SKRIPSI

Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun

Sirih Merah (Piper crocatum)

Disusun Guna Memenuhi Sebagian Syarat dalam Mencapai Gelar Sarjana di

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu-Ilmu Kesehatan
Universitas Alma Ata

Oleh

Nony Widiastuty

170500081
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ALMA ATA
TAHUN 2022

i
iii
 LEMBAR PENGESAHAN
Skripsi
Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun
Sirih Merah (Piper crocatum)
Telah diseminarkan dan dipertahankan di depan Dewan Penguji Untuk
mendapatkan gelar Sarjana di Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu-Ilmu
Kesehatan Universitas Alma Ata Tanggal: ……….
Oleh
Nony Widiastuty
170500081
SUSUNAN DEWAN PENGUJI

Pembimbing I
Apt.Emelda, M.Farm
Tanggal, …………………
Pembimbing II
Apt.Annisa Fatmawati, M.Farm
Tanggal, …………………
Penguji,
Apt. Rizal Fauzi. M.Clin.Pharm

Tanggal, ……………………

Mengetahui,
Dekan Fakultas Ilmu-Ilmu Kesehatan

Univerrsitas Alma Ata

(Dr. Yhona Paramanity S.Gz., Dietisien M.P.H.)

iii
 KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warahmatullahi Wabarakaatuh.

Alhamdulillah, segala puji bagi Allah SWT, yang tiada Tuhan selain Dia
serta yang mengusai alam semesta. Shalawat serta salam semoga selalu tercurah
kepada Nabi Muhammad SAW, keluarga, sahabat, dan pengikut-Nya yang
senantiasa dijalan-Nya.

Berkat Rahmat dan Inayah-Nya, penulis dapat menyelesaikan Skripsi

dengan judul “Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak
Etanol Daun Sirih Merah (Piper crocatum)” Skripsi ini disusun guna
melengkapi sebagian persyaratan mencapai gelar Sarjana di Program Studi
Farmasi Fakultas Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Alma Ata Yogyakarta.

Penulis menyadari dalam penyusunan Skripsi ini penulis mendapatkan

dukungan, nasehat dan bantuan dari berbagai pihak. Karena itu penulis
mengucapkan terima kasih kepada :

1. Prof. Dr. H. Hamam Hadi., MS., Sc.D., Sp.GK selaku Rektor Universitas
Alma Ata
2. Dr. Yhona Paramanity, S.Gz., MPH., RD Selaku Dekan Fakultas Ilmu-ilmu
Kesehatan Universitas Alma Ata

3. apt. Rizal Fauzi. M.Clin.Pharm, selaku Ketua Program Studi Sarjana

Farmasi
4. apt.Emelda, M.Farm, selaku pembimbing 1 yang berkenan meluangkan
waktunya untuk membimbing dan membantu penulis dalam penyusunan
tugas akhir ini.

5. apt.Annisa Fatmawati, M.Farm, selaku pembimbing 2 dan DPA (dosen

pembibing akademik) yang berkenan meluangkan waktunya untuk
membimbing dan membantu penulis dalam penyusunan tugas akhir ini.

iv
6. apt. Rizal Fauzi. M.Clin.Pharm selaku Penguji yang berkenan meluangkan
waktunya menguji dan memberikan pengarahan kepada penulis.
7. Kedua orang tua, dan kakak yang selalu memberikan dukungan, doa, dan
semangat kepada penulis sehingga penulis bisa menyelesaikan tugas akhir
ini.
8. Teman-teman mahasiswa Program Studi Sarjana Farmasi angkatan 2017
Universitas Alma Ata Yogyakarta dan semua pihak yang tidak dapat
disebutkan satu persatu yang telah membantu terselesaikannya tugas akhir
penelitian ini.

Penulis menyadari Skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan sehingga

penulis mengharapkan kritik dan saran dari berbagai pihak guna kesempurnaan
Skripsi ini.

Wassalamu’alaikun Warahmatullahi Wabarakaatuh.

Yogyakarta, 10 Agustus 2022

(Nony Widiastuty)

v
vi
 DAFTAR ISI

SKRIPSI........................................................................................................................i
LEMBAR PERSETUJUAN .......................................................................................i
LEMBAR PENGESAHAN .........................................................................................i
KATA PENGANTAR..................................................................................................i
DAFTAR ISI.................................................................................................................i
DAFTAR GAMBAR....................................................................................................i
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................................i
DAFTAR SINGKATAN..............................................................................................i
INTISARI.....................................................................................................................2
ABSTRAK....................................................................................................................3
BAB I............................................................................................................................1
PENDAHULUAN........................................................................................................1
A. Latar Belakang.....................................................................................................1
B. Rumusan Masalah................................................................................................4
C. Tujuan Penelitiaan................................................................................................4
D. Manfaat Penelitian...............................................................................................5
E. Keaslian Penelitian...............................................................................................6
BAB II...........................................................................................................................8
TUJUAN PUSTAKA...................................................................................................8
A. Landasan Teori.....................................................................................................8
1. Daun Sirih Merah (Piper crocatum).............................................................8
2. Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum).........................................................9
3. Klasifikasi Ilmiah Sirih Merah (Piper crocatum).......................................10
5. Standarisasi..................................................................................................11
6. Ekstrak.........................................................................................................12
7. Definisi Ekstrak...........................................................................................14
8. Parameter-Parameter Standar Ekstrak.........................................................15
9. Persyaratan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik.......................................17

vii
 10. Senyawa Flavonoid.....................................................................................19
B. Kerangka Teori...................................................................................................21
C. Kerangka Konsep...............................................................................................22
D. Hipotesis.............................................................................................................22
BAB III.......................................................................................................................23
METODE PENELITIAN..........................................................................................23
A. Jenis dan Rancangan Penelitian.........................................................................23
B. Tempat dan Waktu Penelitian............................................................................23
C. Populasi dan Sampel..........................................................................................24
D. Veriabel Penelitian.............................................................................................24
E. Definisini Operasional.......................................................................................25
F. Instrumen Penelitian...........................................................................................28
G. Teknik Pengumpulan Data.................................................................................28
H. Pengolahan dan Analisis Data............................................................................36
I. Etika Penelitian..................................................................................................36
J. Jalannya Penelitian.............................................................................................37
BAB IV........................................................................................................................38
HASIL DAN PEMBAHASAN..................................................................................38
A. Hasil Penelitian..................................................................................................38
1. Hasil Determinasi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah........................................38
2. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah...........................................38
3. Hasil Pengamatan Parameter spesifik Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah..........38
a) Identifikasi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah............................................39
b) Organoleptis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah..........................................39
c) Kadar Senyawa yang Larut dalam Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah..39
d) Kadar Senyawa Larut Dalam Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah................40
4. Hasil Pengamatan Parameter Non Spesifik Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah. 40
a) Penetapan Susut Pengeringan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah...............40
b) Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah............................................41
c) Kadar Abu Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.............................................41

viii
 d) Kadar Abu Yang Tidak Larut Asam Ekstrak EtanolDaun Sirih Merah......42
e) Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.............................43
f) Sisa Pelarut Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah...........................................43
5. Penentuan panjang gelombang maksimum........................................................44
6. Operating Time..................................................................................................44
7. Menentuan kurva baku kuersetin.......................................................................46
8. Penetapkan Kadar Senyawa Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah47
B. Pembahasan........................................................................................................48
C. Keterbatasan Penelitian......................................................................................66
BAB V.........................................................................................................................67
KESIMPULAN DAN SARAN..................................................................................67
1. Kesimpulan........................................................................................................67
2. Saran...................................................................................................................67
DAFTAR PUSTAKA................................................................................................69
LAMPIRAN...............................................................................................................74

ix
 DAFTAR TABEL
Tabel 1. Keaslian Penelitian.........................................................................................6
Tabel 2. Definisi Oprasional.......................................................................................25
Tabel 3. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.....................................38
Tabel 4. Kadar Senyawa Larut Dalam Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah...........39
Tabel 5. Kadar Senyawa Larut dalam Etanol Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.......40
Tabel 6. Penetapan Susut Pengeringan Etanol Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.....40
Tabel 7. Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih merah..............................................41
Tabel 8. Kadar Abu Ekstrak EtanolDaun Sirih Merah...............................................41
Tabel 9. Kadar Abu yang Tidak Larut Asam Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.......42
Tabel 10. Penetapan Kadar Air Ekstrak Ekstrak Daun Sirih Merah...........................43
Tabel 11. Sisa Pelarut Ekstrak Ekstrak Daun Sirih Merah.........................................43
Tabel 12. Panjang Gelombang Maksimum.................................................................44
Tabel 13. Oprating time senyawa kompleks kuersetin...............................................45
Tabel 14. Persamaan Regresi Linier Larutan Standar Kuersetin................................46
Tabel 15. Kadar Senyawa Flavonoid Total................................................................47

x
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Daun Sirih Merah(1).....................................................................................9

Gambar 2.Struktur Minyak Atsiri Daun Sirih Merah(13)............................................11
Gambar 3. Struktur Dasar Flavonoid(18).....................................................................19
Gambar 4. Struktur Kimia Tipe-Tipe Flavonoid(18)....................................................20
Gambar 5. Kerangka Teori Rencana Penelitian(19)(11)..............................................21
Gambar 6. Kerangka Konsep(19) (11)..........................................................................22
Gambar 7. Rumus Perhitungan Rendemen Ekstrak......................................................29
Gambar 8.Rumus Perhitungan Kadar Senyawa Yang Larut Dalam Air......................30
Gambar 9. Rumus Perhitungan Kadar Sari Larut Etanol..............................................30
Gambar 10. Rumus Perhitungan Susut Pengeringan....................................................31
Gambar 11. Rumus Perhitungan Bobot Jenis...............................................................32
Gambar 12.Rumus Perhitungan Kadar Abu.................................................................32
Gambar 13. Rumus Perhitungan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam.........................33
Gambar 14. Rumus Perhitungan Kadar Air..................................................................34
Gambar 15. Rumus Perhitungan Sisa Pelarut...............................................................34
Gambar 16. Jalannya Penelitian(11) (19).....................................................................37
Gambar 17. Operating time senyawa kompleks kuersetin............................................45
Gambar 18.Kurva Baku Kuersetin................................................................................46
Gambar 19. Reaksi Pembentukan Kompleks Flavonoid-AlCl3(37).............................60
Gambar 20. Panjang Gelombong Daun Sirih Merah Penentuan Spektrofotometri UV-
Vis....................................................................................................................................62
Gambar 21. Proses Pembuatan Ekstrak Daun Sirih Merah..........................................97
Gambar 22.Pengamatan Uji Organoleptik Ekstrak Daun Sirih Merah.........................97
Gambar 23.Uji Senyawa Larut Dalam Air Dan Larut Dalam Etanol Ekstrak Etanol
Daun Sirih Merah............................................................................................................98
Gambar 24.Uji Susut Pengeringan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.........................98
Gambar 25.Uji Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah....................................99
Gambar 26.Uji Kadar Abu Dan Uji Kadar Abu Tidak Larut Asam.............................99
Gambar 27.Uji Kadar Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah.....................................100
Gambar 28. Penimbangan uji Sisa pelarut ekstrak etanol daun sirih merah...............100
Gambar 29.Oven Untuk Uji Kadar Senyawa Yang Larut Air, Uji Kadar Senyawa
Yang Larut Etanol, Susut Pengeringan, Penetapan Kadar Air......................................101
Gambar 30. Penimbangan AℓCL3 dan Kalium Asetat (CH3COOK)..........................101
Gambar 31. Sampel Larutan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah Uji Kadar Flavonoid
Total Dan Larutan Standar Kuersetin............................................................................102
Gambar 32. Penimbangan Ekstrak Daun Sirih Merah Untuk Pembuatan Larutan Uji
Kadar Flavonoid Total...................................................................................................102
Gambar 33.Panjang Gelombong Daun Sirih Merah Penentuan Spektrofotometri UV-
Vis..................................................................................................................................103

xi
Gambar 34.Operating time pada spektrofotometri UV-Vis........................................104
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Dertiminasi......................................................................................74
Lampiran 2. Identitas.....................................................................................................76
Lampiran 3. Plagiarism..................................................................................................77
Lampiran 4. Hadir seminar............................................................................................78
Lampiran 5. Lembar EC (etikel clirens)........................................................................79
Lampiran 6. Presensi bimbingan skripsi........................................................................80
Lampiran 7. Rendemen ekstrak.....................................................................................81
Lampiran 8. Ekstrak maserasi daun sirih merah............................................................82
Lampiran 9. Kadar Senyawa Yang Larut Dalam Air....................................................83
Lampiran 10. Senyawa Yang Larut Dalam Etanol........................................................84
Lampiran 11. Susut Pengeringan...................................................................................85
Lampiran 12. Penetapan Bobot Jenis.............................................................................86
Lampiran 13. Kadar Abu...............................................................................................87
Lampiran 14. Kadar air..................................................................................................88
Lampiran 15.Kadar abu yang tidak larut asam..............................................................89
Lampiran 16. Pembuatan larutan standar......................................................................90
Lampiran 17.Larutan standar quersetin.........................................................................91
Lampiran 18. kurva Baku..............................................................................................93
Lampiran 19. kadar flafonoid total................................................................................94
Lampiran 20. Dokumentasi Penelitian Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah....................97

xii
 DAFTAR SINGKATAN

C : Celcius

cm : Centimeter

gr : Gram

Kg : Kilogram

L : Liter

Nm : Nanometer

mM : Milimeter

Ml : Mililiter

: Part Per Milion

Ppm
: Ultraviolet-Visible
Uv-vis
: World Health Organization
WHO

xiii
 INTISARI
Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih
Merah (Piper crocatum)
Nony Widiastuty1, Emelda2, Annisa fatmawati3
Latar belakang : Daun sirih merah (Piper crocatum) adalah suatu tanaman
obat herbal yang mempunyai kandungan senyawa metabolit sekunder salah
satunya ialah flavonoid. Flavonoid adalah salah satu senyawa yang memiliki
15 atom karbon yaitu polifenol dan tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6 yang
dapat atau tidak dapat membentuk cincin ketiga dalam satuan tiga karbon
untuk menghubungkan dua cincin aromatik. Sirih merah terdapat minyak atsiri
yang khasiatnya sebagai anti inflamasi dan barteri yang kemungkinan untuk
obat luka bakar.
Tujuan: mengetahui beberapa Parameter spesifik dan non spesifik serta
penetapan kadar flavonoid total pada ekstrak etanol 70% daun sirih merah
(Piper crocatum).
Metode: jenis penelitian yang digunakan adalah eksperimental laboratorium
untuk mengetahui kadar flavonoid total pada ekstrak etanol daun sirh merah
(Piper crocatum) menggunakan spektrofotometer UV-VIS.
Hasil: Kandungan senyawa di dalam ekstrak larut dalam air 33,4% dan
senyawa larut dalam etanol 36,2% yang dilakukan 3x replikasi dan mendapat
rata-rata. Pada pengujian parameter non spesifik didapatkan susut pengeringan
13,8%, bobot jenis 1,03 gr/mL , kadar air , kadar abu total 9,40491%, kadar
abu tidak larut asam 4,98267%, dan untuk susut pengeringan 2,579% dengan
dilakukan 3kali replikasi mendapat rat-rata 3,27%. Hasil uji standar flavonoid
ekstrak daun sirih merah dengan etanol 70% menggunkan uji spektrofotometer
yang konsentrasi nya 2,4,6,8,10 ppm dengan Panjang gelombang 433,8nm
dilakukan 3 kali raplikasi dalam 3 kali penimbang, dan mendampatkan rata-rat
penimbangan ke 1 adalah 0,75% (b/b), penimbangan ke 2 adalah 0,61% (b/b),
dan penimbangan ke 3 adalah 0,74% (b/b).
Kesimpulan: ekstrak daun sirih merah (piper crocatum) Parameter spesifik
ektrak etanol daun sirih merah telah memenuhi persyaratan standar suatu obat.
Parameter non spesifik ekstrak etanol daun sirih merah telah memenuhi
persyaratan standar suatu obat, kecuali pada kadar air dengan jarak
penimbangan 3-5 jam dan kadar abu, serta mengandung golongan flavonoid
dimana buah parameter spesifik dan non spesifik memenuhi standar mutu.
Kata kunci : Daun sirih merah (Piper crocatum), standarisasi, flavonoid total.

xiv
 ABSTRAK
Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun
Sirih Merah (Piper crocatum)
Nony Widiastuty1, Emelda2, Annisa fatmawati3
Background: Red betel leaf (Piper crocatum) is an herbal medicinal plant
that contains secondary metabolites, one of which is flavonoids. Flavonoids
are one the compounds that have 15 carbon atoms, namely polyphenols, and
are arranged in a C6-C3-C6 configuration which can or cannot form a third
ring in three carbon units to connect two aromatic rings. Red betel contains
essential oils that have anti-inflammatory and antibacterial properties which
may be used as a burning medicine.
Objective: to determine some specific and non-specific parameters and to
determine the total flavonoid content in 70% ethanol extract of red betel leaf
(Piper crocatum).
Methods: The type of research used was an experimental laboratory to
determine the total flavonoid content in the ethanol extract of red betel leaf
(Piper crocatum) using a UV-VIS spectrophotometer.
Results: The content of compounds in the extract was 33.4% water-soluble
and 36.2% ethanol-soluble compounds were replicated 3 times and got the
average. In non-specific parameter testing, the drying loss was 13.8%,
specific gravity 1.03 gr/mL, water content, total ash content was 9,40491%,
acid insoluble ash content was 4,98267%, and drying shrinkage was 2.579%
with performed 3 times of replication got an average of 3.27%. The results of
the standard test of red betel leaf extract flavonoids with 70% ethanol using a
spectrophotometer test with a concentration of 2,4,6,8,10 ppm with a
wavelength of 433.8nm carried out 3 times in 3 times weighing, and getting
the average weighing to 1 is 0.75% (b/b), 2 is weighed 0.61% (b/b), and 3 is
0.74% (b/b).
Conclusion: red betel leaf extract (piper scrotum) Specific parameters of red
betel leaf ethanol extract have met the standard requirements of a drug. The
non-specific parameters of the red betel leaf ethanol extract have met the
standard requirements of a drug, except for the water content with a weighing
distance of 3-5 hours and the ash content, and contains the flavonoid group
where the specific and non-specific parameters meet the quality standards.

Keywords: Red betel leaf (Piper scrotum), standardization, total flavonoids

xv
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indoesia mempunyai keanekaragaman tumbuhan, salah satunya tanaman

sirih merah. Tanaman sirih merah banyak dimanfaatkan sebagai obat, terutama

pada bagian daunnya(1). Daun sirih merah memiliki warna merah dan

mengkilap ketika terkena cahaya. Sirih merah mempunyai kandungan senyawa

aktif seperti minyak atsiri, alkaloid, saponin,tannin dan flavonoid (2).

Minyak atsiri yang terkadung di dalam tanaman sirih merah memiliki

aktivitas antibakteri yang mengandung flavonoid efektif sebagai antiinflamasi

terjadinya infeksi pada luka bakar(3). Sirih merah mengandung senyawa kimia

yang berkhasiat sebagai antibakteri yang digunakan untuk obat luka bakar(4).

Penelitian ini akan melakukan standarisasi ekstrak etanol daun sirih merah

merupakan tahapan awal pembuatan standarisasi pengembangan tumbuhan obat

secara spesifik dan non spesifik. Standarisasi spesifik dapat menetapkan

parameter seperti identifikasi, uji organoleptik, uji senyawa dalam air, kadar

senyawa yang larut dalam etanol. Sedangkan standarisasi non spesifik meliputi

susut pengeringan, bobot jenis, kadar abu, kadar abu yang tidak larut asam, dan

kadar air, sisa pelarut(5).

1
 2

Ekstrak merupakan sedian kental, kering atau cair dibuat dengan menyari

simplisia nabati ataupun hewani yang menurutnya cocok(6). Ekstrak sebagai

bahan awal dianalogkan sebagai komoditi bahan baku obat dengan teknologi

fitofarmasi diproses menjadi produk jadi. Ekstrak tumbuhan obat yang dibuat

dari simplisia nabati dapat dipandang sebagai bahan awal. Ekstrak sebagai

bahan antara berarti masih menjadi bahan yang dapat diproses lagi menjadi

fraksi-fraksi(7).

Menurut Farmaakope Herbal Indonesia (FHI), kontrol kualitas ekstrak

bahan baku obat herbal pada umumnya mecakup rendemen ekstrak dan identitas

ekstrak (bau, warna, dan rasa). Senyawa identitas merupakan kandungan kimia

ekstrak/simplisia yang dapat digunakan untuk identifikasi abu total, abu tidak

larut asam dan kadar air. Kandungan kimia ekstrak yang meliputi kadar minyak

atsiri dan kadar identitas senyawa dalam ekstrak(6).

Berdasarkan penelitian dilakukan oleh Najib at all (2016), standarisasi

ekstrak tanaman obat secara non spesifik dan spesifik yang menunjukan

tanaman bahan baku yang bermutu dan berstandar. Diperlukan hasilkan

ekstrak berkualitas sebelum diproduksi dalam skala industri dengan proses

standarisi. Kandungan senyawa ekstrak tanaman obat tidak menjamin akan

selalu dalam jumlah konstan yang terdapat tempat tumbuh, variable bibit,

kondisi ( umur dan cara) panen, iklim, dan proses panen dan preparasi akhir(8).
 3

Salah satu bagian dari standarisasi adalah mengetahui kadar senyawa yang

terdapat di dalam suatu tanaman. Senyawa yang terdapat di dalam ektrak etanol

daun sirih merah salah satunya adalah flavonoid. Flavonoid adalah salah satu

senyawa terbesar golongan fenol yang terdapat paada seluruh tumbuhan.

Golongan senyawa polifenol ini diketahui mempunyai sifat sebagai penangkap

radikal bebas, penghambat enzim hidrolisis, oksidatif, dan juga berkerja sebagai

anti inflamasi(9).

Proses ekstraksi yang merupakan kandungan kimia dapat larut dan dapat

terpisah dari bahan yang tidak larut dengan pelarut adalah proses flavonoid.

Flavonoid adalah proses senyawa yang meiliki inti dasar tersusun dalam

konfigurasii c6-c3-c6 yaitu satuan tiga karbon yang membentukk cicin ketidak

yaitu dapat dan tidak dapat terbentuk yang menghubungkan dua cicin

aromatik(10).

Flavonoid terdapat dalam seluruh bagian tumbuhan termasuk daun, buah,

kulit luar batang dan akar. Tanaman obat yang mengandung flavonoid memiliki

aktivitas antiradang, antibakteri, antivirus, antialergi, antioksidan, dan

antikanker. Dengan demikian pemanfaatan tumbuhan daun sirih dapat lebih

maksimal untuk dijadikan sebagai alternatif pengobatan herbal dalam

penyembuhn macam-macam penyakit serta penggunaannya dapat

dipertanggungjawabkan oleh masyarakat(11).

 4

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas dapat diperoleh rumusan masalah pada

penelitian yang akan dilakukan yaitu sebagai berikut:

1. Bagaimanakah parameter spesifik ekstrak etanol daun sirih merah yang

meliputi identifikasi, organoleptis, senyawa yang larut dalam air, kadar

senyawa yang larut dalam etanol?

2. Bagaimana parameter non spesifik standarisasi ekstrak etanol daun sirih

merah yang meliputi susut pengeringan, bobot jenis, kadar abu, kadar abu

yang tidak larut asam, kadar air, dan sisa pelarut?

3. Berapakah kadar senyawa flavonoid total ektrak etanol daun sirih merah?

C. Tujuan Penelitiaan

1. Menetapkan parameter spesifik ekstrak etanol daun sirih merah yang

meliputi identifikasi, organolepti, senyawa yang larut dalam air, kadar

senyawa yang larut dalam etanol.

2. Menetapkan Parameter non spesifik standarisasi ekstrak etanol daun sirih

merah yang meliputi susut pengeringan, bobot jenis, kadar abu, kadar abu

yang tidak larut asam, dan kadar air, sisa pelarut.

3. Menetapkan kadar senyawa flavonoid total ekstrak etanol daun sirih merah
 5

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat teoritis

Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi inovasi manfaat praktis

dalam mengembangkan formula obat tradisional.

2. Manfaat Praktis

Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi inovasi pilihan

menggunakan bahan alam yang mudah dicari untuk penyembuhan

antiinflmasi yang diuji dengan standarisasi parameter spesifik dan

parameter non spesifik dan dapat mengetahui kadar flavonoid total, dan

mengetahui analisis kadar flavonoid total

 6

E. Keaslian Penelitian

Tabel 1. Keaslian Penelitian

N Nama Judul Hasil Persamaan Perbedaan

o
1 Marcus Standarisasi parameter Hasil yang didapatkan Parameter yang Penguji terdahulu
. Laurentius spesifik dan non spesifik dalam uji parameter non digunakan adalah menggunakan ekstrak
Yudhi ektrak etanol daun kelor daun kelor (Moringa
spesifik dan spesifik, ada standarisasi
Purwoko 2020 (Moringa oleifera) asal oleifera) asal
yang tidak memenuhi parameter spesifik kabupaten blora dan
(10) Kabupaten Blora.
standar dan non spesifik penguji sekarang
yaitu cemara berat PB. menggunkan ekstrak
daun srih merah
berasal
dari
Beringharjo
Yogyakarta.
 7

2 Emelda Formulasi dan uji sifat Uji organoleptis, Bahan yang 1. penelitian sebelumnya
. 2020 (2) fisik sediaan gel homogenitas, ph, daya digunakan adalah menggunakan
tunggal dan kombinasi lekat, daya sebar, dan sirih merah (Piper kombinaksi sirih
ekstrak etanol daun sirih crocatum) dan merah (Piper
merah (Piper konsistensi memenuhi crocatum) kayuh
etanol 70%
crocatum) dan minyak persyaratan dalam sedian putih (Cinnamon oil).
kayu putih (Cinamon gel kombinasi daun sirih 2. Pada penelitian ini
oil) merah (Piper crocatum) tidak melakukan
dan minyak kayu manis formulasi dan evalusi
(Cinamon oil) sifat fisik sediaan gel.

N Nama Judul Hasil Persamaan Perbedaan

o
3 Aktsar Penetapan kadar fenolik Ekstrak buah dan daun Parameter uji Penelitian terdahulu
Roskiana dan flavonoid total ekstrak patikala (Etlingera yang dilakukan menggunakan buah
Ahmad metanol buah dan daun elatior (jack) R.M.SM) adalah uji dan daun patikala
patikala (Etlingera elatior flavonoid (Etlingera elatior (jack)
2015 (9) (jack) R.M.SM) mengandung senyawa R.M.SM)
menggunakan
golongan flavonoid standar kuersetin peneliti sekarang
dimana buah sebesar dengan metode menggunakan
1,77% b/b dn daun sebsar spektrofotometri ekstrak daun sirih
5,45% b/b dengan uv-Vis, merah (Piper
3. crocatum).
menggunakan kuersetin.
4 Aminah Penetapan kadar Berdasarkan hasil yang metode yang Penelitian terdahulu
. 2017 (7) flavonoid total ekstrak di uji bahwa kadar di menggunkan kulit
etanol kulit buah flovonoid total dari gunakan buah alpukat (Persea
 8

alpukat (Persea ekstrak etanol kulit adalah Americana Mill.)

Americana Mill.) buah alpukat (Persea spektrofotometri Penelitian sekarang
dengan metode Americana Mill.) adalah uv-Vis . menggunkan ekstrak
spektrofotometri UV- daun sirih merah
Vis. 4,0122 mgQE/g (Piper crocatum)
 BAB II
TUJUAN PUSTAKA

A. Landasan Teori

1. Daun Sirih Merah (Piper crocatum)

Tanaman daun sirih merah termasuk dalam family piperaceae. Sirih

merah tumbuh menjalar dipohon atau pagar. Ciri khas tanaman daun sirih

merah ini adalah tidak berbunga dan batang nya bulat, berwarna hijau

keunguan. Daun sirih merah mempunyai Permukaan daun yang

mengkilap dan membentuk jatung hati, kemudian bagian ujung daunya

meruncing(1).

Tanaman daun sirih merah adalah suatu tanaman obat berbagai

penyakit yang daunnya juga sudah banyak dikenal oleh kalangan

masyarakat dan khasiat obatnya juga mampu menyembuhkan. Secara

turun temurun telah digunakan dan dapat menyembuhkan berbagai jenis

penyakit, salah satunya yaitu dapat menyembuhkan luka. Daun sirih

merah mempunyai kandungan senyawa aktif yaitu alkaloid, atsirih,

samponin, tannin, dan flavonoid. Dalam proses penyembuhan luka ialah

dengan adanya samponin yang membentuk kolagen(4).

Daun sirih merah baik saat tumbuh ditempat yang teduh dan tidak

terlalu terkena sinar matahari. Daun sirih merah berbeda dengan sirih

9
hujau, sirih merah daunnya berwarna keperakan, bila daunya disobek

makan akan berlendir serta aromanya lebih wangi(1).

10
 11

Gambar 1. Daun Sirih Merah(1).

Sirih merah mampu beradaptasi dengan baik dan tidak terlalu sulih

untuk pemeliharanya kemudian mampu berdaptasi terhadap setiap jenis

tanah. selama pertumbuhan sirih merah yang paling penting adalah

pengairannya harus dengan baik dan cahaya matahari yang diterima(1).

2. Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum)

Tanaman sirih merah diketahui dapat menyembuhkan penyakit dan

obat khasiat. Penggunaan sirih merah dapat digunakan dalam bentuk

ekstrak maupun dalam bentuk simplisia (daun kering). Sirih merah dapat

menurunkan maag, menrunkan tekanan darah, asam urat, dan mengobati

hepatitis. Sirih merah juga dapat digunakan sebagai radang hidung, asma,

dan radang tenggorokan(1).

 12

3. Klasifikasi Ilmiah Sirih Merah (Piper crocatum)

Klasifikasi ilmiah sirih merah (Piper crocatum) adalah sebagai berikut :

Kingdom : plantae (tumbuhan)

Super divisi : Spermatophyte (menghasilkan biji)

Sub kingdom : Tracheobianto (tumbuhan berpembuluh)

Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil)

Divisi : Magnoliphyta (tumbuhan berbunga)

Orde : Piperales

Sub kelas : Magnoliidae

Spesies : Piper crocatum Ruiz & pav

Family : Piperaceae (suku sirih-sirihan)

genus : Piper(1).

4. Kandungan Kimia Daun Sirih Merah (Piper crocatum)

Daun sirih merah memiliki kandungan minyak atsiri 1-4,2% yang

memiliki aroma khas, tidak lupa juga memiliki kandungan air,

karbohidrat, kalsium, fosfor, vitamin A,B,C, gula dan pati, protein, lemak,.

Bahan baku minyak dapat diperoleh dari bagian tanaman seperti daun,

batang, akar atau rimpan, bunga, biji, kulit biji. Salah satu ciri minyak

yaitu beraroma khas dan mudah menguap. Dalam kandungan minyak atsiri

terdapat daya antiseptic (fenol alam), dengan 5x lebih kuat dibandingkan

bakterisid dan fungisid (fenol biasa). minyak atsiri adalah minyak nabati

yang multimanfaat(12).
 13

Struktur pada minyak atsirih daun sirih merah bisa dilihat pada Gambar 2.

Gambar 2.Struktur Minyak Atsiri Daun Sirih Merah(13).

Minyak atsiri terbentuknya membran atau dinding sel hingga tidak

terbentuk atau tidak sempurna. Minyak atsiri yang aktif sebagai

antibakteri pada umumnya mengandung gugus fungsi hidroksil (-OH) dan

karbonil. Flavonoid dapat digunakan sebagai antibakteri dengan

membentuk sanyawa kompleks terhadap protein ekstrak seluler yang

mengganggu integritas sel membran sel bakteri(12).

5. Standarisasi

Standarisasi merupakan mikrobiologi yang kriteria umumnya

menjamin keamanan terhadap suatu ekstrak alam dan juga memproses

 14

metode analisis kimiawi berdasarkan farmakologinya dan melibatkan

analisis fisik(14).

Standarisasi secara normalitas ditunjukan untuk memberikan

efekasi yang diukur farmakologinya dengan menjamin keamanan

konsumen. Standarisasi Obat Herbal ada dua aspek melitputi

a. Aspek parameter spesifik : Dengan analisis kimia yang melibatkat

analisis kuantitatif dan kualitatif terhadap senyawa aktif. Senyawa

atau golongan yang bertanggung jawab terhadap aktivitas

farmakologis.

b. Aspek parameter non spesifik aspek kimia, mikrobiologi, fisis

akan mempengaruhi stabilitas seperti kadar air, kadar logam berat,

dan keamanan konsumen afilatoksin.

Standarisasi dalam kefarmasian merupakan parameter, prosedur,

dan cara pengukurannya yang menghasilkan unsur-unsur terkait paradig

mutu (kimia, (biologi, farmasi) kefarmasian. Menjaminan stabilitas

sebagai produk kefarmasian umum yang berstandarisasi. Standarisasi

berarti proses yang menjamin produk akhir (obat, ekstrak, atau produk

ekstrak) yang mempunyai nilai parameter tertentu(14).

6. Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif

dari simplisia menggunakan pelarut yang sesuai, Sebagian besar ekstrak

dibuat dengan mengekstraksi bahan baku obat secara perkolasi. Seluruh

 15

perkolat biasanya dipekatkan dengan cara destilasi dengan pengurangan

tekanan, agar bahan utama obat sesedikit mungkin terkena panas.

kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau

serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang

telah ditetapkan.

Ekstrak cair adalah sediaan cair simplisia, yang mengandung etanol

sebagai pelarut atau sebagai pengawet atau sebagai pelarut dan pengawet.

Ekstrak cair yang cenderung membentuk endapan dapat didiamkan dan

disaring atau beningan yang diperoleh memenuhi persyaratan Farmakope

Jika tidak dinyatakan lain pada masing-masing monografi, tiap ml ekstrak

mengandung bahan aktif dari 1 g simplisia yang memenuhi syarat(2).

Ekstrak merupakan pengetahuan golongan senyawa

yang aktif kandungannya dalam simplisia yang akan mempermudah

proses pemilihan dan cara ekstraksinya yang tepat dan kandungan kimia

dapat terpisah dari bahan yang larut ataupun tidak larut (14).

Ekstrak yang mengandung sebagian besar senyawa, untuk

melarutkan metabolit sekunder diperlukan cairan pelarut. Cairan pelarut

dalam proses pemuatan ekstrak merupakan pelarut baik dan optimal

berdasarkan polaritas senyawa fitokimia yang berkhasiat atau aktif.

Sehingga senyawa tersebut dapat dipisahkan dari bahan dan senyawa

lainnya(14).

Berdasarkan farmakope herbal indonesia

 16

● kadar air : tidak lebih dari 10,0%

● rendemen tidak kurang dari 17,0%

● kadar abu total : tidak lebih dari 5,9%

● kadar abu tidak larut asam : kurang dari 1,3%

● kadar flavonoid total : Tidak kurang dari 0,79%(6).

7. Definisi Ekstrak

Ekstrak merupakan sedian kental yang diproses dengan cara

ekstraksi senyawa aktif yang didapatkan dari simplisia nabati dan

simplisia hewani dengan menggunakan pelur sesuai, kemudian hampir

semua pelarut diuangkan dari serbuk tersisa sedemikian memenuhi baku

yang telah ditetapkan(15).

a. Ekstrak encer (Extractum Tunue)

Ekstrak yang memiliki konsistensi madu yang dapat dituang.

b. Ekstrak kental (Ekstractum spissum)

Sediaan ekstrak dengan keadaan dingin dan tidak dapat dituang.

c. Ekstrak kering (Ekstractum siccum)

Ekstrak yang memiliki konsintensi kering dan mudah digosongkan. Dengan

melalui penguapan cairan penyari dan pengeringan sisanya akan

membentuk produk yang memiliki kandungan lembab ≤ 5%(15).

 17

8. Parameter-Parameter Standar Ekstrak

a. Parameter Spesifik
Parameter spesifik adalah senyawa aktif yang memberikan efek

farmakologi yang bertujuan untuk mengidentifikasi secara kualitatif

yang berperan dalam bahan alam(16).

1) Identitas

Deskripsi menjadi petunjuk yang merupakan tata nama ekstrak

nama latin, bagian tumbuhan yang digunkan spesifik bertujuan

memberikan identitas objek dari nama yang spesifik(15).

2) Organoleptik

Pengamatan yang menggunakan panca indra meliputi warna, bau,

rasa, dan bentuk(16).

3) Senyawa larut dalam pelarut tertentu

Senyawa yang dilakukan dengan cara melarutkan ekstrak dengan

pelarut (alkohol dan air) yang dapat mengetahui jumlah solute

identic dengan jumlah senyawa kandungan gravimetri(16).

b. Parameter Non Spesifik

Berperan dalam keamanan konsumen secara langsung, parameter

non spesifik berkualitas dan terjamin keamanannya dalam suatu bahan

 18

alam parameter yang difokuskan adalah aspek kimia, fisika, dan

mikrobiologi(16).

1) Susut Pengeringan

Susut pengeringan bahan alam atau simplisia, yang berkaitan

dengan kadar air yang ditentukan setelah pengeringan (105oc)

dengan pengukuran sisa zat. Menggunakan botol timbang yang akan

ditentukan kadar susut pengeringannya dalam. Susut pengeringan

yang bertujuan untuk memberikan gambaran rentang besarnya

senyawa yang hialng pada proses pengeringan(16).

2) Bobot Jenis

Bobot jenis berkaitan dengan kontaminasi atau kemurnian

ekstrak. Tujuannya adalah untuk memberikan gambaran satuan

massa per volume sebagai parameter tertentu dari ekstrak cair

hingga ekstrak kental yang dapat dituang(16).

3) Kadar Abu Total

Penetapan kadar abu bertujuan untuk memberikan gambaran

terkait karakteristik sisa kadar abu monorganik setelah pengabuan.

Kadar abu juga dapat dijadikan sebagai ciri suatu spesies obat karena

setiap tanaman memiliki sisa abu secara spesifik(16).

4) Kadar Air
 19

Parameter penetapan kadar air menentukan kualitas dan

stabilitas ekstrak dalam bentuk sediaan. Kadar air bertujuan untuk

mengetahui kadar residu air setelah pengeringan atau proses

pengentalan ekstrak. Kadar air yang cukup beresiko adalah di atas

10 % (16).

5) Sisa peelarut

Penetapan sisa pelarut adalah untuk mengetahui sisa pelarut

etanol yang telah dikeringkan. Etanol sebagai pelarut karena

memiliki toksisitas lebih rendah. Metanol, heksan, klorofrom

menjadi pelarut yang lebih tinggi dari etanol. Bahan alam yang aman

dan berkalitas harus dipastikan tidak terdapat sisa pelarut organic

didalamnya(16).

6) Cemaran mikroba Aspek

Cemaran mikroba bertujuan dapat menentukan keberadaan

mikroba yang sifatnya dapat merusak ekstrak sehingga dapat

dilakukan pencegah kontaminasi atau menghilangkan

kontaminasinya sesuai dengan persyaratan cemaran mikroba (16).

7) Cemaran logam berat

Parameter penetapan logam berat kaitannya dengan kualitas dan

keamanan dari suatu bahan obat alam atau simplisia. Cemaran logam

dapat menjamin suatu bahan dan ekstrak yang tidak mengandung

logam berat seperti Cd, Hg, Pb, dan logam berat lainnya(16).
 20

9. Persyaratan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik

a) Persyaratan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik Berdasarkan Materia

Medika Indonesia Jilid IV:

▪ kadar abu : tidak lebih dari 8%

● kadar sari yang larut dalam etanol : tidak kurang dari 6 %

● kadar sari yang larut dalam air : tidak kurang dari 24%

● kadar abu yang larut dalam air : tidak lebih dari 1%

● kadar abu yang tidak larut dalam asam : tidak kurang dari 1 %

berdasarkan monografi WHO

▪ Kadar logam berat :

❖ maksimum kandungan Hg = 0,5 ppm

❖ maksimum kandungan Pb = 10 ppm

❖ maksimum kandungann Cd = 0,3 ppm

❖ maksimum kandungan As = 5 ppm

▪ Kadar cemaran pestisida : aldrin dan dieldrin tidak lebih dari 0,05 mg/kg

▪ Kadar cemaran mikro

❖ Salmonella spp -> negative

❖ Bahan tanaman obat dengan merebus (decoction)

o Bakteri aerob tidak lebih dari 107/g

o fungsi tidak lebih dari 105/g

o E.coli tidak lebih dari 102/g

 21

❖ Bahan tanaman Obat untuk penggunaan internal

o Bakteri aerob maksimum 105/g

o khamir dan kapang maksimal 103/g atau Ml.

o Enterobacteriaceae dan bakteri gram negative tidak

lebih dari 103/g

o Escherichiacoli maksimum 10/g (17).

10. Senyawa Flavonoid

Senyawa flavonoid merupakan senyawa polifenol yang megandung

15 atom karbon dalam inti dasarnya, tersusun dalam struktur C6-C3-C6

ialah 2 cincin aromatik yang berhubungan dengan satuan tiga karbon yang

membentuk cincin ketiga atau tidak. Golongan flavonoid digambarkan

sebagai senyawa C6-C3-C6, yang berarti kerangka karbonya terdiri atas

dua gugus C6 yaitu cincin benzene tersubstitusi yang disatukan dengan

rantai alifatik tiga karbon(18).

 22

Gambar 3. Struktur Dasar Flavonoid(18).

Flavonoid merupakan senyawa yang baik, yang bisa menghambat

banyak reaksi oksidasi, baik secara enzim maupun nonenzim. Salah satu

golongan fenolik alami terbesar yang dapat ditemukan dalam tumbuhan

hijau yaitu flavonoid, diperkirakan 2% dari seluruh karbon fotosintesis

oleh tubuhan yang diubah menjadi flavonoid atau senyawa yang berkaitan

dengannya. Sebagai flavonoid allam yang ditemukan dalam bentuk

glikosa, dimana unit flavonoid dapat terikat dengan gula. Flavonoid terdiri

beberapa kelas antara lain, antosianin, glikoflavon, flavonon, flavonol,

flavon, kalkon dan auron serta isoflavon senyawa golongan flavonoid

yang terpenting yaitu senyawa- senyawa antioksidan. Senyawa berpotensi

sebagai antioksidan adalah fenol (flavonoid)(18). Tipe-tipe flavonoid

dapat dilihat pada Gambar 4

 23

Gambar 4. Struktur Kimia Tipe-Tipe Flavonoid(18).

Beberapa studi in vitro menunjukan aktivitas antioksidan flavonoid,

yaitu tidak mencegah kerusakan pada sel-sel tubuh dengan bergabungnya

oksigen dengan zat lain. Senyawa flavonoid bersifat antimutagen,

antineoplastik dan antitrombosit, antibakteri, antiinflamasi, antialergi(18).

B. Kerangka Teori
 24

Gambar 5. Kerangka Teori Rencana Penelitian(19)(11)..

 25

C. Kerangka Konsep

Gambar 6. Kerangka Konsep(19) (11).

D. Hipotesis

Hipotesis pada penelitian kali ini adalah sebagai berikut:

H0 : Ekstrak etanol 70% daun sirih merah tidak memenuhi syarat

standarisasi spesifik dan non spesifik, kadar flavonoid total yang baik

Ha : Ekstrak etanol 70% daun sirih merah memenuhi syarat standarisasi

spesifik dan non spesifik
 BAB III
METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

1. Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium untuk

analisa flavanoid total ekatrak etanol daun sirih merah dengan metode

spektrofotometer UV-Vis dan standarisasi untuk mengetahui parameter

spesifik dan non spesifik ekstrak daun sirih merah.

2. Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian ini yaitu membuat ekstrak daun sirih merah dengan

menggunakan etanol 70% selanjutnya melakukan standarisasi ekstrak daun

sirih merah yang meliputi uji parameter spesifik (identifikasi, organoleptik,

kadar senyawa yang larut dalam air, kadar senyawa yang larut dalam etanol

dan non spesifik (susut pengeringan, bobot jenis, sisa pelarut, kadar abu,

kadar abu tidak larut asam, kadar air, sisa pelarut), dan flavonoid total ektrak

etanol daun sirih merah dengan metode spektrofotometer UV-Vis.

B. Tempat dan Waktu Penelitian

1. Tempat Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Fitokimia dan Teknologi

Farmasi serta Laboratorium Biomedis Universitas Alma Ata.

26
 27

2. Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan pada bulan mei-juni 2022

C. Populasi dan Sampel

1. Populasi yang digunakan adalah tanaman sirih merah

2. Sampel yang digunakan adalah daun sirih merah, yang berasal dari Kota

Yogyakarta

D. Veriabel Penelitian

Variabel penelitian ini terdiri dari beberapa jenis variabel yaitu variabel bebas

dan variabel terikat.

1. Variabel Bebas

Ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) dengan pelarut etanol 70%.

2. Variabel Terikat

Uji standarisasi parameter spesifik (identitas ekstrak, uji organoleptik,

kadar senyawa yang larut dalam air, kadar senyawa yang larut dalam

etanol dan non spesifik (susut pengeringan, bobot jenis, sisa pelarut, kadar

abu, kadar air dan penetapan kadar tidak larut asam) serta flavonoid total.
 28

E. Definisini Operasional

Tabel 2. Definisi Oprasional

NO Variable Definisi Cara ukur Alat ukur Skala

1. Ekstrak Ekstrak etanol daun sirih merah
didapatkan dari hasil ekstraksi
dengan metode maserasi
menggunakan pelarut etanol
70%
2. Identitas Mendeskripsikan tatanama,
nama latin, nama lain tumbuhan
ekstrak daun sirih merah.
3. Penetapan sifat Suatu pengamatan ekstrak daun
organoleptis sirih merah menggunakan paska
indra
4. Kadar senyawa Ekstrak etanol daun sirih merah
yang larut yang mampu larut menggunakan
dalam air air dengan proses pemanasan
membutuhkan waktu yg cukup
lama
5. Kadar senyawa Ekstrak etanol daun sirih merah
yang larut mampu larut dalam etanol
dalam etanol dengan proses pemanansan
membutuhkan waktu yang tidak
lama
Menimbang sirih merah yang sudah kkering dan dibelender, Timbangan Numerik
kemudian dilarutkan etanol 70% selama 2 x 24 jam dan dipekatkan Analitik
dengan water batt setelah itu hitung rendeman
Mendeskripsikan tanaman Daun sirih merah yang meliputi Visual Ordinal
tatanama, nama latin, nama lain tumbuhan sebagai petunjuk
spesifik pada ekstrak.
Menggunakan paska indra dalam mendeskripsikan bentuk warna, Indra mata Ordinal
bau, dan rasa.
Menimbang 5 gram ekstrak daun sirih merah, kemudian dilarutkan Timbngan Numerik
100ml klorofom, dikocok selama 6 jam lalu di diam kan selama 18 Analitik
jam. Setelah itu filtrat 20 ml dipanaskan dengan suhu 105 oC dan
tidak lupa dihitung kadar sari larut dalam air.
Timbang 5 gram ekstrak daun sirih merah dengan ditambah 100 ml Timbngan Numerik
etanol kemudian dimaserasi selama 24 jam dan di kocok selama 6 Analitik
jam lalu didiamkan 18 jam. Kemudian di filtrat sembanyak 20 ml
diletakan kedalam cawan penguap dan dipanaskan dengan suhu
105oC. Tidak lupa dihitung kadar sari larut etanol.
 29

NO Variable Definisi Cara ukur Alat ukur Skala

6. Penetapan Ekstrak etanol daun sirih merah Ekstrak daun sirih merah ditimbang sebanyak 1 gram masukkan Timbngan Numerik
susut yang dipanaskan menggukan dalam botol timbang yang dangkal yg sudah di panaskan dengan Analitik
pengeringan oven dengan suhu 105o c untuk suhu 105oC selama 30 menit. jika ekstrak kental ratakan terlebih
menghilangkan air pada ekstrak. dahulu setelah itu keringkan pada suhu 105 oC. Tidak lupa hitung
susut pengeringan.
7. Bobot jenis Penentuan ekstrak etanol daun Semula timbang pikno yang kosong, kemudian timbang pikno yang Timbngan Numerik
sirih merah kental dan air yang beris, kemudian hitung bobot jenis dengan menggunakan rumus. Analitik
berbentuk cair dengan
membandingan suatu zat kental
dan cair dengan volum yang
sama-sama ditimbang.
8. Kadar abu Merupakan hasil ekstrak etanol Timbang 1 gram ekstak, krus yang kosong terlebih dahulu Timbngan Numerik
daun sirih merah yang tersisa ditimbang setelah itu dipijar dan dimasukan ke dalam alat oven Analitik
atau tertinggal yang dipanaskan dengan suhu 25oC, kemudian hitung kadar abu total nya.
menggunakan oven dengan suhu
600o c.
9. Kadar abu Kadar abu ekstrak etanol daun 25 ml asam sulfat dididihkan selama 5 menit, setelah itu disaring Timbngan Numerik
tidak larut sirih merah melakukan menggunakan kertas saring bebas abu, lalu dicuci dengan air panas Analitik
asam penyaringan menggunakan kemudian disaring, dan tidak lupa hitung kadar abu tidak larut asam
kertas saring, senyawa yang dalam persen.
tertiggal kemudian ditimbang.
10. Penetapan Kadar air ekstrak etanol daun 10 gram ekstrak daun sirih merah masukkan kedalam wadah yang Timbngan Numerik
kadar air sirih merah yang dipanaskan telah ditara lalu keringkan pada suhu 105oC selama 5 jam kemudian Analitik
menggunakan oven untuk hitung hitung kadar abu total
menentukan kualitas ketahanan
 30

NO Variable Definisi Cara ukur Alat ukur Skala

11. Sisa pelarut Mengetahui sisa pelarut ekstrak 2 gram ekstrak ditimbang dilarutkan 25 ml, lalu masukkan kedalam Timbngan Numerik
etanol daun sirih merah yang labu destilasi dengan suhu 77,5oC destilasi yang diperoleh Analitik
telah diuji dipastikan tidak ditambahkan 25 ml air. kemudian hitung sisa pelarut.
terdapat sisa pelarut organik
didalamnypa
12. Pembuatan Penetapan larutan standar 10 jam kuersetin ditambahkan, 10 ml etanol 70% kemudian Spektrofoto Numerik
suatu larutan kuersetin yang pengukurannya diambil 1 ml dilarutkan 10 ml etanol 70%, setelah itu di buat metri UV-
standar menggunkan spektrofotometri konsentrasi 1,2,3,4,5 ppm, setiap konsentrasi ditambah 3 ml Vis
UV-Vis etanol, 0,2 AℓCℓ3 2%, 0,2 ml kalium asetat 120 mM dan
tambahkan aquades 10 ml kemudian inkubasi dengan suhu
kamar, lalu ukur menggunakan absorbans spektrofotofetri UV-
Vis dengan panjang gelombang 431
14 Oprating time Penentuan waktu ekstrak etanol 0,4 larutan kuersetin di tambah 0,2 AℓCℓ3 2% , 0,2 kalium asetat Spektrofoto Numerik
daun sirih merah yang di amati 120 mM kemudian diamati dengan menggunakan metri
oleh spektrofotometri UV-Vis spektrofotometri dalam waktu 1 jam
dengan panjang gelombang
433,8 nm dengan melihat
absorbansi yang stabil.
13 Penetapan Penetapan kadar flavonoid total 100 gram ekstrak daun sirih merah ditimbang dan Spektrofoto Numerik
kadar flafonoid ekstrak etanol daun sirih merah dilarutkan kedalam 10 ml etanol 70% kemudian diambil 1 metri UV-
total dengan menambahkan larutan ml dan ditambahkan 3 ml etanol 70%, 0,2 AℓCℓ 3 2% , 0,2 Vis
dan kemudian pengukurannya kalium asetat 120 mM dan tambahkan aquades sampai 10
menggunakan spektrofotometri ml, lalu simpan selama 30 menit pada suhu kamar ukur
UV-Vis dengan panjang absorbansi menggunakan spektrofotometri UV-Vis dengan
gelombang 433,8 nm panjang gelombang 433,8
 31

F. Instrumen Penelitian

1. Alat Penelitian

Alat yang akan digunakan untuk penelitian

Alat-alat gelas, oven, timbangan listrik, waterbath, blender, botol

timbangan bertutup, pipet ukur, cawan porselin, kaca arloji, labu

destilasi, pipet filler, tabung reaksi dan rak, labu ukur, piknometer, kertas

saring, krus, batang pengaduk, toples, pipet tetes, cawan petri,

spektrofotometri UV-Vis(thermos scientific).

2. Bahan

Daun sirih merah dan etanol 70%, AICI3 2% (aluminium klorida), kalium

asetat 120 mM, kuersetin, aquadest.

G. Teknik Pengumpulan Data

1. Pembuatan ekstrak daun sirih merah

Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian ini yaitu metode

maserasi, dengan melakukan perendaman. Sebelum melakukan

perendaman daun sirih merah yang akan digunakan dibersihkan terlebih

dahulu kemudian dikeringkan dan dihaluskan hingga menjadi serbuk.

Sejumlah 500 gram serbuk daun sirih merah direndam selama 2 x 24 jam

dengan 5 L etanol, etanol yang di gunakan etanol 70%, setelah itu disaring

dan diuapkan diatas waterbath hingga terbentuk ekstrak yang kental sirih

merah, perhitungan rendemen ekstraksi bisa dilihat pada Gambar 7(20).

 32

Gambar 7. Rumus Perhitungan Rendemen Ekstrak

2. Parameter spesifik

a) Identifikasi

Ekstrak yang akan diuji dengan mendeskripsikan tata nama, meliputi

nama ekstrak, nama latin tumbuhan, (sistematika botani), bagian

tumbuhan yang digunakan, dan nama Indonesia dari tumbuhan.

Identifikasi senyawa ekstrak ditentukan menjadi petunjuk speksifik pada

ekstrak tersebut(15).

b) Organoleptik

Ekstrak yang dinyatakan melalui pengamatan dengan panca indra,

mendeskripsikan bau, warna, bentuk dan rasa dari ektrak yang

digunakan penguji(15).

c) Senyawa terlarut dalam pelarut tertentu.

1) Kadar senyawa yang larut dalam air

Ekstrak ditimbang sebanyak 5 gram yang telah kering. Kemudian

setelah dikeringkan ditimbang saksama. Kemudian dimasukkan ke

dalam labu, dan setelah itu ditambahkan 100 ml kloroform, sambil

dikocok selama 6 jam pertama dan dibiarkan 18 jam, lalu tidak lupa

disaring setelah itu difiltrat 20 ml hingga kering, masukan ke dalam

cawan petri, dipanaskan pada suhu 105oC bobot tetap. Kemudian

 33

dihitung terhadap berat ekstrak awal dengan menggunakan rumus

yang ada pada Gambar 8 (19).

Gambar 8.Rumus Perhitungan Kadar Senyawa Yang Larut Dalam Air

Ket A1 = Cawan + residu setelah pemanasan
AO = Cawan kosong
B = Bobot sampel awal

2) Kadar senyawa yang larut dalam etanol

Ekstrak ditimbang 5 gram kemudian meserasi selama 24 jam dan

tambah 100 ml etanol 70% menggunakan labu ukur sambil dikocok

berkali-kali 6 jam pertama. Setelah itu dibiarkan selama 18 jam,

kemudian saring untuk menghindari penguapan etanol. filtrat

sebanyak 20 ml menggunkan pipet lalu diuap hingga kering dalam

wadah cawan porselin yang sudah ditara. Residu dipanaskan suhu

105oC hingga bobot tetap. Selanjutnya kadar senyawa larut dalam

etanol 70% dihitung terhadap berat ekstrak awal dengan rumus seperti

Gambar 9 (19).

AI −Ao
kadar senyawalarut dalam air x 100 %
B

Gambar 9. Rumus Perhitungan Kadar Sari Larut Etanol

Ket : A1 = Cawan + residu setelah pemanasan
AO = Cawan kosong
 34

B = Bobot sampel awal

3. Parameter non spesifik

a) Penetapan susut pengeringan

Ekstrak ditimbang sebanyak 1-2 g kemudian masukan kedalam

botol timbangan yang dangkal dan tertutup yang semula telah

dipanasksn pada suhu 105oC selama 30 menit yang telah ditara.

Ekstrak Sebelum dtimbang ditara terlebih dahulu kedalam botol

timbangan dengan menggoyangkan botol hingga lapisan kurang lebih

5-10 mm. Jika ekstrak kental, ratakan terlebih dahulu menggunakan

batang pengaduk, lalu masukan ke dalam ruang pengering, tutup

dibuka, setelah itu dikeringkan pada suhu 105oC hingga botol tetap.

Botol dalam keadaan tertutup dalam eksikator hingga suhu kamar.

Perhitungan susut pengiriman menggunakan rumus yang terdapat

pada gambar 10(19).

a−b
susut pengeringan %= x 100 %
a

Gambar 10. Rumus Perhitungan Susut Pengeringan

Ket : a = berat awal
b = berat akhir
 35

b) Penetapan bobot jenis

Penetapan ekstrak bobot jenis dilakukan dengan menimbang

piknometer kosong. Piknometer yang beriisi penuh dengan air

kemudian timbang kembali. Setelah Piknometer yang telah kosong dan

diisi penuh ekstrak lalu ditimbang. Kemudian bobot jenis ekstrak dapat

ditetapkan dengan menggunkan rumus pada Gambar 11 (19).

( pikno+ekstrak )−( pikno kosong)
Bobot jenis
( pikno+air )−(pikno kosong)

Gambar 11. Rumus Perhitungan Bobot Jenis

c) Kadar abu

Ekstrak ditimbang 1 g dengan krus yang kosong, krus kosong

ditimbang dahulu, kemudian dipijar dengan perlahan-lahan. Kemudian

dimasukkan kedalam tanur (alat oven) setelah itu atur suhu hingga 600

+ 25oC sampai bebas karbon. Selanjutnya didinginkan, serta ditimbang

berat abu. Perhitungan kadar abu bisa menggunakan rumus pada

Gambar 12 (20).

A 1− AO
kadar abu %= x 100 %
B

Gambar 12.Rumus Perhitungan Kadar Abu

ket Ao : bobot krus kosong (g)
A1 : bobot krus + ekstraksetelah pemijaran (g)
B : bobot sampel awal (g)
 36

d) Kadar abu yang tidak larut asam

Diperoleh penetapan kadar abu, kemudian 25 ml asam sulfat

didihkan 5 menit bagian yang tidak larut kemudian disaring

mengunakan kartas saring bebas abu yang sebelum nya sudah di

timbang , setelah penyaringan menggunakan kertas saring bebas abu

lalu dicuci denga air panas, kemudian disaring dan ditimbang, setelah

itu tentukan kadar abu tidak larut asam dalam persen yang dapat dilihat

pada Gambar 13 (20).

A 1− Ao
kadar abu tidak larut asam %= X 100 %
B

Gambar 13. Rumus Perhitungan Kadar Abu yang Tidak Larut Asam
Ket : A1 = bobot cawan + abu
Ao = bobot cawan kosong
W = bobot sampel
e) Penetapan kadar air

Ekstrak ditimbang sebanyak 10 g, kemudian masukan kedalam

wadah yang telah ditara, lalu dikeringkan pada suhu 105 oC selama 5

jam dan ditimbang pada jarak 1 jam sampai perbedaan antara 2

penimbangan beturut-turut tidak lebh dari 0,25%. Perhitungan kadar air

dapat menggunakan rumus seperti Gambar 14 (19).

 37

a−b
Kadar air %= x 100 %
a

Gambar 14. Rumus Perhitungan Kadar Air

Ket : a = sampel
b = Berat sampel sudah dipanaskan
f) Sisa pelarut

Ekstrak ditimbang 2 g, lalu ekstrak dilarutkan 25 ml kemudian

dimasukan kedalam labu destilasi dengan suhu 77,5oC. Hingga

diperoleh destisi kurang lebih 2 ml. Tambahkan 25 ml air. Tetapkan

bobot jenis cairan paa suhu 25oC seperti yang tertera pada bobot jenis.

Perhitungan sisa pelarut dapat menggunakan rumus seperti pada

Gambar 15 (21).
( pikno+ sisa pelarut )−(pikno kosong)
Sisa pelarut
( pikno +aquadest )− pikno kosong

Gambar 15. Rumus Perhitungan Sisa Pelarut

4. Analisis Flavonoid

Uji senyawa flavonoid

Penetapan kadar flavonoid total dengan metode spektrofotometri UV-Vis

dengan kuersetin sebagai larutan standar(22).

a) Pembuatan larutan baku kerja kuersetin 100 ppm.

1) Larutan baku induk dipipet sebanyak 1 ml kemudian ditambahkan

etanol 70% hingga volume 10 ml.

 38

2) Pembuatan larutan blangko pipet 0,2 ml alcl3 2% dan 0,2 kalium

asetat 120mM tambahkan etanol 70% sampai volume 10 ml.

3) Penentuan operating time larutan baku kerja kuersetin 100 ppm

diambil sebanyak 0,4 ml ditambahkan dengan pipet 0,2 ml alcl3 2%

dan 0,2 kalium asetat 120mM tambahkan etanol 70% sampai volume

10 ml. Larutan tersebut diukur absorbansinya pada panjang

gelombang maksimum teoritis 433,8 nm dengan interval waktu 60

menit sampai diperoleh absorbansi yang stabil. Diamati kurva

hubungan antara absorbansi, waktu, dan tentukan operating time (23).

b) Pembuatan larutan standar kuersetin

Standar kuersetin ditimbang 10 mg ditambahkan 10 ml metanol

untuk 1000 ppm. diambil 1 ml pada 100 ppm kemudian dilarutkan

dalam 10 ml metanol untuk 100 ppm. Setelah itu dibuat masing-

masing konsentrasi 2, 4, 6, 8, dan 10ppm. Dari setiap konsentrasi

ditambah 3 ml metanol, 0,2 AℓCℓ3 2%, 0,2 ml kalium asetat 120 mM,

ditambahkan etanol ad 10 mL. Setelah itu diinkubasi selama 30 menit

pada suhu kamar. Kemudian ukur absorbansinya dengan

spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 433,8 nm(11).

c) Penetapan kadar flavonoid total

Ekstrak ditimbang 100 mg, lalu dilarutkan dalam 10 ml metanol,

kemudian diambil 1 ml dan ditambah 3 ml metanol, 0,2 AℓCℓ3 2%,

 39

0,2 ml kalium asetat 120 mM dan ditambahkan etanol sampai 10 ml.

Simpan 30 menit dengan suhu kamar, ukur absorbansi dengan

spektrofotometri UV-Vis menggunakan panjang gelombang 433,8 nm.

Kadar senyawa flavonoid direplikasi 3 kali untuk memperoleh

ekuivalen kuersetin(11).

H. Pengolahan dan Analisis Data

Pengumpulan data standarisasi menggunakan rumus untuk menentukan

hasil standarisasi spesifik dan non spesifik, dan disajikan secara deskriptif(24).

Pengumpulan data flavonoid menggunakan software excel yang diperoleh dari

absorbansi larutan pembanding kuersetin, dibuat kurva kalibrasi dan di peroleh

persamaan regresi linier. perhitungan selanjutnya menghitung kadar total

persamaan regresi linier (y = bx + a) yang diperoleh dari kurva kalibrasi

pembanding dan hasil dinyatakan dalam satuan mg (11).

I. Etika Penelitian

Surat keterangan ethical clearance didapat dari LP2M (Lembaga

Penelitian dan Pengabdian Masyarakat) Universitas Alma Ata. Penelitian”

Standarisasi dan Analisis Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah (Piper Crocatum)”.

 40

J. Jalannya Penelitian

Gambar 16. Jalannya Penelitian(11) (19).

 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian

1. Hasil Determinasi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Daun sirih merah (Piper crocatum) yang digunakan dalam penelitian ini

yaitu diperoleh dari daerah Bringharjo Daerah Yogakarta. Pembuatan Daun

sirih merah (Piper crocatum) dilakukan di Laboratorium Fitokimia dan

Teknologi Farmasi, detereminasi yang diperoleh dengan serbuk 500 g

menjadi 169,84 g ekstrak kental dengan etanol 70%.

2. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Serbuk daun sirih merah (Piper crocatum) diekstrak menggunakan metode

maserasi dengan pelarut etanol 70%. Hasil rendeman dapat dilihat pada Tabel

3.

Tabel 3. Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Bahan Berat Berat Rendemen Warna
serbuk(gram) ekstrak ekstrak (%) ekstrak
(gram)
Daun sirih Hijau
500 169,84 33,968
merah kehitaman

3. Hasil Pengamatan Parameter spesifik Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Parameter spesifik ekstrak etanol daun sirih merah yang dianalisis meliputi

identifikasi, organoleptik, senyawa yang larut dalam air, kadar senyawa yang

larut dalam etanol:

38
 42

a) Identifikasi Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Identifikasi mendeskripsikan tata nama meliputi nama ekstrak Daun

Sirih Merah, nama latin tumbuhan Piper crocatum, bagian tumbuhan yang

digunakan Daun dan nama Indonesia dari tumbuhan Daun Sirih Merah.

b) Organoleptis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Hasil warna hijau kehitaman, baunya khas sirih merah dan untuk

rasanya pahit.

c) Kadar Senyawa yang Larut dalam Air Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah

Tabel 4. Kadar Senyawa Larut Dalam Air Ekstrak Etanol Daun Sirih
Merah
Replikasi Kadar Senyawa Larut Dalam
Air % (b/b)
1 32,4
2 32,8
3 35,2
Rata-rata 33,6

Berdasarkan Tabel 4, hasil penelitian dan perhitungan dari senyawa

yang larut di dalam air, dengan masing-masing menggunakan sampel

bobot awal sebesar 5gr, didapatkan hasil terbesar pada replikasi 3, ialah

35,2%(b/b), dan yang terkecil pada replikasi 1, ialah 32,4%(b/b), dan

untuk resplikasi 2 dengan hasil 32,8%(b/b), hasil rata-rata kadar senyawa

larut dalam air adalah 33,6%(b/b).

 43

d) Kadar Senyawa Larut Dalam Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 5. Kadar Senyawa Larut dalam Etanol Ekstrak Etanol Daun Sirih
Merah
Replikasi Hasil % (b/b)
1 39,64
2 34,78
3 34,4
Rata-rata 36,27

Berdasarkan Tabel 5, hasil penelitian dan perhitungan dari senyawa

yang larut di dalam air, dengan masing-masing menggunakan sampel

bobot awal sebesar 5gr, didapatkan hasil terbesar pada replikasi 1, 39,64%

(b/b) untuk replikasi 2, 34,78%(b/b) dan pada replikasi 3, atau

34,4%(b/b), dan. Hasil rata-rata kadar senyawa larut dalam etanol 36,27%

(b/b).

4. Hasil Pengamatan Parameter Non Spesifik Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah

Parameter non spesifik standarisasi ekstrak etanol daun sirih merah yang

meliputi susut pengeringan, bobot jenis, kadar abu, kadar abu yang tidak larut

asam, dan kadar air, sisa pelarut.

a) Penetapan Susut Pengeringan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 6. Penetapan Susut Pengeringan Etanol Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah
Replikasi Susut Pengeringan %
(b/b)
1 20
2 19,5
3 21,1
Rata-rata 20,2
 44

Berdasarkan Tabel 6, hasil penelitian dan perhitungan tentang susut

pengeringan, dengan replikasi awal yang masing-masing seberat 1,99 g

dan dipanaskan selama beberapa jam, sehingga menemukan berat akhir

untuk replikasi 1 menyusut 20%(b/b), untuk replikasi 2 menyusut 19,5%

(b/b) dan untuk replikasi 3 menyusut menjadi 21,1%(b/b), dengan hasil

rata-rata 20,2%(b/b).

b) Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 7. Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih merah

Replikasi Bobot Jenis (gr/mL)

1 1,032
2 1,032
3 1,032
Rata-rata 1,032

Berdasarkan Tabel 7, hasil penelitian dan perhitungan didapatkan hasil

masing-masing replikasi dengan berat yang sama, dan dilakukan

pengukuran dan pelarutan kedalam air dan ekstrak, maka di dapatkan hasil

bobot jenis yang sama, yaitu seberat 1,032gr/mL dengan hasil rata-rata

1,032 gr/mL.

c) Kadar Abu Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 8. Kadar Abu Ekstrak EtanolDaun Sirih Merah

Replikasi Hasil % (b/b)

1 8,99948
2 9,42941
3 9,78586
 45

Rata-rata 9,40491

Berdasarkan Tabel 8, hasil penelitian dan perhitungan untuk

mendapatkan kadar abu, dengan dipanaskan disuhu 500-600oc sehingga

didapatkan hasil setelah dipanaskan adalah replikasi 1 menjadi 8,99948%

(b/b) dan replikasi 2 menjadi 9,42941%(b/b) lalu untuk replikasi 3 menjadi

9,78586 %(b/b), dan hasil rata-rata 9,40491 %(b/b).

d) Kadar Abu Yang Tidak Larut Asam Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah

Tabel 9. Kadar Abu yang Tidak Larut Asam Ekstrak Etanol Daun Sirih
Merah
Replikasi Hasil %
(b/b)
1 1,94445
2 2,19216
3 2,53818
Rata-Rata 4,98267

Berdasarkan Tabel 9, hasil penelitian dan perhitungan kadar abu yang

tidak larut asam untuk mengetahui jumlah yang tidak tercampur dengan

ekstrak dengan dipanaskan disuhu 500-600oc sehingga didapatkan hasil

setelah dipanaskan adalah replikasi 1 dengan 1,94445%(b/b), replikasi 2

dengan 2,19216%(b/b) dan replikasi 3 dengan 2,53818 %(b/b), dan

mendapatkan rata-rata 4,9826%(b/b).

 46

e) Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 10. Penetapan Kadar Air Ekstrak Ekstrak Daun Sirih Merah
Sampel Jarak Kadar Air
(A) Penimbangan % (b/b)
10 Grm 1 Jam 5,6
10 Grm 2 Jam 7,4
10 Grm 3 Jam 11,8
10 Grm 4 Jam 14,3
10 Grm 5 Jam 15,8
Rata-rata 10,8

Berdasarkan Tabel 10, hasil penelitian dan penghitungan untuk

penetapan kadar air dengan sample yang sama yaitu seberat 10 g dengan

jarak penimbangan yaitu 1-5jam dan dipanaskan dengan suhu 150oc maka

didapatkan hasil berat sample sesudah dipanaskan yang paling kecil

dengan jarak penimbangan 1 jam 5,6%(b/b) dan yang paling besar

mengalami dengan jarak penimbangan 5 jam mengalami penurunan15,8%

(b/b), dengan rata-rata 10,8%(b/b).

f) Sisa Pelarut Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Tabel 11. Sisa Pelarut Ekstrak Ekstrak Daun Sirih Merah

Replikasi Sisa Pelarut (gr/mL)
1 1,306
2 0,928
3 1,036
Rata-rata 3,27
Berdasarkan Tabel 11, hasil penelitian dan perhitungan untuk

menemukan sisa pelarut setelah dipanaskan dan dicampurkan beberepa

senyawa maka didapatkan hasil dengan pikno kosong yang sama dengan
 47

replikasi yang sama menghasilkan resplikasi 1 dengan hasil 1,306 gr/mL,

replikasi 2 dengan hasil 0,928 gr/mL dan replikasi 3 dengan 1, 036 gr/mL,

hasil rata-rata dari sisa pelarut ialah 3,27 gr/mL.

5. Penentuan panjang gelombang maksimum

Tabel 12. Panjang Gelombang Maksimum Larutan Standar Kuersetin

Sampel Lamda (nm) Absorbansi

Kuersetin 433,8 0,324

Panjang gelombang maksimum yang diperoleh absorbansi kompleks

antara kuersetin dengan AlCl3 2% terbaca secara maksimum pada panjang

gelombang 433,8. Semua hasil tersebut yaitu sesuai dengan teori yang

mengatakan bahwa panjang gelombang maksimum kuersetin yaitu antara

400-500 nm.

6. Operating Time

Hasil dari operating time absorbansi yang dapat dilihat pada Tabel 13

dan Gambar 17 diketahui bahwa menit ke 0-20 belum bereaksi sempurna

dan pada menit ke 20-32 merupakan oprating time dimana senyawa

komplek dengan aluminium menunjukan serapan yang stabil.

 48

Tabel 13. Operating time senyawa kompleks kuersetin

Waktu (menit) Absorbansi Waktu Absorbansi
(menit)
2 0,431 32 0,428
4 0,429 34 0,429
6 0,428 36 0,433
8 0,427 38 0,429
10 0,429 40 0,430
12 0,428 42 0,430
14 0,428 44 0,430
16 0,427 46 0,430
18 0,427 48 0,431
20 0,428 50 0,431
22 0,428 52 0,433
24 0,428 54 0,430
26 0,428 56 0,433
28 0,428 58 0,434
30 0,428 60 0,435

Gambar 17. Operating time senyawa kompleks kuersetin

 49

7. Menentuan kurva baku kuersetin

a) Hasil penentuan kurva baku standar kuersetin

Tabel 14. Persamaan Regresi Linier Larutan Standar Kuersetin

Konsentrasi Absorbansi Persamaan Regresi Linier

2 ppm 0,168 y = 0,0825x - 0,0048
4 ppm 0,312 R² = 0,9938
6 ppm 0,509 R = 0,9969
8 ppm 0,626
10 ppm 0,836

Berdasarkan Tabel 14, pengukuran larutan standar kuersetin yaitu

didapatkan persamaan kurva y = 0,0825x - 0,0048 dengan nilai R2 sebesar

0,9938 dan nilai R sebesar 0,9969 yang dapat dilihat juga pada Gambar 17.

b) Kurva Baku kuersetin

Gambar 18.Kurva Baku Kuersetin

 50

8. Penetapkan Kadar Senyawa Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih

Merah
Tabel 15. Kadar Senyawa Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

No Penimbangan Absorbansi Intercept Slope X Flavonoid Rata Standar

(mg) (a) (b) (ppm) Total –Rata Deviasi
% (b/b) % (%)
(b/b)
1 116 0,710 -0,0048 0,0825 8,664 0,747 0,75 0,02
2 0,707 -0,0048 0,0825 8,628 0,744
3 0,708 -0,0048 0,0825 8,640 0,745
4 108 0,534 -0,0048 0,0825 6,531 0,605 0,61 0,02
5 0,535 -0,0048 0,0825 6,543 0,606
6 0,537 -0,0048 0,0825 6,567 0,608
7 109 0,657 -0,0048 0,0825 8,022 0,736 0,74 0,03
8 0,660 -0,0048 0,0825 8,058 0,739
9 0,661 -0,0048 0,0825 8,070 0,740

Hasil penelitian dan perhitungan untuk mengetahui kadar kuersetin

dengan penambahan larutan AlCl3 2% dan kalium asetat. Pengukuran

absorbansi menggunakan spektrofotometri dan Panjang gelombang 433,8 nm

yang dilakukan 3 kali replikasi dengan rata-rata replikasi lihat Tabel 15.

Berdasarkan Tabel 15 diatas, dapat dilihat bahwa rata-rata kadar

senyawa flavonoid total yang diperoleh pada penelitian ini yaitu 0,75%(b/b)

pada penimbangan ke-1, 0,61%(b/b) pada penimbangan ke-2 dan 0,74%(b/b)

pada penimbangan ke-3.

 51

B. Pembahasan

1. Ekstraksi Daun Sirih Merah

Serbuk daun sirih meraah (Piper crocatum) sebanyak 500g untuk etanol

70%. Ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) diperoleh menggunakan

metode maserasi atau penyarian tanpa pemanasan. Metode maserasi bertujuan

untuk memisahkan senyawa kimia yang terdapat dalam daun sirih merah

menggunakan pelarut etanol 70% sebanyak 5 L(24). Proses pengadukan

menggunakan alat overhead stirre dan perendaman pada metode maserasi

untuk mengambil zat-zat aktif yang terdapat dalam serbuk daun sirih merah

dengan cara memecah dinding dan membran sel akibat terjadinya perbedaan

tekanan antara diluar maupun didalam sel (25). Pelarut yang digunakan untuk

penyarian pada metode maserasi yaitu etanol 70% dengan menggunakan

wadah tertutup seperti toples. Etanol merupakan pelarut polar yang dapat

mengekstraksi senyawa flavonoid, dimana gugus hidroksil akan membentuk

suatu ikatan hidrogen dari senyawa flavonoid sehingga mampu

mengakibatkan peningkatan kelarutan senyawa kimia dalam etanol serta

memliki kelebihan dapat menyari senyawa kimia lebih banyak dibanding

metanol dan air (26).

Ekstraksi dilakukan dengan remaserasi sebanyak 1 kali. Penyaringan

menggunakan kain flannel dikarenakan kain fanel memiliki serat kain yang

lebih rapat dan dapat menghasilkan filtrat dan residu serbuk daun sirih merah.
 52

Filtrat hasil penyaringan dipekatkan menggunakan vacum rotary evaporator

selama 1 jam dengan suhu 70°C dan kecepatan 100 rpm untuk memisahkan

pelarut etanol(27). Hasil rendemen dari suatu sampel digunakan untuk

mengetahui banyaknya ekstrak dan senyawa kimia yang terambil pada proses

ekstraksi. Hasil rendemen suatu sampel memiliki hubungan dengan senyawa

aktif yang terkandung didalamnya, artinya semakin besar nilai rendemen

maka semakin banyak juga senyawa aktif yang tersaring. Sedangkan nilai

rendemen ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum ) etanol 70% yaitu

33,968% yang berwarna coklat kemerahan, dan bau khas daun sirih merah

(Piper crocatum). Hal tersebut sesuai dengan persyaratan Faramkope Herbal

Indonesia bahwa rendemen ekstrak daun sirih merah (Piper crocatum) tidak

kurang dari 17,0% (6).

Penelitian ini akan melakukan standarisasi ekstrak etanol daun sirih

merah (Piper crocatum) yang merupakan tahapan awal pembuatan

standarisasi pengembangan tumbuhan obat secara spesifik dan non spesifik.

Standarisasi spesifik dapat menetapkan parameter seperti identifikasi, uji

organoleptik, uji senyawa dalam air, kadar senyawa yang larut dalam etanol,

sedangkan standarisasi non spesifik meliputi susut pengeringan, bobot jenis,

kadar abu, kadar abu yang tidak larut asam, dan kadar air, sisa pelarut (5).

Standarisasi adalah mikrobiologi yang menjamin keamanan terhadap

suatu ekstrak alam dan juga dapat memproses metode analisis kimiawi
 53

berdasarkan farmakologinya serta melibatkan analisis fisik (5). Parameter

spesifik ekstrak etanol daun sirih merah yang meliputi identifikasi,

organolepti, senyawa yang larut dalam air, kadar senyawa yang larut dalam

etanol. Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh

Emelda at all, 2020 (2) dimana hasil uji organoleptis, homogenitas, ph, daya

lekat, daya sebar, dan konsistensi memenuhi persyaratan dalam sedian gel

kombinasi daun sirih merah (Piper crocatum) dan minyak kayu manis

(Cinamon oil). Bahan yang digunakan adalah daun sirih merah (Piper

crocatum) dan etanol 70%(24).

2. Identitas Daun Sirih Merah

Uji identitas bertujuan untuk memberikan identitas obyektif dari nama

dan spesifik dari senyawa identitas. Prinsipnya adalah melakukan deskripsi

tata nama (ekstrak, nama latin tumbuhan, bagian tumbuhan yang digunakan,

nama Indonesia tumbuhan) dan senyawa identitas ekstrak yang

digunakan(28).

1. Deskripsi tata nama

a. Nama simplisia : Daun sirih merah

(Piperis crocati

folium)

b. Nama ekstrak : Ekstrak kental daun

sirih merah (Piperis

 54

crocati folii

extractum spissum)

c. Nama latin tumbuhan : (Piperis crocati

ruiz & pav.,)

d. Bagian tumbuhan yang digunakan : Daun

e. Nama Indonesia tumbuhan : Sirih merah (6)

(29)

3. Pengujian Organoleptis Daun Sirih Merah

Pengujian organoleptis merupakan pengujian pengenalan sederhana

menggunakan panca indera untuk mendeskripsikan bentuk warna, rasa, dan

bau (30). Tujuan dari pengujian ini yaitu untuk mengenali ekstrak apakah

ekstrak yang di ujikan sesuai dengan standar yang tertera pada FHI.

Menunjukkan bahwa sampel ekstrak daun sirih merah mempunyai bentuk

yang sama, warna yang hampir sama, rasa dan bau yang sama. Sampel

berbentuk kental, berwarna coklat kemerahan rasa pahit dan berbau khas.

Sampel tersebut beberapa sudah sesuai dengan literatur FHI dimana

disebutkan bahwa ekstrak berbentuk kental, berwarna cokelat kemerahan

dengan rasa agak pahit dan bau yang khas FHI(6).

4. Pengujian Kadar Senyawa Yang Larut Dalam Air Daun Sirih Merah
 55

Penetapan kadar senyawa yang larut air yang bertujuan memberikan

gambaran jumlah awal senyawa dalam ekstrak daun sirih merah yang larut

dalam air. Penetapan kadar sari larut air digunakan air jenuh kloroform untuk

menghindari pembusukan simplisia dan ekstrak selama penyarian(30).

Hasil penelitian kadar senyawa yang larut dalam air dari rumus

didapatkan, hasil penelitian dan perhitungan dari senyawa yang larut di dalam

air, dengan masing-masing menggunakan sampel bobot awal sebesar 5gr,

dengan masing-masing menggunakan cawan seberat 53,160 g. Setelah di

panaskan, di dapatkan hasil terbesar pada replikasi 3 dengan 54,90 g atau

35,2%b/b, dan yang terkecil pada replikasi 1 dengan 54,78 g atau 32,4%b/b,

dan untuk resprilaksi 2 dengan hasil 54,80 g atau 32,8%, hasil rata-rata kadar

senyawa larut dalam air adalah 33,6%b/b. Penelitian ini tersebut sejalan

dengan penelitian yang dilakukan oleh Rivai at all (31).

Penentuan kadar senyawa larut dalam air bertujuan untuk menunjukkan

jumlah kandungan senyawa yang bersifat polar (memiliki sifat kepolaran

sama dengan air). Kloroform difungsikan untuk menarik pengotor-pengotor

dalam ekstrak yang bersifat non polar, sedangkan aquades digunakan sebagai

pelarut senyawa-senyawa polar. Kadar sari larut air dilakukan terlebih dahulu

diawali dengan pelarutan ekstrak sampel dalam air kemudian dipanaskan

diatas titik didih air (105oC). Senyawa yang tertinggal dalam cawan setelah

penguapan dinyatakan sebagai senyawa yang larut dalam air (21).

 56

5. Kadar Senyawa Yang Larut Di Dalam Etanol Daun Sirih Merah

Penetapan kadar senyawa larut etanol dilakukan untuk menunjukkan

kandungan senyawa-senyawa yang bersifat semi polar (memiliki sifat

kepolaran sama dengan etanol). Bertujuan untuk memberikan gambaran awal

jumlah senyawa dalam simplisia dan ekstrak etanol daun sirih merah yang

larut dalam pelarut etanol. Etanol yang digunakan sebagai pelarut adalah

etanol 70% yang kemudian diuapkan diatas titik didih etanol (150 oC).

Senyawa yang tertinggal dalam cawan setelah proses pemanasan dinyatakan

sebagai senyawa larut dalam etanol (21).

Berdasarkan hasil penelitian dan perhitungan dari senyawa yang larut di

dalam etanol, dengan masing-masing menggunakan sampel bobot awal

sebesar 5gr, dengan masing-masing menggunakan cawan seberat 49,910

untuk replikasi 1, 50,160 untuk replikasi 2, dan 50,173 untuk replikasi 3.

Setelah di panaskan, di dapatkan hasil terbesar pada replikasi 1, 51,892 atau

39,64%(b/b), dan yang terkecil pada replikasi 3, dengan 50,173 atau 34,4%

(b/b), dan untuk replikasi 2 dengan hasil 51,889 atau 34,78%(b/b), dengan

hasil rata-rata 36,27%(b/b).

Demikian dapat dikatakan bahwa senyawa yang dilarutkan dengan

etanol 70% akan mengalami pelarutan yang lebih besar dari pada senyawa

yang dilarutkan pada air. Penelitian ini sejalan dengan penelitian yang

dilakukan (8) menunjukkan bahwa pengujian senyawa yang larut dalam air
 57

dengan hasil akhir sebesar 68,27%(b/b) sedangkan yang larut etanol sebesar

82% menunjukkan bahwa kadar senyawa yang terkandung dalam ekstra

terdiri dari senyawa polar dan non polar dengan perbandingan senyawa polar

lebih banyak dibandingkan dengan senyawa non polar dilihat dari besar nilai

persen (%) senyawa yang larut dalam air dan dalam etanol (8).

6. Penetapan Standarisasi Non Spesifik Daun Sirih Merah

Penelitian ini juga mengamati adanya penetapan standarisasi non

spesifik ekstrak dimana bertujuan untuk menentukan batasan cemaran serta

kontaminasi dari pengotor yang diperbolehkan, yang mana dapat menjamin

keamanan serta stabilitas suatu ekstrak (32). Ekstrak dapat dijadikan menjadi

bahan obat, berdasarkan penelitian yang, dilakukan penetapan standarisasi

pada daun sirih merah yang meliputi susut pengeringan, bobot jenis, kadar

abu, kadar abu yang tidak larut asam, kadar air serta sisa pelarut. Hasil

penetapan standarisasi non spesifik ekstrak dapat dilihat pada Tabel (6) – (11)

standarisasi non spesifik yang telah peneliti paparkan.

7. Penetapan Susut Pengeringan Daun Sirih Merah

Susut pengeringan yang bertujuan untuk memberikan batasan maksimal

dikarenakan (rentang) tentang besarnya senyawa yang hilang pada proses

pengeringan. Pengukuran susut pengeringan berdasarkan sisa zat setelah

pengeringan pada suhu 105oC selama 30 menit atau sampai berat konstan,

dan dinyatakan sebagai nilai persen (28).

 58

Hasil penelitian pada penetapan susut pengeringan dari rumus didapatkan

hasil pada ketiga replikasi yang sama-sama mempunyai berat awal 1,99 g,

setelah dilakukan pengeringan mendapatkan hasil yang berbeda replikasi 1

dengan berat akhir 1,59 dan menyusut sebanyak 20%, replikasi 2 dengan

berat akhir 1,60 dan menyusut sebanyak 19,5% dan replikasi 3 dengan berat

1,57 dan menyusut sebanyak 2,1%. Hal ini sejalan dengan penelitian yang

dilakukan oleh Rivai at all, 2014 (33) bahwa proses pengeringan yang

dilakukan mengalami susut pengeringan sebesar 2,1533% pada ketiga

replikasi yang diteliti. Penetapan susut pengeringan yang dilakukan oleh

peneliti digunakan untuk mengetahui besarnya senyawa yang hilang pada

proses pengeringan. Hasil penetapan susut peneringan yang dilakukan oleh

peneliti, menunjukkan penyusutan terendah terjadi pada replika 1 yang

mengalami penyusutan hingga 20%.

8. Penetapan Bobot Jenis Daun Sirih Merah

Bobot jenis merupakan perbandingan massa dari suatu zat terhadap

kerapatan air dengan nilai massa per satuan volume. Tujuannya untuk

memberikan gambaran kandungan kimia yang terlarut(28). Berdasarkan hasil

penelitian yang dilakukan oleh peneliti terkait bobot jenis, menunjukkan hasil

yang sama antara replika 1 hingga 3, yaitu dengan berat mencapai

1,032gr/mL. Pengujian bobot jenis dilakukan untuk gambaran terkait

kandungan kimia yang terlarut didalam ekstrak (32).

 59

9. Penetapan Kadar Abu Total Daun Sirih Merah

Penetapan kadar abu yang bertujuan untuk memberikan gambaran

kandungan mineral eksternal dan internal yang prosesnya dari awal hingga

terbentuknya ekstrak(28). Kadar abu total ini melebihi standar yang telah

ditetapkan menunjukkan bahwa tingkat cemaran bahan anorganik yang tinggi

dapat memberikan efek toksik bagi tubuh (28).

Proses pengabuan ekstrak ini dilakukan dalam tanur menggunakan suhu

600ºC karena suhu 600ºC dapat menyebabkan hilangnya kandungan alkali

dan karbon dioksida pada senyawa karbonat. Proses pengabuan dilakukan

hingga senyawa terdekstruksi dan menguap hingga tersisa unsur mineral dan

anorganik saja (21). Pengujian ini juga membuktikan, bahwa kadar abu pada

replika 1-3 yang memiliki rata-rata hasil 9,40491%(b/b) telah melebihi nilai

yang ditetapkan oleh FHI, yaitu tidak lebih dari 5,9%(6).

Pengujian terkait kadar abu dengan kadar abu tidak larut asam bertujuan

untuk memberikan gambaran terkait kandungan mineral yang berasal dari

proses awal hingga akhir pada ekstrak. Penelitian lain yang berasal dari

Marpaung dan Septiyani 2020(34) mengungkapkan, semakin tinggi kadar

abu, maka kandungan mineral pada ekstrak juga semakin tinggi. Sedangkan

tingginya kadar abu tidak larut asam menunjukkan, terdapatnya zat pengotor

seperti tanah, debu, pasir serta logam berat yang berasal dari proses

pengolahan pada ekstrak(34).

 60

10. Penetapan Kadar Abu Yang Tidak Larut Asam Daun Sirih Merah

Penetapan kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk memberikan

gambaran kandungan mineral pada ekstrak metanol daun sirih merah yang

tidak dapat larut dalam asam. Nilai kadar abu tidak larut asam yang tinggi

atau melebihi standar menunjukkan adanya kandungan silikat yang berasal

dari tanah atau pasir (29).

Pengujian kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk menentukan

tingkat pengotoran oleh pasir dan tanah. Pengujian abu tidak larut asam tidak

sesuai dengan peraturan dari FHI yaitu tidak kurang dari 1,3% dengan hasil

yang didapatkan ialah rata-rata 4,98267 %(b/b) (6).

11. Penetapan Kadar Air Daun Sirih Merah

Penetapan kadar air bertujuan memberikan batasan minimal atau rentang

tentang besarnya kandungan air di dalam bahan. Pengukuran kandungan air

yang berada di dalam bahan, dilakukan dengan cara yang tepat diantara cara

titrasi, destilasi atau gravimetric, dengan nilai maksimal atau rentang yang

diperbolehkan, terkait dengan kemurnian dan kontaminas (28).

Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh peneliti terkait kadar

air, didapatkan hasil pada sampel A jarak penimbangan 1 jam mengalami

penurunan sekitar 5,6% sedangkan penurunan paling tinggi terjadi pada jarak

penimbangan 5 jam yang mencapai 15,8%. Berdasarkan hasil jarak

penimbangan 3-5 jam pada sampel A menunjukkan nilai kadar air berkisar
 61

antara 11,8% hingga 15,8%. Hal ini menunjukkan, pada penimbangan 3-5

jam melebihi kadar air yang telah ditetapkan oleh FHI yaitu tidak lebih dari

10%(6). Penelitian ini diuji untuk mengetahui rentang besarnya air yang

dikandung dalam ekstrak daun sirih merah. Tingginya kadar air dapat

menyebabkan terjadinya kerusakan atau pembusukan pada ekstrak yang

diakibatkan oleh mikroba. Kadar air dapat menentukan kualitas dan stabilitas

pada ekstrak(32).

12. Penetapan Sisa Pelarut Daun Sirih Merah

Penetapan sisa pelarut bertujuan memberikan jaminan bahwa selama

proses tidak meninggalkan sisa pelarut yang memang seharusnya tidak boleh

ada. Sedangkan untuk ekstrak cair menunjukkan jumlah pelarut (alkohol)

sesuai dengan yang ditetapkan. Menentukan kandungan sisa pelarut tertentu

(yang memang ditambahkan) yang secara umum dengan kromatografi gas.

(28).

Berdasarkan hasil penelitian dan perhitungan untuk menemukan sisa

pelarut setelah dipanaskan dan dicampurkan beberapa senyawa maka

didapatkan hasil dengan pikno kosong yang sama dengan replikasi yang sama

menghasilkan resplikasi 1 dengan 1,306, replikasi 2 dengan 0,928 dan

replikasi 2 dengan 1, 036, Hal ini menunjukan bahwa sisa pelarut masih

tinggi setelah dilakukan pencampuran senyawa. Hal ini berbeda dengan

penelitian yang dilakukan oleh Rasydy at all 2019 (35). Hasil penetapan
 62

kadar etanol sisa secara GC-FID dalam ekstrak diperoleh kadar etanol

0,006% hasil pemeriksaan tersebut memenuhi persyaratan batas maksimum

sisa pelarut dalam etanol yaitu 1,0% menurut Isnawati dan Arifin, 2006. Hal

ini menunjukkan bahwa ekstrak yang diperoleh dapat digunakan sebagai

bahan baku sediaan karena mengandung kadar etanol yang renda (35).

13. Analisis Kadar Flavonoid Daun Sirih Merah

Analisis kadar flavonoid menggunakan metode spektrofotometri.

Spektrofotometri UV-Vis merupakan analisis yang memakai sumber radiasi

elektromagnetik ultraviolet dengan panjang gelombang (λ) 190-380 nm dan

sinar tampak pada panjang gelombang (λ) 380-780 nm. Prinsip kerja

spektrofotometri UV-Vis yaitu adanya interaksi antara materi dengan cahaya

yang memiliki panjang gelombang tertentu(36).

Penentuan jumlah flavonoid dari ekstak daun sirih merah dilakukan

dengan spektrofotometri yang mempunyai prinsip pengukuran berdasarkan

pembentukan warna. Prinsip penetapan flavonoid dengan metode

spektrofotometri direaksi dengan AlCl3 2% adalah pembentukan kompleks

antara AlCl3 2% dengan gugus keto pada atom C-4 dan juga dengan gugus

hidroksi pada atom C-3 atau C-4 yang bertetangga dari flavon dan flavonol.

Penambahannya, kalium asetat membentuk kompleks asam yang stabil

dengan gugus orthohidroksil pada cincin A- atau B- dari senyawa-senyawa

flavonoid(36).
 63

Sampel yang diuji menunjukkan perubahan warna menjadi kuning. Hal

ini menunjukan bahwa adanya senyawa flavonoid dalam sampel dengan uji

positif. Sampel yang mengandung flavonoid, bila direaksikan dengan AlCl3

2% yang akan terbentuk warna kuning, hal ini terjadi karena terbentuknya

senyawa kompleks antara flavonoid dengan AlCl3 2% seperti pada Gambar

19 (36).

Gambar 19. Reaksi Pembentukan Kompleks Flavonoid-AlCl3(37).

Senyawa yang digunakan sebagai kurva standar pada penetapan kadar

flavonoid daun sirih merah ini ialah kuersetin. Pemilihan kuersetin sebagai

larutan standar karena kuersetin ialah senyawa penyebarannya yang paling

luas terdapat pada tumbuhan. Kuersetin dan glikosidanya berada dalam

jumlah sekitar 60-75% dari flavonoid. Kuersetin juga merupakan salah satu

senyawa golongan flavonoid yang dapat bereaksi dengan AlCl 3 2%

membentuk kompleks (36). Penambahan AlCl3 2% dalam penelitian ini yaitu

 64

bertujuan untuk mendeteksi adanya gugus 7-hidroksil, sebelum pengukuran

agar reaksi berjalan sempurna dengan perlakuan inkubasi selama 30 menit

yang dilakukan, sehingga memberikan intensitas warna yang maksimal (38).

Penambahan kalium asetat untuk pertahankan panjang gelombang pada

daerah visible (tampak). Pengukuran senyawa flavonoid total, larutan sampel

ditambahkan AlCl3 2% yang dapat membentuk warna kompleks, sehingga

terjadi pergeseran panjang gelombang ke arah visible (tampak) yang ditandai

dengan larutan menghasilkan warna yang lebih kuning(39).

14. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Kuersetin

Penetapan panjang gelombang dengan penentuan panjang gelombang

pengukuran kompleks antara kuersetin dengan AlCl3 2% memberikan

absorbansi optimum. Pengukuran pada panjang gelombang maksimum

akan memberikan perubahan absorbansi paling besar untuk setiap satuan

kadar. Penetapan panjang gelombang maksimum merupakan faktor yang

sangat penting dalam analisis kimia dengan metode spektrofotometri.

Selain itu, sekitar panjang gelombang maksimum relatif datar pada kurva

absorbansi. Sehingga jika akan dilakukan pengukuran ulang dan replikasi

akan meminimalkan terjadinya kesalahan pengukuran(40).

 65

Gambar 20. Panjang Gelombong Daun Sirih Merah Penentuan Spektrofotometri

UV-Vis
Panjang gelombang maksimum yang diperoleh pada penelitian seperti

yang dapat dilihat pada Gambar 20 yaitu 433,8 nm, artinya absorbansi

kompleks antara kuersetin dengan AlCl3 2% terbaca secara maksimum pada

panjang gelombang tersebut. Hal ini sedikit berbeda dengan penelitian

panjang gelombang maksimum yang dilakukan oleh kumalasari (2018)(40),

yang memperoleh panjang gelombang maksimum kuersetin berada pada 765

nm, dan sedikit berbeda dengan penelitian yang dilakukan Anjani 2020, yang

memperoleh hasil 662,85 nm pada pengukuran panjang gelombang

maksimum kompleks yang terbentuk antara kuersetin dengan AlCl3 2%.

Semua hasil tersebut yaitu sesuai dengan teori yang mengatakan bahwa

panjang gelombang maksimum kuersetin yaitu antara 400-500 nm(36).

 66

15. Penentuan Operating Time Kuersetin

Operating time biasanya digunakan untuk pengukuran hasil reaksi atau

pembentukan warna. Waktu operasional atau operating time merupakan

waktu senyawa dibutuhkan untuk bereaksi dengan senyawa lain hingga

terbentuk senyawa produk yang stabil. (37).

Senyawa yang akan diukur absorbansinya dalam penelitian ini

merupakan suatu senyawa kompleks antara kuersetin dengan AlCl3 2%.

Senyawa kompleks ini membutuhkan waktu reaksi yang terbentuk agar stabil.

Hal tersebut diperlukan penentuan operating time sehingga diperoleh rentang

waktu pada saat absorbansi kompleks kuersetin dengan AlCl3 2%, yang telah

stabil. Bila pengukuran dilakukan setelah operating time, terdapat

kemungkinan bahwa senyawa kompleks antara kuersetin dan AlCl3 2%

menjadi rusak (37).

Penentuan operating time kuersetin dengan menggunakan larutan kadar

4 ppm kemudian diukur pada spektrofotometer pada menit ke 0-30 dan

dihitung absorbansinya tiap menit. Hasil pengukuran operating time

didapatkan absorbansi stabil pada menit ke 20-32 dapat dilihat pada Tabel 14.

Hasil tersebut sama dengan penelitian Indrayani, 2008 yang menentukan

operating time stabil pada menit ke 25-60. Kestabilan absorbansi ini

menandakan bahwa reaksi pembentukan kompleks sudah optimum(37).

 67

16. Penentuan Kurva Baku Kuersetin

Kurva baku standar ialah standar sampel yang digunakan untuk acuan

sampel pada percobaan. Selain itu, kurva baku standar bertujuan untuk

mengetahui hubungan antara konsentrasi larutan dengan nilai absorbansinya

sehingga konsentrasi sampel dapat diketahui. Nilai r yang mendekati satu

menunjukkan bahwa terdapat korelasi yang baik antara kadar kuersetin dan

absorbansi (37).

Penentuan kurva baku pada penelitian ini menggunakan kuersetin

dengan konsentrasi 100 ppm, kemudian didiamkan selama operating time.

Hasil dari absorbansi kurva baku kuersetin dengan menggunakan

Spektrofotometri UV-Vis dengan panjang gelombang 433,8 nm adalah

sebagai berikut:

Nilai koefisien korelasi (r) menunjukkan hubungan linearitas antara dua

variabel. Nilai r 0,9969 menunjukkan bahwa terdapat hubungan linearitas

yang baik antar variabel tersebut. Linearitas, merupakan kemampuan metode

analisis untuk menghasilkan nilai yang proporsional terhadap kadar analite

dalam sampel pada rentang kadar tertentu(37).

Data dikumpulkan melalui pengukuran nilai absorbansi dari rangkaian

lautan standar. Menurut pratiwi ac, 2020(36) absorbansi dengan kadar

flavonoid memiliki hubungan yang linear yaitu semakin tinggi absorbansi

yang terukur maka kadar flavonoid yang terkandung di dalamnya juga

 68

semakin tinggi. Data absorbansi larutan standar tersebut selanjutnya akan

dihitung kadar flavonoid dengan cara kurva standar diperoleh dari hubungan

antara konsentrasi kuersetin (mg/L) dengan absorbansi sampel. Hasil dari

perhitungan kadar flavonoid total ialah penimbangan 1 dengan 3 kali replikasi

0,747%(b/b), 0,744%(b/b), 0,745%(b/b), dengan rata-rata 0,75%(b/b)

kemudian penimbangan 2 dengan 3 kali replikasi 0,605%(b/b), 0,606%(b/b),

0,608 %(b/b) dengan rata-rata 0,61%(b/b), sedangKan untuk penimbangan ke

3 dengan 3 kali replikasi ialah 0,736%(b/b), 0,739%(b/b), 0,740%(b/b)

dengan rata-rata 0,74%%(b/b). Selain itu, perhitungan kadar flavonoid pada

daun sirih merah menunjukkan rata-rata sebesar 0,70%(b/b) Umumnya hasil

dari nilai absorbansi yang terukur berbanding lurus dengan kadar flavonoid

tidak lebih dari 0,79% dari ketentuan FHI(6). Semakin tinggi nilai absorbansi

maka akan semakin tinggi pula kadar flavonoidnya.

17. Penetapan Kadar Flavonoid Total

Penetapan kadar flavonoid total ditentukan dengan metode

spektrofotometri oleh (Chang at all, 2002)(39). enetapan kadar flavonoid

total, ekstrak daun sirih merah direaksikan dengan AlCl3 2%. dan asam asetat

120Mm menghasilkan larutan berwarna kuning. Warna kuning larutan

disebabkan karena terbentuknya kompleks asam yang stabil dengan gugus

keton pada C-4 atau gugus hidroksil pada C-3 atau C-5 dari flavon dan
 69

flavonol dapat dilihat pada Gambar 3 (39). Hasil perhitungan flavonoid total

pada table 13 dari nilai serapan yang diperolehan, kadar flavonoid total dari

kedua sampel dapet dihitung dengan menggunakan regresi linier standar

kuersetin(41).

Berdasarkan hasil penelitian dan perhitungan yang dilakukan oleh

peneliti terkait larutan standar kuersetin dengan cara memberikan larutan

dengan konsentrasi 2,4,6,8,10 mendapat nilai absorbansi 2:0,168, 4:0,312, 6:

0,509, 8:0,626, 10:0,836, pemberian larutan yang berbeda menunjukkan hasil

nilai absorbansi yang tidak berbeda jauh satu sama lainnya. Selain itu,

perhitungan nilai kadar flavonoid pada daun sirih merah menunjukkan rata-

rata sebesar 0,70% menurut FHI nilai kada flavanoid ekstrak etanol daun sirih

merah 0,79%b/b, Jadi tidak memenuhi FHI, karena AlCl 3 yg digunakan 2%

jadi bisa mempengaruhi hasil dari nilai kadar flavanoid.

C. Keterbatasan Penelitian

Penelitan yang dilakukan memiliki keterbatasan yaitu tidak semua uji

digunakan untuk parameternya, seperti pengujian pada residu pestisidan dan

juga cemaran logam berat yang bisa digunakan untuk parameter non spesifik

belum digunakan pada penelitian ini.

 70

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
1. Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan, maka dapat ditarik

kesimpulan sebagai berikut:

1. Rendenmen ekstrak etanol daun sirih merah memenuhi ketentuan yang

ditetapkan oleh FHI (Farmakope Herbal Indonesia) ialah dengan hasil

tidak kurang dari 17,0 %. Hasil dari rendenmen ekstrak etanol daun sirrih

merah 33,968 %.

2. Parameter spesifik dan parameter non spesifik ekstrak etanol daun sirih

merah yang telah memenuhi persyaratan standar suatu obat, identitas,

organoleptik, kadar senyawa yang larut dalam air, kadar senyawa yang

larut dalam etanol, susut pengeringan,bobot jenis, sisa pelarut. kecuali

pada kadar air, kadar abu dan kadar abu tidak larut asam melebihi yang

telah ditetapkan oleh FHI yaitu tidak lebih dari batas yang ditentukan..

3. Kadar senyawa flavonoid total pada ekstrak etanol daun sirih merah

menunjukkan rata-rata sebesar 0,70% (b/b) yang kadar flavonoid kurang

0,79% dari ketentuan FHI.

2. Saran

1. Diharapkan penelitian selanjutnya bisa meneliti lebih lanjut terkait

ekstrak etanol daun sirih merah (Piper crocatum)

70
 71

2. Perlu dilakukan uji cemaran mikroba aspek , dan cemaran logam berat
 72

DAFTAR PUSTAKA

1. Ma’rifah A. ( Piper Crocatum ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus

Aureus. 2012;
2. Emelda E. Formulasi Dan Uji Sifat Fisik Sediaan Gel Tunggal Dan Kombinasi
Ekstrak Etanolik Daun Sirih Merah (Pipper Crocatum) Dan Minyak Kayu
Manis (Cinnamon Oil). Inpharnmed J (Indonesian Pharm Nat Med Journal).
2020;4(2):43.
3. Fitriyani A, Winarti L, Muslichah S, Nuri D. Uji Antiinflamasi Ekstrak Metanol
Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz & Pav) Pada Tikus Putih. Maj Obat
Tradis. 2011;16(1):2011.
4. Ulviani F, Yusriadi Y, Khaerati K. Pengaruh Gel Ekstrak Daun Sirih Merah
(Piper Crocatum Ruiz & Pav) Terhadap Penyembuhan Luka Bakar Pada
Kelinci (Oryctolagus Cuniculus). J Farm Galen (Galenika J Pharmacy).
2016;2(2):103–10.
5. Sismaini Nr. Standarisasi Ekstrak Metanol Kulit Kayu Kluwih (Artocarpus
Communis J.R. & G.). Skripsi. 2010;
6. Fhi Farmakope Herbal Indonesia Edisi I. Formularies. Pocket Handb Nonhum
Primate Clin Med. 2012;213–8.
7. Tanto A Hardiyani. Menurut Farmakope Herbal. 2016;
8. Manarisip Ge, Rotinsulu H, Fatimawali. Standardization Of Green Betel Leaf
Extracts ( Piper Betle L .) And Antibacterial Test Against Pseudomonas
Aeruginosa. Pharmacon-Progr Stud Farm. 2020;9(November):533–41.
9. Aminah A, Tomayahu N, Abidin Z. Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak
Etanol Kulit Buah Alpukat (Persea Americana Mill.) Dengan Metode
Spektrofotometri Uv-Vis. J Fitofarmaka Indones. 2017;4(2):226–30.
10. Beda To. Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sisik Naga
(Drymoglossum Piloselloides [L.] Presl) Karya Tulis Ilmiah. Karya Tulis Ilm
[Internet]. 2018; Available From: Http://Repository.Poltekeskupang.Ac.Id
 73

11. Ahmad Ar, Juwita J, Ratulangi Sad. Penetapan Kadar Fenolik Dan Flavonoid
Total Ekstrak Metanol Buah Dan Daun Patikala (Etlingera Elatior (Jack)
R.M.Sm). Pharm Sci Res. 2015;2(1):1–10.
12. Okta Ernawati. Pengaruh Air Rebusan Daun Sirih Merah (Piper Crocatum)
Terhadap Penurunan Gejala Fluor Albus Pada Wanita Usia Subur. 2018;121.
13. Utami Y., Taebe B, Fatmawati. Standardisasi Parameter Spesifik Dan Non
Spesifik Ekstrak Etanol Daun Murbei (Morus Alba L.) Asal Kabupaten
Soppeng Provinsi Sulawesi Selatan. J Pharm Med Sci. 2016;1(2):48–52.
14. Khorani N. Karakterisasi Simplisia Dan Standarisasi Ekstrak Etanol Herba
Kemangi (Ocimum Americanum L.). Fakultas Kedokteran Dan Ilmu Kesehatan
Program Studi Farmasi. 2013. 27 P.
15. Rahmadiah. Penetapan Beberapa Parameter Spesifik Dan Non Spesifik Ekstrak
Etanol Daun Asam Jawa (Tamarindus Indica L.). Univ Indones. 2009;
16. Rustam F. Penetapan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik Simplisia Inti Biji
Kemiri ( Aleurites Moluccana ( L .) Willd ) Asal Sulawesi Selatan
Determination Of Specific And Nonspecific Parameters Of Candelnut Kernel
Simplicia ( Aleurites Moluccana ( L .) Willd ) From. 2018;
17. Rizqa Od. Standardisasi Simplisia Daun Justicia Gendarusssa Burm F . Dari
Berbagai Tempat Tumbuh. Dep Farmakognosi Dan Fitokimia Univ Airlangga.
2012;14–8.
18. Kartika Sari A. Fakultas Farmasi Universitas Jember 2014. 2014;105.
19. Sumiwi Sa, Muhtadi A, Marline A, Zuhrotun A, Tjitraresmi A, Y F, Et Al.
Penetapan Parameter Standarisasi Ekstrak Herba Putrimalu (Mimosa Pudica
Linn.) Dan Uji Toksisitas Akut Nya Pada Mencit. Semin Work First Indones
Conf Clin Pharm. 2013;1(November):6–7.
20. Irsyad M. Standarisasi Ekstrak Etanol Tanaman Katumpangan Air (Peperomia
Pellucida L. Kunth). Skripsi. 2013. 1–1112 P.
21. Hilmatul Rosdiyah. Standardisasi Ekstrak Etil Asetat Anting-Anting (Acalypha
 74

Indica Linn.) Sebagai Herba Antimalaria. Sci Surverying Mapp. 2016;41.

22. Fatmawati A, Sucianingsih D, Kurniawati R, Abdurrahman M. Microscopic
Identification And Determination Of Total Flavonoid Content Of Moringa
Leaves Extract And Ethyl Acetate Fraction ( Moringa Oleifera L .) Identifikasi
Mikroskopis Dan Penentuan Kandungan Flavonoid Total Ekstrak Daun Kelor
Dan Fraksi Etil Asetat. 2021;1(1).
23. Estikawati I, Lindawati Ny. Penetapan Kadar Flavonoid Total Buah Oyong
(Luffa Acutangula (L .) Roxb.) Dengan Metode Spektrofotometri Uv-Vis. J
Farm Sains Dan Prakt. 2019;5(2):96–105.
24. Emelda. Potensi Tongkat Ali (Eurycoma Longifolia Jack.) Sebagai Anti
Inflamasi. Jcps (Journal Curr Pharm Sci [Internet]. 2017;1(Vol 1 No 1
(2017)):25–9. Available From:
Http://Journal.Umbjm.Ac.Id/Index.Php/Jcps/Article/View/78
25. Badaring Dr, Sari Spm, Nurhabiba S, Wulan W, Lembang Sar. Uji Ekstrak
Daun Maja (Aegle Marmelos L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia
Coli Dan Staphylococcus Aureus. Indones J Fundam Sci. 2020;6(1):16.
26. Riwanti P, Izazih F, Amaliyah A. Pengaruh Perbedaan Konsentrasi Etanol Pada
Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol 50,70 Dan 96% Sargassum Polycystum
Dari Madura. J Pharm Anwar Med. 2018;2(2):35–48.
27. Emelda, Kusumawardani N, Alfiana Rd, Saputri D, Moch.Saiful Bachri. Efek
Anti-Inflamasi Pemberian Oral Dan Topikal Daun Sirih Merah Dan Minyak
Kayu Manis. Med Sains J Ilm Kefarmasian. 2022;7(3):595–608.
28. Depkes Ri. Farmakope Indonesia Edisi Iv. Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. 1995.
29. Zamrodah Y. Standarisasi Ekstrak Daun Sisik Naga(Pyrrosia Piloselloides (L)
M.G Price) Poho Inang Kopi (Coffea Sp). 2016;15(2):1–23.
30. Anis Prasetiawan. Uji Kualitas Parameter Spesifik Dan Non Spesifik Ekstrak
Pegagan Wilayah Klaten Sebagai Bahan Baku Obat Herbal. 2021;(1996):6.
31. Rivai H, Heriadi A, Fadhilah H. Pembuatan Dan Karakterisasi Ekstrak Kering
 75

Daun Salam (Syzigium Polyanthum (Wight) Walp.). J Farm Higea.

2015;7(1):54–62.
32. Anisa Sf. Standardisasi Parameter Spesifik Dan Non Spesifik Ekstrak Etanol
Daun Melinjo (Gnetum Gnemon L.). 2020;17(2):35–43. Available From:
Http://Repository.Stikesmukla.Ac.Id/Id/Eprint/1482
33. Ri D. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. 2000;
34. Marpaung Mp, Anggun S. Penentuan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik
Ekstrak Kental Etanol Batang Akar Kuning (Fibraurea Chloroleuca Miers)
Mauritz). J Pharmacopolium. 2020;3(2):58–67.
35. Ode L, Rasydy A, Supriyanta J, Novita D. Tabur Anti Jerawat Dan Uji
Aktivitas Antiacne Terhadap Staphylococcus Aureus Formulation Of 96 %
Ethanol Ekstrak Of Green Betel Leaves ( Piper Betle L . ) In The Preparation
Of Antiacne Powder And Antiacne Activity Test Againts Staphylococcus
Aureus. J Farmagazine. 2019;Vi(2).
36. Pratiwi Ac. Perbandingan Kadar Flavonoid Total Dan Fenolik Total Pada
Ekstrak Etanol Bunga Rosella Merah (Hibiscuss Sabdariffa L.) Asal Kabupaten
Bengkulu Tengah Dan Kabupaten Semarang Dengan Metode Spektrofotometri
Uv-Vis. Skripsi Fak Ilmu Kesehatan, Univ Ngudi Waluyo Ung [Internet].
2020;9–17. Available From: Http://Repository2.Unw.Ac.Id/604/
37. Selvi Indrayani. Validasi Penetapan Kadar Kuersetin Dalam Sediaan Krim
Secara Klorometri Dengan Pereaksi Alcl3. 2015;(3):4–5.
38. Mangalu Ma, Herny Ei, Suoth Ej. Standarisasi Parameter Spesifik Ekstrak Buah
Pinang Yaki ( Areca Vestiaria ). 2022;5(1):20–6.
39. Chang Cc, Yang Mh, Wen Hm, Chern Jc. Estimation Of Total Flavonoid
Content In Propolis By Two Complementary Colometric Methods. J Food Drug
Anal. 2002;10(3):178–82.
40. Kumalasari E, Nazir Ma, Putra Amp. Determination Of Total Flavonoid
Content Of 70% Ethanol Extract Of Dayak Leeks (Eleutherine Palmifolia L.)
Using Uv-Vis Spectrophotometric Method. J Insa Farm Indones.
 76

2018;1(2):201–9.
41. Fatmawati A, Aji Np. Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun
Kelor (Moringa Oleifera Lam) Dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis
Densitometri. Proc Conf Matern Healthc Pharm [Internet]. 2019;1(1):1–7.
Available From:
Http://Fikes.Almaata.Ac.Id/Wp-Content/Uploads/2019/07/Annisa-
Fatmawatinurwani-Purnama-Aji.Pdf
77
 LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Dertiminasi

78
75
 80

Lampiran 2. Identitas
A. Identitas Diri

1. Nama Lengkap Nony widiastuty

2. Jenis Kelamin Perempuan
3. Jabatan Fungsional (jika ada) -
4. NIP/NIK/NIM/Identitas lainnya 170500081
5. NIDN (jika ada) -
6. Tempat dan Tanggal Lahir Pangkalan Bun 18 juli 1999
7. E-maiL nonywidiastuty@gmail.com
8. No. Telfon/Hp 082226052770
9. Alamat Jln. A Yani km.50
Rt19/Rw01 ds. Pangkalan
tiga kec. Pangkalan lada, kab.
Kotawaringin barat, prov.
Kalimantan
tengah.

a. Riwayat Pendidikan
No. Pendidikan Tahun Tahun
Masuk Keluar
1. SDN-01 PANGKALAN LADA 2005 2011
2. SMP N-04 PANGKALAN LADA 2011 2014
3. SMA N-01 PANGKALAN LADA 2014 2017
5. Universitas Alma Ata Yogyakarta 2017 2022
Yogyakarta,
Yang Memberikan Pernyataan

(……………………………..)
 81

Lampiran 3. Plagiarism

p
 82

Lampiran 4. Hadir seminar

 83

Lampiran 5. Lembar EC (etikel clirens)

 84

Lampiran 6. Presensi bimbingan skripsi

 85

Lampiran 7. Rendemen ekstrak

Bobot serbuk daun sirih merah : 500 g
Bobot ekstrak yang di dapat : 169,84 g

bobot ekstrak yang didapatkan

rendemen ekstrak= x 100 %
bobot serbuk simplisia yang di ekstraksi
169,84 g
¿ x 100 %=33,968 %
500 g
 86

Lampiran 8. Ekstrak maserasi daun sirih merah

 87

Lampiran 9. Kadar Senyawa Yang Larut Dalam Air

Replikasi Bobot sampel Cawan Cawan + residu Hasil % (b/b)

awal (B) kocong (Ao) setelah
pemanasan (A1 )
1 5,00 gram 53,160 g 54,78 g 32,4 % (b/b)
2 5,00 gram 53,160 g 54,80 g 32,8% (b/b)
3 5,00 gram 53,160 g 54,92 g 35,2 % (b/b)
Rata-rata 33,4 %(b/b)
Rumus :
Rumus yang digunakan untuk menghitung kadar senyawa larut dalam air :

AI− Ao
kadar senyawalarut dalam air= x 100 %
B
A1 = Cawan + residu setelah pemanasan
AO = Cawan kosong
B = Bobot sampel awal
a. Replikasi 1
54,78 g−53,160 g
Kadar senyawa larut dalam air % = x 100 %
5,00 g

1,62 g
%= 100 %
5g
% = 32,4 % (b/b)
b. Replikasi 2
54,80 g−53,160 g
Kadar senyawa larut air % = x 100 %
5,00 g
1,64
%= x 100 %
5g
% = 32,8 % (b/b)
c. Replikasi 3
54,92 g−53,160 g
Kadar senyawa larut lair % = x 100 %
5,00 g
1,76 g
% = x 100 %
5g
% = 35,2 % (b/b)
 88

Lampiran 10. Senyawa Yang Larut Dalam Etanol

Kadar senyawa larut dalam etanol
Replikasi Bobot sampel Cawan Cawan + residu Hasil (%)(b/b)
awal (B) kosong (Ao) setelah
pemanasan (A1
)
1 5g 49,910 51,892 39,64 %(b/b)
2 5g 50,160 51,899 34,78 %(b/b)
3 5g 50,173 51,893 34,4 %(b/b)
Rata-rata 36,27%(b/b)

Rumus :

Rumus yang digunakan untuk menghitung kadar senyawa larut dalam etanol :

AI −Ao
kadar senyawalarut dalam etanol %= x 100 %
B

ket
A1 = Cawan + residu setelah pemanasan
AO = Cawan kosong
B = Bobot sampel awal
Replikasi 1
51,892 g−49,910 g
%= x 100 %
5g
1,980 g
%= x 100 %
5g
%=39,64 %(b /b)
Replikasi 2
51,899 g−50,160 g
%= x 100 %
5g
1,739 g
% x 100 %
5g
%=34,78 % (b /b)
Replikasi 3
51,893 g−50,173 g
%= x 100 %
5g
1,720 g
%= x 100 %
5g
%=34,4 %(b /b)
 89

Lampiran 11. Susut Pengeringan

Replikas Berat awal (g) Berat akhir (b) Susut Pengeringan %

i (b/b)
1 1,99 g 1,59 20% (b/b)
2 1,99 g 1,60 19,5% (b/b)
3 1,99 g 1,57 21,1% (b/b)
Rata-rata 20,2% (b/b)

Rumus
a−b
susut pengeringan= x 100 %
a

A = berat awal
B = berat akhir
Replikasi 1
1,99−1,59
Susut pengeringan % = x 100 %
1,99
0,4
%= x 100 %
1,99
% = 20%(b/b)
Replikasi 2
1,99−1,60
Susut pengeringan % = x 100 %
1,99
0,39
%= x 100 %
1,99
% = 19,5 %(b/b)
Replikasi 3
1,99−1,57
Susut pengeringan % = x 100 %
1,99
0,42
%= x 100 %
1,99
% = 21,1 %(b/b)
 90

Lampiran 12. Penetapan Bobot Jenis

Replikasi Pikno kosong Pikno + air Pikno + ektrak Bobot jenis

(gr/mL)
1 17,202 g 42,396 g 43,217 g 1,032 gr/mL
2 17,202 g 42,399 g 43,219 g 1,032 gr/mL
3 17,202 g 42,398 g 43,217 g 1,032 gr/mL
Rata-rata 1,032 gr/mL

Rumus

( pikno+ ekstrak )− pikno kosong

bobot jenis=
( pikno+ air ) −pikno kosong
Replikasi 1
43,217 g – 17,202 g
Bobot jenis =
42,396 g−17,202 g
26,015 g
=
25,194 g
= 1,032 gr/mL
Replikasi 2
43,219 g – 17,202 g
Bobot jenis =
42,399 g−17,202 g
26,017 g
= 25 ,197 g

= 1,032 gr/mL
Replikasi 3
43,217 g – 17,202 g
Bobot jenis =
42,398 g−17,202 g
26,015 g
=
25 ,196 g
= 1,032 gr/mL
 91

Lampiran 13. Kadar Abu

Kadar abu
Replikasi Krus Kosong Sampel Krus + Kadar Hasil % (b/b)
(gram) (gram) Abu (gram)
1 23,61525 1,00028 23,70527 8,99948 %(b/b)
2 21,89318 1,00038 21,98751 9,42941 % (b/b)
3 23,87374 1,00032 23,97163 9,78586 % (b/b)
Rata-rata 9,40491 %(b/b)
Rumus
A 1− Ao
kadar abu %= X 100 %
B

keterangan :
A1 : Cawan + sampel sudah dipanaskan
Ao : Cawan kosong
B : Berat sampel
Replikasi 1
23,70527 g−23,61525 g
%= x 100 %
1,00028 g
0,09002 g
%= x 100 %
1,00028 g
%=8,99 % (b/b)

Replikasi 2
21.98751 g−21,89318 g
%= x 100 %
1,00038 g
0,09433 g
%= x 100 %
1,00038 g
%=9,42 % (b/b)

Replikasi 3
23,97163 g−23,87374 g
%= x 100 %
1,00032 g
0,09789 g
%= x 100 %
1,00032 g
% = 9,39%(b/b)
 92

Lampiran 14. Kadar air

Sampe Jarak Krus Krus + Krus + Berat Hasil%(b/b)

l penimbangan kosong sampe sampel sampel
A (g) l awal sudah sudah
(g) dipanaskan dipanaskan
(g) (g) B
10 grm 1 jam 39,518 49,518 48,95 9,44 5,6 %(b/b)
10 grm 2 jam 39,518 49,518 48,77 9,26 7,4%(b/b)
10 grm 3 jam 39,518 49,518 48,33 8,82 11,8%(b/b)
10 grm 4 jam 39,518 49,518 48,08 8,57 14,3%(b/b)
10 grm 5 jam 39,518 49,518 47,93 8,42 15,8%(b/b)
Rata-rata 128,5 % (b/b)

Rumus :
a−b
kadar air= x 100 %
a
Ket : a = sampel
b = Berat sampel sudah dipanaskan

1 jam pertama
Kadar air % = 3 jam kemudian
10 g−9,44 g 10 g−8,22 g
x 100 % Kadar air % = x 100
10 g 10 g
0,54 g 1,18 g
= x 100 % = x 100 %
10 g 10 g
= 5,6 % (b/b) = 18,8 % (b/b)
2 jam kemudian
Kadar air % = 4 jam kemudian
10 g−9,26 g 10 g−8,57 g
x 100 % Kadar air % = x 100 %
10 g 10 g
0,74 g 1,43 g
= x 100 % = x 100 %
10 g 10 g
= 7,4 % (b/b) = 14,3 % (b/b)

5 jam kemudian
10 g−8,57 g
Kadar air % = x 100 %
10 g
 93

1,58 g = 15,8 % (b/b)

= x 100 %
10 g

Lampiran 15.Kadar abu yang tidak larut asam

Replikasi Krus Sampel (gram) Krus + Kadar Abu Hasil % (b/b)

Kosong Tidak Larut Asam
(gram) (gram)
1 23,61525 1,00028 23,63470 1,94445 %(b/b)
2 21,89318 1,00038 21,91511 2,19216%(b/b)
3 23,87374 1,00032 23,89913 2,53818%(b/b)
Rata-rata 4,98267 %(b/b)

Rumus
A 1− Ao
kadar abu tidak larut asam %= X 100 %
B

A1 = bobot cawan + abu

Ao = bobot cawan kosong
W = bobot sampel
Replikasi 1
23 , 63470 g−23,61525 g
%= x 100 %
1,00028 g
0,01945 g
%= x 100 %
1,00028 g
%=1,94445 % (b/b)
Replikasi 2
21,91511 g−21,89318 g
%= x 100 %
1,00038 g
0,02193 g
%= x 100 %
1,00038 g
%=2,19216 % (b/b)

Replikasi 2
 94

23,89913 g−23,87374 g
%= x 100 %
1,00032 g
0,02539 g
%= x 100 %
1,00032 g
%=2,53818 % (b/b)
Lampiran 16. Pembuatan larutan standar

Perhitungan larutan quersetin menggunakan etanol 70%.

a. 1ppm 10 ml .5 ppm
V1 =
V1.M1 = V2.M2 100 ppm
V1.100ppm = 10ml.1ppm V1 = 0,5 ml
10ml .1 ppm a. 6ppm
V1 ¿
100 ppm V1.M1 = V2.M2
V1 = 0,1 ml V1.100ppm = 10ml.6ppm
10ml .6 ppm
V1 ¿
b. 2ppm 100 ppm
V1.M1 = V2.M2 V1 = 0,6 ml
V1.100ppm = 10ml.2ppm
10 ml .2 ppm b. 7ppm
V1 =
100 ppm V1.M1 = V2.M2
V1 = 0, 2 ml V1.100ppm = 10ml.7ppm
10 ml .7 ppm
V1 =
c. 3ppm 100 ppm
V1.M1 = V2.M2 V1 = 0, 7 ml
V1.100ppm = 10ml.3ppm
10 ml .3 ppm c. 8ppm
V1 =
100 ppm V1.M1 = V2.M2
V1 = 0,3ml V1.100ppm = 10ml.8ppm
10 ml . 8 ppm
V1 =
d. 4ppm 100 ppm
V1.M1 = V2.M2 V1 = 0,8ml
V1.100ppm = 10ml.4ppm
10 ml .4 ppm d. 9ppm
V1 =
100 ppm V1.M1 = V2.M2
V1 =0,4ml V1.100ppm = 10ml.9ppm
10 ml .9 ppm
V1 =
e. 5ppm 100 ppm
V1.M1 = V2.M2 V1 =0,9ml
V1.100ppm = 10ml.5ppm
e. 10ppm
 95

V1.M1 = V2.M2 10 ml .10 ppm

V1 =
V1.100ppm = 10ml.10ppm 100 ppm
V1 = 1 ml
 96

Lampiran 17. Perhitungan Konsentrasi Dari Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Konsentrasi Absorbansi Persamaan Regresi Linier

2 ppm 0,168 y = 0,0825x - 0,0048
4 ppm 0,312 R² = 0,9938
6 ppm 0,509 R=0,9969
8 ppm 0,626
10 ppm 0,836

Perhitungan regresi linier

Y = bx + a

A = -0,0048
B = 0,0825
R2 = 0,9938
R = 0,9969
p1. rep 1 p.2 rep 1
0.710=0,0825 x−0,0048 0.534=0,0825 x−0,0048
0,0048+0,710 0,0048+0,534
x= x=
0,0825 0,0825
0,7148 0,5388
x= x=
0,0825 0,0825
x=8,664 x=6,531

p1. rep 2 p2 rep 2

0.707=0,0825 x−0,0048 0.535=0,0825 x −0,0048
0,0048+0,707 0,0048+0,535
x= x=
0,0825 0,0825
0,7118 0,5398
x= x=
0,0825 0,0825
x=8,628 x=6,543

p1 rep 3 p.2 rep 3

0.708=0,0825 x−0,0048 0.537=0,0825 x−0,0048
0,0048+0,708 0,0048+0,537
x= x=
0,0825 0,0825
0,7128 0,5418
x= x=
0,0825 0,0825
x=8,640 x=6,567
 97

p3. rep 2
p.3 rep 1 0.660=0,0825 x−0,0048
0.657=0,0825 x−0,0048 0,0048+0,660
x=
0,0048+0,657 0,0825
x=
0,0825 0,6648
x=
0,6618 0,0825
x=
0,0825 x=8,058
x=8,022
p3. rep 3
0.661=0,0825 x−0,0048
0,0048+0,661
x=
0,0825
0,6658
x=
0,0825
x=8,070
 98

Lampiran 18. kurva Baku kuersetin

 99

Lampiran 19. Perhitungan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

No Penimbangan Absorbansi Intercept Slope X Flavonoid Rata Standar

(mg) (a) (b) (ppm) Total –Rata Deviasi
(%) (%) (%)
1 116 0,710 -0,0048 0,0825 8,664 0,747 b/b 0,75 0,02
2 0,707 -0,0048 0,0825 8,628 0,744 b/b b/b
3 0,708 -0,0048 0,0825 8,640 0,745 b/b
4 108 0,534 -0,0048 0,0825 6,531 0,605 b/b 0,61 0,02
5 0,535 -0,0048 0,0825 6,543 0,606 b/b b/b
6 0,537 -0,0048 0,0825 6,567 0,608 b/b
7 109 0,657 -0,0048 0,0825 8,022 0,736 b/b 0,74 0,03
8 0,660 -0,0048 0,0825 8,058 0,739 b/b b/b
9 0,661 -0,0048 0,0825 8,070 0,740 b/b

C x vol ekstrak x 10
kadar flavonoid total =
w (g)

volum ekstrak : 1 mL
berat ekstrak : 100 mg = 0,1 gram
b c (μg /ml). v (ml) . fp
kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,664 .1 ml . 10
ml
¿
116 mg
86,64
¿
116
¿ 0,746 % b/b
b c (μg /ml). v (ml) . fp
kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,628 . 1 ml . 10
ml
¿
116 mg
86,28
¿
116
¿ 0,743 % b/b
 100

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,640 . 1 ml . 10
ml
¿
116 mg
86.40
¿
116 mg
¿ 0,744 % b/b

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
6,531 . 1 ml .10
ml
¿
108 mg
65.31
¿
108mg
¿ 0,604 % b/b

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
6,543 . 1 ml . 10
ml
¿
108 mg
65.43
¿
108mg
¿ 0,605 % b/b

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
6,567 .1 ml . 10
ml
¿
108 mg
65.67
¿
108mg
¿ 0,608% b/b
 101

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,022 . 1 ml .10
ml
¿
109 mg
80.22
¿
109mg
¿ 0,735 % b/b

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,058 . 1 ml . 10
ml
¿
109 mg
80.58
¿
109mg
¿ 0,739 % b/b

b c (μg /ml). v (ml) . fp

kadar flavonoid (% )=
b w( g)
μg
8,070 . 1 ml . 10
ml
¿
109 mg
80.70
¿
109mg
¿ 0,740% b/b
 102

Lampiran 20. Dokumentasi Penelitian Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Gambar 21. Proses Pembuatan Ekstrak Daun Sirih Merah

Gambar 22.Pengamatan Uji Organoleptik Ekstrak Daun Sirih Merah

 103

Gambar 23.Uji Senyawa Larut Dalam Air Dan Larut Dalam Etanol Ekstrak Etanol
Daun Sirih Merah

Gambar 24.Uji Susut Pengeringan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

 104

Gambar 25.Uji Bobot Jenis Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Gambar 26.Uji Kadar Abu Dan Uji Kadar Abu Tidak Larut Asam
 105

Gambar 27.Uji Kadar Air Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah

Gambar 28. Penimbangan uji Sisa pelarut ekstrak etanol daun sirih merah
 106

Gambar 29.Oven Untuk Uji Kadar Senyawa Yang Larut Air, Uji Kadar Senyawa
Yang Larut Etanol, Susut Pengeringan, Penetapan Kadar Air.

Gambar 30. Penimbangan AℓCL3 dan Kalium Asetat (CH3COOK)

 107

Gambar 31. Sampel Larutan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah Uji Kadar Flavonoid
Total Dan Larutan Standar Kuersetin

Gambar 32. Penimbangan Ekstrak Daun Sirih Merah Untuk Pembuatan Larutan Uji
Kadar Flavonoid Total
 108

Gambar 33. Alat spektrofotometri UV-Vis (Thermo scientific)

Gambar 34. Penentuan Panjang Gelombong Maksimum Senyawa Kompleks

Kuersetin Dalam Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah Spektrofotometri UV-Vis
 109

Gambar 35.Operating time Senyawa Kompleks Kuersetin Pada Spektrofotometri

UV-Vis(thermos scientific)