See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/356218279

Uji Millon Millon Test

Preprint · November 2021

CITATIONS READS

0 9,010

1 author:

Anis Monika
Syiah Kuala University
5 PUBLICATIONS 0 CITATIONS

SEE PROFILE

All content following this page was uploaded by Anis Monika on 15 November 2021.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

 Uji Millon
Millon Test
Anis Monika
anismonika.bio20@fkip.unsyiah.ic.id

Abstrak
Uji Millon digunakan untuk mendeteksi adanya protein dalam jaringan tanaman. Molekul protein
yang terdeteksi akan memberikan warna merah bata. Pereaksi millon merupakn campuran Hg-nitrat dan
Hg-nitrit di dalam larutan asam nitrat pekat. Gugus hidroksifenil akan dinitrasi oleh pereaksi millon
membentuk larutan kompleks merkuri (Hg) berwarna, yang merupakan derivad nitrofenil. Praktikum ini
bertujuan untuk mempelajari beberapa reaksi uji terhadap asam amino dan protein. Sampel yang
digunakan dalam praktikum ini adalah larutan albumin 2%, pereaksi Millon. Teknik pengumpulan data
dilakukan melalui pengamatan kualitatif. Metode yang digunakan adalah percobaan langsung di
Laboratorium Pendidikan Biologi. Adapun hasil praktikum ini adalah albumin berubah warna menjadi
merah bata.
Kata kunci : millon, albumin, protein
Abstract
The Millon test is used to detect the presence of protein in plant tissue. The detected protein
molecule will give a brick red color. Millon reagent is a mixture of Hg-nitrate and Hg-nitrite in
concentrated nitric acid solution. The hydroxyphenyl group will be titrated by the millon reagent to form
a colored complex solution of mercury (Hg), which is a nitrophenyl derivative. This practicum aims to
study several test reactions against amino acids and proteins. The sample used in this lab was 2%
albumin solution, Millon reagent. The data collection technique was carried out through qualitative
observation. The method used is a direct experiment in the Biology Education Laboratory. The result of
this practicum is that the albumin changes color to dark purple.
Keywords: millon, albumin, protein

1
Anis Monika : Uji Millon
Pendahuluan
Protein merupakan suatu zat makanan
yang amat penting bagi tubuh karena zat ini
disamping berfungsi sebagai bahan bakar dalam
tubuh juga berfungsi sebagai zat pembangun dan
pengatur. Protein adalah sumber asam-asam
amino yang mengandung unsur-unsur C, H, O
dan N yang tidak memiliki oleh lemak atau
karbohidrat. Struktur protein yang terdiri dari
polipeptida yang mempunyai rantai yang amat
panjang, tersusun atas banyak unit asam amino
(Natsir, 2018, p. 49).
Protein merupakan makromolekul yang
paling berlimpah di dalam sel hidup dan
merupakan 50 persen atau lebih dari berat kering
sel. Protein ditemukan di dalam semua sel dan
semua bagian sel. Protein juga amat bervariasi,
ratusan jenis yang berbeda dapat ditemukan
dalam satu sel. Protein terdiri atas rantai-rantai
panjang asam amino, yang terikat satu sama lain
dalam ikatan peptida. Asam amino terdiri atas
unsur-unsur karbon, hidrogen, oksigen dan
nitrogen. Beberapa protein mengandung gugus
kimia lain disamping asam amino yaitu unsur-
unsur fosfor, besi, sulfur, iodium dan kobalt.
Unsur nitrogen adalah unsur utama protein,
karena terdapat di dalam semua protein akan
tetapi tidak terdapat di dalam karbohidrat dan
lemak. Unsur nitrogen merupakan 16% dari berat
protein (Dirga, 2018, p.27).
Protein menjadi sumber nutrisi yang
paling baik untuk pertumbuhan mikroorganisme,
kemudian mikroorganisme tersebut akan
menguraikan protein menjadi metabolit berbau
busuk, seperti indol, kadeverin, asam-asam
organik, CO2, H2S, dan sketol. Jika asam amino,
peptida, dan senyawa-ssenyawa organik
bermolekul rendah telah habis maka
mikroorganisme akan menghasilkan enzim-
enzim proteolitik yang mampu memecahkan
protein bermolekul tinggi menjadi oligopeptida
dan asam-asam amino bebas yang nantinya juga
akan dimanfaatkan oleh mikroorganisme sebagai
energi. Pada mekanisme reaksi tersebut akan
2
menghasilkan air, dan secara otomatis
konsentrasi protein akan menurun (Purnama,
2019, p. 51).
Protein dalam tubuh berguna sebagai zat
pembangun atau pertumbuhan karena protein
merupakan pembentuk jaringan baru dalam
tubuh terutama pada bayi, anak-anak, ibu hamil,
ibu menyusui dan orang yang baru sembuh dari
penyakit. Protein juga berfungsi sebagai pengatur
dalam metabolisme tubuh. Selain itu protein juga
merupakan komponen pembentuk antibodi untuk
mempertahankan daya tahan tubuh (Andayani,
2011, p. 53).
Asam amino merupakan komponen
utama penyusun protein dan dibagi dalam dua
komponen yaitu asam amino esensial dan asam
amino non esensial. Asam amino esensial tidak
dapat diproduksi dalam tubuh sehingga harus
ditambahkan dalam bentuk asupan makanan,
sedangkan asam amino non esensial dapat
diproduksi dalam tubuh. Asam amino umumnya
berbentuk serbuk dan mudah larut dalam air,
namun tidak larut dalam pelarut organik non
polar (Mandila, 2013, p. 103).
Metode/Cara Kerja
Waktu dan Tempat
Pratikum Biokimia tentang percobaan uji
akrolein pada lipida dilakukan pada hari Senin,
19 April 2021 di Laboratorium Pendidikan
Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Universitas Syiah Kuala.
Target/Objek/Populasi/Sampel
Subjek yang melakukan praktikum
adalah mahasiswa Pendidikan Biologi angkatan
tahun 2021. Adapun tujuan dari praktikum ini
adalah untuk mempelajari beberapa reaksi uji
terhadap asam amino dan protein. Sampel yang
digunakan dalam praktikum ini adalah larutan
albumin 2%, pereaksi Millon.
Prosedur
Langkah kerja pertama yaitu masukkan 5
tetes pereaksi millon kedalam 3 mL larutan
Anis Monika : Uji Millon

protein (albumin). Selanjutnya panaskan sampai
mendidih, reaksikan positif ditunjukkan oleh
terbentuknya oleh terbentuknya warna merah.
Bila belum terbentuk warna, tambahkan lagi 2-3
tetes pereaksi millon dan panaskan lagi.
Hindarkan penambahan pereaksi berlebihan yang
akan menimbulkan warna kuning.
Data, Instrumen, dan Teknik Pengumpulan
Data yang diperoleh adalah data
kualitatif berupa warna pada setiap latutan hasil
uji millon. Praktikum ini menggunakan
instrument tabung reaksi, pipet tetes, gelas piala,
pipet Mohr, kertas saring, corong, dan penangas
air. Teknik pengumpulan data yang digunakan
adalah melalui pengamatan langsung dan melalui
penjelasan asisten laboratorium.
Teknik Analisis Data
Teknik dalam pengambilan data ialah
didapatkan secara pengamatan kualitatif dan
percobaan langsung pada proses pratikum.
Metode yang digunakan adalah percobaan
langsung pada seriap larutan.
Hasil dan Pembahasan
Mutu protein dinilai dari perbandingan
asam-asam amino yang terkandung dalam
protein. Asam amino diperlukan oleh makhluk
hidup sebagai penyusun protein atau sebagai
kerangka molekul-molekul penting. Apabila
spesies tersebut memerlukannya tetapi tidak
mampu memproduksi sendiri disebut asam
amino esensial. Asam amino non esensial dapat
dibentuk di dalam tubuh sehingga tidak harus
dipenuhi dari asupan makanan. Pada prinsipnya
suatu protein yang dapat menyediakan asam
amino esensial dalam suatu perbandingan yang
menyamai kebutuhan manusia mempunyai mutu
yang tinggi. Sebaliknya protein yang kekurangan
satu atau lebih asam-asam amino esensial
mempunyai mutu yang rendah (Ginting, 2017).
Mengkonsumsi protein dalam jumlah
berlebihan akan membebani kerja ginjal.
Makanan yang berprotein tinggi, biasanya juga
tinggi lemaknya sehingga menyebabkan obesitas.
Kelebihan protein pada bayi dapat memberatkan
kesehatan ginjal dan hati yang harus
memetabolisme dan mengeluarkan kelebihan
nitogen, juga dapat menyebabkan asidosis,
dehidrasi, diare dan demam (Bakhtra, 2016, p.
144).
Terdapat dua metode untuk
menghidrolisis protein, yaitu hidrolisis asam dan
hidrolisis enzimatik. Hidrolisis asam mulai
dihindari oleh kebanyakan industri makanan,
karena produk yang dihasilkan kurang terjamin
bagi kesehatan. Hidrolisis enzimatis merupakan
pilihan metode yang aman, enzim yang sering
digunakan adalah bromelin, papain dan fisin.
Produk hidrolisis protein mempunyai range
aplikasi yang luas terkait dengan sifat fungsional
atau sifat nutrisinya (Machin, 2012).
Kualitas protein suatu bahan pangan
sangat ditentukan oleh kadar asam amino yang
dikandungnya. Banyak kelainan yang timbul
terhadap manusia yang kekurangan protein.
Untuk meningkatkan kadar HB pada penderita
anemia, diperlukan makanan dengan gizi yang
lebih baik, artinya perlu tambahan protein
hewani maupun nabati, walaupun pemberian
susu untuk diminum sedikit menaikkan status
tersebut. Sekurangkurangnya, terdapat lima belas
macam asam amino esensial yang harus tersedia
dalam makanan, yaitu fenilalanin, tirosin,
isoleusin, lisin, metionin, sistin, treonin, valin,
triptofan, arginin, histidin, glisin, serin,
asparagin, dan prolin (Elfita, 2014).
Gambar 1 : Sesudah direaksikan

3
Anis Monika : Uji Millon
Pada praktikum ini Sampel yang
digunakan dalam praktikum ini adalah larutan
albumin 2%, pereaksi Millon. Saat sampel
dipanaskan pereaksi milllon membentuk endapan
berwarna pink yang menandakan bahwa uji ini
berhasil.
Albumin adalah protein yang larut dalam
air, mengendap pada pemanasan. Albumin
digunakan untuk segala jenis protein monomer
yang larut dalam air atau garam. Albumin
merupakan protein plasma yang paling banyak
dalam tubuh manusia (sekitar 55 – 60%) dari
protein serum yang terukur. Albumin terdiri dari
rantai polipeptida tunggal dengan berat molekul
Tabel 1. Hasil pengamatan
No Bahan Direaksikan dengan Pereaksi Millon
Setelah Direaksikan
1. Larutan Albumin 2%
Simpulan dan Saran
Simpulan
Protein adalah sumber asam-asam amino yang
mengandung unsur-unsur C, H, O dan N yang
tidak memiliki oleh lemak atau karbohidrat.
Struktur protein yang terdiri dari polipeptida
yang mempunyai rantai yang amat panjang,
tersusun atas banyak unit asam amino. Protein
merupakan suatu zat makanan yang amat penting
bagi tubuh karena zat ini disamping berfungsi
sebagai bahan bakar dalam tubuh juga berfungsi
sebagai zat pembangun dan pengatur. Adapun
hasil praktikum ini adalah albumin berubah
warna menjadi merah bata.
Saran
4
66.4 kDa dan terdiri dari 585 asam amino
(Manggabarani, 2018).
Pereaksi millon merupakan campuran
Hg-nitrat dan Hg nitrit didalam larutan asam
nitrasi pekat. Gugus hidroksifenil (monohidroksi
benzene) akan dinitrasi oleh pereaksi millon
membentuk larutan kompleks merkuri (Hg)
berwarna, yang merupakan derivad nitrofenil.
Ion-ion anorganik seperti CI- dan NH4 dapat
mengganggu uji ini. Karena itu uji ini tidak
bermanfaat untuk analisis air kemih. Uji ini khas
untuk asam amino yang memiliki gugus
hidroksifenil.
Keterangan
+, Membentuk endapan
berwarna pink yang
direaksikan dengan pereaksi
millon.
Pada saat melakukan pengamatan harus dengan
teliti dan saat menggunakan larutan berbahaya
mestilah hati–hati agar tidak terjadi hal yang
tidak diinginkan. Mahasiswa pun dapat
melakukan nya satu persatu sesuai dengan
langkah–langkah dan prosedur yang telah
ditentukan. Dan juga baiknya alat yang
disediakan di laboratorium itu diperiksa dulu
sebelum digunakan.
Daftar Pustaka
Andayani, Yenti & Gustiva. Pengaruh Lama
Penyimpanan Pada Suhu Kamar dan
Lemari Pendingin Terhadap Kandungan
Protein Pada Dadih Kerbau dengan
Metoda Kjeldahl. Jurnal Scienta, 1:1:53-
58.
 Anis Monika : Uji Millon
Bakhtra, Rusdi & Mardiah. 2016. Penetapan
Kadar Protein Dalam Telur Unggas
Melalui Analisis Nitrogen Menggunakan
Metode Kjeldahl. Jurnal Farmasi Higea,
8:2:143-150.
Dirga, Asyhari & Djayanti. 2018. Analisis
Protein Pada Tepung Kecambah Kacang
Hijau (Phaseolus aureus L.) yang
Dikecambahkan Menggunakan Media
Air, Air Cucian Beras dan Air
Kelapa. Journal of Science and
Applicative Technolog, 1:10:27-33.
Elfita, L. 2014. Analisis Profil Protein Dan Asam
Amino Sarang Burung Walet (Collocalia
Fuchiphaga) Asal Painan. Jurnal Sains
Farmasi & Klinis, 1:1: 27-37.
Ginting, Sitorus & Astuti. 2017. Penentuan
Kadar Asam Amino Esensial
(metionin, leusin, isoleusin dan
lisin) Pada Telur Penyu dan Telur
Bebek. Jurnal Kimia Mulawar, 14:2:91-
99.
Machin, A. 2012. Potensi Hidrolisat Tempe
Sebagai Penyedap Rasa Melalui
View publication stats
Pemanfaatan Ekstrak Buah Nanas.
Jurnal Biosaintifika, 4:2:70-77.
Mandila & Hidajati. 2013. Identifikasi Asam
Amino Pada Cacing Sutra (Tubifex sp.)
Yang Diekstrak Dengan Pelarut Asam
Asetat dan Asam Laktat. Journal of
Chemistry, 2:1:103-108.
Manggabarani, dkk. 2018. Karakteristik
Kandungan Albumin Pada Jenis Ikan di
Pasar Tradisional Kota Makassar. Jurnal
Dunia Gizi, 1:1:30-35.
Natsir & Latifa. 2018. Analisis Kandungan
Protein Total Ikan Kakap Merah dan
Ikan Kerapu Bebek. Jurnal Biology
Science & Education, 7:1:49-55.
Purnama, Retnaningsih & Aprianti.
Perbandingan Kadar Protein Susu Cair
UHT Full Cream Pada
Penyimpanan Suhu Kamar dan
Suhu Lemari Pendingin dengan Variasi
Lama Penyimpanan dengan Variasi
Lama Penyimpanan dengan Metode
Kjeldhal. Jurnal Analis Farmasi,
4:1:50-58.