Review Jurnal Antihistamin

Peringkas Yenita Kartika Putri

Nim G70121024
Tanggal Minggu 20 Agustus 2023
Penulis Sangilimuthu Alagar Yadav
Sathishkumar Ramalingam
Anitha Jabamalai Raj
Ravi Subban
Tahun Maret 2015
Judul Antihistamine from Tragia involucrata L. leaves
Jurnal J Komplemen Integr Med
Volume -
Abstrak Latar belakang yang dibahas dalam artikel ini adalah Obat
antihistamin sintetis menyebabkan berbagai efek samping untuk
mengatasi masalah ini dengan fitomedisin atau fitokonstituen alami.
Pengantar Pengantar pada artikel ini menjelaskan Histamin, salah satu molekul
yang paling penting, adalah mediator utama pada rinitis alergi (AR).
Hal ini adalah sifat vasoaktif yang melekat yang dilepaskan dari
butiran yang terkandung di dalam sel mast, basofil, limfosit, dan
reseptor lainnya dan berinteraksi dengan reseptor histamin.
Reseptor H1 -hista-tambang dikaitkan dengan modulasi aktivitas sel
imun proinflamasi dan interaksinya dengan histamin adalah fokus
utama terapi supresif untuk AR. Anti-asma sintetis adalah
diphenhydramine, chlorpheniramine, mepyramine, promethazine,
loratadine yang memiliki berbagai efek samping seperti kantuk,
mulut kering, sembelit, kebingungan, mimpi buruk, gugup, gelisah
dan mudah tersinggung.
Mengingat hal tersebut, penelitian ini menunjukkan aktivitas anti-
asma dan anti-alergi dari fitokonstituen yang ada dalam ekstrak
metanol daun Tragia involucrata L. (Euphorbiaceae) melalui
pendekatan in vitro dan in vivo dan in silico. Ekstrak T. involu- crata
L. telah dilaporkan memiliki mekanisme aktif melawan berbagai
penyakit seperti antiinflamasi,aktivitas analgesik, peradangan akut
dan subakut. Ini juga digunakan untuk asma bronkial sebagai obat
herbal dalam bentuk rebusan, kombinasi T. involucrata L. dengan
 lada hitam untuk menyembuhkan asma dan digunakan dalam
formulasi Ayurveda Pankajakasthuri.
Metode penelitian Metode penelitian yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: Daun
Tragia involucrata diekstraksi dengan alat soxhlet dan difraksinasi
dengan kromatografi kolom. Fraksi yang dihomogenisasi dimonitor
dengan kromatografi lapis tipis (KLT) dan dikarakterisasi dengan
menggunakan UV-visibel, FT-IR,1 H NMR,13 C NMR dan studi
spektroskopi MS. Senyawa yang diisolasi diskrining aktivitas
antihistaminnya pada preparat ileum, bronkokonstriksi dan respon
tiga kali lipat pada babi gui- nea yang diinduksi histamin.
Langkah-langkah Langkah-langkah penelitian dalam artikel ini yaitu:
penelitian 1. Ekstraksi dan fraksinasi
Bahan tanaman (daun) yang terkumpul dicuci bersih dengan air
keran, dicacah, dikeringkan di udara selama 2-3 minggu pada
suhu 35-40°C dan dihaluskan dengan penggiling listrik. Serbuk
kering seberat 500 g diperoleh setelah dihilangkan lemaknya
dengan petroleum eter dan secara berturut-turut diekstraksi
dengan metanol (64-66 ° C) menggunakan alat soxhlet, akhirnya
diperoleh 20 g ekstrak dalam bentuk semi-padat. Ekstrak yang
sama diimpregnasi dengan silika gel dan dimasukkan ke dalam
kolom silika gel (ukuran mesh 60-120 µm) (1000 mm x 40 mm)
sebagai fase diam. Berdasarkan percobaan kromatografi lapis
tipis (KLT), fase gerak yang dipilih adalah campuran petroleum
eter-etil asetat dan kloroform-metanol untuk mengelusi dengan
meningkatnya polaritas pelarut. Jumlah yang seragam dari fraksi
yang berbeda (25 mL) telah dikumpulkan dan dimonitor dengan
KLT.
2. Isolasi dan karakterisasi
Fraksi sebanyak 25 mL telah dikumpulkan dan dimonitor dengan
KLT dan fraksi homogen diambil untuk mendapatkan struktur
dengan menggunakan studi spektral. Data spektral dari
instrumen berikut digunakan untuk menjelaskan struktur kimia
dengan spektrofotometer UV Visible (UV-Vis-2450, Shimadzu,
Jepang) untuk nilai fimax , FT- IR (IR Affinity-1, Shimadzu,
Jepang) untuk analisis gugus fungsi,1 H NMR (instrumen Bruker
DRX 400 -399.95 MHz) untuk jumlah sinyal proton yang ada
 dalam molekul dan13 C NMR (Bruker AMX 300 - 75,5 MHz)
untuk jumlah atom karbon yang ada dalam molekul dan data
spektra massa (Jeol GC MateII) untuk menentukan berat molekul
molekul
3. Evaluasi aktivitas antihistamin dari senyawa terisolasi 1
Persiapan ileum marmut yang diisolasi: Marmut jantan albino
yang dipuasakan selama 24 jam dengan berat 250-350 g dibunuh
dengan pukulan di kepala dan dieksanguinalisasi. Segmen
terminal ileum dengan panjang sekitar 1-1.5 cm disiapkan dan
ditempatkan dalam bak 30 mL yang diisi dengan larutan Tyrode
(NaCl, 136.7; KCl, 2.68; MgCl2 1.05; NaH2 PO4 0.42; CaCl2,
1.80; NaHCO3, 11,90; glukosa, 5,55 mM). Larutan disimpan
pada suhu 37°C dan diberi oksigen secara terus menerus.
Ketegangan awal adalah 1 g dan waktu stabilisasi adalah 45-60
menit. Kontraksi isometrik direkam pada transduser NARCO F-
60 yang terhubung ke perekam NARCO Trace 80. Setelah
stabilisasi rendaman organ, peningkatan konsentrasi histamin
ditambahkan ke rendaman dan kurva respons konsentrasi
kumulatif kontrol untuk masing-masing (histamin) dibuat.
Senyawa terisolasi 1 dari daun T. involucrata L., CPM kemudian
ditambahkan ke dalam rendaman.
4. Bronkokonstriksi yang diinduksi histamin pada marmot
Marmut yang dipuasakan semalaman dibagi menjadi empat
kelompok (n ¼ 4): Penginduksi (IC) ¼ histamin (0,2%, aerosol),
PMS menerima CPM (2 mg / kg, ip), senyawa 1 (10,0 mg / kg)
dan senyawa 1 (12,5 mg / kg). Bronkokonstriksi diinduksi pada
marmot dengan memaparkannya pada aerosol histamin (0,2%)
yang dihasilkan oleh nebulizer ultrasound di ruang aerosol (24 ×
14 × 24 cm) yang terbuat dari kaca perspex. Waktu yang
diperlukan untuk munculnya dispnea pra-kejang yang
disebabkan oleh histamin dicatat untuk setiap hewan. Sebelum
perawatan obat, setiap hewan ditempatkan di ruang histamin dan
terpapar aerosol histamin 0,2%. Waktu pra-kejang (PCT), waktu
pemaparan aerosol hingga timbulnya dispnea yang
menyebabkan munculnya kejang, dicatat. Segera setelah dispnea
pra-kejang (PCD) dicatat, hewan dikeluarkan dari ruangan dan
 ditempatkan di udara segar untuk pulih. Waktu untuk dispnea
pra-kejang ini dicatat sebagai nilai basal. Marmut kemudian
dibiarkan pulih dari dispnea selama 4 jam. Setelah 4 jam, hewan-
hewan tersebut menerima senyawa 1 dan CPM. Hewan-hewan
ini kembali menjadi sasaran aerosol histamin kemudian pada
interval 30 m e n i t, 1 jam dan 4 jam untuk menentukan PCT:
Perlindungan yang ditawarkan oleh perawatan dihitung
menggunakan rumus Persentase perlindungan = (1 - T1 /T2 )×
100 di mana T1 = rata-rata PCT sebelum pemberian obat uji dan
T2 = rata-rata PCT setelah pemberian obat uji pada 30 menit, 1
jam dan 4 jam.
5. Respon tiga kali lipat yang diinduksi histamin pada marmot
Percobaan dilakukan dengan marmut yang dipuasakan
semalaman, berat badan 250-350 g dibagi menjadi empat
kelompok (n = 4): penginduksi (IC) = histamin (0,2%, aerosol),
STD yang menerima CPM (2 mg / kg, ip) dan senyawa 1 (12,5
mg / kg) digunakan untuk menginduksi reaksi alergi sebagai tiga
respons yaitu bintik merah, suar, dan wheal pada kulit.
Kelompok yang terdiri dari enam hewan diobati dengan obat uji.
Obat diberikan secara injeksi intradermal. Persentase
perlindungan dihitung dengan menggunakan rumus Persentase
perlindungan = (1 - T1 /T2 ) × 100 di mana T1 = rata-rata
kejadian wheal sebelum pemberian obat uji dan T2 = rata-rata
terjadinya wheal setelah pemberian obat uji pada 30 menit, 1 jam
dan 4 jam. Kulit marmut dicukur dengan pisau cukur listrik dan
0,2% histamin disuntikkan ke lapisan epidermis kulit. Akhirnya
dicatat waktu terjadinya tiga tahap pada kulit.
6. Aktivitas antihistamin dengan pendekatan in silico Persiapan
molekul protein: Penyempitan bronkokonkaf yang diinduksi
histamin terutama dimediasi melalui reseptor histamin H1
[3RZE]. Protein G ini menggandeng reseptor yang dihambat oleh
antagonis reseptor H1. Protein reseptor histamin H1 (ID PDB:
3RZE) diambil dari bank data protein PDB. Reseptor yang
diperoleh diminimalkan energinya menggunakan
SwissPDBViewer setelah menambahkan ikatan hidrogen di
Argus Lab. Semua molekul air dihilangkan dan pada tahap akhir
 atom hidrogen ditambahkan ke molekul protein target dan
memprediksi situs pengikatan menggunakan Q-Site Finder. Ini
adalah salah satu alat untuk prediksi binding site. Percobaan
meliputi persiapan molekul protein, penentuan situs aktif,
persiapan ligan dan penambatan molekul. Persiapan ligan
menggunakan molekul bioaktif yang diperoleh dengan
kromatografi kolom dari daun T. involucrata L. dikonstruksi
menggunakan Chemsketch 12.0 dengan cara yang sama seperti
struktur obat standar klorfeniramin dan mepiramin dibangun
untuk perbandingan. Struktur 3D dioptimalkan secara geometris
untuk ligan sesuai dengan metode perhitungan Hartree-Fock
(HF) menggunakan ArgusLab 4.0.1, dibuat dan dioptimalkan
untuk mendapatkan geometri yang tepat, setelah situs aktif
ditemukan dan ligan disiapkan pemasangan molekuler: Docking
molekuler menemukan kecocokan terbaik untuk molekul
bioaktif. Interaksi dapat dimodelkan dengan fungsi penilaian
yang mencakup istilah yang menggambarkan energi antar dan
intra-molekul. Setelah menyimpan ligan yang dipilih dalam
format file .mol, docking dilakukan terhadap reseptor
berpasangan protein G (3RZE) dan docking ligan fleksibel dapat
dilakukan, di mana ligan digambarkan sebagai pohon puntir dan
kisi-kisi. Ini dibangun menggunakan hamparan situs pengikatan,
ukuran kotak pengikatan situs pengikatan ditentukan secara
otomatis menggunakan ArgusLab (34.679000 × 28.199000 ×
31.398000 Å). Resolusi kisi (Ang = 0,400000) dan algoritma
genetik Lamarckian digunakan untuk melakukan penambatan
(docking) dan hasilnya divisualisasikan menggunakan PyMOL
viewer 1.3
Hasil penelitian Antihistamin 5-hidroksi-1-metilpiperidin-2-satu telah diisolasi dan
dikarakterisasi dari daun Tragia involucrata L. Relaksan otot yang
menjanjikan, bronkorelaksan dan efek anti alergi dari 5-hidroksi-1-
metilpiperidin-2-satu diamati pada marmot yang diinduksi histamin
dan ditemukan 55,54 2,78% perlindungan pada tingkat dosis 12,5
mg / kg pada efek penyempitan bronkus dan 49,05 2,45%
perlindungan pada respons tiga kali lipat. Temuan ini dikonfirmasi
oleh docking molekuler in silico juga terhadap reseptor histamin H1
 dibandingkan dengan klorfeniramin maleat dan mepiramin. Hal ini
menunjukkan bahwa 5-hidroksi-1-metilpiperidin-2-satu memiliki
efek penghambatan yang baik pada marmot yang diinduksi histamin.
Potensi pelemas otot, bronkodilatasi dan anti alergi dari 5-hidroksi-
1-metilpiperidin-2-satu telah dibahas dalam konteks dengan
kemungkinan profilnya sebagai agen anti-asma dari Daun T.
involucrata L..
Kesimpulan Kesimpulan dari artikel ini adalah 5-hidroksi-1-metilpiperidin-2-
satu yang diisolasi dari ekstrak metanol T. involucrata L.
meninggalkan molekul bioaktif yang kuat untuk relaksan otot,
melebarkan bronkus dan efek anti alergi pada kontraksi otot yang
diinduksi oleh histamin di ileum, bronkokonstriksi pada bronkiolus
dan respon tiga kali lipat pada kulit marmot. Aktivitas ini
dikonfirmasi oleh ikatan molekuler terhadap reseptor histamin H1
(3RZE). 5- Hidroksi-1-metilpiperidin-2-satu menunjukkan skor
docking, energi, dan interaksi tertinggi dibandingkan dengan CPM
dan mepyramine. 5-hidroksi-1- metilpiperidin-2-satu dan
mekanisme kerjanya dijelaskan untuk pengamatan