Kelompok 1, Teknik Analisis Mikroba 2022

ISOLASI DAN KARKTERISASI KHAMIR ENDOFIT DAGING BUAH

SALAK (Salacca zalacca) SEBAGAI PENGEMBANG ADONAN ROTI
ENDOFIT DARI DAGING BUAH SALAK (Salacca zalacca)

Alfina Nur Zahro1, Rofifah Az Zahro1, Maulfi Elsa Noordiya1, Putri Dwi Avitasari1
1)
Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Maulana Malik Ibrahim
Malang Jalan Gajayana No. 50 Malang 65144

Abstrak
Kata kunci : Isolasi, Karakterisasi Morfologi, Khamir Endofit, Uji Biokimia

PENDAHULUAN memiliki warna putih susu, tepi koloni

HASIL DAN PEMBAHASAN bergelombang, elevasi sedikit menonjol,
Isolasi dan Karakterisasi Morfologi bentuk koloni tidak teratur dan tekstur
Khamir dari Buah Salak (Salacca butyrous. Hal tersebut sesuai dengan
zalacca). Hasil isolasi diperoleh 3 isolat pernyataan Pratiwi dan Akhdiya (2020)
khamir, yaitu U1, U2, dan U3. Ciri-ciri koloni khamir memiliki warna putih, krem,
morfologi koloni menunjukkan bahwa U1 kuning hingga jingga. Elevasi koloni
memiliki warna putih susu, tepi koloni berbentuk seperti kawah dan hanya sedikit
rata, elevasi rata, bentuk koloni tidak yang datar ataupun timbul. Tepi koloni
teratur, dan tekstur butyrous. Isolat U2 memiliki karakteristik timbul, rata,
memiliki warna putih susu, tepi koloni bergerigi, dan bergerigi halus. Isolat U1, U2,
tidak rata, elevasi rata, bentuk koloni tidak dan U3 disajikan pada Gambar 1.
teratur, dan tekstur butyrous. Isolat U3

b
a c

Gambar 1. Morfologi koloni isolat khamir U1 (a), U2 (b), dan U3 (c)

Berdasarkan data yang diperoleh memiliki warna dominan yaitu yaitu krem

dapat diamati bahwa ketiga isolat khamir dan putih. Webster dan Weber (2007),

menyatakan bahwa kelompok khamir
Ascomycetes memiliki warna dominan
putih dan krem karena tidak adanya
pigmen warna. Hal ini didukung oleh
Spencer (1997) bahwa hampir 90%
khamir mempunyai penampakan
morfologi putih kekuningan. Berdasarkan
pernyataan tersebut diduga delapan isolat
khamir yang ditemukan dari buah salak
pondoh termasuk ke dalam
Ascomycetes.
Pengamatan morfologi mikroskopis
dilakukan dengan melakukan pewarnaan
pada objek menggunakan methylen blue.
Pengamatan mikroskopik pada isolat U1
dan U2 memiliki bentuk
elips,bereproduksi secara vegetatif dan
cara pertunasan mononopolar dan tidak
memiliki pseudohifa maupun hifa sejati
(gambar 2.a) dan (gambar 2.b).
Berdasarkan hasil tersebut secara
identifikasi mikroskopik memiliki
kemiripan yang sama dengan genus Pichia
kelas Ascomycestes. Hal ini sesuai dengan
penelitian Asliha dan Alami (2014), genus
Pichia memiliki bentuk sel elips, bulat
dengan askospora berbentuk spheroidal,
atau hemispheroidal, hat- shaped serta
bereproduksi seksual dengan membentuk
askospora (1 - 4 askus). Hammamoto dan
Nakase (2000), menyatakan
reproduksi vegetatif khamir dengan budding
cell termasuk dalam subkelas
Hemiascomycetes. Kurtzman dan
(1998), menambahkan bahwa subkelas
Kelompok 1, Teknik Analisis Mikroba 2022
Hemiascomycetes termasuk dalam kelas
Ascomycetes. (hanya ada pada satu kutub sel
induk). Alfian (2019) menambahkan bahwa
Genus Pichia memiliki pseudohifa maupun
hifa sejati dan pertunasan monopolar. Gambar
morfologi isolat khamir secara mikroskopis
dengan masa inkubasi 2 hari pada perbesaran
400× disajikan pada Gambar 2.
a b c
kelas
Gambar 2. Karakteristik mikroskopik
U1(a); U2 (b), U3 (c)
bulat
Uji Toleransi Suhu. Berdasarkan
hasil uji toleransi khamir terhadap tiga
variasi suhu (28⁰C, 37⁰C, dan 45⁰C) melalui
perhitungan nilai kerapatan khamir yang
telah diinkubasi selama 72 jam dapat
diketahui bahwa pada suhu 37⁰C khamir
memiliki nilai kerapatan yang tinggi yaitu
2,926 dibandingkan pada suhu 28⁰C dan
45⁰C (Tabel. 1)
Tabel 1. Hasil Uji Toleransi Suhu
Variasi 28⁰C 37⁰C 45⁰C
suhu
Nilai 1,824 2,926 1,270
kerapatan
bahwa Hal ini sesuai dengan Thais et al.,
(2006), menyatakan bahwa parameter yang
diamati pada uji toleransi suhu pada adalah
Fell setelah inkubasi yaitu strain khamir mampu
bertahan pada suhu tinggi. Berdasarkan hal
 Kelompok 1, Teknik Analisis Mikroba 2022
tersebut menunjukkan bahwa tiga isolat telah diinkubasi 48 jam dapat diketahui
khamir dari buah salak dapat digunakan bahwa nilai kerapatan khamir sebesar 1,011.
sebagai pengembang roti. Nilai kerapatan ini tergolong tinggi yang

Hal ini sesuai dengan penelitian menunjukkan adanya partumbuhan sel khamir

Karki (2017), bahwa khamir komersial pada medium dengan konsentrasi glukosa

yang sudah dimanfaatkan sebagai 50%. Menurut Okafor (2007) khamir yang

pengembang roti dan kebanyakan khamir dapat dijadikan sebagai pengembang roti yaitu

hanya mampu tumbuh suhu 37 ºC dan pada yang memiliki kemampuan toleransi terhadap

suhu 45oC strain khamir komersial gagal tekanan osmotik garam dan gula pada adonan.

untuk tumbuh. Uji Flokulasi. Berdasarkan hasil uji

flokulasi melalui pengamatan terdapat
Uji Toleransi Etanol. Berdasarkan
flok/endapan pada media. Hal ini
hasil uji toleransi khamir terhadap tiga
menunjukkan bahwa khamir mampu
variasi konsentrasi etanol (10%, 13%,
membentuk endapan di bawah media serta
dan 15%) melalui perhitungan nilai
menghasilkan busa pada bagian atas media
kerapatan khamir yang telah diinkubasi
(Gambar 3). Flokulasi merupakan kemampuan
selama 72 jam dapat diketahui bahwa
khamir membentuk endapan dalam media
pada konsentrasi etanol 10% khamir
pertumbuhan yang digunakan. Flokulasi dapat
memiliki nilai kerapatan yang tinggi yaitu
terjadi karena terdapat interaksi dari dua
0,925 dibandingkan pada konsentrasi
komposisi yang berbeda pada permukaan
etanol 13% dan 15% (Tabel 2).
yang sama. Teori flokulasi diantaranya, teori
Tabel 2. Hasil Uji Toleransi Etanol
jembatan Ca2+, teori Lectin-model dan teori
Konsentrasi 10% 13% 15%
Etanol koloidal (Soares, 2011).
Nilai 0,925 0,680 0,184
kerapatan
Hal ini sesuai dengan penelitiaan
Maryam (2017) bahwa semua spesies
khamir yang digunakan mampu tumbuh
di medium yang mengandung etanol 10%
dan 13% serta menunjukkan pertumbuhan
lambat padakonsenterasi etanol 15%.

Uji Toleransi Glukosa 50%.

Gambar 3. Hasil uji flokulasi
Berdasarkan hasil uji toleransi khamir
terhadap konsentrasi glukosa 50%, melalui
perhitungan nilai kerapatan khamir yang
 Kelompok 1, Teknik Analisis Mikroba 2022
Uji Pengembang Adonan Roti.
Pada penelitian ini tidak dilanjutkan pada
uji pengembang adonan roti karena tidak
dilakukan pengkulturan ulang sampel isolat
khamir yang diisolasi pada media YMB.
Hal tersebut menyebabkan sampel isolat
khamir yang akan digunakan sebagai
pengembang roti ditumbuhi oleh hewan
(Drosophila sp) dan tidak dapat digunakan
sebagai khamir pada uji pengembang
adonan roti.