ISOLASI, IDENTIFIKASI, VALIDASI PENETAPAN KADAR ALFA

MANGOSTIN DAN GAMMA MANGOSTIN KULIT BUAH MANGGIS

(Garcinia mangostana L.)

TESIS
Diajukan Kepada
Program Studi Magister Farmasi
Sekolah Pascasarjana Universitas Muhammadiyah Surakarta
untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Guna Memperoleh
Gelar Magister dalam Ilmu Farmasi

Oleh

Kurniawan
NIM. V 100170009

MAGISTER FARMASI
SEKOLAH PASCASARJANA
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2020
 LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING

NOTA PEMBIMBING

Azis Saifudin, Ph. D., Apt

Program Studi Magister Farmasi
Sekolah Pascasarjana
Universitas Muhammadiyah Surakarta

Nota Dinas
Hal : Tesis Kurniawan

Kepada Yth.
Ketua Program Studi Magister Farmasi
Sekolah Pascasarjana
Universitas Muhammadiyah Surakarta

Assalamu’alaikum wr. wb.

Setelah membaca, meneliti, mengoreksi dan mengadakan perbaikan terhadap tesis
saudara :

Nama : Kurniawan
NIM : V 100170009
Konsentrasi : Ilmu Farmasi
Judul : Isolasi, Identifikasi, Validasi Penetapan Kadar Alfa Mangostin dan Gamma
Mangostin Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.)

Dengan ini kami menilai tesis tersebut dapat disetujui untuk diajukan dalam
sidang ujian tesis pada Program Studi Ilmu Farmasi, Sekolah Pascasarjana
Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Wassalamu’alaikum wr. wb.

Surakarta, Februari 2020

Pembimbing,

Azis Saifudin, Ph. D., Apt.

ii
 LEMBAR PENGESAHAN
TESIS BERJUDUL

ISOLASI, IDENTIFIKASI, VALIDASI PENETAPAN KADAR ALFA MANGOSTIN

DAN GAMMA MANGOSTIN KULIT BUAH MANGGIS (Garcinia mangostana L.)

Yang dipersiapkan dan disusun oleh

KURNIAWAN

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Pada tanggal ……………….. dan dinyatakan telah

memenuhi persyaratan untuk diterima.

SUSUNAN DEWAN PENGUJI

Pembimbing Utama

Azis Saifudin, Ph. D., Apt

Anggota Dewan Penguji I Anggota Dewan Penguji II

Prof. Dr. Muhammad Da’i, M. Si, Apt. Prof. Dr. Muhtadi, M.Si

Surakarta, Maret 2020

Direktur Pascasarjana

Prof. Dr. Bambang Sumardjoko, M.Pd.

iii

iii
 PERNYATAAN KEASLIAN TESIS

Saya yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama : Kurniawan

NIM : V 100170009

Program Studi : Magister Farmasi

Konsentrasi : Ilmu Farmasi

Judul : Isolasi, Identifikasi, Validasi Penetapan Kadar Alfa Mangostin dan

Gamma Mangostin Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.)

Menyatakan dengan sebenarnya bahwa tesis yang saya serahkan benar-benar hasil
karya saya sendiri, kecuali kutipan-kutipan dan ringkasan-ringkasan yang telah
saya jelaskan sumbernya. Apabila di kemudian hari terbukti tesis ini jiplakan dan
terdapat plagiasi, gelar yang diberikan oleh Universitas Muhammadiyah Surakarta
batal saya terima.

Surakarta, 7 Februari 2020

Yang membuat pernyataan,

Kurniawan

iv
 Isolasi, Identifikasi, Validasi Penetapan Kadar Senyawa Alfa
Mangostin dan Gamma Mangostin Kulit Buah Manggis (Garcinia
mangostana L.)

ABSTRAK

Kurniawan

Email : kurniya@yahoo.com

. Kulit buah manggis saat ini banyak digunakan masyarakat sebagai bahan
minuman kesehatan. Oleh karena itu, perlu adanya standarisasi kualitas bahan baku,
sediaan ekstrak dan senyawanya agar memenuhi persyaratan mutu sebagaimana
tercantum dalam Farmakope Herbal Indonesia. Kandungan kulit buah manggis
(Garcinia mangostana L.) terdiri dari berbagai macam xanton terutama adalah α-
mangostin dan γ-mangostin. Keberadaan kedua senyawa tersebut dapat menjadi
parameter kualitas standar dari ekstrak kulit buah manggis sebagai bahan obat herbal.
Metode penetapan kadar baku standardalam ekstrak metanol kulit buah manggis
dengan metode KCKT serta membandingkan kadar α-mangostin dan γ-mangostin
dari dua produk yang ada dipasaran.Ekstrak dibuat dengan metode maserasi
menggunakan metanol. Kemudian difraksinasi dan dipurifikasi untuk memperoleh
fraksi menjadi isolat dengan berbagai teknik kromatografi. Identifikasi senyawa
hasil isolasi dengan KLT menggunakan fase gerak heksan:etil asetat (2 : 3), H-NMR
dan KCKT fase terbalik dengan fase gerak air: asetonitiril (80 : 20), Analisa
kuantitatif senyawa baku standar dengan persamaan regresi dan dibandingkan
dengan kadar senyawa yang terkait dengan dua produk di pasaran. Hasil penetapan
kadar untuk senyawa standar α-mangostin memiliki nilai rata-rata 0,155 mg/mL
dengan kadar produk A 0,17 mg/mL dan kadar produk B 0,23 mg/mL. Kadar untuk
senyawa standar γ-mangostin nilai rata-rata 0,386 mg/mL dengan kadar produk A
0,16 mg/mL dan produk B 0,232 mg/mL. Validasi metode penetapan kadar dengan
menentukan nilai-nilai parameter linearitas, batas deteksi dan batas kuantitasi.
Linearitas α-mangostin menunjukkan nilai koefisien relasi (r) sebesar 0,993 dengan
LOD sebesar 0,043 mg/ml dan LOQ sebesar 0,129 mg/ml. Sedangkan γ-mangostin
nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,997 dengan LOD sebesar 0,169 mg/ml dan LOQ
sebesar 0,51 mg/ml. Hasil uji α-mangostin dan γ-mangostin telah memenuhi kriteria
validasi

Kata kunci: Garcinia mangostana L, metabolit sekunder, α-mangostin dan γ-

mangostin, isolasi, fraksinasi dan purifikasi.

v
 ISOLATION, IDENTIFICATION, VALIDATION OF
DETERMINATION OF ALPHA MANGOSTIN AND GAMMA
MANGOSTIN COMPOUNDS FOR MANGOSTEEN RIND
(Garcinia mangostana L.)

ABSTRACT

Kurniawan
Email : kurniya@yahoo.com

Mangosteen rind is currently widely used by the public as a health drink.

Therefore, it is necessary to standardize the quality of raw materials, extracts and their
compounds in order to meet the quality requirements as stated in the Indonesian Herbal
Pharmacopoeia. The content of mangosteen rind (Garcinia mangostana L.) consists of
various kinds of xantons, especially α-mangostin and γ-mangostin. The existence of
these two compounds can be a standard quality parameter of mangosteen rind extract as
herbal medicinal ingredients.The standard levels of methanol extract of α-mangostin
and γ-mangostin in the mangosteen peel was extracted by HPLC method and the levels
of α-mangostin and γ-mangostin from two products on the market were compared. The
extract was made by maceration method using methanol. Then fractionated and purified
to obtain fractions into isolates by various chromatographic techniques. Identification of
isolated compounds by TLCused mobile phase hexane:ethyl acetate (2: 3), H-NMR and
HPLC reversed phase with water:acetonitrile (80:20). Quantitative analysis of standard
raw compounds using regression equations and compared with compound levels of two
related products in the market. The results of the validation analysis of the
determination of content for the standard alpha mangostin compound has an average
value 0,155 mg/mL whith for A product levels are 0,17 mg/mL and B product levels are
0,23 mg/mL. Content determination validation for gamma mangostin standard
compound have an average value 0,386 mg/mL whith for A products are 0,16 mg/mL
and B products are 0,232 mg/mL. Validation of the determination method by
determining the values of linearity parameters, detection limits and quantitation limits.
α-mangostin linearity shows the value of the relation coefficient (r) of 0.993 with a
LOD of 0.043 mg / ml and LOQ of 0.129 mg / ml. While γ-mangostin the value of the
correlation coefficient (r) of 0.997 with a LOD of 0.169 mg / ml and LOQ of 0.51 mg /
ml. α-mangostin and γ-mangostin test results have met the validation criteria
Keywords: Garcinia mangostana L, secondary metabolites, α-mangostin and γ-
mangostin, isolation, fractionation and purification

vi
 KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahiim

Alhamdulillah, puji dan syukur penulis ucapkan ke hadirat Allah SWT

karena atas rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat melaksanakan
penelitian dan menyelesaikan tesis yang berjudul ISOLASI, IDENTIFIKASI,
VALIDASI PENETAPAN KADAR ALFA MANGOSTIN DAN GAMMA
MANGOSTIN KULIT BUAH MANGGIS (Garcinia mangostana L.)
. Tesis ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar
Magister Farmasi Sekolah Pascasarjana Muhammadiyah Surakarta.
Selama penelitian dan penyusunan tesis ini, penulis banyak mendapat
dukungan, bantuan dan masukan yang amat berharga dari berbagai pihak. Oleh
karena itu, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih yang tidak terhingga
kepada :
1. Prof. Dr. Sofyan Anif, M.Si selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Surakarta
2. Prof. Dr. Bambang Sumardjoko, M. Pd. selaku Direktur Sekolah Pascasarjana
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
3. Zakky Cholisoh, M. Clin. Pharm., PhD, Apt. selaku Ketua Program Studi
Magister Farmasi Sekolah Pascasarjana Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
4. Azis Saifudin, PhD., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta serta sebagai Dosen Pembimbing yang telah
memberikan banyak pengarahan, kritik dan saran yang berharga bagi penulis
5. Prof. Dr. Muhammad Da’i, M. Si., Apt. selaku Dosen Penguji yang telah
memberikan banyak pengarahan kritik dan saran sehingga penulis dapat
menyelesaikan penelitian ini.
6. Prof. Dr. Muhtadi, M.Si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan
banyak pengarahan kritik dan saran sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian ini
7. Seluruh staff pengajar dan tim laboran yang telah memberikan bekal ilmu
pengetahuan bagi penulis selama mengikuti pendidikan di Pascasarjana
Universitas Muhammadiyah Surakarta.

vii
8. Pimpinan perpustakaan yang telah memberikan fasilitas dalam penyelesaian
studi kepustakaan.
9. Orang tua, istri, anak dan keluarga atas segala perhatian, doa, kasih sayang
dan dukungan baik secara moril maupun secara materil yang telah diberikan
kepada penulis.
10. Teman-teman Magister Farmasi lintas angkatan yang telah melewati waktu
bersama saat berjuang menyelesaikan penelitian tesis dan pendidikan.
Semoga Allah SWT memberikan balasan yang berlipat ganda atas jasa-
jasa dan perhatian mereka.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa tesis ini masih jauh dari
kesempurnaan, sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat
membangun demi kesempurnaan tesis ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang Farmasi.

Surakarta, Februari 2020

Penulis

viii
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL............................................................................................................... i
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ......................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN.................................................................................... iii
PERNYATAAN KEASLIAN TESIS .................................................................... iv
ABSTRAK .............................................................................................................. v
ABSTRACT ............................................................................................................. vi
KATA PENGANTAR........................................................................................... vii
DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiii
DAFTAR SINGKATAN...................................................................................... xiv
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
A. Latar belakang........................................................................................... 1
B. Rumusan masalah ..................................................................................... 3
C. Tujuan penelitian ...................................................................................... 3
D. Manfaat penelitian .................................................................................... 3
BAB II KAJIAN PUSTAKA .................................................................................. 4
A. Tinjauan Teori........................................................................................... 4
B. Hipotesis ................................................................................................. 20
BAB III METODE PENELITIAN ........................................................................ 21
A. Kategori dan Rancangan penelitian ........................................................ 21
B. Variabel Penelitian .................................................................................. 21
C. Alat dan Bahan ........................................................................................ 21
D. Tempat Penelitian ................................................................................... 21
E. Jalannya Penelitian ................................................................................. 22
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ...................................... 26
A. Penyiapan Bahan Uji............................................................................... 26
B. Ekstraksi Kulit Buah Manggis ................................................................ 26

ix
 C. Orientasi Fase Gerak ............................................................................... 28
D. Fraksinasi Kulit Buah Manggis .............................................................. 28

E. Purifikasi ................................................................................................. 30

F. Identifikasi dan Uji Kuantitatif dengan KCKT ....................................... 32

BAB V PENUTUP………………………………………………………………………...47
A. Kesimpulan ............................................................................................. 47
B. Saran ....................................................................................................... 47

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 48

LAMPIRAN-LAMPIRAN .................................................................................... 50

x
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Hasil ekstraksi methanol kulit buah manggis ........................................... 27

Tabel 2 Hasil ekstraksi heksana Produk A ............................................................ 27

Tabel 3 Hasil ekstraksi heksana Produk B ............................................................ 27

Tabel 4 Hasil fraksinasi ekstrak ............................................................................ 28

Tabel 5 Hasil sub fraksinasi .................................................................................. 29

Tabel 6 Hasil Rf isolasi alfa mangostin dan gamma mangostin ........................... 31

Tabel 7 Hasil perhitungan regresi alfa mangostin ................................................. 35

Tabel 8 Hasil perhitungan regresi gamma mangostin ........................................... 37

Tabel 9 Hasil perhitungan regresi alfa mangostin produk A ................................ 39

Tabel 10 Hasil perhitungan regresi gamma mangostin produk A ......................... 39

Tabel 11 Hasil perhitungan regresi alfa mangostin produk B ............................... 39

Tabel 12 Tabel perhitungan regresi gamma mangostin produk B ....................... 40

Tabel 13 Hasil analisa H’ NMR alfa mangostin ................................................... 42

Tabel 14 Tabel perbandingan H’NMR dengan referensi ...................................... 42

Tabel 15 Hasil analisa H’NMR gamma mangostin .............................................. 43

xi
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1 Hasil fraksinasi diamati KLT dengan fase gerak heksana:etil (2;3)…..30

Gambar 2 Hasil identifikasi KLT fase normal dengan fase gerak ........................ 31

Gambar 3 Hasil identifikasi KLT dengan fase terbalik......................................... 32

Gambar 4 Hasil identifikasi KCKT standar alfa mangostin ................................. 33

Gambar 5 Hasil identifikasi KCKT standar gamma mangostin ........................... 33

Gambar 6 Hasil identifikasi KCKT campuran alfa dan gamma mangostin ........ 33

Gambar 7 Kurva Baku alfa mangostin .................................................................. 34

Gambar 8 Kurva Baku gamma mangostin ............................................................ 36

Gambar 9 Standar alfa mangostin dan gamma mangostin .................................... 38

Gambar 10 Alfa mangostin dan gamma mangostin produk A .............................. 38

Gambar 11 Alfa mangostin dan gamma mangostin produk B .............................. 38

Gambar 12 Hasil H’NMR alfa mangostin............................................................. 42

Gambar 13 Struktur kimia senyawa alfa mangostin ............................................ 42

Gambar 14 Hasil H’NMR gamma mangostin ...................................................... 43

Gambar 15 Struktur kimia senyawa gamma mangostin ....................................... 44

xii
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Keterangan determinasi tanaman ............................................ 50

Lampiran 2. Hasil HPLC Campuran alfa mangostin dan gamma mangostin ....... 51

Lampiran 3. Hasil HPLC standar alfa mangsotin ................................................. 52

Lampiran 4. Hasil HPLC standar gamma mangostin ............................................ 53

Lampiran 5. Kurva Baku senyawa alfa mangostin .............................................. 54

Lampiran 6. Kurva Baku senyawa gamma mangostin .......................................... 55

Lampiran 7. Kurva Baku Alfa mangostin Produk A ............................................. 56

Lampiran 8. Kurva Baku Gamma mangostin Produk B ....................................... 57

Lampiran 9. Kurva Baku Alfa mangostin Produk A ............................................. 58

Lampiran 10. Kurva Baku Gamma mangsotin Produk B ..................................... 59

Lampiran 11. Spektrum H-NMR Alfa mangostin ................................................. 60

Lampiran 12. Spektrum H-NMR Gamma mangostin ........................................... 61

Lampiran 13. Surat keterangan uji turnitin ........................................................... 62

xiii
 DAFTAR SINGKATAN

1H-NMR : 1 Hidrogen Nuclear Magnetic Resonance

KLT : Kromatografi Lapis Tipis
KCV : Kromatografi Cair Vakum
LCMS : Liquid Chromatography-Mass Spectrometry
NMR : : Nuclear Magnetic Resonance
Rf : Retention factor
KCKT : Kromatografi Cair Kinerja Tinggi