Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
Diedit oleh:
Jack Wong,
Universitas Cina Hong Kong,
Cina
Diperiksa oleh:
Alex Galanis,
Universitas democritus Thrace,
Yunani
Jose Antonio Reales-Calderon,
Jaringan Imunologi Singapura
(SEBUAH*STAR), Singapura
* Korespondensi:
Zhaohui Liu
17301255426@163.com
Bagian khusus:
Artikel ini dikirim ke
Antimikroba, Resistensi,
dan Kemoterapi,
bagian dari jurnal
Frontiers in Microbiology
Diterima: 21 Januari 2019
Diterima: 24 April 2019
Diterbitkan: 08 Mei 2019
Kutipan:
Li T, Liu Z, Zhang X, Chen X and
Wang S (2019) Probiotik Lokal
Lactobacillus crispatus
dan Pameran Lactobacillus delbrueckii
Efek Antijamur Kuat Terhadap
Kandidiasis Vulvovaginal pada Model
Tikus. Depan. Mikrobiol. 10:1033.
doi: 10.3389/fmicb.2019.01033
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
PENELITIAN ASLI
diterbitkan: 08 Mei 2019
doi: 10.3389/fmicb.2019.01033
Probiotik Lokal Lactobacillus crispatus
dan Lactobacillus delbrueckii
Menunjukkan Efek Antijamur Yang Kuat
Terhadap Vulvovaginal
Kandidiasis pada Model Tikus
Ting Li1, Zhaohui Liu1* , Xu Zhang2, Xi Chen3 dan Suxia Wang3
1 Departemen Ginekologi, Rumah Sakit Obstetri dan Ginekologi Beijing, Universitas Kedokteran Modal, Beijing, Cina,
2 Pusat Patologi Ultrastruktural, Rumah Sakit Pertama Universitas Peking, Beijing, Cina, 3 Laboratorium Mikroskop Elektron,
Departemen Ginekologi, Pusat Invasif Minimal, Rumah Sakit Obstetri dan Ginekologi Beijing, Capital Medical University,
Beijing, China
Pengetahuan yang komprehensif tentang ekosistem vagina sangat penting untuk
pengembangan pendekatan yang berhasil untuk pengobatan infeksi. Peran dariLactobacillus
dalam mencegah kandidiasis vulvovaginal (KVV) masih kontroversial. Dalam penelitian ini,
kami menyelidiki efek terapeutik dan mekanismeLactobacillus crispatus atau delbrueckii pada
vaginitis yang disebabkan oleh Candida albicans dalam model tikus Sprague-Dawley. Evaluasi
mikrobiologi dilakukan dengan pewarnaan Gram dan koloni jamur dihitung. Khasiat
antijamur dari keduanyaLactobacillus strain dinilai dengan pewarnaan hematoxylin dan eosin
(HE), mikroskop elektron transmisi (TEM), deteksi imunohistokimia interferon-γ (IFN-γ),
interleukin (IL)-4, IL-17, dan IgG yang diturunkan dari epitel (RP125) . Kitain vitro hasil
menunjukkan bahwa aktivitas penghambatan terhadap Kandidat jumlah unit pembentuk
koloni (CFU) ditunjukkan oleh keduanya Lactobacillus regangan (P < 0,001). Hasil kami
menunjukkan bahwaLactobacillus administrasi memainkan peran yang sangat diperlukan
dalam menjaga homeostasis imun, dan menurunkan rasio Th1/Th2 (IFN-γ/IL-4) dengan
mengatur sekresi epitel sitokin yang menghambat pelepasan sitokin proinflamasi epitel,
sambil meningkatkan ekspresi IgG yang diturunkan dari epitel (P < 0,05), menyarankan
perlindungan yang dimediasi antibodi. Hasil kami berimplikasiL. crispatus dan L. delbrueckii
sebagai agen bioterapi tambahan potensial pada wanita dengan VVC, terutama bagi mereka
dengan resistensi obat, efek samping atau kontraindikasi saat menggunakan agen antijamur.
Studi klinis besar, jangka panjang, dan terencana lebih lanjut harus dilakukan dalam praktik
klinis untuk menentukan potensi klinisnyaL. crispatus dan
L. delbrueckii sebagai pengobatan tambahan untuk VVC.
Kata kunci: Lactobacillus crispatus, Lactobacillus delbrueckii, kandidiasis vulvovaginal, antijamur, mikrobioma
Singkatan: ANOVA, analisis varians satu arah; ATCC, koleksi budaya tipe Amerika; BV, vaginosis bakterial;
C. albicans, Candida albicans; CFU, unit pembentuk koloni; HE, hematoksilin dan eosin; IFN, interferon; IL, interleukin; IRS, skor
imunoreaktivitas;L. crispatus, Lactobacillus crispatus; LSD, perbedaan paling kecil; MRS, de Man, Rogosa dan Sharpe; SDA, agar
sabouraud dekstrosa; SI, intensitas pewarnaan; SP, persentase pewarnaan; TEM, mikroskop elektron transmisi; Th, T pembantu; VVC,
kandidiasis vulvovaginal.
1 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033
Li dkk.
PENGANTAR
Sekarang telah diterima dengan baik bahwa mikrobiota yang ada
dalam tubuh manusia dapat mempengaruhi kekebalan, fisiologi, dan
kesehatan (Lagu dkk., 2018). Telah dipostulasikan bahwa mikrobioma
vagina yang unik telah berevolusi untuk melakukan peran ganda
resistensi penyakit dan perlindungan kebidanan (Amabebe dan
Anumba, 2018). Selain itu, infeksi dapat timbul dari
ketidakseimbangan dalam mikrobiota vagina yang sangat beragam
(misalnya, VVC). VVC, terutama disebabkan olehKandidat, adalah
infeksi vagina kedua yang paling umum dan berhubungan dengan
ketidaknyamanan vulva atau dan nyeri (Dovnik dkk., 2015). Terapi
standar yang direkomendasikan untuk vaginaC. albicans infeksi
adalah terapi antijamur, yang terdiri dari azol oral atau intravaginal,
atau obat triazol (Sobel dan Sobel, 2018). Namun, penggunaan
antibiotik jangka panjang meningkatkan tingkat kekambuhan,
mungkin karena ketidakmampuan untuk membangun kembali
normal Lactobacillus- flora vagina yang didominasi
Dalam beberapa tahun terakhir telah ada minat dalam
penggunaan terapi probiotik. Lactobacillus spesies secara
umum direkomendasikan sebagai strategi baru, yang
semakin populer berdasarkan akumulasi bukti efektivitas
mereka dalam memulihkan fungsi mikroba normal dan
mencegah infeksi urogenital (Amabebe dan Anumba, 2018).
Penggunaan probiotik telah dikaitkan dengan penurunan
yang signifikan dalam kekambuhan VVC (Palacios et al., 2016).
Pertama kali diperkenalkan pada tahun 1974 oleh Parker (
Fuller, 1999), kata “probiotik” digunakan untuk
menggambarkan mikroorganisme hidup yang memberikan
manfaat bagi penerima bila diberikan dalam jumlah yang
cukup (Organisasi Kesehatan Dunia dan Organisasi Pangan
dan Pertanian Perserikatan Bangsa-Bangsa, 2006).
Mikrobiota vagina pada sebagian besar wanita sehat usia
reproduksi didominasi oleh protektif Lactobacillus spesies
yang dianggap memperkuat pertahanan terhadap invasi dan
kolonisasi oleh mikroorganisme patogen (Melgaço dkk., 2018
). Pada wanita dengan infeksi vagina, seperti BV dan VVC,
dominasi iniLactobacillus dikompromikan (Sobel, 2007).
Akibatnya, probiotik intravaginal dariLactobacillus genus yang
umum dan bertindak menguntungkan dalam beberapa cara.
Selain fungsinya sebagai penghalang kolonisasi vagina oleh
mikroorganisme berbahaya (Kim dan Park, 2017), spesies ini
mempertahankan mikroflora intravaginal asam dengan
menghasilkan asam laktat melalui dekomposisi karbohidrat (
Cadieux dkk., 2002), menghambat organisme anaerob
katalase-negatif dengan produksi hidrogen peroksida (H2HAI2
) sebagai sumber radikal bebas (Lamont, 2003) dan
menghasilkan peptida antimikroba, seperti zat mirip
bakteriosin dan biosurfaktan (Witkin et al., 2013). Di
tambahan, Lactobacillus spesies menginduksi anti-inflamasi dikumpulkan dengan sentrifugasi (10.000 × G, 10 menit, 5◦
C), respon imun pada pejamu melalui jalur NF-κB dicuci dua kali, dan disuspensikan kembali dalam larutan garam 0,9%
(Santos dkk., 2018).
Lebih dari 20 spesies Lactobacillus telah terdeteksi Neimenggu Wanzeshuangqi Pharmaceutical Co., Ltd.) di vagina, di
antaranya L. crispatus adalah yang paling umum pada wanita Asia yang sehat
sediaan
vagina karena aktivitas antimikroba yang kuat (Ravel dkk., 2011). sekitar 0,25 × 106 CFU siaran langsung L. delbrueckii. Suspensi
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
Lactobacillus Pengobatan VVC
Lactobacillus crispatus memberikan perlindungan pada
penghalang epitel terhadap cedera dan peradangan dengan
mengatur fungsi sel epitel.Anton dkk., 2018). Penelitian kami
sebelumnya menunjukkan bahwaL. crispatus melemahkan
virulensi C. albicans, memodulasi sekresi sitokin dan kemokin,
dan meningkatkan respon imun sel VK2/E6E7 in vitro (Niu dkk.,
2017). Namun, tidak ada preparat vagina yang tersedia secara
komersial yang mengandungL. crispatus di pasar Cina. Hidup
Lactobacillus Kapsul untuk Penggunaan Vagina, mengandung
L. delbrueckii (Neimenggu Wanzeshuangqi Pharmaceutical Co.,
Ltd.) adalah satu-satunya sediaan komersial dari Lactobacillus
yang tersedia saat ini. Persiapan ini telah diperkenalkan untuk
menghambat efek sitotoksik dan adhesi organisme patogen (
Banerjee et al., 2009). L. delbrueckii menghasilkan sejumlah besar
H2HAI2 dan telah dilaporkan menghambat
C. albicans lebih efektif daripada banyak strain turunan
vagina lainnya yang ditemukan pada wanita sehat (Strus et
al., 2005). Karena hubungan anatomi yang erat dengan
vagina, anus nyaman untuk migrasi organisme usus,
termasuk pemberian probiotik oral.Lactobacillus strain
(misalnya, minuman yogurt), ke vagina. Pemindahan pasif
Lactobacillus ke vagina dari rektum mungkin menjadi
pertimbangan penting dalam pemberian probiotik dalam
makanan dan suplemen makanan (Buggio dkk., 2019).
Asupan probiotik oral yang mengandungLactobacillus strain
meningkatkan tingkat pemulihan dan gejala pasien dengan
infeksi vagina dan cenderung memperbaiki pola mikroba
vagina (Laue et al., 2018).
Mempertimbangkan efek promosi kesehatan yang terbukti dari
L. crispatus, penyelidikan kemanjuran topikal Lactobacillus
ketegangan pada pengobatan VVC dijamin. Sampai saat ini,
sedikit, jika ada, penelitian telah menilai anti-Kandidat aktivitas
dan sifat probiotik dari Lactobacillus strain di VVC. Oleh karena
itu, tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki dan
membandingkan efek dari (1)L. crispatus sebagai bakteri vagina
yang dominan pada manusia, dan (2) L. delbrueckii, yang
terkandung dalam satu-satunya persiapan vagina yang tersedia
secara komersial dari Lactobacillus strain, untuk mencegah invasi
C. albicans, selain itu berfokus pada respon imun dari epitel
vagina inang pada model tikus.
BAHAN DAN METODE
Mikroorganisme dan Kondisi Pertumbuhan
Lactobacillus crispatus [Koleksi Budaya Tipe Amerika (ATCC) 33820]
secara rutin dikultur secara anaerob pada suhu 37◦C dalam kaldu de
Man, Rogosa dan Sharpe (Becton Dickinson, Cockeysville, MD,
Amerika Serikat). Setelah kultur semalam, sel-sel
pada suhu 3 × 108 CFU/ml. vaginaLactobacillus (Dingjunsheng ©
R ;
danterdiri
probiotik telah dari
diselidiki
0,25 gsecara
kapsulluas
yangsebagai probiotik
mengandung
diformulasikan setiap hari dalam larutan garam untuk mencapai
sekitar 3× 108 CFU/ml. L. crispatus atau L. delbrueckii suspensi
2 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033
Li dkk. Lactobacillus Pengobatan VVC

diberikan secara intravaginal untuk setiap hewan sekali sehari pada periode pengobatan 7 hari, evaluasi mikrobiologi
jam 3. × 108 CFU/ml. dilakukan dengan pewarnaan Gram. ItuC. albicans beban
Candida albicans strain (ATCC-11006) dikultur ke generasi dalam lavage vagina (dua berurutan 500 μl volume saline
ketiga pada agar Sabouraud dextrose (SDA; Becton Dickinson) steril) ditentukan dengan uji CFU pada SDA. Efek antijamur
pada suhu 37◦C selama 72 jam dan dipanen. Setelah dianalisis dengan menghitung CFU/mL dalam sampel.
resuspensi dalam larutan garam 0,9%, sel dihitung Semua tikus dibius dengan injeksi intraperitoneal
menggunakan hemositometer (Hausser Scientific; Horsham, 100 mg/kg ketamin hidroklorida dan di-eutanasia. Whole-PA,
Amerika Serikat) dan disesuaikan dengan konsentrasi akhir sampel vagina diambil.
dari 1 × 105 CFU/ml.
Analisis Histologis
Hewan Setelah direndam dalam formalin, sampel vagina dipotong
Tikus Sprague–Dawley betina (n = 24, 210–240 g), diperoleh dari menjadi 4-μm bagian tebal dan diwarnai menggunakan kit
Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co. Ltd. (Beijing, pewarnaan HE (Beyotime Biotechnology, Beijing, China)
China), dipelihara dalam kandang di bawah siklus 12 jam terang/ 12 sesuai dengan instruksi pabrik. Jaringan kemudian didehidrasi
jam gelap dengan akses gratis ke makanan dan air komersial . dengan perendaman dalam seri alkohol gradien diikuti
dengan pembersihan xilena. Setelah disegel dengan balsam
netral, jaringan dievaluasi untuk perubahan patologis di
Vaginitis Kandidat Eksperimental bawah mikroskop (Olympus).
Garis waktu perawatan hewan percobaan dan pengumpulan
sampel ditunjukkan pada: Gambar 1. Sebelum infeksi, hewan
menerima injeksi subkutan 0,5 mg estradiol benzoat (Estradiolo,
Imunohistokimia
Bagian diinkubasi semalaman pada suhu 4◦C dengan berikut
Amsa Farmaceutici, Roma, Italia) dengan interval 2 hari
deteksi antibodi: anti-tikus-IFN-γ (1:100),
sampai akhir percobaan untuk menginduksi imunosupresi primer (
anti-tikus-IL-4 (1:200), anti-IL-17 (1:50) (semua poliklonal kelinci,
Zhang dkk., 2018). Aktivitas hormonal dinilai dengan analisis sel epitel
Cloud-Clone, Amerika Serikat), dan anti-IgG (RP215, disediakan
berinti dalam apusan cairan vagina yang diverifikasi di bawah mikroskop
oleh Departemen Imunologi , Pusat Ilmu Kesehatan Universitas
cahaya; sel cornified berinti menunjukkan fase pseudo-estrus (Mandl,
Peking; 1:100). Bagian kemudian diinkubasi dengan Ig anti-kelinci
1951). Tikus diinokulasi secara intravaginal dengan suspensi ragi 1× 108
terkonjugasi peroksidase lobak (Zhongshan Golden Bridge
ragi/mL (dalam 150 mL larutan garam steril) dicuci C. albicans
Biotechnology) dan imunoreaktivitas dikembangkan
blastokonidia. Empat hari setelah inokulasi tetapi sebelum pengobatan,
menggunakan 3,3kan-diaminobenzidine (DAB) sistem substrat.
sampel diperoleh dari rongga vagina untuk konfirmasiC. albicans infeksi
Bagian kontrol negatif diinkubasi dengan PBS bukan antibodi
dengan pewarnaan Gram dari bentuk seperti ragi/hifa dan sel-sel vagina
primer. Analisis semi-kuantitatif dilakukan oleh ahli patologi
yang diamati di bawah mikroskop cahaya.
berpengalaman berdasarkan IRS (Dereci dkk., 2017) dihitung
dengan mengalikan skor SP: 0, <10%; 1, 10–25%; 2, 26–50%; 3, 51–
75%; 4, 76–100%) dan skor SI: 0, negatif; 1, ringan; 2, sedang; 3,
Tikus secara acak dibagi menjadi empat kelompok (n = 6 tikus per
parah).
kelompok). Pada 24 jam setelah infeksi awal, tikus secara acak dibagi
menjadi empat kelompok berikut (n = 6 tikus per kelompok); (a) tidak
terinfeksi (Kontrol, inokulasi vagina dengan larutan garam 0,9%); (b) Pemeriksaan Mikroskop Elektron Transmisi
terinfeksi (Model, inokulasi vagina dengan larutan garam 0,9%); (c) (TEM)
terinfeksi tetapi menerima intravaginal Potongan jaringan vagina dihilangkan, difiksasi (3% glutaraldehid dan
L. crispatus (sekitar 3.0 × 108 CFU/mL) sekali sehari selama 1% osmium tetroksida), didehidrasi dalam seri etanol bertingkat dan
7 hari; dan (d) terinfeksi tetapi menerima intravaginal disematkan dalam resin PON812 (SPI, West Chester, PA, Amerika
L. delbrueckii (sekitar 3.0 × 108 CFU/mL) sekali sehari selama 7 Serikat). Jaringan itu. kemudian diwarnai dengan uranil asetat 5% dan
hari. Pada 1 (Hari 28) dan 4 hari (Hari 31) setelahnya timbal sitrat. Perubahan ultrastruktur pada jaringan vagina

GAMBAR 1 | Garis waktu perlakuan hewan coba dan pengambilan sampel.

Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org 3 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033

Li dkk. Lactobacillus Pengobatan VVC

diamati di bawah JEM 1230 TEM (JEOL Co., Hitachi Ltd.,

Tokyo, Jepang) dan difoto.
Desmosom dalam epitel diidentifikasi dan dihitung oleh
dua peneliti independen sesuai dengan metode yang
dijelaskan sebelumnya (Capocelli dkk., 2015). Desmosom
diidentifikasi dan dikuantifikasi sebagai diskrit,
hiperdensitas linier di sepanjang membran seluler luar
yang memberikan integritas struktural pada jaringan. Fitur
morfologi tambahan dari epitel diidentifikasi secara
independen oleh dua peneliti.

Analisis statistik
Semua data dianalisis menggunakan software analisis statistik
SPSS 13.0. Data mewakili mean± simpangan baku (n = 6 hewan
per kelompok) dari tiga percobaan independen. Variabel
kuantitatif diuji untuk distribusi normal dan data dibandingkan GAMBAR 2 | Pewarnaan gram dari swab vagina dari Model (SEBUAH) dan Lactobacillus
menggunakan analisis varians faktor tunggal (ANOVA) -tikus yang dirawat (B–D). Candida albicans hifa (panah hitam) yang menempel pada sel
menggunakan perangkat lunak Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, epitel vagina. ProbiotikLactobacillus mengelilingi dan menghambat pertumbuhan C.
albicans hifa. Bilah skala = 20μm, perbesaran × 1.000. Model (tanpa perawatan);L. crispatus
Amerika Serikat). Tes LSD Fisher digunakan untuk mengevaluasi
dirawat (3,0 × 108 CFU selama 7 hari, pewarnaan Gram-positif); L. delbrueckii dirawat (3,0 ×
perbedaan antara dua kelompok.P < 0,05 dianggap menunjukkan
108 CFU selama 7 hari, pewarnaan Gram-positif); dan Sembuh (3,0× 108 CFU dari L.
signifikansi statistik. crispatus selama 7 hari, pewarnaan Gram-negatif).

HASIL

L. crispatus dan L. delbrueckii

Melindungi dari C. albicans di VVC Tikus
Untuk membandingkan efek antijamur dari L. crispatus dan
L. delbrueckii, tikus terinfeksi secara intravaginal dengan mukosa C.
albicans. Pada 1 dan 4 hari setelah dosis terakhir, sampel diperoleh dari
semua hewan, dan dinilai dengan pewarnaan Gram. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa pemberian per vaginamL. crispatus atau
L. delbrueckii dilakukan dengan cara yang sama, anti-C. albicans efek
vaginitis. Di antara tikus Model yang tidak diobati yang tetap
terinfeksi, semua usapan vagina dinyatakan positifC. albicans, dengan
sel-sel epitel ditembus oleh hifa (Hari 31, Gambar 2A). Namun, dua
dari enam tikus dengan usapan vagina positif adalah pewarnaan GAMBAR 3 | Jumlah unit pembentuk koloni (CFU)/mL sampel jaringan vagina yang
diperoleh dari tikus (n = 6 ekor/kelompok) pada 1 hari (SEBUAH) dan 4 hari (B) setelah
Gram-negatif setelah menerima intravaginalL. crispatus atau
perlakuan dan diinkubasi pada agar Sabouraud dextrose. Tikus Sprague-Dawley betina
L. delbrueckii (Hari 31), menunjukkan kurang dari setengah dari tikus
yang tidak terinfeksi digunakan sebagai kontrol. Tikus model terinfeksi dengan 1× 108 CFU/
yang terinfeksi disembuhkan. Tingkat konversi patogen negatif dari ml C. albicans. Kontrol (tidak terinfeksi); Model: terinfeksi 1× 108 CFU/ml C. albicans; L.
L. crispatus pada 1 (Hari 28) dan 4 (Hari 31) setelah pengobatan crispatus diobati: terinfeksi dan diobati dengan
masing-masing mencapai 33,3% (2/6), dan 33,3% (2/6), dan tidak L. crispatus 3.0 × 108 CFU selama 7 hari; L. delbrueckii diobati: terinfeksi dan
diobati dengan L. delbrueckii 3.0 × 108 CFU selama 7 hari.
ada perbedaan yang signifikan dibandingkan dengan tingkat
konversi patogen negatif dari sesuai L. delbrueckii kelompok [0%
(0/6) pada 1 hari (Hari 28) dan 33,3% pada 4 hari (Hari 31) setelah
pengobatan; P > 0,05; Angka 2B–D]. CFU di L. crispatus (9.33 ± 3.42 × 103), dan L. delbrueckii (12.17 ± 4.58 ×
Selanjutnya, kami menilai efek antijamur intravaginal 103) kelompok secara signifikan lebih rendah daripada kelompok
L. crispatus atau L. delbrueckii pada beban jamur dengan mengukur Model (Gambar 3B dan Tabel 1; P < 0,001). Tidak ada perbedaan yang
pembentukan koloni (Gambar 3). Pada awal, tikus kontrol bebas dari signifikan dalam rata-rata CFU diL. crispatus, dan L. delbrueckii
C. albicans. Rata-rata CFU/mL untukC. albicans pada Hari 28 adalah kelompok pada satu (Hari 28) atau 4 hari (Hari 31) setelah perlakuan (P
49.00 ± 2.77 × 103 pada kelompok Model pada Hari ke 28, dan diikuti > 0,05).
oleh penurunan yang lambat pada vagina Kandidat beban ke 34,17 ±
3.78 × 103 pada Hari 31. Satu hari setelah perawatan (Hari Analisis Morfometrik
28), rata-rata CFU dalam L. crispatus (14.00 ± 4.73 × 103) dan L. delbrueckii ( Kami melakukan pewarnaan HE dan analisis TEM dari perubahan
18.17 ± 2.24 × 103) kelompok secara signifikan lebih rendah dibandingkan anatomi dan ultrastruktural untuk mengevaluasi sifat probiotik dari
dengan kelompok Model (Gambar 3A dan Tabel 1; P < 0,001). Empat hari keduanya. Lactobacillus ketegangan. Epitel dan mukosa pada hewan
setelah perawatan (Hari ke-31), rata-rata Kontrol yang tidak terinfeksi tampak normal, tanpa tanda-tanda

Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org 4 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033

Li dkk.
TABEL 1 | Jumlah hewan yang tidak terinfeksi dan kuantifikasi beban jamur.
Kelompok pengobatan Kontrol
Hari 1 setelah perawatan (Hari 28) CFU/mL (×103) Tikus yang tidak 0.00 ± 0.00
terinfeksi (N/n)sebuah 6/6
Hari 4 setelah perawatan (Hari 31) CFU/mL (×103) Tikus yang 0.00 ± 0.00
tidak terinfeksi (N/n) 6/6
sebuahN, jumlah hewan yang tidak terinfeksi/n: total hewan per kelompok.
peradangan, dan lapisan tebal stratum korneum diamati di
saluran vagina. Semua hewan Model menunjukkan keputihan
abnormal dan pembengkakan jaringan, serta peradangan epitel
yang parahKandidat infeksi. Pewarnaan HE mengungkapkan
kerusakan serius pada mukosa vagina, dengan pengelupasan sel
epitel dan infiltrasi sel inflamasi, setelah infeksi denganC. albicans
(Gambar 4A). Dibandingkan dengan mukosa Model hewan,
hewan yang diobati denganL. crispatus atau L. delbrueckii selama
7 hari menunjukkan pengurangan yang signifikan dari
peradangan dan kerusakan pada mukosa epitel vagina. Selain itu,
pemulihan mukosa yang hampir lengkap diamati meskipun
beberapa sel inflamasi bertahan di permukaan mukosa dan di
lamina propria.Angka 4B,C). Beberapa jaringan yang rusak
diamati dengan pemulihan lengkap dari mukosa vagina yang
sehat (Gambar 4D).
L. crispatus dan L. delbrueckii
Mempromosikan Integritas Morfologi
Ultrastruktural Vagina
Penghalang Mukosa
Di bawah pengamatan TEM, penghalang mukosa vagina normal
terdiri dari sel-sel epitel skuamosa non-keratin berlapis yang padat
(yaitu, desmosom, sebagai plak kaku yang mempertahankan
GAMBAR 4 | Histologi bagian jaringan vagina dari Model (SEBUAH) dan Lactobacillus-tikus
yang dirawat (B–D), diwarnai dengan hematoxylin-eosin. Epitel vagina yang rusak (panah
biru), sel epitel vagina yang terkelupas (kotak merah), dan neutrofil (panah kuning) yang
menginfiltrasi epitel vagina ditampilkan. Bilah skala = 50μM. Model (tanpa perawatan);L.
crispatus-diperlakukan (3.0 × 108 CFU selama 7 hari, dengan infiltrasi neutrofil); L.
delbrueckii-diperlakukan (3.0 × 108 CFU selama 7 hari, dengan infiltrasi neutrofil); dan
Sembuh (3,0× 108 CFU dari
L. crispatus selama 7 hari, tanpa infiltrasi neutrofil).
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
Lactobacillus Pengobatan VVC
Model L. crispatus L. delbrueckii P-nilai
49.00 ± 2.77 14.00 ± 4.73 18.17 ± 2.24 <0,001
0/6 2/6 0/6
34.17 ± 3.78 9.33 ± 3.42 12.17 ± 4.58 <0,001
0/6 2/6 2/6
integritas jaringan dan adhesi antar sel) dengan banyak
pseudopoda atau mikrovili yang utuh seperti jari dan/atau seperti
gelembung pada permukaannya (Angka 5A,B). Struktur
desmosom yang biasa diidentifikasi dengan jelas oleh adanya
plak padat luar dan dalam pada sisi sitoplasma membran plasma.
SetelahC. albicans infeksi, neutrofil dan spora yang menginfiltrasi
epitel vagina dan lamina propria diamati. Sesuai dengan
penelitian sebelumnya (Harmoni dan Hijau, 2013), evaluasi
histologis menunjukkan bahwa ruang intraseluler diperbesar,
sambungan desmosomal secara signifikan terganggu dan kabur,
dan vakuolisasi sitoplasma hadir pada non-keratinosit dan
disjungsi antar sel (Angka 5C,D). Jumlah desmosom per sel
berkurang secara signifikan di epitel setelah tantangan
dibandingkan dengan di epitel normal (43,67± 8.43 vs. 12.33 ±
4.32, P < 0,0001). Secara intraseluler, mitokondria menunjukkan
pembengkakan, serta deformasi dan pembubaran puncak.
Selanjutnya, dibandingkan dengan kelompok Model, kami
mengamati peningkatan ultrastruktur yang nyata pada epitel
vagina setelah pengobatan dengan salah satu dari Lactobacillus
strain, dengan pengurangan yang signifikan dalam jumlah ragi
perekat, persimpangan seperti desmosom dan bentuk hifa.
Morfologi mitokondria normal atau hanya menunjukkan sedikit
pembengkakan padaL. crispatus (Angka 5E,F) atau L. delbrueckii
kelompok (Angka 5G,H) jika dibandingkan dengan kelompok
Model. Jumlah desmosom dalamL. crispatus kelompok meningkat
secara signifikan dibandingkan dengan kelompok Model (34,67 ±
7.61, P < 0,0001; Gambar 6). Selain itu, jumlah desmosom dalamL.
delbrueckii kelompok (37,83 ± 6.97) hampir sama dengan yang
diamati pada epitel normal (Gambar 6; P = 0.443). Pengamatan ini
menunjukkan bahwaLactobacillus menginduksi restorasi parsial
mukosa.
L. crispatus dan L. delbrueckii Memodulasi
Pelepasan Sitokin oleh Vagina
Jaringan epitel
Studi imunohistokimia kami mengungkapkan peningkatan
ekspresi IFN-γ (IRS: 4.17 ± 2,57 vs 8,17 ± 2.57) dan IL-17
(IRS: 4.67 ± 2.07 vs. 6.33 ± 2.88), menunjukkan stimulasi
respon imun tipe Th 1 dan Th 17 di epitel vagina berikut
C. albicans infeksi. Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan
dalam skor IRS untuk IFN-γ (P = 0,055, Gambar 7A), IL-4 (P =
0,082, Gambar 7B), dan IL-17 (P = 0,017, Gambar 7C) di antara
kelompok. Rasio IFN-γ/IL-4 dihitung untuk mencerminkan
keseimbangan Th1/Th2 (Meja 2). Ketika ditantang dengan
C. albicans, rasio IFN-γ/IL-4 secara signifikan lebih tinggi daripada hewan
yang tidak diberi perlakuan (0,47 ± 0,24 vs 1,26 ± 0,87, P = 0,012).
5 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033
Li dkk. Lactobacillus Pengobatan VVC

GAMBAR 5 | Perubahan ultrastruktur pada mukosa vagina tikus diamati dengan mikroskop elektron transmisi. Kontrol, tidak terinfeksi (A, B); Model, terinfeksi 1 × 108 CFU/
ml C. albicans (CD); L. crispatus diobati, terinfeksi dan diobati dengan L. crispatus 3.0 × 108 CFU selama 7 hari (E, F); L. delbrueckii diobati, terinfeksi dan diobati dengan L.
delbrueckii 3.0 × 108 CFU selama 7 hari (G, H). Tikus pada kelompok Kontrol menunjukkan morfologi vagina normal dengan epitel skuamosa berlapis non-keratin dan
mikrovili utuh (panah hitam) diperpanjang oleh sel epitel vagina. Sel ragi (panah biru) menginvasi lapisan superfisial mukosa vagina, dengan luka seperti desmosom (panah
kuning) dan mitokondria (M) bengkak setelah infeksi 1× 108 CFU/ml C. albicans.

Sebaliknya, rasionya secara signifikan lebih rendah di L.
crispatus grup mengikuti in vivo tantangan (0,43 ± 0,26, P =
0,009) dibandingkan dengan di L. delbrueckii grup (0,80 ±
0,36, P = 0,219), yang rasionya mirip dengan jaringan normal (
P > 0,05).
Meskipun mukosa vagina bertindak sebagai penghalang terhadap invasi
patogen, tidak ada bukti langsung bahwa molekul Ig yang diekspresikan melalui
vagina berkontribusi terhadap aktivitas antimikroba. Itu
antibodi monoklonal RP215 mengikat secara khusus ke epitop
glikosilasi unik pada sel non-B, IgG yang diturunkan dari epitel.
Pewarnaan R215-positif yang kuat terdeteksi di sitoplasma sel
epitel vagina normal, sedangkan pewarnaan pada jaringan
submukosa lemah. Ada perbedaan yang signifikan dalam skor IRS
untuk IgG yang diturunkan dari epitel di antara kelompok (P =
0,006, Gambar 7D). Skor IRS untuk IgG epitel yang disekresikan
oleh mukosa vagina adalah 10,50± 2.51, yang turun tajam

Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org 6 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033

Li dkk. Lactobacillus Pengobatan VVC

GAMBAR 6 | Kuantifikasi desmosom oleh TEM. Ultrastruktur desmosom pada epitel vagina tikus yang diamati oleh TEM. Kontrol, tidak terinfeksi (SEBUAH); Model, terinfeksi
1 × 108 CFU/ml C. albicans (B); L. crispatus diobati, terinfeksi dan diobati dengan L. crispatus 3.0 × 108 CFU selama 7 hari (C); L. delbrueckii diobati, terinfeksi dan diobati
dengan L. delbrueckii 3.0 × 108 CFU selama 7 hari (D). Persimpangan seperti desmosom (panah kuning) berkurang secara signifikan, dan ruang antara sel epitel yang
bersebelahan melebar pada tikus Model. Jumlah desmosom per sel (E) dalam Kontrol normal, Model, L. crispatus dirawat dan L. delbrueckii tikus yang dirawat. Data
mewakili mean± simpangan baku (n = 6). *P < 0,05; **P < 0,01; ***P < 0,001.

GAMBAR 7 | Ekspresi IFN-γ, IL-4 dan IL-17 di jaringan vagina. Analisis semi-kuantitatif dengan skor imunoreaktivitas (IRS) IFN-γ, IL-4 dan IL-17 yang dideteksi secara
imunohistokimia. Kontrol, tidak terinfeksi (SEBUAH); Model, terinfeksi 1 × 108 CFU/ml C. albicans (B); L. crispatus diobati, terinfeksi dan diobati dengan L. crispatus
3.0 × 108 CFU selama 7 hari (C); L. delbrueckii diobati, terinfeksi dan diobati dengan L. delbrueckii 3.0 × 108 CFU selama 7 hari (D). Data mewakili mean ± simpangan baku (n
= 6). Bilah skala = 50μM.

TABEL 2 | Skor imunoreaktivitas (IRS) rasio Th1/Th2 (IFN-γ/IL-4) (n = L. delbrueckii kelompok (12.00 ± 0.00, P = 0,153), yang mencapai
6, ANAVA).
nilai dasar (P > 0,05).
Th1/Th2 skor IRS F-nilai P-nilai

Kontrol 0,47 ± 0.24sebuah 3.563 0,033 DISKUSI

Model 1.26 ± 0,87
L. crispatus 0.43 ± 0,26sebuah Lactobacillus adalah Gram-positif berbentuk batang, bakteri
L. delbrueckii 0,80 ± 0.36 penghasil asam laktat yang sebagian besar anaerob obligat dan
fakultatif dan terutama ditemukan di saluran genitourinari
sebuahP < 0,05 dibandingkan dengan Model.
manusia (Gupta dkk., 1998). ItuLactobacillus hadir dalam vagina
penting dalam mencegah infeksi vagina, seperti BV dan VVC, dan
infeksi berikut (6,67 ± 3.27; P = 0,010). Namun, ketika diobati invasi oleh mikroorganisme patogen, termasuk human
denganL. crispatus, skor meningkat secara signifikan (10.00 ± papillomavirus, dan human immunodeficiency virus (Reid dan
2.19, P = 0,022) dengan pola serupa yang diamati pada Bocking, 2003). Antimikroba yang tersedia saat ini

Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org 7 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033

Li dkk.
pengobatan untuk infeksi vagina berhubungan dengan efektivitas
yang tidak lengkap yang menyebabkan infeksi berulang,
resistensi obat, dan efek samping; Oleh karena itu, obat alternatif
sangat dibutuhkan. Dalam beberapa tahun terakhir, penggunaan
LactobacillusBakteri probiotik yang diturunkan telah muncul
sebagai strategi baru untuk pengelolaan infeksi vagina. Namun,
penyelidikan aktivitas antijamur dari strain probiotik kurang
umum daripada penyelidikan aktivitas antibakterinya.Chew dkk.,
2015). Kami sebelumnya telah menunjukkan bahwa probiotik
Lactobacillus dapat melemahkan virulensi C. albicans dengan
memodulasi sekresi sitokin dan kemokin dan meningkatkan
respon imun bawaan in vitro (Niu dkk., 2017). Karakteristik
fungsional probiotik harus ditetapkan berdasarkan keduanya:in
vitro dan in vivo studi. Dalam penelitian ini, pengiriman
intravaginal dariLactobacillus strain selama 7 hari menghambat in
vivo pertumbuhan Kandidat spesies antara 60 dan 70%. Dengan
demikian, model hewan ini memberikan bukti yang jelas tentang
efek fungisida atau kandididasida dari kedua probiotik
Lactobacillus ketegangan. Lopes dkk. (2017) melaporkan bahwa L.
delbrueckii menunjukkan tidak ada aktivitas antimikroba
terhadap patogen, terutama karena tidak adanya produksi asam
organik. Namun, dalam penelitian ini, efek antijamur dariL.
delbrueckii mirip dengan L. crispatus, yang diyakini berkontribusi
pada kontrol mikrobiota vagina dengan bersaing dengan
mikroflora lain untuk kolonisasi sel epitel vagina (McLean dan
Rosenstein, 2000), serta membebaskan H2HAI2 dan zat lain yang
memediasi aktivitas antijamur intraseluler (Strus et al., 2006).
Temuan ini menunjukkan potensi kedua probiotik iniLactobacillus
strain sebagai adjuvant andalan dalam pengobatan klinis VVC.
Namun, aktivitas antijamur probiotikLactobacillus strain sangat
kompleks dan membutuhkan penyelidikan lebih lanjut (Ogunshe
et al., 2011).
Mempertahankan penghalang epitel vagina sangat penting
karena menjaga keseimbangan antara mikroorganisme komensal
dan inang. Salah satu manfaat kesehatan potensial dari probiotik
adalah penekanan respon inflamasi (Isolauri et al., 2002). Dalam
penelitian kami saat ini, peningkatan regulasi sitokin proinflamasi
olehC. albicans infeksi menyarankan proliferasi sel T (IFN-γ dan
IL-17) dan aktivasi sel T (Bäuerl et al., 2013), ketika Lactobacillus
pengobatan menginduksi pengurangan parsial dalam rasio Th1/
Th2. Pengamatan ini menunjukkan bahwa kedua strain
menetralkan peristiwa molekuler yang mengarah ke aktivasi sel T,
seperti yang telah ditunjukkan sebelumnya untuk strain probiotik.
L. paracasei (Bäuerl et al., 2013), L. plantarum (Bäuerl et al., 2013),
dan L. casei (Carol et al., 2006). keduanya Lactobacillus strain yang
digunakan dalam penelitian ini, dan khususnya
L. crispatus, mampu mengubah profil sitokin sel epitel vagina,
sehingga mengarahkan pola kekebalan ke mode regulasi atau
toleran yang menyeimbangkan rasio Th1/Th2, dan menekan
produksi sitokin proinflamasi (misalnya, IL17 dan IFN-γ),
meskipun perbedaan ini tidak signifikan secara statistik, yang
sesuai dengan laporan sebelumnya (Wasilewska et al., 2019).
Penurunan produksi IFN-γ, sitokin Th1 yang khas, bisa
menjadi fitur probiotik yang sangat menarik (Bäuerl et al.,
2013). Meskipun penting untuk kekebalan bawaan dan adaptif
terhadap patogen intraseluler,
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
Lactobacillus Pengobatan VVC
perbedaan Th1-bias yang berkepanjangan dengan rasio Th1/Th2 yang
terus-menerus tinggi menyebabkan sitotoksisitas yang dimediasi sel,
dan respons inflamasi (Barousse et al., 2004; Ouyang dkk., 2008).
Secara bersama-sama, temuan ini lebih lanjut mendukung hipotesis
bahwa Lactobacillus memainkan peran penting dalam menjaga
homeostasis imun dengan mengatur sekresi sitokin oleh sel epitel (
Bäuerl et al., 2013), dan dalam hal ini, L. crispatus pengobatan lebih
efektif daripada L. delbrueckii. Penginderaan, dan pensinyalan yang
diinduksi oleh,Lactobacillus memerlukan penyelidikan lebih lanjut.
Lactobacillus-protein turunan (Yan dan Polk, 2012) dan pengasaman
yang diinduksi asam laktat mungkin merupakan fungsi
imunomodulator yang menekan respons IFN-γ sel imun yang terkait
dengan jalur pensinyalan Janus kinase/STAT dan menghambat
produksi sitokin yang memediasi imunitas bawaan (Fischer et al., 2007
).
Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa IgG yang
diturunkan dari epitel fungsional (RP215 positif) disekresikan oleh sel
epitel vagina in vitro. Temuan ini menantang konsep klasik bahwa sel
B adalah satu-satunya sumber imunoglobulin.Li dkk., 2016).
Imunoglobulin ini tampaknya berpartisipasi dalam imunitas bawaan
kulit (Jiang dkk., 2015) dan dapat berfungsi sebagai antibodi alami
(tampaknya cabang imunitas humoral yang paling kontroversial),
yang tidak hanya mengenali dan menetralkan produk mikroba
antigenik (Amabebe dan Anumba, 2018), tetapi juga memberikan
memori imunologis jangka panjang yang meningkatkan kemanjuran
terapi azol standar dan mencegah kekambuhan (Khasbiullina dan
Bovin, 2015). Penelitian pada hewan kami mengkonfirmasi hipotesis
kami bahwa IgG non-B diekspresikan dalam epitel vagina, respons
yang tampaknya berkurang oleh infeksi mikotik, tetapi dapat
dipulihkan denganLactobacillus perlakuan. Studi lebih lanjut
diperlukan untuk memastikan mekanisme molekuler dimana
Lactobacillus berpartisipasi dalam imunitas mukosa di vagina terkait
dengan IgG yang diturunkan dari epitel.
Manfaat kesehatan potensial lainnya dari Lactobacillus
pengobatan disediakan oleh kelangsungan hidup sel epitel
ditingkatkan dan fungsi penghalang (Yan dan Polk, 2012; Yan dkk.,
2017). Analisis ultrastruktural dengan mikroskop elektron
memverifikasi beberapa fitur utama:in vivo jaringan epitel vagina,
seperti adanya desmosom dan mitokondria. Dalam jaringan epitel,
sel-sel terikat satu sama lain melalui kompleks junctional misalnya
desmosom, untuk menjaga integritas jaringan, dan melindungi
terhadap lingkungan eksternal.Hijau dan Gaudry, 2000). Infeksi
dengan patogenC. albicans tidak hanya secara signifikan merangsang
sel-sel inflamasi, tetapi juga menginduksi perubahan ultrastruktural
yang signifikan pada sel inang, seperti penghambatan perakitan
desmosom, yang pada akhirnya menyebabkan berkurangnya
kekuatan perekat.Kowalczyk dan Green, 2013). Desmosom, salah satu
jenis sambungan antar sel yang dominan pada jaringan vertebrata,
ditantang oleh berbagai faktor seperti toksin, patogen, dan faktor
inflamasi, yang berpotensi menyebabkan kerusakan jaringan.
Celentano dan Cirillo, 2017). Kerusakan pada epitel, yang dapat
menjadi konsekuensi dari proses inflamasi itu sendiri, terkait dengan
gangguan penghalang ini, dan lewatnya mikroorganisme atau
molekul patogen, efek yang secara positif dipengaruhi oleh probiotik,
yang menstabilkan fungsi penghalang. Ada beberapa laporan terkait
dengan efek probiotikLactobacillus pada "pemulihan" mukosa vagina.
8 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033
Li dkk.
Lactobacillus telah dilaporkan untuk mengurangi kerusakan pada
DNA sel epitel (Yeh dkk., 2007), mengurangi permeabilitas epitel,
dan melemahkan respon inflamasi (Ahrne dan Hagslatt, 2011).
Lactobacillus juga telah dilaporkan untuk mencegah perlekatan
mikroorganisme patogen yang diperlukan untuk memberikan
efeknya pada permeabilitas paraseluler melalui peningkatan
produksi musin MUC3 (Ahrne dan Hagslatt, 2011) dan
memperbaiki apoptosis epitel dengan memproduksi Lactobacillus
protein larut yang diturunkan dengan cara yang bergantung
pada reseptor EGF (Yan dan Polk, 2012). Mitokondria dipengaruhi
oleh banyak sinyal vital yang terlibat dalam regulasi metabolisme
energi dan kelangsungan hidup sel. Sinyal-sinyal ini
meningkatkan atau mencegah kelangsungan hidup sel dengan
memodulasi fungsi dan struktur mitokondria.Sedlackova dan
Korolchuk, 2018). Infeksi jamur secara langsung atau tidak
langsung merusak ultrastruktur mitokondria, yang pada akhirnya
menyebabkan kerusakan epitel vagina. Namun, dalam penelitian
ini, kami mengamati peningkatan yang signifikan dalam
ultrastruktur epitel vagina dan mitokondria sel inang setelah
pemberianLactobacillus. Lactobacillus mengerahkan efek anti-
oksidan pelindung dengan mencegah spesies oksigen reaktif
yang dihasilkan mitokondria yang menginduksi kerusakan
membran (Barbonetti dkk., 2013).
Studi ini memberikan bukti yang mengimplikasikan
Lactobacillus sebagai agen bioterapi tambahan potensial
pada wanita dengan VVC, terutama bagi mereka dengan
resistensi obat, efek samping atau kontraindikasi saat
menggunakan agen antijamur. Efek probiotikL. crispatus dan
L. delbrueckii dalam mengobati VVC terutama terlihat dalam
kaitannya dengan perubahan pada mukosa vagina yang
bersifat mikrobiologis, fisiologis dan morfologis. Dalam hal
antijamur, efek anti-inflamasi dan perbaikan mukosa, efek
dariL. crispatus mirip dengan yang komersial
L. delbrueckii perumusan. Hasil yang menjanjikan dari
penelitian ini menyoroti potensiLactobacillus pengobatan VVC
REFERENSI
Ahrne, S., dan Hagslatt, MLJ (2011). Pengaruh lactobacilli pada paracellular
permeabilitas di usus. Nutrisi 3, 104–117. doi: 10.3390/nu3010104
Amabebe, E., dan Anumba, DOC (2018). Lingkungan mikro vagina:
peran fisiologis Lactobacillus. Depan. Med.5:181. doi: 10.3389/fmed.2018.
00181
Anton, L., Sierra, LJ, DeVine, A., Barila, G., Heiser, L., Brown, AG, dkk.
(2018). Supernatan mikroba serviks yang umum mengubah fungsi epitel serviks:
mekanisme yangLactobacillus crispatus berkontribusi pada kesehatan serviks.
Depan. Mikrobiol.9:2181. doi: 10.3389/fmicb.2018.02181
Banerjee, P., Merkel, GJ, dan Bhunia, AK (2009). Lactobacillus delbrueckii ssp.
bulgarikus B-30892 dapat menghambat efek sitotoksik dan adhesi patogen
Clostridium difficile ke sel Caco-2. Usus. Patog.1:8. doi: 10.1186/1757-
4749-1-8
Barbonetti, A., Vassallo, MR, Cinque, B., Filipponi, S., Mastromarino, P., Cifone,
MG, dkk. (2013). Produk larut dariEscherichia coli menginduksi peroksidasi
lipid membran sperma terkait disfungsi mitokondria yang dicegah oleh
lactobacilli. PLoS. Satu8:e83136. doi: 10.1371/journal.pone.0083136 Barousse,
MM, Van Der Pol, BJ, Fortenberry, D., Orr, D., dan Fidel, PL Jr.
(2004). Kolonisasi ragi vagina, prevalensi vaginitis, dan kekebalan lokal terkait
pada remaja.Seks. Transm. Menulari.80, 48–53.
Bäuerl, C., Llopis, M., Antolín, M., Monedero, V., Mata, M., Zúñiga, M.,
dkk. (2013).Lactobacillus paracasei dan Lactobacillus plantarum ketegangan
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
Lactobacillus Pengobatan VVC
dalam praktik klinis memerlukan validasi dalam studi klinis yang dirancang dengan baik
dengan ukuran sampel yang lebih besar dan tindak lanjut jangka panjang.
PERNYATAAN ETIKA
Semua percobaan hewan dilakukan sesuai dengan National
Institutes of Health Guide for the care and Use of Laboratory
Animals. Protokol tersebut disetujui oleh Komite Etik Rumah
Sakit Pertama Universitas Peking (Izin No.
# J201634). Semua hewan ditempatkan di Laboratorium Pusat
Hewan Rumah Sakit Pertama Universitas Peking.
KONTRIBUSI PENULIS
ZL berkontribusi pada konsepsi dan desain eksperimental
utama. TL dan XC melakukan percobaan. TL, XZ, dan SW
menganalisis data dan berkontribusi pada reagen. TL menulis
naskahnya. Semua penulis menyetujui versi final naskah.
PENDANAAN
Pekerjaan ini didukung oleh hibah dari National Natural
Science Foundation of China (Hibah No. 81771530 dan
81801406) dan Program Pemuda Administrasi Rumah
Sakit Kota Beijing (Hibah No. QML20181402).
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis berterima kasih kepada Prof. Xiaoyan Qiu dari Peking
University Center for Human Disease Genomics atas donasinya
sebesar RP215 untuk mendukung penelitian ini.
menurunkan regulasi gen proinflamasi dalam sistem ex vivo dari mukosa kolon
manusia yang dikultur. Nutrisi Gen 8, 165–180. doi: 10.1007/s12263-012-0301-y
Buggio, L., Somigliana, E., Borghi, A., dan Vercellini, P. (2019). Probiotik dan
mikroekologi vagina: fakta atau khayalan? BMC. Kesehatan perempuan19:25. doi: 10.1186/
s12905-019-0723-4
Cadieux, P., Burton, J., Gardiner, G., Braunstein, I., Bruce, AW, Kang, CY, dkk.
(2002). Lactobacillus strain dan ekologi vagina. JAMA 287, 1940–1941.
Capocelli, KE, Fernando, SD, Menard-Katcher, C., Furuta, GT, Masterson,
JC, dan Wartchow, EP (2015). Fitur ultrastruktural esofagitis eosinofilik:
dampak pengobatan pada desmosom.J.klin. Patol.68, 51–56. doi:
10.1136/jclinpath-2014-202586
Carol, M., Borruel, N., Antolin, M., Llopis, M., Casellas, F., Guarner, F., et al. (2006).
Modulasi apoptosis pada limfosit usus oleh bakteri probiotik pada penyakit
Crohn. J. Leukok. Biol.79, 917–922. doi: 10.1189/jlb.0405188 Celentano, A., dan
Cirillo, N. (2017). Desmosom dalam penyakit: panduan untuk dokter.
Lisan. Dis.23, 157–167. doi: 10.1111/odi.12527
Chew, SY, Cheah, YK, Seow, HF, Sandai, D., dan Than, LT (2015). Probiotik
Lactobacillus rhamnosus GR-1 dan Lactobacillus reuteri RC-14 menunjukkan efek
antijamur yang kuat terhadap penyebab kandidiasis vulvovaginal candida glabrata
terisolasi. J. Aplikasi Mikrobiol.118, 1180-1190. doi: 10.1111/jam.12772 Dereci, ,
Akgün, , Celasun, B., ztürk, A., and Günhan, (2017). Histologik
evaluasi kemungkinan transformasi granuloma sel raksasa perifer dan
fibroma pengerasan perifer: studi pendahuluan. India J. Pathol. Mikrobiol.
60, 15-20. doi: 10.4103/0377-4929.200032
9 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033
Li dkk.
Dovnik, A., Golle, A., Novak, D., Arko, D., dan TakaČ, I. (2015). Pengobatan
kandidiasis vulvovaginal: tinjauan literatur. Akta. Dermatovenerol. Puncak gunung.
Pannonica Adriat.24, 5-7.
Fischer, K., Hoffmann, P., Voelkl, S., Meidenbauer, N., Ammer, J., Edinger, M.,
dkk. (2007). Efek penghambatan asam laktat yang diturunkan dari sel tumor pada sel T manusia.
Darah 109, 3812–3819.
Fuller, R. (1999). “Probiotik untuk hewan ternak,” diProbiotik. Tinjauan Kritis, ed.
GW Tannock (Wymondham: Horizon Scientific Press), 15–22.
Hijau, KJ, dan Gaudry, CA (2000). Apakah desmosom lebih dari sekadar tambatan untuk
filamen menengah? Nat. Pdt. Biol Sel.1, 208–216.
Gupta, K., Stapleton, AE, Hooton, TM, Roberts, PL, Fennell, CL, dan Stamm,
KAMI (1998). Asosiasi terbalik dari H2HAI2-menghasilkan laktobasilus dan vagina
Escherichia coli kolonisasi pada wanita dengan infeksi saluran kemih berulang.
J. Menginfeksi. Dis.178, 446–450. doi: 10.1086/515635
Harmon, RM, dan Hijau, KJ (2013). Keanekaragaman struktural dan fungsional
desmosom. Sel. komuni. perekat.20, 171–187. doi: 10.3109/15419061.2013.
855204
Isolauri, E., Rautava, S., Kalliomäki, M., Kirjavainen, P., dan Salminen, S. (2002).
Penelitian probiotik: belajar dari bukti. Alergi 57, 1076–1077.
Jiang, D., Ge, J., Liao, Q., Ma, J., Liu, Y., Huang, J., dkk. (2015). IgG dan IgA
dengan aktivitas pengikatan mikroba potensial diekspresikan oleh sel-sel
epidermis kulit manusia normal. Int. J. Mol. Sci.16, 2574–2590. doi: 10.3390/
ijms16022574 Khasbiullina, NR, dan Bovin, NV (2015). Hipotesis asal usul alam
antibodi: pendapat ahli glikobiologi. Biokimia 80, 820–835. doi: 10.1134/
S0006297915070032
Kim, JM, dan Park, YJ (2017). Probiotik dalam pencegahan dan pengobatan
infeksi vagina pascamenopause: artikel ulasan. J.Menopause. Med.23, 139–
145. doi: 10.6118/jmm.2017.23.3.139
Kowalczyk, AP, dan Hijau, KJ (2013). Struktur, fungsi dan regulasi
desmosom. Prog. mol. Biol. terjemahan Sci.116, 95–118. doi: 10.1016/B978-0-12-
394311-8.00005-4
Lamont, RF (2003). Infeksi dalam prediksi dan antibiotik dalam pencegahan
persalinan prematur spontan dan kelahiran prematur. BJOG 110, 71-75.
Laue, C., Papazova, E., Liesegang, A., Pannenbeckers, A., Arendarski, P., Linnerth,
B., dkk. (2018). Efek minuman yoghurt yang mengandungLactobacillus strain pada
vaginosis bakteri pada wanita - uji coba klinis tersamar ganda, acak, dan terkontrol.
manfaat. mikrob.9, 35-50. doi: 10.3920/BM2017.0018
Li, T., Niu, X., Zhang, X., Wang, S., dan Liu, Z. (2016). Supositoria Baofukang
mempromosikan perbaikan sel epitel vagina sebagai respons terhadap Candida albicans.
AMB Exp. 6:109. doi: 10.1186/s13568-016-0281-1
Lopes, EG, Moreira, DA, Gullón, P., Gullón, B., Cardelle-Cobas, A., dan Tavaria,
FK (2017). Aplikasi topikal probiotik pada kulit: uji adhesi, antimikroba
dan antibiofilm in vitro.J. Aplikasi Mikrobiol.122, 450–461. doi: 10.1111/
jam.13349
Mandl, AM (1951). Fase siklus estrus pada tikus putih dewasa.J. Eks.
Biol. 28, 576–584.
McLean, NW, dan Rosenstein, IJ (2000). Karakterisasi dan pemilihan
sebuah Lactobacillus spesies untuk menjajah kembali vagina wanita dengan
vaginosis bakteri berulang. J. Med. Mikrobiol.49, 543–552. doi:
10.1099/0022-1317-49- 6-543
Melgao, ACC, Blohem Pessoa, WF, Freire, HP, Evangelista de Almeida, M.,
Santos Barbosa, M., Passos Rezende, RT, dkk. (2018). Potensi menjaga
lingkungan vagina yang sehat dengan duaLactobacillus strain diisolasi dari
fermentasi kakao. Bioma. Res. Int.2018:7571954. doi: 10.1155/2018/7571954
Niu, XX, Li, T., Zhang, X., Wang, SX, and Liu, ZH (2017).Lactobacillus
crispatus memodulasi respons bawaan sel epitel vagina terhadap Candida albicans.
Dagu. Med. J.130, 273–279. doi: 10.4103/0366-6999.198927
Ogunshe, AA, Omotoso, MA, dan Bello, VB (2011). secara in vitro
aktivitas antimikroba metabolit dari Lactobacillus tegang Kandidat spesies
yang terlibat dalam Candida vaginitis. Melayu. J. Med. Sci.18, 13–25. Ouyang,
W., Chen, S., Liu, Z., Wu, Y., dan Li, J. (2008). Sitokin Th1/Th2 lokal
ekspresi pada kandidiasis vagina murine eksperimental. J. Huazhong. Univ. Sci.
teknologi. Med. Sci.2008, 352–355.
Palacios, S., Espadaler, J., Fernández-Moya, JM, Prieto, C., dan Salas, N. (2016).
Apakah mungkin untuk mencegah vulvovaginitis berulang? Peran dari
Lactobacillus plantarum I1001 (CECT7504). eur. J.klin. Mikrobiol. Menulari. Dis.
35, 1701–1708.
Perbatasan dalam Mikrobiologi | www.frontiersin.org
Lactobacillus Pengobatan VVC
Ravel, J., Gajer, P., Abdo, Z., Schneider, GM, Koenig, SS, McCulle, SL, dkk.
(2011). Mikrobioma vagina wanita usia reproduksi.Prok. Natal akad. Sci. Amerika
Serikat108, 4680–4687. doi: 10.1073/pnas.1002611107
Reid, G., dan Bocking, A. (2003). Potensi probiotik untuk mencegah bakteri
vaginosis dan persalinan prematur. Saya. J. Obstesi. Ginekol.189, 1202–1208.
Santos, CMA, Pires, MCV, Leão, TL, Silva, AKS, Miranda, LS, Martins,
FS, dkk. (2018). Efek anti-inflamasi dari duaLactobacillus strain selama infeksi
dengan Gardnerella vaginalis dan Candida albicans dalam model kultur sel
HeLa. Mikrobiologi 164, 349–358. doi: 10.1099/mic.0.000608
Sedlackova, L., dan Korolchuk, VI (2018). Kontrol kualitas mitokondria sebagai
penentu utama kelangsungan hidup sel. Biokim. Biofis. Akta Mol. Sel. Res.1866, 575–
587. doi: 10.1016/j.bbamcr.2018.12.012
Sobel, JD (2007). Vulvovaginitis kandida.Lanset 369, 1961–1971. doi: 10.1016/
S0140-6736(07)60917-9
Sobel, JD, dan Sobel, R. (2018). Pilihan pengobatan saat ini untuk vulvovaginal
kandidiasis yang disebabkan oleh spesies Candida yang resisten terhadap azole. Pakar.
pendapat apoteker.19, 971–977. doi: 10.1080/14656566.2018.1476490
Song, J., Lang, F., Zhao, N., Guo, Y., dan Zhang, H. (2018). Laktobasilus vagina
menginduksi diferensiasi prekursor monositik menuju sel mirip langerhans:
bukti in vitro. Depan. kekebalan.9:2437. doi: 10.3389/fimmu.2018.02437 Strus,
M., Brzychczy-Włoch, M., Gosiewski, T., Kochan, P., and Heczko, PB
(2006). Efek in vitro hidrogen peroksida pada komunitas mikroba vagina.
FEMS imun. Med. Mikrobiol.48, 56–63.
Strus, M., Brzychczy-Wloch, M., Kucharska, A., Gosiewski, T., dan Heczko, PB
(2005). Penghambatan aktivitas vaginabakteri Lactobacillus pada ragi yang menyebabkan
kandidiasis vulvovaginal. Med. Dow. Mikrobiol.57, 7–17.
Wasilewska, E., Zlotkowska, D., dan Wroblewska, B. (2019). Pemula yoghurt
budaya dari Streptococcus thermophilus dan Lactobacillus bulgaricus memperbaiki
gejala dan memodulasi respon imun pada model tikus kolitis yang diinduksi natrium
dekstran sulfat. J. Ilmu Susu. 102, 37–53. doi: 10.3168/jds.2018- 14520
Witkin, SS, Mendes-Soares, H., Linhares, IM, Jayaram, A., Ledger, WJ, dan
Forney, LJ (2013). Pengaruh bakteri vagina dan isomer asam D-dan L-laktat pada
induser metalloproteinase matriks ekstraseluler vagina: implikasi untuk
perlindungan terhadap infeksi saluran genital bagian atas.mBio. 4:e460-13. doi: 10.
1128/mBio.00460-13
Organisasi Kesehatan Dunia, dan Organisasi Pangan dan Pertanian Amerika Serikat
Bangsa. (2006).Probiotik dalam Makanan: Sifat Kesehatan dan Gizi dan
Pedoman Evaluasi. Roma, IT: Organisasi Kesehatan Dunia, Organisasi Pangan
dan Pertanian Perserikatan Bangsa-Bangsa.
Yan, F., Liu, L., Cao, H., Moore, DJ, Washington, MK, Wang, B., dkk. (2017).
Kolonisasi neonatus tikus dengan LGG meningkatkan perkembangan usus dan mengurangi
kerentanan terhadap kolitis di masa dewasa. mukosa. kekebalan.10, 117–127. doi: 10.1038/
mi.2016.43
Yan, F., dan Polk, DB (2012). Karakterisasi larutan yang diturunkan dari probiotik
protein yang mengungkapkan mekanisme efek pencegahan dan pengobatan
probiotik pada penyakit radang usus. Usus. mikrob.3, 25–28. doi: 10. 4161/
gmic.19245
Yeh, SL, Lin, MS, dan Chen, HL (2007). Efek penghambatan dari makanan larut
serat dari Amorphophallus konjac pada sitotoksisitas dan kerusakan DNA yang disebabkan
oleh air tinja pada sel Caco-2. tanaman. Med.73, 1384–1388. doi: 10.1055/s-2007- 990228
Zhang, X., Li, T., Chen, X., Wang, S., dan Liu, Z. (2018). Nistatin meningkatkan
respon imun terhadap Candida albicans dan melindungi ultrastruktur
epitel vagina pada model tikus kandidiasis vulvovaginal. Mikrobiol BMC.
18:166. doi: 10.1186/s12866-018-1316-3
Pernyataan Benturan Kepentingan: Para penulis menyatakan bahwa penelitian
dilakukan tanpa adanya hubungan komersial atau keuangan yang dapat
ditafsirkan sebagai potensi konflik kepentingan.
Hak Cipta © 2019 Li, Liu, Zhang, Chen dan Wang. Ini adalah artikel akses terbuka
yang didistribusikan di bawah ketentuan Lisensi Atribusi Creative Commons (CC
BY). Penggunaan, distribusi atau reproduksi di forum lain diperbolehkan, asalkan
penulis asli dan pemilik hak cipta dikreditkan dan publikasi asli dalam jurnal ini
dikutip, sesuai dengan praktik akademik yang diterima. Penggunaan, distribusi,
atau reproduksi tidak diizinkan yang tidak sesuai dengan persyaratan ini.
10 Mei 2019 | Jilid 10 | Pasal 1033