1.Penentuan Sifat Fisikokimia.

Kajian praformulasi meliputi karakterisasi fisik dan sifat organoleptik obat, titik leleh, DSC,
analisis UV, dan FT-IR. Berbagai parameter dibahas pada bagian yang sesuai. Ketokonazol
dikarakterisasi berdasarkan bentuk fisik dan sifat organoleptik seperti warna, rasa, dan bau;
kemudian, sifat-sifat ini dibandingkan dengan yang ada dalam literatur.

2. Penentuan Titik Leleh.

Titik leleh ketokonazol ditentukan dengan menggunakan alat titik leleh kapiler pada tingkat
awal. Dalam metode ini, kami mengambil sampel kecil dalam tabung kapiler dan
memasukkannya ke dalam peralatan. Kami mencatat suhu saat zat mulai berubah wujud
dari padat menjadi cair.

3. Kurva Kalibrasi Ketoconazole.

Labu takar berkapasitas 100 mL diisi dengan larutan buffer fosfat (PBS). Ketokonazol 100
mg ditimbang secara akurat dan dilarutkan dalam 5 mL etanol,
dan campuran obat dan pelarut disonikasi dan kemudian dipindahkan ke dalam labu takar
100 mL, dan diratakan sebagai larutan stok. Untuk menghasilkan konsentrasi serial
masing-masing

4. Diagram Fase Pseudoterner. Surfaktan dan kosurfaktan untuk nanoemulsi dikembangkan

melalui penyusunan diagram fase pseudoterner. Berbagai rasio Smix surfaktan dan
kosurfaktan diuji (1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 4:1, 3:1, dan 2:1) untuk membuat diagram fase
pseudoterner beserta pencampurannya. dengan minyak dan air. Studi kelarutan
menunjukkan bahwa ketokonazol larut maksimal dalam minyak cengkeh, minyak kayu putih,
atau Tween 20 sebagai surfaktan dan span 80 sebagai kosurfaktan.51ÿ53 Diagram fase
pseudoterner dibuat melalui teknik titrasi air. Fase berair secara bertahap ditambahkan ke
dalam campuran Smix dan minyak,diikuti dengan mengaduk campuran trifasa pada suhu
kamar.

5. Pengujian Pengenceran, Sentrifugasi

Semua formulasi dari wilayah NE pada diagram fase pseudoterner dilakukan pengujian
pengenceran dengan memasukkan setetes NE ke dalam 100 mL air suling. Selanjutnya,
formulasi dikenakan. siklus pemanasan-pendinginan stabilitas termodinamika selama 48 jam
dengan memaparkan formulasi pada suhu berkisar antara 4 hingga 48 °C dan uji
sentrifugasi selama 45 menit dan kemudian mengamati pemisahan fase, opalescence, dan
kekeruhan. Untuk menganalisis stabilitas NE, formulasi dilakukan dalam tiga siklus.
6.Karakterisasi Nanoemulsi (Ukuran Globule, Indeks Polidispersitas, dan Potensi ). Untuk
pengukuran butiran terdispersi, nanoemulsi diencerkan 10 kali dalam air suling. Muatan
permukaan antara bola luar ke lapisan stasioner diukur menggunakan penganalisis
Zetasizer (Nano ZSP, Malvern, Worcestershire, UK). Penelitian dilakukan rangkap tiga pada
suhu kamar.

7. Efisiensi Jebakan (%EE). Efisiensi penjerapan ketokonazol ditentukan dengan mengikuti

metode yang dilaporkan dengan sedikit modifikasi.54 Konsentrasi obat yang dienkapsulasi
ditentukan menggunakan kantong dialisis dengan batas berat molekul 12ÿ14 kDa (Hi media,
Mumbai, India) setelah penghapusan obat bebas dari NE. Persamaan berikut digunakan
untuk memperkirakan % efisiensi jebakan dari formulasi
% EE = (A/B) × 100 (1)
dimana A adalah total obat yang terperangkap dalam formulasi dan B adalah total obat yang
ditambahkan dalam formulasi.

8. Mikroskop Elektron Transmisi (TEM). Pengukuran ukuran tetesan dalam nanoemulsi

dilakukan oleh TEM.
Untuk menyiapkan sampel, tetes nanoemulsi diencerkan dalam air suling, dan setelah 10
menit, satu tetes ditempatkan pada jaringan tembaga berlapis karbon dan kemudian
diwarnai dengan asam fosfotungstat 1%. Setelah noda grid mengering, sampel diperiksa di
bawah TEM (JEOL JEM 1010, Tokyo, Jepang).

9. Pelepasan Obat In Vitro. Pelepasan obat diukur pada membran dialisis dengan batas
berat molekul 12.000 Dalton (Hi Media Pvt., Ltd., Mumbai, India) sesuai prosedur yang
dijelaskan sebelumnya.43,45 Sebelum memulai percobaan, membran dialisis direndam
dalam air garam semalaman.Nanoemulsi 20% minyak cengkeh dan 15% minyak kayu
putih(1 mL) mengandung 15 mg ketokonazol yang dimasukkan ke dalam kantong dialisis
dengan kedua ujungnya tertutup, direndam dalam peralatan disolusi USP tipe II (tipe
dayung)
( Agilent 708-DS, Agilent Technologies, Cary, North Carolina) dengan gelas kimia ukuran
sedang 500 mL yang sebelumnya diisi dengan 150 mL media disolusi buffer pH 6,8. Media
disolusi dipertahankan pada 37 ± 0,5 °C. Media terus diaduk pada 75 rpm menggunakan
dayung, dan 1 mL alikuot diambil pada berbagai titik waktu (0, 0,3, 1, 2, 4, 8, 12, 16, dan 24
jam). Itu
https://doi.org/10.1021/acsomega.3c01571
2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, dan 20 ÿg mLÿ1 , larutan stok 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1,0, 1,2, 1,4,
1,6, 1,8, dan 2 mL diproduksi dalam labu takar 10 mL dan diencerkan hingga tanda batas.
Dengan menggunakan spektrofotometer UV visibel dan etanol sebagai sistem pelarut,
semua larutan dianalisis pada ÿmaks yang telah ditentukan. Kurva standar ketokonazol
diplot dengan konsentrasi (mg/ml ) dan absorbansi; kemudian, nilai R2 dan perpotongan y
dihitung dari kurva.

10. Studi Kelarutan. Metode labu pengocok digunakan untuk penentuan kelarutan
ketokonazol dalam pelarut yang berbeda.50 Jumlah obat yang berlebih dipindahkan ke
dalam tabung Eppendorf yang berisi 2,5 mL pelarut. Isi tabung divorteks dengan kecepatan
seragam dalam siklomixer (Remi, India) selama 3 menit untuk mengurangi pencampuran
obat yang seragam dalam pelarut. Tabung dipindahkan ke pengocok biologis (Remi, India)
pada suhu 25 °C, dan pengocokan dilanjutkan sampai kesetimbangan tercapai, pada saat
itu tidak ada lagi obat yang terlarut. Setelah 72 jam, campuran obat disentrifugasi pada 5000
rpm selama 10 menit (Remi, India). Aliquot dipisahkan dan diukur untuk pengukuran
konsentrasi obat menggunakan spektrofotometri UV visibel. Penelitian dilakukan dalam
rangkap tiga.

11.Penentuan Kandungan Obat dan viskositas

Jumlah ketokonazol ditentukan dengan mengekstraksi formulasi gel dalam etanol absolut,
diikuti dengan mengukur konsentrasi ketokonazol dengan spektrofotometer UVÿVis
(UV-1700 CE, Shimadzu Corporation, Jepang) pada 226 nm. Viskositas formulasi dinilai
dengan menggunakan viskometer Brookfield yang dilengkapi dengan sistem pengukuran
tipe kerucut/pelat pada suhu kamar. Pada peningkatan laju geser, viskositas nanoemulgel
ditentukan dan profil viskositas dibuat dengan memplot grafik dengan nilai viskositas vs laju
geser yang diperoleh untuk menyimpulkan hasilnya.

12. Homogenitas dan Daya Sebar.

Keseragaman atau homogenitas NEG diperiksa dengan mata telanjang setelah gel disimpan
dalam wadah dalam posisi menetap.Konsistensi, keseragaman, dan agregat diamati.17
Kemampuan gel untuk mengalir ditentukan dengan menyebarkan 0,5 g 20% minyak
cengkehÿNEG atau 15% minyak kayu putihÿNEG secara terpisah di antara kaca objek yang
menutupi diameter 2 cm. Jumlah gel yang sama ditempatkan pada kaca slide yang
diletakkan di atas dan dibiarkan selama 5 menit sebelum kapasitas penyebaran
diperkirakan.