FORMULASI SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL TANAMAN SEREH

(Cymbopongon citratus (DC) Stapf) DAN UJI AKTIVITASNYA

TERHADAP Staphylocococus aureus

PROPOSAL

OLEH:

TRISANTI PUTRI GULO

NIM: 16.51.132

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI
INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA
LUBUK PAKAM
2020
 HALAMAN PERSETUJUAN

Proposal Dengan Judul

FORMULASI SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL TANAMAN SEREH
(Cymbopongon citratus (DC) Stapf) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP Staphylocococus aureus

Yang Dipersiapkan dan Diseminarkan Oleh :

Trisanti Putri Gulo

16.51.132

Telah disetujui untuk diujikan dan dipertahankan dihadapan Komisi Penguji

Skripsi pada ujian sidang skripsi Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut

Kesehatan MEDISTRA Lubuk Pakam.

Lubuk Pakam, Maret 2020

Pembimbing

Ahmad Syukur Hasibuan. S.Farm., M.Farm., Apt

NIK. 06.19.18.07.1995
 HALAMAN PENGESAHAN

Proposal penelitian ini dengan judul :

FORMULASI SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL TANAMAN SEREH

(Cymbopongon citratus (DC) Stapf) DAN UJI AKTIVITASNYA
TERHADAP Staphylocococus aureus

Oleh:

Trisanti Putri Gulo

16.51.132

Proposal penelitian ini telah diseminarkan dan disetujui Komisi penguji proposal,

pada Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut Kesehatan MEDISTRA

Lubuk pakam, untuk dilanjutkan ketahap penelitian.

Lubuk pakam, 8 Juni 2020

Komisi Penguji :

1. Tati Murni Karokaro, S.Kep.,NS.,M.Kep

NIK. 01.02.28.02.1980
2. Reni Aprinawaty Sirait.SKM.,M.Kes
NIK.03.15.17.01.1982
3. Ahmad Syukur Hasibuan, S.Farm.,M.Farm.,Apt
NIK.06.19.18.07.1995

Disahkan oleh :

Dekan Fakultas Farmasi Institut Ketua Program Studi Farmasi

Kesehatan MEDISTRA Fakultas Farmasi Institut Kesehatan
Lubuk Pakam MEDISTRA Lubuk Pakam

(Romauli Anna Teresia Marbun, S.Farm., M.Si., Apt) (Ahmad Syukur Hasibuan, S.Farm., M.Farm., Apt)
NIK. 06.15.12.08.1991 NIK. 06.19.18.07.1995
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan yang Maha Esa atas

segala nikmat keberkahan, kekuatan, keimanan dan hidayah-Nya, sehingga

proposal penelitian ini dapat diselesaikan dengan sebagaimana mestinya walaupun

di dalam proposal ini masih banyak kekurangan. Proposal penelitian ini berjudul

“ FORMULASI SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL TANAMAN

SEREH (Cymbopongon citratus (DC) Stapf) DAN UJI AKTIVITASNYA

TERHADAP Staphylococcus aureus ”

Proposal penelitian ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat sebelum

memperoleh gelar Sarjana Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut

Kesehatan Medistra Lubuk Pakam.

Dalam penyusunan dan penyelesaian proposal penelitian ini, penulis

mendapat bantuan dari berbagai pihak yang terkait, sehingga proposal penelitian

ini dapat diselesaikan. Penulis menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar –

besarnya kepada :

1. Drs. Johannes Sembiring, M.Pd, M.Kes selaku Ketua Yayasan Institut

Kesehatan MEDISTRA Lubuk Pakam.

2. Drs. David Ginting, M.Pd, M.Kes selaku Rektor Institut Kesehatan

MEDISTRA Lubuk Pakam.

3. Romauli Anna Teresia Marbun S.Farm, M.Si selaku Dekan Fakultas

Farmasi Institut Kesehatan MEDISTRA Lubuk Pakam.

4. Ahmad Syukur Hasibuan S.Farm, M.Farm., Apt selaku Dosen Pembimbing

dan Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Institut Kesehatan

i
 MEDISTRA Lubuk Pakam yang telah banyak meluangkan waktu untuk

membimbing dan memberi arahan kepada penulis.

5. Seluruh staf Dosen serta staf pegawai di lingkungan Institut Kesehatan

MEDISTRA Lubuk Pakam yang telah memberikan bimbingan selama

penulis mengikuti pendidikan.

6. Kepada kedua orang tua yang telah memberikan semangat dan motivasi baik

secara pengetahuan maupun moral kepada penulis.

7. Kepada teman-teman perkuliahan Farmasi yang telah banyak mebantu

penulis selama perkuliahan berjalan sampai kepada penyusunan proposal

ini.

Demikianlah yang dapat penulis sampaikan, saran dan kritik yang

membangun sangat diharapkan demi perbaikan proposal ini. Penulis berharap

semoga proposal ini bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan serta bagi

siapapun yang membacanya.

Lubuk Pakam, 12 Februari 2020

Penulis,

TRISANTI PUTRI GULO

NPM : 16.51.132

ii
 DAFTAR ISI

JUDUL............................................................................................................. i
KATA PENGANTAR..................................................................................... ii

BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1

1.1 Latar Belakang........................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah................................................................... 4
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................... 4
1.3.1 Tujuan Umum.............................................................. 4
1.3.2 Tujuan Khusus............................................................. 4
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................... 4
1.4.1 Bagi Institusi Pendidikan............................................. 4
1.4.2 Bagi Peneliti................................................................. 5
1.4.3 Bagi Masyarakat.......................................................... 5
1.4.4 Manfaat Untuk penulis ................................................ 5
1.5 Hipotesis Penelitian ................................................................... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.................................................................... 6

2.1 Tanaman Sereh Dapur (Cymbopongon citratus) ......................... 6

2.1.1 Taksonomi Tanaman Sereh................................................ 6

2.2.2 Morfologi Tanaman Sereh.................................................. 7

2.2.3 Nama Daerah ...................................................................... 8

2.2 Khasiat Tanaman.......................................................................... 8

2.3 Kandungan kimia ......................................................................... 9

2.2.1 Minyak Atsiri ...................................................................... 9

2.2.2 Flavonoid............................................................................ 9

2.2.3 Saponin .............................................................................. 10

2.2.4 Tanin .................................................................................. 10

2.2.5 Alkaloid .............................................................................. 11

2.4 Simplisia dan Ekstrak .................................................................. 11

2.4.1 Simplisia.............................................................................. 11

2.4.2 Ekstrak ................................................................................ 12

2.5 Ekstraksi....................................................................................... 12

2.6 Krim............................................................................................. 14

2.6.1 Tipe Krim........................................................................... 15

iii
 2.6.2 Krim Tipe Minyak Dalam Air ........................................... 15

2.6.3 Krim Tipe Air Dalam Minyak ........................................... 15

2.6.4 Basis Krim ......................................................................... 16

2.7 Keuntungan Sediaan Krim........................................................... 16

2.8 Bakteri.......................................................................................... 17

2.8.1 Bentuk Sel Bakteri............................................................ 17

2.8.2 Faktor-faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan dan

Perkembangan Bakteri ................................................... 18

2.8.3 Fase Pertumbuhan Mikroorganisme.................................. 21

2.9 Bakteri Staphylococcus aureus ................................................... 21

2.9.1 Klasifikasi Staphylococcus aureus.................................. 23

2.9.2 Morfologi Bakteri Staphylococcus aureus......................... 23

2.9.3 Metode Kultur Bakteri....................................................... 24

2.10 Uji Aktivitas Bakteri.................................................................. 25

2.11 Mekanisme Kerja Antibakteri .................................................... 26

2.12 Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri .......................................... 27

2.13 Kerangka Pikir Penelitian........................................................... 29

BAB III METODOLIGI PENELITIAN ....................................................... 30

3.1 Metode Penelitian......................................................................... 30

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ...................................................... 30

3.3 Alat dan Bahan ........................................................................... 31

3.3.1 Alat-alat yang Digunakan.................................................... 31

3.3.2 Bahan-bahan yang Digunakan ........................................... 31

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ....................................................... 32

3.4.1 Pereaksi Mayer .................................................................. 32

3.4.2 Peraksi natrium hidroksida 2 N ....................................... 32

iv
 3.4.3 Pereaksi Bouchardat........................................................... 32

3.4.4 Peraksi Drangedroff ........................................................... 32

3.4.5 Pereaksi besi (III) klorida .................................................. 33

3.4.6 Pereaksi asam klorida 2 N................................................. 33

3.4.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ....................................... 33

3.4.8 Pereaksi Liebermann-Burchard .......................................... 33

3.4.9 Pereaksi Molisch ................................................................ 33

3.4.10 Pereaksi Kloralhidrat ......................................................... 33

3.5 Pengambilan dan Pengolahan Sampel ......................................... 34

3.5.1 Pengambilan Sampel ......................................................... 34

3.5.2 Pengolahan Sampel............................................................ 34

3.6 Karakteristik Simplisia ................................................................. 34

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopis ................................................. 34

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopis .................................................. 35

3.7 Skrining Fitokimia........................................................................ 35

3.7.1 Pemeriksaan Flavonoid ...................................................... 35

3.7.2 Pemeriksaan Saponin......................................................... 35

3.7.3 Pemeriksaan Tanin............................................................. 36

3.7.4 Pemeriksaan Alkaloid ........................................................ 36

3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Tanaman Sereh................................. 37

3.9 Pembuatan Formulasi Sediaan Krim ........................................... 38

3.9.1 Formula dasar krim............................................................. 38

3.9.2 Formulasi sediaan krim....................................................... 38

3.9.3 Cara pembuatan sediaan krim..................................... 39

3.10 Evaluasi Sediaan......................................................................... 40

3.10.1 Pemeriksaan Stabilitas Sediaan...................................... 40

v
 3.10.2 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan ............................... 40

3.11 Sterilisasi Alat............................................................................. 40

3.12 Pembuatan Media Nutrient Agar (NA) ...................................... 41

3.12.1 Pembuatan Media Nutrient Agar................................... 41

3.12.2 Pembuatan Nutrient Broth (NB) .................................... 41

3.13 Pembuatan Agar Miring.............................................................. 42

3.14 Pembuatan Stok Kultur Bakteri Staphylococcus aureus............ 42

3.15 Pembuatan Larutan Uji ekstrak Etanol Tanaman Sereh dengan

berbagai konsentrasi .................................................................. 43

3.16 Uji Aktivitas Anntibakteri Ekstrak Etanol Tanaman Sereh Terhadap

Staphylococcus aureus ............................................................. 43

3.17 Pembuatan Larutan Uji Sediaan Krim........................................ 43

3.18 Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim Ekstrak Etanol Tanaman

Sereh Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ....................... 44

DAFTAR PUSTAKA........................................................................ 45

vi
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Menurut data World Health Organization (WHO) 65% dari penduduk

negara maju dan 80% penduduk negara berkembang telah menggunakan obat

herbal (Jumiarni dan Komalasari, 2017). Obat tradisional, termaksud obat herbal

telah dan terus menjadi dan menggunakan di setiap negara, obat herbal atau obat

tradisional mengandung bahan aktif tanaman, hewan, dan atau mineral (Robinson,

M. M dan Zhang, X. 2011).

Indonesia Merupakan negara tropis yang memiliki keanekaragaman hayati

yang sangat melimpah. banyak peneliti yang tertarik untuk meneliti

keanekaragaman hayati yang ada diindonesia. Salah satu penyakit yang sering

terjadi didaerah tropis adalah penyakit kulit yang disebabkan oleh bakteri. Karena

di negara tropis, intensitas sinar matahari lebih tinggi dan panasnya terus-terusan.

Jadi lebih mudah berkeringat, sementara kulit yang berkeringat cenderung lebih

sensitive. Penyakit infeksi ialah penyakit yang disebabkan oleh bakteri patogen

yang masuk ke dalam tubuh, berkembang biak dan menyebabkan penyakit. Salah

satu bakteri yang sering menyebabkan infeksi adalah bakteri Staphylococcus

aureus. Pengobatan penyakit infeksi biasanya dilakukan dengan pemberian

antibiotik namun beberapa jenis bakeri menjadi resistensi (Fatimah, S., dkk,

2016).

Staphylococcus aureus penyebab terjadinya infeksi yang bersifat

piogenik, infeksi yang disebabkan bakteri ini timbul dengan tanda-tanda khas

ialah peradangan, nekrosis, dan pembentukan abses, serta dapat menyebabkan

1
 2

berbagai macam infeksi seperti pada jerawat, bisul, atau nanah. Bakteri ini

berkembang biak dan menyebar luas dalam jaringan tubuh serta adanaya beberapa

zat ekstraseluler yang dapat diproduksi yang menimbulkan berbagai penyakit

(Tuntun, M. 2016).

Oleh karena itu salah satu cara untuk mencegah permasalahan tersebut

dengan menggunakan antibakteri. Menurut penelitian Sikawin, B. M, dkk, (2018)

Antibakteri adalah senyawa yang digunakan untuk mengendalikan pertumbuhan

bakteri yang bersifat merugikan, pengendalian pertumbuhan mikroorganisme

bertujuan untuk mencegah penyebaran penyakit dan infeksi.

Salah satu pilihan alternatif pengganti antibiotika dengan menggunakan

obat tradisional yang berasal dari tanaman sebagai obat alternatif terhadap infeksi

bakteri. Penggunaan tanaman dalam terapi berbagai penyakit memiliki berbagai

keuntungan diantaranya mengenai keamanan dan keefektifannya (Falugah , F.,

dkk, 2019).

Saat ini minat masyarakat untuk memanfaatkan kembali bahan alam bagi

kesehatan, terutama obat-obatan dari tumbuhan cenderung meningkat. Tanaman

sereh ialah salah satu tanaman yang mudah tumbuh di daerah katulistiwa yang

diketahui mempunyai efek sebagai antibakteri,memperbaiki kulit (Sarlina, Razak,

dkk, 2017). Tanaman sereh dapat dijadikan bahan alternatif alam sebagai

pengendalian vektor, tanaman ini hidup di daerah tropis terutama diindonesia,

sering dimanfaatkan sebagai bumbu dapur dan rempah-rempah. Adapun kegunaan

Tanaman sereh secara farmakologi seperti anti moeba , anti bakteri, anti diare,
 3

anti filarial, anti inflamasi, anti malaria, serta sebagai larvasida (Agustia, N.

2019).

Satu contoh antibakteri yang dapat diperoleh dari alam adalah tanaman

sereh Cyombopongon citratus. Menurut Sikawin, B. M, dkk, (2018) dalam

penelitiannya, maka diperoleh penyelidikan fitokimia mengungkapkan bahwa

ekstrak sereh berisi beberapa nabati konstituen, ialah: minyak atsiri, saponin,

alkaloid, flavonoid, dan tanin. Dalam jurnal Adiguna , P dan Santoso, O ( 2017)

Daun sereh banyak mengandung miyak atsiri yang tersusun dari senyawa-

senyawa monoterpene seperti sitral dan geraniol. Minyak ini mengandung

antibakteri dan antijamur, sehingga sangat bagus digunakan pada pengobatan

bakeri Staphylococcus aureus.

Penggunaan ekstrak tanaman sereh secara langsung pada kulit tidak

praktis, oleh karena itu perlu dibuat sediaan yang cocok agar mudah digunakan.

Salah satu alternatif sediaan yang dapat digunakan ialah sediaan krim, bentuk

sediaan krim lebih disukai masyarakat karena mudah dibersihkan dan mudah

menyebar, penggunaan sediaan krim juga dapat memberikan efek dingin,

mengkilap dan melembabkan kulit (Clements, G, dkk, 2020).

Berdasarkan uraian diatas maka peneliti tertarik untuk melakukan suatu

penelitian yang saya beri judul formulasi sediaan krim ekstrak etanol tanaman

sereh (Cyombopogon citratus (DC) Stapf) dan uji aktivitasnya terhadap

Staphylococcus aureus.
 4

1.2 Perumusan Masalah

1. Apakah ekstrak etanol tanaman sereh bersifat antibakteri terhadap bakteri

Staphylococcus aureus

2. Apakah sediaan krim ekstrak etanol tanaman sereh memiliki aktivitas

antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

1. Untuk mengetahui sediaan krim ekstrak etanol tanaman sereh

memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus

aureus

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Untuk mengetahui ekstrak etanol tanaman sereh dapat

diformulasikan sebagai sediaan krim

2. Untuk mengetahui ekstrak etanol tanaman sereh bersifat antibakteri

terhadap bakteri Staphylococcus aureus

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Bagi Institut Kesehatan Medistra

Penelitian ini diharapkan sebagai bahan acuan

pembelajaran dan bahan tambahan referensi bacaan untuk menambah

ilmu pengetahuan dalam bidang pengembangan tanaman obat

tradisional.
 5

1.4.2 Bagi Peneliti

Untuk dapat mengaplikasikan langsung yang telah dipelajari, dan untuk

menambah informasi, pengetahuan, wawasan dan pengalaman peneliti selama

melakukan penelitian.

1.4.3 Bagi Masyarakat

Dengan penelitian ini, masyarakat diharapkan dapat mengetahui

kegunaan lebih ekstrak tanaman sereh yang dapat dikembangkan menjadi obat

tradisional yang penggunaanya untuk mencegah infeksi yang disebabkan oleh

bakteri Staphylococcus aureus.

1.4.4 Manfaat Untuk Penulis

Penelitian ini berguna untuk menambah pengalaman dan menambah

ilmu pengetahuan dibidang Fitokimia dan Mikrobiologi

1.5 Hipotesis penelitian

1. Sediaan krim ekstrak etanol tanaman sereh memiliki aktivitas antibakteri

terhadap Staphylococcus aureus

2. Ekstrak etanol tanaman sereh mempunyai aktivitas antibakteri terhadap

Staphylococcus aureus
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tanaman Sereh (Cymbopongon citratus ( DC) Stapf)

2.1.1 Taksonomi Tanaman Sereh

Menurut Muhlisah (1999) klasifikasi dari serai Cymbopogon

citratus adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Liliopsida

Ordo : Poales

Famili : Poaceae

Genus : Cymbopogon

Spesies : Cymbopogon citratus

Gambar 2.1 Tanaman Sereh (Cymbopongon citratus (DC) Stapf)

6
 7

2.1.2 Morfologi Tanaman Sereh

Cymbopogon citratus atau lebih dikenal dimasyarakat sebagai tanaman

sereh dapur. Sereh dapur umumnya dapat tumbuh ideal didaerah dengan

ketinggian 100 – 400m. Sereh dapur memiliki jenis akar serabut yang berimpang

pendek serta batang yang bergerombol. Kulit luar berwarna putih atau keunguan

dan lapisan dalam batang berisi umbi untuk pucuk berwarna putih kekuningan.

Sereh dapur memiliki daun yang kesat, panjang dan kasar hampir menyerupai

daun lalang. Memiliki panjang sekitar 50-100 cm dengan lebar kurang lebih 2 cm

dengan daging daun tipis serta permukaan dan bagian bawah bertekstur halus

(Sastrapradja, 1978). Tanaman ini dikenal dengan istilah Lemongrass karena

memiliki bau yang kuat seperti lemon, sering ditemukan tumbah alami di negara-

negara tropis (Oyen dan Dung 1999).

Tanaman serai dengan genus Cymbopongon meliputi hampir 80 spesies,

tetapi hanya beberapa jenis yang menghasilkan minyak atsiri yang mempunyai

arti ekonomi dalam perdagangan.Tanaman serai mampu menghasilkan minyak

dengan kadar sitronellal 7-15% dan geraniol 5-55% (Wijoyo, 2009 ) . Tanaman

serai memiliki habitat berupa tanaman tahunan yang hidup secara liar dan

berbatang semu yang membentuk rumpun tebal serta mempunyai aroma yang kuat

dan wangi. Morfologi akarnya berimpang pendek dan berwarna coklat muda

(Sastrapradja,1978).
 8

2.1.3 Nama Daerah

Di Indonesia ada beberapa sebutan untuk tanaman ini antara lain: Sere

mangat bi, thereu (Aceh), Sereh, sere, sangge-sangge, (Batak), sarai, sarai arun,

sarai batawi, (Minangkabau), sorai (Lampung), sere (Jawa), sereh (Sunda), sere,

seri (Madura), See (Bali), Pataha mpori (Nusa Tenggara), kendoung witu (sumba),

serai, belangkak, salai, segumu (Kalimantan), Timbuale (Gorontalo), tonti,

sarimbata, salimbata, salimata (Minahasa), sare (Makassar), sere (Bugis); Maluku:

Serai, sere, serai gula (Ambon), nausina (Roti), gara ma kusu (Ternate), bara ma

kuso (tidore) (Sianipar. A, dkk, 2012).

2.2 Khasiat Tumbuhan

Sereh digunakan untuk menghambat atau membunuh bakteri patogen

karena mengandung minyak atsiri yang berfungsi sebagai antijamur dan

antibakteri terhadap beberapa bakteri patogen yaitu Stapylococcus aureus

(Falugah F, dkk, 2019). Daun sereh berfungsi sebagai peluruh kentut, penambah

nafsu makan, obat pasca bersalin, penurun panas, dan pereda kejang. selain itu

juga akar sereh bermanfaat sebagai pengencer dahak, obat kumur, peluruh

keringat dan penghangat badan (Ningrum, D. W. 2019). Dalam buku Sianipar. A,

dkk, (2012) tanaman sereh memiliki kegunaan secara empiris diantaranya adalah

nyeri rematik, analgesik, antispasmodik, ganguan pencernaan, demam, mual,

antitusif, antiseptik, sakit kepala, sakit perut, nyeri abdominal.

 9

2.3 Kandungan Kimia

Tanaman sereh mengandung saponin, tanin, alkaloid, flavonoid, dan

minyak atsiri. Berbagai kandungan senyawa aktif tersebut mengindikasikan

bahwa sereh memiliki aktivitas anti bakteri yang cukup besar (Rita, W. S, dkk,

2018). Menurut (Adiguna , dkk, 2017) tanaman sereh mengandung Alkaloid,

Flavoniod, dan beberapa monterpene yang berfungsi sebagai antimikrobial,

antibakteri, moluscidal, antifungal dan lain-lain. Senyawa utama penyusun

Tanaman sereh (Cymbopongon citratus) mengandung senyawa sitronellal dan

geraniol yang diketahui dapat bersifat antibakteri (Sikawin, B. M., dkk, 2018).

2.3.1.Minyak atsiri

Minyak atsiri adalah ekstrak dari berbagi bahan tanaman dan tidak berasal

dari bunga, tetapi dari tumbuh-tumbuhan, pohon dan berbagai bahan tanaman

lainnya (Suryawanshi, M., dkk, 2016). Minyak atsiri memiliki berbagai manfaat

misalnya sebagai obat misalnya digunakan sebagai antiseptik ialah dapat

digunakan obat luka eksternal dan internal dan juga sebagai bahan lotion

antiseptik krim Menurut Susditianto, V. K. (2017). Selain itu, Minyak atsiri

memberikan aroma tertentu dan khas pada tumbuhan, digunakan juga sebagai

parfum, kosmetik, antioksidan, imunostimulan, mengurangi stres, dan terapi bagi

penyakit ringan (Pratiwi, dkk, 2018).

2.2.2 Flavonoid

Senyawa flavonoid adalah senyawa yang mengandung C15 terdiri atas dua

inti fenolat yang dihubungkan dengan tiga satuan karbon. Secara biologis

flavonoid memainkan peranan penting dalam kaitan penyerbukan pada tanaman

 10

oleh serangga (Rachmawaty, D. U. (2016). Flavonoid merupakan salah satu

metabolit sekunder dan keberadaannya pada daun tanaman dipengaruhi oleh

proses fotosintesis sehingga daun muda belum terlalu banyak menggandung

flavonoid. Flavonoid ialah senyawa bahan alam dari golongan fenolid (Sari, L.

D. 2018).

2.2.3 Saponin

Saponin berasal dari bahasa latin “sapo” yang berarti sabun, dinamakan

demikian karena sifatnya yang menyerupai sabun. Saponin adalah senyawa aktif

permukaan yang kuat yang menimbulkan busa jika dikocok dalam air, Saponin

memiliki rasa pahit menusuk dan menyebabkan bersin serta iritasi pada lendir.

Saponin merupakan racun yang dapat menghancurkan butir darah atau hemolisis

pada darah (Rachmawaty, D. U. (2016).

Saponin sebagai antibakteri dengan mekanisme kerja dapat menyebabkan

kebocoran protein dan enzim dari dalam sel karena zat aktif permukaannya mirip

detergen, akibatnya saponin akan menurunkan tegangan permukaan dinding sel

bakteri dan merusak permeabilitas membran (Ningsih,dkk, 2016).

2.2.5 Tanin

Tanin merupakan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada

tumbuhan. Tanin merupakan astrigen, polifenol, berasa pahit, dapat mengikat dan

mengendapkan protein serta larut dalam air (terutama pada air panas). Tanin

digunakan untuk pengobatan penyakit kulit dan sebagai antibakteri, tetapi tanin

juga banyak diaplikasikan pada pengobatan diare, hemostatik (menghentikan

pendarahan ) dan wasir (Sari, L. D. 2018).

 11

2.2.6.Alkaloid

Alkaloid adalah senyawa kimia tanaman hasil metabolisme sekunder, yang

terbentuk berdasarkan prinsip pembentukan campuran. Alkaloid dapat ditemukan

pada daun, kuncup muda, akar pada getah yang diproduksi ditabung-tabung getah

dalam epidermis dan sel-sel yang lansung dibawah epidermis seperti pada korteks

.Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri yaitu dengan cara menggangu

komponen penyusun polipeptidoglikan pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding

sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut

(Rachmawaty, D. U. (2016).

2.4 Simplisia dan Ekstrak

2.4.1 Simplisia

Simplisia adalah bahan alamia yang dipergunakan sebagai obat yang

belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain, berupa

bahan yang telah dikeringkan. Simplisia dibedakan simplisia nabati, simplisia

hewani, dan simplisia pelikan (mineral). Simpilsia nabati adalah simplisia berupa

tanaman utuh,bagian tanaman atau eksudat tanaman yang dipergunkan sebagai

obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan lain

berupa bahan yang telah dikeringkan (Ditjen POM,2000).

 12

2.4.2 Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi

senyawa aktif dari simplisia nabati maupun hewani dengan menggunakan pelarut

yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa

atau serbuk yang tersisa diperlukan sedemikian rupa sehingga memenuhi baku

yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995).

2.5 Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu cara menarik satu atau lebih zat dari bahan asal

menggunakan suatu cairan penarik atau pelarut. Umumnya dikerjakan untuk

simplisia yang mengandung zat-zat berkhasiat atau zat-zat lain untuk keperluan

tertentu. Tujuan utama ekstraksi dalam bidang farmasi dalah untuk mendapatkan

atau memisahkan zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan (Syamsuni,2006).

Menurut Ditjen POM RI (2000), ada beberapa metode ekstraksi yaitu:

1.Cara Dingin

a. Maserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan

pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada

temperatur ruangan (kamar). Cairan penyari akan menembus dinding sel

dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif yang akan

larut, karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di

dalam sel dan di luar sel maka larutan terpekat didesak keluar.

b. Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai

sempurna yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan. Proses

 13

terdiri dari tahapan pengembangan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi

sebenarnya terus menerus sampai diperoleh ekstrak (perkolat). Cara

perkolasi lebih baik dibandingkan dengan cara maserasi karena:

 Aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi

dengan larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan

derajat perbedaan konsentrasi.

 Ruangan diantara butir-butir serbuk simplisia membentuk saluran tempat

mengalir cairan penyaring. Karena kecilnya saluran kapiler tersebut, maka

kecepatan pelarut cukup untuk mengurangi lapisan batas, sehingga dapat

meningkatkan perbedaan konsentrasi.

2.Cara Panas.

a. Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik didihnya,

selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang relatif konstan

dengan adanya pendingin balik. Umunya pada metode ini dilakukan

pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat

termasuk proses ekstraksi sempurna.

b. Sokletasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang selalu baru

dan yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstrak

kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin

balik.

c. Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada

temperatur yang lebih tinggi dari temperatur ruangan, yaitu secara umum

dilakukan pada temperatur 40-50 0C.

 14

d. Infundasi adalah proses penyarian yang umumnya dilakukan untuk

menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati.

Proses ini dilakukan pada suhu 90 0C selama 15 menit.

e. Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama dan temperatur sampai

titik didih air, yakni 30 menit pada suhu 90-100 0C.

2.6 Krim

Menurut Farmakope Edisi IV, krim adalah bentuk sediaan setengah padat

mengandung satu atau lebih bahan obat terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar

yang sesuai (Ditjen POM,1995).

Krim dapat diformulasikan dalam dua tipe yaitu m/a emulsi miyak dalam

air dan tipe a/m atau air dalam minyak. Kedua fase yang berbeda dalam krim

distabilkan dengan penambahan surfaktan (Ansel, 1989).

Menurut (Riawenni, S. 2017).Sebagai obat luar, krim harus memenuhi

beberapa persyaratan berikut :

a. Stabil selama masih dipakai untuk mengobati. Oleh karena itu, krim harus

bebas dari inkompatibilitas, stabil pada suhu kamar, dan kelembaban yang

ada di dalam kamar.

b. Lunak. Semua zat dalam keadaan halus dan seluruh produk menjadi lunak

serta homogen.

c. Mudah dipakai. Umumnya, krim tipe emulsi adalah yang paling mudah

dipakai dan dihilangkan dari kulit.

d. Terdistribusi secara merata. Obat harus terdispersi merata melalui dasar

krim padat atau cair pada penggunaan.

 15

2.6.1 Tipe Krim

Tipe dibagi menjadi dua yaitu krim tipe air dalam minyak (A/M) dan

minyak dalam air (M/A) yang pembuatannya digunakan zat pengemulsi. Krim

umumnya menggunakan zat pengemulsi berupa surfaktan-surfaktan anionik,

kationik dan non-ionik. Krim bersifat stabil apabila ditambah antioksidan dan zat

pengawet (Ujan , Y. P. 2016).

2.6.2 Krim Tipe Minyak Dalam Air

Krim tipe M/A merupakan krim dengan fase terdispersi minyak dan fase

pendispersi air. Krim tipe M/A mengandung zat -zat polar yang bersifat lemak

seperti setil alkohol dan gliseril monostearat cenderung menstabilkan emulsi M/A

dalam sediaan semipadat . Krim tipe M/A memiliki beberapa keuntungan yaitu

mudah dicuci dengan air, pelepasan obatnya baik, karena jika digunakan pada

kulit maka akan terjadi penguapan dan peningkatan konsentrasi dari obat yang

larut dalam air sehingga mendorong penyerapannya ke dalam jaringan kulit (Ujan

, Y. P. 2016).

2.6.3 Krim Tipe Air Dalam Minyak

Krim tipe A/M merupakan krim dengan fase terdispersi air dan fase

pendispersi minyak. Krim tipe A/M mempunyai tiga komponen utama yaitu

emulgator, fase air dan fase minyak. Krim tipe A/M stabil jika digunakan ion-ion

polivalen seperti magnesium, kalsium dan aluminium dengan bentuk ikatan silang

dengan gugus polar bahan-bahan lemak. Krim tipe A/M mempunyai viskositas

yang lebih besar dari pada Krim tipe M/A. Krim tipe A/M umunya stabil dan

kandungan airnya tidak lebih dari 60% (Ujan , Y. P. 2016).

 16

2.6.4 Basis krim

Krim dibuat dengan memperhatikan seleksi basis yang cocok, basis harus

dapat campur secara fisika dan kimia dengan obat yang dikandungnya. Basis tidak

boleh merusak atau menghambat aksi terapi dari obat dan dipilih agar dapat

melepas obat pada daerah yang diobati. Basis yang digunakan harus membuat

krim menjadi stabil selama masih digunakan untuk mengobati, stabil pada suhu

kamar dan kelembaban udara serta, tidak menyebabkan inkompatibilitas.

Surfaktan adalah emulgator yang sering digunakan pada pembuatan sediaan krim

basis AM dan MA. Surfaktan mempunyai dua ujung yang terpisah, yaitu ujung

polar (hidrofilik) yang akan berada pada bagian air dan ujung non polar

(hidrofobik) berada pada bagian minyak (Ujan , Y. P. 2016).

2.7 Keuntungan sediaan krim

Keuntungan menggunakan sediaan bentuk krim ialah krim dapat

mempertahankan kelembaban kulit serta dapat membuat kulit terasa lebih lentur

saat pemakaiannya. Krim dapat meningkatkan suplai bahan-bahan seperti

humektan, air, dan minyak ke dalam kulit sehingga diharapkan bahan aktif

maupun bahan penunjang lainnya yang ada dalam sediaan krim dapat masuk atau

berpenetrasi ke dalam kulit dengan baik. Krim memiliki fungsi lain dalam

pemakainya yaitu dapat membersihkan kulit (Riawenni, S. 2017).

 17

2.8 Bakteri

Nama bakteri berasal dari kata “bakterion” (bahasa yunani) yang berarti

tongkat atau batang. Bakteri merupakan organisme yang sangat kecil (berukuran

mikroskopis) dengan lebar 0,5-1µm dan panjang hingga 10 µm sehingga hanya

tampak dengan mikroskop (Arif, S, 2017). Sel bakteri terdiri atas beberapa

bentuk, yaitu bentuk basil/batang, bulat, atau spiral. Dinding sel bakteri

mengandung kompleks karbohidrat dan protein yang disebut peptidoglikan.

Bakteri umunya bereproduksi dengan cara membelah diri menjadi dua sel yang

berukuran sama, Hal ini disebut dengan cara pembelahan biner. Bakteri umumnya

menggunakan bahan kimia organik yang dapat diperoleh secara alami dari

organisme hidup atau organisme yang sudah mati. Bakteri dapat membuat

makanan sendiri dengan proses biosintesis, sedangakan beberapa bakteri yang lain

memperoleh nutrisi dari substansi organik (Sari, L. D. 2018).

2.8.1 Bentuk sel bakteri

1.Bulat (kokus)

Bakteri kokus biasanya berbentuk bulat atau lonjong, hidup sendiri-

sendiri, berpasangan, membentuk rantai panjang atau kubus, tergantung cara

bakteri itu membelah diri dan kemudian melekat satu sama lain setelah

pembelahan. Beberapa bakteri kokus berpasangan setelah pembelahan sel. Bentuk

kokus terdiri atas Diplococcus, Tetracoccus,Streptococcus (berbentuk rantai),

Sarcinae (berbentuk kubus ), dan Staphylococcus (berbentuk seperti buah anggur)

(Sari, L. D. 2018).
 18

2 Batang (basil)

Bakteri basil adalah golongan bakteri yang memiliki bentuk seperti batang

atau silinder.Bakteri ini mempunyai ukuran yang sangat beragam. Basil umumnya

terlihat sebagai batang tunggal, Beberapa bakteri basil berpasangan setelah

pembelahan sel. Bentuk basil terdiri atas Diplobacillus, Streptobacillus dan

Coccobacillus (Sari, L. D. 2018).

3 Spiral (Lengkung)

Bakteri spiral adalah bakteri yang mempunyai bentuk yang tidak lurus

seperti basil,tetapi mempunyai satu atau beberapa lekukan. Bakteri spiral dibagi

menjadi vibrio (bakteri berbentuk batang yang melengkung menyerupai bentuk

koma), spirilum (bakteri berbentuk spiral atau pilinan dengan selnya yang kokoh)

dan spiroketa (bakteri yang berbentuk spiral dan tubuhnya sangat lentur sehingga

dapat bergerak bebas) (Sari, L. D. 2018).

2.8.2 Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan

bakteri

Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan

bakteri adalah :

1.Suhu

Suhu adalah suatu faktor terpenting yang mempengaruhi pertumbuhan dan

kelangsungan hidup dari semua organisme hidup. Spesies mikroba yang berbeda

membutuhkan suhu optimal yang amat beragam untuk pertumbuhannya:bentuk

psikrofil tumbuh paling baik pada suhu rendah (15-20℃), bentuk mesofil tumbuh
 19

terbaik pada suhu 30-37℃ dan bentuk termofil tumbuh terbaik pada suhu 50-

60℃ (Riawenni, S. 2017).

2.pH

pH merupakan indikasi konsentrasi ion hidrogen. Peningkatan dan

penurunan konsentrasi ion hidrogen dapat menyebabkan ionisasi gugus-gugus

dalam protein,asam amino dan karboksilat, sehingga menyebabkan denatursi

protein yang menggangu pertumbuhan sel (Riawenni, S. 2017).

Mikroorganisme asidofil tumbuh pada antara pH optimal 1,0-5,5,

mikroorganisme neutrofil tumbuh pada antara pH optimal 5,5-8,0.

Mikroorganisme alkalofil tumbuh pada pH optimal 8,5-11,5, sedangkan

mikroorganisme alkalofil ekstrem tumbuh pada kisaran pH optimal ≥ 10

(Riawenni, S. 2017).

3.Tekanan osmosis

Tekanan osmosis adalah laju air dari larutan dengan konsentrasi rendah ke

larutan dengan konsentrasi tinggi, misalnya suatu peristiwa terjadinya plasmolisis

yang disebabkan oleh sel mikroorganisme berada dalam larutan dengan

konsentrasinya lebih tinggi dari pada konsentrasi di dalam sel. Maka yang akan

terjadi keluarnya cairan dari dalam sel melalui membran sitoplasma, oleh karena

itu untuk mempertahankan kehidupan sel agar tetap hidup harus diciptakan

tekanan osmosis (Riawenni, S. 2017).

 20

4.Nutrisi

Nutrisi merupakan substansi yang diperlakukan untuk biosintesis dan

pembentukan energi. Berdasarkan kebutuhannya, nutrisi dibedakan menjadi dua

yaitu makroelemen (C,O,H,N,S,P,K,Mg,Ca,Fe) dan mikroelemen (Mn,Zn,Co,Cu)

(Riawenni, S. 2017).

5.Oksigen

Berdasarkan akan kebutuhan terhadap oksigen,bakteri digolongkan

menjadi,antara lain:

a. Bakteri aerob mutlak : bakteri yang memerlukan adanya oksigen untuk

pertumbuhannya

b. Bakteri anaerob mutlak : bakteri yang tidak memerlukan adanya oksigen

untuk pertumbuhannya

c. Bakteri anaerob fakultatif : bakteri yang dapat tumbuh,baik ada oksigen

maupun tanpa adanya oksigen

d. Bakteri mikroaerofilik : bakteri yang kebutuhan oksigennya rendah

(Riawenni, S. 2017).

6.Media kultur

Media kultur ialah bahan nutrisi yang digunakan untuk pertumbuhan

mikroorganisme dilaboratorium. Berdasrakan konsistensinya, media

dikelompokkan menjadi dua macam yaitu media cair dan media padat (Riawenni,

S. 2017).
 21

2.8.3 Fase Pertumbuhan Mikroorganisme

Ada empat macam fase pertumbuhan mikroorganisme, menurut Rosidah,

U, 2016 yaitu

1.Fase Adaptasi (lag phase )

Sel dalam fase statis ketika dipindah ke media baru maka sel akan

melakukan proses adaptasi. Proses adaptasi meliputi sintesis enzim baru yang

sesuai dengan medianya dan pemulihan terhadap metabolit yang bersifat toksik

pada waktu di media lama.

Pada fase ini tidak dijumpai pertambahan jumlah sel. Akan tetapi terjadi

pertambahan volume sel, karena pada fase statis biasanya sel melakukan

pengecilan ukuran.Akan tetapi fase adaptasi dapat dihindari (langsung ke fase

perbanyakan), jika sel dimedia lama dalam kondisi fase perbanyakan dan di

pindah ke media baru yang sama komposisinya dengan media lama.

2.Fase perbanyakan (Exponential Phase)

Setelah sel memperoleh kondisi ideal dalam pertumbuhannya sel akan

melakukan pembelahan. Pembelahan sel merupakan persamaan

eksponensial,maka fase ini disebut juga fase eksponensial. Pada fase perbanykan

jumlah sel meningkat sampai batas tertentu atau sampai memasuki fase statis.

Pada fase perbanyakan sel melakukan konsumsi nutrien dan fase fisiologis

lainnya.
 22

3.Fase Statis (Stasioner Phase)

Pada fase statis bakteri tidak melakukan pembelahan sel. Alasan bakteri

tidak melakukan pembelahan sel pada fase ini bermacam-macam antara lain:

a. Nutrien habis

b. Akumulasi metabolit toksik (misalnya alkohol, asam dan basa)

c. Penurunan kadar oksigen

d. Penurunan nilai (ketersedian air)

4.Fase kematian (Death Phase)

Penyebab utama kematian adalah autolisis sel dan penurunan energi

seluler. Beberapa bakteri hanya mampu bertahan beberapa jam selama fase statis

dan kemudian masuk ke fase kematian. Untuk bakteri yang mampu bertahan

tahunan pada fase statis biasanya bakteri tersebut membentuk spora.

2.9 Bakteri Staphylococcus aureus

Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif berbentuk bulat,

tersusun dalam kelompok-kelompok yang tidak teratur seperti buah anggur,

fakultatif anaerob, tidak membentuk spora, dan tidak bergerak. Bakteri ini

termaksud jenis bakteri yang paling kuat daya tahannya (Lenny, A. A. 2016).

Staphylococcus aureus hidup sebagai saprofit di dalam saluran

pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan hewan seperti hidung, mulut,

tenggorokan dan dapat pula dikeluarkan pada waktu batuk dan bersin. Selain

dapat menyebabkan intoksikasi, bakteri ini juga dapat menyebabkan berbagai

 23

macam infeksi seperti jerarawat, bisul, meningitis, osteomilitis, pneumonia, dan

masitis pada manusia dan hewan (Arif, S, 2017).

2.9.1 Klasifikasi Stapyhlococcus aureus

Klasifikasi bakteri Staphylococcus aureus, Syahrurahman (2010)

adalah sebgai berikut:

Kingdom :Eubacteria

Domain :Bacteria

Ordo : Eubacteriales

Famili :Micrococeaceae

Genus : Staphylococcus

Spesies : Staphylococcus aureus

Gambar 2.2 Stapylococcus aureus

2..9.2 Morfologi Bakteri Staphylococcus aureus

Bakteri Stapyhlococcus aureus termasuk dalam famili Micrococcaceae

menurut bahasa yunani staphyle (anngur) dan coccus (bulat atau bulat ).salah satu

spesies menghasilkan pigmen berwarna kuning emas sehingga dinamakan aureus

 24

(emas seperti matahari), bakteri ini dapat tumbuh dengan atau tanpa bantuan

oksigen.Infeksi Staphylococcus aureus dapat menyran setiap bagian tubuh kita.

Bakteri dapat ditemukan dihidung,mulut, kulit, mata, jari, usus dan hati. Bakteri

ini dapat tinggal, sementara didaerah kulit yang basah. Infeksi Staphylococcus

aureus biasanya terjadi pada luka terbuka (Sari, L. D. 2018).

2.9.3 Metode kultur bakteri

a.Metode cawan gores

Prinsip menggoreskan sejumlah suspensi sampel pada permukaan media

lempeng agar menggunakan jarum inokulasi secara asptik lalu diinkubasi (Sari, L.

D. 2018).

b.Metode cawan tuang

Prinsip mencampur sejumlah suspensi bahan atau seri pengenceran pada

media agar yang dicairkan, lalu dituaang pada cawan petril steril secara aseptik,

biarkan padat lalu diinkubasi (Sari, L.D, 2018).

c.Metode perataan

Prinsip meratakan sejumlah suspensi sampel atau biakan pada permukaan

lempeng agar menggunakan kapas lidi steril atau spratel drigalski. Metode ini

digunakan untuk uji sensitivitas mikroorganisme terhadap agensi kimia (Sari, L.

D, 2018).
 25

d.Metode titik

Prinsip menginokulasi biakan secara titik pada permukaan media lempeng

agar menggunakan jarum. Cara ini digunakan untuk inokulasi kapang (Sari, L. D.

2018).

e.Metode tusukan

Prinsip menginokulasikan biakan secara tusukan pada agar tegak dengan

menggunakan jarum ent, biasanya digunakan untuk uji motilitas pada media

semisolid (Sari, L. D. 2018).

f.Metode pencelupan

Prinsip mencelupkan sejumlah biakan pada media cair menggunakan

jarum inokulasi (Sari, L. D. 2018).

2.10 Uji Aktivitas Antibakteri

Metode pengujian antibakteri untuk mengetahui efektivitas suatu zat

terhadap suatu mikroorganisme, uji kepekaan terhadap antibakteri pada dasarnya

dapat dilakukan melalui yaitu :

a.Metode difusi

Disk-diffusion method atau kirby- bauer test dibagi tiga yaitu metode

menggunakan cakram, metode mengunakan silinder, dan metode lubang

sumuran. Disk diuji diletakkan pada permukaan media agar yang telah diinokulasi

dengan mikroorganisme uji, diinkubasikan dan diamati terbentuknya zona

hambatan. Tes ini dapat mendeterminasi sensivitas bahan uji dan estimasi
 26

konsentrasi hambat minimum, yaitu konsentrasi terendah yang mampu

menghambat pertumbuhan bakteri secara visual. Kelemahan metode difusi yaitu

tidak dapat menentukan efek bakterisidal suatu bahan uji (Sari, L. D. 2018).

b.Metode dilusi

Prinsipnya adalah seri pengenceran konsentrasi bahan uji titik dapat

digunakan untuk menentukan konsentrasi hambat minimum dan konsentrasi

bunuh minimum. Suatu bahan uji titik inokulasi suatu seri pengenceran bahan uji

dalam tabung berisi media cair dan diinokulasi dengan bakteri uji lalu diamati

tingkat kekeruhan atau pertumbuhan pengenceran tertinggi dari media cair yang

jernih dinyatakan sebagai konsentrasi hambat minimum, sedangkan tabung yang

jernih diinokulasi goresan pada media plate agar, pencairan tertinggi dari tabung

yang jernih sebagai konsentrasi bunuh minimum (Sari, L. D. 2018).

2.11 Mekanisme Kerja Antibakteri

Obat antimikroba mempunyai susunan kimiawi dan mempunyai cara kerja

yang berbeda antara obat yang satu dengan obat lainnya. Antimikroba menggangu

bagian-bagian mikroba yang peka, yaitu dinding sel, protein, asam nukleat, dan

metabolit intermedier. Beberapa mekanisme kerja antimikroba diantaranya:

1. Menghambat sintesis dinding sel. Obat antimikroba yang menghambat

pembentukan dinding sel efektif pada saat bakteri sedang aktif membelah.

2. Merusak membran sel. Rusaknya membran sel dapat menyebabkan

metabolit penting di dalam sel lolos keluar sel dengan akibat kematian sel.

3. Menghambat sintesis protein

 27

4. Menghambat sintesis asam nukleat. Antimikroba ini dapat bekerja dengan

cara menghambat sintesis MRNA pada proses transkripsi atau

menghambat replikasi DNA pada proses pembelahan sel.

5. Antagonis metabolit. Mekanisme kerja senyawa antimetabolit adalah

dengan cara menghambat secara kopetitif terhadap sintesis metabolit

esensial (Riawenni, S. 2017).

2.12 Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri

Penentuan kadar hambat minimum (KHM) bertujuan untuk menentukan

konsentrasi minimum pada ekstrak dalam menghambat pertumbuhan bakteri uji.

Zona bening disekitar zat antimikroba merupakan kekuatan hambatan zat

antimikroba terhadap penghambatan pertumbuhan mikroorganisme, ditunjukkan

dengan adanya zona hambatan atau daerah transparan disekitar sumur pada

pertumbuhan bakteri. Namun, zona hambat yang dihasilkan hanya bersifat

menghambat pertumbuhan bakteri (bateriostatik) dan tidak bersifat membunuh

bakteri (bakteriosidal). Hal ini ditunjukkan dengan mengecilnya ukuran zona

hambat setelah fasa logaritmik dari bakteri. Selanjutnya, dilakukan pengukuran

zona hambat yang ditujukan (Sari, L. D. 2018). Suatu sediaan dikatakan memiliki

daya hambat bakteri jika memenuhi persyaratan dengan diameter daerah hambat

bakteri lebih kurang dari 11 sampai 20 mm. Diameter zona hambat diukur dengan

penggaris atau jangka sorong. Tingkat keberhasilan pengaruh krim ekstrak etanol

tanaman sereh dinyatakan dalam bentuk ukuran milimeter. Tingkat

keberhasilannya akan dibagi menjadi empat kategori skala ordinal, yaitu sangat

kuat, kuat, berpotensi dan tidak ada potensi, dengan klasifikasi sebagai berikut:
 28

Diameter Zona Bening Respon Hambat Pertumbuhan

Bakteri

>21 mm Sangat Kuat

11-20 mm Kuat

6-10 mm Berpotensi

<5 mm Tidak Ada Potensi

Tabel 2.1 Klasifikasi Respon Hambat Pertumbuhan Bakteri (Dhinarty Umi

Rachmawati, 2016).
 29

2.13 Kerangka pikir penelitian

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Tanaman sereh 1. Makroskopik

2. Mikroskopik

karakterisasi Mikroskopik
Serbuk
Simplisia
Tanaman
1. Flavonoid
Skrining 2. Tanin
fitokimia 3. Saponin
4. Alkaloid

Ekstrak etanol tanaman

sereh

Formulasi sediaan krim Diameter

Aktivitas krim
ekstrak etanol tanaman hambat krim
antibakteri terhadap
sereh dengan konsentrasi: antibakteri
bakteri Staphylococcus
1. 12,5 % aureus
2. 25 %
3. 50%
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Metode Penelitian

Pada penelitiana ini dilakukan secara eksperimental. Metode penelitiaan

ini meliputi tahapan penyiapan alat dan bahan penelitian, determinasi bahan

penelitian, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol tanaman sereh, formulasi

sediaan krim ekstrak etanol tanaman sereh, selanjutnya pengujian aktivitas

antibakteri dengan metode difusi.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilaksanakan dilaboratorium kimia organik, laboratorium

farmasetika, laboratorium kimia kualitatif di Institut Kesehatan Medistra dan

laboratorium mikrobiologi rumah sakit GRANMED lubuk pakam. Penelitian ini

dilakukan pada bulan Januari sampai Juni 2020.

Tabel 3.1 Waktu Kegiatan Penelitiaan

Bulan
N Uraian Jan Feb Mar April Mei Juni Juli
o Kegiatan 2020 2020 2020 2020 2020 2020 2020
1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Pengajuan
1
Judul
Bimbingan
2
Proposal
Seminar
3
Proposal
Perbaikan
4
Proposal
Pengumpula
5
n Data
Analisi
6
Data
Sidang
7
Proposal

30
 31

3.3 Alat dan Bahan

3.3.1 Alat-alat yang Digunakan

Alat-alat yang digunakan dalam penelitiaan ini adalah aluminium foil,

otoklaf, batang pengaduk, blender, beaker glass, cawan petri, cawan porselin,

deck glass, erlenmeyer, gelas ukur, inkubator, jangka sorong, jarum ose, kaca

objek, kain kasa, kapas, kertas cakram, kertas label, kertas perkamen, kulkas,

laminar air flow, lampu bunsen, lumpang dan stamper, mikroskop, neraca analiti,

oven, pinset, pipet mikro, pot, rak tabung, rotari evaporator, spatula, dan tabung

reaksi.

3.3.2 Bahan-bahan yang Digunakan

Bahan penelitiaan yang digunakan adalah berupa tanaman sereh segar

diperoleh dari kebun masyarakat lubuk pakamkemudian di ekstrasi dengan etanol

96% kemudian bahan formula krim: Asam stearat,Setil alkohol,Gliserin,Parafin

cair, Propilen glikol, Nipagin, Sorbitol, TEA, dan Aquadest . Sedangkan jenis

bakteri yang digunakan adalah Staphylococcus aureus.

Bahan kimia yang digunakan adalah alfanaftol, asam klorida pekat, asam

asetat anhidrit, asam asetat glasial, asam nitrat pekat, asam sulfat pekat, benzen,

besi (III) klorida, bismut (III), nitrat, etanol, etil astat, n-heksan, iodium,

isopropanol, kalium iodida, kloral hidrat, kloroform, metanol, natrium hidrosida,

natrium klorida, natrium sulfat anhidrat, raksa (II) klorida, serbuk magnesium dan

timbal (II) asetat, dimetil sulfoksida (DMSO), aquadest.

 32

3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi

Pembuatan larutan pereaksi besi (III) Klorida 1 % bouchardat,

Dragendroff, Mayer, Molisch, Asam klorida 2 N, Asam sulfat 2 N, Kloral hidrat,

Natrium dikrosida 2 N, Liberman-Bouchart, Timbal (II) Asetat 0,4.

3.4.1 Pereaksi Mayer

Ditimbang sebanyak 1,35 g raksa (II) klorida,lalu dilarutkan dalam 60 ml

akuades.Kemudian pada wadah lain sebanyak 5 g kalium iodida dilarutkan dalam

10 ml akuades dan campurkan keduanya,ditambahkan akuades hingga batas 100

ml

3.4.2 Pereaksi natrium hidroksida 2 N

Ditimbang sebanyak 8,001 g natrium hidroksida,kemudian dilarutkan

dalam air suling hingga 100 ml (Depkes RI,1995).

3.4.3 Pereaksi Bouchardat

Dilarutkan dalam air suling sebanyak 4 g kalium iodida dan dan 2 g

iodium secukupnya hingga 100 ml (Depkes RI,1995).

3.4.4 Pereaksi Dragendorff

Pereaksi dibuat dua persediaan (1) 0,6 g bismut nitrat dalam 2 ml HCI

pekat dan 10 ml air; (2) 6 g kalium iodida dalam 10 ml air.Larutan persediaan ini

dicampurkan dengan 7 ml HCI pekat dan 15 ml air (Harbone,1987).

 33

3.4.5 Pereaksi besi (III) klorida

Ditimbang sebanyak 9 g besi (III) klorida heksahidrat (p),kemudian

dilarutkan dalam air suling hingga 100 ml,lalu disaring (Ditjen POM RI,2010).

3.4.6 Pereaksi asam klorida 2 N

Asam klorida pekat sebanyak 16,6 ml ditambahkan air suling sampai 100

ml (Ditjen POM RI ,1979).

3.4.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M

Ditimbang sebanyak 15,17 g timbal asetat,kemudian dilarutkan dalam air

suling bebas karbondioksida hingga 100 ml (Depkes RI,1995).

3.4.8 Pereaksi Liebermann-Burchard

Dicampurkan 5 ml asam asetat anhidrida dengan 5 ml asam sulfat pekat

kemudian ditambahkan dengan etanol hingga diperoleh volume 50 ml (Depkes

RI,1995).

3.4.9 Pereaksi Molisch

Dilarutkan sebanyak 3 g alfa naftol dalam 15 ml etanol 95%,ditambahkan

asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Ditjen POM RI,1995).

3.4.10 Peraksi kloralhidrat

Larutan kloralhidrat dibuat dengan cara melarutkan kloralhidrat sebanyak

50 g dalam 20 ml air (Ditjen POM RI,1995).

 34

3.5 Pengambilan dan Pengolahan Sampel

3.5.1 Pengambilan Sampel

Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif yaitu tanpa

membandingkan dengan tanaman yang sama dari daerah lain. Sampel yang

digunakan adalah tanaman sereh sebanyak 5 kg.

3.5.2 Pengolahan Sampel

Sampel dibersihkan dari kotoran yang melekat dengan cara dicuci dengan

air mengalir, ditiriskan, lalu ditimbang sebagai berat basah, kemudiaan di iris

kecil dan diangin-anginkan pada suhu ruangan lebih kurang 40℃. Sampel yang

telah kering biasanya ditentukan dari kerapuhan dan mudah patahnya bahan

tumbuhan yang dikeringkan. Beratnya kemudiaan ditimbang sebagai berat kering,

lalu dihaluskan dengan menggunakan blender, di ayak dengan ayakan, sehingga

didapat serbuk simplisia. Serbuk simplisia dimasukkan kedalam wadah kaca yang

berwarna gelap yang tertutup rapat dan disimpan pada suhu kamar.

3.6 Karakteristik Simplisia

Pemeriksaan karakteristik simplisia yang meliputi pemeriksaan

makroskopik dan mikroskopik.

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik

Pemeriksaaan makroskopik dilakukan dengan mengamati sifat morfologi

luar bau dan rasa simplisia tanaman sereh.

 35

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia dan

tanaman sereh segar. Serbuk simplisia ditaburkan sedikit di atas kaca objek yang

masing-masing telah ditetesi dengan akuadest ditambahkan kloralhidrat lalu di

panaskan dan ditutup dengan kaca penutup, kemudiaan amati dibawah mikroskop.

3.7 Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia tanaman sereh meliputi pemeriksaan

senyawa golongan flavonoid, tanin, saponin,alkaloid.

3.7.1 Pemeriksaan Flavonoid

Sampel dicampur dengan 10 ml air, dikocok, dipanaskan, dan dikocok lagi

kemudiaan di saring, kemudiaan ditambahkan Mg 0,2 g, 3 tetes asam klorida

pekat, dan 2ml amil alkohol pada masing-masing filtrat. Terbentuknya warna

merah pada lapisan amil alkohol menunjukkan adanya flavonoid (Harbone, 1987)

3.7.2 Pemeriksaan Saponin

Sebanyak 0,5 g sampel ditimbang, kemudiaan dimasukkan ke dalam

tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan kemudiaan dikocok

kuat-kuat selama 10 detik. Terbentuk busa setinggi 1-10 cm yang stabil tidak

kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2

N menunjukkan adanya saponin.

 36

3.7.3 Pemeriksaan Tanin

Sebanyak 0,5 g sampel di saring denga 10 ml aquadest, disaring lalu

filtratnya diencerkan dengan aquadest sampai tidak berwarna. Diambil 2ml

larutan lalu ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida, terjadi warna biru

atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin.

3.7.4 Pemeriksaan Alkaloid

Sebanyak 0,5 g sampel ditimbang, kemudiaan ditambahkan 1 ml asam

klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanasakan diatas penangas air selama 2 menit,

didinginkan lalu disaring.

Filtrat dipakai untuk tetes alkaloid, diambil 3 tabung reaksi, lalu kedalam

masing- masing tabung reaksi dimasukkan 3 tetes filtrat.

Tabung I : ditambahkan 2 tetes pereaksi mayer, terbentuk endapan

menggumpal berwarna putih atau kuning.

Tabung II : ditambahkan 2 tetes larutan pereaksi bouchardat, akan

terbentuk endapan berwarna coklata sampai hitam.

Tabung III : ditambahkan 2 tetes pereaksi dragendrof, terbentuk

endapan berwarna coklat atau jingga kecoklatan.

3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Tanaman Sereh

Pembuatan ekstrak etanol tanaman sereh dilakukan secara maserasi

menggunakan etanol 96% prosedur pembuatan ekstrak secara maserasi, yaitu

 37

sebanyak 400 gram. Satu bagian serbuk kering simplisia dimasukkan

kedalam maserator, tambahkan 10 bagian etanol 96%. Rendam selama 6 jam

pertama sambil sekali - sekali diaduk, kemudian diamkan selama 18 jam.

Pisahkan maserat dengan cara pengendapan. Ulangi proses penyarian

sekurang – kurangnya dua kali dengan jenis dan jumlah pelarut

yang sama. Hasil maserasi disaring, kemudiaan dipekatkan dengan rotary

evaporator pada suhu 50 ℃ sampai diperoleh ekstrak daun sirih hijau

cukup kental dan dipekatkan diatas penangas air hingga menjadi kental

(Depkes RI, 2010)

3.9 Pembuatan Formulasi Sediaan Krim

3.9.1 Formula dasar krim

Sediaan krim yang dibuat adalah krim dengan tipe m/a

a.Formula dasar krim (Young,1972)

R/ Asam stearat 12 g

Setil alkohol 0,5 g

Sorbitol sirup 5g

Trietanolamin 1g

Gliserin 1-5 tetes

Propilen glikol 3g

Nipagin secukupnya
 38

Aquadest ad 100 ml

b.Formula yang telah dimodifikasi

R/ Asam stearat 12 g

Setil alkohol 0,5 g

Sorbitol sirup 5g

Trietanolamin 1g

Gliserin 5 tetes

Propilen glikol 3g

Nipagin secukupnya

Aquadest ad 100 ml

3.9.2 Formulasi sediaan krim

Cara pembuatan : Asam stearat dan setil alkohol dimasukkan ke dalam cawan

penguap dan dilebur di atas penangas air (massa I). Nipagin dilarutkan dalam air

panas, lalu ditambahkan propilen glikol, sorbitol, gliserin, dan trietanolamin

diaduk sampai larut (massa II). Lalu ditambahkan massa II ke dalam massa I di

dalam lumpang panas sambil digerus secara terus-menerus hingga terbentuk dasar

krim.

Sediaan krim dibuat kedalam 3 konsentrasi dan blanko dimana masing-

masing sediaan memiliki bobot 100 gram

a.Blanko: Formulasi tanpa mengandung ekstrak etanol tanaman sereh

 39

b.Formulasi I: Formulasi mengandung 12,5 % ekstrak etanol tanaman sereh

c.Formulasi II: Formulasi mengandung 25%ekstrak etanol tanaman sereh

d.Formulasi III: Formulasi mengandung 50 % ekstrak etanol tanaman sereh.

3.9.3 Cara Pembuatan Sediaan Krim

a.Blanko

Cara Pembuatan: dimasukkan massa II ke dalam massa I di dalam lumpang

panas sambil digerus secara terus-menerus sampai homogen.

b. Formula I

Cara Pembuatan: ke dalam lumpang panas dimasukkan massa II ke dalam massa

I sambil digerus secara terus-menerus hingga terbentuk dasar krim. Lalu

ditambahkan 12,5 % Ekstrak tanaman sereh kemudian gerus di dalam lumpang,

sampai homogen.

c. Formula II

Cara Pembuatan : ke dalam lumpang panas dimasukkan massa II ke dalam massa

I sambil digerus secara terus-menerus hingga terbentuk dasar krim. Lalu

ditambahkan 25 % Ekstrak tanaman sereh kemudian gerus di dalam lumpang,

sampai homogen.

d. Formula III

Cara Pembuatan : ke dalam lumpang panas dimasukkan massa II ke dalam massa

I sambil digerus secara terus-menerus hingga terbentuk dasar krim. Lalu

 40

ditambahkan 50 % Ekstrak tanaman sereh kemudian gerus di dalam lumpang,

sampai homogen.

3.10 Evaluasi Sediaan

Evaluasi formula meliputi evaluasi fisik. Evaluasi fisik meliputi

pemeriksaan stabilitas, pemeriksaan homogenitas. Evaluasi biologi meliputi

penetuan aktivitas bakteri sediaan krim ekstrak etanol tanaman sereh terhadap

Staphylococcus aureus dengan metode difusi agar menggunakan kertas cakram.

3.10.1 Pemeriksaan Stabilitas Sediaan

Sediaan dinyatakan stabil apabila warna, bau, dan penampilan tidak

berubah. Secara visiul selama penyimpanan dan juga secara visiul tidak ditumbuhi

jamur. Pengamatan dilakukan pada suhu kamar pada hari ke-15.

3.10.2 Pemeriksaan Homogenitas Sediaan

Ditimbang satu gram krim pada bagian atas, tengah, dan bawah kemudian

di oleskan pada sekeping kaca transparan, uji homogenitas dilakukan dengan

mengamati warna sediaan dan melihat apakah terdapat bagian-bagian yang tidak

tercampur dengan baik dalam krim dilakukan sebelum dan sesudah uji stabilitas.

3.11 Sterilisasi Alat

Sterilisasi alat digunakan sebelum semua peralatan digunakan, yaitu

dengan cara membungkus semua peralatan dengan kertas perkamen kemudiaan

dimasukkan kedalam autoklaf pada suhu 121℃ dengan tekanan 1 atm selama 15
 41

menit dan alat-alat gelas lainnya disterilkan di oven pada suhu 160℃-170℃

selama 2-3 jam.Jarum ose dibakar dengan lampu bunsen.

3.12 Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)

3.12.1 Pembuatan Media Nutrient Agar

Komposisi:

a.Lab-lemco powder 5 gram

b.Meat extract 3 gram

e.Agar 12 gram

cara pembuatan:

Nutrient agar (NA) sebanyak 20 g dilarutkan dalam 1000 ml aquadest

menggunakan erlenmeyer. Selanjutnya media di sterilkan dengan autoklaf dengan

suhu 121℃ selama 15 menit, kemudiaan dibiarkan pada suhu ruangan selama ±

30 menit sampai kemudian media memadat. Media agar ini dilakukan untuk

inokulasi bakteri lapisan dasar dan lapisan kedua (Merck,2005).

3.12.2 Pembuatan Nutrient Broth (NB)

Komposisi:

a.Meat extract 5 gram

b. peptone 3 gram
 42

Cara pembuatan:

Sebanyak 8 gram media nutrient broth yang sudah jadi ditimbang dan

dilarutkan dengan aquadest 1000 ml,lalu dipanaskan sampai larut sempurna media

dimasukkan dalam erlenmeyer steril yang tertutup dan disterilkan dalam autoklaf

pada suhu 121℃ selama 15 menit (Merck,2005).

3.13 Pembuatan Agar Miring

Sebanyak 3 ml media nutrient agar yang telah dibuat dimasukkan ke

dalam tabung reaksi, kemudiaan diletakkan pada sudut kemiringan 30-40℃ dan

dibiarkan hingga media memadat dan disimpan dalam lemari pendingin.

3.14 Pembuatan Stok Kultur Bakteri Staphylococcus aureus

Satu koloni bakteri diambil menggunakan jarum ose steril koloni bakteri

tersebut ditanamkan pada media nutrient agar miring dengan cara menggores,

setelah itu diinkubasi dalam inkubator pada suhu 36 ℃ selama 18-24 jam (Ditjen

POM RI, 1995).

3.15 Pembuatan Inokulum Bakteri Staphylococcus aureus

Dari stok kultur bakteri Stapyhlococcus aureus yang telah tumbuh diambil

dengan jarum ose steril lalu disuspensikan dalam tabung yang berisi 10 ml larutan

nutrient broth. Diukur kekeruhan larutan (Ditjen POM,1995).

 43

3.16 Pembuatan Larutan Uji ekstrak Etanol Tanaman Sereh dengan

berbagai konsentrasi

Ditimbang ekstrak tanaman sereh sebanyak 1 g, lalu ditambahkan dimetil

sulfoksida (DMSO) hingga volume 10 ml dan diaduk hingga larut dan didapat

konsentrasi 100 mg/ml kemudian dibuat pengenceran dengan konsentrasi

12,5,25,dan 50%.

3.17 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Tanaman Sereh Terhadap

Staphylococcus aureus

Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan terhadap ekstrak etanol tanaman

sereh dengan berbagai konsentrasi.pengujian ini dilakukan dengan metode difusi

agar menggunakan pencandang kertas. Sebanyak 0.1 ml inokulum dimasukkan

kedalam cawan petri steril,setelah itu dituang media nutrient agar sebanyak 20 ml

dengan suhu 45-50℃, selanjutnya cawan digoyang diatas permukaan meja agar

media dan suspensi bakteri tercampur rata. Pada media yang telah padat

diletakkan beberapa pencandang kertas, dipipet 0,1 ml larutan uji ekstrak etanol

tanaman sereh dengan berbagai konsentrasi dan dimetil sulfoksida (DMSO)

sebagai kontrol, kemudiaan diinkubasi dalam inkubator pada suhu 35 ± 2℃

selama 18-24 jam, lalu diukur dengan diameter daerah hambat (zona jernih)

pertumbuhan disekitar pencandang dengan menggunakan jangka sorong.

3.18 Pembuatan Larutan Uji Sediaan Krim

Ditimbang sebanyak 1 g krim dari setiap formula, dimasukkan ke dalam

vial dan diberi label kemudian ditambahkan akuades steril sebanyak 1 ml dan

diaduk hingga larut.

 44

3.19 Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim Ekstrak Etanol Tanaman Sereh

Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus

Uji mikrobiologi untuk mengetahui aktivitas antibakteri sediaan krim

ekstrak etanol tanaman sereh yang dilakukan dengan metode difusi agar

menggunakan kertas cakram kirby bauer dengan cara mengukur diameter

hambatan pertumbuhan bakteri terhadap bakteri staphylococcus aureus.

Medium NA dituang ke cawan petri sebanyak 15 ml, masing-masing

bakteri staphylococcus aureus sebagai biakan uji, dipipet dari medium larutan

Nacl 0,9 % ke empat cawan petri steril masing-masing sebanyak 0,1 ml. Cawan

petri kemudiaan digoyang secara perlahan-lahan untuk menyebarkan biakan

bakteri secara merata dan di diamkan hingga medium memadat.

Masing-masing dari kertas cakram steril dipindahkan secara aseptik

menggunakan pinset steril ke konsentrasi krim ekstrak tanaman sereh

12,5%,25%,50%,dan blanko,direndam ±1 menit.

Kertas cakram yang telah direndam dengan krim ekstrak etanol tanaman

sereh dalam beberapa konsentrasi dan blanko,dipindahkan dengan pinset steril ke

medium NA yang sudah berisi bakteri Staphylococcus aureus secara

aseptik,kemudian diinkubasi selama 1 x 24 jam dengan suhu 37℃.Setelah

diinkubasi,diamati zona bening yang terdapat disekitar kertas cakram dan diukur

diameternya menggunakan jangka sorong.Dilakukan tiga kali pengulanagan.

 DAFTAR PUSTAKA

Adiguna , P., & Santoso, O. ( 2017). Pengaruh Ekstrak Daun Serai (Cymbopongon
citratus) Pada Berbagai Konsentrasi Terhadap Viabilitas Bakteri
Streptoccus Mutans. Jurnal Kedokteran Diponegoro Volume 6, Nomor 4,
Oktober , 1543-1550.

Agustia, N. (2019). Efektivitas Minyak Atsiri Serai Dapur ( Cymbopongon

citratus) sebagai Lavarsida Terhadap Larva Nyamuk Culex
quinquefasciatus. Sikripsi . Fakultas Kedokteran Program Studi
Kedokteran. Universitas Muhammadiyah Palembang.

Ansel, HC. (1989). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Edisi Keempat. Jakarta:
Universitas Indonesia. Halaman 166-167.

Arif, S. (2017). Formulasi Sediaan Krim Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao
(Theobroma Cacao L. ) Dan Uji Aktivitas Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus Dan Pseudomonas auruginosa. Sikripsi. Program
Ekstensi Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi. Universitas Sumatera Utara

Clements, G., Yamlean, P. V., & Lolo, W. A. (2020). Formulasi Dan Uji Aktivitas
Antibakteri Krim Ekstrak Etanol Herba SeledriI (Apium graveolens L.)
Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. PHARMACON Jurnal Ilmiah
Farmasi – UNSRAT Vol. 9 No. 1 FEBRUARI, 229-236.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid Kelima. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia Halaman 333-337.

Ditjen POM. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 9,32,896.

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 7,891-898,1032

Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 1,3,5,10-11.

Ditjen POM. (2010). Suplemen I Farmakope Herbal Indonesia. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 148

Fatimah, S., Nadifah, F., & Burhanudin, I. (2016). Uji Daya Hambat Ekstrak
Etanol Kubis (Brassica oleracea var. capitata f. alba) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Jurnal Ilmiah Biologi, Vol 4, No.
2, Desember2016, hal 102-106.

Falugah , F., Posangi , J., & Yamlean, P. (2019). Uji Efek Antibakteri Jamur
Endofit Pada Tumbuhan Sereh (Cymbopogon citratus) Pada Bakteri Uji
Staphylococcus aureus Dan Escherichia coli. PHARMACON Jurnal
Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 8 No. 3 AGUSTUS, 292-302.

45
Harbone, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Edisi Pertama. Penerjemah: Kosasih
Padmawinata Dan Iwang Soedro. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 6, 48-
49, 240.

Jumiarni, W ,. O & Komalasari, O. (2017). Eksplorasi Jenis dan Pemanfaatan

Tumbuhan Obat Pada Masyarakat Suku Muna di Permukiman Kota Wuna.
Traditional Medicine Journal. Vol 22 (1). hal 45-56.
Lenny, A. A. (2016). Daya Hambat Ekstrak Buah Alpukat (Persea americana
mill) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus Dan Staphylococcus
epidermis .Sikripsi. Program Studi DIV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu
Keperawatan Dan Kesehatan. Universitas Muhammadiyah Semarang.
Muhlisah, Fauziah. (1999). Tanaman Obat Keluarga. Swadaya. Jakarta

Ningrum, D. W. (2019). Pemberian Minyak Serai (Cymbopongon Citratus)

Dengan Konsentrasi Yang Berbeda Sebagai Bahan Anestesi Terhadap
Kelulushidupan Ikan Black Ghost (Apteronotus albifrons) Dalam Waktu
12 Jam. Sikripsi. Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian Peternakan.
Universitas Muhammadiyah Malang
Ningsih, D. T., Zusfahair dan Dwi, k. (2016). Identifikasi Senyawa Metabolit
Serta Uji Aktivitas Ekstrak Daun Sirsak Sebagai Antibakteri. Sikripsi.
Jurusan Kimia FMIPA. Universitas Jendral Soedirman, Purwokerto

Oyen, H, P, A., dan Dung, N. X. (1999). Plant Resources of South East Asia:
Esential Oil Plants. Prosea Foundation. Backhyus Publisher, Leiden.

Pratiwi, A., & Utami , L. B. (2018). Isolasi dan Analisis Kandungan Minyak
Atsiri pada Kembang Leson . Bioeksperimen, Volume 4 No.1, Maret , 42-
47.

Rita, W. S., Vinapriliani, N. E., & Gunawan , I. G. (2018). Formulasi Sediaan

Sabun Padat Minyak ATSIRI Serai Dapur (Cymbopogon citratus DC.)
Sebagai Antibakteri Terhadap Escherichia coli DAN Staphylococcus
aureus. Cakra Kimia (Indonesian E-Journal of Applied Chemistry)
Volume 6 Nomor 2, Desember , 152-160.

Riawenni, S. (2017) Aktivitas Antibakteri Krim Anti Jerawat Yang Mengandung

Ekstrak Daun Sirih Hijau ( Piper betle L) Terhadap Propionibacterium
acne. Sikripsi. Program Ekstensi Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi.
Universitas Sumatera Utara

Robinson, M. M., & Zhang, X. (2011). Traditional Medicines Global Situation,

Issues And Challenges. Geneva: WHO.

Rosidah, U. (2016). Tepung Ampas Tahu Sebagai Media Pertumbuhan Bakteri

Serratia Marcescens. Sikripsi. Program Studi D IV Analis Kesehatan.
Universitas Muhammadiyah Semarang.

46
Sarlina, Razak, A. R., & Tandah, M. R. (2017). Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan
Gel Ekstrak Daun Sereh (Cymbopogon nardus L. Rendle) terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus Penyebab Jerawa. Jurnal Farmasi Galenik Vol 3,
No 2, 143 – 149 .
Sari, L. D. (2018). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak Muda
Dan Tua (Annona muricata L.) Terhadap Staphylococcus aureus. Sikripsi.
Program Ekstensi Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi. Universitas Sumatera
Utara.
Sastrapradja, S. (1978). Tanaman Industri. LIPI Jakarta.

Septiani, Dewi, E. N., & Wijayanti, I. (2017). Aktivitas Antibakteri Ekstrak

Lamun (Cymodocea rotundata) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Dan Escherichia coli . Saintek Perikanan Vol.13 No. 1 Agustus , 1-6.

Sianipar, A. (2012). Formularium Ramuan Etnomedisin Obat Asli Indonesia. CV

Global Express, Jakarta.

Sikawin, B. M., Yamlean, P. V., & Sudewi, S. (2018). Formulasi Sediaan Gei
Antibakteri Ekstrak Etanol Tanaman Sereh (Cymbopogon citratus (DC.)
Stapf) Dan Uji Aktivitas Antibakteri (Staphylococcus aureus) Secara in
vitro. PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 7 No. 3
Agustus , hal 302-310.

Suryawanshi, M., Mane, V., & Kumbhar, G. (2016). Methodolgy To Extract

Essential Oils From Lemograss Leaves: Solvent Exstractin Approach.
International Research Journal of Engineering and Technology (IRJET)
Volume: 03 Issue: 08 Aug , 1775-1780.

Susditianto, V. K. (2017). Ekstraksi Minyak Atsiri Serai Dapur (Cymbopongon

citratus) Dengan Metode Microwave-Assisted Hydrodistillation (MAHD).
Sikripsi. Fakultas Teknologi Sepuluh Nopember Bandung: Departemen
Teknik Kimia.

Syamsuni. (2006). Farmasetika Dasar Dan Hitungan Farmasi. Jakarta: Penerbit

Buku Kedokteran EGC. Halaman 102

Tuntun, M. (2016). Uji Efektivitas Ekstrak Daun Pepaya (Carica papaya L.)
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli Dan Staphylococcus
aureus. Jurnal Kesehatan, Volume VII, Nomor 3, November , 497-502.
Ujan , Y. P. (2016). Uji Aktivitas Antibakteri Krim Ekstrak Etanol Kulit Batang
Kesambi (Schleichera oleosa Merr) Terhadap Staphylococcus aureus
ATCC 25923 Secara In Vivo. Sikripsi. Fakultas Farmasi, Universitas Setia
Budi. Surakarta.
Wijoyo, P. M. (2009). 15 Ramuan Penyembuh Maag. Bee Media Indonesia.
Jakarta.

47
48