TEKNIK PREPARASI SPERMA PADA

INSEMINASI SESUAI STANDAR WHO 2021

Teknik pemisahan spermatozoa dari plasma
mani, menghasilkan sediaan akhir
mengadung prosentase jumlah yang maksimal
secara morfologi, motilitas normal &
kerusakan DNA yang minimal ,bebas dari sel
non germinal &spermatozoa berkualitas
rendah ,untuk memaksimalkan terjadinya
fertilitas pada inseminasi
MEMASTIKAN
KUALITAS
SPERMA BAIK

PRINSIP YANG
MENDASARI
DALAM TEKNIK
PREPARASI
SPERMA PADA
INSEMINASI
MENGELIMINIR
FAKTOR –
FAKTOR YANG
MERUGIKAN
PEMBUAHAN
HAL YANG SANGAT PENTING JIKA TES FUNGSI
SPERMA AKAN DILAKUKAN
MEMBATASI KERUSAKAN
APAPUN DARI SEL NON
SPERMA
PLASMA MANI
DALAM 1 JAM
SETELAH
EJAKULASI MENGURANGI FAKTOR
HARUS SEGERA MERUGIKAN AKIBAT
DIPISAHKAN PENINGKATAN OSMOLALITAS
TERJADI PADA EJAKULASI
YANG DISIMPAN SECARA IN
VITRO
 PROSTAGLANDIN,
ZINK

PENGUMPULAN,
BAHAN,
TEKNIK YANG BAKTERI,
TIDAK STERIL MERUSAK ZAT BERACUN,
OBAT-OBATAN
SPERMA

BATANG
PENGADUK,
VOTEX MIXER,
SYRINGE
TUJUAN PREPARASI PLASMA MANI PADA
INSEMINASI
MENGHASILKAN SEDIAAN AKHIR YANG MENGANDUNG
PRESENTASE TINGGI SEL SECARA MORFOLOGIS NORMAL DAN
MOTIL

BEBAS DARI SISA-SISA, SEL NON GERMINAL,SPERMATOZOA

BERKUALITAS RENDAH
 PEMILIHAN
METODE

SIFAT PLASMA INDIKASI /

MANI TUJUANNYA
 Tidak
menginduksi
MEMAKSIMAL disfungsi melalui
MEMINIMALISIR KAN
KERUSAKAN produksi ROS
RECOVERY
oleh sperma dan
leukosit

MEMPROSES
CEPAT, MUDAH, METODE EJAKULAT
MURAH YANG DALAM
JUMLAH
IDEAL BANYAK

MENGELEMINIR MENGISOLASI
SEL NON SPERMA MOTIL,
GERMINAL, MORFOLOGI MEMULIHKAN
NORMAL, POPULASI
SPERMATOZOA MEMELIHARA DNA
KWALITAS SECARA SPERMATOZOA
RENDAH MAKSIMAL
 PROTEIN
LARUTAN
GARAM BUFFER
SEIMBANG
PRINSIP
UMUM
MEDIA
KULTUR
EFISIENSI PREPARASI

JUMLAH
JUMLAH SPERMATOZOA
SPERMA 2-10 MOTIL
JUTA /0.3- 0.5
ml PROGRESIF > 90
%

DINYATAKAN SECARA
MUTLAK
CONTOH PRE & POST PREPARASI
 METODE YANG DIGUNAKAN

SIMPLE WASHING

DIRECT SWIM-UP

DISCONTINOUS DENSITY GRADIENT

ALAT YANG DIBUTUHKAN
 KELEBIHAN & KELEMAHAN

DISCOUNTINOUS DENSITY
SIMPLE WASHING DIRECT SWIM-UP GRADIENT

KELEBIHAN
1. Baik untuk sampel yang KELEBIHAN
KELEBIHAN
rendah motilitasnya sehingga 1. Sperm recovery > 20%
1. Memberikan jumlah
didapatkan sperma yang motil 2. Mendapatkan jumlah spermatozoa
spermatozoa yang tertingi
saja lebih banyak progresif slow dan
jika sampel baik
2. Menurunkan kerusakan DNA sedikit yang progresif rapid
2. Sering digunakan untuk
KEKURANGANNYA 3. Mengeliminasi sel non germinal,
mempersiapkan
1. Hasil recovery spermatozoa < spermatozoa kualitas rendah, zat-
spermatozoa untuk IUI
20% zat toksik, obat-obatan, bakteri
KELEMAHAN
2. Konsentrasi zinc lebih besar KEKURANGAN
Tidak dapat mengeliminasi sel
dibanding discontinuos density 1. Kerusakan DNA sperma lebih tinggi
non germinal, spermatozoa
gradient 2. Harus menentukan waktu dan
berkualitas rendah,leukosit,zat
3. Pada semen dengan viskositas kecepatan sentrifugasi
beracun,obat-obatan
tinggi tidak boleh diencerkan
akan merusak peroksidase lipid
 ABSTENIENSIA

PENANGANAN
KONTAINER
SAMPEL AWAL

PENGUMPULAN
SAMPEL

PENERIMAAN PENAMPUNGAN
SAMPEL BAHAN
pre
post
 PENANGANAN
DARI ORGANISME
MENULAR

TINJAUAN
SISTEMATIS,META-ANALISIS
ART 11.858, SAMPEL 3.994 BIOSAFETY LEVEL
HIV,56,3% MENGALAMI 3
KEHAMILAN KLINIS TANPA
SEROKONVERSI HIV

MENGGUNAKAN METODE
ISTRI
SEHAT,SUAMI DISCONTINUOS DENSITY
YANG TERINFEKSI GRADIENT,DIRECT SWIM UP
 KRITERIA STANDAR YANG HARUS
DIPENUHI SEBELUM DILAKUKAN
PREPARASI SPERMA
Sel T-CD4 harus >200/mm3 ,pemeriksaan 2x dalam 4 bulan terakhir sebelum preparasi

Tidak boleh ada peningkatan jumlah viral load >log 0,5 dalam 2x pemeriksaan selama
4 bulan terakhir sebelum preparasi

Tidak ada infeksi sekunder

 Pasien Skrining (rapid test/EIA/3methods)

HIV (-) HIV (+)

Analisis semen rutin &

Genotipe
lengkap

Kualitatif (RT- Kuantitatif (viral

PCR) load monitoring)

Preparasi sperma Discountinous Density Gradient

dilanjutkan direct swim-up
(v = ≥500 µl)
100 µl
Deteksi RNA HIV & viral Limit : 50 RNA copies/ml
load