Prinsip kromatografi kertas adalah adsorbsi dan
kepolaran, dimana adsorbsi didasarkan pada
panjang komponen dalam campuran yang
diadsorbsi pada permukaan fase diam dan
kepolaran komponen berpengaruh karena
komponen akan larut dan terbawa oleh pelarut
jika memiliki kepolaran yang sama serta
kecepatan migrasi pada fase diam dan fase gerak
3 METODE KROMATOGRAFI
KERTAS
Tahap penotolan
cuplikan
Kertas yang digunakan memiliki
susunan serat kertas membentuk
medium berpori yang bertindak
sebagai tempat untuk
mengalirnya fase bergerak. Lalu
membuat garis awal dengan jarak
23 cm dengan salah satu ujung
kertas dengan menggunakan
pensil. Selanjutnya totolkan
larutan cuplikan dengan
menggunakan mikropipet atau
pipa kapiler pada garis awal tadi,
kemudian keringkan.
Tahap pengembangan
Pada tahap ini ujung kertas
kromatografi dekat garis
awal yang telah berisi
totolan cuplikan dicelupkan
ke dalam pelarut (pelarut
untuk contoh ini misalnya
etanol) yang terdapat di
dalam bejana kromatografi.
Hasil pemisahan akan
nampak sebagai nodanoda
berwarna pada kertas
dengan jarak yang berbeda
beda dari garis awal.
TAHAP IDENTIFIKASI ATAU
PENAMPAKAN NODA
Menghitung Rf (rate of flow) menyatakan derajad retensi
suatu komponen dalam fase diam. Karena itu Rf juga
disebut faktor refensi. Rf adalah jarak tempuh relatif
terhadap pelarut. Harga Rf mengukur kecepatan
bergeraknya zona relatif terhadap garis depan
pengembang. Kromatografi yang dihasilkan diuraikan dan
zonazona dicirikan dengan nilainilai Rf.
BILA NODA TIDAK BERWARNA, LANGKAH
PERTAMA YANG HARUS DIAMBIL ADALAH
MENAMPAKKAN NODA TERSEBUT
Menyemprot kertas dengan pereaksi penimbul
warna ditizon, ninhidrin, kalium kromat,
amonium sulfida dan lainlain.
Menyinari sinar dengan sinar ultra violoet.
Mendedahkan kertas pada uap iodium.
JENISJENIS KROMATOGRAFI KERTAS
Kromatografi Kertas
Satu Arah Kromatografi Kertas Dua
Arah
Karena pelarut Kromatografi kertas dua
bergerak lambat pada arah dapat digunakan
kertas, komponen dalam menyelesaikan
komponen yang berbeda masalah pemisahan
substansi yang memiliki
dari campuran tinta
nilai Rf yang sangat
akan bergerak pada serupa. Waktu ini
laju yang berbeda dan kromatogram dibuat dari
campuran dipisahkan bercak tunggal dari
berdasarkan pada campuran yang
perbedaan bercak ditempatkan kedepan dari
warna garis dasar.
KROMATOGRAFI KERTAS SATU ARAH
KROMATOGRAFI KERTAS DUA ARAH
KELEBIHAN DAN KEKURANGAN
KROMATOGRAFI KERTAS
Kelebihan kekurangan
Tidak diperlukan Banyaknya
peralatan yang teliti permasalahan
dan mahal menyangkut cara
Dapat diperoleh hasil pemasukan fasa gerak,
yang baik walaupun perambatan fasa gerak,
dengan peralatan dan dan penggumpalan
materi yang sederhana Membutuhkan waktu
Senyawa yang terpisah lama
dapat dideteksi pada Keterbatasan parameter
kertas dan diidentifikasi senyawa yang diuji
APLIKASI KROMATOGRAFI
KERTAS
Penemuan senyawasenyawa dalam tanaman
Analisa logamlogam dalam tanah
Pemisahan alkaloid (senyawa yang mengandung
substansi dasar nitrogen basa, biasanya dalam bentuk
cincin heterosiklik, banyak terdapat pada tanaman)
Pemisahan asam lemak
Analisa bahan tambahan makanan pada makanan
dan AMDK
Pengujian rutin urine dan cairancairan lainnya yang
mengandung asamasam amino dan gula (untuk
diagnosa suatu penyakit)
Menentukan komponen yang terkandung dalam uang
logam.