PRINSIP DAN DASAR-DASAR

PENGUJIAN MIKROBIOLOGI
Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021

TIM MIKROBIOLOGI BARISTAND INDUSTRI BANJARBARU

NAZARNI RAHMI, RUFIDA, NADRA KHAIRIAH DAN AINUN
 Definisi MIKROBIOLOGI

• Micros = kecil (renik); Bios = hidup ; Logos =

ilmu
• Mikrobiologi : Ilmu tentang perikehidupan
organisme hidup yang sangat kecil yang hanya
dapat dilihat menggunakan mikroskop
• Mikroorganisme contohnya Bakteri, Protozoa,
Virus, Algae, Jamur, Yeast

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021

Morfologi sel bakteri

• Umumnya bakteri berukuran 0,5 – 1,0 x 2,0 – 5,0 m

• Bentuk bakteri : Bola (coccus), batang (bacillus), spiral (vibrio)
• Penataan bakteri : berpasangan, bergerombol, rantai atau
filamen
 MEDIUM PERTUMBUHAN

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 MEDIA

• Nutrisi yang dibutuhkan oleh mikroorganisme

untuk tumbuh
• Penggunaan media bagi kita :
1.Menghitung mikrobia
2.Memperkaya
3.Identifikasi
4.Koleksi mikrobia

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Syarat-syarat media

• Mengandung semua nutrisi yang digunakan oleh

mikrobia
• Mempunyai tekanan osmosis
• Mempunyai pH yang sesuai dengan kebutuhan
mikrobia
• Tidak mengandung zat yang dapay menghambat
pertumbuhan mikrobia
• Harus dalam keadaan steril sebelum digunakan

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 JENIS-JENIS MEDIA

• BERDASARKAN FISIKNYA :
1.Media cair
2.Media padat
3.Media semi padat

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 MEDIA CAIR

• Bentuknya cair, tidak mengandung bahan

pemadat
• Penggunaan untuk menumbuhkan/
membiakkan, menyimpan kultur, uji
kemampuan fermentasi, peng-kayaan dan
pengujian lainnya
• Contohnya : Nutrient broth, Brain Heart Broth,
Lactose broth, dll

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 MEDIA PADAT

• Mengandung 1,5 – 2% agar media

• Fungsinya untuk menumbuhkan mikrobia,
menyimpan kultur dalam jangka waktu tidak
terlalu lama, mengisoklasi dan menghitung
mikrobia
• Contohnya : Plate Count Agar , Potato Dextrose
Agar, Nutrient Agar, Cromogenic coliform Agar,
Yeast Extract Agar
• Note : Pencairan dan pemadatan berulang akan
menurunkan kekuatan media Agar

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 MEDIA SEMI PADAT

• Mengandung 0,5 % media agar

• Fungsinya untuk menyimpan mikrobia atau
pengujian aktivitas fisik tertentu
• Mencegah/ menekan difusi oksigen untuk
kondisi anaerob atau sedikit oksigen
• Contohnya Thioglycolate medium, MRS soft
agar dll

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 JENIS-JENIS MEDIA

• BERDASARKAN KOMPOSISINYA
1.Media alami : dari bahan alami seperti
kentang, kaldu daging, telur, air kelapa dsb
2.Media semi sintesis : dari bahan alami dan
bahan sintesis seperti pepton, ekstrak
daging, NaCl, akuades
3.Media sintesis : tersusun dari senyawa kimia
seperti KH2PO4, MgSO2, NaCl, MgSO4 dll

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
JENIS-JENIS MEDIA

• BERDASARKAN SIFATNYA :
1. Media umum : media untuk pertumbuhan
satu atau lebih mikrobia, contohnya PCA,
PDA dll
2. Media pengayaan (enrichment) : media yang
berfungsi untuk mempercepat pertumbuhan
bakteri/ pemulihan bakteri, contohnya RVS
TBB, Frasher dll
3. Media selektif : media yang berfungsi untuk
menumbuhkan bakteri tertentu dan
menghambat jenis bakteri lainnya,
contohnya Mc Conkey, EMB, XLD dll
 Jenis media berdasarkan
sifatnya….(lanjutan)

4. Media differensial : media yang digunakan

untuk pertumbuhan mikroba yang bertujuan
mengetahui sifatnya, contoh Mc Conkey, BPA
dll
5. Media identifikasi : media yang digunakan
untuk mempelajari/ membuktikan satu atau
lebih fungsi metabolic khas dari suatu
mikrobia utk keperluan diidentifikasi,
contohnya TSI Agar

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
TEKNIK ASEPTIK

• Suatu teknik yang dilakukan di Laboratorium

mikrobiologi yang bertujuan untuk
meminimalisasi terjadi kontaminani dengan
cara :
1. Menggunakan APD
2. Membersihkan meja kerja sebelum dan
sesudah dengan menggunakan desinfektan
3. Menggunakan Laminar Air Flow/ Biosafety
cabinet
 Sterilisasi

• Suatu proses untuk membunuh mikrobia baik

sel vegetative ataupun spora

Beberapa teknik sterilisasi :

A. Mekanik/ filtrasi
Ukuran membrane filtrasi berkisar 0,22 –
0,45 µm
Terbuat dari bahan yang mudah rusak oleh
panas
Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Sterilisasi ( lanjutan….)

B. Fisik
• Pemanasan , contohnya :
 Pemijaran : untuk ose dan pinset
 Panas kering (Oven suhu 160 – 180 ºC
selama 2 jam ); untuk peralatan gelas dan
bahan stainless
 Uap air bertekanan contohnya autoklaf (121
ºC, 15 menit tekanan 15 Psi) untuk media
dan bahan lain yang tidak tahan/ rusak oleh
suhu tinggi
Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Sterilisasi ( lanjutan….)

• Penyinaran
 Sinar UV, sinar Gamma dll

C. Kimiawi
• Desinfektan, alcohol, formalin, klor dll

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
FAKTOR – FAKTOR YANG
MEMPENGARUHI PERTUMBUHAN
MIKROBIA

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Fase pertumbuhan mikrobia
1. Lag Phase
• Belum ada pertumbuhan populasi karena sel mulai beradaptasi
dengan medium sehingga siap untuk membelah diri
2. Logaritma phase
• Sel membelah diri dengan laju yang cepat dan constant
3. Stationary phase
• Terjadinya penumpukan racun akibat metabolism sel
• Kandungan nutrient mulai habis
4. Decline phase Sel menjadi mati akibat penumpukan racun
• Nutrisi habis, mengalami penurunan jumlah sel secara
eksponensial
Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015
Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 KESELAMATAN KERJA DI
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

• INGAT !! MIKROORGANISME DAPAT MENJADI

HAL YANG MEMILIKI POTENSI MEMBAHAYAKAN
KESEHATAN MANUSIA

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021
 Hal yang harus di lakukan saat
bekerja di lab. mikrobiologi
• Cuci tangan terlebih dahulu dengan sabun sebelum bekerja di lab.
• Selalu menggunakan jas laboratorium yang bersih dan kelengkapan APD
lainnya selamam berada di laboratorium
• Tidak makan, minum dan merokok di dalam laboratorium
• Sebelum memulai kerja, semprot tangan dengan alcohol 70%
• Bersihkan permukaan meja kerja dengan alkohol70% sebelum dan
sesudah bekerja
• Berli label pada kultur atau media (nama kultur/ media, tanggal dibuat)
• Sterilikam peralatan bekas kultur dan media yang sudah tercemar
• Jangan memipet dengan mulut
• Jika kultur atau media tumpah, segera lap dengan alcohol 70%
• Setelah selesai bekerja, bersihkan tangan dengan mencuci pakai sabun
ataupun semprot dengan alkohol 70%
 TERIMAKASIH

Traning Pengujian Mikrobiologi AMDK sesuai SNI 3554:2015

Baristand Industri Banjarbaru, 14 – 15 Desember 2021