1.
2.
3.
4. OLEH:
5.
OLEH:
Nim : 174111062
Judul : Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Etanol 96% Batang Sereh Wangi
(Cymbopogon Nardus(L)) Pada Mencit Putih Jantan (Mus
Muculus L) Yang Terinduksi Asam Asetat
Tanggal,….…….
Menyetujui.
Pembimbing I Pembimbing II
apt. Magi Melia Tanggu Rame, S.Farm., M.Farm apt. Jefri E. Y. Kamlasi,
S.Farm., M.Farm
Mengetahui
Sarjana Farmasi
i
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas
berkat dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal ini dengan
judul “UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK ETANOL BATANG
SEREH WANGI (Cymbopogon nardus(L)) PADA MENCIT PUTIH
JANTAN (Mus muculus L) YANG TERINDUKSI ASAM ASETAT”.
Proposal ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Farmasi (S.Farm) di Universitas Citra Bangsa.
Penulisan proposal ini tidak lepas dari bantuan dan dukungan dari banyak
pihak. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya
kepada:
1. Bapak Prof. Dr. Frans Salesman, SE.,M.Kes selaku Rektor Universitas Citra
Bangsa Kupang yang telah memberikan kesempatan dan fasilitas kepada
penulis untuk mengikuti dan melakukan ujian proposal.
2. Bapak Vinsensius Balawa Lemaking, S. KM., M. Kes selaku Dekan Fakultas
Kesehatan Universitas Citra Bangsa Kupang yang telah memberikan
kesemptan bagi penulis untuk mengikuti dan melakukan ujian proposal.
3. Ibu apt. Novi Winda Lutsina, S.Farm.,M.Si selaku Ketua Program Studi
Sarjana Farmasi Universitas Citra Bangsa Kupang yang selalu mendukung dan
memberikan motivasi dalam penulisan proposal ini.
4. Ibu apt. Maria Philomena Erika Rengga, S.Farm.,M.Farm-Klin selaku
Sekertaris Program Studi Sarjana Farmasi Universitas Citra Bangsa Kupang
yang selalu mendukung dan memberikan motivasi dalam penulisan proposal
ini.
5. Ibu apt. Magi M. Tanggu Rame, S. Farm., M. Farm selaku Dosen Pembimbing
I yang telah meluangkan waktu dan selalu sabar dalam membimbing dan
memberikan pengarahan serta motivasi kepada penulis dalam menyusun
proposal ini dengan baik.
6. Bapak apt. Jefri E. Kamlasi, S.Farm., M.Farm selaku Dosen Pembimbing II
yang dengan sabar telah meluangkan waktunya untuk membimbing penulis
dalam menyusun proposal ini dengan baik.
ii
7. Ibu apt. Nur Oktavia S.Farm, M.Farm.,M.Farm Klin sebagai Dosen
Pembimbing Akademik yang selalu memberikan dukungan, dan motivasi
selama penulis menjadi mahasiswa di Program Studi Sarjana Farmasi
Universitas Citra Bangsa Kupang
8. Bapak-ibu Dosen Program Studi Sarjana Farmasi yang telah memberikan
motivasi kepada penulis.
9. Bapak Stefanus L. Wunda, Bapak Matius Pakereng, Ibu Debora Tanggu
Ndendo, Ibu Sanete Ounga dan semua keluarga yang selalu mendukung
penulis dalam doa maupun motivasi kepada penulis sehingga dapat
menyelesaikan proposal ini.
10. Teman-teman Farmasi B Angkatan III yang selalu mendukung dan
memberikan motivasi kepada penulis.
11. Seluruh teman-teman angkatan III yang selalu memberikan dorongan serta
masukan kepada penulis.
Akhir kata, semoga Tuhan senantiasa membalas budi baik semua pihak
yang telah memberi kesempatan dan dukungan kepada penulis dalam
menyelesaiakan proposal ini. Penulis sadar bahwa proposal ini masih jauh dari
kesempurnaan, tetapi penulis berharap bahwa proposal ini dapat bermanfaat bagi
pembaca dan kemajuan ilmu pengetahuan.
iii
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN.....................................................................................i
KATA PENGANTAR.............................................................................................ii
DAFTAR ISI...........................................................................................................iv
DAFTAR GAMBAR.............................................................................................vii
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................viii
BAB I.......................................................................................................................1
PENDAHULUAN...................................................................................................1
1. Latar Belakang.................................................................................................1
2. Rumusan Masalah............................................................................................4
3. Tujuan Penelitian..............................................................................................4
4. Manfaat Penelitian............................................................................................4
5. Keaslian Penelitian...........................................................................................5
BAB II......................................................................................................................6
TINJAUAN PUSTAKA..........................................................................................6
2.1 Sereh Wangi (Cymbopogon nardus L)...........................................................6
2.1.1 Klasifikasi................................................................................................6
2.1.2 Morfologi.................................................................................................6
2.1.3 Kandungan Kimia....................................................................................8
2.1.4 Kegunaan...............................................................................................12
2.2 Ekstraksi.......................................................................................................12
2.2.1 Simplisia................................................................................................12
2.2.2 Pengeringan...........................................................................................13
2.2.3 Metode Penyarian..................................................................................15
2.2.4 Pelarut....................................................................................................18
2.2.5 Ekstrak...................................................................................................20
2.3 Tinjauan Tentang Hewan Uji Mencit...........................................................22
2.3.1 Klasifikasi..............................................................................................23
2.3.2 Biologi...................................................................................................23
iv
2.3.3 Cara Penyuntikan Intraperitoneal pada Mencit.....................................23
2.3.4 Tinjauan Tentang Analgesik.....................................................................23
1. Pengertian Nyeri.........................................................................................23
2. Klasifikasi Nyeri.........................................................................................24
3. Patofisiologi Nyeri......................................................................................26
4. Obat Antinyeri (Analgesik)........................................................................27
2.3.5 Asam Asetat..............................................................................................29
2.4 Kerangka Teori.............................................................................................30
2.5 Kerangka Konseptual...................................................................................31
2.6 Hipotesis.......................................................................................................32
BAB III..................................................................................................................33
METODE PENELITIAN.......................................................................................33
3.1 Desain dan Rencana Penelitian....................................................................33
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian......................................................................33
3.3 Populasi dan Sampel....................................................................................33
3.3.1 Populasi..................................................................................................34
3.3.2 Sampel...................................................................................................34
3.4 Variabel Penelitian.......................................................................................34
3.4.1 Variabel Utama......................................................................................34
3.4.2 Definisi Operasional Variabel...............................................................35
3.5 Alat, Bahan dan Hewan Uji..........................................................................35
3.5.1 Alat Penelitian.......................................................................................35
3.5.2 Bahan Penelitian....................................................................................36
3.5.3 Hewan Uji..............................................................................................36
3.6 Jalannya Penelitian.......................................................................................36
3.6.1 Pengambilan Sampel.............................................................................36
3.6.2 Determinasi Tanaman............................................................................36
3.6.3 Pembuatan Serbuk Batang Sereh Wangi...............................................36
3.6.4 Pengujian Kadar Kelembaban...............................................................37
3.6.5 Pembuatan Ekstrak Etanol Batang Sereh Wangi...................................37
3.6.6 Identifikasi Kandungan Kimia...............................................................37
3.6.7 Penetapan Dosis.....................................................................................39
v
3.8 Analisis Data................................................................................................41
3.9 Prosedur Penelitian.......................................................................................43
DAFTAR PUSTAKA............................................................................................44
LAMPIRAN...........................................................................................................48
vi
DAFTAR GAMBAR
DAFTAR LAMPIRAN
vii
viii
BAB I
PENDAHULUAN
1. Latar Belakang
Nyeri adalah pengalaman sensoris dan emosional yang tidak
menyenangkan yang disebabkan oleh kerusakan jaringan. Keadaan psikis dapat
mempengaruhi nyeri, contohnya emosi dapat menimbulkan sakit kepala atau juga
dapat memperberatnya. Ambang rasa nyeri bagi tiap orang berbeda-beda (Tjay &
Rahardja, 2015). Rasa sakit atau nyeri merupakan tanda bagi seseorang bahwa
terdapat bagian tubuh yang sakit, yang merupakan suatu gejala, yang fungsinya
adalah melindungi serta memberikan tanda bahaya mengenai adanya gangguan-
gangguan didalam tubuh seperti peradangan, infeksi kuman atau kejang otot. Rasa
nyeri dapat timbul akibat adanya rangsangan mekanis ataupun kimiawi yang dapat
menimbulkan kerusakan pada jaringan dan melepaskan zat-zat tertentu yang
disebut mediator (perantara) nyeri seperti bradikinin, histamin, serotonin, dan
prostaglandin (Auliah, N. et al., 2019).
Survei yang dilakukan oleh Lumunon, N. S., et al (2015) diketahui
prevalensi nyeri akut di Inggris sebesar 25% pada wanita dan 17% pada pria yang
artinya prevelensi nyeri akut yang terjadi pada wanita lebih tinggi di
bandingankan pada wanita. The Chronic Pain Coalition menyebutkan bahwa
nyeri kronis dialami sekitar 7,8 juta orang pada segala usia di Inggris (Sinda, I. T.,
2018). Penelitian Agfiandi, B. D. (2015), di sebuah Rumah Sakit di dapatkan
prevalensi nyeri neuropatik pada wanita sebesar 66,85% dan pada pria sebesar
33,15%. Untuk prevalensi penyakit di Indonesia berdasarkan Riset Kesehatan
Dasar tahun 2018 bahwa prevalensi penyakit sendi berdasarkan diagnosis pada
penduduk umur > 15 tahun di Indonesia sebesar 7,3% dan berdasarkan diagnosis
dokter pada umur > 15 tahun, untuk laki-laki sebesar 6,1% dan untuk perempuan
sebesar 8,5%. Sedangkan pada provinsi Nusa Tenggara Timur, prevalensi
penyakit sendi berdasarkan diagnosis pada penduduk umur > 15 tahun sebesar
3,2% (Riskesdas, 2018).
Analgesik adalah senyawa yang dapat menekan fungsi sistem saraf pusat
secara selektif, digunakan untuk mengurangi rasa sakit tanpa mempengaruhi
kesadaran (Rahmatia, R., 2018). Berdasarkan efek farmakologis, obat analgesik
2
obat. Sereh wangi memiliki khasiat yang banyak, diantaranya yaitu sebagai obat
sakit kepala, batuk, nyeri lambung, diare, penghangat badan, penurun panas, dan
pengusir nyamuk (Hendrik, G. et al., 2013)
Penelitian yang dilakukan oleh Sentat, T., et al (2018) dengan judul uji
aktivitas analgesik ekstrak etanol daun sereh wangi (Cymbopogon nardus(L))
pada mencit putih (Mus muculus L) jantan yang terinduksi asam asetat
menunjukan hasil ekstrak etanol daun sereh wangi dapat memberikan aktivitas
analgesik yang paling optimal pada dosis 400mg/kg BB atau 8mg/20g BB mencit
dikarenakan terdapat kandungan flavanoid, tanin dan saponin. Dalam penelitian
yang dilakukan oleh Muttalib, S., et al (2018) tanaman sereh wangi memiliki
kandungan kimia diantaranya fenolat, tanin, flavanoid, steroid, saponin dan
karbohidrat. Selain itu penelitian yang dilakukan oleh G. Hendrik., et al (2013)
menunjukan bahwa ekstrak kasar methanol pada batang sereh wangi positif
mengandung flavanoid, terpenoid dan fenolik yang artinya batang sereh wangi
juga dicurigai dapat memberikan aktivitas analgesik.
Kandungan kimia yang dimiliki tanaman sereh wangi, khususnya pada
bagian batang menunjukan bahwa batang sereh wangi berpotensi sebagai bahan
obat, salah satunya yaitu aktivitas sebagai analgesik. Namun penelitian terkait
batang sereh wangi sebagai analgesik masih sangat sedikit, oleh karena itu peneliti
tertarik untuk melakukan penelitian mengenai uji aktivitas analgesik ekstrak
etanol batang sereh wangi pada mencit putih jantan yang terinduksi asam asetat.
4
2. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dirumuskan rumusan
masalah sebagai berikut :
1. Apakah ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus)
memiliki aktivitas analgesik pada mencit (Mus musculus) putih jantan
yang terinduksi asam asetat ?
2. Berapakah dosis ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus)
yang paling optimal dalam memberikan aktivitas analgesik pada mencit
(Mus musculus) putih jantan yang terinduksi asam asetat ?
3. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui aktivitas ekstrak etanol batang sereh wangi
(Cymbopogon Nardus) pada mencit (Mus musculus) putih jantan yang
terinduksi asam asetat.
2. Untuk mengetahui berapa dosis ekstrak etanol batang sereh wangi
(Cymbopogon Nardus) yang paling optimal (8mg/gBB, 12mg/gBB dan
16mg/gBB) dalam memberikan aktivitas analgesik pada mencit (Mus
muculus) putih jantan yang terinduksi asam asetat.
4. Manfaat Penelitian
Adapun manfaat dari penelitian ini yaitu :
1. Manfaat penelitian bagi Masyarakat
Penelitian ini dapat menjadi pengetahuan terhadap masyarakat dalam
mengembangkan obat tradisional, terutama dalam penggunaan batang
sereh wangi.
2. Manfaat penelitian bagi Institusi
Penelitian ini dapat menjadi rujukan atau sumber untuk di kembangkan
dalam penelitian lain.
3. Manfaat penelitian bagi Peneliti
Penelitian ini dapat menjadi landasan untuk pengembangan obat
tradisional, khususnya obat analgesik.
5
5. Keaslian Penelitian
2.1.2 Morfologi
Tanaman sereh wangi merupakan tanaman yang termasuk kedalam
golongan rumput-rumputan (Poaceae) yang penanamannya tersebar di daerah sub
tropis dan tropis karena mampu beradaptasi dengan baik pada lahan marginal
seperti salin dan lahan berpasir (Rochmah, N., 2018).
1. Akar Sereh Wangi (Cymbopogon nardus)
Akar sereh wangi (Cymbopogon nardus) serabut jumlah cukup banyak,
mampu menyerap unsur hara dalam tanah cukup baik sehingga pertumbuhannya
lebih cepat (Suroso, 2018).
7
1. Flavanoid
Flavanoid berasal dari kata flavon, yang merupakan salah satu jenis yang
paling banyak dijumpai dan memiliki jumlah terbesar. Flavanoid merupakan
senyawa polifenol yang banyak tersebar di alam dan terdiri atas 15 atom karbon
(C). Meskipun banyak jenisnya, yaitu mencakup ribuan jenis namun pada
umumnya pembahasan hanya terfokus pada tiga jenis sebagai jenis yang paling
sering dipelajari yaitu flavonol, antosianin, dan flavon. Kerangkanya terdiri atas
satu cincin aromatik A, satu cincin aromatik B, dan cincin tengah heterosiklik
dengan kandungan oksigen. Terdapat dua C6 (cincin benzene) yang terdapat pada
rantai propane (C3) sehingga dapat membentuk C6-C3-C6. Struktur tersebut
kemudian dapat menghasilkan tiga struktur lainnya yaitu flavanoid, isoflavanoid,
dan neoflavanoid (Emelda, 2019).
Flavanoid merupakan metabolit sekunder dan banyak sekali ditemukan
pada jaringan tumbuhan. Flavanoid dapat berupa bentuk bebas sebagai aglikon
ataupun berada dalam bentuk glukosida karena memiliki rantai glukosa.
Kandungan yang dimiliki flavanoid memiliki efek farmakologis sebagai bahan
baku pembuatan obat-obatan tradisional karena memiliki beberapa khasiat baik
sebagai antifungi, antivirus, dan sebagainya (Emelda, 2019).
2. Terpenoid
Terpenoid merupakan suatu senyawa yang termasuk metabolit sekunder,
di mana merupakan modifikasi dari golongan terpena. Modifikasi disini bermakna
bahwa terpenoid merupakan derivat dari senyawa terpen melalui mekanisme
dehidrogenasi dan oksigenasi. Terpenoid lebih banyak ditemukan pada tumbuhan
meskipun sebagian kecil juga diketahui bersumber dari beberapa jenis hewan.
Terpenoid merupakan penyusun utama dari minyak atsiri, dan selain ditemukan
dalam keadaan bebas, seringkali terpenoid berada dalam bentuk aglikosida
ataupun glikosil ester (Emelda, 2019).
Terpenoid terdiri dari beberapa unit isoprene (2-metil-1,3-butadiena), dan
secara umum memiliki struktur siklik dan gugus fungsi yang berjumlah satu atau
lebih. Kerangka karbonnya dibangun oleh setidaknya dua unit C-5 tersebut
(isoprene), dan bahkan lebih. Ikatan yang terjadi antar unit-unit isopren mengikuti
suatu keteraturan dalam kaidah yang disebut kaidah isoprene. Dalam rangkaian
10
ini, kepada suatu unit akan berikatan dengan ekor dari unit yang lainnya. Apabila
terdapat satu atau beberapa ikatan antara kepala dan ekor dari unit-unit isopren
yang hilang maka akan menyebabkan terjadinya suatu penyimpangan. Perlu
diketahui bahwa di dalam perbedaan struktur yang ditunjukkan beberapa
kelompok terpenoid akan ditentukan oleh beragam reaksi yang terjadi, baik itu
siklikasi, mekanisme penataan ulang, maupun terjadinya perubahan gugus fungsi.
Kenyataan bahwa jumlah dari unit isopren yang membangun kerangka struktur
dari terpenoid memiliki beberapa jenis yang beragam. Unit C-5 pada kerangka
karbon terpenoid disebut isopren karena memang kerangka tersebut sama dengan
senyawa isopren. Terpenoid memiliki kecenderungan untuk larut dalam lemak.
Beberapa tempat yang sering kali menjadi sumber keberadaan terpenuhi pada
tumbuhan adalah vakuola sel, sitoplasma, dan getah (Emelda, 2019).
Terpenoid merupakan senyawa yang tersusun atas atom karbon (C),
hidrogen (H), dan oksigen (O), meski terkadang hanya mengandung atom karbon
(C) dan hidrogen (H) saja. Secara umum biosintesa dari terpenoid dengan
terjadinya 3 reaksi dasar yaitu pembentukan isoprena aktif yang berasal dari asam
asetat melalui asam mevalonat, penggabungan kepala dan ekor dari unit isopren
sehingga akan membentuk mono-, seskui-, di-, sester-, dan poli-terpenoid, serta
penggabungan ekor dan ekor dari unit C-15 atau C-20 menghasilkan triterpenoid
dan steroid (Emelda, 2019).
3. Tanin
Tanin atau nama lainnya adalah asam tanat (terutama merujuk pada tanin
yang berasal dari tumbuh-tumbuhan) merupakan senyawa organik kompleks dan
sekaligus merupakan senyawa polifenol yang memiliki berat molekul tinggi (yaitu
>1000) yang terdiri dari gugus hidroksi ataupun gugus-gugus lain seperti
karboksil. Senyawa tannin tersusun dari unsure-unsur meliputi karbon (C),
hidrogen (H), dan oksigen (O). tannin yang terkandung dalam tumbuhan
seringkali memberikan rasa dan aroma khusus tertentu karena kandungan fenol
yang dimilikinya. Kandungan fenol ini memiliki gugus OH (Emelda, 2019).
Tanin merupakan senyawa yang dapat bereaksi ataupun menggumpalkan
senyawa-senyawa organic lain seperti protein, asam amino, dan alkaloid sehingga
dapat membentuk suatu kompleks, missal kompleks protein. Hal ini dikarenakan
11
4. Saponin
Saponin merupakan salah satu jenis dari metabolit sekunder yang banyak
ditemui pada tumbu-tumbuhan, meskipun juga dapat ditemukan pada beberapa
jenis hewan, seperti beberapa jenis hewab laut tingkat rendah atau mungkin juga
pada bakteri. Saponin merupakan senyawa yang memiliki beragam sifat kimia
serta khasiat terutama jika digunakan di dalam pembuatan obat tradisional.
Saponin memiliki bagaian utama berupa turunan triterten dengan sedikit steroid,
dimana residu gula dihubungkan dengan gugus –OH yang biasanya adalah C3-OH
dari aglikon (monodesmoside saponin) dan jarang menggunakan 2 gugus OH atau
satu gugus OH dan satu gugus karboksil (bis-desmiside saponin). Saponin juga
dikenal sebagai surfaktan alami, dimana untuk mengidentifikasinya dapat
dilakukan dengan menambahkan air sehingga akan muncul busa sebagai akibat
dari adanya glikosida, di mana glikosida tersebut dapat terhidrolisis sehingga
menghasilkan glukosa dan aglikon. Busa yang dihasilkan saponin merupakan busa
yang stabil sehingga tidak mudah menghilang (Emelda, 2019).
Saponin banyak dimanfaatkan karena memiliki potensi dan kecenderungan
sebagai antivirus dan antijamur, kemudian karena kandungan yang dimilikinya,
saponin juga dapat bersifat racun terutama untuk beberapa jenis organism seperti
pada ikan dan beberapa jenis bintang laut lainnya. Beberapa factor yang dapat
mempengaruhi aktivitas biologi dari saponin diantaranya adalag gugus polar dari
aglikon, kelas aglikon, ataupun jenis karbohidrat yang diikat. Di mana diantaranya
saponin dapat digunakan dalam produksi hormon steroid, meski dalam kadar
12
tertentu dapat menyebabkan terjadinya lisis pada sel, sebagai contoh adalah
terjadinya hemolisis pada sel darah merah. Karena sifat tersebut juga menjadikan
saponin dapat dimanfaatkan sebagai antibakteri karena sifatnya yang dapat
merusak sel (Emelda, 2019).
2.1.4 Kegunaan
Beberapa jenis tanaman sereh wangi digunakan sebagai bahan analgesik,
haemolitik, atau sebagai antizymatik serta sedatif dan stimulant untuk obat sakit
perut, minyak angin, bahan baku sampo, dan sebagai bahan baku lotion untuk
mencegah gigitan serangga (Sulaswaty, A., et al. 2019). Tanaman sereh dapat
digunakan sebagai bahan makanan, obat, dan aromaterapi. Tanaman sereh jika
dikonsumsi sebagai obat dapat bermanfaat sebagai analgenik, mengobati sakit
kepala, nyeri lambung, haid tidak teratur hingga bengkak setelah melahirkan
(Basuki, A. 2020).
Menurut Sulaswaty (2019), pada dasarnya tanaman sereh wangi
manfaatnya dikelompok sebagai berikut :
1. Bahan aromaterapi
2. Pewangi ruangan
3. Pelancar pernapasan
4. Minyak pijat
5. Obat nyamuk
6. Profuk kecantikan
7. Pelepas stress
8. Perfume
9. Obat tradisional dan kesehatan
10. Bioadiktif, bahan bakar minyak
2.2 Ekstraksi
2.2.1 Simplisia
Pembuatan serbuk simplisia merupakan proses awal pembuatan ekstrak.
Serbuk simplisia dibuat dari simplisia utuh atau potongan-potongan halus
simplisia yang sudah dikeringkan melalui proses pembuatan serbuk dengan suatu
alat tanpa menyebabkan kerusakan atau kehilangan kandungan kimia yang
13
dibutuhkan dan diayak hingga diperoleh serbuk dengan derajat kehalusan tertentu.
Derajat kehalusan serbuk simplisia terdiri dari serbuk sangat kasar, kasar, agak
kasar, halus dan sangat halus. Simplisia atau herbal adalah bahan alam yang telah
dikeringkan yang digunakan untuk pengobatan dan belum mengalami pengolahan.
Kecuali dinyatakan lain suhu pengeringan simpiisia tidak lebih dari 60°. Simplisia
segar adalah bahan alam segar yang belum dikeringkan (DepKes, 2008).
Berdasarkan asalnya, simplisia dibagi menjadi 3 yaitu :
1. Simplisia Nabati
Simplisia nabati adalah simplisa berupa tanaman utuh, bagian tanaman,
atau eksudat tanaman. Eksudat tanaman ialah isi sel yang secara spontan keluar
dari tanaman atau isi sel yang dengan cara tertentu dikeluarkan dari selny, atau
zat-zat nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya dan
belum berupa zat kimia murni.
2. Simplisia Hewani
Simplisia hewani adalah simplisia yang berupa hewan utuh, bagian hewan,
atau zat-zat berguna yang dihasilkan oleh hewan dan belum berupa zat kimia
murni.
2.2.2 Pengeringan
Pemanfaatan tanaman obat sebagai bahan penelitian, dimulai dengan dua
tahap awal yang penting dalam pengelolahan senyawa bioaktif yaitu pra-ekstraksi
dan ekstrasi. Pra-ekstraksi merupakan tahapan dalam mempelajari dan
mempersiapkan tanaman obat sebelum dilakukannya ekstraksi. Sedangkan,
ekstraksi adalah proses pemisahan suatu senyawa aktif menggunakan pelarut yang
sesuai. Hal lain yang juga dapat mempengaruhi pengawetan fitokimia dalam
ekstrak akhir yaitu penggilingan dan pengeringan (Aswanida, 2015).
14
1. Pengeringan Udara
Pengeringan udara biasanya berlangsung 3-7 hari hingga bulan atau tahun
tergantung pada jenis sampel yang dikeringkan. Sampel tanaman biasanya daun
tanaman dengan batang diikat bersama dan digantung sehingga terjadi kontak
antara tanaman dengan udara pada suhu kamar. Metode pengeringan tidak
menggunakan suhu tinggi, oleh karena itu pengeringan ini dapat digunakan untuk
senyawa-senyawa yang tidak tahan terhadap panas namun pengeringan udara
membutuhkan waktu yang lebih lama dibandingkan dengan pengeringan lainnya
serta dapat mengalami kontaminasi pada kondisi suhu yang tidak stabil.
2. Pengeringan Mikrowave
Pengeringan mikrowave menggunakan radiasi elektromagnetik yang
memiliki medan listrik dan magnet. Medan listrik menyebabkan pemanasan
simultan melalui rotasi dipolar, pelurusan pada medan listrik dari molekul yang
memiliki momen dipol permanen atau induksi, dan induksi ionik, yang
menghasilkan osilasi molekul. Osilasi menyebabkan tumbukan antar molekul dan
menghasilkan pemanasan cepat dari sampel secara bersamaan. Metode ini dapat
mempersingkat waktu pengeringan tetapi terkadang menyebabkan degradasi
fitokimia.
3. Pengeringan Oven
Pengeringan oven merupakan metode pre-ekstraksi lain yang
menggunakan energi panas untuk menghilangkan uap air dari sampel. Persiapan
sampel ini dianggap sebagai salah satu proses ternal termudah dan cepat yang
dapat mempertahankan fitokimia. Waktu ekstraksi yang lebih pendek diperoleh
dengan menggunakan metode ini.
b. Ekstraksi cair-cair
Ekstraksi ini dilakukan apabila substansi yang akan diekstraksi
berbentuk cairan di dalam campurannya.
3. Infusa
Infusa merupakan sediaan cair yang dibuat dengan cara menyari
simplisia nabati dengan air pada suhu 90°C selama 15 menit.
Kecuali dinyatakan lain dilakukan dengan cara sebagai berikut :
“Simplisia dengan derajat kehalusan tertentu dimasukkan ke dalam
panci infusa, kemudian ditambahkan air secukupnya. Panaskan
campuran di atas penangas air selama 15 menit dihitung mulai
suhu 90°C sampai sekali-sekali diaduk. Serkai selagi panas
menggunakan kain flannel, tambahkan air panas secukupnya
melalui ampas sehingga diperoleh volume infus yang
dikehendaki”.
4. Digestasi
Digitasi adalah proses ekstraksi yang cara kerjanya hampir sama
dengan maserasi, hanya saja digestasi menggunakan pemanasan
rendah pada suhu 30-40°C. Metode ini biasanya digunakan untuk
simplisia yang tersari baik pada suhu biasa.
5. Dekokta
Proses penyaringan secara dekokta hampir sama dengan infusa,
perbedaannya hanya terletak pada lamanya waktu pemanasan.
Waktu pemanasan pada dekokta lebih lama dibanding metoda
infusa, yaitu 30 menit di hitung setelah suhu mencapai 90°C.
Metode ini sudah sangat jarang digunakan karena selain proses
penyaringannya yang kurang sempurna dan juga tidak dapat
digunakan untuk mengekstraksi senyawa yang bersifat termolabil.
6. Refleks
Refluks merupakan proses ekstraksi dengan pelarut pada titik didih
pelarut selama waktu dan jumlah pelarut tertentu dengan adanya
pendingin balik. Proses ini umumnya dilakukan 3-5 kali
pengulangan pada residu pertama, sehingga termasuk proses
ekskresi yang cukup sempurna.
18
7. Soxhletasi
Proses soxhletasi merupakan proses ekstraksi panas menggunakan
alat khusus berupa ekstraktor. Suhu yang digunakan lebih rendah
dibandingkan dengan suhu pada metode refluks.
3. Berdasarkan proses pelaksanaan
a. Ekstraksi berkesinambungan (Continous Extraction)
Pada proses ekstraksi ini, pelarut yang sama dipakai berulang-ulang
sampai proses ekstraksi selesai.
b. Ekstraksi bertahap (Bath Extraction)
Dalam ekstraksi ini pada setiap tahap ekstraksi selalu dipakai pelarut
yang selalu baru sampai proses ekstraksi selesai.
4. Berdasarkan metode ekstraksi
a. Ekstraksi tunggal
Merupakan proses ekstraksi dengan cara mencampurkan bahan yang
akan diekstrak sebanyak satu kali dengan pelarut. Pada ekstraksi ini
sebagian dari zat aktif akan terlarut dalam pelarut sampai mencapai suatu
keseimbangan. Kekurangan dari ekstraksi dengan cara seperti ini adalah
rendahnya rendemen yang dihasilkan.
b. Ekstraksi multi tahap
Merupakan suatu proses ekstraksi dengan cara mencampurkan bahan
yang akan diekstrak beberapa kali dengan pelarut yang baru dalam
jumlah yang sama banyak. Ekstrak yang dihasilkan dengan cara ini
memiliki rendemen lebih tinggi dibandingkan ekstraksi tunggal, karena
bahan yang diekstrak mengalami beberapa kali campuran dan pemisahan.
2.2.4 Pelarut
1. Pengertian Pelarut
Pelarut pada umumnya adalah zat yang berbeda pada larutan dengan
jumlah yang besar, sedangkan zat lainnya dianggap sebagai zat terlarut. Pelarut
yang digunakan pada proses ekstraksi haruslah merupakan pelarut terbaik untuk
zat aktif yang terdapat dalam sampel atau simplisia, sehingga zat aktif dapat
dipisahkan dari simplisia dan senyawa lainnya yang ada dalam simplisia tersebut.
19
Hasil akhir dari ekstraksi ini adalah didapatkannya ekstrak yang hanya
mengandung sebagian besar dari zat aktif yang diinginkan (Marjoni, 2016).
Menurut Marjoni (2016) pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi
memiliki beberapa sifat penting. Diantaranya sifat-sifat penting tersebut antara
lain :
1. Kemampuan melarutkan (solubility).
2. Kecepatan menguap.
3. Trayek didih.
4. Berat jenis (specific gravity)
5. Flashpoint.
2. Pembagian Pelarut
Menurut Merjoni (2016) pembagian pelarut berdasarkan kepolarannya, dibagi
menjadi 3 yaitu :
1. Pelarut polar
Pelarut polar adalah senyawa yang memiliki rumus umum ROH dan
menunjukan adanya atom hydrogen yang menyerang atom elektronegatif
(Oksigen). Pelarut dengan tingkat kepolaran yang tinggi merupakan
pelarut yang cocok baik untuk semua jenis zat aktif(universal) karena di
samping menarik senyawa yang bersifat polar, pelarut polar juga tetap
dapat menarik senyawa-senyawa dengan tingkat kepolaran lebih rendah.
Contoh pelarut polar diantaranya : air, methanol, etanol dan asam asetat.
2. Pelarut semi-polar
Pelarut semi-polar adalah pelarut yang memiliki molekul yang tidak
mengandung ikatan O-H. Pelarut dalam kategori ini, semuanya memiliki
ikatan dipol yang besar. Ikatan dipol ini biasanya merupakan ikatan
rangkap antara karbon dengan oksigen atau nitrogen. Pelarut semi-polar
memiliki tingkat kepolaran yang lebih rendah dibandingkan dengan
pelarut polar. Pelarut ini baik digunakan untuk melarutkan senyawa-
senyawa yang juga bersifat semipolar dari tumbuhan. Contoh pelarut semi-
polar : aseton, etil asetat, DMSO dan di-kloro metan.
20
3. Pelarut nonpolar
Pelarut nonpolar merupakan senyawa yang memiliki konstanta dielektrik
yang rendah dan tidak larut dalam air. Pelarut ini baik digunakan untuk
menarik senyawa-senyawa yang sama sekali tidak larut dalam pelarut
polar seperti minyak. Contoh pelarut non polar : heksana, kloroform dan
eter.
3. Persyaratan Pelarut
Persyaratan pelarut yang ideal untuk ekstraksi, menurut Marjoni (2016) yaitu :
1. Selektif
Artinya pelarut dapat melarutkan semua zat dengan cepat, sempurna, dan
sedikit mungkin melarutkan bahan lain yang tidak dibutuhkan.
2. Mempunyai titik didih yang rendah dan seragam.
3. Tidak toksik dan ramah lingkungan.
4. Mempu mengekstrak semua senyawa dalam simplisia.
5. Stabil secara fisik dan kimia.
6. Bersifat inert dan tidak mudah terbakar.
7. Mudah untuk dihilangkan dari ekstrak.
8. Tidak bereaksi dengan senyawa-senyawa dalam simplisia yang diekstrak.
9. Murah/ekonomis.
2.2.5 Ekstrak
1. Pengertian Ekstrak
Ekstrak adalah suatu produk hasil pengambilan zat aktif melalui proses
ekstraksi menggunakan pelarut, dimana pelarut yang digunakan diuapkan kembali
sehingga zat aktif ekstrak menjadi pekat. Bentuk dari ekstrak yamg dihasilkan
dpat berupa ekstrak kental atau ekstrak kering tergantung jumlah pelarut yang
diuapkan (Marjoni, 2016).
2. Tujuan Ekstrak
Menurut Marjoni (2016), tujuan dilakukannya ekstraksi adalah untuk
menarik semua zat aktif dari komponen kimia yang terdapat dalam simplisia.
Dalam menentukan tujuan dari suatu proses ekstraksi, perlu diperhatikan beberapa
kondisi dan pertimbangan sebagai berikut :
21
3. Pembagian Ekstrak
Menurut Farmakope Herbal Indonesia I (2008), ekstrak dapat berupa
sediaan :
a. Ekstrak cair
Ekstrak cair merupakan ekstrak yang diperoleh dari hasil penyarian bahan
alam dan masih mengandung pelarut.
22
b. Ekstrak kental
Ekstrak kental merupakan ekstrak yang telah mengalami proses penguapan
dan sudah tidak mengandung cairan pelarut lagi, tetapi konsistensinya tetap
cair pada suhu kamar.
c. Ekstrak kering
Ekstrak kering merupakan ekstrak yang telah mengalami proses penguapan
dan tidak lagi mengandung pelarut dan berbentuk padat (kering).
4. Metode Pengentalan/Pengeringan Ekstrak
Menurut Saifudin (2014), ada beberapa metode pengentalan/pengeringan
ekstrak, yaitu sebagai berikut :
a. Diuapkan di atas water bath (penguapan) : baik system terbuka maupun
tertutup. Sistem tertutup dilakukan untuk mencegah penyebaran pelarut yang
dapat mencemari lingkungan.
b. Diuapkan dengan rotary evaporator. Digunakan untuk semua pelarut organic.
Tidak cocok untuk bahan berair karena air membutuhkan waktu penguapan
yang sangat lama. Saat ini sudah ada multirotary evaporator yang lebih efisien
karena enam sampel dapat dikeringkan secara bersamaan.
Untuk ekstrak yang mengandung air (karena palerut menggunakan kombinasi
air), pemekatan bias dilakukan dengan rotary evaporator dengan suhu 50°C,
dengan volume pengisian labu 1/3 bagian untuk mencegah terjadinya buih
yang mudah tersedot keatas.
c. Liofilisasi (freeze dryer) : digunakan untuk bahan yang berair tidak untuk
pelarut organik.
d. Dialiri dengan gas N2 : untuk bahan yang termolabil, jumlah rendemen kecil.
2.3.1 Klasifikasi
Klasifikasi mencit (Mus mucullus) menurut Myers, et al (2019) adalah
sebagai berikut :
Kingdom : Animalia
Filum : Chordata
Subfilum : Vertebrata
Kelas : Mamalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Genus : Mus
Species : Mus musculus
2.3.2 Biologi
Mencit yang paling sering digunakan untuk penelitian biomedis adalah
Mus muculus. Berbeda dengan hewan-hewan lainnya, mencit tidak memiliki
kelenjer keringat. Pada umur empat minggu berat badannya mencapai 18-20
gram. Jantung terdiri dari empat ruang dengan dinding atrium yang tipis dan
dinding ventrikel yang lebih tebal. Peningkatan temperature tubuh tidak
mempengaruhui tekanan darah, sedangkan frekuensi jantung, cardiac output
berkaitam dengan ukuran tubuhnya. Mencit memiliki karakter yang lebih aktif
pada malam hari daripada siang hari. Traktus respiratorius terdiri dari tiga bagian
yaitu anterior, intermediate, dan posterior (Kusumawati, 2004).
2.3.3 Cara Penyuntikan Intraperitoneal pada Mencit
Pemberian materi secara intraperitoneal sering dilakukan pada kelompok
rodenitia, seperti mencit. Tempat suntikan pada umumnya di kuadran kiri bawah
abdomen untuk menghindari organ-organ vital. Jarum dimasukkan sejajar dengan
kakinya kemudian didorong melalui dinding abdomen ke dalam rongga peritoneal
(Kusumawati, 2004).
2.3.4 Tinjauan Tentang Analgesik
1. Pengertian Nyeri
Nyeri adalah pengalaman sensorik dan emosional yang tidak
menyenangkan akibat kerusakan jaringan, baik aktual maupun potensial atau yang
digambarkan dalam bentuk kerusakan tersebut. Nyeri adalah suatu pengalaman
sensorik yang multidimensional. Fenomena ini dapat berbeda dalam intensitas
24
c. Nyeri Neuropatik
Merupakan nyeri yang terjadi akibat adanya lesi sistem saraf perifer
(seperti pada neuropati diabetika, post-herpetik neuralgia, radikulopati
lumbal, dll) atau sentral (seperti pada nyeri pasca cedera medula spinalis,
nyeri pasca stroke, dan nyeri pada sklerosis multipel). Bentuk sensitivitas
nyeri ini ditandai dengan tidak ditemukannya abnormalitas perifer dan
defisit neurologis.
d. Nyeri Fungsional
Nyeri fungsional disebabkan oleh respon abnormal sistem saraf terutama
hipersensitifitas aparatus sensorik. Beberapa kondisi umum yang memiliki
gambaran nyeri tipe ini antara lain fibromialgia, irritable bowel syndrome,
beberapa bentuk nyeri dada non-kardiak, dan nyeri kepala tipe tegang.
Tidak diketahui mengapa pada nyeri fungsional susunan saraf
menunjukkan sensitivitas abnormal atau hiperresponsif.
3. Patofisiologi Nyeri
Nociceptors menerima rangsangan nyeri pada kulit menyebabkan
terjadinya intesitas tinggi maupun rendah seperti perenggangan dan suhu serta
oleh lesi jaringan. Sel yang mengalami nekrotik akan merilis K+ dan protein
intraseluler. Peningkatan kadar K+ ekstraseluler akan menyebabkan depolarisasi
nociceptor, sedangkan protein pada beberapa keadaan akan menginfiltrasi
mikroorganisme sehingga menyebabkan peradangan / inflamasi. Akibatnya,
mediator nyeri dilepaskan seperti leukotrien, prostaglandin E2, dan histamin yang
akan merangasng nosiseptor sehingga rangsangan berbahaya dan tidak berbahaya
dapat menyebabkan nyeri (hiperalgesia atau allodynia). Selain itu lesi juga
mengaktifkan faktor pembekuan darah sehingga bradikinin dan serotonin akan
terstimulasi dan merangsang nosiseptor. Jika terjadi oklusi pembuluh darah maka
akan terjadi iskemia yang akan menyebabkan akumulasi K + ekstraseluler dan H
+ yang selanjutnya mengaktifkan nosiseptor. Histamin, bradikinin, dan
prostaglandin E2 memiliki efek vasodilator dan meningkatkan permeabilitas
pembuluh darah. Hal ini menyebabkan edema lokal, tekanan jaringan meningkat
dan juga terjadi Perangsangan nosisepto. Bila nosiseptor terangsang maka mereka
melepaskan substansi peptida P (SP) dan kalsitonin gen terkait peptida (CGRP),
27
yang akan merangsang proses inflamasi dan juga menghasilkan vasodilatasi dan
meningkatkan permeabilitas pembuluh darah. Vasokonstriksi (oleh serotonin),
diikuti oleh vasodilatasi, mungkin juga bertanggung jawab untuk serangan
migrain. Peransangan nosiseptor inilah yang menyebabkan nyeri (Bahrudin,
2017).
4. Obat Antinyeri (Analgesik)
A. Pengertian
Analgesik merupakan obat yang digunakan untuk mengurangi atau
menekan rasa nyeri tanpa menghilangkan kesadaran (Tjay dan Rahardja, 2015)
B. Penggolongan
Menurut Tjay & Rahardja (2015), atas dasar kerja farmakologisnya,
analgesik dibagi kedalm dua kelompok besar, yaitu :
1. Analgesik perifer (non-opioid)
Teridiri dari obat-obat yang tidak bersifat narkotik dan tidak bekerja
sentral. Secara kimiawi analgesik perifer dibagi menjadi beberapa
kelompok, yaitu :
a. Paracetamol
b. Salisilat : asetosal, salisilamida, dan benorilat
c. Penghambat prostaglandin : Ibuprofen
d. Derivat antranilat : Asam mefenamat dan glaferin
e. Derivat pirazolinon: Propifenazon, isopropyl-aminofenazon dan
metamizol
f. Lainnya : Benzidamin (Tantum)
2. Analgesik opioid
Khusus digunakan untuk menhalau rasa nyeri hebat, seperti pada
fraktur dan kanker. Atas dasar cara kerjanya, obat analgesik narkotik
dibagi kedalam tiga kelompok, yaitu :
a. Agonis opiat
Dibagi kedalam :
Alkaloida candu : morfin, kodein, heroin, dan nikomorfin.
28
3. Paracetamol
Paracetamol merupakan obat yang sering digunakan untuk mengobati
demam dan nyeri ringan seperti sakit kepala dan nyeri otot. Meskipun aman
dikonsumsi pada dosis terapeutik, namun overdosis obat yang disebabkan oleh
pemakaian jangka panjang ataupun penyalahgunaan masih sering terjadi.
Overdosis paracetamol akan mengakibatkan terjadinya nekrosis sel hepar daerah
sentrolobuler yang dapat menyebabkan gagal hepar akut (Rafita, et al., 2015).
Mekanisme kerja aspirin terutama adalah penghambatan sintesis
prostaglandin E2 dan tromboksan A2. Akibat penghambatan ini, maka ada tiga
aksi utama dari aspirin, yaitu:
a. Antiinflamasi, dikarena penurunan sintesisprostaglandin proinflamasi.
b. Analgesik, dikarena penurunan prostaglandin E2, akan menyebabkan
penurunan sensitisasi akhiran saraf nosiseptif terhadap mediator pro
inflamasi.
c. Antipiretik, karena penurunan prostaglandin E2 yang
bertanggungjawab terhadap peningkatan set point pengaturan suhu di
hipotalamus (Miladiyah, 2012)
Efek Samping:
Jarang terjadi efek samping, tetapi dilaporkan terjadi reaksi
hipersensitivitas, ruam kulit, kelainan darah (termasuk trombositopenia,
leukopenia, neutropenia), hipotensi juga dilaporkan pada infus, PENTING:
Penggunaan jangka panjang dan dosis berlebihan atau overdosis dapat
29
Nyeri
Pengobatan
Paracetamol
1. Flavanoid
2. Alkaloid
3. Saponin
Analisis
4. Terpenoid-
steroid
5. tanin
Hipotesis diterima
Hipotesis ditolak
2.6 Hipotesis
Berdasarkan landasan teori di atas, maka dapat dirumuskan hipotesis
sebagai berikut :
1. Ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) memiliki aktivitas
analgesik pada mencit (Mus musculus) putih jantan yang diinduksi asam asetat.
Ho : Ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) tidak memiliki
aktivitas analgesik pada mencit (Mus musculus) yang diinduksi asam
asetat.
Ha : Ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) memiliki
aktivitas analgesik pada mencit (Mus musculus) yang diinduksi asam
asetat.
Pengambilan keputusan :
Jika nilai signifikan uji One Way Anova < 0,05% maka Ho di tolak.
Jika nilai signifikan uji One Way Anova > 0,05% maka Ho di terima.
2. Ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) pada dosis tertentu dari
dosis uji memberikan aktivitas analgesik yang paling efektif pada mencit (Mus
musculus) yang diinduksi asam asetat.
Ho : ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) pada dosis
tertentu dari dosis uji tidak memberikan aktivitas analgesik yang paling
efektif pada mencit (Mus musculus) yang diinduksi asam asetat.
Ha : ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) pada dosis
tertentu dari dosis uji memberikan aktivitas analgesik yang paling efektif
pada mencit (Mus musculus) yang diinduksi asam asetat.
Pengambilan keputusan :
Jika nilai signifikan uji One Way Anova < 0,05% maka Ho di tolak.
Jika nilai signifikan uji One Way Anova > 0,05% maka Ho di terima.
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Desain dan Rencana Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian true experimental dengan posttest
only control design, yaitu suatu rancangan percobaan yang terdiri dari
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Pada penelitian ini digunakan 2
kelompok kontrol yaitu kelompok kontrol negatif dan kelompok kontrol
positif. Sedangkan kelompok perlakuan dibagi menjadi 3 kelompok yaitu
kelompok perlakuan I, kelompok perlakuan II dan kelompok perlakuan III .
Rancangan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut :
1. Kelompok kontrol negatif (-), akan diberikan suspensi Na CMC 0,5%.
2. Kelompok kontrol positif (+), akan diberikan Paracetamol dengan dosis
1,3 mg/20gBB mencit.
3. Kelompok perlakuan I, akan diberikan ekstrak etanol batang sereh wangi
dengan dosis 8mg/20g BB mencit.
4. Kelompok perlakuan II, akan diberikan ekstrak etanol batang sereh wangi
dengan dosis 12mg/20g BB mencit.
5. Kelompok perlakuan III, akan diberikan ekstrak etanol batang sereh wangi
dengan dosis 16mg/20g BB mencit.
Setelah 30 menit, mencit akan diinduksi dengan asam asetat 0,5% secara
intraperitoneal, kemudian diamati dan dicatat geliat dari mencit.
terhadap dependen tidak dipengaruhi oleh faktor luar yang tidak diteliti. Dalam
penelitian ini, yang menjadi variabel kontrol adalah kondisi fisik mencit, yang
meliputi berat badan dan jenis kelamin.
3.4.2 Definisi Operasional Variabel
a. Batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) merupakan bagian tanaman sereh
wangi yang memiliki ciri-ciri berwarna putih keunguan atau hijau
keunguan.
b. Metode maserasi adalah proses ekstraksi zat aktif yang dilakukan dengan
cara merendam serbuk simplisia batang sereh wangi menggunakan pelarut
etanol 96% selama 3 hari dalam suhu kamar dengan sesekali digojok dan
terhindar dari paparan sinar matahari.
c. Ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) adalah ekstrak
kental yang diperoleh dengan cara diekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan pelarut etanol 96% yang kemudian diuapkan menggunakan
rotary evaporator.
d. Aktivitas analgesik adalah aktivitas senyawa yang dapat digunakan untuk
menghilangkan rasa nyeri yang terjadi, dapat menggunakan obat
farmakologi atau ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus).
e. Geliat adalah respon mencit akibat pemberian senyawa inductor nyeri berupa
gerakan kontraksi otot perut dengan gerakan perenggangan, yaitu kaki
ditarik kebelakang.
f. Hewan percobaan adalah mencit putih jantan galur swiss webster yang
memiliki berat badan antara 20-30g.
g. Induksi asam asetat adalah metode yang digunakan untuk memicu terjadinya
nyeri pada mencit dengan menggunakan larutan asam asetat 0,5% yang
diberikan secara intraperitoneal.
pipet tetes, plat tetes, corong kaca, tabung reaksi, gelas ukur, beker gelas, kertas
saring, stopwatch, mortir dan stamper, sonde lambung dan rotary evaporator.
3.5.2 Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah batang sereh wangi
(Cymbopogon Nardus), etanol 96%, HCl pekat, serbuk Mg, HCl 1%, pereaksi
mayer, pereaksi wagner, HCl 2N, air panas, asam asetat glasial, H2SO4, FeCl3 1%,
Na CMC 0,5%, paracetamol, asam asetat 0,5% dan aquades.
3.5.3 Hewan Uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit putih jantan
dengan berat 20-30 g yang diperoleh dari Fakultas Kedokteran Hewan Universitas
Nusa Cendana Kupang.
BK
sebagai berikut : % RK = × 100 %
BB
Keterangan :
RK : Rendemen kering
BK : Berat kering
37
BB : Berat basah
3.6.4 Pengujian Kadar Kelembaban
Sebanyak 1g serbuk batang sereh wangi dimasukan kedalam alat moisture
analyzer, uji kelembaban dan nyalakan lampu pemanas pada suhu berkisar 105 0C.
Pengujian dilakukan selama 1 menit. Catat kadar kelembaban yang dihasilkan
oleh alat (Widia, I. et al 2018).
3.6.5 Pembuatan Ekstrak Etanol Batang Sereh Wangi (Cymbopogon Nardus)
Serbuk batang sereh wangi diekstraksi dengan menggunakan pelarut
etanol 96% dengan perbandingan 1:10 yaitu 200g serbuk batang sereh wangi
dilarutkan dalam 2L etanol 96% dalam wadah maserasi selama 3 hari sambil
sesekali dikocok.
Hasil maserasi disaring dan diuapkan menggunakan rotary evaporator
pada suhu 400C hingga diperoleh ekstrak kental batang sereh wangi. Untuk
menghitung presentasi rendemen ekstrak (% b/b) digunakan rumus :
BE
% RE = × 100 %
BSK
Keterangan :
RE : Rendemen ekstrak
BE : Berat ekstrak
BSK : Berat ekstrak kering
3.6.6 Identifikasi Kandungan Kimia
Identifikasi komponen fitokimia dalam ekstrak batang sereh wangi
(Cymbopogon Nardus) dilakukan dengan menggunakan uji tabung. Tujuan
dilakukannya identifikasi kandungan kimia adalah untuk mengetahui kandungan
kimia yang ada dalam ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus).
1. Uji Flavonoid
Ambil esktrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) sebanyak
0,5 gram masukan ke dalam tabung reaksi, lalu tambahkan dengan serbuk Mg dan
larutan Hcl pekat. Perubahan warna larutan menjadi merah bata menandakan
adanya flavanoid (Sopianti & Sary, 2018).
2. Uji Alkaloid
Ambil ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) sebanyak
0,5 gram tambahkan HCl 1% kemudian disaring. Filtrat dibagi menjadi tiga
38
5. Uji Tanin
Diambil 10 tetes ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus)
lalu, dimasukkan ke dalam tabung reaksi ditambahkan 1 sampai 2 tetes larutan
FeCl3 1%. Bila terbentuk warna biru tua atau hijau kehitaman memberikan
indikasi adanya tanin atau dapat juga dilakukan dengan cara diambil 10 tetes
ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) dimasukkan ke dalam
tabung reaksi lalu, ditambah 1 sampai 2 tetes larutan gelatin. Bila terdapat
endapan memberikan indikasi adanya tanin (Sentat & Pangestu, 2016).
3.6.7 Penetapan Dosis
1. Dosis ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus)
Dosis ekstrak etanol batang sereh wangi (Cymbopogon Nardus) yang
digunakan dalam penelitian ini dirujuk dari hasil penelitian yang dilakukan oleh
Sentat, et al., (2018). Dosis yang paling efektif pada penelitian tersebut adalah
400 mg/kg atau 8 mg/20 g BB mencit sehingga dalam penelitian ini dosis 400
mg/kg atau 8 mg/20 g BB mencit digunakan sebagai dosis untuk kelompok uji I.
Selanjutnya untuk mengetahui dosis kelompok uji II dan III dinaikan ½ dari dosis
awal sehingga menjadi 12 mg/20 g BB mencit untuk kelompok uji II dan
16mg/20g BB mencit untuk kelompok uji III. Pemberian larutan ekstrak pada
mencit dilakukan melalui rute peroral dengan volume pemberian untuk masing-
masing mencit adalah 0,5 ml/20 g BB mencit.
2. Dosis Paracetamol
Dosis paracetamol untuk mencit dalam penelitian ini diperoleh dari hasil
konversi dosis paracetamol untuk manusia dengan faktor konversi 0,0026. Dosis
paracetamol untuk manusia (BB 70 kg) adalah 500 mg , maka volume pemberian
peroral untuk masing-masing mencit adalah 1,3 mg/20 g BB. Perhitungan dosis
paracetamol dapat dilihat pada Lampiran 3.
3. Dosis Asam Asetat
Asam asetat yang digunakan dalam penelitian ini adalah asam asetat 0,5%.
Konsentrasi 0,5% dirujuk dari penelitian yang dilakukan oleh Sentat, et al.,
(2018). Pemberian larutan asam asetat pada mencit dilakukan melalui rute
intraperitonial dengan volume pemberian untuk masing-masing mencit adalah 0,5
ml/20 gBB. Perhitungan dosis asam asetat dapat dilihat pada Lampiran 4.
40
selang waktu 5 menit. Hitung rata-rata jumlah geliat mencit dan data disediakan
dalam bentuk tabel.
Setelah dilakukan pengamatan geliat pada masing-masing mencit,
dilakukan hitung daya proteksi (% P) kelompok perlakuan terhadap rasa nyeri
yang dihasilkan dan dilakukan perhitungan efektivitas analgesik (% E) dari
kelompok uji dibandingkan terhadap kelompok kontrol positif.
%P=100 %−{¿
% Proteksi zat uji
%E=( × 100 %)
% proteksi kontrol positif
kelompok perlakuan maka dilanjutkan dengan uji Post Hoc dengan teknik LSD
(Least Square Differences) dan Duncan.
3.9 Prosedur Penelitian
43
25 ekor mencit
Sulaswaty, A., et al. (2019). Quo Vadis Minyak Sereh Wangi Dan Produk
Turunannya. Jakarta : Lipi Press. (http://penerbit.lipi.go.id/data/naskah156
2653977.pdf di akses pada tanggal 9 Desember 2020). Hal. 6
Syakir, M. (2015). Peningkatan Produksi Herba dan Mutu Serai Wangi Dengan
Penambahan Nitrogen. Jurnal littri. 21(4) : 0853-8212
(t-1) (n-1) ≥ 15
Dengan :
(5-1) (n-1) ≥ 15
4n-4 ≥ 15
4n ≥ 19
n ≥ 4,75
Berdasarkan hasil perhitungan di atas, maka didapatkan jumlah hewan uji dalam
setiap kelompok adalah ≥ 5 ekor.
49
Volume pemberian yang ingin diberikan untuk mencit berat badan 20 g adalah
0,5 ml atau 12 mg/0,5 ml.
Volume total yang ingin dibuat adalah 15 ml.
50
12 mg
Penimbangan bahan ¿ × 15 ml=360 mg=0,36 g
0,5 ml
Volume pemberian untuk masing-masing mencit berdasarkan berat badan :
BB( g)
Volume pemberian ¿ × 0,5 ml
20 kg
3. Perhitungan penimbangan bahan untuk kelompok uji I dosis 16 mg/20 gBB
mencit
Volume pemberian yang ingin diberikan untuk mencit berat badan 20 g adalah
0,5 ml atau 16 mg/0,5 ml.
Volume total yang ingin dibuat adalah 15 ml.
16 mg
Penimbangan bahan ¿ × 15 ml=480 mg=0,48 g
0,5 ml
Volume pemberian untuk masing-masing mencit berdasarkan berat badan :
BB( g)
Volume pemberian ¿ × 0,5 ml
20 kg
51
1 ,3 mg
Berat tablet untuk mencit = × Berat rata−rata tablet ( mg )=… mg
500 mg
Volume pemberian yang diinginkan (untuk mencit dengan berat badan 20g)
adalah 0,5 ml atau 1,3 mg/0,5 ml
BB(g)
Volume pemberian : × 0 ,5 ml=…ml
20 g
M1 × V1 = M2 × V2
Dengan :
Konsentrasi asam asetat yang ingin dibuat dalam penelitian ini adalah 0,5%
dengan volume 100 ml. Konsentrasi asam asetat yang tersedia adalah 96%. Maka
volume pemberian asam asetat adalah :
M1 × V1 = M2 × V2
96 % ×V 1=0,5 % × 100 ml
0,5 % ×100 ml
V 1=
96 %
V 1=0,52 ml
Berdasarkan hasil perhitungan di atas, maka sebanyak 0,52 ml larutan asam asetat
dengan konsentrasi 96% diambil dan diencerkan dalam 100 ml aquades sehingga
diperoleh larutan asam asetat dengan konsentrasi 0,5%.
54
Konsentrasi Na CMC yang ingin dibuat adalah 0,5% dalam 100 ml aquades.
0 ,5 g 500 mg
Na CMC 0,5% = =
100 ml 100 ml
0 ,5 g
Penimbangan bahan = × 100ml=0 ,5 g
100 ml
BB(g)
Volume pemberian : × 0,5 ml=… ml
20 g
Mencit Berat Badan (g) Volume pemberian Na CMC 0,5% (ml)
I - -
II - -
III - -
IV - -
V - -
Prosedur kerja : Na CMC ditimbang sebanyak 0,5 g atau sama dengan 500 mg.
Dimasukkan ke dalam mortir dan ditambahkan sedikit air hangat untuk
mengembangkan Na CMC. Gerus Na CMC hingga larut. Pindahkan Na CMC ke
beker gelas dan tambahkan aquades hingga mencapai volume 100 ml.
55