Machine Translated by Google

pubs.acs.org/biochemistry Artikel

Mekanisme Tuning melalui Ketergantungan Penyangga dari Evolusi Hidrogen

yang Dikatalisis oleh Enzim Mini Kobalt Jennifer M. Le, Georgios Alachouzos,
Marco Chino, Alison J. Frontier, Angela Lombardi, dan Kara L. Bren*

Kutip Ini: Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297 Membaca online

MENGAKSES Metrik & Lainnya Rekomendasi Artikel *sÿ Informasi Pendukung

ABSTRAK: Cobalt-mimochrome VI*a (CoMC6*a) adalah protein mini sintetik

yang mengkatalisis reduksi proton berair menjadi hidrogen (H2).
Dalam air buffer, ada banyak kemungkinan donor proton, mempersulit
penjelasan mekanismenya. Kami telah menemukan bahwa buffer pKa dan
sterik memiliki efek signifikan pada aktivitas, dievaluasi melalui voltametri
siklik (CV). Buffer terprotonasi diusulkan untuk bertindak sebagai donor proton
utama untuk katalis, khususnya melalui amina terprotonasi dari buffer yang
diuji. Pada pH konstan 6,5, evolusi H2 katalitik di hadapan asam buffer
dengan nilai pKa berkisar antara 5,8 hingga 11,6 diselidiki, sehingga
menimbulkan hubungan potensial-pKa yang dapat dibagi menjadi dua wilayah.
Untuk asam dengan nilai pKa ÿ8.7, potensial katalitik setengah gelombang
(Eh) berubah sebagai fungsi pKa dengan kemiringan satuan ÿ128 mV/pKa,
dan untuk asam dengan pKa ÿ8.7, Eh berubah sebagai fungsi dari pKa
09:31:04
GADJAH
Februari
Diunduh
tanggal
(UTC).
melalui
MADA
pukul
2023
pada
UNIV
26

dengan kemiringan ÿ39 mV/pKa satuan. Selain itu, serangkaian asam buffer
sharingguidelines
dipublikasikan
pubs.acs.org/
membagikan
tentang
secara
artikel
https://
untuk
yang
sah.
cara
Lihat
opsi
disintesis untuk mengeksplorasi pengaruh curah sterik di sekitar proton asam pada katalisis. Arus katalitik dalam CV menunjukkan penurunan
yang signifikan dengan adanya asam penyangga yang terhalang secara sterik dibandingkan dengan senyawa induknya, juga konsisten
dengan penambahan asam penyangga yang bertindak sebagai donor proton utama pada katalis dan menunjukkan bahwa struktur asam
selain pKa berdampak pada aktivitas. Hasil ini menunjukkan bahwa keasaman dan struktur buffer merupakan pertimbangan penting ketika
mengoptimalkan dan mengevaluasi sistem untuk katalisis yang bergantung pada proton dalam air.

abstraksi untuk meregenerasi bentuk dasar dari situs seng yang

Dalam konteks
pembawa penyediaan
energi, yang
hidrogen berkelanjutan
(H2) dan terbarukan
idealnya berasal dari air.
Kemajuan dalam pengembangan katalis H2-evolution termasuk
katalis sintetik yang beroperasi dalam 100% air1ÿ7 dan/atau
pengenalan jalur transfer proton yang diilhami secara biologis yang
menghasilkan katalis yang lebih efisien.8ÿ11 Pengembangan lebih
lanjut di lapangan memerlukan penyelidikan mekanistik transfer
proton ke katalis dalam air.12,13 Ada preseden untuk peran buffer
dalam memediasi transfer proton dalam sistem heterogen untuk
reduksi proton,14 sistem elektrokatalitik homogen untuk oksidasi
air,15ÿ19 dan sistem elektrokatalitik dan fotokatalitik homogen
untuk CO2 reduksi menggunakan siklam nikel.20 Dalam kasus
sistem heterogen untuk reduksi proton, praasosiasi buffer dalam
lapisan ganda elektrokimia berperan dalam transfer proton antar
muka.14 Dalam sistem katalitik elektro homogen untuk oksidasi air,
buffer diusulkan untuk berperan berbagai peran, termasuk bertindak
sebagai basa dalam abstraksi proton dari air,15ÿ19 menghambat
katalisis t melalui anasi,15,18 dan/atau memfasilitasi langkah
transfer elektron berpasangan proton yang mengarah ke
pembentukan ikatan OÿO.15ÿ18 Dalam sistem reduksi CO2,
aktivitas dan selektivitas reduksi CO2 dipengaruhi oleh asosiasi
buffer dengan katalis.20 Contoh klasik dalam kinetika enzim
melibatkan peran penyangga dalam proton
aktif secara katalitik dalam karbonat anhidrase untuk interaksi
21
dengan CO2.
Seperti yang ditunjukkan oleh contoh-contoh ini, terbukti
bahwa penyangga tidak selalu bersih ketika mengevaluasi sistem
dalam air. Di sini, kami melaporkan temuan kami bahwa struktur
penyangga dan pKa keduanya berperan dalam menentukan
aktivitas dan mekanisme evolusi H2 untuk katalis mini-protein CoMC6*a.
Perancah MC6*a terdiri dari deuteroporfirin yang secara kovalen
terikat pada rantai dekapeptida distal dan rantai tetradekapeptida
proksimal melalui rantai lisin peptida yang terkonsolidasi dengan
gugus asam propionat deuteroporfirin, di mana rantai
tetradekapeptida memberikan his aksial ke ion logam (Gambar 1 ) .
22 CoMC6*a sebelumnya dilaporkan secara elektrokatalis mereduksi
proton menjadi H2 dalam air berbuffer pH 6,5 dengan angka
turnover 230000.2 Overpotensial untuk evolusi H2 teramati
diturunkan sebagai fungsi dari
Diterima: 23 Januari 2020
Revisi: 12 Maret 2020
Diterbitkan: 13 Maret 2020

© 2020 American Chemical Society https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060

1289 Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google
Biokimia pubs.acs.org/biochemistry
Gambar 1. Model CoMC6*a.2 CoMC6*a adalah protein mini yang
terdiri dari dekapeptida distal dan tetradekapeptida proksimal, yang
masing-masing terikat secara kovalen dengan deuteroporfirin kobalt
melalui ikatan amida antara rantai samping lisin peptida dan
propionat porfirin bagian asam. Residu berlabel yang dipilih
direpresentasikan sebagai tongkat.
peningkatan tingkat pelipatan peptida CoMC6*a sebesar ÿ90 mV.2
Selain itu, karakterisasi elektrokimia dalam dime thylformamide
(DMF) mendukung hipotesis bahwa spesies Co(I) harus diakses
agar katalisis dapat terjadi saat menggunakan asam asetat sebagai
sumber proton ( nilai pKa ÿ13.5 dalam DMF23).2 Evolusi H2 yang
dikatalisis oleh kobalt melalui mekanisme situs tunggal yang
berpusat pada logam biasanya melibatkan pembentukan hidrida
kobalt melalui protonasi spesies kobalt bervalensi rendah.24ÿ26
Selama siklus katalitik, dua elektron dan dua proton dirakit melalui
jalur yang diusulkan yang melibatkan negara proto Co(I) untuk
membentuk hidrida Co(III), yang terprotonasi untuk menghasilkan
H2 baik secara langsung atau setelah langkah reduksi berikutnya.25
Studi mekanistik Katalis evolusi H2 kobalt yang dilakukan dalam
pelarut organik menunjukkan bahwa asam kuat diperlukan untuk
evolusi H2 dengan memprotonasi spesies Co(III)-H,26,27 sedangkan
asam lemah berkompeten untuk memprotonasi spesies Co(II)-H.
27ÿ29 Jalur homolitik inv Pembentukkan H2 oleh reaksi bimolekuler
Co(III)-H atau Co(II)-H juga dimungkinkan30 tetapi tidak akan
digunakan dalam pekerjaan ini, karena konsentrasi asam konjugat
buffer yang digunakan di sini relatif lebih tinggi dibandingkan
konsentrasi katalis. . Selanjutnya, struktur CoMC6*a, di mana
porfirin kobalt dilindungi oleh peptida pada kedua permukaannya,
diharapkan dapat menghambat interaksi katalis-katalis (Gambar 1).
Kelarutan dan reaktivitas mini-protein ini dalam air mendekati pH
netral sangat penting, karena sebagian besar katalis evolusi H2
yang diketahui berfungsi dalam pelarut organik dengan tambahan
asam organik atau dalam campuran dengan air, sementara fungsi
relatif sedikit dalam air,25, 26,31 terutama mendekati pH
netral,1,2,32ÿ34 meskipun minat yang signifikan dalam
mengembangkan katalisis evolusi H2 dalam air.35ÿ37 Di sini, kami
melaporkan hubungan potensialÿ pKa untuk katalisis evolusi H2
oleh CoMC6*a di adanya berbagai asam penyangga dalam air,
memberikan wawasan tentang kemungkinan mekanisme evolusi
H2 . Hasil menunjukkan bahwa ketergantungan buffer dari evolusi
H2 elektrokatalitik menyediakan alat untuk menyelidiki jalur katalitik
dalam air dan juga menggambarkan pentingnya pilihan buffer dalam
mengoptimalkan katalisis evolusi H2.
ÿ BAHAN DAN METODE
Sintesis dan Karakterisasi CoMC6*a. Sintesis dan karakterisasi
CoMC6*a telah dijelaskan
sebelumnya.2,38
Voltametri Siklik. Eksperimen voltametri siklik dalam air dilakukan
dengan elektroda kerja tetes merkuri gantung (HMDE) dari BASi
Instruments. Elektroda pembanding adalah elektroda karbon gelas
3 mm dari CH
1290
Artikel
Instruments, Inc. Elektroda penghitung dipoles dengan pasta
alumina Gamma 0,05 ÿm sebelum setiap percobaan. Elektroda
referensi adalah elektroda Ag/AgCl (1 M KCl) dari CH Instruments,
Inc. Prosedur umum untuk CV adalah sebagai berikut. Pertama, 5,0
mL 1,0 ÿM CoMC6*a dalam 100 mM KCl dan 50 mM buffer pada
pH 6,5 digunakan kecuali dinyatakan sebaliknya.
Tingkat pemindaian CV adalah 100 mV / s. Setiap pengukuran
menggunakan tetes merkuri segar dengan massa rata-rata 5,6 ± 1,3 mg.
Sebelum setiap percobaan, larutan dibersihkan selama 5 menit
dengan nitrogen, dan pengukuran dilakukan di bawah selimut
nitrogen. PH dipantau menggunakan pengukur pH VWR SB70P dan
probe pH semimikro Mettler Toledo InLab. Semua nilai Eh dan ip
dari data CV dengan CoMC6*a adalah
ditentukan setelah pengurangan CV tanpa CoMC6*a.
Sintesis Morpholine Tersubstitusi-N dan Piper idine. Tabung
bertekanan tertutup diisi dengan batang pengaduk, dihaloalkana S
(1 equiv), dan amina primer (4 equiv)
(Skema S1). Tabung disegel dan dipanaskan hingga 95 °C (R =
tBu) atau 85 °C (R = iPr) di bawah pengadukan kuat di belakang
pelindung ledakan 1 .
Reaksi dipantau dengan H NMR sampai konsumsi dihaloalkana
penuh S
terjadi, di mana campuran reaksi didinginkan. Heksana (kira-kira
sama dengan 5 kali volume reaksi awal) ditambahkan, bersama
dengan volume yang sama dari HCl 1,0 M encer. Lapisan organik
dipisahkan dan kemudian diekstraksi dua kali lagi dengan larutan
HCl 1,0 M, masing-masing dengan volume yang sama dengan
ekstraksi awal. pH lapisan berair gabungan diatur dengan NaOH
padat sampai pH kira-kira 14 tercapai. Lapisan dasar berair
diekstraksi tiga kali dengan diklorometana (DCM); lapisan organik
gabungan dikeringkan di atas MgSO4 dan disaring di atas corong
fritted, dan filtratnya dipekatkan dengan penguapan putar untuk
menghilangkan pelarut dan kelebihan amina primer yang mudah
menguap. Larutan amina yang diperoleh cukup murni amina tersier
N-tert-butil morfolin (TBM, 8b), N-tert-butil-piperidin (TBP, 12a), atau
N-isopropil-morfolin (IPM, 8a). Dihaloalkana S, bahan awal amina
primer, dan amina tersier tidak aktif ultraviolet; dengan demikian,
mereka divisualisasikan dengan pewarnaan phosphomo lybdic acid
(PMA) atau KMnO4 pada KLT. Data dari semua produk data H NMR
dan 13C NMR cocok dengan literatur (Gambar S1ÿS6).
Sintesis N,N-tert-Butyl-piperazine. N, N-tert-Buty lethylenediamine
(1 equiv) dan 1,2-dibromoethane (4 equiv) digabungkan dalam labu
alas bulat yang dilengkapi dengan kondensor refluks dan dipanaskan
hingga 100 °C sambil diaduk secara magnetis selama 18 jam
( Skema S2). Reaksi dipantau oleh
1
H NMR sampai konsumsi penuh N,N-tert-butiletilenadi amina telah
terjadi, di mana campuran reaksi didinginkan. Heksana (kira-kira
sama dengan 5 kali volume reaksi awal) ditambahkan, bersama
dengan volume yang sama dari HCl 1,0 M encer. Lapisan organik
dipisahkan dan kemudian diekstraksi dua kali lagi dengan larutan
HCl 1,0 M, masing-masing dengan volume yang sama dengan
ekstraksi awal. pH lapisan berair gabungan diatur dengan NaOH
padat sampai pH kira-kira 14 tercapai. Lapisan dasar berair
diekstraksi tiga kali dengan DCM, dan lapisan organik gabungan
dikeringkan di atas MgSO4, disaring di atas corong bergores, dan
dipekatkan dengan penguapan berputar untuk menghilangkan
pelarut.
Residu berlilin yang dihasilkan dimasukkan ke corong fritted yang
mengandung bantalan SiO2 (15 kali massa bahan mentah
berdasarkan berat kering, dikemas sebagai gel dengan EtOAc), dan
pemisahan kromatografi vakum kolom kering dilakukan dalam 50
mL fraksi EtOAc. Empat fraksi pertama mengandung murni
https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google
Biokimia
produk yang ditentukan dengan KLT divisualisasikan dengan pewarnaan KMnO4.
Fraksi ini digabungkan dan dipekatkan dengan penguapan putar
untuk menghasilkan N, N-tert-butil-piperazine (DTBP, 1a) sebagai
padatan putih bubuk (hasil 49%). Dibromoetana, bahan awal
amina, dan produk diamina tersier tidak aktif ultraviolet; dengan
demikian, mereka divisualisasikan dengan pewarnaan PMA atau
KMnO4 pada KLT. Data produk cocok dengan literatur
1
Data H NMR dan 13C NMR (Gambar S7 dan S8).
Estimasi Nilai pKa TBM, IPM, TBP, dan DTBP. Nilai pKa asam
buffer TBM (8b), IPM (8a), TBP (12a), dan DTBP (1a) diperkirakan
dengan titrasi potensiometri menggunakan titrasi HCl ke dalam
buffer (konsentrasi dan volume untuk setiap bahan disebutkan
dalam Gambar S9ÿ S12).
Untuk menilai keakuratan metode ini, nilai pKa NMM (5) dan MES
(2) juga ditentukan dan dibandingkan dengan nilai literatur
(Gambar S13 dan S14). PH dipantau menggunakan pengukur pH
VWR SB70P dan probe pH semimikro Mettler Toledo InLab. Titik
ekivalen ditentukan dengan memplot pH sebagai fungsi dari
volume asam atau basa yang ditambahkan dan mengambil
turunan pertama dari plot tersebut.
ÿ HASIL
Voltametri Siklik CoMC6*a dalam Air dengan Kehadiran
Berbagai Buffer. Voltammogram siklik CoMC6*a dikumpulkan
dalam air atau air buffer dengan elektrolit KCl tambahan pada pH
6,5, pH di mana lipatan mimochrome ini dioptimalkan.2,38,39
Seperti dilaporkan sebelumnya, hasil gelombang ireversibel pada
potensial di bawah ÿ 1 V versus Ag/ AgCl [1 M KCl; semua potensi
akan dilaporkan sebagai vs Ag/AgCl (1 M KCl) kecuali dinyatakan
lain], sesuai dengan evolusi H2 yang dikatalisis oleh CoMC6*a.2
Di sini, kami mencatat bahwa setengah gelombang potensial (Eh)
untuk gelombang katalitik bervariasi secara signifikan dalam
adanya agen penyangga yang berbeda, pada kisaran 0,57 V.
Demi kejelasan, data representatif untuk CoMC6*a dengan
adanya lima penyangga terpilih (50 mM) dan tanpa penyangga
ditunjukkan pada Gambar 2. Hasil untuk semua 12 zat penyangga
yang digunakan di sini dengan nilai pKa berkisar antara 5,8
hingga 11,6 (1ÿ12, struktur ditunjukkan pada Gambar 3) ditunjukkan pada Gambar
Voltammogram siklik CoMC6*a hanya dengan adanya air dan
KCl (13) (Gambar 2 dan Gambar S27) hasil a
Gambar 2. Overlay voltammogram siklik CoMC6*a dengan adanya agen
penyangga terpilih. Data voltammogram siklik dikumpulkan di bawah
nitrogen pada kecepatan pindai 100 mV/s dengan 1,0 ÿM CoMC6*a,
buffer 50 mM (bila ada), dan 100 mM KCl (pH 6,5). Elektroda penghitung
karbon kaca, elektroda referensi Ag / AgCl (1 M KCl), dan elektroda kerja
HMDE digunakan.
Data pemindaian ketiga ditampilkan. Untuk sebidang arus puncak sebagai
fungsi pKa pada konsentrasi konstan dari bentuk asam konjugasi buffer
1ÿ12, lihat Gambar S59 dan S60.
pubs.acs.org/biochemistry Artikel
gelombang pada Eh ÿ1,82 V, yang secara signifikan lebih rendah
daripada gelombang yang diamati dengan adanya asam buffer
1ÿ12 (Gambar S15ÿS26). Tabel S1 mencantumkan asam
penyangga 1ÿ12 dan singkatannya yang sesuai, nilai pKa, dan
nilai Eh yang diperoleh dari data voltammogram siklik CoMC6*a
pada pH 6,5. Eksperimen CV juga dilakukan pada pH 5,0, nilai
pH di bawah pKa dari asam buffer paling asam yang digunakan
di sini, untuk mencapai kondisi di mana setiap buffer ÿ86% dalam
bentuk asam konjugat (Gambar S28ÿS39). Tabel S2 merangkum
nilai Eh dari data voltammogram siklik CoMC6*a di hadapan 1ÿ12
pada pH konstan 5,0; namun, nilai Eh berada dalam 0,04 V dari
nilai yang diukur pada pH 6,5.
Gambar 3 menunjukkan sebidang nilai Eh (Tabel S1) sebagai
fungsi pKa asam penyangga pada pH 6,5. Hasil hubungan
potensial-pKa dapat dibagi menjadi dua wilayah. Untuk asam
penyangga dengan nilai pKa ÿ8.7, Eh berubah sebagai fungsi
pKa dengan kemiringan ÿ128 mV/pKa satuan (wilayah 1), dan
untuk asam penyangga dengan nilai pKa ÿ8.7, Eh berubah
sebagai fungsi pKa dengan kemiringan unit ÿ39 mV/pKa (wilayah
2). Hasil yang diperoleh pada pH 6,5 tidak menyimpang secara
signifikan dari pH 5,0 yaitu nilai pH yang berada di bawah nilai
pKa asam buffer yang paling asam. Pada pH 5.0, wilayah 1
menunjukkan kemiringan unit ÿ123 mV/pKa, dan wilayah 2
menunjukkan kemiringan unit ÿ41 mV/pKa (Gambar S41).
Persamaan 1 dan 2 menguraikan hubungan untuk proses transfer
proton berpasangan redoks yang melibatkan kompleks C, n
elektron, dan m proton, di mana proton disumbangkan ke C dari
asam HA.40,41 Persamaan 2 memprediksi bahwa Eh bergantung
pada asam pKa jika tiga suku pertama tetap, suku pertama
menyatakan potensi reduksi spesies C tanpa adanya proton, suku
kedua menggambarkan pKa produk C terprotonasi dan tereduksi,
dan suku ketiga menggambarkan logaritma konsentrasi basa (Aÿ)
terhadap konsentrasi asam konjugasi (HA).41 Perbandingan
lereng dari data yang diperoleh pada pH 6,5 dan 5,0 menunjukkan
bahwa suku log(Aÿ/HA) harus konstan, yang diharapkan di bawah
kondisi di mana [HA] ÿ [Aÿ], atau konsentrasi asam konjugat jauh
lebih besar daripada konsentrasi kompleks yang diinginkan, C.41
Jadi, plot Eh sebagai fungsi pKa dari asam yang ditambahkan HA
diharapkan menghasilkan wilayah yang bergantung pada pKa
dengan S15ÿS26.0. 059(m/n) pada 25 °C (persamaan 2).
kemiringan
Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3, kemiringan di wilayah
1 konsisten dengan proses dua-H+ satu-eÿ (nilai, mV/pKa),
teoritis unit
danÿ118
besarnya kemiringan di wilayah 2 konsisten dengan satu- Proses
H+ (nilai teoritis unit ÿ59 mV/pKa ). , satu-eÿ
ÿ ÿÿ
()nm A
C ++
F HA+em
CH mn M (1)
= °ÿ
mn k ( nm
(C)0/ 0,059(/)
+ N
p (CH
ÿ ÿÿ
EEh A M ))
ÿ
ÿ ÿ]log(A /HA) K
p(HA) (2)
A
Pada pH 6,5, buffer 1ÿ4 adalah 17ÿ80% dalam bentuk asam
konjugasi. Eksperimen voltametri siklik dengan CoMC6*a juga
dilakukan dengan adanya 1ÿ4 pada nilai pH setidaknya satu unit
di bawah nilai pKa asam buffer 1ÿ4 (Gambar S42ÿS45). Tidak
ada perbedaan signifikan yang diamati antara nilai Eh pada pH
6,5 dibandingkan dengan nilai Eh dari voltammogram siklik yang
dilakukan pada pH 1 unit di bawah nilai pKa 1ÿ4. Hubungan
potensialÿpKa yang diamati di wilayah 1 untuk reduksi dua-H+
satu-eÿ pada pH 6,5 (Gambar 3) tidak,berubah
ketika data
secara
diplot
signifikan
menggunakan nilai Eh dari data voltammogram siklik ini [ÿ105
mV/pKa unit untuk wilayah 1 (Gambar S46)]. Asam penyangga
1291 https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google

Biokimia pubs.acs.org/biochemistry Artikel

Gambar 3. Ketergantungan buffer dari potensi setengah gelombang katalitik. Di sebelah kanan adalah sebidang nilai Eh diukur dengan CV untuk evolusi H2 pada pH 6,5
oleh CoMC6*a sebagai fungsi pKa asam buffer. Wilayah 1 (garis merah solid) memiliki kemiringan ÿ128 mV/pKa satuan, dan wilayah 2 (garis biru solid) memiliki kemiringan
ÿ39 mV/pKa satuan. Garis merah (wilayah 1) dipasang menggunakan nilai Eh dari asam buffer 1ÿ8, dan garis biru (wilayah 2) dipasang menggunakan nilai Eh dari asam
buffer 8ÿ12 (struktur di sebelah kiri). Data voltammogram siklik dikumpulkan di bawah nitrogen pada kecepatan pindai 100 mV/s dengan 1,0 ÿM CoMC6*a, buffer 50 mM,
dan 100 mM KCl (pH 6,5). Elektroda penghitung karbon kaca, elektroda referensi Ag / AgCl (1 M KCl), dan elektroda kerja HMDE digunakan. Nilai Eh adalah rata-rata dari
tiga percobaan terpisah dengan batang standar deviasi yang ditunjukkan pada plot. Plot ÿpKa potensial pada pH 5.0 ditunjukkan pada Gambar S41, dan lereng tidak
menyimpang secara signifikan dari pH 6,5.

titrasi 1ÿ12 juga dilakukan untuk percobaan CV dengan CoMC6*a
pada pH 6,5; arus puncak (ip) meningkat sebagai fungsi dari
peningkatan konsentrasi asam buffer, tetapi tidak terlihat adanya
perubahan signifikan pada nilai Eh sebagai fungsi konsentrasi
(Gambar S47ÿS58). Di bawah kondisi yang digunakan untuk
percobaan titrasi pada pH 6,5, terdapat ÿ1ÿ50 mM spesies asam
konjugasi pada pH 6,5.
Arus puncak dalam voltammogram siklik CoMC6*a di hadapan
50 mM buffer 1ÿ12 pada pH 5.0 sebanding satu sama lain tanpa
tren yang jelas sebagai fungsi pKa (Gambar S59). Selain itu,
arus puncak sebagai fungsi pKa pada pH konstan 6,5 dan
konsentrasi konstan spesies asam konjugat (50 mM) juga
sebanding dengan asam buffer 1ÿ12 (Gambar S60). Data
menunjukkan bahwa besarnya arus puncak terutama dipengaruhi
oleh ketersediaan bentuk asam konjugat dari buffer 1ÿ12,
terlepas dari pKa. Data juga menunjukkan bahwa posisi setengah
gelombang katalitik dipertahankan untuk asam buffer tertentu,
meskipun ada perubahan ketersediaan asam konjugat dari buffer
sebagai fungsi konsentrasi buffer pada pH konstan atau sebagai
fungsi perubahan. pH, menunjukkan bahwa potensi setengah
gelombang katalitik terutama bergantung pada pKa asam buffer.
Investigasi Efek Struktur Penyangga. Beberapa amina dengan
struktur yang terkait dengan buffer standar disintesis untuk
mengeksplorasi pengaruh curah sterik di sekitar proton asam
pada katalisis (Skema 1). Nilai pKa dari asam penyangga yang
dihambat secara sterik diharapkan serupa dengan asam
penyangga induk [dikonfirmasi dengan potensiometri
Skema 1. Derivatif Asam Digunakan untuk Menguji Pengaruh
Sterik
titrasi (Gambar S9ÿS12)], memungkinkan untuk evaluasi
sistematis curah sterik pada aktivitas. Turunannya adalah N,N-
tert butyl-piperazine (DTBP, 1a), N-isopropyl-morpholine (IPM,
8a), N-tert-butyl-morpholine (TBM, 8b), dan N-tert-butyl piperidine
(TBP , 12a) (detail sintetis ada di Bahan dan Metode). Untuk
mensintesis rangkaian amina ini, kami menyusun metode baru
menggunakan pendekatan terpadu dengan hasil yang relatif
tinggi dibandingkan dengan yang ada di literatur.42ÿ46 Kami
menjelaskan metode ringkas dalam Bahan dan Metode,
1
dalam Skema H NMR, 13C S1 dan S2 . Karakterisasi dirangkum
melalui
NMR, dan titrasi potensiometri disertakan dalam Informasi
Pendukung (Gambar S1ÿS12). Titrasi potensiometri juga
dilakukan untuk NMM (4) dan MES (2), dan perkiraan nilai pKa
dibandingkan dengan nilai literatur untuk mengkonfirmasi
keakuratan metode titrasi potensiometri (Gambar S13 dan S14).
Tabel S3 merangkum nilai pKa 1a, 8a, 8b, dan 12a dan nilai
rata-rata Eh dan ip dari CV CoMC6*a dalam 1a, 8a, 8b, dan 12a
dibandingkan dengan CV dengan adanya masing-masing asam
buffer induk 1, 8 , dan 12 (Tabel S3). Voltametri siklik CoMC6*a
dalam DTBP (1a) menunjukkan arus yang berkurang dibandingkan
dengan CoMC6*a dalam piperazine (1), dievaluasi melalui arus
puncak (Gambar 4a). Dibandingkan dengan hasil yang diperoleh
dengan adanya morpholine (8), IPM (8a) dan TBM (8b) juga
memiliki arus puncak yang berkurang secara signifikan untuk
gelombang katalitik (Gambar 4b). Dibandingkan dengan piperidin
(12), TBP (12a) menunjukkan arus yang berkurang pada potensi
yang sama untuk gelombang katalitik untuk CoMC6*a dalam
piperidin, selain gelombang katalitik yang tampaknya bergeser
secara katodik relatif terhadap CV dengan adanya piperidin ( Gambar 4c).
Namun, pada potensial rendah ini, ada kemungkinan fitur ini
sesuai dengan gelombang katalitik untuk CoMC6*a hanya dalam
air dan elektrolit KCl (Gambar S27), karena arus faradaic dalam
air dan elektrolit dimulai pada permulaan kira-kira ÿ1,70 V.
Terlepas dari itu, rata-rata nilai Eh diperkirakan ÿ1,82 V. Hasil ini
menunjukkan bahwa peningkatan curah sterik di situs donasi
proton secara signifikan menurunkan arus puncak , yang mungkin
mencerminkan tingkat katalisis yang lebih rendah oleh CoMC6*a.
Karena nilai pKa dari donor proton yang terhalang secara sterik
mirip dengan donor proton induk, efek peningkatan curah di
dekat proton asam pada katalis

1292 https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google

Biokimia pubs.acs.org/biochemistry Artikel

Gambar 4. Overlay voltammogram siklik CoMC6*a dengan adanya asam buffer yang terhalang secara sterik dibandingkan dengan asam buffer induk. (A)
Hamparan voltammogram siklik CoMC6*a dalam piperazine (hitam) dan DTBP (biru). (b) Hamparan voltammogram siklik CoMC6*a dalam morpholine
(hitam), IPM (biru), dan TBM (biru muda). (c) Hamparan voltammogram siklik CoMC6*a dalam piperidin (hitam) dan TBP (biru).
Data voltammogram siklik dikumpulkan di bawah nitrogen pada kecepatan pindai 100 mV/s dengan 1,0 ÿM CoMC6*a, buffer 50 mM, dan 100 mM KCl
(pH 6,5). Elektroda penghitung karbon kaca, elektroda referensi Ag / AgCl (1 M KCl), dan elektroda kerja HMDE digunakan.

Skema 2. Usulan Mekanisme Hidrogen-Evolusi

saat ini berkaitan dengan struktur asam penyangga daripada pKa.
Selain itu, hubungan potensialÿpKa yang disebutkan di atas
dipertahankan ketika nilai Eh diperoleh dari CV CoMC6*a dengan
adanya turunan asam penyangga yang terhalang secara sterik
dimasukkan dalam plot potensialÿpKa unit [ÿ114 mV/pKa untuk
wilayah 1 dan unit ÿ33 mV/pKa untuk wilayah 2 (Gambar S61)].
Voltammogram siklik 1a, 8a, 8b, dan 12a tanpa CoMC6*a ditunjukkan
pada Gambar S62ÿS64.
Alternatif yang cocok untuk satu baris disediakan di Informasi
Pendukung untuk semua data Eh pada pH 6,5, termasuk nilai Eh
dari voltammogram siklik CoMC6*a dengan adanya dan tidak adanya
asam buffer sterik untuk dibandingkan dengan kecocokan linier
masing-masing daerah dengan dan tanpa asam buffer yang
terhalang secara sterik (Gambar S65).
ÿ DISKUSI
Jalur yang paling sering dipanggil untuk evolusi H2 elektrokatalis
kobalt-katalis dilambangkan ECCE atau ECEC, 24,30,47 di mana E
adalah langkah elektrokimia dan C adalah langkah kimia (Skema 2).
Jalur ketiga, EECC, juga mungkin melibatkan protonasi spesies
formal Co(0), meskipun jalur seperti itu tidak mungkin terjadi di air
karena mekanisme EECC biasanya digunakan dalam sistem di
mana asam secara signifikan lebih lemah daripada air.10,25 ,48,49
Sulit untuk membedakan antara jalur ECCE dan ECEC,50ÿ53
meskipun hal ini dimungkinkan dalam beberapa kasus di mana
reduksi Co(III)-H menjadi Co(II)-H adalah katodik dari Co Reduksi
(II/ I).54,55 Dalam laporan sebelumnya, CV CoMC6*a di DMF
mengungkapkan pasangan Co(III/II) dan Co(II/I) kuasi-reversibel
dan penugasan spesies Co(I) sebagai spesies yang aktif secara
katalitik.2 Meskipun bekerja di air mengaburkan pasangan Co(II/I)
karena keberadaan proton sebagai substrat, kemungkinan bahwa
Co(I) adalah spesies yang aktif secara katalitik dalam air, konsisten
dengan penampakannya. gelombang katalitik pada potensial rendah.
Dia
tergoda untuk menghubungkan mekanisme yang berpusat pada
kobalt (Skema 2) dengan peristiwa reduksi yang diekstrapolasi dari
hubungan potensial-pKa yang diamati (Gambar 3), tetapi hubungan
potensialÿpKa hanya dapat memberikan evaluasi mekanisme secara
kualitatif, terutama ketika analisis elektrokimia tanggapan sistem
yang bekerja di air kurang mudah dibandingkan dengan yang
beroperasi di pelarut aprotik di mana tanggapan elektrokimia dapat
langsung dikaitkan dengan sumber asam tunggal. Selain tantangan-
tantangan ini, banyak mekanisme dapat hidup berdampingan.24,50
Namun, hubungan ini dapat memberikan wawasan tentang
mekanisme utama dalam kondisi tertentu.
Kami mengusulkan bahwa perubahan kemiringan yang diamati
dari unit ÿ128 mV / pKa (wilayah 1) menjadi ÿ39 mV / pKa (wilayah
2) mencerminkan perubahan , peristiwa satu-eÿ
dari dua-H + ke satu-H+3), peristiwa
(Gambar ketika pKasatu-eÿ
asam penyangga meningkat. Perbedaan kemiringan menunjukkan
mekanisme yang berbeda, dan mekanisme ECCE dan ECEC
(Skema 2) dapat dipertimbangkan untuk wilayah 1 dan 2, masing-
masing, jika hubungan potensial-pKa ini diasumsikan terkait dengan
langkah-langkah yang berpusat pada logam. Dugaan tambahan
adalah bahwa peristiwa protonasi dalam kasus dua-H+ satu-eÿ dan
satu-H+ satu-eÿ, terkait dengan
katalisis. reduksi, Co(II/I)
Jika peristiwa benar
reduksi yang
yangmemulai
terkait dengan
diamatilangkah-
benar-
langkah yang benar-benar berpusat pada kobalt, efek pKa donor
proton pada mekanisme berkorelasi baik dengan tren yang diamati
pada sistem lain, di mana asam kuat dapat memprotonasi Co(I) dan
Co( III)-H spesies,26,27 tetapi penggunaan asam lemah mensyaratkan
bahwa perantara Co(II)-H dapat diakses untuk evolusi H2.27ÿ29
Dalam hal ini, asam penyangga yang lebih kuat (pKa ÿ 8.7) dapat
memprotonasi Co (I) dan Co(III)-H perantara untuk menghasilkan
H2 melalui mekanisme ECCE. Asam penyangga yang merupakan
asam lemah (pKa ÿ 8,7) dapat memprotonasi Co(I) untuk
menghasilkan Co(III)-H, tetapi reduksi lebih lanjut dari Co(III)-H
menjadi spesi Co(II)-H yang lebih nukleofilik adalah diperlukan untuk
menghasilkan H2. Karya yang dipublikasikan di aprotic

1293 https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google
Biokimia pubs.acs.org/biochemistry
pelarut memberikan perbandingan yang berguna. Dalam kasus
katalis kobaloksima, [Co(dmgBF2)2L], eksperimen CV
mengungkapkan bahwa H2 berevolusi melalui jalur ECCE dengan
asam trifluoroasetat sebagai sumber proton (pKa = 12,7 dalam
asetonitril).56 Studi selanjutnya mengungkapkan bahwa [Co
(dmgBF2)2L] juga mengembangkan H2 melalui jalur ECEC selain
jalur ECCE.27 Dalam studi yang sama, [Co(dmgBF2)2L]
dilaporkan menghasilkan H2 melalui ECCE sebagai jalur utama
menggunakan asam yang lebih kuat, p- cyanoanilinium
tetrafluoroborate (pKa = 7,6 dalam asetonitril).27 Studi ini
menunjukkan bahwa masuk akal bahwa perubahan dalam
mekanisme utama dapat terjadi untuk CoMC6*a sebagai fungsi pKa asam
Dalam sistem [Co(dmgBF2)2L] yang disebutkan di atas dalam
asetoni trile, Co(III) + H2/Co(III)-H pKa yang diusulkan sebesar
10,5 sedikit lebih rendah daripada Co(III)-H/Co(I) pKa dari 13.3,
dan Co(II) + H2/Co(II)-H pKa adalah 36.3.27 Jika pKa dari asam
yang ditambahkan lebih besar dari Co(III) + H2/Co(III)-H tetapi
lebih kecil daripada Co(III)-H/Co(I), asam dapat memprotonasi
Co(I) pada langkah kimia pertama tetapi tidak Co(III)-H pada
langkah kimia kedua. Jadi, Co(II)-H harus diakses untuk protonasi
kedua oleh asam untuk menghasilkan H2. Skenario serupa dapat
digunakan untuk CoMC6*a, di mana pKa Co(III) + H2/Co(III)-H
diusulkan lebih rendah daripada pKa Co(III)-H/Co(I). Jika
perubahan yang diamati pada kemiringan plot Eh versus pKa
menunjukkan perubahan mekanisme dari ECCE ke ECEC, maka
Co(III) + H2/Co(III)-H pKa dapat diperkirakan dari titik di mana
kedua kemiringan tersebut berpotongan (Gambar 3), yaitu ÿ8.7.
Khususnya, asam buffer dengan nilai pKa ÿ8,7 dapat memprotonasi
Co(I) dan Co(III)-H dalam tahapan ECC di jalur ECCE; donor
proton dengan nilai pKa di atas 8,7 dapat memprotonasi Co(I)
hanya pada langkah EC pertama ECEC, dan Co(II)-H harus
diakses untuk menghasilkan H2 dalam
kasus ini.
Untuk asam buffer yang lebih basa (pKa ÿ 8.7), kemiringan plot
Eh versus pKa menunjukkan reduksi satu-H+ satu-eÿ, untuk dan
semuaterlihat untuk asam penyangga tertentu (Gambar S47ÿS58) sehubungan
buffer yang diuji di sini (hingga pKa 11.6 dan an Eh sebesar ÿ1,73
, perubahan
V). Jika reduksi satu-H+ satu-eÿ terkait dengan reduksi Co(II/I),
lanjutan
dalam Eh sebagai fungsi pKa di luar 8,7 menyiratkan bahwa pKa
Co(III)-H/Co(I) lebih besar daripada Co(III) + H2/Co(III)-H pKa.
Secara teori, pKa dari spesies Co(III)-H/Co(I) dapat ditemukan
dengan menguji asam penyangga dengan nilai pKa yang lebih
besar, tetapi efek penyamarataan air sebagai pelarut menetapkan
pKa maksimum pada 14.0.57 Sebagai tambahan , fakta bahwa
potensi serangan ÿ1,70 V dan setengah gelombang potensial
ÿ1,82 V pada pH 6,5 diamati dalam voltammogram siklik CoMC6*a
dalam air dan elektrolit (tanpa buffer) membuat analisis puncak
katalitik menjadi sulit jika ada gelombang katalitik jauh melampaui
ÿ1,70 V. Namun, kami berspekulasi bahwa ada kemungkinan
bahwa potensial reduksi Co(II/I) bisa lebih katodik daripada ÿ1,73
V berdasarkan titik akhir pKa 11,6 di wilayah 2. Aktivitas diamati
untuk CoMC6*a bahkan dalam air dan tanpa asam penyangga
dengan nilai Eh ÿ1,82 V (Gambar 2). Potensial ÿ1,82 V sangat
rendah, tetapi potensial Co(II/I) dari CoMC6*a diamati menjadi
ÿ2,64 V versus Fc/Fc+ dalam DMF,2 yang secara signifikan lebih
negatif daripada Co(II/I ) potensial untuk katalis [Co(dmgBF2)2L]
(kira-kira ÿ2 V vs Fc/Fc+ dalam DMF).27 Satu kasus melibatkan
pKa untuk Co(III)-H/Co(I) dalam air melibatkan kobalt bis kompleks
(iminopiridin).58 Pada pH ÿ7, jalur utama untuk pembentukan
H2 dimulai dengan protonasi oleh H3O+ ketika spesies Co(I)
direduksi lebih lanjut pada ligan untuk menghasilkan spesies Co-
H yang penulis gambarkan sebagai [Co( III)- H(L4 •ÿ)]+ . Di bawah
pH 6, protonasi langsung Co(I) terjadi pada
1294
Artikel
menghasilkan [Co(III)-H(L4)]2+, menyiratkan bahwa Co(III)-H/
Co(I) pKa mungkin antara 6 dan 7. Meskipun tidak jelas secara
mekanis dari pekerjaan ini bagaimana H2 berevolusi setelah
peristiwa protonasi pertama terjadi, hasil ini menghasilkan
perkiraan pKa Co(III)-H/Co(I) untuk katalis kobalt yang bekerja dalam air.
pKa untuk kompleks kobalt bis(iminopiridin) lebih rendah daripada
yang tersirat untuk Co(III)-H/Co(I) pKa untuk CoMC6*a, tetapi
potensi reduksi Co(II/I) untuk kobalt bis( iminopyridine) diamati
pada ÿ1,05 V versus SCE [kira-kira ÿ1,0 V vs Ag/AgCl (1 M KCl)]
pada pH 7,0 (potensial berlebih 0,39 V). Untuk CoMC6*a,
potensial Co(II/I) mungkin serendah ÿ1,82 V versus Ag/AgCl (1 M
KCl) pada pH 6,5 (potensial berlebih 1,2 V). Telah dilaporkan
buffer.
bahwa potensial reduksi Co(II/I) berkorelasi langsung dengan pKa
untuk Co(III)-H/Co(I), di mana potensial yang lebih rendah sesuai
dengan nilai pKa yang lebih tinggi.59 Jadi, masuk akal bahwa
Co(III)-H/Co(I) pKa untuk CoMC6*a lebih besar daripada kompleks
kobalt bis(iminopiridin).
Dengan adanya asam penyangga 1a, 8a, 8b, dan 11a dengan
curah sterik pada proton asam amina, CoMC6*a menampilkan
aktivitas yang lebih rendah sebagaimana tercermin dari arus
puncak dalam voltammogram siklik jika dibandingkan dengan
voltammogram siklik pada kehadiran asam buffer induk (Gambar
4). Arus puncak yang lebih rendah dengan adanya asam buffer
yang terhalang secara sterik memberikan bukti lebih lanjut bahwa
asam buffer bertindak sebagai donor proton untuk CoMC6*a.
Seperti yang ditunjukkan paling jelas untuk turunan piperazine
dan morpholine, arus puncak gelombang katalitik berkurang pada
turunan yang terhalang secara sterik (Gambar 4a, b), tetapi posisi
setengah gelombang katalitik dipertahankan secara luas
sehubungan dengan pKa . Hasil ini menunjukkan bahwa kekuatan
pendorong untuk katalisis tergantung pada pKa donor proton dan
bahwa struktur donor proton dapat mempengaruhi laju.
Sifat invarian Eh sebagai fungsi konsentrasi asam penyangga
dengan fakta bahwa arus puncak tidak menunjukkan tren melintasi
donor proton 1ÿ12 ketika konsentrasi bentuk asam konjugat dari
donor proton dipertahankan konstan menunjukkan bahwa langkah-
langkah protonasi mungkin tidak membatasi laju meskipun ada
bukti kuat bahwa langkah-langkah pembatas laju dalam katalisis
evolusi H2 sering melibatkan langkah-langkah protonasi.49,60
Hasil yang mengejutkan ini dapat dikaitkan dengan perancah
peptida CoMC6*a yang berperan dalam katalisis dengan
kemungkinan memposisikan donor proton untuk interaksi yang
menguntungkan dengan situs aktif seperti bahwa transfer proton
tidak akan membatasi laju. Perubahan konformasi di CoMC6*a
mungkin diperlukan agar hal ini terjadi. Efek dari donor proton
yang terhalang secara sterik dengan penurunan arus puncak
sebagai fungsi curah sterik di lokasi donasi proton mendukung
gagasan bahwa perancah peptida memiliki peran dalam
memposisikan asam penyangga untuk transfer proton. Seperti
yang ditunjukkan sebelumnya, jelas bahwa perancah peptida
berperan dalam katalisis, dibuktikan dengan efek lipatan CoMC6*a pada potensial
ÿ KESIMPULAN
Kami telah menunjukkan bahwa potensi yang diperlukan untuk
evolusi H2 oleh enzim mini sintetik CoMC6*a diubah secara
dramatis dengan penambahan donor proton eksogen dalam air.
Selain itu, ketergantungan potensial setengah gelombang katalitik
pada pKa donor proton jatuh ke dalam dua rezim berbeda yang
konsisten dengan jalur evolusi H2 yang berbeda. Selain itu,
sebagian besar sterik donor proton berdampak pada arus katalitik.
Hasil ini menunjukkan bahwa pKa dan
https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google
Biokimia pubs.acs.org/biochemistry
struktur buffer yang digunakan harus dipertimbangkan ketika
mengembangkan dan mengevaluasi sistem dalam air untuk proton
yang memerlukan katalisis. Seperti yang ditunjukkan oleh sistem
tetrafenilporfirin besi yang stabil dalam air untuk reduksi CO2 , pilihan
buffer bahkan dapat menyetel selektivitas antara pembentukan CO
atau H2.61 Dalam kasus yang dievaluasi di sini, buffer juga dapat
memberikan pegangan untuk memeriksa mekanisme evolusi hidrogen,
seperti yang diperlihatkan diperparah oleh ketergantungan yang kuat
dari potensial setengah gelombang katalitik pada pKa donor proton
dan perbedaan hubungan potensial-pKa yang muncul.
ÿ KONTEN TERKAIT
*sÿ Informasi Pendukung
Informasi Pendukung tersedia gratis di https://pubs.acs.org/doi/10.1021/
acs.biochem.0c00060.
Detail eksperimental, spektrum, dan gambar dan tabel tambahan
(PDF)
ÿ INFORMASI PENULIS
Penulis yang sesuai
Kara L. Bren ÿ Departemen Kimia, Universitas Rochester,
Rochester, New York 14627, Amerika Serikat;
orcid.org/0000-0002-8082-3634; Telepon: (585) 275-
4335; Email: bren@chem.rochester.edu
Penulis
Jennifer M. Le ÿ Departemen Kimia, Universitas Rochester,
Rochester, New York 14627, Amerika Serikat Georgios
Alachouzos ÿ Departemen Kimia, Universitas Rochester, Rochester,
New York 14627, Amerika Serikat Marco Chino ÿ Departemen
Ilmu Kimia, Universitas of Naples Federico II, 80126 Naples, Italia
Alison J. Frontier ÿ Departemen Kimia, Universitas Rochester,
Rochester, New York 14627, Amerika Serikat; orcid.org/
0000-0001-5560-7414 Angela Lombardi ÿ Departemen Ilmu Kimia,
Universitas Naples Federico II, 80126 Napoli, Italia
Informasi kontak lengkap tersedia di: https://
pubs.acs.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Pendanaan
Karya ini didukung oleh Divisi Ilmu Kimia, Geosains dan Biosains,
Kantor Ilmu Energi Dasar, Kantor Sains, Departemen Energi AS,
melalui Grant DE FG02-09ER16121 (studi elektrokimia) dan oleh
Wilayah Campania, Italia, Departemen Riset Ilmiah , POR-FESR
2014ÿ2020, Asse 1, Grant B63D187000350007 (desain dan persiapan
katalis).
Catatan
Para penulis menyatakan tidak ada persaingan kepentingan keuangan.
ÿ UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis berterima kasih kepada Jose L. Alvarez-Hernandez untuk diskusi
yang bermanfaat.
ÿ REFERENSI
(1) Kandemir, B., Kubie, L., Guo, Y., Sheldon, B., dan Bren, KL
(2016) Evolusi Hidrogen dari Air dalam Kondisi Aerobik yang Dikatalisis
oleh Cobalt ATCUN Metallopeptide. Inorg. kimia 55, 1355ÿ1357.
(2) Firpo, V., Le, JM, Pavone, V., Lombardi, A., and Bren, KL
(2018) Evolusi hidrogen dari air yang dikatalisis oleh kobalt
1295
Artikel
mimochrome VI*a, protein mini sintetik. kimia Sains. 9, 8582ÿ 8589.
(3) Boralugodage, NP, Arachchige, RJ, Dutta, A., Buchko, GW, and
Shaw, WJ (2017) Mengevaluasi peran asam amino asam, basa, dan
polar serta dipeptida pada elektrokatalis molekular untuk H2 oksidasi.
Katal. Sains. Technol. 7, 1108ÿ1121.
(4) Ahmed, ME, Dey, S., Darensbourg, MY, dan Dey, A. (2018)
Produksi H2 yang Toleran Oksigen oleh [FeFe]-H2ase Active Site Mimics
Dibantu oleh Second Sphere Proton Shuttle. Selai. kimia Soc. 140,
12457ÿ12468.
(5) Lakadamyali, F., Kato, M., Muresan, NM, dan Reisner, E.
(2012) Reduksi Selektif Proton Berair menjadi Hidrogen dengan Katalis
Kobaloksim Sintetik dalam Kehadiran Oksigen Atmosfer. Angew. Kimia,
Int. Ed. 51, 9381ÿ9384.
(6) McNamara, WR, Han, Z., Alperin, PJ, Brennessel, WW, Holland,
PL, dan Eisenberg, R. (2011) Kompleks Cobalt Dithiolene untuk Reduksi
Proton Fotokatalitik dan Elektrokatalitik . Selai. kimia Soc. 133,
15368ÿ15371.
(7) Ahmed, ME, Chattopadhyay, S., Wang, L., Brazzolotto, D., Pramanik,
D., Aldakov, D., Fize, J., Morozan, A., Gennari, M., Duboc, C ., Dey, A.,
and Artero, V. (2018) Evolusi Hidrogen dari Larutan Berair yang Dimediasi
oleh Model Heterogenisasi [NiFe]-Hydrogenase: pH Rendah Mengaktifkan
Katalisis melalui Mekanisme yang Relevan dengan Enzim.
Angew. Kimia, Int. Ed. 57, 16001ÿ16004.
(8) Solis, BH, Maher, AG, Honda, T., Powers, DC, Nocera, D.
G., dan Hammes-Schiffer, S. (2014) Analisis Teoritis Cobalt Hangman
Porphyrins: Dearomatisasi Ligan dan Implikasi Mekanistik untuk Evolusi
Hidrogen. Katal ACS. 4, 4516ÿ4526.
(9) Solis, BH, Maher, AG, Dogutan, DK, Nocera, DG, dan Hammes-
Schiffer, S. (2016) Perantara phlorin nikel yang dibentuk oleh transfer
elektron berpasangan proton dalam mekanisme evolusi hidrogen.
Proses Natl. Acad. Tahu AS 113, 485ÿ492.
(10) Bediako, DK, Solis, BH, Dogutan, DK, Roubelakis, MM, Maher,
AG, Lee, CH, Chambers, MB, Hammes-Schiffer, S., and Nocera, DG
(2014) Peran relay proton pendant dan transfer elektron berpasangan
proton pada reaksi evolusi hidrogen oleh porfirin algojo nikel. Proses
Natl. Acad. Sains. AS 111, 15001ÿ 15006.
(11) Helm, ML, Stewart, MP, Bullock, RM, DuBois, MR, dan DuBois,
DL (2011) Elektrokatalis Sintetik Nikel dengan Frekuensi Perputaran
Di atas 100.000 s ÿ1 untuk Produksi H2 . Sains 333, 863ÿ866.
(12) Panggilan, A., Casadevall, C., Romero-Rivera, A., Martin-
Diaconescu, V., Sommer, DJ, Osuna, S., Ghirlanda, G., dan Lloret-Fillol, J.
(2019) Peningkatan Pengurangan Air Elektro dan Fotokatalitik oleh
Katalis Kobalt Terbatas di Streptavidin. Katal ACS. 9, 5837ÿ5846.
(13) Keller, SG, Probst, B, Heinisch, T, Alberto, R, dan Ward, T.
R. (2018) Evolusi Hidrogen Berbasis Foto oleh Hidrogenase Buatan
Memanfaatkan Teknologi Biotin-Streptavidin. Helv.
Chim. UU 101, e1800036.
(14) Jackson, MN, Jung, O., Lamotte, HC, dan Surendranath, Y.
(2019) Promosi Ketergantungan Donor dari Transfer Elektron
Berpasangan Proton Antar Muka dalam Elektrokatalisis Berair. Katal
ACS. 9, 3737ÿ 3743.
(15) Wang, D., dan Groves, JT (2013) Oksidasi air yang efisien
dikatalisis oleh porfirin kobalt kationik homogen dengan peran penting
untuk basis penyangga. Proses Natl. Acad. Sains. AS 110, 15579ÿ 15584.
(16) Chen, Z., Concepcion, JJ, Hu, X., Yang, W., Hoertz, PG, and
Meyer, TJ (2010) Konser transfer atom-proton O dalam langkah
pembentukan ikatan O–O dalam oksidasi air . Proses Natl. Acad. Sains.
AS 107, 7225ÿ7229.
(17) Song, N., Concepcion, JJ, Binstead, RA, Rudd, JA, Vannucci, AK,
Dares, CJ, Coggins, MK, dan Meyer, TJ (2015)
Oksidasi air katalitik yang ditingkatkan basa oleh kompleks
karboksilatÿbipiridin Ru(II). Proses Natl. Acad. Sains. AS 112, 4935ÿ4940.
(18) Wang, JW, Zhang, XQ, Huang, HH, and Lu, TB (2016)
Kompleks Nikel(II) sebagai Elektrokatalis Homogen untuk Air
https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google
Biokimia pubs.acs.org/biochemistry
2ÿ
Oksidasi pada pH Netral: Peran Ganda HPO4 ChemCatChem dalam katalisis.
8, 3287ÿ3293.
(19) Zhang, L.-H., Yu, F., Shi, Y., Li, F., and Li, H. (2019) Basa meningkatkan
oksidasi air elektrokimia oleh kompleks nikel dalam larutan berair netral. kimia
Komunal. 55, 6122ÿ6125.
(20) Schneider, CR, Lewis, LC, and Shafaat, HS (2019) Yang baik, netral,
dan positif: identitas penyangga berdampak pada CO2 aktivitas reduksi oleh
nikel(II) siklam. Dalt. Trans. 48, 15810ÿ 15821.
(21) Jonsson, B.-H., Steiner, H., dan Lindskog, S. (1976)
Partisipasi buffer dalam mekanisme katalitik karbonat anhidrase. FEB Lett. 64,
310ÿ314.
(22) Chino, M., Leone, L., Zambrano, G., Pirro, F., D'Alonzo, D., Firpo, V.,
Aref, D., Lista, L., Maglio, O., Nastri, F., dan Lombardi, A.
(2018) Katalisis oksidasi oleh porfirin besi dan mangan di dalam sangkar mirip
enzim. Biopolimer 109, e23107.
(23) Porras, SP, dan Kenndler, E. (2005) Elektroforesis kapiler dalam N,N-
dimethylformamide. Elektroforesis 26, 3279ÿ3291.
(24) Queyriaux, N., Jane, RT, Massin, J., Artero, V., dan Chavarot Kerlidou,
M. (2015) Perkembangan terkini dalam hidrogen yang mengembangkan katalis
molekul kobalt (II)ÿpolipiridil. Koord. kimia Pdt. 304ÿ 305, 3ÿ19.
(25) Artero, V., Chavarot-Kerlidou, M., dan Fontecave, M. (2011)
Memisahkan Air dengan Kobalt. Angew. Kimia, Int. Ed. 50, 7238ÿ7266.
(26) Dempsey, JL, Brunschwig, BS, Winkler, JR, dan Gray, H.
B. (2009) Evolusi Hidrogen Dikatalisis oleh Cobaloximes. Rek. kimia
Res. 42, 1995ÿ2004.
(27) Baffert, C., Artero, V., dan Fontecave, M. (2007) Cobaloxim sebagai
Model Fungsional untuk Hidrogenase. 2. Elektroreduksi Proton yang Dikatalisis
oleh Kompleks Difluoroborylbis(dimethylglyoximato)cobalt(II) dalam Media
Organik. Inorg. kimia 46, 1817ÿ1824.
(28) Fihri, A., Artero, V., Razavet, M., Baffert, C., Leibl, W., dan Fontecave,
M. (2008) Perangkat Fotokatalitik Berbasis Cobaloxime untuk Produksi
Hidrogen . Angew. Kimia, Int. Ed. 47, 564ÿ567.
(29) Dempsey, JL, Winkler, JR, dan Gray, HB (2010)
Mekanisme Evolusi H2 dari fotogenerasi Hydridocobalox ime. Selai. kimia
Soc. 132, 16774ÿ16776. ÿ
(30) Costentin, C., Dridi, H., dan Saveant, J.-M. (2014 ) Katalisis
Molekuler Evolusi H2 : Mendiagnosis Jalur Heterolitik versus Homolitik.
Selai. kimia Soc. 136, 13727ÿ13734.
(31) DuBois, DL (2014) Pengembangan katalis Elektro Molekuler untuk
Penyimpanan Energi. Inorg. kimia 53, 3935ÿ3960.
(32) Bacchi, M., Berggren, G., Niklas, J., Veinberg, E., Mara, MW, Shelby,
ML, Poluektov, OG, Chen, LX, Tiede, DM, Cavazza, C., Lapangan, MJ,
Fontecave, M., dan Artero, V. (2014) Hidrogenase Buatan Berbasis Cobaloxime.
Inorg. kimia 53, 8071ÿ8082.
(33) Sommer, DJ, Vaughn, MD, dan Ghirlanda, G. (2014)
Interaksi kulit sekunder protein meningkatkan produksi hidrogen kobalt
protoporphyrin IX yang diinduksi foto. kimia Komunal. 50, 15852ÿ15855.
(34) Kleingardner, JG, Kandemir, B., dan Bren, KL (2014)
Evolusi hidrogen dari air netral dalam kondisi aerobik dikatalisis oleh cobalt
microperoxidase-11. Selai. kimia Soc. 136, 4ÿ7.
(35) Bren, KL (2015) Pendekatan multidisiplin terhadap hidrogen surya.
Antarmuka Fokus 5, 20140091.
(36) Maeda, K., dan Domen, K. (2010) Pemisahan Air Fotokatalitik : Kemajuan
Terkini dan Tantangan Masa Depan. J.Fis. kimia Lett. 1, 2655ÿ2661.
(37) Le, JM, dan Bren, KL (2019) Merekayasa Enzim dan Katalis Terinspirasi
Bio untuk Konversi Energi. Surat Energi ACS. 4, 2168ÿ2180.
(38) Caserta, G., Chino, M., Firpo, V., Zambrano, G., Leone, L., D'Alonzo, D.,
Nastri, F., Maglio, O., Pavone, V., dan Lombardi, A.
(2018) Peningkatan Aktivitas Peroksidase pada Katalis Mimochrome VI Buatan
Melalui Rancangan Rasional. ChemBioChem 19, 1823ÿ1826.
(39) Leone, L., D'Alonzo, D., Balland, V., Zambrano, G., Chino, M., Nastri, F.,
Maglio, O., Pavone, V., dan Lombardi, A. (2018) Mn Mimochrome VI*a: Suatu
Metaloenzim Buatan Dengan Aktivitas Peroksigenase. Depan. kimia 6, 590.
1296
Artikel
(40) Weinberg, DR, Gagliardi, CJ, Hull, JF, Murphy, CF, Kent, CA, Westlake,
BC, Paul, A., Ess, DH, McCafferty, DG, dan Meyer, TJ (2012) Proton-Coupled
Transfer Elektron. kimia
Pdt. 112, 4016ÿ4093.
(41) McCarthy, BD, and Dempsey, JL (2017) Decoding Transfer Elektron
Tergabung Proton dengan Diagram PotensiÿpKa. Inorg.
kimia 56, 1225ÿ1231.
(42) Suzuki, K., Okano, K., Nakai, K., Terao, Y., and Sekiya, M.
(1983) Penataan Ulang Reduktif 2-Kloroalkanamida dengan Litium Aluminium
Hidrida yang Mengarah ke Amina Alifatik Bercabang ÿ-Metil. Sintesis 1983,
723ÿ725.
(43) Denton, SM (1999) Modifikasi Reaksi Bouveault untuk Persiapan ÿ,ÿ-
Dimethylamines dari Amida. Synlett 1999, 55ÿ 56.
(44) Bilke, JL, dan O'Brien, P. (2008) Pada Deprotonasi Asimetris Katalitik
Dua Ligan dari N-Boc Pyrrolidine: Menyelidiki Pengaruh Ligan Stoikiometrik.
J.Org. kimia 73, 6452ÿ6454.
(45) Carpino, LA, Ionescu, D., dan El-Faham, A. (1996 ) Kopling Peptida
dalam Kehadiran Amina Tersier yang Sangat Terhalang. J.Org.
kimia 61, 2460ÿ2465.
(46) Denk , MK , Krause , MJ , Niyogi , DF , dan Gill , NK (2003).
Reaksi 1,2-dibromoetana dengan amina primer: pembentukan etilenadiamina
tersubstitusi N,Nÿ RNHÿCH2CH2ÿNHR dan poliamina homolog RNHÿ
[CH2CH2NR]nÿH. Tetrahedron 59, 7565ÿ7570.
(47) Maher, AG, Passard, G., Dogutan, DK, Halbach, RL, Anderson, BL,
Gagliardi, CJ, Taniguchi, M., Lindsey, JS, and Nocera, DG (2017) Katalisis
Evolusi Hidrogen dengan Jarang Klorin kobalt tersubstitusi. Katalog ACS. 7 ,
3597ÿ3606 .
(48) Lee , CH , Dogutan , DK , dan Nocera , DG ( 2011 ).
Generasi Hidrogen oleh Hangman Metalloporphyrins. Selai. kimia
Soc. 133, 8775ÿ8777.
ÿ
(49) Costentin, C., dan Saveant, J.-M. (2014) Multielektron, Katalisis Molekuler
Multistep dari Reaksi Elektrokimia: Penandaan Bench dari Katalis Homogen.
ChemElectroChem 1, 1226ÿ1236.
(50) Marinescu, SC, Winkler, JR, dan Gray, HB (2012)
Mekanisme molekuler dari evolusi hidrogen yang dikatalisis oleh kobalt. Proses
Natl. Acad. Tahu AS 109, 15127ÿ15131.
(51) King, AE, Surendranath, Y., Piro, NA, Bigi, JP, Long, JR, and Chang, CJ
(2013) Sebuah studi mekanistik reduksi proton yang dikatalisis oleh kompleks
kobalt pentapyridine: bukti keterlibatan anasi berbasis jalur. kimia Sains. 4,
1578ÿ1587.
(52) Razavet, M., Artero, V., dan Fontecave, M. (2005 ) Elektroreduksi Proton
Dikatalisis oleh Cobaloximes: Model Fungsional untuk Hidrogenase. Inorg.
kimia 44, 4786ÿ4795.
(53) Muckerman, JT, dan Fujita, E. (2011) Studi teoritis tentang mekanisme
produksi hidrogen katalitik oleh kobaloksim.
kimia Komunal. 47, 12456.
(54) Koelle, U., dan Paul, S. (1986) Reduksi elektrokimia dari kompleks fosfin
siklopentadienilkobalt terprotonasi. Inorg. kimia 25, 2689ÿ2694.
(55) Wiedner, ES, Appel, AM, DuBois, DL, dan Bullock, RM
(2013) Kajian Termokimia dan Mekanistik Produksi Hidrogen Elektrokatalitik
dengan Kompleks Kobalt yang Mengandung Liontin Amina. Inorg. kimia 52,
14391ÿ14403.
(56) Hu, X., Cossairt, BM, Brunschwig, BS, Lewis, NS, dan Peters, JC (2005)
Evolusi hidrogen elektrokatalitik oleh kompleks kobalt difluoroboril-diglioksimat.
kimia Komunal. 37, 4723ÿ
4725.
(57) Moran, MJ (2006) Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Kekuatan Asam
Relatif Dalam Air: Model Sederhana. J.Chem. Pendidikan 83, 800ÿ803.
(58) Stubbert, BD, Peters, JC, dan Gray, HB (2011 ) Reduksi Air Cepat
menjadi H2 yang Dikatalisis oleh Cobalt Bis(iminopyridine)
Kompleks. Selai. kimia Soc. 133, 18070ÿ18073.
(59) Solis, BH, dan Hammes-Schiffer, S. (2011 ) Efek Substituen pada Katalis
Cobalt Diglyoxime untuk Evolusi Hidrogen. J.
Saya. kimia Soc. 133, 19036ÿ19039.
https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297
Machine Translated by Google

Biokimia pubs.acs.org/biochemistry Artikel

(60) Rountree, ES, McCarthy, BD, Eisenhart, TT, dan Dempsey, JL (2014) Evaluasi
Elektrokatalis Homogen dengan Cyclic Voltammetry. Inorg. kimia 53, 9983ÿ10002.

(61) Costentin, C., Robert, M., Saveant, J.-M., dan Tatin, A. (2015)
Katalis molekuler yang efisien dan selektif untuk konversi elektrokimia CO2-ke-CO dalam air.
Proses Natl. Acad. Sains. AS 112, 6882ÿ6886.

1297 https://dx.doi.org/10.1021/acs.biochem.0c00060
Biokimia 2020, 59, 1289ÿ1297