Anda di halaman 1dari 104

FORMULASI SEDIAAN HANDSANITIZER EKSTRAK

ETANOL KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis)


TERHADAP BAKTERI Pseudomonas aeruginosa
Dan Staphylococcus aureus

SKRIPSI

Oleh :

OKTAVIANI
1801011536

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI


FAKULTAS FARMASI DAN KESEHATAN
INSTITUT KESEHATAN HELVETIA
MEDAN
2022
FORMULASI SEDIAAN HANDSANITIZER EKSTRAK
ETANOL KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis)
TERHADAP BAKTERI Pseudomonas aeruginosa
Dan Staphylococcus aureus

SKRIPSI

Diajukan Sebagai Syarat Pengajuan Untuk Memperoleh


Gelar Sarjana Farmasi
(S.Farm)

Oleh :

OKTAVIANI
1801011536

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI


FAKULTAS FARMASI DAN KESEHATAN
INSTITUT KESEHATAN HELVETIA
MEDAN
2022
ABSTRAK

FORMULASI SEDIAAN HANDSANITIZER EKSTRAK ETANOL


KEMBANG SEPATU (Hibiscus rosa-sinensis) TERHADAP
BAKTERI Pseudomonas aeruginosa dan
Staphylococcus aureu

OKTAVIANI
1801011536

Bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) Malvaseae yang


tumbuh subur di beberapa negara yang beriklim tropis dan subtropics salah
satunya Indonesia yang banyak dimanfaatkan sebagai tanaman hias, tanaman
pagar, dan bunga potong serta dan dapat digunakan sebagai obat herbal. Tujuan
penelitian untuk mengetahui pembuatan hand sanitizer dan efektivitas terhadap
bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus.
Jenis Penelitian ini eksperimental meliputi pengambilan sampel,
pembuatan ekstrak, pembuatan sediaan hand sanitizer, dan pengujian aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus
dan mengukur daya hambat bakteri (mm).
Hasil pembuatan sediaan ekstrak etanol bunga kembang sepatu dapat
diformulasikan dalam bentuk sediaan hand sanitizer dengan konsentrasi 10, 20
dan 30%. Pengujian aktivitas antibakteri Pseudomonas aeruginosa dan
Staphylococcus aureus ekstrak yang paling efektif adalah 30% dengan zona
hambat 18 mm dan 18,28 mm. Pada sediaan hand sanitizer yang paling efektif
konsentrasi 30% dengan zona hambat 15,60 mm dan 15,73 mm
Kesimpulan dalam penelitian ini ekstrak etanol bunga kembang sepatu
dan sediaan hand sanitizer bunga kembang sepatu memiliki daya hambat
antibakteri terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus
yang baik sehingga pengujian antibakteri dikatakan dalam kategori “Kuat”

Kata Kunci : Bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis), hand sanitizer,


antibakteri.

i
KATA PENGANTAR

Dengan mengucapkan puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas
berkat dan karunia-Nya yang telah memberikan kesehatan kepada penulis,
sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Formulasi Sediaan
Handsanitizer Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus Rosa-
Sinensis) Terhadap Bakteri (Pseudomonas aeruginosa & Staphylococcus
aureus)” yang disusun sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan
program S1 Farmasi di Institut Kesehatan Helvetia Medan.
Selama proses penyusunan sikripsi ini penulis banyak mendapatkan
bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini
penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada :
1. Ibu Dr. dr. Hj. Razia Begum Suroyo, M.Sc., M.Kes., selaku Ketua Pembina
Yayasan Helvetia Medan.
2. Bapak Iman Muhammad, S.E., S.Kom., M.M., M.Kes, selaku Ketua Yayasan
Helvetia Medan.
3. Bapak Drs. Dr. Ismail Efendi, M.Si., selaku Rektor Institut Kesehatan
Helvetia Medan.
4. Bapak apt., Darwin Syamsul, S.Si., M.Si., selaku Dekan Fakultas Farmasi
dan Kesehatan Institut Kesehatan Helvetia Medan.
5. Ibu apt., Adek Chan, S.Si., M.Si., selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi
Institut Kesehatan Helvetia Medan.
6. Ibu Tetty Noverita Khairani S, S.Si., M.Si., selaku Dosen Pembimbing I yang
telah memberikan masukan yang bermanfaat untuk perbaikan sikripsi ini.
7. Ibu apt., Khairani Fitri, S.Si., M.Kes., selaku Dosen Pembimbing II yang
telah memberikan masukan yang bermanfaat untuk perbaikan sikripsi ini.
8. Bapak dr. Jefri Naldi, M.Si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan
masukan yang bermanfaat untuk perbaikan sikripsi ini.
9. Seluruh Staf Dosen Institut Kesehatan Helvetia Medan yang telah
memberikan ilmu dan pengetahuan dan bimbingan kepada penulis selama
pendidikan.
Penulis menyadari baik dari segi penggunaan bahasa, cara menyusun
sikripsi ini masih jauh dari kata sempurna, oleh karena itu dengan segala
kerendahan hati, penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun
dari semua pihak untuk kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis
mengharapkan semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi kita semua

Medan Februari 2022

Oktaviani

ii
DAFTAR ISI

ABSTRAK.................................................................................................. i
KATA PENGANTAR................................................................................ ii
DAFTAR ISI............................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR.................................................................................. vi
DAFTAR TABEL...................................................................................... vii
DAFTAR LAMPIRAN.............................................................................. viii
BAB I PENDAHULUAN........................................................................... 1
1.1 Latar Belakang................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah......................................................... 3
1.3 Hipotesis Penelitian......................................................... 4
1.4 Tujuan Penelitian............................................................. 4
1.5 Manfaat Penelitian........................................................... 4
1.6 Kerangka Konsep Penelitian............................................ 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA................................................................ 8
2.1 Bunga Kembang Sepatu.................................................. 8
2.1.1 Taksonomi Tanaman Bunga Kembang Sepatu.... 8
2.1.2 Morfologi Tanaman Bunga Kembang Sepatu..... 9
2.1.3 Nama Daerah Tanaman Bunga Kembang Sepatu 9
2.1.4 Khasiat Tanaman Bunga Kembang Sepatu......... 9
2.1.5 Kandungan Senyawa Kimia Bunga Kembang
Sepatu................................................................... 10
2.2 Simplisia.......................................................................... 10
2.3 Ekstraksi.......................................................................... 11
2.3.1 Metode Cara Dingin............................................. 11
2.3.2 Metode Cara Panas.............................................. 12
2.4 Pelarut.............................................................................. 13
2.5 Bakteri.............................................................................. 14
2.5.1 Pseudomonas aeruginosa.................................... 14
2.5.2 Staphylococcus aureus......................................... 16
2.6 Kulit................................................................................. 18
2.6.1 Susunan Kulit....................................................... 19
2.6.2 Fungsi kulit.......................................................... 21
2.7 Zona Hambat Bakteri....................................................... 23
2.8 Gel.................................................................................... 23
2.8.1 Basis Gel.............................................................. 24

iii
2.8.2 Formulasi Standar Gel......................................... 26
2.9 Hand Sanitizer................................................................. 26
BAB III METODOLOGI PENELITIAN................................................ 42
3.1 Jenis Penelitian................................................................ 42
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian.......................................... 42
3.2.1 Tempat Penelitian................................................ 42
3.2.2 Waktu Penelitian.................................................. 42
3.3 Alat dan Bahan................................................................ 42
3.3.1 Alat....................................................................... 42
3.3.2 Bahan................................................................... 43
3.4 Prosedur Kerja................................................................. 43
3.4.1 Pengumpulan Sampel.......................................... 43
3.4.2 Pembuatan Simplisia............................................ 43
3.4.3 Uji Sikrining Fitokimia........................................ 44
3.4.4 Karakteristik Simplisia........................................ 45
3.4.5 Pembuatan Ekstrak.............................................. 47
3.4.6 Karakteristik Ekstrak........................................... 48
3.5 Prosedur Pembuatan Gel Hand sanitizer......................... 49
3.5.1 Formulasi Sediaan Gel......................................... 49
3.6 Sterilisasi Alat dan Bahan................................................ 50
3.7 Peremajaan Bakteri.......................................................... 50
3.8 Pengujian Aktivitas Antibakteri...................................... 51
3.8.1 Pembuatan Media Nutrient agar (NA)............... 51
3.8.2 Pembuatan Media Muller Hinton Agar (MHA). . 51
3.8.3 Pembuatan Media Agar Miring........................... 52
3.8.4 Suspensi Standar Mc Farland 0,5........................ 52
3.8.5 Pembuatan Suspensi Bakteri................................ 52
3.8.6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Bunga
Kembang Sepatu dengan Berbagai Konsentrasi. . 53
3.8.7 Pengujian Aktivitas Antibakteri Esktrak Etanol
Bunga Kembang Sepatu....................................... 53
3.8.8 Pengujian Antibakteri Sediaan Hand sanitizer.... 53
3.9 Evaluasi Terhadap Sediaan.............................................. 54
3.9.1 Pengamatan Organoleptik.................................... 54
3.9.2 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan..................... 54
3.9.3 Penentuan pH....................................................... 54
3.9.4 Uji Viskositas....................................................... 55
3.9.5 Uji Iritasi.............................................................. 55
3.10 Pengukuran Zona Hambat............................................... 55
3.11 Analisis Data.................................................................... 56

iv
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN............................................... 57
4.1 Hasil Determinasi............................................................ 57
4.2 Hasil Ekstraksi Bunga Kembang Sepatu......................... 57
4.3 Hasil Karakteristik Simplisa dan Ekstrak........................ 58
4.4 Hasil Mikroskopik........................................................... 59
4.5 Hasil Skirning Fitokimia Simplisia dan Ekstrak............. 59
4.6 Hasil Pembuatan Sediaan Hand Sanitizer Bunga
Kembang Sepatu.............................................................. 59
4.7 Hasil Evaluasi Mutu Sediaan........................................... 60
4.7.1 Hasil Pengujian Organoleptis.............................. 60
4.7.2 Hasil Pengujian Homogenitas.............................. 61
4.7.3 Hasil Pengujia pH................................................ 61
4.7.4 Hasil Pengujia Iritasi............................................ 62
4.7.5 Hasil Pengujian Viskositas.................................. 63
4.8 Hasil Pengujia Aktivitas Antibakteri Pseudomonas
aeruginosa dan Staphylococcus aureus........................... 63
4.9 Hasil Pengukuran Bakteri Sediaan Gel Hand Sanitizer
Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus.... 66
4.10 Analisis Data.................................................................... 67
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN............................................... 69
5.1 Kesimpulan...................................................................... 69
5.2 Saran................................................................................ 69
DAFTAR PUSTAKA................................................................................. 70

LAMPIRAN................................................................................................ 71

v
DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1.1. Kerangka Konsep Penelitian................................................ 7


Gambar 2.1. Bunga Kembang Sepatu....................................................... 8
Gambar 2.1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa........................................ 15
Gambar 2.3. Bakteri Staphylococcus aureus............................................ 16
Gambar 2.4. Anatomi Kulit....................................................................... 19
Gambar 2.5. Pengukuran Diameter Zona Hambat ................................... 23

vi
DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1. Formula Acuan Hand Sanitizer.............................................. 26


Tabel 3.1. Rancangan Formula Gel Hand Sanitizer Ekstrak Etanol
Bunga Kembang Sepatu......................................................... 35
Tabel 4.1 Hasil Karakteristik Simplisia.................................................. 58
Tabel 4.2 Hasil Karakteristik Ekstrak..................................................... 58
Tabel 4.3 Hasil Skrining Fitokimia......................................................... 58
Tabel 4.4 Hasil Uji Organoleptis............................................................ 60
Tabel 4.5 Hasil Uji Homogenitas........................................................... 61
Tabel 4.6 Hasil Uji pH............................................................................ 61
Tabel 4.7 Hasil Uji Iritasi....................................................................... 62
Tabel 4.8 Hasil Uji Viskositas................................................................ 63
Tabel 4.9 Zona hambat pada bakteri Pseudomonas aeruginosa ............ 64
Tabel 4.10 Zona hambat bakteri Staphylococcus aureus.......................... 65
Tabel 4.11 Hasil Uji Sediaan Gel Hand Sanitizer Terhadap
Bakteri Pseudomonas aeruginosa.......................................... 66
Tabel 4.12 Hasil Uji Sediaan Gel Hand Sanitizer Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus............................................................ 66
Tabel 4.13 Hasil Uji Statistik Ekstrak Terhadap Bakteri
Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus........... 67
Tabel 4.14 Hasil Uji Statistik Sediaan gel hand sanitizer Terhadap
Bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus
aureus.................................................................................... 68

vii
DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat Izin Penelitian............................................................. 73


Lampiran 2. Surat Permohonan Judul....................................................... 74
Lampiran 3. Lembar Bimbingan Proposal Doping 1................................ 75
Lampiran 4. Lembar Bimbingan Proposal Doping 2................................ 76
Lampiran 2. Lembar Bimbingan Sikripsi Doping 1................................. 77
Lampiran 3. Lembar Bimbingan Skripsi Doping 2.................................. 78
Lampiran 4. Skema Pengambilan Sampel Bunga Kembang Sepatu dan
Karakterisitik simplisia......................................................... 79
Lampiran 5. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu
dan Karakterisasi Ekstrak..................................................... 80
Lampiran 5. Skema Pembuatan Sediaan Hand Sanitizer.......................... 81
Lampiran 7. Skema Peremajaan Bakteri................................................... 82
Lampiran 8. Skema Pembuatan Suspensi Bakteri.................................... 83
Lampiran 9. Skema Pembuatan Larutan Standar Mc. Farland................ 84
Lampiran 10. Skema Pembuatan NA.......................................................... 85
Lampiran 11. Skema Pengujian Antibakteri Ekstrak Bunga Sepatu.......... 86
Lampiran 12. Skema Pengujian Antibakteri Sediaan Hand Sanitizer........ 87
Lampiran 13. Pembuatan Simplsia............................................................. 88
Lampiran 14. Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan ekstrak................ 89
Lampiran 15. Hasil Pemerikasaan Mikroskopik......................................... 90
Lampiran 16. Uji Skrining ......................................................................... 91
Lampiran 17. Pengujian Antibakteri........................................................... 92
Lampiran 18. Uji pH................................................................................... 93
Lampiran 19. Hasil Uji Homogenitas ....................................................... 94
Lampiran 20. Uji Iritasi............................................................................... 95
Lampiran 21. Uji Statistik Ekstrak Bunga Kembang Sepatu
Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus....... 96

viii
BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Indonesia yang beriklim tropis merupakan negara terbesar kedua di dunia

setelah Brazil yang kaya keanekaragaman hayati. Di indonesia tersedia sekitar

30.000 spesies tanaman,di antaranya tanaman obat yang berjumlah sekitar 2.500

jenis. Sebagai negara kepulauan yang berisi berbagai macam suku bangsa dan

adat istiadat, indonesia juga mewariskan keanekaragaman budaya. Hal ini terkait

dengan tradisi dalam hal pemanfaatan tanaman obat sehingga tak heran bila

indonesia juga memiliki beragam pengobatan tradisional. Kebiasaan membuat

ramuan herba atau kebiasaan meminum jamu merupakan bagian dari

keanekaragaman budaya tersebut. Pengetahuan menggunakan obat tradisional

sejatinya telah diwariskan secara turun temurun dan biasanya didasarkan pada

pengalaman, tradisi, kepercayaan yang di masyarakat, serta tergantung dengan

jenis tanaman didaerah setempat. Untuk menunjang keberlangsungan tradisi

dalam memanfaatkan tanaman obat warisan budaya bangsa tersebut,

kelestariannya harus terus diupayakan secara optimal yang pengembangannya

ditujukan untuk pembangunan kesehatan nasional hal ini ditunjang oelh berbagai

hasil penelitian yang telah membutktikan bahwa obat herbal dapat menjaga

kesehatan, mempengaruhi metabolisme tubuh dan memperbaiki kerusakan organ

sehingga memiliki efek pengobatan yang efektif. Selain itu, WHO jugs telah

merekomendasikan penggunaan obat herbal untuk promotif, preventif,

1
2

rehabilitatif, kuratif, terutama untuk penyakit yang sifatnya kronis, degeneratif

dan kanker (1).

Tren global back to nature turut menyebabkan terjadi nya peningkatan

kesadaran masyaraka akan produksi pangan organik dan obat-obatan berbasis

bahan baku alam yang lebih sehat, aman dan murah. Sekitar 80% penduduk dunia

telah memanfaatkan tumbuhan obat untuk memelihara kesehtan primernya dan

perlu diketahui bahwa sekitar 25% obat modern berasal datri tanaman obat. Saat

ini, masyarakat sangat membutuhkan tanaman obat yang dapat meningkatkan

daya tahan tubuh (imunitas), meningkatkan vitalitas tubuh, pengobatan penyakit

infeksi, pengobatan penyakit degeneratif seperti tekanan darah tinggi (hipertensi),

penyakit kencing manis (diabetes militis), kadar trigliserida tinggi (hiper

trigliseridemia), kadar kolesterol tinggi (hiper kolesterolemia) dan kanker (1).

Salah satu tanaman yang sangat berpotensi untuk mengobati berbagai

penyakit adalah bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis). tanaman semak

dari famili Malvaseae yang tumbuh subur di beberapa negara yang beriklim tropis

dan subtropics salah satunya Indonesia yang banyak dimanfaatkan sebagai

tanaman hias, tanaman pagar, dan bunga potong serta dan dapat digunakan

sebagai obat herbal (2).

Penyakit sering berasal dari mikroorganisme yang tidak dapat dilihat oleh

mata secara langsung. Mikroorganisme tersebut dapat dijumpai di mana saja,

terutama tempat-tempat umum dan fasilitas umum lain yang memungkinkan

menjadi tempat berkembang biaknya mikroorganisme. Salah satu bentuk

penyebaran mikroorganisme pada manusia adalah melalui tangan (3). Mencuci


3

tangan merupakan salah satu kegiatan yang sangat penting dalam upaya untuk

menjaga agar tubuh terhindar dari penyakit, khususnya infeksi yang disebabkan

oleh mikroorganisme (3).

Produk pembersih tangan dapat di rancang dengan berbagai jenis, mulai

dari sabun yang dicuci dengan air hingga produk Hand sanitizer gel dengan

antiseptik yang tidak memerlukan pencucian dengan air (4). Hand sanitizer adalah

gel dengan berbagai kandungan yang cepat membunuh mikroorganisme yang ada

di kulit tangan. Hand sanitizer banyak digunakan karena alasan kepraktisan,

mudah dibawa kemana-mana serta bisa cepat digunakan tanpa perlu menggunakan

air (4). Cara pemakaiannya dengan diteteskan pada telapak tangan, kemudian

diratakan pada permukaan tangan (5).

Hasil penelitian sebelumnya dari ekstrak bunga kembang sepatu memiliki

senyawa yang bersifat antibakteri seperti tanin, alkaloid, triterpenoid, sianidin,

glikosida, kuersetin. memiliki daya anti mycrobacterium sebagai obat anti

tuberkulosis (6), antibakteri (7), antipiretik (8).

Berdasarkan latar belakang diatas peneliti tertarik untuk memanfaatkan

lebih lanjut dalam bentuk sediaan topikal agar dapat digunkan secara luas sebagai

gel antiseptik tangan (Hand sanitizer).

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas maka rumusan masalah penelitian yaitu:

1. Apakah ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) dapat

diformulasikan dalam bentuk sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer)?.


4

2. Apakah sediaan hand sanitizer yang mengandung ekstrak etanol bunga

kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) memenuhi evaluasi sediaan dengan

menggunakan kontrol positif?

1.3 Hipotesis Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah maka hipotesis dalam penelitian ini adalah:

1. Diduga ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) dapat

diformilasikan dalam bentuk sediaan gel antiseptik tangan (hand sanitizer)

2. Diduga sediaan hand senitizer yang mengandung ekstrak etanol bunga

kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) memenuhi evaluasi sediaaan dengan

menggunakan kontrol positif.

1.4 Tujuan Penelitian

Berdasarkan rumusan diatas maka dapat disimpulkan tujuan dari penelitian

ini adalah:

1. Untuk mengetahui bahwa ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus

rosa-sinensis) dapat diformulasikan dalam bentuk sediaan gel antiseptik

tangan (Hand sanitizer)

2. Untuk mengetahui bahwa ekstrak etanol bungan kembang sepatu (Hibiscus

rosa-sinensis) memenuhi evaluasi sediaan dengan mengguakan kontrol

positif

1.5 Manfaat Penelitian

Manfaat dari penelitian adalah :


5

1. Bagi Peneliti

Untuk mengetahui Senyawa apa yang ada di dalam bunga kembang sepatu

dan manfaat sebagai hand sanitizer

2. Bagi Institusi

Memberikan sumber ilmu pengetahuan tentang tanaman bunga kembang

sepatu yang dapat dikembangkan ke dalam bentuk sediaan hand sanitizer

3. Bagi Masyarakat

Memberikan informasi bahwa tanaman bunga kembang sepatu dapat di

dijadikan sebagai hand sanitizer yang terbuat dari bahan dasar tanaman.
6

1.6 Kerangka Konsep Penelitian

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Simplisia Bunga Skirining 1. Alkaloid


Kembang Sepatu Fitokimia 2. Flavonoid
3. Saponin
4. Tanin
5. Steroid

1. Uji Mikroskopik
2. Penetapan Kadar Air
3. Penetapan Kadar Abu
Uji Karakterisasi Total
Simplisia 4. Penetapan Sari Larut
Air
5. Penetapan Kadar Sari
Larut Dalam Etanol
6. Penetapan Kadar Abu
Tidak Larut Dalam
Asam

1. Uji Mikroskopik
2. Penetapan Kadar Air
Ekstrak Etanol Bunga Uji Karakterisasi 3. Penetapan Kadar Abu
Kembang Sepatu Ekstrak Etanol Total
Bunga Kembanng 4. Penetapan Sari Larut Air
Sepatu 5. Penetapan Kadar Sari
Larut Dalam Etanol
6. Penetapan Kadar Abu
Tidak Larut Dalam
Asam

Uji aktivitas antibakteri


Pengukuran
terhadap bakteri
zona Hambat
Pseudomonas aeruginosa,
(mm)
Staphylococcus aureus
7

Ekstrak Etanol Bunga 1. Uji Organoleptis


Kembang Sepatu dan 2. Uji Homogenitas
Konsentrasi Formula 3. Uji Stabilitas
Evaluasi Sediaan
yang di gunakan 4. Uji pH
F0 = Aquades 5. Uji Iritasi
F1 = 10% 6. Uji Kesukaan Terhadap
F2 = 20% sukarelawan
F3 = 30 %
F4 = Antis

Uji Aktivitas
Antibakteri Terhadap Zona Hambat
Bakteri Pseudomonas (mm)
aeruginosa dan
Staphylococcus aureus

Gambar 1.1. Kerangka Konsep Penelitian


BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Bunga Kembang Sepatu

Gambar 2.1. Bunga Kembang Sepatu

2.1.1 Taksonomi Tanaman Bunga Kembang Sepatu

Taksonomi adalah pengelompokan atau pengklasifikasian jenis tumbuhan

ke dalam kelompok tertentu. Pengelompokan ini disusun secara runtut sesuai

dengan tingkatannya (hierarkinya), yaitu mulai dari yang lebih besar tingkatannya

hingga ke tingkatan yanglebih kecil.

Dala m sistematika tumbuhan, kembang sepatu dapat diklasifikasikan

sebagai berikut:

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae

Class : Dicotyledonae

8
9

Ordo : Malvales

Family : Malvaceae

Genus : Hibiscus

Species : Hibiscus rosa-sinensis L. (9)

2.1.2 Morfologi Tanaman Bunga Kembang Sepatu

Kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L) merupakan tanaman perdu,

tahunan, dengan tinggi tanaman ±3 m. Batangnya bulat, berkayu, keras dan

berdiameter ±9 cm, masih muda berwarna ungu setelah tua putih kotor. Daun

tunggal, tepi beringgit, ujung runcing, pangkal tumpul, panjangnya 10-16 cm,

lebar 5-1 cm, hijau muda. Bunga tunggal, bentuk terompet, di ketiak daun,

kelopak bentuk lonceng, mahkota terdiri dari lima belas sampai dua puluh daun

mahkota, merah muda, benang sari banyak, tangkai sari merah, kepala sari

kuning, dan putik bentuk tabung. Sedangkan akarnya tunggang dan berwarna

coklat muda. Buahnya kecil dan lonjong, dengan diameter ±4 mm, masih muda

putih setelah tua berwarna coklat. Sedangkan bijinya pipih dan berwarna putih

(10).

2.1.3 Nama Daerah Tanaman Bunga Kembang Sepatu

Nama tanaman di berbagai daerah Bungong raya (Aceh), soma-soma

(Nias), bunga-bunga (Batak), kembang wera (Sunda), bunga raya (Melayu),

kembang sepatu, wora-wari (Jawa), waribang (Bali) (11).

2.1.4 Khasiat Tanaman Bunga Kembang Sepatu

Berkhasiat sebagai mengobati batuk lendir dan berdarah, mengobati btuk

rejan (pertussis), mengobati demam karna malaria, mengobati gondongan


10

(parotitis), mengobati infeksi saluran kemih, mengobati keputihan, melancarkan

haid, mengobati mimisan (epistaxis), mengobati radang usus (enteritis),

mengobati sariawan (ephthae), mengobati tuberkulosis (11).

2.1.5 Kandungan Senyawa Kimia Bunga Kembang Sepatu

Daun, bunga dan akar kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L)

mengandung flavonoida. Disamping itu daunnya mengandung saponin dan

polifenol, bunganya mengandung polifenol, sedangkan akarnya mengandung

tannin dan saponin (10). Ekstrak etanol bunga kembang sepatu diketahui

mengandung tannin, saponin, alkaloid, steroid, flavonoid (12).

2.2 Simplisia

Simplisia adalah bahan alam yang telah dikeringkan yang digunakan untuk

pengobatan dan belum mengalami pengolahan . pengeringan dapat dilakukan

dengan penjemuran di bawah sinar matahari, diangin-angin, atau menggunakan

oven, kecuali dinyatakan lain suhu pengeringan dengan tidak lebih dari 60o.

Simplisia Segar adalah bahan alam segar yang belum dikeringkan. Simplisia

Nabati adalah simplisia yang berupa tumbuhan utuh, bagian tumbuhan atau

eksudat tumbuhan. Eksudat tumbuhan adalah isi sel yang secara spontan keluar

dari tumbuhan atau dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya atau zat nabati

lain yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tumbuhannya. Serbuk Simplisia

Nabati adalah bentuk serbuk dari simplisia nabati, dengan ukuran derajat

kehalusan tertentu. Sesuai dengan derajat kehalusannya, dapat berupa serbuk

sangat kasar, kasar, agak kasar, halus dan sangat halus. Serbuk simplisia nabati
11

tidak boleh mengandung fragmen jaringan dan benda asing yang bukan

merupakan komponen asli dari simplisia yang bersangkutan antara lain telur

nematoda, bagian dari serangga dan hama serta sisa tanah (13).

2.3 Ekstraksi

Menurut Departemen Kesehatan RI (2006), ekstraksi adalah proses

penarikan kandungan kimia yang dapat larut dari suatu serbuk simplisia, sehingga

terpisah dari bahan yang tidak dapat larut. Ekstrak merupakan sediaan kental yang

diperoleh dengan cara mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati ataupun

simplisia hewani dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Kemudian semua atau

hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan

sedemikian, sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (14).

Beberapa metode yang banyak digunakan untuk ekstraksi bahan alam

antara lain:

2.3.1 Metode Cara Dingin

1) Maserasi

Maserasi adalah proses ekstraksi simplisia menggunakan pelarut dengan

beberapa kali pengadukan pada suhu ruangan. Prosedurnya dilakukan dengan

merendam simplisia dalam pelarut yang sesuai dalam wadah tertutup. Pengadukan

dilakukan dapat meningkatkan kecepatan ekstraksi. Kelemahan dari maserasi

adalah prosesnya membutuhkan waktu yang cukup lama. Ekstraksi secara

menyeluruh juga dapat menghabiskan sejumlah besar volume pelarut yang dapat

berpotensi hilangnya metabolit. Beberapa senyawa juga tidak terekstraksi secara

efisien jika kurang terlarut pada suhu kamar (27oC). Ekstraksi secara maserasi
12

dilakukan pada suhu kamar (27oC), sehingga tidak menyebabkan degradasi

metabolit yang tidak tahan panas (14).

2) Perkolasi

Perkolasi merupakan proses mengekstraksi senyawa terlarut dari jaringan

selular simplisia dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna yang

umumnya dilakukan pada suhu ruangan. Perkolasi cukup sesuai, baik untuk

ekstraksi pendahuluan maupun dalam jumlah besar (14).

2.3.2 Metode Cara Panas

1) Soxhlet

Metode ekstraksi soxhlet adalah metode ekstraksi dengan prinsip

pemanasan dan perendaman sampel. Hal itu menyebabkan terjadinya pemecahan

dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar

sel. Dengan demikian, metabolit sekunder yang ada di dalam sitoplasma akan

terlarut ke dalam pelarut organik. Larutan itu kemudian menguap ke atas dan

melewati pendingin udara yang akan mengembunkan uap tersebut menjadi tetesan

yang akan terkumpul kembali. Bila larutan melewati batas lubang pipa samping

soxhlet maka akan terjadi sirkulasi. Sirkulasi yang berulang itulah yang

menghasilkan ekstrak yang baik (14).

2) Refluks

Ekstraksi dengan cara ini pada dasarnya adalah ekstraksi

berkesinambungan. Bahan yang akan diekstraksi direndam dengan cairan penyari

dalam labu alas bulat yang dilengkapi dengan alat pendingin tegak, lalu

dipanaskan sampai mendidih. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan
13

diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif dalam

simplisia tersebut. Ekstraksi ini biasanya dilakukan 3 kali dan setiap kali

diekstraksi selama 4 jam (14).

3) Digesti

Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada suhu

yang lebih tinggi dari suhu ruangan, yaitu secara umum dilakukan pada suhu 40-

50oC

4) Infusa

Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada suhu penangas air (bejana

infus tercelup dalam penangas air mendidih), suhu terukur (96-98oC) selama

waktu tertentu (15-20 menit)

5) Dekok

Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama dan suhu sampai titik

didih air, yaitu pada suhu 90-100oC selama 30 menit (14).

2.4 Pelarut

Etanol merupakan pelarut terbaik dalam ekstraksi senyawa fenolik bila

dibandingkan dengan pelarut lainnya karena memiliki sifat polar Etanol juga

mampu menyari senyawa kimia lebih banyak dibandingkan dengan air dan

methanol, terdapat beberapa faktor yang berpengaruh tehadap proses ekstraksi

dimana hal ini akan mempengaruhi perolehan kadar suatu senyawa zat aktif salah

satunya adalah konsentrasi pelarut pengekstraksi yang digunakan. Berdasarkan

penelitian yang dilakukan terhadap pengaruh variasi konsentrasi pelarut etanol

60%, 70%, 80%, dan 96%, terhadap kadar flavonoid total ekstrak rambut jagung
14

yang memperoleh hasil bahwa pelarut optimum untuk ekstraksi senyawa

flavonoid adalah pelarut etanol 70%. Kemudian penelitian lainnya mengenai

pengaruh konsentrasi ekstrak etanol 70% , 96% dan ekstrak air buah harendong

terhadap kadar flavonoid total yang diperoleh menyatakan bahwa kandungan

flavonoid total tertinggi terdapat dalam ekstrak etanol 96% (15).

2.5 Bakteri

Bakteri merupakan organisme uniseluler yang relatif sederhana

karenamateri genetik tidak diselubungioleh selaputinti.Bakteri memiliki bentuk

dan ukuran yang sangat beragam.Sebagian besar bakteri memiliki diameter 0,2-2

μmdan panjang 2-8 μm. Secara umum, sel bakteri terdiri atas beberapa bentuk,

yaitu basil atau batang, bulat, dan spiral. Dinding sel bakteri mengandung

kompleks karbohidrat dan protein yang disebut peptidoglikan. Bakteri umumnya

bereproduksi dengan cara membelah diri menjadi dua sel yang berukuran sama.

Ini disebut dengan pembelahan biner.Untuk nutrisi, bakteri umumnya

menggunakan bahan kimia organik yang dapat diperolah secara alami dari

organisme hidup atau organisme yang sudah mati. Beberapa bakteri dapat

membuat makanan sendiri dengan proses biosintesis, sedangkan beberapa bakteri

yang lain memperoleh nutrisi dari substansi organik (16).

2.5.1 Pseudomonas aeruginosa

Bakteri ini merupakan jenis bakteri yang juga terdapat dalam usus besar.

Bakteri ini kadang kedapatan di dalam luka pada hewan atau manusia. Bakteri ini

menyebabkan timbulnya nanah yang kebiruan (17).


15

Gambar 2.2. Bakteri Pseudomonas aeruginosa

1. Klasifikasi Bakteri

Kingdom : Bacteria

Devisi : Proteobacteria

Class : Gammaproteobacteria

Ordo : Pseudomonadales

Familia : Pseudomonadaceae

Genus : Pseudomonas

Spesies : Pseudomonas aeruginosa (18).

2. Sifat dan Morfologi

Pseudomonas aeruginosa merupakan bakteri Gram negatif dengan

berbentuk sel tunggal, batang lurus atau melengkung, namun tidak berbentuk

heliks. Pada umumnya berukuran 0,5 – 1,0 µm. Motil dengan flagelum polar;

monotrikus atau multitrikus. Tidak menghasilkan selongsong prosteka. Tidak

dikenal adanya stadium istirahat. Kemoorganotrof. Metabolisme dengan respirasi,

tidak pernah fermentatif. Beberapa merupakan kemolitotrof fakultatif, dapat


16

menggunakan H2 atau CO sebagai sumber energi. Oksigen molekuler merupakan

penerima elektron universal, beberapa dapat melakukan denitrifikasi dengan

menggunakan nitrat sebagai penerima pilihan (19).

2.5.2 Staphylococcus aureus

Staphylococcus adalah organisme yang biasanya terdapat di berbagai

bagian tubuh manusia, termasuk hidung, tenggorokan kulit dan karenanyamudah

mencemari makanan. Pada anak-anak kecil dan orang-orang lemah dapat

mengakibatkan renjatan (shock) dan kematian karena dehidrasi. Juga biasanya

tidak dikenali sebagai penyebab keracunan makanan, kecuali jika banyak orang

yang terserang pada saat yang bersamaan. Pada umumnya gejala-gejalanya mual,

pusing, muntah dan diare muncul dua sampai enam jam setelah makan makanan

tercemar itu. Bakteri ini menghasilkan enterotoksin yang mana dapat

mengkoagulasi plasma darah yang diberi sitrat atau oksalat. Enterotoksin ini tahan

panas; tidak berubah walau dididihkan selama 30 menit (19).

Gambar 2.3. Bakteri Staphylococcus aureus


17

1. Klasifikasi Bakteri

Kingdom : Bacteria

Devisi : Firmicutes

Class : Bacilli

Ordo : Bacillales

Familia : Staphylococcaceae

Genus : Staphylococcus

Spesies : Staphylococcus aureus (17)

2. Sifat dan Morfologi

Bakteri Staphylococcus termasuk dalam famili Micrococcaceae. Bakteri

ini berbentuk bulat. Koloni mikroskopik cenderung berbentuk menyerupai buah

anggur. Menurut bahasa Yunani, Staphyle berarti anggur dan coccus berarti bulat

atau bola. Salah satu spesies menghasilkan pigmen berwarna kuning emas

sehingga dinamakan aureus (berarti emas, seperti matahari). Bakteri ini dapat

tumbuh dengan atau tanpa bantuan oksigen. Staphylococcus aureus membentuk

koloni berwarna kuning pada media yang kaya nutrisi. Staphylococcus

epidermidis membentuk koloni berwama putih dan relatif kecil Staphylococcus

aureus sering kali bersifat hemolitik pada media agar yang mengandung darah,

sedangkan Staphylococcus epidermidis bersifat nonhemolitik. Staphylococcus

bersifat anaerob fakultatif dan menghasilkan enzim katalase. Staphylococcus

aureus dapat tumbuh dalam larutan NaCI 15%. Staphylococcus aureus

menghasilkan enzim koagulase, sedangkan Staphylococcus epidermidis tidak

menghasilkan enzim koagulase. Staphylococcus aureus bersifat patogen pada


18

manusia, sedangkan Staphylococcus epidermidis bersifat nonpatogen dan dapat

hidup sebagai flora normal tubuh, seperti pada hidung, tenggorokan, rambut, dan

kulit orang sehat. Staphylococcus ditemuka n di hidung 6,6 % bayi berusia1 hari,

50 % bayi berusia 2 hari, 62 % bayi berusia 3 hari, dan 88 % bayi berusia 4-8 hari.

Keracunan makanan akibat Staphylococcus dapat terjadi jika seseorang

mengonsumsi makanan yang mengandung toksin yang berasal dari

Staphylococcus. Gejala muncul 6-8 Jam setelah mengonsumsi makanan yang

terkontaminasi. Gejala umum yang timbul adalah mual, muntah, kram perut, diare

dan lemas (20).

2.6 Kulit

Kulit merupakan organ tubuh yang meliputi seluruh permukaan badan.

Luas permukaan kulit kira-kira 2 m² dan tebalnya 3-5 mm. Kulit yang paling tebal

ada di telapak tangan. Penebalan kulit dapat terjadi karena gesekan atau tekanan

terus-menerus pada suatu bagian kulit itu. Berat kulit seluruhnya kira-kira

seperlima bagian berat badan, sedangkan warnanya tergantung pada ras,

keturunan, dan lingkungan. Kulit tangan hampir sama dengan kulit tubuh yang

lain, tetapi rambutnya lebih halus dan tidak memiliki rambut yang panjang. Kulit

yang sehat mempunyai sifat lentur, elastis, agak basah, bebas dari kelainan

kelainan, dan bebas dari penyakit. Kulit yang sehat juga bersifat sedikit asam

karena tertutup suatu lapisan yang disebut lapisan asam kulit (acid barrier).

Lapisan asam kulit ini dapat mencegah terjadinya infeksi oleh bermacam-macam

penyebab penyakit kulit (21)


19

Gambar 2.4. Anatomi Kulit

2.6.1 Susunan Kulit

Lapisan kulit manusia terdiri atas tiga lapisan, yaita epidermis, dermis, dan

hipodermis. Berikut ini penjelasan masing-masing lapisan kulit tersebut.

1) Epidermis (kulit ari)

Kulit ari merupakan bagian kulit paling atas dan paling tipis. Kulit

ariterdiri atas beberapa lapisan berikut:

a. Lapisan Tanduk (Stratum Corneum)

Lapisan tanduk adalah lapisan yang terdiri atas keratin. Lapisan ini dapat

mengelupas dan selalu diganti oleh sel-sel lapisan di bawahnya. Sel-sel

mati.lapisan tanduk ini berbentuk pipih, tidak berinti, dan merupakan sel yang

mati

b. Lapisan Bening (Stratum Lucidum)

Lapisan bening terdiri atas sel-sel mati, tidak berinti, dan bersifat transparan.

Sel-sel lapisan ini berisikan zat pendahulu keratin.


20

c. Lapisan Butir (Stratum Gronulosum)

Lapisan butir terdiri atas dua atau tiga lapis sel berbentuk kumparan yang

berinti dan plasmanya berbutir. Butir-butir ini terdiri atas zat pendahulu

keratin.

d. Lapisan Taju (Stratum Spinosum)

Lapisan taju terdiri atas empat atau lima lapisan sel yang bersudut banyak

(polygonal) yang berhubungan satu dengan yang lain dengan. perantaraan

jembatan-jembatan protoplasma sehingga sel-sel yang terlepas seolah-olah

bertaju.

e. Lapisan Tunas (Stratum Basale)

Lapisan tunas dibentuk oleh sel-sel epitel torak. Di antara sel-sel tersebut

terdapat sel-sel bening (melanosit) yang membentuk pigmen kulit melanin

(21).

2) Dermis/Cutis/Corium ( Kulit Jangat)

Lapisan ini merupakan jaringan ikat yang terdiri atas serabut-serabut

elastin dan serabut-serabut kolagen, bagian atasnya berupa jonjot-jonjot yang

menonjol ke dalam kulit ari. Di dalam kulit jangat terdapat kelenjar palit (kelenjar

lemak), kelenjar keringat, pembuluh-pembuluh darah, pembuluh-pembuluh getah

bening, urat-urat saraf halus, kandung (folikel) rambut dan otot penegak rambut.

3) Hipodermis atau Subcutis (Jaringan Ikat Bawah Kulit)

Lapisan ini merupakan lapisan kulit paling bawah dan berisi banyak

jaringan lemak. Tebal tipisnya lapisan ini berbeda-beda pada tiap-tiap orang.

tergantung usia, jenis kelamin, dan keadaan kesehatan badan. Di dalam lapisan ini
21

juga terdapat pembuluh-pembuluh darah dan getah bening. Lapisan lemak

berfungsi sebagai isolator, sebagai bantalan untuk lapisan di bawahnya, dan

sebagai cadangan makanan (21).

2.6.2 Fungsi kulit

Kulit memiliki beberapa fungsi sebagai berikut :

1. Sebagai alat pelindung (proteksi)

Kulit melindungi tubuh dari pukulan, gesekan, luka, kuman penyakit. bahan-

bahan kimia yang kuat, panas, radiasi, dan sebagainya.

2. Pengatur suhu tubuh (termoregulasi)

Suhu tubuh yang sehat antara 36-37°C. Jika terjadi perubahan suhu, darah

dan kelenjar keringat mengadakan penyesuaian. Pembuluh darah dapat

melebar dan menyempit, sedangkan kelenjar keringat mengeluarkan keringat

sehingga terjadi penguapan

3. Penerima rangsang (persepsi)

Pada kulit terdapat serabut saraf sensorik (serabut saraf perasa) sehingga kulit

dapat merasakan panas, dingin, tekanan, rabaan, rasa sakit, nyeri, dan

sebagainya.

4. Alat pengeluaran (ekskresi)

Sisa-sisa metabolisme berupa air (H₂O), garam dapur (NaCl), dan asam laktat

dikeluarkan oleh kelenjar-kelenjar keringat kulit.

5. Pembentukan vitamin D

Dalam palit terdapat provitamin D yang dengan bantuan sinar matahari

berubah menjadi vitamin D.


22

6. Peresap zat-zat tertentu (absorpsi)

Kulit dapat menyerap zat-zat yang larut dalam lemak dan berbagai gas seperti

oksigen. Oleh sebab itu, bahan kosmetik untuk permukaan kulit dapat masuk

ke dalam jaringan kulit melalui kandung rambut ke dalam kelenjar lemak dan

meresap melalui pembuluh-pembuluh darah di sekitar kelenjar lemak ke

dalam jaringan kulit jangat. Secara teori dikatakan bahwa kulit dapat

bernapas, Kulit tidak dapat dilewati air dari luar ke dalam

7. Tempat cadangan lemak di bawah kulit

Jaringan lemak di dalam subcutis berguna untuk menyimpan lemak sebagai

cadangan.

8. Kulit sebagai alat pernapasan

Walaupun hanya sedikit, kulit juga ikut berperan sebagai alat pernapasan

karena kulit juga dapat menyerap gas O₂ dan mengeluarkan CO₂.

9. Kulit sebagai penahan antibakteri

Kulit selalu berkontak dengan lingkungan luar yang memungkinkan adanya

bakteri ataupun kuman. Pada dasarnya, kulit mempunyai sifat asam dengan

derajat keasaman (pH kulit) antara 4,2-5,6 sehingga kulit dapat menahan

hampir seluruh kuman/bakteri yang masuk ke dalam tubuh.

10. Kulit sebagai pembentuk pigmen

Ada lapisan basale pada epidermis. Pada lapisan ini terdapat sel-sel melanosit

pembentuk pigmen yang menentukan warna kulit seseorang (21).


23

2.7 Zona Hambat Bakteri

Zona bening sekitar cakram merupakan petunjuk kepekaan bakteri

terhadap bahan antibakteri yang digunakan sebagai bahan uji dan dinyatakan

dengan luas zona hambat. Zona hambat yang terbentuk disekitar cakram kertas

saring diukur diameter vertical dan diameter horizontal dengan satuan mm

penggunaan jangka sorong.

DV

DH

DC

Gambar 2.5. Pengukuran Diameter Zona Hambat (22)

Keterangan
Dv : Diameter vertical
Dh : Diameter horizontal
Dc : Diameter cakram
Diameter zona hambat diukur dengan rumus :
( DV −D C )+(D H −DC )
2

2.8 Gel

Menurut “Farmakope Indonesia edisi IV” gel kadang-kadang disebut

sebagai jeli, merupakan sistem semi padat terdiri dari suspensi yang dibuat dari

partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang besar, terpenetrasi oleh
24

suatu cairan. Jika massa gel terdiri dari dari jaringan partikel kecil yang terpisah,

gel digolongkan sebagai system dua fase. Dalam dua fase, jika ukuran partikel

dari fase terdirfersi relative besar, massa gel kadang-kadang dinyatakan sebagai

magma (misalnya magma bentonit). Baik gel maupun magma dapat berupa

tiksotropik, membentuk semipadat jika dibiarkan dan menjadi cair pada

pengocokan. Sediaan harus dikocok dulu sebelum digunakan untuk menjamin

homogenitas (23).

Gel fase tunggal terdiri dari makromolekul organik yang tersebar serta

sama dalam suatu cairan sedemikian hingga tidak terlihat adanya ikatan antara

moleku makro yang terdispersi dan cairan. Gel fase tunggal dapat dibuat dapat

dibuat dari makromolekul sintetik (misalnya karbomer) atau dari gom alam

(misalnya tragakan). Sediaan tragakan disebut juga musilago. Walaupun gel-gel

ini umunya mengandug air, etanol, dan minyak dapat digunakan sebagi fase

pembawa (23).

2.8.1 Basis Gel

Berdasarkan komposisinya, basis gel dapat dibedakan menjadi basis gel

liofobik dan basis gel liofilik.

1. Basis gel liofobik

Basis gel liofobik (tidak suka dengan pelarut) umumnya terdiri dari

partikel- partikel anorganik. Apabila ditambahkan kedalam fase pendispersi,

bilamana ada, hanya sedikit sekali interaksi terjadi antara kedua fase. Berbeda

dengan bahan liofilik, bahan liofobik tidak secara spontan menyebar, tetapi harus

dirangsang dengan prosedur yang khusus. Basis gel liofobik antara lain
25

protelatum, mineral oil/gel polythilen, plastibase, aluminium stearat, dan

carbowax. Basis gel hidrofobik biasanya terdiri dari paraffin cair dengan polietilen

atau minyak lemak dengan koloid silica. Minyak-minyak non polar seperti

minyak zaitun, paraffin cair, atau isoprofil miristat dapat membentuk basis gel

dengan penambahan bahan penebal colloidal silicon dioxide (aerosol). Basis gel

yang dibuat dari bahan ini menghasilkan gel yang transparan. Pembentuk gel

hidrofobik memberikan kontribusi dalam meningkatkan adhesi pembawa (24).

2. Basis gel liofilik

Basis gel liofilik umumnya adalah molekul-molekul organik yang besar

dan dapat larut atau disatukan dengan molekul dari fase pendispersi. Istilah

hidrofilik berarti suka pada pelarut. Daya tarik menarik atau tidak adanya daya

tarik menarik antara fase terdispersi dengan medium pendispersinya

mempengaruhi kemudahan pembuatan disperse koloid. Jika fase pendispersi

berinteraksi ini diistilahkan sebagai liofilik. Denganfase pendispersi. Pada

umumnya. Karena daya tarik menarik pada pelarut bahan-bahan liofilik kebalikan

dari tidak adanya daya tarik menarik dari bahan hidrofobik, sisitem koloid

hidrofilik biasanya lebih mudah untuk dibuat dan memiliki stabilitas yang lebih

besar. Basis gel hidrofilik antara lain bentonit, tragakan, derivate selulosa,

karbomer/karbopol, polivinil alkohol, alginate. Karbopol adalah polimer

carboyvinyl yang memiliki berat molekul yang besar. Karbopol relative dapat

membentuk gel pada konsentrasi yang rendah. Karbopol digunakan sebagian

dalam formulasi sediaan cair atau semisolid sebagai pensuspensi atau peningkat

viskositas. Karbopol biasanya digunakan dalam krim, gel, salep untuk preparat
26

mata, rektal, dan sediaan topikal.Keuntungan gel liofilik antara lain: daya

sebarnya pada kulit baik, efek dingin yang ditimbulkan akibat lambatnya

penguapan air pada kulit, tidak menghambat fungsi fisiologis kulit khususnya

respiration sensibilis oleh karena tidak melapisi permukaan kulit secara kedap dan

tidak menyumbat pori-pori kulit, mudah dicuci dengan air dan memungkinkan

pemakaian pada bagian tubuh yang berambut dan pelepasan obatnya baik (24).

2.8.2 Formulasi Standar Gel

Tabel 2.1. Formula Acuan Hand Sanitizer

HPMC 5g
Propilen glikon 15 ml
Nipagin 0.02 g
Pewangi 15 tetes
Aquades 100 ml

2.9 Hand Sanitizer

Sanitizer adalah disenfektan khusus yang mengurangi jumlah

kumankuman kontaminasi sampai tingkat yang aman bagi kesehatan masyarakat

(4). Hand sanitizer adalah cairan dengan berbagai produk yang sangat cepat

membunuh mikroorganisme yang ada di kulit tangan. Hand sanitizer banyak

digunakan karena alasan kepraktisan, mudah dibawa dan cepat digunakan tanpa

perlu menggunakan air. Hand sanitizer digunakan ketika dalam keadaan darurat

dimana kita tidak bisa menemukan air. Kelebihan ini diutarakan US FDA (Food

and Drug Administration) dapat membunuh kuman dalam waktu kurang lebih 30

detik (25).
42

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah penelitian

eskperimental laboratorium.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

3.2.1 Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada Laboratorium Farmaseutika dan

mikrobiologi Institut Kesehetan Helvetia

3.2.2 Waktu Penelitian

Waktu penelitian dilaksanakan selama 3 bulan, dilaksanakan pada bulan

Juli sampai dengan bulan September 2022.

3.3 Alat dan Bahan

3.3.1 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: timbangan digital,

lumpang dan alu, spatula, kertas saring, batang pengaduk, gelas ukur, beaker

glass, erlenmeyer, water bath, rotary evapotaror, cawan porselin, gelas arloji,

cawan petri, roll, sendok tanduk, pipet tetes, sudip, wadah gelas, aluminium foil,

blender, tissue, objek glass, kertas perkamen, pH meter, pot gel, tabung reaksi,rak

tabung, pipet volume, jangka sorong kapas, kassa, inkubatol, api bunsen,

autoclave, kawat ose, kertas cakram.


43

3.3.2 Bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan gel hand sanitizer ini

ekstrak bunga kembang sepatu, carbopol, TEA, gliserin, propilenglikol, metil

paraben, pengharum, aquadest, etanol, bakteri Pseudomonas aeruginosa,

staphylococcus aureus, median nutrien agar, CMC-Na, dibutil ftalat,

trientanolamin.

3.4 Prosedur Kerja

3.4.1 Pengumpulan Sampel

Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa

membandingkan tumbuhan daerah yang satu dengan daerah lain. Sampel yang

digunakan adalah bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis ) yang di ambil

dari Amplas Kota Medan Provinsi Sumatera Utara yang digunakan sebanyak 5 kg

3.4.2 Pembuatan Simplisia

. Bunga yang digunakan sebanyak 5 kg adalah keseluruhan dari Bunga

yang masih dalam keadaan baik dan segar, bewarna merah. Sampel bunga

kembang sepatu segar dibersihkan dari pengotor ditimbang sebagai berat basah,

selanjutnya dicuci dibawah air mengalir sampai bersih dan ditiriskan, kemudian

dilakukan perajangan lalu dikeringkan dengan cara diangin-anginkan dalam

ruangan yang tidak terpapar cahaya matahari langsung selama ± 2 minggu atau

sampai sampel kering seutuhnya yang ditandai dengan sampel mengalami

perubahan warna, mudah dipatah atau rapuh. Sampel ditimbang sebagai berat
44

simplisia kering, kemudian dihaluskan menggunakan blender sampai benar-benar

halus. (26)

Bobot susut pengeringan dapat di hitung dengan cara:

Berat Kering
Susut Pengeringan = x 100 %
Berat Basah

3.4.3 Uji Sikrining Fitokimia

Skrining fitokimia etanol daun kersen untuk memeriksa senyawa alkaloid,

flavonoid, tanin dan terpenoid dilakukan dengan cara:

a. Analisis Alkaloid

Disiapkan ekstrak dan 2 ml kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

Pada sampel tersebut ditambahkan 2 tetes pereaksi Dreagendroff.

Perubahan yang terjadi diamati setelah 30 menit, hasil uji dinyatakan

positif apabila dengan pereaksi Dreagendroff terbentuk warna jingga.

b. AnalisisTanin

Disiapkan ekstrak sebanyak 1 ml. Di tambahkan beberapa tetes larutan

besi (III) Klorida 1%. Perubahan yang terjadi diamati, terbentuknya warna

biru tua atau hitam kehijauan menunjukkan adanya senyawa tanin.

c. Analisis Flavonoid

Sejumlah sampel diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi.

Ditambahkan pada sampel berupa serbuk Magnesium 2 mg dan di berikan

3 tetes HCl pekat. Sampel dikocok dan diamati perubahan yang terjadi,

terbentuknya warna merah, kuning atau jingga pada larutan menunjukkan

adanya flavonoid.
45

d. Analisis Saponin

Sejumlah sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Air panas

ditambahkan pada sampel. Perubahan yang terjadi terhadap terbentuknya

busa diamati, reaksi positif jika busa stabil selama 30 menit dan tidak

hilang pada penambahan 1 tetes HCl 2 N.

e. Analisis Steroid

Sejumlah sampel diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Sampel

ditambahkan 2 tetes larutan CHCl3. Ditambahkan 3 tetes pereaksi

Lieberman Burchard. Perubahan pada sampel diamati, terbentuknya warna

merah pada larutan pertama kali kemudian berubah menjadi biru dan hijau

menunjukkan reaksi positif.

f. Analisis Triterpenoid

Sejumlah sampel diambil dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Sampel

ditambahkan 2 tetes larutan CHCl3. Ditambahkan 3 tetes pereaksi

Lieberman Burchard. Perubahan pada sampel diamati, reaksi posiitif jika

terbentuknya warna merah ungu (26)

3.4.4 Karakteristik Simplisia

Pemeriksaan karakterisik simplisia meliputi penetapan kadar air,

penetapan kadar sari larut dalam air, penetapan sari larut dalam etanol, penetapan

kadar abu total dan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam.

a. Uji Mikroskopik

Simplisia yang diberikan berupa serbuk simplisia daun kembang sepatu

(hibiscus rosa-sinensis L). dilakukan dengan cara meletakkan serbuk


46

simplisia daun kembang sepatu (hibiscus rosa-sinensis L) di atas objek

glass yang ditetesi kloralhidrat diamati di bawah mikroskop untuk melihat

fragmen pengenal dalam bentuk sel, isi sel atau jaringan dari daun

kembang sepatu (hibiscus rosa-sinensis L) (27)

b. Penetapan Kadar Air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode gravimetri. Botol timbang,

oven, dan timbangan. Cara penetapannya, yaitu : Timbang krus porselin

yang telah dipijar terlebih dahulu di dalam oven, masukkan lebih kurang

1-5 gram serbuk simplisia yang telah ditimbang dengan seksama

dimasukkan kedalam krus porselin yang telah dipanaskan pada suhu 105º

dan didinginkan. Dipanaskan selama 3 jam hingga bobot tetap kemudian,

didinginkan dan ditimbang. Dimasukkan kembali kedalam oven selama 1

jam, didinginkan dan ditimbang (27)

c. Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml

air-kloroform P dalam labu tersumbat sambil dikocok sesekali selama 6

jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Hasil maserasi kemudian

disaring dan filtrat sebanyak 20 ml diuapkan sampai kering dalam cawan

penguap berdasar rata yang telah dikeringkan dan ditara. Panaskan pada

suhu 105ºC sampai bobot tetap (27).

d. Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol

Sebanyak 5 gram serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml

etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam
47

pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Hasil maserasi kemudian

disaring dan filtrat sebanyak 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam

cawan penguap berdasar rata yang telah dikeringkan dan ditara. Panaskan

pada suhu 105 ºC sampai bobot tetap (27).

e. Penetapan Kadar Abu Total

Sebanyak 2-3 gram serbuk yang telah digerus, dimasukkan dalam krus

porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus porselin

dipijar perlahan-lahan sampai arang habis. Pemijaran dilakukan pada suhu

500-600 º C hingga berubah menjadi abu berwarna putih abu-abu (27).

f. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam

Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total, didihkan dalam 25 ml

asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam

disaring dan dikumpulkan dengan menggunakan kertas saring bebas abu ,

cuci dengan air panas, lalu dipindahkan kedalam krus dan dilakukan

pemijaran sampai bobot tetap (27).

Parameternya MMI
Penetapan Kadar Air ≤10 %
Penatapan Kadar Abu Total ≤9 %
Kadar Sari Larut dalam air ≥16 %
Kadar sari larut dalam etanol ≥6%
Kadar abu tidak larut asam ≤1 %

3.4.5 Pembuatan Ekstrak

Ekstraksi dilakukan dengan metode cara maserasi dengan perbandingan

pelarut 1:10 etanol 70%. Simplisia yang telah berbentuk serbuk kering ditimbang

sebanyak 500 gram dimasukan dalam sebuah bejana, kemudian di tambahkan


48

pelarut etanol sebanyak 3750 ml, tutup biarkan selama 5 hari terlindung dari

cahaya sesekali diaduk, diperas dan disaring dengan menggunakan kertas saring

filtrat 1 dan ampas, Kemudian ampas di rendam kembali dengan 1.250 ml etanol

kedalam bejana tertutup biarkan selama 2 hari di tempat sejuk terlindung dari

cahaya dan sesekali aduk, kemudian disaring menggunakan kertas saring dan

diperoleh filtrat 2 dan ampas, Selanjutnya satukan filtrat 1 dan 2 pekatkan di

rotary evaporator sampai di peroleh ekstrak kental (27).

3.4.6 Karakteristik Ekstrak

Karakteristik ekstrak etanol daun kersen (Muntingia calabura L) dilakukan

melalui penetapan kadar air, penetapan kadar abu total, serta penetapan kadar sari

larut air dan sari larut etanol.

a. Penetapan Kadar Air

Cawan porselen ditimbang beratnya hingga konstan, kemudiandimasukkan

ekstrak daun kersen (1 g) ke dalam cawan. Ekstrak dikeringkandi dalam oven

selama 3 jam pada suhu 105 ̊C. Ekstrak dan cawandidinginkan di dalam

desikator kemudian ditimbanghinggakonstan dan dihitung kadar air (WHO,

1998).

b. Penetapan Kadar Abu Total

Krus silikat ditimbang beratnya sampai konstan, kemudiandimasukkan ekstrak

daun kersen (1 g) dan dipanaskan. Pemanasan dilakukandengan cara

meningkatkan temperatur secara bertahap (selama 3jam pada suhu 600 ̊C)

sampai sampel menjadi abu(berwarnaputih). Abu didinginkan dalam desikator


49

selama 30 menit danditimbang sampai bobot konstan. Kadar abu total

dihitungterhadap berat bahan uji, dinyatakan dalam % b/b (Ditjen POM,2009).

c. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam

Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total, didihkan dalam 25 ml

asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam

disaring dan dikumpulkan dengan menggunakan kertas saring bebas abu , cuci

dengan air panas, lalu dipindahkan kedalam krus dan dilakukan pemijaran

sampai bobot tetap

3.5 Prosedur Pembuatan Gel Hand sanitizer

3.5.1 Formulasi Sediaan Gel

Adapun formula yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada

tabel 3.1.

Tabel 3.1. Rancangan Formula Gel Hand Sanitizer Ekstrak Etanol Bunga
Kembang Sepatu

Formula
No Bahan Kontro Fungsi
F0 F1 F2 F3
l Positif Bahan
1 Ekstrak Etanol 0 10 20 30 Antis Zat aktif
Bunga
Kembang
Sepatu
2 HPMC 1g 1g 1g 1g - Pengikat
3 Propilen 15 ml 15 ml 15 ml 15 ml - Pengawet
Glikol
4 Nipagin 0,02 g 0,02 g 0,02 g 0,02 g - Pengawet
5 Parfum 15 tetes 15 tetes 15 tetes 15 tetes - Penwangi
6 Aquades ad 50 ml 50 ml 50 ml 50 ml - pelarut
Keterangan :
F0 = Basis gel (blanko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (30%)
50

Cara Pembuatan :

Diawali dengan menaburkan HPMC di dalam lumpang yang berisi

aquades selama 15–30 menit hingga mengembang digerus sampai terbentuk dasar

gel (massa I), kemudian nipagin dilarutkan dengan propilenglikol (massa II) lalu

ditambahkan ekstrak bunga kembang sepatu dan di campur dengan (massa I),

diaduk tambahkan bahan pewangi kemudian diaduk secara homogen.

Sediaan gel dibuat ke dalam 4 sediaan, yaitu satu sediaan blanko (dasar

gel) dan sediaan yang mengandung ekstrak bunga kembang sepatu. Konsentrasi

ekstrak daun belimbing wuluh yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: 10%,

20%, dan 30%.

3.6 Sterilisasi Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan dalam suatu uji aktivitas antibakteri

disterilkan terlebih dahulu sebelum digunakan dalam percobaan. Media

pertumbuhan disterilkan di autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit dan alat-

alat gelas yang digunakan disterilkan di oven pada suhu 160-170 oC selama 1-2

jam. Jarum ose dan pinset disterilkan dengan cara dibakar dengan nyala bunsen

(28).

3.7 Peremajaan Bakteri

Peremajaan bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus

dilakukan dengan mengambil satu jarum ose biakan murni kemudian digoreskan

dalam biakan nutrient agar dengan permukaan miring, kemudian diinkubasi pada

suhu 37°C selama 24 jam (23).


51

3.8 Pengujian Aktivitas Antibakteri

3.8.1 Pembuatan Media Nutrient agar (NA)

Komposisi :

Lab-lamco powder 1 g
Yeast extract 2g
Peptone 5g
Sodium Chloride 5g
Agar 15 g
Aquades ad 1 liter

Cara Pembuatan :

Sebanyak 28 g nutrient agar dilarutkan dalam air suling steril ad 1000 ml

kemudian dipanaskan hingga semua larut, dalam keadaan panas larutan tersebut

kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer. Disterilkan di autoklaf pada suhu 121°C

selama 15 menit (29).

3.8.2 Pembuatan Media Muller Hinton Agar (MHA)

Komposisi :

Casien acid hydrolisate 17,5 g


Starch 1,5 g
Agar 17 g
Aquades ad 1 liter

Cara Pembuatan :

Sebanyak 36 g nutrient agar ditimbang, kemudian disuspensikan ke dalam

air suling ad 1000 ml, lalu dipanaskan sampai bahan larut sempurna, lalu

disterilkan di dalam autoklaf pada suhu 121 oC selama 15 menit (30).


52

3.8.3 Pembuatan Media Agar Miring

10 ml media nutrient agar (NA) yang telah dimasak dimasukkan ke dalam

tabung reaksi, ditutup dan di bungkus lalu disterilkan di dalam autoklaf selama 15

menit pada suhu 121°C Kemudian tabung yang berisi agar diletakkan pada

kemiringan 30-45°C. Diperhatikan bahwa agar tidak menyentuh tutup tabung.

Agar dibiarkan menjadi dingin dan keras (28)

3.8.4 Suspensi Standar Mc Farland 0,5

Komposisi :

Larutan BaCl21,175% b/v 0,5 ml

Larutan H2SO4 1% v/v 99,5 ml

Cara Pembuatan :

Kedua larutan dicampurkan dalam tabung reaksi steril, dikocok sampai

homogen dan dengan kekeruhan suspensi ditutup. Apabila kekeruhan hasil

suspensi bakteri sama dengan kekeruhan suspensi standar berarti konsentrasi

bakteri 108 CFU/ml (31).

3.8.5 Pembuatan Suspensi Bakteri

Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), satu koloni bakteri

diambil dengan menggunakan jarum ose steril. Koloni bakteri tersebut

disuspesikan kedalam tabung reaksi yang berisi 10 ml larutan NaCl 0.9% hingga

diperoleh kekeruhan yang sama dengan standar kekeruhan larutan Mc.Farland.

(32).
53

3.8.6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu


dengan Berbagai Konsentrasi

Ekstrak bunga kembang sepatu ditimbang 5 g kemudian dilarutkan dengan

pelarut etanol 96% hingga 10 ml maka konsentrasi ekstrak adalah 500 mg/ml.

Larutan tersebut diencerkan kembali dengan pelarut etanol 96% sehingga didapat

konsentrasi 10%, 20% dan 30%

3.8.7 Pengujian Aktivitas Antibakteri Esktrak Etanol Bunga Kembang


Sepatu.

Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), sebanyak 0,1 ml

suspensi inokulum bakteri Pseudomonas aeruginosa dimasukkan ke dalam cawan

petri steril, kemudian tuangkan 15 ml media MHA ke dalam cawan, lalu

dihomogenkan dan didiamkan pada suhu kamar hingga media memadat. Cakram

kertas yang telah dicelupkan dalam larutan uji dengan berbagai perbandingan

diletakkan pada permukaan media sedangkan cakram yang dicelupkan ke dalam

etanol 96% digunakan sebagai kontrol. Cawan didiamkan pada suhu kamar

selama 10-15 menit, kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam,

kemudian diameter zona hambat di sekitar cakram diukur dengan menggunakan

jangka sorong. Pengujian dilakukan dengan tiga kali pengulangan (triplo).

Perlakuan yang sama dilakukan terhadap inokulum bakteri Pseudomonas

aeruginosa dan Staphylococcus aureus (32).

3.8.8 Pengujian Antibakteri Sediaan Hand sanitizer

Dilakukan dalam Biological Safety Cabinet (BSC), sebanyak 0,1 ml

suspensi inokulum bakteri Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus

dimasukkan ke dalam cawan petri steril, kemudian dituang 15 ml media MHA ke


54

dalam cawan, lalu dihomogenkan dan didiamkan pada suhu kamar hingga media

memadat. Cakram kertas yang telah dicelupkan dalam larutan sediaan gel dengan

konsentrasi 10%, 20%, 30% diletakkan pada permukaan media sedangkan cakram

yang dicelupkan ke dalam dasar gel digunakan sebagai blangko. Cawan

didiamkan pada suhu kamar selama 10-15 menit, kemudian diinkubasi pada suhu

37°C selama 18-24 jam, kemudian diameter zona hambat di sekitar cakram diukur

dengan menggunakan jangka sorong. Pengujian dilakukan dengan tiga kali

pengulangan (triplo). Perlakuan yang sama dilakukan terhadap inokulum bakteri

Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus.(32)

3.9 Evaluasi Terhadap Sediaan

Ada beberapa uji evaluasi terhadap sediaan gel hand sanitizer

3.9.1 Pengamatan Organoleptik

Sediaan gel dievaluasi secara fisik meliputi bau, warna, konsistensi selama

12 minggu. Pengamatan ini dilakukan pada gel antiseptik tangan (hand sanitizer)

yang disimpan pada suhu kamar.

3.9.2 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan

Sejumlah sediaan jika dioleskan pada sekeping kaca, sediaan Sejumlah

harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar

3.9.3 Penentuan pH

Penentuan pH sediaan dilakukan dengan menggunakan alat PHmeter.

Cara: Alat terlebih dahulu dikalibrasi dengan menggunakan larutan dapar standar

netral (pH 7,01) dan larutan dapar pH asam (pH 4,01) hingga alat menunjukkan

harga pH tersebut. Kemudian elektroda dicuci dengan air suling,lalu dikeringkan


55

dengan tissue. Sampel dibuat dalam konsentrasi 1% yaitu ditimbang 0,25 gram

sediaan dan dilarutkan dalam 25 ml air suling. Kemudiaan elektroda dicelupkan

dalam larutan tersebut. Dibiarkan alat menunjukkan harga pH sampai konstan.

Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan pH 6 - 6,5sediaan

3.9.4 Uji Viskositas

Pengukuran viskositas dilakukan dengan cara sediaan gel antiseptik

dimasukkan ke dalam beker gelas 100 ml dan dipilih nomor spindle yang sesuai.

Pengukuran ini dilakukan dengan tiga kali pengulangan dengan menggunakan

viskometer Brook field DV-E

3.9.5 Uji Iritasi

Uji iritasi dilakukan dengan cara uji tempel terbuka dengan mengoleskan

sediaan terhadap sukarelawan pada bagian belakang telinga, dibiarkan terbuka dan

diamati apa yang terjadi. Uji ini dilakukan selama 24 jam. Reaksi iritasi positif

ditandai dengan kemerahan, gatal atau bengkak pada bagian belakang telinga yang

diberi perlakuan

3.10 Pengukuran Zona Hambat

Pengujian yang efektif terhadap antibakteri dilakukan menggunkan

metode dengan beberapa konsentrasi, konsentrasi yang digunakan yaitu: 10%,

20%, dan 30%. Pengujian dilakukan dengan menyiapkan suspensi bakteri uji.

Kemudian menyiapkan media MHA yang akan digunakan. Sebanyak 10 mL

medium MHA dimasukkan ke dalam cawan petri lalu dibiarkan memadat. (26)

Setelah memadat, diambil 1 ose bakteri yang telah diukur berdasarkan

standar Mc.Farland 108CFU/ml, kemudian dioles menggunakan cotton bud secara


56

merata pada permukaan media MHA yang sudah dipadatkan. Kemudian Blank

disk yang telah diberi ekstrak menggunakan mikropipet dengan konsentrasi yang

telah ditentukan dimasukkan ke dalam permukaan media dengan jarak disk satu

dengan yang lainnya 1-2 cm dipinggir cawan petri. Sebagai kontrol positif (+)

yaitu nuvo dan aquadest sebagai kontrol negatif (-) (27).

Kemudian diinkubasi pada suhu 44°C selama 1x24 jam. Selanjutnya di

amati zona hambat yang terbentuk dan diukur diameter zona hambatnya dengan

jangka sorong. Lakukan 3 kali ulangan pada setiap konsentrasi ekstrak.

Pengukuran diameter hambatan dapat dilakukan dengan jangka sorong dengan

menggunakan rumus :

d 1+ d 2
R(%)
2

Keterangan :
R = Daya Hambat (mm)
D1= Diameter Zona Hambat terpanjang (mm)
D2 = Diameter Zona Hambat Terpendek (mm)

3.11 Analisis Data

Analisis data yang diperoleh dari hasil penelitian di laboratorium di olah

dengan statistik menggunakan uji ANOVA (Analysis Of Varian) dengan tingkat

kepercayaan 95% untuk mengetahui pengaruh konsentrasi ekstrak etanol bunga

kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis) terhadap keberadaan bakteri

Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus.


57

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Determinasi

Indentifikasi sampel dilakukan di Laboratorium Hebarium Medanese

(MEDA) Departemen Biologi FMIPA. Universitas Sumatera Utara. Hasil

Menunjukkan sampel yang digunakan adalah bunga kembang sepatu (Hibiscus

Rosa-Sinensis) sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Sub divisi : Angiospermae

Class : Dicotyledonae

Ordo : Malvales

Family : Malvaceae

Genus : Hibiscus

Species : Hibiscus rosa-sinensis L

4.2 Hasil Ekstraksi Bunga Kembang Sepatu

Bunga kembang sepatu (Hibiscus Rosa-Sinensis) dilakukan ekstraksi

dengan metode maserasi menggunkan pelarut etanol 96% direndam serbuk

simplisia sebanyak 250 g dengan menggunakan etanol sebanyak 2500 ml selama

hari kemudian di saring, dan didapatkan filtrate dari maserasi. Setelah itu

dilakukan penguapan pelarut dengan alat rotary evapotator sampai didapatkan


58

ekstrak kental dari bunga kembang sepatu sebanyak 35 gram dengan rendemen

ekstrak 14%

4.3 Hasil Karakteristik Simplisa dan Ekstrak

Tabel 4.1 Hasil Karakteristik Simplisia

No Karakterisasi Kadar Simplisia Ketentuan


(%) Farmakope (%)
1. Kadar air 3,5 <10
2. Sari larut dalam air 2,6 >1,5
3. Sari larut dalam etanol 12,3 >0,5
4. Abu total 3,5 <4,6
5. Abu tidak larut dalam asam 0,4 <0,9

Penetapan kadar air pada simplisia dilakukan untuk mengetahui jumlah air

yang terkandung di dalam simplisia. Hasil yang diproleh dari penetapan kadar air

sebesar 3,5%. Kadar sari larut dalam air bertujuan untuk mengetahui kadar

senyawa yang dapat terlarut di dalam air. Dari tabel diatas dapat diketahui bahwa

kadar sari larut dalam air pada Bunga kembang sepatusebesar 2,6%.

Kadar sari larut dalam etanol pada Bunga kembang sepatudimana hasil

pengujian menyatakan dalam simplisia tersebut kadar sari larut dalam etanol

sebesar 12,3%. Begitupun kadar abu total simplisia rambut jagung manis, dimana

hasil pengujian menyatakan dalam simplisia tersebut terkandung 3,5%. Kadar abu

tidak larut dalam asam dari tabel diatas dapat diketahui sebesar 0,4%.

Tabel 4.2 Hasil Karakteristik Ekstrak

No Kadar Ekstrak Ketentuan


Parameter (%) Farmakope
(%)
1. Kadar air 3 < 6,8
2. Abu total 6,7 < 8,4
3. Abu tidak larut dalam asam 4,8 < 5,1
59

Berdasarkan Tabel 4.2 hasil penetapan kadar air ekstrak Bunga kembang

sepatuyang diproleh sebesar 3%. Kadar air Bunga kembang sepatutelah

memenuhi persyaratan standar karena memiliki kadar air tidak lebih dari 6,8%.

Hasil penetapan kadar abu total yang diproleh sebesar 6,7%. Nilai tersebut sesuai

dengan ketentuan yang ditetapkan yaitu tidak lebih dari 8,4%. Kadar abu tidak

larut dalam asam ekstrak bunga kembang sepatutidak lebih dari 5,1%. Hasil

pengujian yang diperoleh yaitu 4,8%.

4.4 Hasil Mikroskopik

Dalam pengujian mikroskopik terdapat rambut penutup, stomata, rambut

kelenjar, stomata, epidermis atas dan epidermis bawah.

4.5 Hasil Skirning Fitokimia Simplisia dan Ekstrak

Tabel 4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Pemeriksaan Hasil
Senyawa Simplisia Ekstrak
Alkaloid + +
Flavonoid - -
Tanin + +
Saponin + +
Steroid + +
Terpenoid + +

Keterangan :
(-) : Tidak Terdapat
(+) : Terdapat

4.6 Hasil Pembuatan Sediaan Hand Sanitizer Bunga Kembang Sepatu

Sediaan hand sanitizer dengan menggunakan beberapa formula yaitu

HPMC nipagin propilenglikol dengan zat aktif ekstrak etanol bunga kembang
60

sepatu. Sediaan hand sanitizer dibuat dengan konsentrasi masing- masing 10%,

20% dan 30%.

4.7 Hasil Evaluasi Mutu Sediaan

Evaluasi mutu sediaan dilakukan dengan beberapa uji diantaranya uji

organoleptis, uji homogenitas, uji viskosititas, uji iritasi dan uji pH.

4.7.1 Hasil Pengujian Organoleptis

Tabel 4.4 Hasil Uji Organoleptis

Formul
a Pengamatan Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3
F0 Bentuk Gel Gel Gel
Warna Bening Bening Bening
Bau Vanila Vanila Vanila
F1 Bentuk Gel Gel Gel
Warna Merah Merah Merah
Bau Khas Khas Khas
F2 Bentuk Gel Gel Gel
Warna Merah Merah Merah
Bau Khas Khas Khas
F3 Bentuk Gel Gel Gel
Warna Merah bata Merah bata Merah bata
Bau Khas Khas Khas

Keterangan :
F0 = Basis gel (blanko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (30%)

Uji organoleptis berupa pengamatan secara visual yang meliputi warna,

bentuk dan bau (aroma). Hasil dari pengamatan sediaan hand sanitizer warna

merah, bentuk gel dan bau (aroma) khas.untuk F1 dan F2 pada F3 warnanya
61

merah bata karena jumlah ekstrak yang terkandung, keempat sediaan ini stabil

dalam pengujian organoleptis.

4.7.2 Hasil Pengujian Homogenitas

Tabel 4.5 Hasil Uji Homogenitas

Formula Pengujian Homogenitas


F0 Homogenitas
F1 Homogenitas
F2 Homogenitas
F3 Homogenitas
Keterangan :
F0 = Basis gel (blanko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (30%)
Uji homogenitas bertujuan untuk melihat dan mengetahui semua bahan

dari sediaan hand sanitizer ekstrak etanol bunga kembang sepatu tersebar atau

tercampur secara merata, maka sediaan hand sanitizer dikatakan homogeny.

4.7.3 Hasil Pengujia pH

Tabel 4.6 Hasil Uji pH

Pengujian pH Sediaan
Formula Rata-rata
Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3
F0 6.4 6.5 6.6 6.5
F1 6.3 6.3 6.2 6.3
F2 6.2 6.2 6.1 6.2
F3 6.2 6.1 5.9 6.1
Keterangan :
F0 = Basis gel (blanko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (30%)
62

Pengujian pH sediaan hand sanitizer dengan pH normal 4,5-6,5.

Berdasarkan hasil yang diperoleh dengan nilai rata- rata pH F0: 6.5, F1: 6.3, F2:

6.2 dan F3: 6.1. Dari hasil yang diperoleh dikatakan memenuhi persyaratan.

4.7.4 Hasil Pengujia Iritasi

Tabel 4.7 Hasil Uji Iritasi

Sukarelawan
Formula Pengamatan
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Kemerahan - - - - - - - - - - - -
F0 Bengkak - - - - - - - - - - - -
Gatal - - - - - - - - - - - -
Kemerahan - - - - - - - - - - - -
F1 Bengkak - - - - - - - - - - - -
Gatal - - - - - - - - - - - -
Kemerahan - - - - - - - - - - - -
F2 Bengkak - - - - - - - - - - - -
Gatal - - - - - - - - - - - -
Kemerahan - - - - - - - - - - - -
F3 Bengkak - - - - - - - - - - - -
Gatal - - - - - - - - - - - -

Keterangan:
(-) : Tidak Iritasi
(+) : Iritasi

Berdasarkan hasil uji iritasi pada 12 sukarelawan yang dilakukan dengan

cara mengoleskan sediaan pada bagian tangan, menunjukkan bahwa semua

sukarelawan memberikan hasil negatif terhadap reaksi iritasi. Adapun parameter

yang diamati yaitu kulit merah, gatal-gatal dan pembengkakan. Dari hasil uji

iritasi tersebut dapat disimpulkan bahwa sediaan spray hand sanitizer ekstrak
63

etanol bunga kembang sepatu dengan konsentrasi 10%, 20% dan 30% aman untuk

digunakan.

4.7.5 Hasil Pengujian Viskositas

Tabel 4.8 Hasil Uji Viskositas

Viskositas
Keterangan Vikositas
Formula Sebelum Sesudah cycling Memenuhi syarat
cycling test test 2000-50000 cPs

F0 15.503 7.578 Memenuhi syarat


F1 8.46 5.668 Memenuhi syarat
F2 6.018 5.574 Memenuhi syarat
F3 4.909 3.512 Memenuhi syarat

Keterangan :
F0 = Basis gel (blanko)
F1 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi gel ekstrak bunga kembang sepatu (30%)

Pengujian viskositas menggunakan alat viscometer spindel 4, kecepatan 12

rpm dengan waktu 10 second. Berdasarkan hasil yang diperoleh dari uji viskositas

dikatakan memenuhi persyaratan.

4.8 Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Pseudomonas aeruginosa dan


Staphylococcus aureus.

Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol bunga kembang sepatu dalam

menghambat pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa dan bakteri

Staphylococcus aureusdilakukan dengan metode difusi agar dengan menggunakan


64

kertas cakram

Tabel 4.9 Zona hambat pada bakteri Pseudomonas aeruginosa

Formula Pengulanga Pengulangan Pengulangan Rata- Standar


nI II III rata Deviasi
Kontrol Positif 21,6 22,95 22,6 22,38 0,70
Kontrol Negatif 0 0 0 0,00 0,00
F1 (10%) 14,15 14,05 13,95 14,05 0,10
F2 (15%) 17,4 16,8 15,35 16,52 1,05
F3 (20%) 19,9 17,95 16,15 18,00 1,88

Keterangan :
F1 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (30%)

Hasil uji aktivitas antibakteri Pseudomonas aeruginosa menunjukkan

bahwaekstrak etanol Bunga kembang sepatu dapat menghambat pertumbuhan

bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan konsentrasi 10%, 20% dan 30% masing-

masing memiliki rata-rata zona hambat terhadap bakteri Pseudomonas

aeruginosa. Diameter zona bening rata-rata yang terbentuk disekitar kertas

cakram pada masing-masing konsentrasi 10% diameter rata-rata zona hambat

sekitar 14,05 mm, konsentrasi 20% dengan menghasilkan diameter rata-rata zona

hambat 16,52 mm, konsentrasi 30% dengan menghasilkan rata-rata zona hambat

18,00 mm. masing-masing konsentrasi memiliki respon hambatan yang


65

dikategorikan kuat.
66

Tabel 4.10 Zona hambat bakteri Staphylococcus aureus

Pengulanga Pengulangan Pengulanga Rata- Standar


Formula
nI II n III rata Deviasi
Kontrol Positif 21,75 21,85 22,7 22,1 0,52
Kontrol Negatif 0 0 0 0 0,00
F1 (10%) 14,05 14,65 14,55 14,42 0,32
F2 (15%) 17,55 17,35 15,55 16,82 1,10
F3 (20%) 18,6 18,85 17,4 18,28 0,78

Keterangan :
F1 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (10%)
F2 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (20%)
F3 = Konsentrasi ekstrak bunga kembang sepatu (30%)

Hasil uji aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus menunjukkan bahwa

ekstrak etanol Bunga kembang sepatu dapat menghambat pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureusdengan konsentrasi 10%, 20% dan 30% masing-masing

memiliki rata-rata zona hambat terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Diameter

zona bening rata-rata yang terbentuk disekitar kertas cakram pada masing-masing

konsentrasi 10% diameter rata-rata zona hambat sekitar 14,42 mm, konsentrasi

20% dengan menghasilkan diameter rata-rata zona hambat 16,82 mm, konsentrasi

30% dengan menghasilkan rata-rata zona hambat 18,28 mm. masing-masing

konsentrasi memiliki respon hambatan yang dikategorikan kuat.


67

4.9 Hasil Pengukuran Bakteri Sediaan Gel Hand Sanitizer Pseudomonas


aeruginosa dan Staphylococcus aureus.

Tabel 4. 11 Hasil Uji Sediaan Gel Hand Sanitizer Terhadap Bakteri


Pseudomonas aeruginosa

Pengulangan Pengulanga Pengulangan Rata- Standar


Formula
I n II III rata Deviasi
Kontrol Positif 20,15 17 18,7 18,62 1,58
Kontrol Negatif 0 0 0 0,00 0,00
F1 (10%) 12 12,6 11,85 12,15 0,40
F2 (20%) 13,2 13,15 14 13,45 0,48
F3 (30%) 14,85 15,35 16,6 15,60 0,90

Hasil uji aktivitas antibakteri Pseudomonas aeruginosa menunjukkan

bahwa sediaan spray hand sanitizer Bunga kembang sepatudapat menghambat

pertumbuhan bakteri Pseudomonas aeruginosa dengan konsentrasi 10%, 20% dan

30% masing-masing memiliki rata-rata zona hambat terhadap bakteri

Pseudomonas aeruginosa. Diameter zona bening rata-rata yang terbentuk

disekitar kertas cakram pada masing-masing konsentrasi 10% diameter rata-rata

zona hambat sekitar 12,15 mm, konsentrasi 20% dengan menghasilkan diameter

rata-rata zona hambat 13,45 mm, konsentrasi 30% dengan menghasilkan rata-rata

zona hambat 115,60 mm.

Tabel 4.12 Hasil Uji Sediaan Gel Hand Sanitizer Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus

Formula Pengulanga Pengulangan Pengulanga Rata- Standar


nI II n III rata Deviasi
Kontrol Positif 18,7 20 18,55 19,08 0,80
Kontrol Negatif 0 0 0 0,00 0,00
F1 (10%) 14,45 8,6 11,8 11,62 2,93
F2 (20%) 14 14,3 13,6 13,97 0,35
F3 (30%) 16,05 16,9 14,25 15,73 1,35
68

Hasil uji aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus menunjukkan bahwa

sediaan spray hand sanitizer Bunga kembang sepatudapat menghambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi 10%,20% dan

20% masing-masing memiliki rata-rata zona hambat terhadap bakteri

Staphylococcus aureus. Diameter zona bening rata-rata yang terbentuk disekitar

kertas cakram pada masing-masing konsentrasi 10% diameter rata-rata zona

hambat sekitar 11,62 mm, konsentrasi 20% dengan menghasilkan diameter rata-

rata zona hambat 13,19 mm, konsentrasi 30% dengan menghasilkan rata-rata zona

hambat 15,75 mm. masing-masing konsentrasi memiliki respon hambatan yang

dikategorikan kuat.

4.10 Analisis Data

Tabel 4.13 Hasil Uji Statistik Ekstrak Terhadap Bakteri Pseudomonas


aeruginosa dan Staphylococcus aureus

Kelompok Normalitas Homogenitas Anova


Bakteri Pseudomonas aeruginosa
F1 (10%) 1
F2 (15%) 551 >0,05 0
F3 (20%) 950
Bakteri Staphylococcus aureus
F1 (10%) 289
F2 (15%) 174 >0,05 0
F3 (20%) 309

Berdasarkan tabel 4.13 diatas diketahui normalitas diproleh nilai sig.

disetiap konsentrasi >0,05yang berarti terdistribusi dengan normal. Berdasarkan

tabel 4.16 diatas diketahui normalitas diproleh nilai sig. disetiap konsentrasi

>0,005 yang berarti terdistribusi dengan normal. Sehingga dapat disimpulkan nilai

rata-rata zona hambat menunjukkan adanya perbedaan secara signifikan.Ini


69

artinya konsentrasi berpengaruh secara signifikan terhadap zona hambat yang

terbentuk.

Tabel 4.14 Hasil Uji Statistik Sediaan gel hand sanitizer Terhadap Bakteri
Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus
Kelompok Normalitas Homogenitas Anova
Bakteri Pseudomonas aeruginosa
F1 (10%) 363
F2 (15%) 100 >0,05 0
F3 (20%) 537
Bakteri Staphylococcus aureus
F1 (10%) 896
F2 (15%) 162 >0,05 0
F3 (20%) 255

Berdasarkan tabel 4.16.diatas diketahui normalitas diproleh nilai sig.

disetiap konsentrasi >0,005 yang berarti terdistribusi dengan normal.Hasil uji

ANOVA menunjukkan nilai sig. 0,000 sehingga dapat disimpulkan nilai rata-rata

zona hambat menunjukkan adanya perbedaan secara signifikan.Ini artinya

konsentrasi berpengaruh secara signifikan terhadap zona hambat yang terbentuk.

Berdasarkan tabel 4.17.diatas diketahui normalitas diproleh nilai sig. disetiap

konsentrasi >0,005yang berarti terdistribusi dengan normal. Hasil uji ANOVA

menunjukkan nilai sig. 0,000 sehingga dapat disimpulkan nilai rata-rata zona

hambat menunjukkan adanya perbedaan secara signifikan. Ini artinya konsentrasi

berpengaruh secara signifikan terhadap zona hambat yang terbentuk


70

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian, dapat diperoleh kesimpulan sebagai berikut :

a. Gel Hand sanitizer ekstrak etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus Rosa-

Sinensis)mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Pseudomonas

aeruginosa dan bakteri Staphylococcus aureus.

b. Konsentrasi yang paling baik digunakan dalam menghambat bakteri

Pseudomonas aeruginosa dan bakteri Staphylococcus aureus yaitu dengan

menggunakan konsentrasi 30%

5.2 Saran

Disarankan pada peneliti selanjutnya melakukan penelitian dengan ekstrak

etanol bunga kembang sepatu (Hibiscus Rosa-Sinensis) dalam bentuk sediaan

spray hand sanitizer.


DAFTAR PUSTAKA

1. dr. Setiawan Dalimarta. 1001 Resep Herbal. Cet. 1. Jakarta: Penebar


Swadaya,; 2008. 5-8 p.
2. Parengkuan H, Wowor VNS, Pangemanan DHC. Uji Daya Hambat Ekstrak
Bunga Kembang Sepatu (Hibiscus rosa-sinensis L.) terhadap Pertumbuhan
Bakteri Streptococcus mutans. e-GiGi. 2020;8(1):8–14.
3. Shu M. Formulasi Sediaan Hand sanitizer Dengan Bahan aktif Triklosan
0.5 % dan 1%. 2013;2(1):1–14.
4. Sartika Dewi Syaiful. Formulasi dan Uji Stabilitas Fisik Gel Ekstrak Etanol
Daun Kemangi (Ocimum sanctum L.) Sebagai Sediaan Hand Sanitizer.
Euphytica. 2016;18(2):22280.
5. Wijaya JI. Formulasi Sediaan Gel Hand Sanitizer dengan Bahan Aktif
Triklosan 1,5% dan 2%. Calyptra J Ilm Mhs Univ Surabaya. 2013;2(1):1–
14.
6. Rendeng EF, Kepel BJ, Manampiring AE. Uji anti mycobacterium ekstrak
bunga kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis L.) sebagai tumbuhan obat
anti tuberkulosis. J Biomedik Jbm. 2019;12(1):48–53.
7. Widayanti MA. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Bunga Sepatu
(Hibiscus rosa-sinensis L.) dan Bunga Sepatu Kuncup (Malvaviscus
arboreus Cav.) terhadap Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus
aureus. Kemamp Koneksi Mat (Tinjauan Terhadap Pendekatan
Pembelajaran Savi). 2016;
8. Titin Sulastri, Evi Fatmi Utami, En Purmafitrah. Uji Efek Infusa Bunga
Kembang Sepatu (Hibiscus rosa sinensis L.) Sebagai Antipiretik Pada
Mencit Putih Jantan Yang Diinduksi Vaksin DPT. J Farmasetis.
2018;7(Vol 7 No 1 (2018): Mei):12–8.
9. Herbarium Medanense (MEDA). In Universitas Sumatera Utara;
10. Kesehatan DKR dan KSRBP dan P. Inventaris Tanaman Obat Indonesia.
Jilid I. Jakarta.; 2000. 131-132 p.
11. Drs. H. Arief Hariana. Tumbuhan Obat & Khasiatnya. Cet. 5. Jakarta.:
Penebar Swadaya,; 2008. 33-38 p.
12. Bhaskar A. Phytochemical screening and in vitro antioxidant activities of
the ethanolic extract of Hibiscus rosa sinensis L. Sch Res Libr Ann Biol
Res. 2011;2(5):653–61.
13. Kementrian Kesehatan RI. Farmakope Herbal Indonesia. Edisi II. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia; 2017. 5-6 p.
14. Depkes RI. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. VI. Badan Penelitian dan
Pengembangan Kesehatan Tawangmangu, editor. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia; 2006.
15. Riwanti P, Izazih F, Hang. Journal of Pharmaceutical Care Anwar Medika
Artikel Penelitian Pengaruh Perbedaan Konsentrasi Etanol pada Kadar
Flavonoid Total Ekstrak Etanol 50,70 dan 96%. 2(2):82–95.
16. Radji M. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan
Kedokteran. Jakarta: Buku Kedokteran EGC.; 2011. 107, 118, 201-207,
72

295, p.
17. Wahyuni D. Buku Ajar Dasar Biodemik Lanjutan. Yogyakarta: CV Budi
Utama; 2021. 32 p.
18. Garrity. G. M., Bell. J. A. and L. Taxonomic Outline Of The Prokaryotes
Bergey’s Manual Of Sistematic Bacteriology. 2004. 24-95 p.
19. Pelczar. Michael J. and Chan. Dasar-Dasar Mikrobiologi,Terjemahan oleh
Hadioetomo. Jakarta : Universitas Indonesia.: E.C.S,; 2008.
20. Radji M. Buku Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa Farmasi dan
Kedokteran. Manurung J, editor. Jakarta: E.G.C; 2010. 179-180 p.
21. Ermavianti D. Anatomi dan Fisiologi. Yogyakarta: IKAPI; 2020. 3 p.
22. Toy TSS, Lampus BS, Hutagalung BSP. Uji Daya Hambat Ekstrak Rumput
Laut Gracilaria Sp Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Aureus.
e-GIGI. 2015;3(1).
23. Departermen Kesehatan RI. Farmakope Indonesia. Jakarta.; 2010.
24. Ansel H. C. Pengantar Bentuk sediaan Farmasi. Edisi Keem. Jakarta :
Universitas Indonesia.; 1989.
25. Vicky Wiijoyo. Optimasi Formula sediaan Gel Hand Sanitizer Minyak
Atsiri Jeruk Bergamot Dengan Gelling Agent Carbopol dan Humektan
Propilen Glikon. Sci Surverying Mapp. 2016;41.
26. Mayasari U, Laoli MT. Karakterisasi Simplisia Dan Skrining Fitokimia
Daun Jeruk Lemon ( Citrus limon ( L .) Burm . f .). 2018;2(1):7–13.
27. Kementrian Kesehatan RI. Farmakope Herbal Indonesia. Edisi I. Jakarta.;
2013.
28. Lay, B. W., Sugiyo H. Analisis mikroba di laboratorium. Jakarta: Raja
Grafindo Persada.; 1994. Halaman 34, 72, 73.
29. Oxoid. The Oxoid Manual Of Culture Media Ingredints and Other
Laboratory Service. Edisi V. Basingtoke Oxoid Ltd.; 1982. Halaman 20.
30. Himedia. Pseudomonas Isolation Agar Base. 2013;1(April):4–5.
31. vandepitte. Basic Laboratory Procedures In Clinical Bacteriology. 1st ed.
Jakarta Pusat: World Health Organizations; 2003.
32. Ditjen POM. Farmakope Indonesia. Edisi Keem. Jakarta: Depertemen
Kesehatan Republik Indonesia,; 1995.
73

Lampiran 1. Surat Izin Penelitian


74

Lampiran 2. Surat Permohonan Judul


75

Lampiran 3. Lembar bimbingan Proposal Doping 1


76

Lampiran 4. Lembar Bimbingan Proposal Doping 2


77

Lampiran 5. Lembar Bimbingan Skripsi Doping 1


78

Lampiran 6. Lembar Bimbingan Skripsi Doping 2


79

Lampiran 7. Skema Pengambilan Sampel Bunga Kembang Sepatu dan


Karakterisitik simplisia

Peengumpulan sampel Bunga Kembang


sepatu (Hibiscus rosa-sinensis)
Sebanyak 5 kg
Ditimbang
Disortasi Basah

Dicuci
Ditiriskan
Dikeringkan

Simplisia Bunga Kembang Sepatu


(Hibiscus rosa-sinensis)
Sebanyak 500 g

Skrining Fitokimia : Uji Karakterisasi simplisia Bunga


1. Alkaloid Kembang Sepatu :
2. Flavonoid 1. Uji Mikroskopik
3. Saponin 2. Penetapan Kadar Air
4. Tanin 3. Penetapan Kadar Abu Total
5. Steroid 4. Penetapan Sari Larut Air
5. Penetapan Kadar Sari Larut
Dalam Etanol
6. Penetapan Kadar Abu Tidak
Larut Dalam Asam
80

Lampiran 8. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol Bunga Kembang Sepatu dan


Karakterisasi Ekstrak

Simplisia Bunga Kembang Sepatu


(Hibiscus rosa-sinensis)

Direndam dengan etanol sebanyak 75 bagian (3.750 ml) Direndam


Selama 5 hari ditutup dengan aluminium foil sambil diaduk sesekali

Setelah 5 hari sampel disaring menghasilkan filtrate I dan residu I

Residu I direndam kembali dengan etanol sebanyak 25 bagian (1250


ml) ditutup dan diaduk sesekali

Di diamkan Selama 2 hari, kemudian di saring dihasilkan filtrat 2 dan


residu 2

Filtrat 1 dan 2 digabungkan dan dipekatkan dengan Rotary


Evaporator dan dihasilkan ekstrak bunga kembang sepatu

Uji Karakterisasi Ekstrak Etanol Bunga Kembang


Sepatu

Uji Karakterisasi ekstrak etanol bunga kembang sepatu:


1. Uji Mikroskopik
2. Penetapan Kadar Air
3. Penetapan Kadar Abu Total
4. Penetapan Sari Larut Air
5. Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol
6. Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam
81

Lampiran 9. Skema Pembuatan Sediaan Hand Sanitizer

HPMC dilarutakan dengan aquades dan didiamkan selama


15-30 menit hingga mengembang di gerus sampai terbentuk
dasar gel ( massa I )

Nipagin dilarutkan dengan propilenglikol (massa II)

Ditambahkan ekstrak Bunga kembang sepatu dicampur


dengan (massa I) dan ditambahkan prafum di aduk sampai
homogen

Sediaan Dibuat dalam 3 bagian dengan konsentrasi ekstrak


bunga kembang sepatu 10%, 20%, dan 30%
82

Lampiran 10.Skema Peremajaan Bakteri

Isolasi Bakteri

Diambil
dengan Jarum
ose steril
Diambil 1 Jarum Ose

Digoreskan pada cawan petri


yang berisi media NA

Diinakubasi selama 24-48 jam


pada sushu 37oC

Hasil
83

Lampiran 11.Skema Pembuatan Suspensi Bakteri

Hasil

Dimasukkan

Tabung reaksi 10 ml larutan NaCl 0.9%

Terbentuk Larutan Keruh

hingga diperoleh kekeruhan


yang sama dengan standar
kekeruhan larutan
Mc.Farland.
84

Lampiran 12.Skema Pembuatan Larutan Standar Mc. Farland

Dipipet BaCl2 1% Sebanyak 0,05 ml

Dimasukkan

Tabung Reaksi dan tambahkan H2SO4


Sebanyak 9,95 ml

Dikocok

Terbentuk Larutan Keruh

Larutan Standar Mc. Farland


85

Lampiran 13. Skema Pembuatan NA

Ditimbang Sebanyak 28 g Nutriet


agar

Dilarutkan kedalam aquades,


kemudian di panaskan hingga larut

Dalam keadaan panas dimasukan


kedalam erlemeyer dan disterilkan
dalam autoklaf selama 15 menit
dengan suhu 121oC
86

Lampiran 14 . Skema Pengujian Antibakteri Ekstrak Bunga Sepatu

Disiapkan cawan petri yang telah steril

Dimasukan Suspensi Bakteri kedalam cawan


petri yang di standarkan dengan Mc. Farland

Kertas Cakram direndam kedalam ekstrak


bunga kembang sepatu dengan masing-
masing konsentrasi 10%, 20%, 30% dengan
control negative aquades dan control positif
Ciprofloxacin selama 15 menit

Diinkubasi pada suhu ± 36-37oC selama 18-24


jam

Diamati daerah bening disekeliling cakram


dan diukur diameternya menggunakan jangka
sorong

Dilakukan Pengulangan Sebanyak 3 kali


87

Lampiran 15. Skema Pengujian Antibakteri Sediaan Hand Sanitizer

Disiapkan cawan petri yang telah steril

Dimasukan Suspensi Bakteri kedalam cawan


petri yang di standarkan dengan Mc. Farland

Kertas Cakram direndam kedalam ekstrak bunga


kembang sepatu dengan masing-masing
konsentrasi F0=0%, F1=10%, F2=20%, F3=30,
dan control positif Antis selama 15 menit

Diinkubasi pada suhu ± 36-37oC selama 18-24


jam

Diamati daerah bening disekeliling cakram dan


diukur diameternya menggunakan jangka sorong

Dilakukan Pengulangan Sebanyak 3 kali


88

Lampiran 16. Pembuatan Simplsia

Pengambilan Sampel Pengeringan

Serbuk Simplisia Proses Maserasi

Pengeringan
Ekstrak Kental
89

Lampiran 17. Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan ekstrak

Kadar sari larut etanol


Kadar Sari larut air

Kadar Air

Kadar abu total

Kadar abu tidak larut asam


90

Komponen yang diperiksa Hasil Literatur

Rambut penutup

Stomata

Epidermis atas

Epidermis bawah

Rambut Kelenjar

Lampiran 18. Hasil Pemerikasaan Mikroskopik


91

Lampiran 19. Uji Skrining


92

Lampiran 20. Pengujian Antibakteri


93

Lampiran 21. Uji pH


94

Lampiran 22. Hasil Uji Homogenitas


95

Lampiran 23. Uji Iritasi


96

Lampiran 24. Pengujian Aktivitas Antibakteri

Bakteri Pseudomonas aeruginosa Bakteri Staphylococcus aureus

F1 F1

F2 F2
97

F3 F3
98

Lampiran 25 Perhitungan Zona Hambat Bakteri Pseudomonas aeruginosa

( DV −DS )+( DH −DS)


RUMUS=
2

1. Kontrol Positif

( 26,7−5 ) +(26,5−5) 21,7+21,5


Pengulangan I = = =2 1,6 mm
2 2

( 27,8−5 )+(28,1−5) 22,8+23,1


Pengulangan II= = =22,95 mm
2 2

( 27,5−5 )+(27,7−5) 22,5+22,7


Pengulangan III= = =22,6 mm
2 2

21,6+22,95+22,6
Rata−rata= =23,38 mm
3

2. Formula F1 (10%)

( 19,1−5 ) +(19,2−5) 14,1+14,2


Pengulangan I = = =14 , 15 mm
2 2

( 19,1−5 ) +(19,0−5) 14,1+14


Pengulangan II= = =14,05 mm
2 2

( 18,9−5 )+(19,0−5) 13,9+14


Pengulangan III= = =13,95mm
2 2

14,15+ 14,05+13,95
Rata−rata= =14,03 mm
3
99

3. Formula F2 (20%)

( 22,2−5 ) +(22,3−5) 17,2+17,3


Pengulangan I = = =17,4 mm
2 2

( 21,8−5 )+(21,8−5) 16,8+16,8


Pengulangan II= = =16,8 mm
2 2

( 20,8−5 )+(19,9−5) 15,8+14,9


Pengulangan III= = =15,35 mm
2 2

17,4+16,8+15,35
Rata−rata= =16,51 mm
3

4. Formula F3 (30%)

( 24,8−5 ) +( 25,0−5) 19,8+ 20


Pengulangan I = = =19,9 mm
2 2

( 22,9−5 ) +(23,0−5) 17,9+18


Pengulangan II= = =17,95 mm
2 2

( 21,1−5 )+(21,2−5) 16,1+ 16,2


Pengulangan III= = =16,15 mm
2 2

19,9+17,95+16,15
Rata−rata= =18 mm
3
10
0

Lampiran 26 Perhitungan Zona Hambat Bakteri Staphylococcus aureus

( DV −DS )+( DH −DS)


RUMUS=
2

1. Kontrol Positif

( 26,7−5 ) +(26,8−5) 21,7+21,8


Pengulangan I= = =21,75 mm
2 2

( 26,9−5 ) +(26,8−5) 21,9+21,8


Pengulangan II= = =21,85 mm
2 2

( 27,7−5 ) +(27,7−5) 22,7 +22,7


Pengulangan III= = =22,7 mm
2 2

21,75+21,85+22,7
Rata−rata= =22,1 mm
3

2. Formula F1 (10%)

( 19,0−5 ) +(19,1−5) 14+ 14,1


Pengulangan I = = =14,05mm
2 2

( 19,5−5 ) +(19,8−5) 14,5+14,8


Pengulangan II= = =14,65 mm
2 2

( 19,7−5 ) +(19,4−5) 14,7 +14,4


Pengulangan III= = =14,55 mm
2 2

14,05+ 14,65+14,55
Rata−rata= =14,41mm
3
10
1

3. Formula F2 (20%)

( 22,5−5 ) +( 22,6−5) 17,5+ 17,6


Pengulangan I = = =17,55 mm
2 2

( 22,2−5 ) +(22,5−5) 17,2+17,5


Pengulangan II= = =17,35mm
2 2

( 20,4−5 ) +(20,7−5) 15,4+15,7


Pengulangan III= = =15,55 mm
2 2

17,55+ 17,35+15,55
Rata−rata= =16,48 mm
3

4. Formula F3 (30%)

( 23,5−5 ) +( 23,7−5) 18,5+18,7


Pengulangan I = = =18,6 mm
2 2

( 23,8−5 )+(23,9−5) 18,8+18,9


Pengulangan II= = =18,85 mm
2 2

( 22,5−5 )+(22,3−5) 17,5+17,3


Pengulangan III= = =17,4 mm
2 2

14,05+ 14,65+14,55
Rata−rata= =18,28 mm
3
10
2

Lampiran 27. Uji Statistik Ekstrak Bunga Kembang Sepatu Pseudomonas


aeruginosa dan Staphylococcus aureus
1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
ZonaHambat Kontrol Positif ,283 3 . ,934 3 ,504
Kontrol Negatif . 3 . . 3 .
F1 (10%) ,175 3 . 1,000 3 1,000
F2 (15%) ,273 3 . ,946 3 ,551
F3 (20%) ,178 3 . ,999 3 ,956
a. Lilliefors Significance Correction

Test of Homogeneity of Variances


Levene Statistic df1 df2 Sig.
ZonaHambat Based on Mean 4,038 4 10 ,393
Based on Median 1,556 4 10 ,260
Based on Median and with 1,556 4 3,948 ,341
adjusted df
Based on trimmed mean 3,833 4 10 ,139

ANOVA
ZonaHambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 935,121 4 233,780 103,176 ,000
Within Groups 22,658 10 2,266
957,779 14
10
3

Zona Hambat
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3
Tukey HSD a
Kontrol Negatif 3 ,0000
F1 (10%) 3 14,0500
F2 (15%) 3 16,5167
F3 (20%) 3 18,0000
Kontrol Positif 3 23,7167
1,000 ,056 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
10
4

2. Bakteri Staphylococcus aureus

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
ZonaHambat Kontrol Positif ,351 3 . ,828 3 ,183
Kontrol Negatif . 3 . . 3 .
F1 (10%) ,328 3 . ,871 3 ,298
F2 (15%) ,353 3 . ,824 3 ,174
F3 (20%) ,325 3 . ,875 3 ,309
a. Lilliefors Significance Correction

Test of Homogeneity of Variances


Levene Statistic df1 df2 Sig.
ZonaHambat Based on Mean 5,769 4 10 ,511
Based on Median ,594 4 10 ,675
Based on Median and with ,594 4 4,753 ,684
adjusted df
Based on trimmed mean 4,839 4 10 ,020

ANOVA
Zona Hambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 862,624 4 215,656 492,365 ,000
Within Groups 4,380 10 ,438
Total 867,004 14
10
5

ZonaHambat
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3 4
Tukey HSD a
Kontrol Negatif 3 ,0000
F1 (10%) 3 14,4167
F2 (15%) 3 16,8167
F3 (20%) 3 18,2833
Kontrol Positif 3 22,1000
1,000 1,000 ,121 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
10
6

Lampiran 28. Uji Statistik Sediaan Gel Hand sanitizer Pseudomonas aeruginosa
dan Staphylococcus aureus
1. Bakteri Pseudomonas aeruginosa

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Zona Kontrol Positif ,188 3 . ,998 3 ,913
Hambat Kontrol Negatif . 3 . . 3 .
F1 ,314 3 . ,893 3 ,363
F2 ,367 3 . ,794 3 ,100
F3 ,276 3 . ,942 3 ,537
a. Lilliefors Significance Correction

Test of Homogeneity of Variances


Levene Statistic df1 df2 Sig.
Zoana Based on Mean 2,671 4 10 ,795
Hambat Based on Median 1,578 4 10 ,254
Based on Median and with 1,578 4 5,154 ,308
adjusted df
Based on trimmed mean 2,603 4 10 ,100

ANOVA
Zona Hambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 608,576 4 152,144 206,530 ,000
Within Groups 7,367 10 ,737
Total 615,942 14
10
7

Zona Hambat
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3 4
Kontrol Negatif 3 ,0000
F1 3 12,1500
F2 3 13,4500 13,4500
F3 3 15,6000
Kontrol Positif 3 18,6167
Sig. 1,000 ,397 ,071 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
10
8

2. Bakteri Staphylococcus aureus

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.
VAR00001 Kontrol Positif ,351 3 . ,827 3 ,180
Kontrol Negatif . 3 . . 3 .
F1 ,192 3 . ,997 3 ,896
F2 ,204 3 . ,993 3 ,843
F3 ,259 3 . ,959 3 ,610
a. Lilliefors Significance Correction

Test of Homogeneity of Variances


Levene Statistic df1 df2 Sig.
Zona Based on Mean 3,116 4 10 ,066
Hambat Based on Median 2,056 4 10 ,162
Based on Median and with 2,056 4 3,876 ,255
adjusted df
Based on trimmed mean 3,053 4 10 ,069

ANOVA
Zona Hambat
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 636,282 4 159,071 71,199 ,000
Within Groups 22,342 10 2,234
Total 658,624 14
10
9

Zona Hambat
Tukey HSDa
Subset for alpha = 0.05
Kelompok N 1 2 3 4
Kontrol Negatif 3 ,0000
F1 3 11,6167
F2 3 13,9667 13,9667
F3 3 15,7333 15,7333
Kontrol Positif 3 19,0833
Sig. 1,000 ,364 ,614 ,116
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.

Anda mungkin juga menyukai