Kromatografi Lapis Tipis

Alat dan bahan

Bejana KLT
Fase diam : Plat KTL (TLC 254)
Fase gerak : Kloroform : etanol (95:5)
Sampel : Obat sakit kepala mengandung parasetamol dan kafein
Detektor : Densitometer
Alat lain : peralatan gelas

Cara Kerja

1. Penyiapan larutan baku (disiapkan oleh laboran)

a. Buat larutan stok parasetamol dan kafein (dengan konsentrasi masing-masing
10mg/mL) dalam Metanol
b. Dibuat seri konsentrasi untuk pembuatan kurva baku (menggunakan labu takar 10mL)
sesuai tabel:

Parasetamol 10mg/mL Kafein 10mg/mL

(uL) (uL)
150 50
300 100
450 150
600 200
750 250
900 300

c. Tambahkan metanol hingga batas tanda (10mL)

2. Penyiapan Sampel
a. Timbang saksama lebih kurang 100mg serbuk obat yang mengandung parasetamol
dan kafein
b. Larutkan dalam 100mL metanol (dalam labu takar 100mL)
c. Homogenkan menggunakan sonikator kemudian saring dengan kertas saring

3. Penyiapan bejana KLT

a. Masukkan larutan fase gerak ke dalam bejana KLT
b. Jenuhkan bejana KLT dengan meletakkan kertas saring di dalam bejana (Bagian
bawah kertas harus tercelup di fase gerak dan bagian atas menempel pada dinding
bejana)
c. Tutup rapat dan tunggu hingga kertas saring basah sampai atas

4. Penyiapan plat KLT

a. Aktivasi lempeng (plat) KLT dengan cara memanaskan plat dalam oven pada suhu
105°C selama 2 jam (dilakukan oleh laboran)
b. Siapkan lempeng KLT dengan memberi tanda awal dan akhir elusi (lihat gambar 1)
c. Totolkan larutan baku, sampel, dan standar masing-masing ± 4 L
d. Masukkan plat KLT ke dalam bejana KLT dan tutup rapat
e. Tunggu dan amati hingga fase gerak mencapai batas akhir elusi sesuai tanda
f. Keluarkan lempeng KLT dan kering anginkan
 Gambar 1. Skema penyiapan plat KLT dan penotolan sampel (warna hanya sebagai ilustrasi)

5. Pengukuran kadar
a. Baca luas bercak masing-masing dengan menggunakan densitometer (diperoleh data
luas area)
b. Buat persamaan regresi linear konsentrasi versus luas area (y = mx + b) dari masing-
masing seri konsentrasi larutan baku parasetamol dan kafein
c. Hitung konsentrasi parasetamol dan kafein dalam tiap sampel

Data Keseragaman Bobot

Informasi tablet: tiap tablet mengandung 600mg parasetamol dan 50mg kafein