Applsci 12 06771 V2.en - Id

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
terapan
ilmu pengetahuan
Tinjauan
Tantangan Bioteknologi dan Teknis Terkait Produksi Daging

Budidaya
Davide Lanzoni1,†, Filippo Bracco2,†, Federica Cheli1,3, Bianca Maria Colosimo2, Davide Moscatelli4,
Antonella Baldi1, Raffaella Rebucci1,* dan Carlotta Giromini1,3
1 Departemen Ilmu Kedokteran Hewan dan Hewan (DIVAS), UniversitAdegli Studi di Milano,
Melalui dell'UniversitA6, 29600 Lodi, Italia; davide.lanzoni@unimi.it (DL); federica.cheli@unimi.it (FC);
antonella.baldi@unimi.it (AB); carlotta.giromini@unimi.it (CG)
2 Departemen Teknik Mesin, Politecnico di Milano, Via La Masa 1, 20156 Milano, Italia;
filippo.bracco@polimi.it (FB); biancamaria.coosimo@polimi.it (BMC)
3 CRC “Inovasi untuk Kesejahteraan dan Lingkungan (I-WE)”, UniversitAdegli Studi di Milano, Via Festa
del Perdono 7, 20122 Milano, Italia
4 Departemen Kimia, Material dan Teknik Kimia “Giulio Natta”, Piazza Leonardo da Vinci 32, 20133 Milano,
Italia; davide.moscatelli@polimi.it
* Korespondensi: raffaella.rebucci@unimi.it † Para penulis
memberikan kontribusi yang sama untuk pekerjaan ini.
Abstrak:Pertumbuhan populasi yang konstan telah mendorong para peneliti untuk menemukan sumber
protein baru. Solusi yang mungkin untuk masalah ini telah ditemukan dalam pertanian seluler, khususnya
dalam produksi daging hasil budidaya. Dalam tinjauan berikut, langkah-langkah utama dalam produksi daging
in vitro diidentifikasi, serta tantangan yang paling penting. Pendekatan biologis dan teknis utama
dipertimbangkan dan didiskusikan, seperti pemilihan hewan, alternatif non-hewani untuk serum janin sapi
(FBS), interaksi biomaterial sel, dan penerapan sistem biofabrikasi dan budidaya yang terukur dan
Kutipan:Lanzoni, D.; Bracco, F.; Cheli, berkelanjutan. Mengingat temuan-temuan yang ada, meskipun produksi daging hasil budidaya cukup
F.; Colosimo, BM; Moscatelli, D.; Baldi, menjanjikan, sebagian besar tantangan yang dibahas masih berada pada tahap awal. Oleh karena itu,
A.; Rebucci, R.; Giromini, C. Tantangan penelitian harus mengatasi tantangan-tantangan ini untuk memastikan produksi skala besar yang efisien.
Bioteknologi dan Teknis Terkait
Produksi Daging Budidaya.Aplikasi. Kata kunci:daging budidaya; pertanian seluler; Alternatif FBS; Perancah 3D; biocetak 3D; bioink yang dapat
Sains.2022,12, 6771.https://doi.org/ dimakan; keberlanjutan; daging in vitro
10.3390/app12136771
Editor Akademik: Jean-François

Hocquette, Sghaier Chriki dan
Marie-Pierre Ellies-Oury 1. Perkenalan
Populasi global saat ini berjumlah sekitar 8 miliar, jumlah ini diperkirakan akan meningkat pesat pada
Diterima: 16 Mei 2022
tahun 2050, ketika jumlah penduduk bumi diperkirakan mencapai 9–11 miliar [1]. Peningkatan populasi yang
Diterima: 30 Juni 2022
Diterbitkan: 4 Juli 2022
signifikan akan menyebabkan pertumbuhan permintaan produk pangan secara eksponensial, mencapai 50%
pada tahun 2030 dan meningkat dua kali lipat pada tahun 2050, sehingga permintaan tersebut akan sulit
Catatan Penerbit:MDPI tetap netral
dipenuhi tanpa memberikan dampak negatif terhadap kesehatan lingkungan [2,3]. Produk yang banyak
sehubungan dengan klaim yurisdiksi dalam
diminati adalah produk asal hewan, khususnya daging dan produk susu. Pada tahun 2012, Organisasi Pangan
peta yang dipublikasikan dan afiliasi
dan Pertanian (FAO) memperkirakan bahwa permintaan daging global diperkirakan akan mencapai 455 juta ton
kelembagaan.
pada tahun 2050, meningkat 76% dari tahun 2005. Tren ini juga berlaku pada budidaya ikan, dimana jumlah
ikan yang diperoleh dari daging diperkirakan mencapai 455 juta ton pada tahun 2050. budidaya perikanan telah
meningkat dari 4,7 menjadi 66,6 juta ton hanya dalam 32 tahun, dan permintaan global diperkirakan akan
Hak cipta:© 2022 oleh penulis.

mencapai 140 juta pada tahun 2054 [2,4].
Pemegang Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Oleh karena itu, untuk memenuhi permintaan besar akan produk hewani, peternakan
Artikel ini adalah artikel akses terbuka intensif banyak diterapkan. Meskipun keberhasilannya setelah proses industrialisasi pada
yang didistribusikan di bawah syarat tahun 1960an, sistem produksi ternak terbukti sangat rapuh.
dan ketentuan lisensi Creative Sistem peternakan skala industri saat ini telah menjadi bahan perdebatan mengenai kesejahteraan
Commons Attribution (CC BY) (https:// hewan, perlindungan lingkungan, dan kesehatan masyarakat.
creativecommons.org/licenses/by/ Sejak tahun 1980an, peternakan intensif telah menjadi sumber berbagai krisis kesehatan masyarakat,
4.0/). seperti penyakit sapi gila dan, kemudian, kontaminasi pada ayam, daging sapi, dan hewan ternak.
Aplikasi. Sains.2022,12, 6771.https://doi.org/10.3390/app12136771 https://www.mdpi.com/journal/applsci

Aplikasi. Sains.2022,12, 6771 2 dari 26
produk daging babi, susu, dan salmon yang mengandung dioksin, dan yang terbaru, flu babi dan
flu unggas [2]. Masalah lain yang terkait dengan peternakan intensif adalah dampak lingkungan.
Intensifikasi produksi peternakan dan pertanian turut menyebabkan emisi gas rumah kaca (GRK),
khususnya metana (CH4) dan dinitrogen oksida (N2HAI). Seperti yang dilaporkan oleh Guerci dkk.,
pertanian menyumbang 10–12% dari total emisi, sedangkan produksi peternakan, khususnya
ruminansia, menyumbang total 14,5% [5,6]. Namun pernyataan ini bertentangan dengan apa yang
dilaporkan Chriki dan Hocquette. Menurut para penulis ini, meskipun benar bahwa peternakan
mempunyai dampak terhadap lingkungan, khususnya dalam kaitannya dengan CH4, N2O, dan
karbon dioksida (CO2) emisi, juga benar bahwa yang terakhir adalah sumber utama emisi daging in
vitro karena energi fosil yang dikonsumsi untuk memastikan pertumbuhan dan proliferasi sel [7].
Untuk mendukung anggapan ini, Lynch dkk. mengkonfirmasi bahwa dampak daging budidaya
hanya akan kecil dalam jangka pendek (dalam 20 tahun), namun tidak dalam jangka panjang (lebih
dari 100 tahun), karena CO2, tidak seperti CH4, terakumulasi dalam waktu lama di atmosfer [8].
Selain itu, meskipun ternak, sebagian besar hewan ruminansia, mengonsumsi makanan yang tidak
diperuntukkan bagi manusia, mereka menempati sekitar 70% lahan pertanian global dan mengonsumsi
sekitar 35% tanaman pertanian, bersaing langsung dengan produksi tanaman untuk konsumsi manusia
dan potensi penggunaan lahan alternatif. termasuk konservasi alam [9]. Sektor pertanian sangat kaya
akan sumber daya dan terus mengalami transformasi seiring dengan pertumbuhan penduduk. Produksi
pangan global merupakan pengguna air tawar terbesar dan menggunakan sekitar 38% lahan. Sisanya
sebesar 62% dari luas lahan global diperkirakan tidak cocok untuk budidaya karena iklim, topografi,
kualitas tanah yang buruk, pembangunan perkotaan, atau karena tertutup oleh lahan alami seperti
hutan. Oleh karena itu, hanya sedikit lahan subur yang tersisa untuk ekspansi pertanian tanpa dampak
negatif terhadap kesehatan lingkungan [10].
Pertanian Seluler dan Daging Budidaya

Bioteknologi industri memegang kunci dalam menyediakan pangan yang bergizi, aman, dan sehat
bagi umat manusia, sekaligus meminimalkan penggunaan sumber daya seperti energi, air, dan tanah.3].
Solusi ini disebut “pertanian seluler” dan melibatkan produksi produk pangan seperti daging atau ikan
dari sel tunggal, bukan organisme utuh seperti hewan, yang prioritasnya adalah memproduksi produk
yang pada tingkat molekuler serupa dengan yang dibuat dengan teknik tradisional [11]. Dengan metode
pertanian seluler, dimungkinkan untuk menghasilkan daging buatan, yang juga disebut daging hasil
budidaya atau daging bersih, melalui diferensiasi sel satelit otot secara in vitro [12].
Daging budidaya mewakili produksi daging in vitro tanpa pengorbanan hewan. Lebih
khusus lagi, ini dihasilkan dari sel menggunakan teknik rekayasa jaringan. Produksi terutama
melibatkan pembentukan jaringan otot rangka. Namun, seringkali juga terdapat adiposit
untuk produksi lemak, fibroblas, dan/atau kondrosit untuk pembentukan jaringan ikat, dan
sel endotel untuk menyediakan vaskularisasi.13].
Sampai saat ini, produksi daging budidaya merupakan topik yang hangat diperdebatkan (juga
penggunaan “daging”) dunia, dengan pendapat yang bertentangan mengenai kelayakan dan keberlanjutannya.
Oleh karena itu, tinjauan berikut ini bertujuan untuk membahas proses produksi daging in vitro dengan
menyoroti keunggulan dan tantangan utama dari perspektif bioteknologi dan teknis.
2. Proses Produksi Daging Budidaya

Produksi daging budidaya mengikuti alur kerja yang tepat, yang dirangkum secara singkat pada
Gambar1.
Pemanenan sel. Langkah mendasar dalam produksi daging budidaya adalah pengadaan sel, yang
menggunakan tiga metode. (1) Biopsi sel atau jaringan diperoleh dari hewan hidup atau hewan
postmortem yang telah pulih. Sel-sel yang diperoleh dengan cara ini disebut garis primer. (2) Sel
berpotensi majemuk, seperti sel induk embrionik atau sel induk berpotensi majemuk terinduksi,
digunakan [14]. (3) Garis sel abadi.
Gambar 1.Proses produksi daging budidaya (Sumber Biorender, Toronto, ON, Kanada).
Meskipun kultur sel primer memungkinkan untuk mempelajari mekanisme produksi daging
yang dibudidayakan dalam skala waktu yang singkat, mereka mengalami sejumlah pembelahan
yang terbatas sebelum mencapai penuaan. Sebaliknya, garis sel abadi atau berkelanjutan tidak
mengalami penuaan dan oleh karena itu dapat mengalami pembelahan tak terbatas, sehingga
memungkinkan diperoleh daging budidaya yang lebih konsisten tanpa memerlukan biopsi hewan
terus menerus. Namun, saat ini belum ada garis sel abadi yang cocok untuk daging budidaya yang
tersedia bagi para peneliti dan pengembang. Garis sel yang paling mirip adalah myoblast dari
spesies model yang biasa digunakan dalam penelitian, seperti mencit, mencit, hamster, dan
burung puyuh Jepang. Garis sel ini ditandai dengan tidak adanya rasa, nutrisi, dan tekstur daging
tradisional. Oleh karena itu, jalur berkelanjutan yang digunakan untuk produksi daging budidaya
harus dikembangkan dari jenis dan spesies sel yang akrab bagi konsumen dan enak, bergizi, dan
aman untuk pangan [15].
Bekerja dengan biopsi jaringan melibatkan langkah tambahan. Penting untuk mengisolasi sel
induk otot individu dari serat lainnya, yang dicapai dengan menggunakan protease termasuk
trypsin, pronase, dyspase, dan kolagenase. Setelah disosiasi enzimatik, sangat penting untuk
menghilangkan fragmen serat, sisa jaringan, dan jaringan ikat untuk memastikan proses seleksi
yang efisien [16].
Langkah selanjutnya adalah mempertahankan sel yang dipanen dalam kultur untuk mencapai
proliferasi sel terlebih dahulu, kemudian diferensiasi dan/atau pematangan sel dengan tujuan akhir
meningkatkan biomassa.
Proliferasi. Sel-sel tersebut awalnya dibiarkan berkembang biak dalam labu kecil di mana
mereka dapat tumbuh dalam lembaran dua dimensi, yang dilekatkan pada suatu permukaan.
Metode ini mewakili standar metode kultur sel laboratorium, yang terutama ditujukan untuk
kegiatan penelitian. Namun, untuk produksi sel industri skala besar, kultur suspensi dalam
bioreaktor diperlukanmerah meningkat melihat efisiensi proses: sistem ini memerlukan
pembuatan sel dalam jumlah besar dengan konsumsi energi dan sumber daya minimal (misalnya
media kultur, bahan habis pakai), waktu, dan langkah penanganan [17].
Metode kultur sel saat ini melibatkan penggunaan media pertumbuhan spesifik, yang
mengandung semua zat yang diperlukan untuk memastikan proliferasi sel seperti glukosa, garam
anorganik, asam amino, vitamin, faktor pertumbuhan, antibiotik, dan antijamur. Zat lain dapat
ditambahkan untuk memberikan sifat organoleptik, seperti protein atau pigmen yang memberi warna
seperti daging [18]. Namun, hingga saat ini, terdapat alternatif yang layak untuk media budaya klasik
sedang dicari, yang tujuannya adalah untuk memasukkan produk sampingan yang dapat dimakan ke dalam media
untuk memastikan pertumbuhan sel yang cepat. Prinsip yang sama harus diterapkan pada serum janin sapi (FBS), yang
penting untuk proliferasi sel, namun sama sekali tidak etis dan berkelanjutan.
Perancah. Proses fabrikasi dan maturasi jaringan hanya dapat dicapai jika sel diberikan
lingkungan yang tepat dimana sel dapat melekat, berproliferasi, dan berdiferensiasi.19,20].
Perancah adalah struktur tiga dimensi yang ditandai dengan porositas yang benar, arsitektur
tekstur, dan sifat mekanik dan kimia yang cocok untuk pematangan jenis sel tertentu. Selain
itu, mengingat tujuan rekayasa pangan, scaffold harus dapat terbiodegradasi atau dapat
dimakan atau keduanya, dan strukturnya juga terlibat dalam sifat organoleptik akhir dari
produk akhir.20]. Pendekatan tradisional, berdasarkan rekayasa jaringan, melibatkan
fabrikasi perancah dan selanjutnya penyemaian sel dalam kultur 3D. Scaffold dapat diperoleh
melalui dekellularisasi jaringan/organ atau dapat dibuat. Ada beberapa teknik berbeda untuk
produksi perancah. Yang paling banyak digunakan adalah teknik pengecoran pelarut dan
pelindian porogen (SCPL), pemisahan fasa, pembusaan gas, sintering, electrospinning, self-
assembly, dan teknik pencetakan 3D (3DP) (misalnya, pencetakan 3D alas bubuk, pemodelan
deposisi leburan, dan stereolitografi) [18].
Biofabrikasi . Baru-baru ini, pendekatan lain semakin penting: biofabrikasi [19]. Proses ini
memungkinkan produksi konstruksi sarat sel menggunakan bahan yang mengandung sel
campuran dan molekul biologis. Keuntungan utamanya adalah kemungkinan untuk membuat
struktur yang lebih tebal dan mengontrol penataan ruang sel, bahkan dari berbagai jenis sel, yang
merupakan keterbatasan utama metode scaffolding konvensional.21]. Bioprinting 3D (3DBP)
adalah teknologi biofabrikasi berdasarkan manufaktur aditif (AM) yang memungkinkan
penempatan sel secara tepat, pengendapan kepadatan, dan kontrol struktur yang tepat, serta
rasio antar populasi yang berbeda dalam kasus konstruksi multiseluler. Campuran sel-bahan yang
digunakan dalam proses ini disebut bioinks [22]. 3DBP mewakili sebuah terobosan dalam bidang
manufaktur daging in vitro, menjamin skalabilitas tinggi, proses bebas kompleksitas, pengeluaran
energi minimal, dan emisi N20 yang lebih rendah [22]. Metode bioprinting yang utama adalah
metode berbasis ekstrusi, inkjet, stereolitografi, dan berbasis laser dan cahaya.23].
Diferensiasi jaringan dan bioreaktor: Apa pun fabrikasi konstruksinya, sel-sel di dalam
perancah 3D harus ditempatkan dalam bioreaktor untuk pematangan. Rangsangan mekanis,
kimia, dan akhirnya listrik diperlukan untuk menyelesaikan tahap ini melalui sistem kultur khusus [
24,25]. Bioreaktor adalah sistem otomatis dan tertutup di mana sel dapat berkembang biak,
berdiferensiasi, dan matang dalam konstruksi yang membentuk jaringan. Bioreaktor memberikan
kontrol yang tepat terhadap variabel yang relevan seperti suhu, konsentrasi oksigen, pH, dan
kepadatan sel [18]. Beberapa jenis bioreaktor yang digunakan, yang paling umum adalah kultur
statis, labu spinner, dan bioreaktor perfusi (misalnya tangki berpengaduk atau dinding berputar) [
25]. Di dalam bioreaktor, sel mengalami proliferasi dan diferensiasi. Proses terakhir dipicu oleh
perubahan perancah dan media kultur serta melalui penambahan unsur-unsur seperti protein,
asam amino, dan mineral [24]. Kurangnya adhesi sel dan terciptanya struktur yang sesuai untuk
pertumbuhan sel adalah poin penting dari prosedur rumit ini.
Dari peningkatan skala laboratorium hingga industri: Jumlah sel yang dibutuhkan untuk memproduksi 1 kg
protein dari sel otot berada pada kisaran 2,9×1011ke 8×1012[25]. Untuk mencapai jumlah yang
sangat besar ini, tahap proliferasi sel perlu dilakukan dalam bioreaktor skala besar [26], sehingga
sel dapat tumbuh dan bereplikasi sebanyak 5000 L [27]. Menurut Zidaric et al., bioreaktor akan
sangat penting dalam proses produksi industri daging budidaya [26]. Perkembangan jaringan
memerlukan setidaknya dua tahapan yang berbeda: (i) fase proliferasi sel untuk menyediakan
jumlah sel yang cukup untuk pembuatan konstruksi (misalnya, menggunakan bioreaktor tangki
berpengaduk), dan (ii) diferensiasi jaringan ke suatu tahap (misalnya, perancah berpori yang
ditempatkan di dalam bioreaktor perfusi) yang akan menghasilkan potongan akhir daging yang
memberikan rangsangan kimia, mekanik, dan listrik yang tepat [26,27]. Produk dan proses yang
ada dalam industri kimia dan biomedis tidak memenuhi persyaratan untuk kultur sel dan jaringan
skala besar, terutama dalam hal biaya dan keberlanjutan. Menurut Specht dkk., terdapat perspektif
untuk mengembangkan metode dan teknologi untuk mencapai tujuan
daging in vitro yang bersih dalam waktu dekat [28]. Namun, selain persyaratan industri, budidaya daging
laboratorium berukuran kecil juga menghadapi beberapa tantangan umum. Sel yang digunakan untuk
produksi daging budidaya memerlukan tempat berlabuh agar dapat tumbuh dan berkembang biak.
Solusi untuk masalah ini, terutama dalam pencetakan 3D dan bioprinting, adalah formulasi biomaterial
dan bioink yang optimal, serta mencampur produk seperti polistiren, gelatin, kolagen, atau bahan
tambahan berbasis protein untuk memberikan titik adhesi pada sel, mencegahnya tertinggal.
ditangguhkan dalam konstruk [29]. Tempat penahan seperti itu sangat penting untuk memungkinkan sel
tumbuh pada perancah dan struktur yang bertekstur khusus untuk memastikan diferensiasi sel otot.
Perancah tersebut bertanggung jawab untuk memastikan produk daging yang dibudidayakan memiliki
berbagai sifat struktural, termasuk bentuk dan susunan sel [14]. Perancah dapat dibuat dari banyak
bahan, yang mungkin berasal dari alam (selulosa, tanaman terdeselulerisasi, alginat, kitosan, kolagen,
dan gelatin) atau sintetis (polietilen glikol atau poliakrilamida) [18]. Hingga saat ini, kekhawatiran besar
adalah bahwa produk yang berasal dari hewan adalah yang paling cocok dan efisien untuk afinitas dan
perlekatan sel [29], namun hal ini tidak memadai dalam kaitannya dengan metode non-hewani untuk
proses budidaya daging. Selain itu, karena produk akhir harus dapat dimakan, perancah jaringan, jika
tidak dapat dimakan, setidaknya harus dapat terurai secara hayati dan tidak beracun atau dirancang
untuk dapat dilepas sebelum dikonsumsi [14,18]. Setelah mencapai kematangan, produk akhir harus
dipanen, yang menambah satu langkah dalam proses, sehingga meningkatkan kompleksitas prosedur.
Langkah ini dapat dilakukan secara enzimatis, kimia, atau manual, dengan dua cara pertama lebih
disukai [30].
Oleh karena itu, budidaya daging dan peningkatan proses industrinya untuk tujuan komersial
merupakan hal yang kompleks dan multidisiplin yang memerlukan upaya sinergis dari bidang
biologi, kimia, teknis, dan industri. Fokus penelitian utama adalah pengembangan dan
peningkatan garis sel yang tersedia untuk menyiapkan kultur sel dan media kultur, bioreaktor,
garis sel, perancah, dan biofabrikasi.
3. Tantangan Terkait Produksi Daging Budidaya

Manfaat produksi daging budidaya banyak dibahas dalam literatur. Produksi daging hasil
budidaya akan menghasilkan pengurangan penggunaan air sebesar 89%, pengurangan
penggunaan lahan sebesar 99%, dan pengurangan gas rumah kaca (GRK) sebesar 96% sebagai
akibat dari peralihan dari produksi peternakan intensif [14,31]. Meskipun aspek-aspek ini menarik
namun masih kontroversial, benar juga bahwa ada beberapa aspek mengenai produksi daging in
vitro yang perlu dipertimbangkan, baik dari sudut pandang bioteknologi maupun teknologi (Tabel1
).
Tabel 1.Tantangan bioteknologi dan teknis utama dalam produksi daging budidaya.
Tantangan Bioteknologi Tantangan Teknis

Pilihan hewan untuk pengambilan sel
Pilihan lokasi pengumpulan
Pembuatan perancah
Metode pengambilan sel
Alternatif untuk fabrikasi perancah
FBS: tantangan etika
Biofabrikasi dan bioprinting 3D
Proliferasi sel yang tinggi dan ketidakstabilan
Bioreaktor
genetik Sifat nutrisi dan fungsional daging budidaya
Peningkatan proses industri
Alternatif FBS
Sistem pengendalian makanan untuk daging budidaya
3.1. Tantangan Bioteknologi

3.1.1. Pilihan Hewan untuk Pemanenan Sel
Tantangan pertama yang dihadapi dalam produksi daging budidaya adalah pemilihan hewan
untuk melakukan biopsi sel. Pilihannya tidak boleh sembarangan, namun harus mempertimbangkan
berbagai variabel, termasuk usia, jenis kelamin, dan kondisi pemeliharaan, karena hal tersebut
mempengaruhi ada atau tidaknya sel satelit (sel induk otot rangka dewasa).
Seiring bertambahnya usia hewan, konsentrasi sel satelit di dalam otot menurun. Penurunan
tercepat dalam jumlah sel satelit paling banyak terjadi pada beberapa bulan pertama setelah
kelahiran. Selain itu, karena sel satelit pada hewan yang lebih muda mengalami pembelahan sel mitosis yang
lebih sedikit, mereka mungkin mempertahankan kapasitas diferensiasinya untuk periode proliferasi yang lebih
lama.14,31].
Jenis kelamin hewan adalah faktor lain yang terlibat dalam proliferasi sel induk
otot.
Hormon seks seperti estrogen dan testosteron mampu mempengaruhi pertumbuhan sel.
Dibandingkan dengan hewan betina, hewan jantan memiliki ciri kandungan dan aktivitas sel satelit
yang lebih tinggi, berkat pengaruh positif testosteron [16]. Tindakan menguntungkan ini juga
digarisbawahi oleh Mulvaney et al., yang menunjukkan bahwa hewan yang dikebiri menunjukkan
konsentrasi aktivitas sel satelit yang lebih rendah dibandingkan hewan yang tidak dikebiri, sebuah
tren yang berbalik dengan pemberian testosteron propionat [32].
Kondisi pemeliharaan hewan juga berperan penting dalam komposisi serat otot. Vestergaard
dkk. menunjukkan bahwa hewan yang dipelihara secara ekstensif memiliki jumlah serat otot tipe I
yang lebih banyak tetapi juga terjadi penurunan serat otot tipe II dibandingkan dengan hewan
yang dipelihara secara intensif. Perbedaan ini, menurut penulis, disebabkan oleh perbedaan pola
makan yang dilakukan hewan; lebih tepatnya, jumlah serat yang dikonsumsi, yang lebih tinggi
pada hewan yang dipelihara dalam kondisi ekstensif [33].
3.1.2. Pilihan Lokasi Pengumpulan

Parameter mendasar lainnya yang perlu dipertimbangkan adalah lokasi biopsi. Konsentrasi
sel satelit bervariasi antar otot atau kelompok otot. Telah ditunjukkan bahwa tipe I, serabut otot
kedutan lambat, dicirikan oleh jumlah sel satelit yang lebih banyak dibandingkan dengan serat otot
kedutan cepat tipe II, yang konsentrasinya lebih rendah.31].
Lebih khusus lagi, pada sapi, otot chuck terutama mengandung serat tipe I,
sedangkan otot bulat sebagian besar mengandung serat tipe II.31].
3.1.3. Metode Pemanenan Sel

Faktor lain yang perlu dipertimbangkan adalah metode pengambilan biopsi sel. Sel satelit dapat
diambil pada saat penyembelihan hewan, yang bukan merupakan jalur yang diterima untuk pertanian
seluler, atau melalui biopsi jaringan otot. Biopsi jaringan, prosedur yang banyak digunakan dalam
kedokteran hewan, melibatkan penggunaan biopsi jarum. Meskipun teknik ini cepat dan menyebabkan
sedikit stres pada hewan, teknik ini memungkinkan pengambilan sampel yang terbatas, sekitar 0,5 g, dan
tidak terlalu tepat karena sifat sampel yang buta [31]. Pilihan kedua melibatkan sayatan kecil di lokasi
pengambilan sampel, sehingga memungkinkan pengambilan sampel lebih banyak, sekitar 15 g, dan
keberhasilan yang lebih besar, meskipun hal ini ditandai dengan tingkat invasif yang lebih besar pada
hewan [31].
Untuk mengurangi jumlah donor yang diperlukan untuk produksi daging budidaya, sebaiknya memaksimalkan
jumlah biopsi yang diambil dari setiap hewan, dengan mempertimbangkan tingkat stres dan ketidaknyamanan yang
ditimbulkan. Seperti yang dilaporkan oleh Melzener dkk., pendekatan yang mungkin dilakukan dalam pengambilan
biopsi otot untuk produksi daging budidaya dapat melibatkan pengambilan beberapa biopsi (hingga empat) dari setiap
hewan donor dalam satu sesi setiap tiga bulan, dengan menggunakan teknik biopsi jarum, sehingga memastikan
pemulihan yang tepat. waktu untuk kesejahteraan hewan [31].
3.1.4. Serum Sapi Janin: Tantangan Etis

Salah satu landasan pertanian seluler adalah menjamin keberlanjutan proses produksi. Saat
ini, hampir semua kultur sel melibatkan penambahan FBS ke media kultur untuk memastikan
pertumbuhan optimal. Fetal Bovine Serum adalah campuran yang sangat kompleks yang, selain
menyediakan sejumlah besar konstituen seperti asam lemak, lipid, vitamin, karbohidrat, garam
anorganik, protein (lebih dari 1800), dan lebih dari 400 metabolit, juga menyediakan faktor
hormonal penting. untuk pertumbuhan dan proliferasi sel. Sejalan dengan fungsi nutrisi, FBS
memastikan faktor adhesi dan difusi yang bertindak sebagai titik perkecambahan untuk perlekatan
sel. Selain itu, hal ini memungkinkan meminimalkan kerusakan fisik yang disebabkan oleh
penanganan dan pengadukan pipet [34,35]. Meskipun aspek positif dari penggunaan FBS telah
banyak ditunjukkan dan didiskusikan dalam literatur, hal tersebut juga benar adanya
menghadirkan berbagai masalah terkait keberlanjutan dan etika yang bertentangan dengan
prinsip dasar pertanian seluler.
Koleksi FBS selalu menimbulkan kehebohan. Ketika seekor sapi bunting disembelih, janinnya
dikeluarkan dan dilakukan tusukan jantung pada jantung yang masih berdetak untuk
mengumpulkan serum dalam kondisi paling aseptik, yang mula-mula menyebabkan penderitaan
yang luar biasa dan kemudian kematian.34]. Janin harus berusia minimal 3 bulan untuk
memastikan pembentukan anatomi jantung guna memastikan pengumpulan serum yang
sempurna [36]. Jumlah pasti FBS yang diproduksi dan dijual di dunia tidak diketahui. Namun,
diperkirakan sekitar 800 ribu liter FBS terjual setiap tahunnya, yang berarti sekitar 2 juta janin
dikorbankan [35]. Namun, angka-angka ini diperkirakan akan meningkat secara eksponensial
karena meningkatnya penggunaan kultur sel untuk protein rekombinan, vaksin, dan perawatan
diagnostik terapeutik.37]. Dari perspektif keberlanjutan proses, pasar FBS sangat dinamis,
menyebabkan fluktuasi harga yang terus menerus dan menjadikannya tidak berkelanjutan dalam
skala besar [38]. Harga dan ketersediaan berfluktuasi karena perubahan jumlah dan biaya ternak
yang dipelihara di seluruh dunia, peraturan impor, harga daging sapi dan susu, biaya, dan kondisi
cuaca [34].
FBS sebagai turunan hewan mempunyai ciri-ciri perbedaan kualitatif dan kuantitatif yang
bergantung pada batch yang dimilikinya dan oleh karena itu pada hewan yang digunakan untuk
pengambilan sampel, sehingga produk perlu diuji sebelum digunakan [39]. Selain masalah variabilitas,
serum mungkin mengandung endotoksin, hemoglobin, dan faktor lain yang merugikan pertumbuhan sel
dalam jumlah yang bervariasi, serta berpotensi menjadi sumber kontaminan mikroba seperti jamur,
bakteri, mikoplasma, virus, atau prion yang dimasukkan selama pengambilan sampel. fase [34]. Selain
itu, banyak zat lain dalam FBS yang masih belum diketahui, sehingga menghalangi kita untuk
mempelajari dan mengetahui kemungkinan dampaknya terhadap kelangsungan hidup sel [40].
Oleh karena itu, penting untuk menemukan alternatif yang layak selain FBS untuk mendukung produksi daging
budidaya dalam skala besar.
3.1.5. Proliferasi Sel Tinggi dan Ketidakstabilan Genetik

Produksi daging budidaya melibatkan pemrosesan sel yang memiliki kapasitas proliferasi
tinggi. Namun, selalu ada kemungkinan ketidakstabilan genetik yang dapat menyebabkan
terbentuknya sel kanker di dalam kultur tanpa teridentifikasi dengan jelas. Sel-sel ini, meskipun
tidak berbahaya, karena mati pada saat konsumsi daging dan oleh karena itu tidak dimasukkan
hidup-hidup ke dalam tubuh, merupakan tantangan besar untuk diterima oleh konsumen (karena
sel-sel tersebut kemudian dicerna di dalam perut), itulah sebabnya hal ini terjadi. proses harus
diselidiki dan dipelajari lebih lanjut untuk memastikan tidak adanya risiko [41].
3.1.6. Sifat Gizi dan Fungsional Daging Budidaya

Salah satu tantangan terbesar bagi daging budidaya adalah mencocokkan sifat nutrisi,
fungsi, dan organoleptik yang khas dari daging konvensional. Tujuan akhir dari produksi
daging budidaya adalah untuk menciptakan produk yang sedekat mungkin dengan aslinya.
Namun, hingga saat ini, kami masih jauh dari mencapai hal tersebut. Dari segi konsistensi
produk akhir, tidak bisa sama dengan daging aslinya, yang menjadi empuk hanya setelah
hewan disembelih, ketika pasokan oksigen terhenti, memicu berbagai perubahan biokimia
yang mengarah pada pembentukan. asam laktat, bertanggung jawab untuk menurunkan pH,
yang mengaktifkan berbagai kelompok enzim yang diperlukan untuk pemecahan protein otot
dan pelunakan daging selanjutnya. Proses ini disebut dengan maturasi dan sampai saat ini
merupakan masalah yang kurang diperhatikan dalam literatur namun tidak kalah pentingnya
untuk diperdalam dengan kajian lebih lanjut.41,42]. Ciri sumbang lainnya adalah warna
produk akhir. Warna daging bervariasi menurut dua parameter dasar: mioglobin dan
konsentrasi zat besi. Warna serat buatan adalah kuning, jauh dari warna merah jambu/merah
produk aslinya [41]. Kejanggalan ini terjadi karena mioglobin ditekan oleh sel yang dikultur
dengan adanya oksigen, dan karena media kultur yang umum digunakan seperti IMDM,
RPMI1640, dan DMEM mengandung sedikit zat besi. Masalah ini bisa
diatasi jika medianya dilengkapi dengan zat besi, namun suplementasi ini masih terbatas [41–43].
Masalah selanjutnya berkaitan dengan rasa. Banyak metabolit biokimia yang terdapat dalam
daging konvensional merupakan produk bersih dari asupan makanan dan metabolisme biologis
namun tidak berasal dari otot itu sendiri.42]. Lebih lanjut, daging hewan merupakan hasil interaksi
kompleks antara protein, karbohidrat, rasa dari fraksi lipid, saraf, dan pembuluh darah yang
memberikan produk rasa akhir yang khas.41]. Kelompok penelitian sedang mengembangkan
kultur bersama dengan sel-sel lemak untuk mencapai tujuan ini, serta untuk menyediakan
mikronutrien seperti vitamin B12, yang penting bagi kesehatan manusia dan mudah dimasukkan
ke dalam makanan melalui konsumsi daging tetapi berisiko hilang seiring dengan produksi.
daging budidaya [41].
Selama bertahun-tahun, pembiakan intensif telah mengalami perubahan besar, membantu memperoleh
produk yang aman, bergizi, dan berkualitas bagi konsumen.
Faktanya, daging merah dianggap sebagai sumber protein tinggi yang menyediakan sekitar 20–24
g protein per 100 g. Nilai ini, bersama dengan kandungan lemaknya, menjamin asupan energi yang
tinggi. Yang terakhir ini merupakan sumber energi utama dalam makanan manusia dan kandungannya
bervariasi menurut jenis daging yang dipertimbangkan. Profil asam lemak dalam daging merah
bervariasi sesuai dengan proporsi daging tanpa lemak dan lemak yang ada. Yang pertama lebih kaya
akan asam lemak tak jenuh ganda (PUFA), sedangkan lemak memiliki ciri kandungan asam lemak jenuh
(SFA) yang tinggi, mengandung sekitar 37 g SFA per 100 g daging.
Secara keseluruhan, daging merah tanpa lemak mengandung asam lemak tak jenuh tunggal (MUFA) dan
SFA dengan proporsi yang sama, meskipun proporsi pastinya bervariasi tergantung pada jenis dagingnya. SFA
utama yang ditemukan dalam daging merah adalah asam palmitat (C16:0) (sekitar setengahnya) dan asam
stearat (C18:0) (sekitar sepertiganya). Meskipun yang pertama tampaknya meningkatkan kadar kolesterol darah,
yang kedua memiliki efek netral terhadap kolesterol total dan LDL. Daging merah juga mengandung lebih
sedikit asam miristat (C14:0) dan asam laurat (C12:0), yang dianggap lebih ampuh meningkatkan kolesterol
darah dibandingkan asam palmitat. Selain itu, meskipun mengandung PUFA tingkat rendah, daging merah
merupakan bagian penting dari makanan, menyediakan 18% n-6 PUFA (asam linoleat) dan 17% n-3 PUFA (asam
α-linoleat), berkontribusi sekitar 23% dari total asupan lemak [44].
Oleh karena itu, daging budidaya harus mencakup ciri-ciri tersebut agar menjadi produk yang
nutrisinya kompetitif. Terakhir, sulit untuk membayangkan bahwa dalam waktu dekat mungkin
akan ada pasokan daging in vitro sehingga konsumen akan ditawari berbagai macam otot atau
potongan daging hewan tersebut. Faktanya, kualitas sensorik daging berbeda-beda antar spesies,
ras, genera, dan tipe hewan, serta kondisi di mana mereka dibesarkan.7].
3.1.7. Alternatif FBS

Seperti diberitakan sebelumnya, untuk mematuhi prinsip-prinsip pertanian seluler, penting untuk
menemukan alternatif yang dapat diandalkan selain FBS untuk budidaya sel yang menjamin keberlanjutan dan
pengembangan etis.
Beberapa penelitian telah dilakukan untuk memenuhi permintaan alternatif FBS yang dapat dimakan.
Namun, sebagian besar penelitian dalam literatur tampaknya bertentangan dengan prinsip-prinsip pertanian
seluler, karena mereka menerapkan alternatif berbasis hewan untuk FBS seperti serum janin dari spesies lain
(misalnya kambing) atau produk sampingan hewan lainnya (misalnya , cairan mata sapi), yang meskipun sangat
efisien, memiliki masalah yang sama seperti FBS [35,45]. Demikian pula, lisat trombosit manusia juga telah
dipertimbangkan karena kemampuannya untuk mendorong proliferasi sel induk yang berasal dari jaringan
adiposa manusia, namun karena berasal dari manusia, maka lisat tersebut tidak cocok untuk dikonsumsi [34,46
].
Saat bekerja dengan kultur sel, penggunaan media yang ditentukan secara kimia (protein
rekombinan dan faktor pertumbuhan) adalah praktik yang umum. Bahan-bahan ini, meskipun etis
dan cocok untuk dikonsumsi manusia, memiliki ciri biaya tinggi sehingga tidak cocok untuk
penerapan skala besar.
Oleh karena itu penting untuk mempelajari matriks inovatif yang, ketika ditambahkan ke media
kultur, dapat mempertahankan proliferasi dan viabilitas sel baik dalam jangka pendek maupun jangka
panjang, sehingga menjamin keberlanjutan dan etika proses produksi.
Matriks yang mungkin diuji pada proliferasi kultur sel yang berbeda adalah yang dilaporkan oleh
Ho et al. [47] (Meja2). Namun, meskipun sebagian besar dari mereka mungkin merupakan kandidat yang
baik sebagai alternatif FBS karena kapasitas proliferasi selnya yang tinggi, hal ini perlu didiskusikan
dalam hal keberlanjutan dan etika.
Meja 2.Aplikasi dan analisis matriks yang berbeda dalam kultur sel. Dimodifikasi oleh Ho dkk. [47].
Matriks Tipe Sel Efek Referensi
Peningkatan budidaya dan produktivitas

Tanam pepton CHO-320 (klon CHO K1) [48]
Gamma interferon manusia
CHO Produktivitas interferon beta manusia yang lebih tinggi

Hidrolisat ragi [49,50]
rCHO (CHO rekombinan) Pertumbuhan sel lebih tinggi
CHO-320 Perlindungan terhadap stres oksidasi dari

Hidrolisat protein beras [51,52]
sel HepG manusia hidrogen peroksida
Pepton kedelai CHO DG44 Peningkatan produksi sel [53]
Hidrolisat gandum CHO Peningkatan viabilitas sel [54]
Sianobakteri laut
Karsinoma Paru-Paru Manusia Peningkatan viabilitas dan proliferasi sel [55]
spirulinamaksimal
Ekstrak Klorella vulgaris CHO-K1 dan MSC Mempromosikan pertumbuhan sel [56]
Rapeseed berlapis CHO-C5 Mempromosikan pertumbuhan sel [57]
Hidrolisat serisin sutra sel CHO dan Hela Meningkatkan pertumbuhan dan proliferasi sel [58]
CHO K1
protein whey Peningkatan viabilitas dan proliferasi sel [59]
JURKAT E6.1
Matriks ditunjukkan pada Tabel2adalah mereka yang mencapai hasil yang menjanjikan dalam
proliferasi dan kelangsungan hidup sel. Sebagian besar berasal dari tumbuhan (pepton tumbuhan,
beras, gandum kedelai, Marine cyanobacterium Spirulinamaksimal, Chlorella vulgaris, dan rapeseed),
sejalan dengan prinsip pertanian seluler. Perhatian khusus harus difokuskan pada hidrolisat. Biayanya
yang relatif rendah menjadikannya sangat menarik sebagai komponen pengganti FBS. Namun, karena
produk hidrolisat tidak sepenuhnya dikarakterisasi, pemahaman lebih lanjut mengenai komponen-
komponennya dan mekanisme yang mempengaruhi pertumbuhan dan pemeliharaan sel sangat penting
untuk penerapannya dalam skala besar.47].
Sericin adalah protein makromolekul, globular, biodegradable, dan biokompatibel yang diproduksi di
dalam kelenjar pusat ulat sutera. Itu diperoleh dengan menghilangkan getah kepompongBombyx mori. Untuk
waktu yang lama bahan ini dianggap sebagai produk limbah pengolahan sutra sampai para peneliti
mengeksplorasi potensinya dalam aplikasi farmasi, biomedis, dan kosmetik.35,60]. Selain bidang-bidang ini,
sericin juga dapat diaplikasikan sebagai bahan pelapis yang dapat dimakan dalam produk makanan karena
kemampuannya untuk menghambat aktivitas oksidatif terhadap kerusakan polifenol, sehingga membuka
perdebatan menarik mengenai kemungkinan penggunaannya sebagai alternatif FBS dalam pemeliharaan kultur
sel.61]. Karena merupakan produk turunan hewani, penggunaannya tidak sepenuhnya memenuhi persyaratan
etika dan kelayakan untuk dimakan. Namun harus ditegaskan kembali bahwa ini merupakan produk limbah
industri pengolahan sutra dan penggunaannya pada sektor lain dapat memenuhi prinsip ekonomi sirkular.
Whey protein merupakan salah satu komponen utama susu. Secara khusus, ini adalah
produk sampingan dari industri susu yang memiliki nilai biologis tinggi berkat sifat
antioksidan, anti-inflamasi, antivirus, dan antitumornya, baik ketika dikonsumsi secara
individu maupun sebagai bahan tambahan pada makanan lain [62–64]. Fungsi-fungsi ini
dapat dikaitkan dengan komposisi nutrisinya yang sangat baik; itu terutama terdiri dari α-
laktalbumin, albumin, β-galaktoglobulin, dan imunoglobulin [62]. Karena alasan ini, telah
diteliti sebagai pengganti FBS dalam media kultur.
Sekali lagi, ini adalah produk yang berasal dari hewan. Namun merupakan produk limbah dengan
beban pencemaran lingkungan yang tinggi seperti yang dilaporkan oleh Veskoukis dkk. [62]. Memang
benar, telah dihitung bahwa potensi polusinya setara dengan kebutuhan oksigen biokimia
sekitar 175 kali lipat lebih tinggi dibandingkan sistem pembuangan limbah kota-kota modern. Oleh karena itu,
hal ini menyebabkan masalah lingkungan yang serius jika dibuang [62].
Oleh karena itu, meskipun berasal dari hewan, penggunaannya sebagai alternatif FBS dapat
dipertimbangkan. Apalagi produksinya tinggi; ini akan memungkinkan untuk memenuhi
permintaan pasar yang tinggi khas FBS.
Secara keseluruhan, sangat penting untuk menemukan alternatif yang cocok untuk FBS,
mengingat penggunaan kombinasi produk nabati (misalnya, yang dilaporkan dalam Tabel2).
Namun, karena tingginya variabilitas dalam komposisi kimia dan mekanisme kerja matriks-matriks
ini, maka perlu untuk menyelidiki efek kombinasi keduanya pada kultur sel.
3.1.8. Sistem Pengendalian Pangan untuk Daging Budidaya
Aspek mendasar dalam setiap produksi adalah pemantauan di sepanjang rantai produksi. Seperti
dilansir Chriki dan Hocquette, banyak diskusi mengenai standar keamanan daging hasil budidaya. Para
pendukung daging in vitro menganggapnya sebagai produk yang jauh lebih aman daripada produk
konvensional, karena daging tersebut diproduksi di lingkungan tertutup dan terkendali tanpa
kemungkinan kontak dengan patogen eksternal. Aspek ini memegang peranan penting, terutama pada
saat proses penyembelihan hewan, dimana bakteri usus patogen sepertiE.coli,Salmonella, atau
Campylobacterdapat mencemari daging yang selanjutnya dipasarkan [7]. Namun, tujuan untuk
sepenuhnya menghilangkan risiko yang mungkin terjadi di seluruh rantai produksi sulit dicapai,
sehingga perlu dilakukan pengendalian yang tepat untuk mengidentifikasi risiko ini sebelum
memasarkan produk. Pada saat yang sama, tidak dapat disangkal bahwa, meskipun penyakit pangan
sering terjadi, setiap tahun pengawasan terhadap rantai produksi daging meningkatkan standar
kualitasnya, sehingga memastikan produk yang semakin aman. Oleh karena itu, produksi dalam
lingkungan yang tertutup dan terkendali, dikombinasikan dengan pengawasan di seluruh rantai
pasokan, yang merupakan karakteristik produksi konvensional, akan menjadikan produksi daging
budidaya sebagai produk yang aman.
4. Tantangan Teknis dalam Produksi Daging Budidaya

Tantangan teknis utama dalam memproduksi daging hasil budidaya adalah mereplikasi
lingkungan 3D otot asli, di mana sel dapat dimatangkan di laboratorium atau pabrik untuk meniru
jaringan. Proses kompleks ini melibatkan sejumlah besar tugas dan masalah yang belum
terselesaikan, yang dapat dikumpulkan secara global pada tingkat hierarki yang lebih tinggi ke
dalam tiga kategori utama: perancah, biomaterial, atau bio-tinta dan interaksinya dengan sel,
prosedur fabrikasi, dan proses kultur sel. teknik proliferasi dan diferensiasi [65,66]. Dari sudut
pandang teknis, metode dan proses yang sudah mapan dari rekayasa jaringan dan pengobatan
regeneratif digunakan setelah disesuaikan dengan tujuan tertentu [67]. Pada bagian berikut,
disajikan perancah konvensional hingga teknologi mutakhir, seperti bioprinting, ditinjau dari
kondisi dan perspektifnya saat ini. Selain itu, bioreaktor yang paling umum sebagai sistem kultur
dijelaskan.
4.1. Fabrikasi Perancah

Perancah dapat memiliki struktur berpori, berbentuk tabung, atau seperti jaringan.
Parameter terpenting adalah porositas dan komposisi material. Jenis dan struktur perancah
bergantung pada aplikasi spesifik yang dirancang.
Namun, persyaratan umum yang harus dipenuhi pada dasarnya adalah memungkinkan sel untuk
menempel dan memungkinkan pengangkutan material melalui strukturnya.
Bagian berikut menyajikan beberapa metode pembuatan perancah berpori, dibagi
menjadi konvensional (Gambar2) dan teknik fabrikasi non-konvensional.
Gambar 2.Teknologi fabrikasi perancah berpori konvensional masing-masing memproses representasi

dan contoh perancah (A) SCPL, (B) pemisahan fasa, (C) gas berbusa, (D) sintering.
4.1.1. Teknologi Fabrikasi Perancah Berpori Konvensional

• Pengecoran pelarut dan pencucian porogen(SCPL) [68]: Proses ini melibatkan
pencampuran larutan polimer yang dilarutkan dalam pelarut organik yang terdiri dari
partikulat yang tidak larut (porogen). Campuran tersebut kemudian dituangkan ke dalam
cetakan atau membran, dan pelarutnya diuapkan. Terakhir, struktur direndam dalam larutan
air untuk menghilangkan partikulat dalam struktur. Porositas, dalam hal bentuk, ukuran, dan
keseragaman, bergantung pada pilihan partikulat, biasanya partikel garam. Kelemahan
utama adalah kurangnya kontrol arsitektur internal dan keseragaman, berkurangnya
reproduktifitas, pembentukan lapisan kulit karena penebalan polimer yang dapat membatasi
akses ke pori-pori internal, ketebalan terbatas (2-3 mm) [69], sifat mekanik yang lemah, dan
kemungkinan sitotoksisitas karena sisa pelarut dan porogen [70].
• Pemisahan fase[71]: Teknik ini digunakan untuk menghasilkan perancah melalui
pemisahan campuran menjadi dua fase: fase kaya polimer dan fase miskin polimer. Hal
ini dicapai dalam kondisi termodinamika tidak stabil. Misalnya, mendinginkan larutan di
bawah titik beku pelarut menginduksi nukleasi kristal di dalam larutan; setelah itu,
bahan padat disublimasikan, memastikan bahwa struktur hanya terdiri dari daerah
miskin polimer dengan porositas, karena pelarut dan fase kaya polimer dikeluarkan dari
perancah. Teknik ini menghasilkan porositas yang sangat saling berhubungan yang
dapat digunakan untuk mereproduksi struktur seperti saluran dengan menerapkan
gradien suhu terarah. Namun demikian, kontrol dan optimalisasi parameter proses
(misalnya suhu, konsentrasi polimer, penggunaan surfaktan, nukleasi kristal) adalah
masalah utama dalam mengatur ukuran dan distribusi pori [72]. Selain itu, ukuran pori
tipikal yang dapat dicapai seringkali lebih kecil dibandingkan dimensi tipikal dalam
aplikasi rekayasa jaringan (<200mikroM).
• Gas berbusa[73]: Ini adalah kelas teknik fabrikasi perancah yang memanfaatkan zat peniup
untuk menghasilkan gas di dalam material yang bertindak sebagai zat porogen. Keuntungan
utamanya adalah tidak adanya bahan pelarut atau porogen yang dapat menginduksi
sitotoksisitas karena kemungkinan residu. Pembentukan Gas dapat diinduksi secara kimia atau termal
atau dengan perubahan tekanan. Kelemahan utama dari teknik ini adalah rendahnya kontrol terhadap
ukuran pori dan interkonektivitas, rendahnya reproduktifitas dan keseragaman struktur, serta kesulitan
dalam menggabungkan molekul biologis dalam proses yang diinduksi secara termal.74,75].
• Sintering[76]: Teknik ini digunakan untuk menghasilkan perancah berpori kohesif melalui ikatan
fase polimer dan partikel atau serat keramik. Prosedur yang biasa dilakukan melibatkan lapisan
partikel yang dikemas secara acak yang diikat melalui pemanasan hingga suhu di atas suhu transisi
gelas bahan dasar, namun lebih rendah dari titik lelehnya, sehingga menciptakan area sekering
lokal hanya pada permukaan kontak, yang menyebabkan struktur mikro berpori. . Mode sintering
alternatif adalah perlakuan dan tekanan pelarut ringan. Perancah sinter dicirikan oleh porositas
yang lebih rendah, ukuran pori yang kecil dengan kesulitan dalam kontrol dan distribusi yang tepat,
dan sifat mekanik yang lebih tinggi, dan perancah tersebut terutama digunakan dalam aplikasi
perbaikan gigi dan tulang [77].
4.1.2. Teknologi Fabrikasi Perancah Berpori Non-Konvensional

• Pemintalan listrik[78]: Metode ini didasarkan pada medan listrik yang dihasilkan antara sistem
pengiriman larutan polimer pada laju aliran terkontrol dan pengumpul, menarik larutan ke dalam
serat, contoh ilustratif ditunjukkan pada Gambar3. Hasilnya adalah membran serat bukan tenunan.
Teknik berbasis tekstil telah diciptakan untuk mereproduksi bahan berbasis serat, seperti bahan
yang mirip dengan matriks ekstraseluler (ECM). Porositas yang dihasilkan saling berhubungan dan
ukuran pori yang dapat dicapai lebih rendah dibandingkan dengan teknik perancah lainnya,
sehingga menghasilkan serat dengan diameter hingga beberapa nanometer [78], yang dapat
menjadi keuntungan untuk aplikasi spesifik (misalnya, vaskular [79]), namun cenderung membatasi
migrasi sel hingga ke titik di mana penerapannya dalam rekayasa jaringan menjadi sebuah
masalah. Beberapa parameter proses dapat dikontrol untuk menyesuaikan diameter dan
keselarasan serat, mengadaptasi sifat tekstur ke jenis sel spesifik yang akan diunggulkan.
Gambar 3.Contoh ilustratif metode electrospinning untuk fabrikasi scaffold dan gambar konstruk
(diadaptasi dari [80]).
• Perakitan sendiri[81]: Teknik ini melibatkan peptida amfifilik yang dirancang khusus dengan
kapasitas untuk mengatur secara spontan menjadi struktur yang teratur, termasuk serat
nano. Metode ini memungkinkan pengendalian proses yang hebat mulai dari blok penyusun
dalam pendekatan desain bottom-up untuk aplikasi rekayasa jaringan.
• Perancah hibrida:Dengan tujuan mengendalikan fitur struktural dan komposisi,
terutama porositas, pada skala panjang yang berbeda, beberapa pendekatan dengan
teknik campuran digunakan, seperti kombinasi SCPL dan electrospinning [82], komposit
electrospun multilayer dengan parameter berbeda [83], dan kombinasi lebih dari dua
teknik fabrikasi [84,85].
• Manufaktur aditif(SAYA):Teknik konvensional pembuatan perancah berpori, serta alternatif

lain yang muncul, diterapkan untuk menghasilkan perancah guna menciptakan kembali
struktur mikro dan makro kompleks jaringan biologis. Namun, semuanya memiliki
keterbatasan dan memungkinkan kontrol yang sempit terhadap parameter tekstur penting
seperti bentuk pori, dimensi, dan interkonektivitas.86]. Sekelompok teknologi yang sedang
berkembang, berdasarkan teknik aditif AM, telah terbukti memungkinkan pembuatan dan
pengendalian bentuk yang kompleks. AM, yang populer disebut pencetakan 3D, adalah
definisi umum dan mewakili sekelompok besar proses yang dapat diklasifikasikan dalam
beberapa cara [87]. Dalam konteks fabrikasi perancah berpori, menurut Rey et al., beberapa
teknologi AM dapat digunakan untuk menghasilkan perancah dengan resolusi spasial yang
tinggi, kompleksitas struktural, dan kontrol atas arsitektur pori internal. Teknik yang paling
menjanjikan adalah 3DP berbasis serbuk, seperti sintering laser selektif (SLS), dan 3DP
berbasis bahan mentah cair, seperti stereolitografi (SLA) [86].
4.2. Alternatif untuk Fabrikasi Perancah

4.2.1. Deselularisasi Jaringan
Pendekatan alternatif terhadap perancah yang direkayasa adalah deselularisasi tanaman atau
jaringan/organ. Pendekatan ini didasarkan pada penghilangan sel-sel residen dan sebagian besar
kompleks histokompatibilitas utama dari suatu jaringan untuk mendapatkan perancah alami untuk
diunggulkan. Dengan cara ini, struktur ECM dipertahankan [87]. Ada beberapa contoh sukses dalam
rekayasa regenerasi jaringan yang mengikuti apa yang disebut strategi “like-to-like”, di mana jaringan
donor dan jaringan yang diregenerasi memiliki tipe yang sama.86]. Namun demikian, dalam kasus
deselularisasi jaringan/organ, pengadaan jaringan akan memerlukan penggunaan jaringan yang berasal
dari hewan, yang sangat berbeda dengan persyaratan mendasar dari daging hasil budidaya.
4.2.2. Kultur Mikrocarrier

Microcarrier adalah manik-manik dengan dimensi khas antara 100 dan 200mikrom, dan hal ini
mewakili solusi yang mungkin karena sel mamalia memerlukan permukaan tempat mereka dapat
tumbuh [17]. Untuk aplikasi rekayasa jaringan, khususnya untuk produk makanan, sistem berbasis
mikrokarrier dipertahankan sebagai sistem kultur utama untuk mencapai volume sel yang tinggi karena
sistem tersebut dapat menyediakan luas permukaan yang besar per satuan volume medium [88].
Verbruggen dkk. mengusulkan sistem produksi sel myoblast berdasarkan mikrocarrier yang tersuspensi
di dalam sel dan media di dalam bioreaktor tangki berpengaduk, mencapai hasil yang menjanjikan dalam
hal pertumbuhan sel untuk pengembangan daging budidaya yang efisien dan hemat biaya [88]. Bodiou
dkk. memberikan tiga skenario berdasarkan kultur dengan mikrocarrier: kultur mikrocarrier sementara
untuk proliferasi, microcarrier yang tidak dapat dimakan tetapi dapat terdegradasi, dan microcarrier
yang dapat dimakan yang tertanam dalam produk akhir. Menurut penulis, yang ketiga adalah yang
paling menjanjikan untuk produksi daging budidaya [89]. Di luar kemungkinan yang besar tersebut,
kelemahan utama dari penggunaan mikrocarrier atau agregat adalah bahwa sel dapat membentuk
kelompok yang tidak berproliferasi dengan cara yang benar, oleh karena itu, jika tidak dimodifikasi, fase
proliferasi sel akan sulit dikendalikan.17].
4.3. Biofabrikasi dan Bioprinting 3D

Biofabrikasi mengacu pada produksi produk biologis kompleks yang menggabungkan sel,
matriks, biomaterial, dan biomolekul, terutama untuk rekayasa jaringan, pengobatan regeneratif,
dan rekayasa pangan. Bidang yang sedang berkembang ini sangat terstimulasi oleh
pengembangan teknologi berbasis AM [90].
Pencetakan 3D langsung dari bahan biologis, termasuk sel, didefinisikan sebagai bioprinting 3D.
Tantangan utamanya adalah mengadaptasi teknologi yang dikembangkan untuk melelehkan plastik dan
logam agar dapat bekerja dengan bahan sensitif, lunak, dan biologis (bioinks). Tujuan utamanya adalah
untuk mereproduksi arsitektur mikro kompleks ECM lebih baik dibandingkan metode lain dan memiliki
kontrol lebih tinggi terhadap kepadatan dan deposisi sel [91]. Kelemahan utama dari teknik biofabrikasi
scaffolding yang ingin diatasi adalah terbatasnya migrasi sel di dalam pori
perancah. Menurut Sachlos et al., sel belum tentu mengenali permukaan perancah dan, yang terpenting,
sel tidak bermigrasi lebih dari 500 kali.mikrom dari permukaan [92]. Ada beberapa strategi 3DBP, yang
dicirikan oleh fitur berbeda, yang digunakan untuk membuat biofabrikasi struktur sarat sel 3D. Metode
yang paling tersebar luas adalah ekstrusi, inkjet, dan bioprinting berbasis stereolithogaphy, sedangkan
hidrogel umumnya digunakan sebagai bahan dasar bioink [93].
4.3.1. Strategi Bioprinting 3D

Ada beberapa strategi bioprinting yang berbeda, masing-masing memiliki kelebihan dan kekurangannya
sendiri (disediakan dalam Tabel3. Angka4memberikan representasi grafis dari metode yang paling umum atau
metode penelitian tingkat tinggi). Menurut Vijayavenkataraman dkk., tidak ada satu metode pun yang dapat
digunakan secara ekskursif untuk mencapai tujuan biofabrikasi jaringan kompleks, tren saat ini adalah
penelitian dalam pengembangan metode hibrida [94].
Gambar 4.Teknik bioprinting 3D yang berbeda, diadaptasi dari Santoni dkk. [95].
Bioprinting ekstrusi: Metode 3DBP yang paling umum adalah metode berbasis ekstrusi, terutama karena
serbaguna dan terjangkau, dan beberapa bioprinter tingkat pemula tersedia di pasaran [95]. Kang et al.,
misalnya, berhasil menggunakannya untuk melakukan bioprint konstruksi mirip daging [96]. Bioprinting
ekstrusi biasanya bergantung pada sistem penyaluran, seperti jarum suntik dengan nosel atau jarum yang
sesuai, dipasang pada kepala cetak yang digunakan untuk menyimpan bioink secara tepat pada alas cetak.
Sistem penyaluran dapat berupa tekanan, piston, atau sekrup: yang pertama memungkinkan viabilitas sel yang
lebih baik, namun dengan kontrol yang rendah pada laju aliran material dan ketepatan bentuk [91,93].
Keuntungan utama dari metode berbasis ekstrusi adalah skalabilitas, kemampuan cetak berbagai bahan
dengan viskositas tinggi, dan konsentrasi sel yang tinggi [94]. Namun demikian, resolusinya adalah yang paling
rendah jika dibandingkan dengan metode lain dan hal ini terkait dengan diameter nosel, dalam pengurangan
tersebut dibatasi oleh penurunan viabilitas sel yang diakibatkannya [94]. Selain itu, kelangsungan hidup sel
pasca pencetakan bergantung pada viskositas bioink dan konsentrasi sel [97]. Kelemahan selanjutnya adalah
penyumbatan nosel dan keterbatasan karena reologi material: hanya bioink dengan sifat penipisan geser yang
dapat digunakan [94].
Bioprinting inkjet: Sistem penyaluran tetesan cairan, berdasarkan suhu atau teknologi penggerak
piezoelektrik digunakan. Karena sifat prosesnya, bioprinting inkjet ditandai dengan kecepatan dan
resolusi tinggi, serta biaya yang lebih rendah. Namun, ini hanya dapat digunakan dengan bahan dengan
viskositas rendah, dan sangat dibatasi oleh mekanisme penyumbatan nosel. Selain itu, untuk
meningkatkan dan memfasilitasi pembentukan tetesan, konsentrasi sel yang rendah diperbolehkan [91,
94].
Stereolitografi dan bioprinting berbasis polimerisasi dua foton. Stereolitografi didasarkan pada
polimerisasi polimer peka cahaya; Sinar UV atau sinar tampak dapat digunakan untuk melakukan proses
fotocuring pada bahan secara lapis demi lapis [23]. Ini adalah metode bebas nosel, sehingga tidak
menghadapi masalah penyumbatan nosel, yang merupakan keterbatasan besar dalam metode yang
telah dijelaskan sebelumnya. Selain itu, memungkinkan diperolehnya resolusi sangat tinggi dan
kecepatan pencetakan tinggi. Namun, hanya polimer peka cahaya yang dapat digunakan, dan lampu UV,
serta foto-inisiator yang diaktifkan UV, dapat merusak sel dan secara konsisten mengurangi
kelangsungan pasca pencetakan [23,94,97,98]. Atas dasar teknologi ini, digital
pemrosesan cahaya (DLP) telah dikembangkan untuk menyembuhkan polimer dengan foto. Metode tersebut
menggunakan proyektor yang memancarkan cahaya tampak untuk mengatasi masalah akibat penyinaran UV [
98]. Dengan munculnya resolusi skala nano stereolitografi berbasis polimerisasi dua foton dapat dicapai.
Resolusi spasial tertinggi terdapat di antara teknik biofabrikasi namun dengan sistem yang mahal [94,99].
Bioprinting dengan bantuan laser. Metode ini didasarkan pada prinsip transfer yang diinduksi laser
[100]: menggunakan sinar laser berdenyut yang bekerja, melalui sistem pemfokusan, pada pita yang
disusun oleh bahan pendukung transportasi donor yang ditutupi oleh lapisan bahan penyerap energi
laser dan bahan biologis. Pulsa laser terfokus pada lapisan penyerap menghasilkan gelembung
bertekanan tinggi yang mendorong material terhadap substrat kolektor yang menghadap pita. LAB
adalah teknologi bebas nosel yang mampu melakukan bioprinting berkecepatan tinggi dan kepadatan
sel tinggi. Namun, ini kurang umum dibandingkan inkjet dan ekstrusi, terutama karena biaya teknologi
dan kesulitan memproduksi pita. Selain itu, sulit untuk meningkatkan produksi dalam jumlah besar [91].
Tabel 3.Perbandingan metode bioprinting utama dengan mempertimbangkan beberapa sifat, kelebihan dan
kekurangan, serta aplikasi utama. Tabel diadaptasi dari [23,94,95].
Properti Ekstrusi jet inkjet Berbantuan Laser Stereolitografi Dua Foton

Kecepatan Lambat Cepat Sedang Cepat Sangat cepat
Biaya Sedang Rendah Tinggi Rendah Sangat tinggi
Kelangsungan hidup sel 85–95% 80–95% <85% 25–90% > 80%
Kepadatan sel Tinggi Rendah Sedang Sedang Sedang
Skalabilitas Tinggi Tinggi Rendah Sedang-tinggi -
Resolusi 100–500mikroM 100–500mikroM 20–100mikroM 20–100mikroM 0,1–10mikroM
Viskositas bioink 6–30×107MPa·S <10mPa·S 1–300 mPa·S Tidak ada batasan Tidak ada batasan
Memiliki kemampuan mencetak

Sederhana saja Memiliki resolusi tinggi, Bebas nosel, punya
dengan kekentalan rendah Bebas nosel, punya
mampu mencetak bebas nosel, dan kompleksitas yang tinggi,
biomaterial, cepat kompleksitas tinggi,
Keuntungan bermacam-macam dapat menyetor memiliki yang tertinggi
kecepatan fabrikasi, dan memiliki tinggi
biomaterial, tinggi biomaterial dalam bentuk padat resolusi, dan memiliki
biaya rendah, dan a resolusi
kepadatan sel atau fase cair viabilitas sel yang tinggi
resolusi tinggi
Biaya tinggi, termal
Kurangnya pencetakan
Terbatas pada rendah kerusakan karena
multi-sel,
Hanya untuk kental cairan kental, nanodetik- Kurangnya pencetakan
Kekurangan kerusakan sel
cairan, resolusi resolusi, sel ond/femtodetik multi-sel, biaya
selama
kepadatan iritasi laser,
pengawetan foto
skalabilitas, biaya
Model jaringan untuk

penelitian sel, obat-obatan
Perancah dan
pengujian dan Divaskularisasi dan
Tambahan untuk Sel yang tepat kompleks
Aplikasi yg membarui presisi tinggi
teknologi lainnya endapan struktur dengan
obat, model
saluran
analog daging
konstruksi [101]
4.3.2. Formulasi Bioink

Formulasi bioink adalah salah satu cabang terpenting dalam penelitian bioprinting, dengan sekitar
25% dari keseluruhan publikasi di bidang ini [95]. Bahan-bahan ini biasanya didasarkan pada hidrogel
sitokompatibel, dan bahan-bahan tersebut harus memiliki beberapa sifat utama, baik dari sudut
pandang mekanis (misalnya viskositas, kemampuan cetak, dan kekakuan) maupun biologis (misalnya
sitokompatibilitas dan interaksi sel-bahan) [101].
Hidrogel adalah kelas polimer hidrofilik yang dapat berikatan silang, membentuk jaringan 3D
yang mampu menyerap dan menahan air dalam jumlah besar (bahkan hingga 100 kali berat
keringnya). Properti ini memungkinkan polimer mencapai tingkat hidrasi yang ditemukan di
sebagian besar jaringan. Selain itu, jaringan berpori memungkinkan terjadinya banyak hal
difusi nutrisi dan limbah keluar dari bahan. Hidrogel ini bisa stabil secara kimia, atau bisa
terdegradasi dan larut.102]. Oleh karena itu, mereka menawarkan kesempatan untuk
menciptakan kembali rekayasa lingkungan mikro yang cocok untuk sel, meniru sifat ECM
alami dan ceruk seluler asli yang penting untuk regenerasi jaringan [86]. Hidrogel dapat
dibentuk dengan menggunakan biopolimer alami, biopolimer sintetik, atau kombinasi
keduanya. Yang paling umum dibentuk menggunakan protein (seperti kolagen, elastin, dan
fibrin), polisakarida (alginat, agarosa, kitin/kitosan, dll.), dan polimer sintetik (seperti polietilen
glikol, polivinil alkohol, poliakrilamida, dan asam polilaktat). ) [86]. Kerangka bahan yang
digunakan untuk fabrikasi hidrogel lebih lengkap disajikan pada Tabel4.
Tabel 4.Polimer hidrofilik yang digunakan untuk mensintesis matriks hidrogel, diadaptasi dari [102].
Kombinasi Alami dan

Polimer Alami Polimer Sintetis
Polimer Sintetis
Polimer anionik: Poliester:

HA, asam alginat, pektin, PEG-PLA-PEG, PEG-PLGA-PEG, PEG-PCL-PEG,
PLA-PEG-PLA, PHB, P(PEG-ko-peptida),
karagenan, kondroitin
P(PF-co-EG)±akrilat, alginat-g-(PEO-PPO-PEO),
sulfat, dekstran sulfat
P(PEG/PBO tereftalat) P(PLGA-co-serine),
kolagen-akrilat,
Polimer kationik: Polimer lainnya:
alginat-akrilat,
kitosan, polilisin PEG-bis-(PLA-akrilat), PEG±CD,
P(HPMA-g-peptida),
PEG-gP(AAm-co-Vamine), PAAm,
Polimer amfipatik: P(HEMA/Matrigel®),
P(NIPAAm-co-AAc), P(NIPAAm-co-
kolagen (dan gelatin), HA-g-NIPAAm, GelMA
EMA), PVAc/PVA, PNVP, P(MMA-co-HEMA),
karboksimetil kitin, fibrin P(AN- ko-alil sulfonat),
Polimer netral: P(biscarboxy-phenoxy-phosphazene),
dekstran, agarosa, pullulan P (GEMA-sulfat)
Keuntungan utama polimer alami adalah sitokompatibilitas yang lebih tinggi dan adanya
gugus biologis yang dapat dikenali (biasanya hanya berasal dari hewan) yang dapat bertindak
sebagai sinyal dan memodulasi respons seluler seperti perlekatan, proliferasi, dan diferensiasi.
Namun, produk-produk tersebut dipengaruhi oleh variabilitas batch-to-batch, produk-produk
tersebut seringkali memerlukan protokol ekstraksi dan pemurnian yang ketat, dan produk-produk
tersebut menghadapi masalah pengadaan terkait keberlanjutan dan ketersediaan [27,86]. Terlebih
lagi, daging yang berasal dari hewan hanya berguna untuk kegiatan penelitian, namun tidak
memadai untuk produksi daging budidaya skala besar. Karena sumbernya, polimer sintetik
berpotensi mencapai reproduktifitas dan keseragaman yang lebih tinggi dalam perilaku mekanik
dan reologi, dengan sifat fisik yang dapat dikontrol tinggi. Selain kelebihan-kelebihan ini, mereka
mempunyai perilaku biologis terburuk, kurang memiliki bagian untuk berinteraksi dengan sel dan
menciptakan lingkungan yang sesuai. Oleh karena itu, beberapa kombinasi telah dirumuskan
untuk menggabungkan sifat-sifat kedua kelas. Sebagai alternatif, proses fungsionalisasi diterapkan
pada polimer sintetik untuk meningkatkan adhesi sel [86,102]. Sebagai contoh, Chaudhuri dkk.
menunjukkan efek menguntungkan dari modifikasi alginat dengan motif peptida RGD (asam
arginin-glisin-aspartat), suatu ligan pengikat integrin [103]. Integrin adalah reseptor
transmembran sel dan menjadi dasar dalam rekayasa jaringan karena mengaktifkan transduksi
sinyal dan mengatur siklus sel, termasuk penyebaran sel, migrasi, bimbingan, proliferasi, dan
apoptosis [103,104].
Jaringan hidrogel dibentuk melalui ikatan silang (fiksasi atau gelasi) dengan polimer
prekursor hidrogel. Hal ini dapat dilakukan sebelum, selama, atau setelah pencetakan 3D dan hal
ini penting untuk menjaga bentuk dan integritas struktural serta menghindari keruntuhan.
Mekanisme gelasi dapat dibagi menjadi dua kategori utama: kimia dan fisik. Biasanya, ikatan
silang fisik merupakan proses yang dapat dibalik namun memiliki stabilitas mekanik yang buruk,
sedangkan reagen kimia mampu meningkatkan stabilitas mekanik dengan menciptakan ikatan
silang kovalen.101]. Ikatan silang dapat distimulasi oleh cahaya (yaitu UV atau sinar tampak),
panas, atau rendaman pengikat silang (yaitu ikatan silang ionik).
Kombinasi mekanisme atau langkah-langkah dapat dilakukan untuk meningkatkan proses.

Misalnya, Colosi dkk. mengusulkan campuran bioink yang terdiri dari alginat dan gelatin metacroyl
(GelMA) pada konsentrasi rendah (<5% b/v) yang ditandai dengan viskositas rendah, yang berdampak
positif pada viabilitas sel selama proses ekstrusi. Tinta diikat silang dalam dua langkah, CaCl2 selama
(menggunakan nosel koaksial) dan setelah bioprinting, dan kemudian konstruksinya distabilkan lebih
lanjut dengan pengikatan silang UV [105].
Formulasi dan persiapan bioink dan bioprintingnya rumit karena keberadaan sel dan
persyaratan sterilitas dan viabilitasnya yang ketat. Mengenai kemampuan cetak, parameter
fisio-kimia hidrogel yang paling penting meliputi perilaku reologi, sifat pengembangan,
tegangan permukaan, sifat gelasi, dan kinetika. Sifat-sifat ini harus disesuaikan, dengan
mempertimbangkan teknik bioprinting (misalnya ekstrusi atau inkjet) dan jenis sel yang akan
digunakan. Dengan demikian, karakteristik bioink harus memenuhi persyaratan mekanis dari
sudut pandang proses dan pada saat yang sama memastikan kelangsungan hidup sel setelah
bioprinting dan di dalam konstruksi [101]. Sebagian besar makalah terbaru menguraikan
perlunya menemukan kompromi terbaik antara kemampuan mencetak dan spesialisasi untuk
jenis sel atau jaringan tertentu yang sedang dianalisis [95].
Menurut Rutz et al., formulasi bioink yang optimal harus mempertimbangkan keseluruhan proses.
Penulis mengacu pada bioprinting ekstrusi, yang saat ini paling umum, dan mencantumkan faktor-faktor
utama yang bertanggung jawab untuk mencapai desain bioink optimal yang mampu mencapai viabilitas
sel yang tinggi dan mengevaluasi dampaknya [106] (Angka5).
Gambar 5.Representasi skematis dari parameter proses utama, dikelompokkan berdasarkan fase bioink,
pencetakan, dan desain pasca-cetak, serta perilaku biologis sel yang dapat digunakan oleh parameter.
Diadaptasi dari [106].
Viabilitas dianggap sebagai tantangan utama karena berdampak pada peristiwa seluler berikutnya,
seperti proliferasi, diferensiasi, dan pembentukan jaringan, meskipun banyak faktor yang
mempengaruhi stres sel dan tingkat keparahannya belum sepenuhnya dipahami.
Selain itu, kepadatan seluler, proyeksi seluler, dan pembentukan jaringan yang dipertahankan
merupakan hal yang sangat penting [106].
Menurut Rutz dkk., faktor utama dalam desain bioink yang mempengaruhi kelangsungan hidup sel dan
pembentukan jaringan adalah sebagai berikut. Efeknya ditampilkan secara skematis dalam Tabel5.
Tabel 5.Hubungan antara sifat bahan bioink dan viabilitas serta perilaku seluler, diadaptasi dari [
106].
bioink Sel
Tekanan pencetakan^ ↓Kelangsungan hidup
Diameter nosel↓ ↓Kelangsungan hidup
Waktu pencetakan^ ↓Kelangsungan hidup
Derajat ikatan silang↓ ^Kepadatan dalam bioink ^

Viskositas↓ Kepadatan dalam bioink
• Ada hubungan melingkar antara sel dan reologi bioink: yang pertama berdampak pada reologi,
dan dengan demikian memproses parameter, dan sebaliknya. Misalnya, Billiet dkk. menemukan
penurunan dua kali lipat dalam viskositas bioink berbasis GelMA ketika dibuat dengan 0,5 dan 1,5
juta sel/mL dan penurunan empat kali lipat ketika dibuat dengan 2,5 juta sel/mL [107]. Oleh karena
itu, ada kebutuhan untuk memprediksi atau menguji sifat reologi tinta dengan sel di dalamnya.
• Tekanan mekanis harus diminimalkan, mengurangi tekanan pencetakan dan meningkatkan

diameter nosel karena sel merasakan tekanan mekanis dan mengalami tekanan mekanis yang lebih
tinggi.
• Modulus fase gel sangat mempengaruhi kelangsungan hidup sel, dan mungkin
juga berat molekul dan polidispersitas. Sifat mekanik bahan di sekitar sel
merupakan aspek penting yang kurang dipahami.
• Tautan silang pasca-cetak juga dapat mempengaruhi kelangsungan hidup sel. Seringkali,
konstruksi bioprint memiliki ikatan silang UV dan jumlah iradiasi yang dapat ditoleransi sel tidak
jelas, mungkin antara 30 detik dan beberapa menit. Selain itu, tingkat akhir dari ikatan silang dapat
mengganggu proyeksi sel dan pembentukan jaringan, suatu mekanisme penting untuk
memastikan pembentukan jaringan. Hal ini menjadi penting bila konsentrasi polimer ditingkatkan
untuk meningkatkan kemampuan cetak. Menurut penulis, konsentrasi polimer harus antara 5 dan
10%, namun jelas merupakan kuantitas yang bergantung pada polimer.
Hal penting lainnya yang menjadi fokus saat ini adalah teknik penilaian untuk membakukan
evaluasi kemampuan cetak [108,109]. Paxton dkk. mengusulkan metode penilaian kemampuan
cetak untuk mengevaluasi sifat reologi bioink untuk proses ekstrusi. Hal ini dibagi dalam dua
langkah: (1) penyaringan kualitatif pembentukan serat dan kemampuan penumpukan lapisan, dan
(2) evaluasi reologi yang berfokus pada inisiasi aliran, penipisan geser, dan sifat pemulihan pasca
pencetakan [108].
Melalui analisis gambar selama bioprinting, parameter lain yang terkait dengan
ketepatan bentuk dapat dihitung, seperti indeks kemampuan cetak (Pr) berdasarkan
perhitungan sirkularitas struktur seperti grid [109].
Penelitian untuk solusi baru dalam pengembangan bioink untuk kultur sel 3D dan tujuan bioprinting
dapat mendorong munculnya teknologi baru dalam rekayasa jaringan dan bioprinting makanan.
Tantangannya adalah mencapai keseimbangan yang tepat antara sifat kimia, morfologi, dan
struktur suatu bahan yang mempunyai efek positif pada proses siklus sel. Selain itu, bahan non-
replikasi harus dihindari untuk standarisasi proses produksi. Dalam hal bahan yang dapat
digunakan kembali setelah matang, bahan yang berasal dari hewan juga dapat digunakan [65,88].
Khusus untuk bidang bioprinting pangan, perlu dilakukan pertimbangan lebih lanjut. Menurut Post
dkk., persyaratan baru yang paling penting untuk bioink yang dapat dimakan berkaitan dengan
masalah biologis dan lingkungan: keberlanjutan (yaitu konsumsi air dan lahan, serta energi dan
jejak karbon), sumber bahan mentah (konsisten, bebas hewani, dan terukur), rasa, dan keamanan
untuk dikonsumsi manusia [27].
4.4. Bioreaktor
Dalam konteks rekayasa jaringan, bioreaktor digunakan untuk menerapkan dan
mengontrol parameter dan kondisi lingkungan pada konstruksi atau kultur sel. Parameter
terpenting dalam kultur adalah suhu, pH, CO2, dan biologis lainnya, biokimia (seperti
seperti oksigen, transfer nutrisi, atau pembuangan limbah), dan kondisi fisik (rangsangan mekanis)
[25]. Persyaratan spesifik dan arsitektur bioreaktor bergantung pada jenis sel atau kultur jaringan.
Dengan demikian, mereka harus dirancang dan diproduksi untuk tujuan spesifik jaringan [25].
• Sistem budaya statis:Mereka adalah yang paling sederhana dan menyediakan nutrisi yang dibutuhkan
dalam lingkungan fluida statis. Oleh karena itu, media harus sering diganti dan perfusinya dilakukan
melalui difusi cairan pasif.25]. Sistem ini dapat dengan mudah digabungkan dengan mekanisme penahan
beban, misalnya, untuk memberikan beban tekan pada jaringan yang direkayasa [110,111].
• Labu pemintal:Sistem berbasis labu pemintal digunakan untuk menerapkan tegangan geser yang
diinduksi fluida pada konstruksi yang terendam dalam larutan media yang bersirkulasi ulang dan
kaya nutrisi [25]. Meskipun sistem ini menyediakan lingkungan yang lebih baik untuk dibangun
sehubungan dengan budaya statis, labu spinner mungkin tidak optimal karena aliran turbulen dan
tegangan geser yang dihasilkan lebih tinggi [112].
• Sistem perfusi:Kondisi difusi yang buruk dari kultur statis dapat diperbaiki dengan
bioreaktor perfusi, terutama di bagian internal perancah berpori [113]. Sistem ini dicirikan
oleh bioreaktor yang membungkus kultur, wadah untuk medium (kaya nutrisi dan oksigen),
dan pompa yang menghasilkan aliran [27]. Selain itu, sistem perfusi memungkinkan sirkulasi
media secara otomatis, pembuangan limbah, dan memberikan tegangan geser akibat aliran,
yang bermanfaat dalam kultur jaringan tertentu seperti untuk jaringan dermis dan tulang
rawan [23,112].
• Bejana dinding berputar:Pendekatan alternatif untuk mengurangi keterbatasan difusi
nutrisi dan limbah dengan tegangan geser terbatas adalah penggunaan bioreaktor bejana
dinding berputar [24]. Meskipun tegangan geser penting untuk pematangan sel, gaya yang
berlebihan akan menyebabkan kerusakan atau pembentukan kapsul yang tidak diinginkan di
sekitar jaringan.112]. Metode ini menggunakan aliran laminar dinamis yang disebabkan oleh
putaran cairan di dalam bioreaktor, dan telah terbukti efektif untuk kultur sel, terutama
kondrosit dan sel jantung [24]. Kelemahan utamanya adalah pertumbuhan jaringan yang
tidak seragam, akibat medan gaya. Selain itu, gaya sentrifugal dapat menyebabkan
tumbukan antara perancah dan dinding bioreaktor [112].
• Aliran pulsatil:Untuk kultur sel kardiovaskular yang memerlukan stimulasi pulsatil, bioreaktor
yang memanfaatkan aliran pulsatil digunakan untuk meniru kondisi in vivo. Biasanya, sel-sel
pembuluh darah dikultur ke dalam perancah tubular [112].
Dengan alat teknologi dan desain, bioreaktor yang semakin canggih yang dirancang untuk
aplikasi spesifik dapat dibuat, dengan spesialisasi dan efektivitas tinggi [24]. Asumsi utama dalam
desain bioreaktor adalah bahwa faktor dan rangsangan yang sama yang menentukan sifat
fenotipik dan fungsi jaringan dan sel in vivo juga menentukan perkembangan sel in vitro [114].
Beberapa jaringan dikultur, menyediakan sistem mekanik, listrik, kimia, dan campuran yang
meniru lingkungan dalam kondisi in vivo. Jaringan kulit dan tulang rawan adalah salah satu yang
paling berhasil dikultur—yang terakhir terutama karena sifatnya yang avaskular—memberikan
rangsangan mekanis dalam kultur statis atau dinamis [23,115]. Selain itu, aliran yang diinduksi oleh
geseran tinggi digunakan untuk membiakkan jaringan tulang [116]. Zimmermann dkk.
menerapkan sistem yang mampu menerapkan regangan mekanis siklik pasif di dalam sistem
kultur pada konstruksi untuk rekayasa jaringan jantung [117,118]. Untuk jaringan jantung,
bioreaktor perfusi yang mampu memberikan stimulasi listrik dirancang dan diuji secara khusus [
119–121]. Bioreaktor spesifik lainnya diterapkan untuk katup jantung dan pembuluh darah [112,
120].
4.5. Peningkatan Proses Industri

Dalam produksi daging budidaya, terdapat beberapa tantangan teknologi untuk mencapai peningkatan
yang tepat. Dalam konteks ini, isu utama terkait dengan bioreaktor skala besar untuk produksi sel dan
pematangan jaringan dalam jumlah besar. Menurut Post et al., penelitian ini akan menguji konfigurasi dan jenis
bioreaktor lain untuk mencapai kepadatan sel yang lebih tinggi dengan meminimalkan pemanfaatan sumber
daya hayati dan biaya untuk menjadikan daging hasil budidaya sebagai komoditas [27]. Menurut penulis yang
sama, produksi sel awal dan pematangan jaringan akan terjadi
dua tahap yang terpisah dan berbeda dengan masalah yang berbeda pula. Yang pertama berkaitan
dengan proliferasi sel dengan faktor pengganda yang sesuai—tidak lebih rendah dari×109—dan
bertujuan untuk mempertahankan sel dalam keadaan pertumbuhan eksponensial dan mencegahnya
mengalami diferensiasi dewasa sebelum waktunya. Yang kedua terkait dengan pemberian rangsangan
yang benar dan pemberian nutrisi secara efisien [88]. Standar industri untuk bioreaktor sel mamalia
adalah tangki berpengaduk, dimana sel berada dalam suspensi, diagregasi, atau dilekatkan pada
pembawa mikro [21,31]. Untuk membangun sistem kultur berbasis mikrocarrier yang efisien dan hemat
biaya, beberapa tantangan harus dihadapi, yang pertama adalah sifat permukaan dan fisik dari
microcarrier: muatan, lapisan, permukaan, dan ukuran [88]. Selain itu, menurut pandangan yang
diberikan oleh Bodiou dkk., hubungan antara pembawa mikro dan produk akhir harus diperhatikan,
dengan mempertimbangkan kemungkinan teknologi. Skenario mikrokarrier sementara menghadirkan
masalah pemisahan dan pemulihan sel yang belum terselesaikan, sedangkan untuk dua skenario lainnya
(karrier mikro yang tidak dapat dimakan tetapi dapat terdegradasi dan mikrokarrier yang dapat dimakan
yang tertanam dalam produk akhir), bahan yang dapat dimakan atau dapat terbiodegradasi yang akan
digunakan dan teknologi produksinya adalah yang utama. masalah utama [89]. Dalam kasus perancah
atau konstruksi yang sarat sel dalam proses pematangan, tantangan utama terkait dengan stimulasi
mekanis yang tepat sel yang memerlukan penyelarasan yang benar dan, pada akhirnya, ketegangan
mekanis, dan peningkatan transportasi material untuk pemanfaatan media yang efisien,
memperkenalkan teknik daur ulang [24,87,88]. Menurut Martin et al., transisi dari batch laboratorium ke
bioreaktor industri akan memerlukan transisi dari bioreaktor fleksibel ke sistem yang sangat
terspesialisasi, dioptimalkan dan distandarisasi dari sudut pandang bioproses [24].
Peningkatan industri juga merupakan langkah penting untuk mendapatkan produk yang
kompetitif di pasar. Contoh pertama burger budidaya disajikan pada tahun 2013 di Belanda, dan
memerlukan total biaya produksi sebesar 300.000 $ [42]. Setelah presentasi tersebut, beberapa
perusahaan dan kelompok penelitian berupaya mengatasi tantangan kompleks ini. Menurut Guan
dkk., perkiraan biaya saat ini (2020) untuk daging atau produk ikan budidaya berkisar antara 66,4
$/kg hingga 2200,5 $/kg dibandingkan dengan beberapa dolar per kilogram untuk daging
konvensional, dan sebagian besar biaya tersebut dibebankan untuk kultur sel dan jaringan [122].
Dari pembahasan di atas, tujuan utama pencapaian daging budidaya hanya dapat dicapai jika
ditemukan pendekatan baru untuk sistem budidaya yang terjangkau, terukur, dan berkelanjutan.
Hal ini harus diterapkan dengan memanfaatkan beberapa metode desain, termasuk model silico
untuk proses produksi bioreaktor [92]. Prosesnya harus hemat biaya, oleh karena itu bahan yang
digunakan harus berasal dari sumber yang berlimpah dan bebas hewani, serta proses produksinya
harus terukur, ekonomis, dan berkelanjutan, dengan produksi limbah yang minimal [27].
5. Penerimaan Konsumen
Meskipun tujuan utama dari tinjauan ini adalah untuk mempertimbangkan dan menyelidiki
tantangan teknologi dan bioteknologi, perlu ditekankan bahwa penerimaan konsumen memainkan
peran penting dalam penyebaran daging hasil budidaya. Bryant di al. melakukan tinjauan sistematis
terhadap beberapa survei tentang topik ini [123]. Karya ini menyoroti kompleksitas dalam merumuskan
gambaran lengkap persepsi masyarakat terhadap daging hasil budidaya. Survei yang berbeda
melaporkan hasil yang berbeda. Tingkat penerimaan rata-rata daging budidaya yang dilaporkan oleh
Wilks dan Philip adalah 63,5%, sedangkan parameter yang sama, yang diidentifikasi oleh Hocquette,
bervariasi antara 5% dan 11% [124,125]. Hasil ini tidak sesuai karena pertimbangan populasi dan sampel,
serta struktur pertanyaan (bagaimana kuesioner dirumuskan, misalnya, kesediaan untuk mencoba
daging budidaya vs. kesediaan untuk makan secara teratur) [126]. Keberatan yang paling umum
berkaitan dengan produk yang tidak alami, persepsi pribadi yang kurang aman dan sehat dibandingkan
daging konvensional, dan kesan yang diperkirakan bahwa produk tersebut memiliki rasa, tekstur, dan
penampilan yang lebih rendah, disertai dengan harga yang lebih tinggi. Sebaliknya, argumen positif
terkait dengan kesejahteraan hewan dan manfaat lingkungan, namun pada saat yang sama juga disertai
dengan keraguan terhadap kelayakan dan status etika [125]. Sebagai
disarankan oleh Mark Post, seorang penulis terkemuka di bidang daging budidaya, penerimaan pelanggan
terhadap produk ini akan tetap bersifat spekulatif sampai produk ini benar-benar dipasarkan [66].
6. Kesimpulan
Peningkatan populasi global yang konstan dan cepat telah mendorong penelitian untuk
menemukan sumber protein baru untuk memenuhi permintaan yang meningkat. Dalam skenario ini,
pertanian seluler, khususnya daging hasil budidaya, semakin meningkatkan minat. Daging budidaya
telah membuka perdebatan sengit antara mereka yang melihatnya sebagai produk yang inovatif, etis,
dan berkelanjutan, dan mereka yang skeptis. Realisasi penuh produk ini akan menghadapi berbagai
tantangan, baik dari sudut pandang bioteknologi maupun teknologi.
Dalam kasus pertama, pemilihan hewan dan metode pengambilan sel merupakan langkah penting
dalam produksi daging budidaya dalam skala besar disertai dengan identifikasi pengganti FBS yang
mampu mempertahankan kelangsungan hidup dan proliferasi sel baik dalam jangka pendek maupun
jangka panjang. Meskipun, seperti diberitakan sebelumnya, langkah pertama telah diambil ke arah ini,
alternatif yang sepenuhnya non-hewani yang dapat menyamai karakteristik kinerja FBS masih jauh dari
dapat diidentifikasi.
Pendekatan bioteknologi juga penting untuk menciptakan produk yang tidak hanya aman,
namun juga mencerminkan daging tradisional. Meskipun benar bahwa perubahan-perubahan
yang terjadi di sektor peternakan berdampak terhadap lingkungan, namun juga benar bahwa
perubahan-perubahan tersebut telah memungkinkan kita untuk menghadirkan produk-produk
yang bercirikan kualitas gizi dan fungsional yang tinggi. Aspek kedua ini, selain berperan penting
dalam penerimaan konsumen, merupakan salah satu tantangan tersulit untuk diatasi. Oleh karena
itu, semua karakteristik organoleptik dan fungsional yang terdapat pada daging tradisional
merupakan konsekuensi langsung dari pakan dan kesejahteraan hewan serta direproduksi dalam
produk budidaya harus diperhatikan.
Dari sudut pandang teknis, tantangannya terkait dengan penerapan rantai proses yang andal
dan terukur. Tantangan keseluruhan terkait dengan sistem produksi dan budidaya. Mengenai
produksi, dalam literatur beberapa pendekatan terbukti sangat menjanjikan: mulai dari
scaffolding, yang merupakan teknologi lama namun terkenal, hingga alternatifnya, hingga
biofabrikasi dan bioprinting 3D. Hal terakhir ini berpotensi mewakili sebuah terobosan, bahkan jika
beberapa tantangan spesifik harus diatasi, seperti, misalnya, pemilihan bahan yang tepat sebagai
keseimbangan fitur kimia, mekanik, dan biologis yang dioptimalkan untuk kemampuan proses dan
kompatibilitas proses siklus sel. Selain itu, 3DBP dapat mengarah pada sistem dan proses tertutup,
yang dirancang untuk mengurangi risiko kontaminasi [33] dengan cara yang terukur dan modular.
Masalah besar lainnya terkait dengan diferensiasi sel dalam konstruksi melalui bioreaktor, yang
harus dipenuhi untuk permintaan ukuran yang lebih tinggi yang berbeda dari skala laboratorium
yang biasanya digunakan.
Kesimpulannya, beberapa tantangan bioteknologi dan teknis perlu diselidiki lebih lanjut
untuk memenuhi tujuan kualitas, keamanan, dan penerimaan konsumen. Dalam skenario ini,
sangatlah penting untuk mendorong inisiatif penelitian dengan karakter akses terbuka untuk
menyebarkan studi penelitian, hasil, dan solusi antara mitra publik dan swasta yang terlibat
dalam produksi daging budidaya.
Pendanaan:Penelitian ini tidak menerima pendanaan eksternal.
Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan:Tak dapat diterapkan.
Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan:Tak dapat diterapkan.
Ucapan Terima Kasih:Para penulis mengakui dukungan dari Universitas Milano melalui inisiatif
APC.
Konflik kepentingan:Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi
1. Röös, E.; Bajžel, B.; Smith, P.; Patel, M.; Sedikit, D.; Garnett, T. Serakah atau membutuhkan? Penggunaan lahan dan dampak pangan terhadap iklim pada tahun 2050 berdasarkan masa
depan peternakan yang berbeda.Gumpal. Mengepung. Perubahan.2017,47, 1–12. [Referensi Silang]
2. Bellet, C.; Rushton, J. Ketahanan pangan dunia, globalisasi dan peternakan: Membuka paradigma dominan ilmu kesehatan hewan.Pendeta Sains.
Teknologi.2019,38, 383–393. [Referensi Silang] [PubMed]
3. Rischer, H.; Szilvay, GR; Oksman-Caldentey, KM Pertanian seluler—Bioteknologi industri untuk makanan dan material.Saat ini. Pendapat.
Bioteknologi.2020,61, 128–134. [Referensi Silang]
4. Rubio, NR; Xiang, N.; Kaplan, DL Pendekatan nabati dan berbasis sel untuk produksi daging.Nat. Komunitas.2020,11, 6276.[Referensi
Silang]
5. Guerci, M.; Bava, L.; Zucali, M.; Sandrucci, A.; Penati, C.; Tamburini, A. Pengaruh strategi peternakan terhadap dampak lingkungan dari peternakan
sapi perah intensif di Italia.J.Res Susu.2013,80, 300–308. [Referensi Silang] [PubMed]
6. FAO.Artikel Berita: Pengurangan Besar-besaran Emisi Gas Rumah Kaca dari Peternakan dalam Jangkauan; FAO: Roma, Italia, 2022; Tersedia daring:
http://www.fao.org/news/story/en/item/197608/icode(diakses pada 29 Juni 2022).
7. Kriki, S.; Hocquette, JF Mitos Daging yang Dibudidayakan: Sebuah Tinjauan.Depan. Nutrisi.2020,7, 7.[Referensi Silang]
8. Lynch, JV; Pierrehumbert, TR Dampak iklim dari budidaya daging dan sapi potong.Depan. Mempertahankan. Sistem Pangan.2019,3, 5.[Referensi Silang]
9. Stehfest, E.; Bouwman, L.; van Vuuren, DP; den Elzen, MGJ; Eickhout, B.; Kabat, P. Manfaat iklim dari perubahan pola makan.Klim. Perubahan.2009,
95, 83–102. [Referensi Silang]
10. Rizvi, S.; Pagnutti, C.; Fraser, E.; Bauch, CT; Anand, M. Implikasi penggunaan lahan global terhadap tren pola makan.PLoS SATU2018, 13,
e0200781. [Referensi Silang]
11. Eibl, R.; Senn, Y.; Gubser, G.; Jossen, V.; van den Bos, C.; Eibl, D. Pertanian Seluler: Peluang dan Tantangan.Ann. Pdt. Makanan. Sains.
Teknologi2021,12, 51–73. [Referensi Silang]
12. Warner, RD Review: Analisis proses dan pendorong produksi daging seluler.Satwa2019,13, 3041–3058. [Referensi Silang] [
PubMed]
13. Djisalov, M.; Knežić, T.; Podunavac, I.; Živojević, K.; Radonik, V.; Knežević, N.Ž.; Bobrinetskiy, I.; Gadjanski, I. Menumbuhkan
Multidisiplin: Manufaktur dan Merasakan Tantangan dalam Produksi Daging Budidaya.Biologi2021,10, 204.[Referensi Silang] [
PubMed]
14. Reiss, J.; Robertson, S.; Suzuki, M. Sumber Sel untuk Daging yang Dibudidayakan: Penerapan dan Pertimbangan di Seluruh Alur Kerja Produksi.
Int. J.Mol. Sains.2021,22, 7513.[Referensi Silang] [PubMed]
15. Soice, E.; Johnston, J. Mengabadikan Sel untuk Konsumsi Manusia.Int. J.Mol. Sains.2021,22, 11660.[Referensi Silang] [PubMed]
16. Choi, KH; Yoon, JW; Kim, M.; Lee, HJ; Jeong, J.; Ryu, M.; Jo, C.; Lee, CK Isolasi sel induk otot dan kultur in vitro untuk produksi daging: Tinjauan
metodologis.Kompr. Pendeta Ilmu Makanan. Keamanan Makanan.2021,20, 429–457. [Referensi Silang]
17. Moritz, M.; Verbruggen, S.; Post, M. Alternatif untuk produksi daging sapi budidaya skala besar: Sebuah tinjauan.J.Integrasi. Pertanian.2015,14, 208–216. [
Referensi Silang]
18. Ong, KJ; Johnston, J.; Datar, saya.; Sewalt, V.; Holmes, D.; Shatkin, JA Pertimbangan keamanan pangan dan prioritas penelitian untuk industri daging dan makanan laut
yang dibudidayakan.Kompr. Pendeta Ilmu Makanan. Keamanan Makanan.2021,20, 5421–5448. [Referensi Silang]
19. O'Brien, F. Biomaterial & perancah untuk rekayasa jaringan.Materi. Hari ini2011,14, 88–95. [Referensi Silang]
20. Seah, J.; Singh, S.; Tan, L.; Choudhury, D. Perancah untuk pembuatan daging budidaya.Kritik. Pdt. Bioteknologi.2021,42, 311–323. [Referensi Silang
]
21. Moroni, L.; Burdick, J.; Highley, C.; Lee, SJ; Morimoto, Y.; Takeuchi, S.; Yoo, J. Strategi biofabrikasi untuk model in vitro 3D dan
pengobatan regeneratif.Nat. Pdt. Mater.2018,3, 21–37. [Referensi Silang]
22. Handral, H.; Tay, S.; Chan, WW; Choudhury, D. Pencetakan 3D produk daging budidaya.Kritik. Pendeta Ilmu Makanan. Nutrisi.2020,62, 272–281. [
Referensi Silang] [PubMed]
23. Derakhshanfar, S.; Mbeleck, R.; Xu, K.; Zhang, X.; Zhong, W.; Xing, M. Bioprinting 3D untuk perangkat biomedis dan rekayasa jaringan:
Tinjauan tren dan kemajuan terkini.Bioak. Materi.2018,3, 144–156. [Referensi Silang] [PubMed]
24. Martin, saya.; Wendt, D.; Heberer, M. Peran bioreaktor dalam rekayasa jaringan.Tren Bioteknologi.2004,22, 80–86. [Referensi Silang] [
PubMed]
25. Rosser, J.; Thomas-Vazquez, D. Proses bioreaktor untuk pematangan jaringan bioprint 3D. Di dalamBioprinting 3D untuk Bedah Rekonstruktif,
edisi pertama; Whitaker, TJ, Ed.; Elsevier Wordmark: Amsterdam, Belanda, 2018. [Referensi Silang]
26. Zidarič, T.; Milojević, M.; Vajda, J.; Vihar, B.; Maver, U. Daging Budidaya: Industri Daging Bergandengan Tangan dengan Metode Produksi Biomedis.Bahasa
Inggris Makanan. Putaran.2020,12, 498–519. [Referensi Silang]
27. Pos, M.; Levenberg, S.; Kaplan, D.; Genovese, N.; Fu, J.; Bryant, C.; Negoetti, N.; Verzijden, K.; Moutsatsou, P. Tantangan ilmiah,
keberlanjutan dan peraturan daging budidaya.Nat. Makanan.2020,1, 403–415. [Referensi Silang]
28. Specht, E.; Welch, D.; Clayton, E.; Lagally, C. Peluang Penerapan Metode Produksi dan Manufaktur Biomedis untuk Pengembangan
Industri Daging Bersih.Biokimia. bahasa Inggris J.2018,132, 161–168. [Referensi Silang]
29. McKee, C.; Chaudhry, GR Kemajuan dan tantangan dalam kultur sel induk.Selancar Koloid. B2017,159, 62–77. [Referensi Silang]
30. Nienow, AW Sebuah metode yang berpotensi terukur untuk pemanenan hMSC dari mikrocarrier.Biokimia. bahasa Inggris J.2014,85, 79–88. [Referensi Silang]
31. Melzener, L.; Verzijden, KE; Buijs, AJ; Pos, MJ; Flack, JE Daging sapi budidaya: Dari biopsi kecil hingga jumlah besar.J.Ilmu. Pertanian Pangan.2021,
32. Mulvaney, DR; Marple, DN; Merkel, RA proliferasi sel satelit otot rangka setelah pengebirian dan pemberian testosteron propionat.
Proses. sosial. Contoh. biologi. medis.1988,188, 40–45. [Referensi Silang]
33. Vestergaard, M.; Oksbjerg, N.; Henckel, P. Pengaruh intensitas pemberian pakan, penggembalaan dan penyelesaian pemberian pakan terhadap
karakteristik serat otot dan warna daging otot semitendinosus, longissimus dorsi dan supraspinatus sapi jantan muda.Ilmu Daging.2000,54, 177–185. [
Referensi Silang]
34. Brunner, D.; Frank, J.; Aplikasi, H.; Schöffl, H.; Pfaller, W.; Gstraunthaler, G. Kultur sel bebas serum: Basis data online interaktif media
bebas serum.ALTEX2010,27, 53–62. [Referensi Silang] [PubMed]
35. Subbiahanadar Chelladurai, K.; Selvan Christyraj, JD; Rajagopalan, K.; Yesudhason, BV; Venkatachalam, S.; Mohan, M.; Chellathurai
Vasantha, N.; Selvan Christyraj, JRS Alternatif FBS dalam kultur sel hewan—Sebuah gambaran umum dan perspektif masa depan.
Heliyon2021,7, e07686. [Referensi Silang] [PubMed]
36. Jochem, CE; van der Valk, JB; Stafleu, FR; Baumans, V. Penggunaan serum janin sapi: Masalah etika atau ilmiah?Alternatif. Laboratorium. animasi.
2002,30, 219–227. [Referensi Silang]
37. Gstraunthaler, G. Alternatif penggunaan serum janin sapi: Kultur sel bebas serum.ALTEX2003,20.4, 275–281. [Referensi Silang]
38. Kolkmann, AM; Pos, MJ; Rutjens, MAM; van Essen, ALM; Moutsatsou, P. Media bebas serum untuk pertumbuhan myoblast sapi
primer.Sitoteknologi2020,72, 111–120. [Referensi Silang]
39. Honn, KV; Singley, JA; Chavin, W. Serum sapi janin: Standar multivariat.Proses. sosial. Contoh. biologi. medis.1975,149, 344–347. [Referensi Silang]
40. Anderson, I. Kekeringan serum anak sapi janin melanda laboratorium kultur sel.Alam1980,285, 63.[Referensi Silang]
41. Hocquette, JF Apakah daging in vitro adalah solusi masa depan?Ilmu Daging.2016,120, 167–176. [Referensi Silang]
42. Balasubramanian, B.; Liu, W.; Pushparaj, K.; Park, S. Epik Produksi Daging In Vitro-Fiksi yang Menjadi Kenyataan.Makanan2021, 10, 1395.
[Referensi Silang]
43. Rubio, NR; Ikan, KD; Pemangkas, BA; Kaplan, DL Otot serangga in vitro untuk aplikasi rekayasa jaringan.Biomater ACS. Sains. bahasa Inggris2019,
44. Calder, PC Konferensi tentang masa depan produk hewani dalam pola makan manusia: Masalah kesehatan dan lingkungan Kuliah Pleno 3 n-3 PUFA dan
kesehatan: Fakta, fiksi dan masa depan Asam lemak n-3 rantai sangat panjang dan kesehatan manusia: Fakta, fiksi, dan masa depan.
Proses. Nutrisi. sosial.2019,7, 52–72.
45. Paranjape, S. Goat serum: Sebuah alternatif serum janin sapi dalam penelitian biomedis.India J. Exp. biologi.2004,42, 26–35. [
PubMed]
46. Guiotto, M.; Raffoul, W.; Hart, SAYA; Riehle, MO; di Summa, PG Lisat trombosit manusia untuk menggantikan serum janin sapi dalam
ekspansi hMSC untuk aplikasi translasi: Tinjauan sistematis.J.Terjemahan. medis.2020,18, 351.[Referensi Silang] [PubMed]
47. Ho, YY; Lu, HK; Lim, ZFS; Lim, HW; Ho, YS; Ng, SK Aplikasi dan analisis hidrolisat dalam kultur sel hewan. sumber daya hayati.
Bioproses.2021,8, 93.[Referensi Silang]
48. Burteau, CC; Verhoeye, FR; Mol, JF; Ballez, JS; Agathos, SN; Schneider, YJ Fortifikasi media kultur sel bebas protein dengan pepton
tanaman meningkatkan budidaya dan produktivitas lini sel CHO penghasil interferon-gamma.Vitr. Pengembang Sel. biologi. animasi.
49. Spearman, M.; Lodewyks, C.; Richmond, M.; Butler, M. Bioaktivitas dan fraksinasi hidrolisat peptida dalam kultur sel CHO.
Bioteknologi. Prog.2014,30, 584–593. [Referensi Silang]
50. Dinyanyikan, YH; Lim, SW; Chung, JY; Lee, GM Ragi hidrolisat sebagai aditif berbiaya rendah pada media bebas serum untuk produksi
trombopoietin manusia dalam kultur suspensi sel ovarium hamster Cina.Aplikasi. Mikrobiol. Bioteknologi.2004,63, 527–536. [Referensi
Silang]
51. Mol, J.; Peeters-Joris, C.; Agathos, SN; Schneider, YJ Asal hidrolisat protein beras yang ditambahkan ke media bebas protein mengubah sekresi dan
proteolisis ekstraseluler interferon-γ rekombinan serta pertumbuhan sel CHO-320.Bioteknologi. Biarkan.2004,26, 1043–1046. [Referensi Silang]
52. Wang, L.; Zeng, B.; Zhang, X.; Liao, Z.; Gu, L.; Liu, Z.; Zhong, Q.; Wei, H.; Fang, X. Pengaruh polifenol teh hijau terhadap keanekaragaman mikroba
usus dan pengendapan lemak pada tikus C57BL/6J HFA.Fungsi Pangan.2016,7, 4956–4966. [Referensi Silang]
53. Davami, F.; Eghbalpour, F.; Nematollahi, L.; Barkhordari, F.; Mahboudi, F. Pengaruh Suplementasi Pepton pada Media Kultur Berbeda
terhadap Pertumbuhan, Jalur Metabolik dan Produktivitas Sel CHO DG44; Wawasan Baru tentang Profil Asam Amino.
Iran. Bioma. J.2015,19, 194–205. [Referensi Silang] [PubMed]
54. Ho, SC; Nian, R.; Woen, S.; Chng, J.; Zhang, P.; Yang, Y. Dampak hidrolisat terhadap produktivitas, pemurnian dan kualitas antibodi monoklonal
dalam sel ovarium hamster Cina.J. Biosci. Bioeng.2016,122, 499–506. [Referensi Silang] [PubMed]
55. Jeong, Y.; Choi, WY; Taman, A.; Lee, YJ; Lee, Y.; Taman, GH; Lee, SJ; Lee, Minggu; Ryu, YK; Kang, DH Marine cyanobacterium Spirulina
maxima sebagai alternatif suplemen media kultur sel hewan.Sains. Reputasi.2021,11, 4906.[Referensi Silang] [PubMed]
56. Ng, JY; Chua, ML; Zhang, C.; Hong, S.; Kumar, Y.; Gokhale, R.; Ee, ekstrak PLR Chlorella vulgaris sebagai pengganti serum yang meningkatkan
pertumbuhan sel mamalia dan ekspresi protein.Depan. Bioeng. Bioteknologi.2020,8, 564667.[Referensi Silang]
57. Chabanon, G.; Chevalot, saya.; Farge, B.; Harscoat, C.; Chenu, S.; Goergen, JL; Marc, A.; Marc, I. Pengaruh Kondisi Hidrolisis Protein
Rapeseed terhadap Pertumbuhan Sel Hewan pada Media Bebas Serum yang Dilengkapi Hidrolisat. Di dalamTeknologi Sel untuk
Produk Sel; Springer: Dordrecht, Belanda, 2007; hal.667–669.
58. Zhang, C.; Li, H.; Li, C.; Li, Z. Fe-Loaded MOF-545(Fe): Aktivitas Seperti Peroksidase untuk Degradasi Pewarna Pewarna dan Adsorpsi Tinggi untuk
Menghilangkan Pewarna dari Air Limbah.Molekul2019,25, 168.[Referensi Silang] [PubMed]
59. Paradkar, PH; Vaidya, AD; Talwalkar, SC; Mishra, LS; Agashe, SV; Vaidya, RA Bovine whey protein dan cairan biologis lainnya
sebagai alternatif serum janin sapi dalam melengkapi media kultur sel.India J. Exp. biologi.2019,57, 123–130.
60. Suryawanshi, R.; Kanoujia, J.; Parashar, P.; Saraf, SA Sericin: Biopolimer Protein Serbaguna dengan Signifikansi Terapi.Saat ini. farmasi.
Des.2020,26, 5414–5429. [Referensi Silang]
61. Thongsook, T.; Tiyaboonchai, W. Efek penghambatan serisin pada polifenol oksidase dan penerapannya sebagai pelapis yang dapat dimakan.Int. J. Ilmu
Pangan. Teknologi2011,46, 2052–2061. [Referensi Silang]
62. Veskoukis, AS; Kerasoti, E.; Skaperda, Z.; Papapostolou, PA; Nepka, C.; Spandidos, DA; Asprodini, E.; Taitzoglou, I.; Kouretas,
D. Protein whey meningkatkan profil antioksidan tikus dengan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan penting dengan cara yang spesifik pada
jaringan.Kimia Makanan. beracun.2020,142, 111508.[Referensi Silang]
63. Smithers, GW Whey dan protein whey—dari 'selokan menjadi emas'.Int. perusahaan susu j.2008,18, 695–704. [Referensi Silang]
64. Kerasioti, E.; Kiskini, A.; Veskoukis, A.; Jamurtas, A.; Tsitsimpikou, C.; Tsatsakis, AM; Koutdakis, Y.; Stagos, D.; Kouretas, D.; Karathanos, V. Pengaruh
kue karbohidrat-protein khusus pada penanda stres oksidatif setelah siklus yang melelahkan pada manusia.Kimia Makanan. beracun.2012,50,
2805–2810. [Referensi Silang] [PubMed]
65. Stephens, N.; Dunsford, saya.; Silvio, L.; Ellis, D.; Glencross, A.; Sexton, A. Membawa daging budidaya ke pasar: Tantangan teknis, sosial-politik,
dan peraturan dalam Pertanian Seluler.Tren Ilmu Makanan. Teknologi.2018,78, R713–R715. [Referensi Silang] [PubMed]
66. Post, M. Daging sapi budidaya: Teknologi medis untuk menghasilkan pangan.J.Ilmu. Pertanian Pangan.2014,94, 1039–1041. [Referensi Silang] [PubMed]
67. Post, M. Sumber protein hewani alternatif: Daging sapi budidaya.NY Akademik. Sains.2014,1328, 29–33. [Referensi Silang]
68. Mikos, AG; Thorsen, AJ; Czerwonka, LA; Bao, Y.; Langer, R.; Winslow, DN Persiapan dan karakterisasi busa poli (asam l-laktat).
Polimer1994,35, 1068–1077. [Referensi Silang]
69. Prasad, A.; Sankar, Bpk; Katiyar, V. Canggih dalam metode pelindian partikulat pengecoran pelarut untuk fabrikasi perancah ortopedi. Materi. Hari
ini Proc.2017,4, 898–907. [Referensi Silang]
70. Mikos, AG; Sarakinos, G.; Leite, SM; Kosong, JP; Langer, R. Busa biodegradable tiga dimensi yang dilaminasi untuk digunakan dalam rekayasa
jaringan.Biomaterial1992,14, 323–330. [Referensi Silang]
71. MaretSayanez-Pyaiturez, CA; Olivas-Armendariz, I.; Castro-Carmona, JS; GarcSayaa-Casillas, PE Perancah untuk rekayasa jaringan melalui pemisahan fase
yang diinduksi secara termal. Di dalamKemajuan dalam Pengobatan Regeneratif; Wislet-Gendebien, S., Ed.; InTechOpen: London, Inggris, 2011; hal.275–
294.
72. Akbarzadeh, R.; Yousefi, AM Pengaruh parameter pemrosesan dalam teknik pemisahan fase yang diinduksi secara termal pada arsitektur
perancah berpori untuk rekayasa jaringan tulang.J. Biomed. Materi. Res. Aplikasi B. Biomater.2014,102, 1304–1315. [Referensi Silang]
73. Mooney, DJ; Baldwin, DF; Suh, NP; Kosong, JP; Langer, R. Pendekatan baru untuk membuat spons berpori dari poli(d,l-asam laktat-
koglikolat) tanpa menggunakan pelarut organik.Biomaterial1996,17, 1417–1422. [Referensi Silang]
74. Costantini, M.; Barbetta, A. Teknologi berbusa gas untuk rekayasa perancah 3D. Di dalamPerancah Rekayasa Jaringan 3D Fungsional; Deng, Y.,
Kuiper, J., Eds.; Penerbitan Elsevier Woodhead: Duxford, Inggris, 2018; hlm.127–149.
75. Dehghani, F.; Annabi, N. Rekayasa perancah berpori menggunakan teknik berbasis gas.Saat ini. Pendapat. Bioteknologi.2011,22, 661–666. [Referensi Silang]
76. Gibson, LJ; Ashby, MFPadatan Seluler: Struktur dan Sifat; Cambridge University Press: Cambridge, Inggris, 1999.
77. Pilar, RM; Filiaggi, MJ; Sumur, JD; Grynpa, MD; Kandel, RA Perancah kalsium polifosfat berpori untuk aplikasi pengganti tulang—
Karakterisasi in vitro.Biomaterial2001,22, 963–972. [Referensi Silang]
78. Braghirolli, DI; Steffens, D.; Pranke, D. Electrospinning untuk pengobatan regeneratif: Tinjauan topik utama.Penemuan Narkoba. Hari ini2014,19,
743–753. [Referensi Silang]
79. Hobson, CM; Amoroso, NJ; Amini, R.; Ungchusri, E.; Hong, Y.; D'Amore, A. Pembuatan perancah elastomer dengan struktur berserat
lengkung untuk rekayasa selebaran katup jantung.J. Biomed. Materi. Res.2015,103, 3101–3106. [Referensi Silang]
80. Sola, A.; Bertaccini, J.; D'Avella, D.; Anselmi, L.; Maraldi, T.; Marmiroli, S.; Messori, M. Pengembangan perancah polimer pelarut-casting particulate
leaching (SCPL) sebagai dukungan tiga dimensi yang ditingkatkan untuk meniru ceruk sumsum tulang.Materi. Sains. bahasa Inggris2018,96,
81. Hartgerink, JD; Beniash, E.; Stupp, SI Peptide-amphiphile nanofibers: Perancah serbaguna untuk persiapan bahan rakitan sendiri.Proses. Natal.
Akademik. Sains. Amerika Serikat2002,99, 5133–5138. [Referensi Silang]
82. Steele, JAM; McCullen, SD; Callanan, A.; Autefage, H.; Accardi, MA; Dini, D. Morfologi perancah kombinatorial untuk rekayasa tulang
rawan artikular zonal.Akta Biomater.2014,10, 2065–2075. [Referensi Silang]
83. McCullen, SD; Autefage, H.; Callanan, A.; Tuan-tuan, E.; Stevens, MM Perancah berserat anisotropik untuk regenerasi tulang rawan
artikular.Jaringan Eng.2012,18, 2073–2083. [Referensi Silang]
84. Vaquette, C.; Cooper-White, J. Metode sederhana untuk membuat perancah komposit berlapis-lapis 3-D.Akta Biomater.2013,9, 4599–
4608. [Referensi Silang]
85. Salerno, A. Hubungan pemrosesan/struktur/properti perancah komposit PCL dan PCL-HA multi-skala yang dibuat melalui pembusaan
gas dan templat balik NaCl.Bioteknologi. Bioeng.2011,108, 963–976. [Referensi Silang]
86. Rey, DFV; St-Pierre, JP 6—Teknik fabrikasi perancah rekayasa jaringan. Di dalamSeri Penerbitan Woodhead dalam Biomaterial, Buku Pegangan
Perancah Rekayasa Jaringan; Woodhead Publishing: Cambridge, Inggris, 2019; Jilid 1, hlm.109–125. ISBN 9780081025635.[Referensi Silang]
87. Badylak, SF; Tullius, R.; Kokini, K.; Shelbourne, KD; Klootwyk, T.; Voytik, SL Penggunaan submukosa usus kecil xenogenik sebagai biomaterial
untuk perbaikan tendon Achille pada model anjing.J. Biomed. Materi. Res1995,29, 977–985. [Referensi Silang]
88. Verbruggen, S.; Luining, D.; van Essen, A.; Posting, produksi sel myoblast M. Bovine dalam sistem berbasis mikrocarrier. Sitoteknologi
89. Bodiou, V.; Moutsatsou, P.; Post, M. Microcarriers untuk Meningkatkan Produksi Daging Budidaya.Depan. Nutrisi.2020,7, 10.[Referensi Silang]
90. Tenenhaus, M.; Rennekampff, HO; Mulder, G. Produk sel hidup sebagai biomaterial penyembuhan luka. Di dalamBiomaterial Penyembuhan Luka,
edisi pertama; Agren, SM, Ed.; Elsevier: Amsterdam, Belanda, 2016. [Referensi Silang]
91. Murphy, S.; Atala, A. Bioprinting 3D Jaringan dan Organ.Nat. Bioteknologi.2014,32, 369–392. [Referensi Silang]
92. Sachs, E.; Czernuszka, J. Membuat Perancah Rekayasa Jaringan Bekerja. Tinjauan Penerapan Teknologi Fabrikasi Bentuk Bebas
Padat pada Produksi Perancah Rekayasa Jaringan.euro. Materi Sel.2003,5, 29–39. [Referensi Silang]
93. Zhu, W.; Bu, X.; Gou, M.; Mei, D.; Zhang, K.; Chen, S. Pencetakan 3D biomaterial fungsional untuk rekayasa jaringan.Saat ini. Pendapat.
Bioteknologi.2016,40, 103–112. [Referensi Silang]
94. Vijayavenkataraman, S.; Wei-Cheng, Y.; Wen, L.; Chi-Hwa, W.; Fuh, J. Bioprinting 3D jaringan dan organ untuk pengobatan regeneratif.Adv.
Pengiriman Obat. Putaran.2018,132, 296–332. [Referensi Silang]
95. Santoni, S.; Gugliandolo, S.; Sponchioni, M.; Moscatelli, D.; Colosimo, B. Bioprinting 3D: Status dan tren saat ini—Panduan untuk literatur
dan praktik industri.Bio-Des. Manuf.2021,5, 14–42. [Referensi Silang]
96. Kang, DH; Louis, F.; Liu, H.; Shimoda, H.; Nishiyama, Y.; Nozawa, H.; Kakitani, M.; Takagi, D.; Kasa, D.; Nagamori, E.; dkk. Merekayasa jaringan
seperti daging utuh dengan perakitan serat sel menggunakan bioprinting terintegrasi gel tendon.Nat. Komunitas.2021, 12, 5059.[Referensi
Silang]
97. Chang, R.; Nama, J.; Sun, W. Pengaruh tekanan pengeluaran dan diameter nosel pada kelangsungan hidup sel dari penulisan sel langsung berbasis fabrikasi
bentuk bebas padat.Jaringan Eng. A2008,14, 41–48. [Referensi Silang]
98. Senang sekali, A.; Makkithaya, K.; Hunakunti, B.; Hegde, A.; Krishnamurthy, K.; Sarkar, A.; Lobo, C.; Keshav, DVS; Dharshini, G.;
Mascarenhas, S.; dkk. Wawasan tentang kemajuan dan penerapan bioprinting 3d: Sebuah tinjauan.pencetakan bio2021,24, e00176. [
Referensi Silang]
99. Lee, KS; Kim, RH; Yang, DY; Park, SH Kemajuan dalam nano/mikrofabrikasi 3D menggunakan polimerisasi yang dimulai dengan dua foton. Prog.
Polim. Sains.2008,33, 631–681. [Referensi Silang]
100. Barron, JA; Ringeisen, BR; Kim, H.; Spargo, BJ; Chrisey, DB Penerapan pencetakan laser pada sel mamalia.Film Padat Tipis 2004,453,
101. Hölzl, K.; Lin, S.; Tytgat, L.; Van Vlierberghe, S.; Gu, L.; Ovsianikov, A. Sifat bioink sebelum, selama dan setelah bioprinting 3D.
Biofabrikasi2016,8, 032002.[Referensi Silang]
102. Hoffman, AS Hidrogel untuk Aplikasi Biomedis.Adv. Pengiriman Obat. Putaran.2002,65, 18–23. [Referensi Silang]
103. Chaudhuri, O.; Gu, L.; Klumper, D.; Darnell, M.; Bencherif, S.; Penenun, J.; Huebsch, N.; Lee, H.; Lippens, E.; Duda, G.; dkk. Hidrogel dengan
relaksasi stres yang dapat diatur mengatur nasib dan aktivitas sel induk.Nat. Materi.2015,15, 326–334. [Referensi Silang]
104. Humphries, J.; Byron, A.; Sekilas tentang ligan Humphries, MJ Integrin.J. Ilmu Sel.2007,119, 3901–3903. [Referensi Silang]
105. Colosi, C.; Shin, SR; Manoharan, V.; Massa, S.; Costantini, M.; Barbetta, A.; Dokmeci, Bpk; Dentini, M.; Khademhosseini,
A. Bioprinting mikrofluida dari konstruksi jaringan 3D heterogen menggunakan bioink dengan viskositas rendah.Adv. Materi.2016,28, 677–684. [Referensi
Silang]
106. Rutz, A.; Lewis, P.; Shah, R. Menuju bioink generasi berikutnya: Menyesuaikan sifat material sebelum dan sesudah pencetakan untuk mengoptimalkan kelangsungan hidup sel.
Nyonya Banteng.2017,42, 563–570. [Referensi Silang]
107. Billiet, T.; Gevaert, E.; De Schryver, T.; Cornelissen, R.; Dubruel, P. Pencetakan 3D konstruksi rekayasa jaringan yang sarat sel gelatin
metakrilamida dengan viabilitas sel yang tinggi.Biomaterial2013,35, 49–62. [Referensi Silang]
108. Paxton, N.; Smolan, W.; Bock, T.; Melchel, F.; Groll, J.; Jungst, T. Proposal untuk Menilai Kemampuan Cetak Bioink untuk Bioprinting
Berbasis Ekstrusi dan Evaluasi Sifat Rheologi yang Mengatur Bioprintabilitas.Biofabrikasi2017,9, 044107.[Referensi Silang]
109.Ouyang, L.; Yao, R.; Zhao, Y.; Sun, W. Pengaruh sifat bioink pada kemampuan cetak dan viabilitas sel untuk bioplotting 3D sel induk embrionik.
Biofabrikasi2016,8, 035020.[Referensi Silang]
110. Waldman, SD; Couto, DC; Grynpa, MD; Pilar, RM; Kandel, RA Penerapan pembebanan siklik tunggal dapat mempercepat pengendapan matriks
dan meningkatkan sifat tulang rawan yang direkayasa jaringan.Osteoartritis. tulang rawan.2006,14, 323–330. [Referensi Silang] [PubMed]
111. Correia, V.; Panadero, JA; Ribeiro, C.; Sencadas, V.; Rocha, JG; Gomez Ribelles, JL Desain dan validasi bioreaktor biomekanik untuk kultur
jaringan tulang rawan.Biomekan. Model. Mekanobiol.2015,8, 471–478. [Referensi Silang] [PubMed]
112. Chen, HC; Hu, YC Bioreaktor untuk rekayasa jaringan.Bioteknologi. Biarkan.2006,28, 1415–1423. [Referensi Silang] [PubMed]
113. Martin, I. Modulasi sifat mekanik tulang rawan rekayasa jaringan.Bioheologi2000,37, 141–147.
114. Tandon, N.; Cimetta, E.; Bhumiratana, S.; Godier-Furnyaitumont, A.; Maidhof, R.; Vunjak-Novakovic, G. Champer II.6.6—Bioreaktor untuk
Rekayasa Jaringan. Di dalamIlmu Biomaterial, Edisi Ketiga: Pengantar Bahan dalam Kedokteran, edisi ke-3; Pers Akademik: Cambridge,
MA, AS; Elsevier: Cambridge, MA, AS, 2013.[Referensi Silang]
115. Mauck, RL; Soltz, MA; Wang, CC; Wong, DD; Chao, PH Rekayasa jaringan fungsional tulang rawan artikular melalui pemuatan dinamis gel
agarosa yang diunggulkan kondrosit.J. Biomekan. bahasa Inggris2000,122, 252–260. [Referensi Silang]
116. Grayson, WL; Fröhlich, M.; Yeager, K.; Bhumiratana, S.; Chan, ME Fitur khusus pengobatan regeneratif: Rekayasa cangkok tulang manusia
berbentuk anatomi.Proses. Natal. Akademik. Sains. Amerika Serikat2009,107, 3299–3304. [Referensi Silang]
117. Zimmermann, WH; Schneiderbanger, K.; Schubert, P.; Didiya,M.; Münzel, F. Rekayasa jaringan dari konstruksi otot jantung yang berbeda.
Lingkaran. Res.2002,90, 223–230. [Referensi Silang]
118. Zimmermann, W.; Melnychenko, saya.; Wasmeier, G.; Didiya,M.; Naito, H. Rekayasa cangkok jaringan jantung meningkatkan fungsi sistolik dan diastolik
pada jantung tikus yang mengalami infark.Nat. medis.2006,12, 452–458. [Referensi Silang]
119. Radisik, M.; Marsano, A.; Maidhof, R.; Wang, Y.; Vunjak-Novakovic, G. Rekayasa jaringan jantung menggunakan sistem bioreaktor perfusi.Nat.
protokol.2008,3, 719–738. [Referensi Silang]
120. Tandon, N.; Cannizzaro, C.; Chao, PH; Maidhof, R.; Marsano, A. Sistem stimulasi listrik untuk rekayasa jaringan jantung. Nat. protokol.
2009,4, 155–173. [Referensi Silang] [PubMed]
121. Maidhof, R.; Tandon, N.; Lee, EJ; Luo, J.; Duan, Y.; Yeager, K.; Vunjak-Novakovic, G. Perfusi biomimetik dan stimulasi listrik yang diterapkan secara
bersamaan meningkatkan perakitan jaringan jantung yang direkayasa.J. Jaringan Eng. Regen. medis.2011,6, e12–e23. [Referensi Silang] [
PubMed]
122. Guan, X.; Lei, Q.; Yan, Q.; Li, X.; Zhou, J.; Du, G.; Chen, J. Tren dan ide dalam teknologi, regulasi dan penerimaan masyarakat terhadap daging hasil
budidaya.Pangan Masa Depan J. Pertanian Pangan. sosial.2021,3, 100032.[Referensi Silang]
123. Bryant, C.; Barnett, J. Penerimaan konsumen terhadap daging budidaya: Tinjauan sistematis.Ilmu Daging.2018,143, 8–17. [Referensi Silang] [PubMed]
124. Wilks, M.; Phillips, CJ Sikap terhadap daging in vitro: Sebuah survei terhadap konsumen potensial di Amerika Serikat.PLoS SATU2017, 12,
e0171904. [Referensi Silang]
125. Hocquette, A.; Lambert, C.; Sinquin, C.; Peterolff, L.; Wagner, Z.; Bonny, SPF; Hocquette, JF Konsumen yang terdidik tidak percaya bahwa daging
buatan adalah solusi terhadap permasalahan industri daging.J.Integrasi. Pertanian.2015,14, 273–284. [Referensi Silang]
126. Hoket,É.;Liu, J.; Ellies-Oury, anggota parlemen; Kriki, S.; Hocquette, JF Apakah masa depan daging di Prancis bergantung pada sel otot yang dikultur?
Jawaban dari segmen konsumen yang berbeda.Ilmu Daging.2022,188, 108776.[Referensi Silang]

Applsci 12 06771 V2.en - Id

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Applsci 12 06771 V2.en - Id

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

Tantangan Bioteknologi dan Teknis Terkait Produksi Daging

Editor Akademik: Jean-François

Hak cipta:© 2022 oleh penulis.

Aplikasi. Sains.2022,12, 6771.https://doi.org/10.3390/app12136771 https://www.mdpi.com/journal/applsci

Pertanian Seluler dan Daging Budidaya

2. Proses Produksi Daging Budidaya

3. Tantangan Terkait Produksi Daging Budidaya

Tantangan Bioteknologi Tantangan Teknis

3.1. Tantangan Bioteknologi

3.1.2. Pilihan Lokasi Pengumpulan

3.1.3. Metode Pemanenan Sel

3.1.4. Serum Sapi Janin: Tantangan Etis

3.1.5. Proliferasi Sel Tinggi dan Ketidakstabilan Genetik

3.1.6. Sifat Gizi dan Fungsional Daging Budidaya

3.1.7. Alternatif FBS

Matriks Tipe Sel Efek Referensi

Peningkatan budidaya dan produktivitas

CHO Produktivitas interferon beta manusia yang lebih tinggi

CHO-320 Perlindungan terhadap stres oksidasi dari

3.1.8. Sistem Pengendalian Pangan untuk Daging Budidaya

4. Tantangan Teknis dalam Produksi Daging Budidaya

4.1. Fabrikasi Perancah

Gambar 2.Teknologi fabrikasi perancah berpori konvensional masing-masing memproses representasi

4.1.1. Teknologi Fabrikasi Perancah Berpori Konvensional

4.1.2. Teknologi Fabrikasi Perancah Berpori Non-Konvensional

• Manufaktur aditif(SAYA):Teknik konvensional pembuatan perancah berpori, serta alternatif

4.2. Alternatif untuk Fabrikasi Perancah

4.2.2. Kultur Mikrocarrier

4.3. Biofabrikasi dan Bioprinting 3D

4.3.1. Strategi Bioprinting 3D

Properti Ekstrusi jet inkjet Berbantuan Laser Stereolitografi Dua Foton

Memiliki kemampuan mencetak

Model jaringan untuk

4.3.2. Formulasi Bioink

Kombinasi Alami dan

Polimer anionik: Poliester:

Kombinasi mekanisme atau langkah-langkah dapat dilakukan untuk meningkatkan proses.

Diameter nosel↓ ↓Kelangsungan hidup

Waktu pencetakan^ ↓Kelangsungan hidup

Derajat ikatan silang↓ ^Kepadatan dalam bioink ^

• Tekanan mekanis harus diminimalkan, mengurangi tekanan pencetakan dan meningkatkan

4.5. Peningkatan Proses Industri

Pendanaan:Penelitian ini tidak menerima pendanaan eksternal.

Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan:Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan:Tak dapat diterapkan.

Konflik kepentingan:Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Anda mungkin juga menyukai