Laporan Tugas Akhir (LTA)

Diploma III Kesehatan

ANALISIS RHODAMIN B PADA CABAI MERAH BUBUK

YANG DIJUAL DI PASAR BEURUNUEN
PROVINSI ACEH

Diajukan sebagai salah satu Syarat Untuk Mencapai

Gelar Ahli Madya Analisis Farmasi dan Makanan

Oleh:

NIZA FONNA
NIM: 0141942015022

AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN BANDAACEH

YAYASAN HARAPAN BANGSA DARUSSALAM
2019

iii
 LEMBAR PENGESAHAN

ANALISIS RHODAMIN B PADA CABAI MERAH BUBUK

YANG DIJUAL DI PASAR BEURUNUEN
PROVINSI ACEH

Oleh:

Niza Fonna
NIM. 0141942015022

Pembimbing

Elfariyanti, M.Pd
NIDN. 1328018001

Mengetahui
Direktur Akademi Analis Farmasi dan Makanan Banda Aceh
Yayasan Harapan Bangsa Darussalam

Fauziah, M. Sc. Apt

NIDN. 131602830

iii
 PERNYATAAN PERSETUJUAN

ANALISIS RHODAMIN B PADA CABAI MERAH BUBUK

YANG DIJUAL DI PASAR BEURUNUEN
PROVINSI ACEH

Telah disetujui, diperiksa dan dipertahankan dihadapan tim penguji Ujian Akhir
program Akademi Analisis Farmasi dan Makanan
Banda Aceh pada tanggal 25 februari 2019

Penguji I Penguji II

Irma Zarwinda, M. Pd Raihanatun, M. Si

NIDN. 1326038901 NIDN. 1316028301

Pembimbing

Elfariyanti, M.Pd
NIDN. 1328018001

Mengetahui
Direktur Akademi Analis Farmasi dan Makanan Banda Aceh
Yayasan Harapan Bangsa Darussalam

Fauziah, M. Sc. Apt

NIDN. 1316028301

iii
 SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT

Saya yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama : Niza Fonna

Nim : 0141942015022
Program Studi : DIII Analis Farmasi dan Makanan

Dengan ini menyatakan bahwa judul Laporan Tugas Akhir “Analisis Rhodamin
B Pada Cabai Merah Bubuk Yang Dijual Di Pasar Beurunuen Provinsi
Aceh” benar bebas dari plagiat, dan apabila persyaratan ini terbukti tidak benar
maka saya bersedia menerima sanksi sesuai ketentuan yang berlaku.
Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk dipergunakan sebagai mana
mestinya.

Banda Aceh, 25 Februari 2019

Yang membuat pernyataan,

Niza Fonna

iii
 ABSTRAK

Rhodamin B adalah salah satu zat pewarna sintetis non pangan bewarna merah
yang digunakan untuk pewarna tekstil. Menurut Permenkes RI No. 033 tahun
2012, rhodamin B digolongkan kedalam zat pewarna sintetis yang berbahaya dan
sama sekali tidak boleh ditambahkan ke dalam produk pangan. Penelitian ini
bertujuan untuk menganalisis kandungan rhodamin B dalam cabai merah bubuk
yang dijual di pasar Beureunun provinsi Aceh yang dilakukan secara kualitatif
dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT). Sampel dalam penelitian ini
adalah cabai merah bubuk yang diambil dari 9 pedagang di pasar Beurunuen,
dengan teknik pengambilan sampel secara Simple Random Sampling. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa dari 9 sampel yang diuji, semuanya negatif
mengandung rhodamin B berdasarkan nilai Rf yang didapat yaitu larutan baku
sebesar 0,57, sedangkan nilai Rf sampel secara berturut-turut sebesar 0,98; 0,97;
0,21 dan 0,98; 0,98; 0,97; 0,12 dan 0,97; 0,97; 0.97, sedangkan sampel XI tidak
ditentukan noda sehingga tidak bisa dihitung nilai Rfnya.

Kata Kunci : Rhodamin B, Cabai Giling, Kromtografi Lapis Tipis.

iv
 ABSTRACT

Rhodamin B is a red non-food synthetic coloring agent used for textile dyes.
According to RI Minister of Health Regulation No. 033 of 2012, Rhodamin B is
classified into a dangerous synthetic dye and must not be added to food products
at all. This study aimed to analyze the content of rhodamine B in powdered red
chilli sold in the Beureunun market in Aceh province which was carried out
qualitatively using the thin layer chromatography (TLC) method. The sample in
this study was powdered red chili taken from 9 traders in the Beurunuen market,
with a simple random sampling technique. The results showed that of the 9
samples tested, all of them were negative containing rhodamine B based on the Rf
values obtained, namely the standard solution of 0.57, while the Rf values of the
samples were 0.98; 0.97; 0.21 and 0.98; 0.98; 0.97; 0.12 and 0.97; 0.97; 0.97,
while the sample XI is not stained so the Rf value cannot be calculated. 

Keywords: Rhodamine B, Ground Chili, Thin Layer Chromtography.

v
 KATA PENGANTAR

Assalammu’alaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Dengan mengucapkan Alhamdulillah berkat Rahmat Allah Subhanahuwa

Ta’ala yang telah melimpahkan karunia-nya sehingga penulis dapat
menyelesaikan Proposal Laporan Tugas Akhir yang berjudul Analisis Rhodamin
B Pada Cabai Merah Giling Yang Dijual Dipasar Beurunuen Dengan Metode
Kromatografi Lapis Tipis. Tidak lupa shalawat dan salam penulis sampaikan
kepangkuan Nabi Besar Muhammad Sallallahu Alaihi Wassallam.
Selesainya penulisan Laporan Tugas Akhir ini tidak terlepas dari bantuan
dan perhatian berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis
menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
1. Ibu Fauziah, M.Sc, Apt. Selaku Direktur Akademi Analis Farmasi dan
Makanan (AKAFARMA) Banda Aceh Harapan Bangsa Darussalam.
2. Ibu Azmalina Adriani, M.Si, selaku Ketua Program Studi Akademi Analis
Farmasi dan Makanan (AKAFARMA) Banda Aceh Harapan Bangsa
Darussalam.
3. Ibu Efariyanti, M.Pd, selaku pembimbing pembuatan Proposal Laporan
Tugas Akhir.
4. Ibu Raihanatun, M. Si dan ibu Irma zarwinda, M. Pd selaku penguji yang
sudah memberikan saran untuk menyempurnakan LTA ini.
5. Seluruh Pengajar dan staf Akademi Analis Farmasi dan Makanan Banda
Aceh Harapan Bangsa Darussalam yang telah mendidik, membekali penulis
dengan ilmu pengetahuan selama dalam masa pendidikan.
6. Teristimewa dan tercinta Ayahanda dan Ibunda yang telah banyak
memberikan doa dan dukungan yang tak terhingga dan tak mungkin
terbalaskan.
7. Rekan-rekan Mahasiswa/i dan semua pihak yang telah ikut serta dalam
memberikan dukungan kepada penulis untuk menyelesaikan Laporan Tugas
Akhir ini.
Penulis menyadari bahwa banyak kekurangan dalam penyusunan dan
penulisan Laporan Tugas Akhir, maka penulis mengharapkan kritik dan saran

vi
yang sifatnya membangun dari semua pihak sehingga dapat menyempurnakan
Laporan Tugas Akhir ini.
Harapan penulis semoga Laporan Tugas Akhir ini dapat memberikan
manfaat bagi penulis sendiri dan bagi pembaca pada umumnya.

Banda Aceh, Februari 2019

Penulis

vii
 DAFTAR ISI

Hala
man

LEMBAR PENGESAHAN............................................................................
.........................................................................................................................i
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
LEMBAR PERSETUJUAN LTA.................................................................
........................................................................................................................ii
..........................................................................................................................
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT..............................................
.......................................................................................................................iii
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
ABSTRAK.......................................................................................................
.......................................................................................................................iv
KATA PENGANTAR....................................................................................
.......................................................................................................................vi
DAFTAR ISI...................................................................................................
.....................................................................................................................viii
DAFTAR GAMBAR......................................................................................
........................................................................................................................x
DAFTAR TABEL...........................................................................................
.......................................................................................................................xi
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................
......................................................................................................................xii
BAB I PENDAHULUAN...............................................................................
........................................................................................................................1
1.1 Latar Belakang.....................................................................................
...........................................................................................................1
1.2 Perumusan Masalah ............................................................................
...........................................................................................................2
1.3 Tujuan Penelitian.................................................................................
...........................................................................................................2
1.4 Manfaat Penelitian...............................................................................
...........................................................................................................2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA....................................................................

........................................................................................................................3
2.1 Cabai Merah........................................................................................
...........................................................................................................3
2.1.1 Jenis Cabai Merah ....................................................................
................................................................................................3
2.1.2 Komposisi Kimia Cabai Merah................................................
................................................................................................4

viii
 2.2 Pewarna Makanan................................................................................
...........................................................................................................5
2.2.1 Pewarna Yang Diizinkan..........................................................
................................................................................................6
2.2.2 Pewarna Yang Tidak Diizinkan................................................
................................................................................................7
2.3 Rhodamin B.........................................................................................
...........................................................................................................7
2.4 Analisa Rhodamin B............................................................................
...........................................................................................................9
2.4.1 Cara Reaksi Kimia....................................................................
................................................................................................9
2.4.2 Cara Kromatografi Lapis Tipis.................................................
................................................................................................9

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ....................................................

......................................................................................................................11
3.1 Metode Penelitian................................................................................
......................................................................................................................11
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian..............................................................
......................................................................................................................11
3.3 Populasi dan Sampel............................................................................
......................................................................................................................11
3.3.1 Populasi.......................................................................................
......................................................................................................................11
3.3.2 Sampel.........................................................................................
......................................................................................................................11
3.4 Alat dan Bahan....................................................................................
......................................................................................................................11
3.4.1 Alat..............................................................................................
......................................................................................................................11
3.4.2 Bahan...........................................................................................
......................................................................................................................11
3.5 Prosedur Kerja.....................................................................................
......................................................................................................................12
3.5.1 Pembuatan Eluen (10:4:5) ..........................................................
......................................................................................................................12
3.5.2 Pembuatan Larutan Uji................................................................
..........................................................................................................12
3.5.3 Pembuatan Larutan Baku............................................................ 12
3.5.4 Pembuatan Larutan Campuran.................................................... 12
3.5.5 Analisa Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis...................... 12
3.6 Analisa Data........................................................................................
......................................................................................................................13

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................

......................................................................................................................14

ix
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
..........................................................................................................................
4.1 Data Hasil Penelitian...........................................................................
...............................................................................................................14
...................................................................................................................
4.2 Pembahasan.........................................................................................
......................................................................................................................14

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN..........................................................

......................................................................................................................17
5.1 Kesimpulan..........................................................................................
......................................................................................................................17
5.2 Saran ...................................................................................................
......................................................................................................................17

DAFTAR PUSTAKA......................................................................................
......................................................................................................................18
LAMPIRAN....................................................................................................
......................................................................................................................20

x
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Cabang Merah Giling Yang Dijual Di Pasar Beurunun............... 4

Gambar 2.2 Struktur Rhodamin B ................................................................... 8

xi
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Komposisi kimia cabai merah segar.............................................. 5

Tabel 2.2 Bahan pewarna sintetis yang diizinkan di Indonesia.................... 6
Tabel 2.3 Bahan pewarna sintetis yang tidak diizinkan di Indonesia............ 7

xii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Pembuatan Eluen..................................................................... 20

Lampiran 2. Prosedur Kerja......................................................................... 21
Lampiran 3. Perhitungan Bahan.................................................................. 23
Lampiran 4. Perhitungan Harga Rf.............................................................. 24
Lampiran 5. Foto Penelitian........................................................................ 26

xiii
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Semakin berkembangnya ilmu pengetahuan dan teknologi menyebabkan
perubahan yang sangat besar dalam hal pengolahan pangan. Pada saat sekarang ini
masyarakat menginginkan segala sesuatu yang serba cepat, mudah, dan praktis.
Demikian pula dalam masalah makanan, masyarakat lebih menyukai yang dapat
diolah dan disajikan dengan cepat dan mudah tetapi juga sesuai dengan selera
mereka. Salah satu cara untuk menyajikannya dengan cepat dan mudah adalah
dengan menggunakan bumbu siap pakai berbentuk pasta atau serbuk, bumbu pasta
masih mengandung kadar air yang tinggi sedangkan bumbu serbuk adalah bumbu
yang kadar airnya rendah karena adanya proses pengeringan dalam
pembuatannya, sehingga bumbu serbuk umur simpannya lebih panjang bila
dibandingkan dengan berbentuk pasta. (Winarno, 1993).

Salah satu bumbu siap pakai yang sering digunakan dalam masakan adalah
adanya cabai merah bubuk yang merupakan hasil penggilingan cabai kering
dengan atau tanpa bahan pengawet. Cabai merah bubuk banyak dipilih karena
praktis dan tidak memerlukan waktu lama dalam proses persiapan masakan
(Tarwiyah, 2001).

Pewarna sering ditambahkan untuk memperbaiki tampilan warna merah

cabai yang berkurang akibat penambahan bahan campuran. Pewarna sintetis yang
biasa ditambahkan misalnya orengered bahkan Rhodamin B. Orengered
merupakan pewarna makanan sedangkan Rhodamin B sering ditambahkan
pedagang dikarenakan murah dan memperbaiki kualitas warna pada makanan
(Endang, 2008). Hal ini seperti yang dilaporkan oleh Ripaldy. dkk, (2017),
dimana terdapat kandungan zat warna Rhodamin B pada cabai merah bubuk yang
dijual di pasar tradisional di Kabupaten Sleman Daerah Istimewa Yogyakarta
sebanyak 3 (4,68%) sampel positif mengandung zat warna Rhodamin B. Hidayati
(2017) juga melaporkan bahwa dari 25 sampel cabai giling basah yang ada di
pasar Kota Yogyakarta terdapat 5 sampel yang positif mengandung rhodamin B.

xiv
 Menurut Permenkes RI No. 033 tahun 2012, rhodamin B digolongkan
kedalam zat pewarna sintetis yang berbahaya dan sama sekali tidak boleh
ditambahkan ke dalam produk pangan baik makanan ataupun minuman. Menurut
Yuliarti (2007) dalam Ripaldy, dkk., (201 7) mengkonsumsi Rhodamin B dalam
jumlah banyak dalam waktu singkat dapat menyebabkan gejala akut keracunan.
Rhodamin B yang ditambahkan pada makanan dapat mengakibatkan iritasi pada
saluran pencernaan dan dapat menimbulkan gejala keracunan yang ditandai
dengan air kencing berwarna merah maupun berwarna merah muda. Rhodamin B
yang terhirup dapat mengakibatkan gangguan kesehatan seperti terjadinya iritasi
pada saluran pernafasan.

Berdasarkan uraian diatas, maka peneliti tertarik untuk meneliti kandungan

Rhodamin B pada cabai merah bubuk yang di jual di Pasar Beurunuen dengan
metode kromatografi lapis tipis.

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka perumusan masalah dari penelitian ini

adalah apakah cabai merah bubuk yang dijual di pasar Beurunuen menggunakan
bahan pewarna Rhodamin B ?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan dilakukan penelitian ini adalah untuk mengetahui ada atau tidaknya
pewarna Rhodamin B pada cabai merah bubuk yang dijual dipasar Beureunun.

1.4 Manfaat Penelitian

Adapun manfaat dari penelitian ini adalah :

1. Untuk lebih memperhatikan penggunaan bahan pewarna buatan yang
disalahgunakan ke dalam makanan khususnya pada cabai merah giling yang
beredar di pasaran.

xv
2. Sebagai bahan masukan atau petunjuk bagi produsen maupun pengolah
makanan dalam memproduksi cabai merah giling.
3. Sebagai informasi bagi masyarakat dalam memilih makanan olahan yang
aman dikonsumsi.

xvi
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Cabai Merah

Cabe merah (Capsicum annum L) merupakan salah satu jenis sayuran dan
rempah-rempah yang banyak dikonsumsi masyarakat. Tanaman cabai merah
diperkirakan memiliki ± 20-30 spesies. Berdasarkan tingkat kematangannya cabai
dibagi menjadi dua, yaitu buah muda atau cabai hijau dan buah tua atau cabai
merah. Sedangkan berdasarkan morfologinya cabai dibedakan menjadi cabai besar
panjang (C. Annum var. longum), cabai keriting (C. Annum sp.), cabai bulat
pendek (C, annum var. Abbreviate), paprika (C. Annum var. grosum), cabe rawit
(C. frutescens), C. baccatum, C. pubescens, dan C. chinese (Rukmana dan
Yuniarsih, 2005).
Produksi cabai merah di Indonesia seluruhnya hasil usaha rakyat. Daerah yang
banyak ditanami cabai adalah Yogyakarta, Wonosobo, Pekalongan, dan Cirebon.
Komoditi cabai di kota Bogor menempati 13,26% luas tanam dari jumlah
produksi tanaman hortikultura di kota Bogor. Luas areal tanaman cabai merah
dikota Bogor pada tahun 2005 adalah 112.41 Ha dengan jumlah produksi
sebanyak 297.13 ton (BPS, 2006). Selama sepuluh tahun terakhir peningkatan
permintaan cabai oleh konsumen rumah tangga mencapai 6.2% per tahun dan
permintaan diperkiraan akan semakin meningkat ditahun-tahun mendatang untuk
memenuhi kebbutuhan bahan baku berbagai industri pengolahan pangan dan
sasaran ekspor (Rukmana dan Yuniarsih, 2005).
2.1.1 Jenis Cabai Merah
Dalam dunia perdagangan, cabai merah dipasarkan dalam bentuk seperti
cabai merah segar, cabai giling, cabai kering, oleoresin, saus cabai, macam-
macam sambal dan acar dalam botol. Pada industri obat-obatan, cabai merah
terutama digunakan untuk campuran dalam pembuatan obat gosok untuk
menghilangkan rasa gatal dan pegal, dan menghilangkan rasa lesu (Rukmana dan
Yuniarsih, 2005).
Pengolahan pangan dapat menghasilkan produk yang lebih praktis
digunakan, mudah dalam pengangkutan dan penyimpanan (Syarief dan Halid,
1993). Salah satu contoh produk olahan cabai adalah cabai giling. Ditinjau dari

xvii
kepraktisannya, cabai relatif lebih praktis digunakan dibanding cabai segar. Selain
itu dengan mengolah cabai segar tersebut menjadi cabai giling akan lebih mudah
dalam hal pengangkutan dan penyimpanan (Hardiansyah, 2003).
Cabai giling yang dijual dipasar ada dua jenis, yaitu cabai giling halus dan
cabai giling kasar. Cabai giling halus diperoleh dari penggilingan cabai hingga
semua komponen cabe halus dan tidak tampak sedikitpun sisa hancuran biji cabai
tersebut, sedangkan cabai giling kasar masih mengandung biji cabai utuh. Cabai
giling kasar biasanya dibuat tanpa penambahan air. Pembuatan cabaigiling halus
dan kasar hanya berbeda pada pengaturan jari-jari mesin penggiling cabai yang
digunakan (Lubis, 2000).
Penentuan mutu cabai giling masih merujuk pada syarat mutu cabai segar
dan saus cabe karena hingga saat ini belum ada syarat mutu produk cabai giling
menurut Standar Nasional Indonesia. Syarat mutu saus cabai yang baik menurut
SNI 01-2976-1992 adalah mengandung jumlah padatan sebesar 20-40%, tidak
mengandung logam berbahaya (Pb, Hg, Cu, dan Zn), kadar kotoran maksimum
1%, bau dan rasa normal dan khas cabai, secara mikroskopis tidak mengandung
kapang, dan apabila menggunakan pengawet dan pewarna sesuai dengan yang
diizinkan.

Gambar 2.1 Cabai Merah Bubuk yang dijual di pasar Beurunuen.

2.1.2 Komposisi Kimia Cabai Merah

Komposisi buah cabai segar yang baru dipetik ditentukan oleh spesies,
cara perawatan tananaman, kondisi lingkungan tempat tumbuh dan tingkat
kematangan saat dipanen. Selanjutnya perubahan kimia relatif terjadi setelah
permanen selama pematangan, pengeringan, pengolahan dan penyimpanan
(Setiadi, 1987). Kondisi ini terefleksi dalam unsur penyusun pokok (komposisi

xviii
kimia) yang relatif beragam. Komposisi kimia cabai merah segar dapat dilihat
pada Tabel 2.1.

Tabel 2.1. Komposisi Kimia Cabai Merah Segar.

Komponen Komposisi (% bb)

Kadar Air 87-90
Kadar Karbohidrat 54-58
Kadar Pati 0.5-1.5
Kadar Protein 11-14
Kadar Total Abu 5-6
Kadar Komponen volatil 0.7-2.6
Kadar Komponen nonvolatil 15-22
Kadar Asam Askorbat 0.029-0.063

Sumber : Setiadi. 1987. Bertanam Cabe. Penebar Swadaya, Jakarta.

Warna merah pada cabai disebabkan adanya pigmen karotenoid yaitu

capsanthin, capsorubin, lutein, zeaxanthin, caroten, dan kriptoxanthin
(Prabaningrum, dkk. 1996). Menurut Reeves (1987), sekitar 60% dari total
karotenoid pada cabai merah tersusun atas capsanthin. Karatenoid merupakan
kelompok pigmen yang larut dalam lemak dan dapat menghadapi cahaya tampak
pada panjang gelombang 400-500 nm. Pigmen karotenoid mudah teroksidasi oleh
cahaya, udara, dan panas sehingga menyebabkan memudarnya warna pada buah
dan sayur (Kanner, dkk. 1997). Jumlah dan perbandingan komponen karotenoid
pada cabe bervariasi, tergantung kematangan, varietas, agroteknik, dan
klimatologi (Purseglove, dkk. 1981).

2.2 Pewarna Makanan

Zat warna yang terdapat pada pangan dapat berasal dari: (a) pigmen yang
secara alami terdapat pada tanaman dan hewan, sebagai contoh klorofil yang
secara alami terdapat pada tananaman dan hewan, sebagai contoh klorofil yang
memberi warna hijau, karoten yang memberi warna jingga sampai merah, dan
mioglobin yang memberi warna merah pada daging, (b) reaksi karamelisasi yang

xix
timbul bila gula dipanaskan sehingga akan memberikan warna cokelat sampai
kehitaman, contohnya pada kembang gula karamel, atau pda roti bakar, (c) reaksi
Maillard, yaitu reaksi antara gugus amino protein dengan gugus karbonil gula
pereduksi, reaksi ini memberikan warna gelap misalnya pada susu bubuk yang
disimpan lama, (d) reaksi senyawa organik dengan udara (oksidasi) yang
menghasilkan warna hitam, misalnya warna gelap atau hitam pada permukaan
buah-buahan yang telah dipotong dan dibiarkan diudara terbuka beberapa waktu,
dan (e) penambahan zat warna, baik alami maupun sintetik (Winarno, 1997).

2.2.1 Pewarna Yang Diizinkan

Zat sintetis seharusnya telah melalui suatu pengujian secara intensif untuk
menjamin keamanannya. Karakteristik dari zat pewarna sintetis adalah warnanya
lebih cerah, lebih homogen dan memiliki variasi warna yang lebih banyak bila
dibandingkan dengan zat pewarna alami (Winarno, 2002).

Disamping itu penggunaan zat pewarna sintetis pada makanan bila

dihitung berdasarkan harga per unit dan efisiensi produksi akan jauh lebih murah
bila dibandingkan dengan zat pewarna alami (Winarno, 2002). Berikut adalah
bahan tambahan pangan sintetis yang diizinkan dapat dilihat pada Tabel 2.2.

Tabel 2.2 Bahan Pewarna Sintetis Yang Diizinkan di Indonesia

Bahan Pewarna Nomor Indeks Warna

Amaran Amaranth: C1 Food Red 9 16185
Biru berlian Brilliant blue FCF: C1 42090
Eritrosin Food red 2; Eritrosin: C1 45430
Food red 14
Hijau FCF 42053
Fast green FCF: C1
Food green 3
Hijau S 44090
Greeb S: C1. Food
Green 4
Indigotin 73015
Indigotin: C1. Food
Blue 1
Ponceu 4R 16255
Ponceu 4R: C1
Kuning Food red 7 74005
Kuinelin Quinelline yellow 15980

xx
 CI. Food yellow 13
Sunset yellow FCF
Kuning FCF
C1. Food yellow 13
Riboflavina Riboflavina
19140
Tatrazine Tatrazine
Sumber : Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 033/Menkes/Per/II/12

2.2.2 Pewarna Yang Tidak Diizinkan

Menurut Winarno (1993), lebih dari 90% zat pewarna yang digunakan
untuk pangan adalah zat pewarna sintetik dan ironisnya sering kali masih
ditemukan produk pangan dan minuman yang mengandung zat pewarna
nonpangan. Pemakaian zat pewarna yang tidak diizinkan ini akan membahayakan
kesehatan. Bahan pewarna yang demikian disebut bahan kimia berbahaya
(Winarno, 1990).

Pada tahun 2012 berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan Republik

Indonesia No. 033 Men.Kes.Per/II/12 tentang zat warna tertentu yang dinyatakan
sebagai bahan berbahaya yang dilarang penggunaannya di Indonesia. Berikut
adalah bahan tambahan pangan sintetis yang tidak diizinkan di Indonesia yaitu
dapat dilihat pada Tabel 2.3.

Tabel 2.3 Bahan Pewarna Sintetis yang Tidak Diizinkan di Indonesia

Bahan Pewarna Nomor Indeks Warna
Citrus red No.2 12156
Ponceu 3R (Red G) 16155
Ponceu SX (Food Red No.1) 14700
Rhodamine B (Food Red No.5) 45170
Guinea Greean B (Acid Green No. 3) 42085
Magenta (Basic Violet No.14) 42510
Chrysoidine (Basic Orange No. 2) 11270
Butter yellow (Solvent Yellow No. 2) 11020
Sudan I (Food Yellow No. 2) 12055
Methanil yellow (Food Yellow No. 14) 13065
Auramine (Ext. D&C Yellow No.1) 41000
Oil Oranges SS (Basic Yellow No.1) 12100
Oil Oranges XO (Solvent Oranges No.7) 12140
Oil Yellow AB (Solvent Oranges No. 5) 11380
Oil Yellow OB (Solvent Orange No. 6) 11390

Sumber : Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 033/Menkes/Per/II/12

xxi
2.3 Rhodamin B

Rhodamin B adalah salah satu zat pewarna sintetik non pangan bewarna
merah yang banyak disalah gunakan dalam pengolahan bahan pangan. Hasil
penelitian Djarisnawati, dkk. (2004) menunjukkan 63% cabe giling yang dijual
dipasar tradisional di DKI Jakarta positif menggunakan Rhodamin B. Hastuti
(2005) melaporkan 70% terasi yang digunakan pedagang di lingkar kampus IPB
Darmaga Bogor positif mengandung Rhodamin B. Penelitian yang dilakukan
Hasanah (2005) menunjukkan kandungan Rhodamin B sebesar 33.39 mg/100g
dan 1.56 mg/100g pada makanan jajanan makaroni dan sosis di Sekolah Dasar di
Bogor Tengah.

Rhodamin B memiliki rumus molekul C28H31N2O3Cl dan berat molekul 479.

Rhodamin B berbentuk kristal hijau atau serbuk ungu kemerahan, dapat larut
dalam air, alkohol, HCl, dan NaOH dan menghasilkan warna merah kebiruan dan
berflouresensi kuat (Sihombing, 1987). Zat warna ini memiliki banyak sinonim
nama antara lain: D & C Red no.19, Food Red 15, Brilliant Pink B, ADC
Rhodamin B, dan Rheonine B (Anonim, 2006). Struktur molekul Rhodamin B
dapat ditunjukan pada Gambar 2.2.

Gambar 2.2 Struktur Rhodamin B

Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 033 tahun 2012 tentang

bahan tambahan pangan adalah yang ditambahkan kedalam pangan tentang zat
warna Rhodamin B dinyatakan sebagai bahan berbahaya. Rhodamin B bersifat
karsinogenik dan menyerang hati. Rhodamin B bersifat toksik, menghambat

xxii
pertumbuhan mencit, menyebabkan diare, urin berflouresensi, bahkan dapat
menyebabkan kematian lebih awal sekalipun dosis yang digunakan cukup rendah
(0.17 mg/kg berat badan) (Basrah, 1987). Umumnya pewarna ini digunakan untuk
pewarna kertas, wol, dan sutra.

Rhodamin B tidak dapat dicerna oleh tubuh dan akan mengendap secara
utuh dalam hati sehingga lambat laun dapat menyebabkan kerusakan hati.
Rhodamin B juga menyebabkan kanker hati pada mencit (16.6%), kanker limfa
pada tikus (11.1%) (Samsudin, 2004). Menurut sihombing (1987), tikus yang
diberi 1 g Rhodamin B kedalam setiap 3 kg makanan menunjukkan perubahan
prilaku tikus yang abnormal. Tikus tersebut menjadi cenderung agresif dan
menunjukkan tanda-tanda kanibal, diskolorasi dan degradasi warna rambut dan
kulit menjadi kemerah-merahan dan kasar.

Menurut studi yang dilakukan oleh Universitas Hokoriku Jepang, efek

Rhodamin B pada kosmetik dapat menghambat proliferasi fibrolas pada kultur
sistem. Rhodamin B pada takaran 25 µg/ml secara signifikan menyebabkan
pengurangan sel setelah 72 jam dalam kultur. Rhodamin B juga dapat mengurangi
jumlah sel vaskuler endothetial pembuluh darah sapi dan sel otot polos pada
pembuluh darah hewan berkulit setelah 72 jam dalam kultur (Anonim, 2006).

2.4 Analisa Rhodamin B

Menurut Cahyadi (2008) Rhodamin B dapat dianalisis dengan cara reaksi

kimia dan Kromatografi Lapis Tipis (KLT).
2.4.1 Cara Reaksi Kimia

Prinsip dari reaksi kimia adalah mereaksikan suatu cuplikan dengan cara
menambahkan pereaksi-pereaksi seperti : HCl pekat, H2SO4 pekat, NaOH 10%,
dan NH4OH 10%. Lalu diamati reaksi apa yang terjadi (reaksi perubahan warna)
pada masing-masing sampel yang sudah dilakukan pemisahan dari bahan-bahan
pengganggu (matriks).
2.4.2 Cara Kromatografi Lapis Tipis

xxiii
 Prinsip kerja Kromatografi Lapis Tipis untuk memisahkan sampel
berdasarkan perbedaan kepolaran antar sampel dengan pelarut yang digunakan.
Teknik ini biasanya menggunakan fase geraknya disesuaikan dengan jenis sampel
yang ingin dipisahkan. Larutan atau campuran larutan yang digunakan dinamakan
eluen. Semakin dekat kepolaran antara sampel dan eluen maka sampel akan
semakin terbawa oleh fase gerak tersebut. Kromatografi lapis tipis dalam
penggunaannya lebih mudah dan lebih murah dibandingkan dengan kromatografi
lapis tipis, peralatan yang digunakan lebih sederhana dan dapat dikatakan bahwa
hampir semua laboratorium dapat melaksanakan setiap saat secara cepat
(Rohman, 2009).

Dibandingkan dengan kromatografi kertas, keuntungan kromatografi lapis

tipis adalah membutuhkan waktu yang lebih cepat, dan diperoleh pemisahan lebih
baik (Sastrohamidjojo, 2007).

Dalam mengidentifikasi noda-noda dalam plat Kromatografi Lapis Tipis

sangat lazim menggunakan harga RF yang didefinisikan sebagai :

Jarak yang Ditempu h Ole h Sen yawa

Rf =
Jarak yang Ditempu h Ole h Pelarut

xxiv
 BAB III
METODELOGI PENELITIAN

3.1 Metode Penelitian

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah kromatografi lapis tipis.
Pengujian dilakukan secara uji laboratorium.

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada tanggal 14 sampai 18 Januari 2019 di
Laboratorium Kimia Akafarma Banda Aceh Harapan Bangsa Darussalam.

3.3 Populasi dan Sampel

3.3.1 Populasi
Populasi pada penelitian ini adalah cabai giling yang dijual oleh 17
pedagang di pasar Beurunuen.
3.3.2 Sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah cabai giling yang
diambil dari 9 pedagang yang dipilih secara Simple Random Sampling.

3.4 Alat dan Bahan

3.4.1 Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi kaca arloji,
timbangan analitik, gelas kimia 250 mL, gelas kimia 100 mL, gelas ukur 50 mL,
labu ukur 50 mL, labu ukur 10 mL, pengaduk kaca, spatula, pinset, chamber,
pipet kapiler, pipet ukur 10 mL, pipet ukur 1 mL, kertas saring, corong pisah,
penangas air, plat Kromatografi Lapis Tipis, botol vial, pensil dan penggaris.
3.4.2 Bahan
N-butanol (C4H9OH), etil asetat (CH3CH2OCCH3), amonia (NH3),
methanol (CH3OH), dan larutan baku Rhodamin B (C28H31N2O3Cl).
3.5 Prosedur Kerja
3.5.1 Pembuatan Eluen (10:4:5)

xxv
 Dipipet 26,3 mL n-butanol, 10,5 mL etil asetat, 13,1 mL amonia.
Dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL. Dikocok hingga homogen.
3.5.2 Pembuatan Larutan Uji
Ditimbang 5 gram sampel cabai merah giling, dimasukkan ke dalam labu
ukur 50 mL dan dihomogenkan dengan menggunakan methanol sebanyak 50 mL.
Dikocok sampai terjadi pemisahan yaitu terjadi perubahan warna pelarut.
Dipisahkan hasil ekstraksi dengan menggunakan kertas saring kemudian diambil
filtratnya. Selanjutnya larutan dimasukkan kedalam corong pisah dan diekstraksi
sebanyak 2 kali dengan menambahkan masing-masing 10 mL larutan methanol,
kemudian pisahkan hasil ekstraksi. Hasil ekstraksi dimasukkan ke dalam beaker
gelas. Dipanaskan di atas penangas air 30 menit, dilakukan hal yang sama pada
sampel berikutnya (Indrayani, dkk. 2017).
3.5.3 Pembuatan Larutan Baku
Ditimbang 0,1 gram Rhodamin B, dilarutkan dengan 10 mL methanol
kemudian dikocok hingga larut.
3.5.4 Pembuatan Larutan Campuran
Diambil 1 mL larutan baku dan 1 mL larutan uji kemudian dihomogenkan.
3.5.5 Analisa menggunakan kromatografi lapis tipis
Diambil plat silika dengan ukuran 10 cm x 12 cm, diberi tanda dengan
pensil ± 1 cm dari tepi bawah dan tepi atas dengan jarak antara penotolan satu
dengan penotolan lain adalah 1 cm. Dimasukkan eluen yaitu n-
butanol:etilasetat:amonia dengan perbandingan 10:4:5 ke dalam chamber dan
selnjutnya chamber dijenuhkan. Totolkan sampel diatas plat silika dengan
menggunakan pipet kapiler, didiamkan beberapa menit. Dimasukkan plat tersebut
ke dalam chamber tertutup yang telah di isi dengan eluen, dibiarkan pelarut
menaiki plat di dalam wadah perlahan-lahan. Diamati jarak noda yang terbentuk
sampai tanda batas, jika jarak noda tidak tampak secara manual, dilakukan secara
visual dibawah sinar ultra violet (UV), sampel positif mengandung Rhodamin B
jika dilihat secara visual maka akan berwarna merah muda sedangkan apabila
dilihat di bawah sinar UV 254 nm akan berfluoresensi orange dan berfluoresensi
merah muda di bawah sinar UV 366 nm (Mamay dan Gunawan, 2007).

xxvi
3.6 Analisa Data
Setelah proses analisis menggunakan KLT selesai, selanjutnya hasil elusi
setiap sampel dipresentasikan nilainya kedalam nilai Rf. Sampel dinyatakan
positif mengandung Rhodamin B apabila nilai Rf sampel sama dengan nilai Rf
baku atau masih dalam range 0,00 ≤ Rf ≤ 0,02 (Depkes,1988 dalam Tangka, dkk.
2012).

xxvii
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Data Hasil Penelitian

Analisis Rhodamin B pada cabai giling yang dijual dipasar Beureunuen

dilakukan secara uji di laboratorium menggunakan metode Kromatografi Lapis
Tipis (KLT), Data hasil penelitian dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Hasil pengamatan zat warna pada cabai giling secara Kromatografi
Lapis Tipis
Jarak Jarak
No. Sampel Warna noda noda pelarut Harga Rf Ket
(cm) (cm)
1. Larutan Baku Merah muda 4,7 cm 8,2 cm 0,57 +
2. Spike sampel Merah muda 4,7 cm 0,57 +
8,2 cm
I Merah muda 7,9 cm 0,96 -
3. Sampel I Orange 8,1 cm 8,2 cm 0,98 -
4. Sampel II Orange 8,0 cm 8,2 cm 0,97 -
5. Sampel III Orange 1,8 cm 0,21 -
8,2 cm
Orange 8,1 cm 0,98 -
6. Sampel IV Orange 8,1 cm 8,2 cm 0,98 -
7. Sampel V Orange 8,0 cm 8,2 cm 0,97 -
8. Sampel VI Orange 1,0 cm 0,12 -
8,2 cm
Orange 8,0 cm 0,97 -
9. Sampel VII Orange 8,0 cm 8,2 cm 0,97 -

10. Sampel VIII Orange 8,0 cm 8,2 cm 0,97 -

Noda tidak 8,2 cm

11. Sampel IX - - -
ditemukan

Keterangan:

+ = positif

- = negatif

xxviii
4.2 Pembahasan

Penelitian analisis rhodamin B pada cabai giling yang dijual di pasar

Beureunun bertujuan untuk mengetahui ada atau tidaknya kandungan pewarna
rhodamin B pada sampel cabv ai giling tersebut. Metode yang digunakan adalah
Kromatografi Lapis Tipis (KLT). KLT merupakan teknik pemisahan suatu
komponen kimia berdasarkan prinsip adsorbsi dan partisi yang ditentukan oleh
fase diam (adsorben) dan fase gerak (eluen) (Alen, dkk. 2017 ). Fase diam yang
digunakan adalah plat silika gel yang mengandung flouresensi yang dapat
berpendar atau berflouresensi pada λ 254 nm. Fase gerak yang digunakan adalah
n-butanol : etil asetat : amonia dengan perbandingan 10:4:5. Pemilihan metode
KLT dilakukan karena dalam pelaksanaannya lebih mudah dan murah, demikian
juga peralatannya yang digunakan pada plat KLT lebih sederhana dan dapat
dikatakan bahwa hampir semua laboratorium dapat setiap saat secara cepat,
namun dapat menunjukkan hasil yang akurat (Indrayani, dkk).
ekstraksi sampel yang bertujuan untuk menarik rhodamin B yang terdapat
dalam simpilisia dengan menggunakan pelarut metanol. Pelarut metanol
digunakan karena rhodamin B larut dalam pelarut tersebut. Setelah ekstraksi
sampel dilanjutkan dengan pembuatan larutan baku, dibuat dengan cara
mereaksikan baku rhodamin B dengan metanol, selanjutnya larutan spike dibuat
dengan cara mencampurkan 1 mL larutan uji dengan 1 mL larutan baku. Fungsi
larutan spike adalah untuk membandingkan jarak noda dan harga Rf dari larutan
uji biar hasilnya lebih akurat, sedangkan baku sebagai pembanding. Proses
selanjutnya dilakukan analisis secara KLT dengan cara mentotolkan larutan baku,
sipke dan semua sampel di atas plat KLT yang telah ditandai batasnya. Dielusi
dengan eluen n-butanol:etil asetat:amonia. Jika jarak noda sampel sejajar dengan
jarak noda larutan baku, maka sampel diduga mengandung zat warna rhodamin B
atau masih dalam range 0,00 ≤ Rf ≤ 0,02 (Depkes,1988 dalam Tangka, dkk.
2012).

Berdasarkan Tabel 4.1 dapat dilihat bahwa harga Rf sampel tidak ada yang
sama atau masih dalam range 0,00 ≤ Rf ≤ 0,02 dengan larutan baku rhodamin B.
Rf larutan baku yaitu 0,57, sedangkan nilai Rf sampel secara berturut-turut

xxix
sebesar 0,98; 0,97; 0,21 dan 0,98; 0,98; 0,97; 0,12 dan 0,97; 0,97; 0.97, sedangkan
sampel XI tidak ditentukan noda sehingga tidak bisa dihitung nilai Rfnya. Selain
nilai Rf yang jauh berbeda, pada pemeriksaan warna secara visual dan sinar UV
254 nm dan 366 nm berfluoresensi orange. Hal tersebut menandakan tidak adanya
kandungan rhodamin B pada sampel (Purniati, dkk).

Pada sampel III dan VI didapatkan dua bercak noda pada setiap sampel
dengan nilai Rf pada sampel III yaitu sebesar 0,21 dan 0,98, sedangkan pada
sampel VI 0,12 dan 0,97. Adanya bercak noda yang lebih dari satu kemungkinan
disebabkan oleh adanya senyawa lain yang berbeda kepolarannya yang ikut
terpisah karena sesuai dengan eluen yang digunakan. Nilai Rf 0,21 dan 0,12
menunjukkan bahwa senyawa yang terelusi bersifat polar, sedangkan nilai Rf 0,98
dan 0,97 bersifat non polar. Senyawa polar yang terkandung di dalam sampel
diduga jenis pewarna sintetis lain selain rhodamin B, untuk itu perlu dilakukan
penelitian lanjutan untuk memastikan dugaan tersebut.

xxx
 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, semua sampel cabai giling

yang diteliti tidak mengandung rhodamin B. Hal ini dapat dilihat dari hasil
perhitungan nilai Rf, dimana tidak ada satupun nilai Rf sampel yang sama dengan
nilai Rf baku. Baku rhodamin B nilai Rf nya sebesar 0,57, sedangkan nilai Rf
sampel secara berturut-turut sebesar 0,98; 0,97; 0,21 dan 0,98; 0,98; 0,97; 0,12
dan 0,97; 0,97; 0.97, sedangkan sampel XI tidak ditentukan noda sehingga tidak
bisa dihitung nilai Rfnya. Sehingga dapat disimpulkan bahwa semua sampel cabai
merah bubuk tidak mengandung rhodamin B.

5.2 Saran

Adapun saran yang bisa penulis sampaikan adalah:

1. Hendaknya peneliti selanjutnya dapat melakukan penelitian lanjutan untuk
memastikan dugaan terhadap sampel cabai merah bubuk yang beredar di
pasar Beurunuen Provinsi Aceh.
2. Bagi masyarakat sebaiknya konsumen lebih selektif dalam memilih makanan
yang baik yang bebas dari zat-zat pewarna dilarang khususnya rhodamin B.
3. Dinas Kesehatan Provinsi Aceh dan BPOM diharapkan dapat meningkatkan
pengawasannya dalam produk makanan dan minuman.

xxxi
 DAFTAR PUSTAKA

Alen, Y, Agresa. F.L, Yuliandra, Y. 2017. Analisis Kromatografi Lapis Tipis

(KLT) dan Aktivitas Anthiperurisemia Ekstrak Rebung
Schizostachyum brachyladum Kurz (Kurz) pada Mencit Putih Jantan.
Jurnal. Sains Farmasi, Vol 3 (2) : 146-152.

Anonim, 2006. Pedoman Penggunaan Obat Bebas dan Obat Bebas Terbatas.
Direktorat Bina Farmasis Komunitas dan Klinik Direktorat Jendral
Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan Depkes RI.

Badan Pusat Statistik Jakarta Pusat, 2006. Pendataan Sosial Ekonomi Tahun
2005. Jakarta Pusat : Badan Pusat Statistik.

Basrah, E. 1987. Zat Warna dan Pemakaiannya dalam Industri Pangan. Risalah
Seminar Bahan Tambahan Makanan Kimiawi, Jakarta.

Cahyadi, W. 2008. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan.

Edisi Ke II. Jakrta : PT Bumi Aksara.

Depkes, 1988 dalam Tangka, dkk. 2012. Identifikasi Rhodamin B Sediaan Lipstik
Yang Beredar Di Kota Manado Secara Kromatografi Lapis Tipis.
(Jurnal pada https://www.com) Diakses pada Tanggal 07 Februari
2019.

Endang. 2008. Pewarna Tekstil Pada Makanan. Jakarta. www.aagos.ristek.go.id.

Diakses pada tanggal 14 Oktober 2018.

Hardiansyah. 2003. Cabai giling. (http://www.gizinet.com.) Diakses pada tanggal

14 Oktober 2018.

Hasanah, R. I. 2005. Studi Pengetahuan dan Penggunaan Pewarna Makanan Pada

Maknan Jajanan di Sekolah Dasar Wilayah Bogor Tengah. Skripsi.
Jurusan Gizi Masyarakat dan Sumber Daya Keluarga. Fakultas
Pertanian IPB.

Hidayati, S. 2017. Analisis Penggunaan Rhodamin B Pada Cabe Giling Basah

Yang Dijual Di Pasar Kota Yogyakarta. (Jurnal pada
https://jurnalakafarmajogja.files.wordpress.com) Diakses pada Tanggal
14 Oktober 2018.

Indrayani, N.K.E,Setiawan. D, Subaktiyasa. P.G. 2017. Identifikasi Rhodamin b

Pada Kue Ku Yang Dijual Di Pasar Agung Desa Peninjoan Denpasar.
Jurnal. (https://balimedikajurnal.com) Diakses pada tanggal 14 Oktober
2018.

Lubis, Y. 2000. Studi Proses Pembuatan Cabe Merah Giling. Skripsi. Jurusan
Teknologi Industri Pertanian. Fakultas Teknologi Pertanian IPB.

xxxii
Mamay dan Gunawan, A. 2017. Identifikasi Kadar Rhodamin B Pada Terasi Yang
Dijual di Pasar Ciawitali Kabupaten Garut. Jurnal. Madiks Cendikia,
4 (2) : 108-115.

Menteri Kesehatan RI. 1989. Peraturan Menteri Kesehatan RI No.

722/MENKES/PER/IX/88 tentang Bahan Tambahan Pangan. Jakarta :
Menkes RI.

Menteri Kesehatan RI. 2012. Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 33 Tahun 2012
tentang Bahan Tambahan Pangan. Jakarta : Menkes RI.

Ripaldy, I, Wijanarka, A, dan Putriningtyas, N.D. 2017. Analisis Kandungan

Rhodamin B Pada Cabai Merah Giling Di Pasar Tradisional Di
Kabupaten Sleman Daerah Istimewa Yogyakarta. Jurnal Ilmu Gizi
Indonesia, Vol 1 (01) : 10-18.

Prabaningrum L, Moekasan TK. 1996. Di dalam: Duriat AS, Hadisoeganda

AWW, Soetiarso TA, Prabanigrum L, editor. Teknologi Produksi
Cabai Merah. Lembang (ID). Badan Penelitian Tanaman Sayuran.
Hlm 48-63.

Purniati, N. K, Ratman, Jura. M. R. 2015. Identifikasi Zat Warna Rhodamin B

Pada Lipstik Yang Beredar Di Pasar Kota Palu. Jurnal. Akademika
Kimia, 4 (3) : 155-160.

Purseglove, J. W., E. G. Brown, C. L. Green, dan S. R. J. Robinsons. 1981. Spices

and Condiments. National Book Trust, New Delhi.

Rohman, A. 2009. Kromatografi Untuk Analisa Obat. Graha Ilmu. Yogyakarta.

Rukmana, R dan Y. Yuniarsih. 2005. Penanganan Pascapanen Cabe Merah.
Kanisius, Yogyakarta.

Samsudin. 2004. Jakarta. Puskesmas Diminta Memantau Terasi Bercampur Zat

Pewarna. (http://www.suaramerdeka.com.) Diakses pada tanggal 14
Oktober 2018.

Sastrohamidjojo, H. 2007. Kromatografi. Universitas Gajah Mada. Yogyakarta.

Setiadi. 1987. Bertanam Cabe. Penebar Swadaya, Jakarta.

Syarief, R. dan H. Halid. 1993. Teknologi Penyimpanan Pangan. Arcan, Jakarta.

Tarwiyah K. 2001. 2015. Cabe Giling Dalam Kemasan. Jakarta.

(www.aagos.ristek.go.id.) Diakses pada tanggal 14 Oktober 2018.

Winarno, F. G. 1990. Tempe, Misteri Gizi dari Jawa, Info Pangan. Teknologi
Pangan dan Gizi, Fatameta, IPB, Bogor.

xxxiii
Winarno, F. G. 1993. Pangan Gizi, Teknologi dan Konsumen. Gramedia Pustaka
Utama, Jakarta.

Winarno, F. G. 1997. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.

Winarno, F. G. 2002. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.

xxxiv
 LAMPIRAN

Lampiran 1 Pembuatan Eluen

1. Pembuatan Eluen 10 : 4 : 5

n-butanol : Etil asetat : Amonia

— Dipipet 26,3 mL — dipipet 10,5 mL — dipipet 13,1

mL

— dipipet n-butanol sebanyak 26,3 mL, 10,5

mL etil asetat dan 13,1 mL amonia
— dimasukkan kedalam labu ukur 50 mL
— dikocok hingga homogen

Eluen

xxxv
Lampiran 2. Prosedur Kerja

1. Pembuatan Larutan Uji

Serbuk cabai merah giling

— ditimbang 5 gram sampel cabai merah giling

— dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL dan dihomogenkan
dengan menggunakan methanol sebanyak 50 mL.
— dikocok sampai terjadi pemisahan yaitu terjadi perubahan
warna pelarut.
— dipisahkan hasil ekstraksi dengan menggunakan kertas saring
kemudian diambil filtratnya.
— dilakukan pengulangan terhadap sampel yang sudah diekstraksi
sebanyak 2 kali dengan menambahkan masing-masing 10 mL
larutan methanol
— kemudian pisahkan hasil ekstraksi. Hasil ekstraksi dimasukkan
ke dalam beaker gelas. Dipanaskan di atas penangas air 30
menit, dilakukan hal yang sama pada sampel berikutnya

Larutan uji

2. Larutan Baku Rhodamin B

Rhodamin B

— ditimbang 0,1 gram Rhodamin B

— dilarutan dengan 10 mL methanol
— kemudian dikocok hingga larut
Larutan uji

xxxvi
3. Pembuatan Larutan Campuran

Larutan Uji + Larutan Baku

— diambil 1 mL larutan uji dan 1 mL larutan baku

— kemudian dicampurkan.

Larutan Campuran

4. Analisa menggunakan metode KLT

Plat KLT

— Diambil plat silica dengan ukuran 11 cm x 10 cm

— diberi tanda dengan pensil ± 2 cm dari tepi bawah dan tepi atas jarak
antara penotolan satu dengan penotolan lain adalah 1 cm
— dimasukkan eluen kedalam chamber
— ditotolkan sampel diatas plat silica dengan menggunakan pipet
kapiler
— didiamkan beberapa menit
— dimasukkan plat tersebut kedalam chamber tertutup yang telah di isi
dengan eluen
— dibiarkan pelarut menaiki plat didalam wadah perlahan-lahan
— diamati jarak noda yang terbentuk sampai tanda batas, jika jarak
noda tidak tampak secara manual
— dilakukan secara visual dibawah sinar (UV)

Hasil

xxxvii
Lampiran 3. Perhitungan Pembuatan Eluen

Pembuatan Eluen n-butano:etilasetat;: amonia (10:4:5) dalam 50 mL

10
a) N-butanol ¿ × 50 mL ¿ 26,3 mL
19
4
b) Etil asetat ¿ × 50 mL ¿ 10,5 mL
19
5
c) Amonia ¿ × 50 mL ¿ 13,1 mL
19

xxxviii
Lampiran 4. Perhitungan Harga Rf

1. Larutan Baku Rhodamin B

4,7 cm
a) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,57 cm
2. Larutan Spike
4,7 cm
a) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,57 cm
7,7 cm
b) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,96 cm
3. Sampel I
8,1 cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,98 cm
4. Sampel II
8,0 cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,97 cm
5. Sampel III
1,8 cm
a) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,21 cm
8,1 cm
b) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,98 cm
6. Sampel IV
8,1 cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,98 cm
7. Sampel V
8,0 cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,97 cm
8. Sampel VI

xxxix
 1,0 cm
a) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,12 cm

8,0 cm
b) Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,97 cm
9. Sampel VII
8,0 cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,97 cm
10. Sampel VIII
8 , o cm
Rf ¿
8,2 cm
¿ 0,97 cm

xl
Lampiran 5. Foto Penelitian

Gambar 1. Larutan ekstrak sampel

Gambar 2. Larutan baku Rhodamin B

xli
Gambar 3. Penjenuhan chamber

Gambar 4. Pada saat proses elusi

xlii
 Gambar 5. Plat KLT setelah proses elusi

Gambar 6. Plat KLT pada saat dimasukkan ke dalam sinar UV

xliii