 Reagen dan Bahan

Asam nitrat konsentrat (HNO3) dengan konsentrasi 70% v/v diberikan dari laboratorium
ternama. Kemurnian HNO3 ini adalah grade logam jejak. HNO3 5% digunakan sebagai pelarut.
Air deionisasi diproduksi melalui sistem air Millipore. Bahan baku obat Dobutamin Hidroklorida
dan standar pencemarannya diberikan dari laboratorium ternama.

 Peralatan

1. "Analisis pencemar elemen dilakukan menggunakan model Agilent ICPMS 7800."

- Ini mengidentifikasi instrumen yang digunakan untuk analisis, yaitu model Agilent ICPMS
7800. ICPMS adalah singkatan dari Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, yang
menunjukkan bahwa instrumen ini menggunakan plasma terkumpul secara induktif untuk
analisis massa unsur-unsur.

2. "Kalibrasi kosong, larutan standar kalibrasi dari 0,25J hingga 2,50J (J = 100% tingkat
spesifikasi pencemar), larutan standar pemeriksaan, dan larutan standar pemeriksaan penjepit
dihisap ke nebulizer melalui pompa peristaltik pada laju 1 ml/m."

- Ini menjelaskan persiapan standar dan larutan kontrol yang digunakan untuk memastikan
akurasi dan keandalan hasil analisis. Larutan kalibrasi dan kontrol ini dihisap ke nebulizer, yang
merupakan bagian dari sistem penyemprotan sampel ke dalam plasma.

3. "Detail kondisi peralatan ICPMS adalah sebagai berikut: daya radio frekuensi adalah 1550
watt, laju aliran gas plasma adalah 15 l/m, suhu ruang semprot adalah 2°C, pola puncak
spektral adalah 3 titik, laju aliran gas helium adalah 5 ml/m, waktu integrasi adalah 0,3s, mode
tune adalah gas helium, jumlah hitungan pencemar logam per detik (CPS) direplikasi 3 kali."

- Ini memberikan informasi rinci tentang parameter dan kondisi operasional dari instrumen
ICPMS yang digunakan dalam analisis. Ini mencakup daya RF, laju aliran gas plasma, suhu
ruang semprot, dan parameter lain yang penting untuk memastikan pengoperasian instrumen
yang tepat dan konsisten.

4. "Kecepatan penyerapan nebulizer adalah 0,35 revolusi per detik, waktu penyerapan sampel
adalah 45s, dan waktu stabilisasi sampel adalah 45s."

- Ini menjelaskan parameter terkait pengambilan sampel dan persiapan sampel, termasuk
kecepatan dan waktu penyerapan sampel oleh nebulizer, serta waktu yang diperlukan untuk
stabilisasi sampel sebelum analisis dimulai.

5. "Digester microwave digunakan untuk mengekstraksi pencemar elemen yang detail

programnya adalah sebagai berikut: daya microwave digester adalah 1200 watt, waktu rampa
diatur sebagai 30 menit untuk mencapai suhu 160°C dan mempertahankan sampel pada suhu
160°C selama 20 menit untuk mencernanya."
 - Ini menjelaskan penggunaan microwave digester dalam proses ekstraksi pencemar elemen
dari sampel. Detail program mencakup daya dan waktu yang digunakan untuk mencapai dan
mempertahankan suhu yang diperlukan untuk mencernakan sampel.

 Spesifikasi

Batas spesifikasi untuk Kadmium adalah 0,5 ppm, Timbal adalah 0,5 ppm, Arsenik adalah 1,5
ppm, Merkuri adalah 3 ppm, Kobalt adalah 5 ppm, Vanadium adalah 10 ppm, Nikel adalah 20
ppm, dan Talium adalah 0,8 ppm dalam larutan sampel.

Batas spesifikasi adalah nilai maksimum yang ditetapkan untuk konsentrasi suatu zat atau
parameter tertentu dalam sebuah sampel. Batas ini biasanya ditentukan berdasarkan standar
keamanan atau kualitas yang telah ditetapkan untuk suatu produk atau proses tertentu. Dalam
konteks ini, batas spesifikasi menentukan jumlah maksimum kadmium, timbal, arsenik, merkuri,
kobalt, vanadium, nikel, dan talium yang diperbolehkan dalam larutan sampel. Sebagai contoh,
jika batas spesifikasi untuk timbal adalah 0,5 ppm, ini berarti bahwa konsentrasi timbal dalam
sampel tidak boleh melebihi 0,5 bagian per juta (ppm) untuk memenuhi standar atau
persyaratan yang berlaku.

 Persiapan Pelarut (5% HNO3)

Pelarut (5% HNO3) disiapkan dengan mentransfer 72 ml asam nitrat 70% v/v yang disebutkan
di atas ke dalam labu volumetrik 1000 ml yang berisi sekitar 500 ml air Milli-Q dan diisi hingga
volume penuh dengan air Milli-Q.

 Persiapan Larutan Standar Stok

 Stock A, B, D, E, F dan I:
o 0.1 ml larutan standar 1000 ppm Cd, Pb, As, Hg, Co dan Tl masing-masing dimasukkan ke
dalam labu volumetrik 10 ml.
o Larutan diencerkan dengan pengencer (5% HNO3) hingga mencapai volume total 10 ml.
 Stock G dan H:
o 1 ml larutan standar 1000 ppm V dan Ni masing-masing dimasukkan ke dalam labu volumetrik
10 ml.
o 9 ml pengencer (telah dibuat sebelumnya) ditambahkan ke dalam labu volumetrik.
o Larutan diaduk hingga homogen.
 Stock C:
o 1 ml stock A, 1 ml stock B, dan 8 ml pengencer dicampurkan dalam labu volumetrik.
o Larutan diaduk hingga homogen.
 Stock J:
o Disiapkan dengan mencampurkan berbagai larutan stock di atas dengan proporsi yang berbeda
(tidak disebutkan detail pada tabel).

 Persiapan Larutan Kalibrasi Kosong

Larutan kalibrasi kosong disiapkan dengan mentransfer 0,1 ml dari Larutan Stok-L dan 0,1 ml
dari Larutan Stok-N ke dalam labu volumetrik 10 ml, dan kemudian diencerkan hingga volume
penuh dengan pelarut (5% HNO3).

 Persiapan Larutan Standar Kalibrasi

Enam larutan standar kalibrasi disiapkan untuk memenuhi persyaratan kesesuaian sistem
(ICPMS). Larutan-larutan ini disiapkan dengan spesifikasi yang berbeda dengan mencampur
larutan stok standar yang telah disiapkan sebelumnya dalam proporsi yang berbeda. Volume
akhir dari larutan-larutan tersebut dibuat menjadi 10 ml dengan menggunakan pelarut. Berbagai
proporsi larutan stok dan konsentrasi akhir logam-logam dijabarkan dalam Tabel 2. Dari Tabel
2, dapat dilihat bahwa larutan standar pemeriksaan diperoleh dengan mencampur 0,4 ml
Larutan Stok J, 0,1 ml Larutan Stok L, dan 0,1 ml Larutan Stok N, dan kemudian menambahkan
pelarut hingga volume total menjadi 10 ml.

 Persiapan Sampel Blank

5 ml asam nitrat (HNO3) dituangkan ke dalam wadah pencernaan, dan kemudian ditambahkan
0,25 ml larutan Stok-N ke dalamnya. Kemudian, campuran dibiarkan selama 15 menit dan
dibiarkan reaksi terjadi pada kondisi atmosfer. Selanjutnya, sampel dicerna dalam sistem
pencernaan microwave. Setelah pencernaan selesai, sampel dibiarkan dingin. Selanjutnya,
ditambahkan 0,25 ml larutan Stok-L (standar internal) dan larutan diencerkan hingga volume 25
ml dengan air Milli-Q. Akhirnya, larutan dikocok selama 5 menit untuk mendapatkan Sampel
blank.

 Persiapan Sampel

Sebanyak 250 mg sampel ditransfer ke dalam wadah pencernaan. Kemudian, ditambahkan 5

ml asam nitrat (HNO3) dan 0,25 ml larutan Stok-N ke dalamnya. Campuran tersebut kemudian
dibiarkan selama 15 menit agar reaksi dapat terjadi pada kondisi atmosfer. Selanjutnya, sampel
tersebut dicerna dalam sistem pencernaan microwave. Setelah pencernaan selesai, sampel
dibiarkan dingin dan kemudian ditambahkan 0,25 ml larutan Stok-L (standar internal). Akhirnya,
larutan tersebut diencerkan hingga volume 25 ml dengan air Milli-Q. Pada akhirnya, larutan
akhir dikocok selama 5 menit untuk mendapatkan sampel.

 Persiapan Sampel Terspike

Sebanyak 250 mg sampel ditransfer ke dalam wadah pencernaan. Kemudian, ditambahkan 5

ml asam nitrat (HNO3), 0,25 ml larutan Stok-N, dan 1 ml larutan Stok-J ke dalamnya. Campuran
tersebut kemudian dibiarkan selama 15 menit agar reaksi dapat terjadi pada kondisi atmosfer.
Selanjutnya, sampel tersebut dicerna dalam sistem pencernaan microwave. Setelah
pencernaan selesai, sampel dibiarkan dingin dan kemudian ditambahkan 0,25 ml larutan Stok-L
(standar internal). Campuran ini akhirnya diencerkan hingga volume 25 ml dengan air Milli-Q.
Pada akhirnya, larutan akhir dikocok selama 5 menit untuk mendapatkan sampel terspike.

HASIL DAN PEMBAHASAN

  Validasi Metode

Validasi metode di atas diverifikasi dalam bagian ini sesuai dengan panduan Q2 (R1) dan ICH.
Verifikasi tersebut dilakukan dengan memperkirakan kesesuaian sistem, spesifisitas, batas
kuantifikasi, presisi sistem, linearitas, presisi metode, presisi intermediat, akurasi, dan
kekokohan, dan hasilnya diberikan dalam Tabel 3. Prosedur pengukuran ini dikembangkan
dengan menyuntikkan larutan kalibrasi kosong, larutan standar kalibrasi, larutan standar
pemeriksaan, larutan sampel, dan larutan sampel terspike, serta larutan standar penjepit ke
dalam ICPMS. Jumlah kandungan Vanadium, Kobalt, Nikel, Arsenik, Kadmium, Merkuri, Talium,
dan Timbal yang ada dalam larutan sampel kemudian dihitung dengan menggunakan rumus
berikut:

Dengan demikian, validasi metode dilakukan dengan memeriksa sejumlah parameter dan
menggunakan hasil pengukuran untuk menghitung konsentrasi unsur dalam sampel yang
dianalisis.

Kesesuaian Sistem

Kesesuaian sistem ditetapkan dengan mengukur kinerja sistem sebelum analisis dilakukan.
Respons dari kesesuaian sistem diperoleh dengan menyedot larutan standar dengan
konsentrasi dalam rentang dari 0,25J hingga 2,50J dari tingkat spesifikasi. Selanjutnya,
koefisien korelasi dan persentase variasi konsentrasi dalam larutan standar pemeriksaan
dihitung. Sesuai dengan kriteria penerimaan yang diberikan oleh panduan ICH, koefisien
korelasi untuk semua delapan logam harus 0,99 atau lebih, dan konsentrasi mereka dalam
larutan standar pemeriksaan tidak boleh bervariasi lebih dari ± 20% dari konsentrasi aktual.
Hasil kami ditunjukkan dalam Tabel 3. Dapat dilihat dari Tabel 3 bahwa koefisien korelasi untuk
Vanadium, Kobalt, Nikel, Arsenik, Kadmium, Merkuri, Talium, dan Timbal ditemukan sebesar
1,0. Dan variasi konsentrasi dari pencemar logam di atas dalam larutan standar pemeriksaan
ditemukan sebesar 0,2, 0,0, 0,9, 0,9, 1,8, 0,1, 0,1, dan 0,8 persen secara berurutan.