LAPORAN HASIL PENELITIAN

TUGAS AKHIR
ISOLASI SENYAWA AKTIF ANTIOKSIDAN DARI FRAKSI ETANOL
KORTEKS KUPA (Syzygium polycephalum (Miq.) Merr & Perry)

SYAHNIDAR ZUHRA NAZILA

13161087

Dosen Pembimbing
1. Dr. Elfahmi, M.Si., Apt
2. Dadang Juanda, M.Si., Apt
 Latar Belakang

 Radikal bebas dapat mengakibatkan kerusakan oksidatif (Sadikin, 2001).

 Antioksidan merupakan senyawa yang dapat mencegah terjadinya proses
oksidasi oleh radikal bebas (Amin et al, 2006).
 Resiko efek samping pada penggunaan antioksidan sintetis  antioksidan
alami sebagai pilihan utama (Winarsi,et al., 2003; Chen et al., 1990; Sichel,
et al., 1991).
 Syzygium adalah salah satu marga dari suku Myrtaceae yang berpotensi
sebagai sumber antioksidan alami (Craven et al, 2006., Lim, 2012).
 Kupa (Syzygium polycephalum (Miq.) Merr & Perry) merupakan tumbuhan
endemik Indonesia yang terbukti memiliki senyawa antioksidan seperti
flavonoid dan beberapa senyawa fenolat lainnya (Lim, 2012; Wibowo, 2015)
Tabel 1.Aktivitas antioksidan ekstrak etanol 96% beberapa bagian tanaman Kupa dengan
metode peredaman radikal bebas menggunakan 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl
(DPPH) (Wibowo, 2015).

Bagian tanaman Buah Daun Korteks Lignum Vit C

IC50 (µg/mL) 116,698 16,768 12,584 217,765 8,946

Tabel 2. Aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol 96% dan beberapa fraksi korteks kupa
dengan metode peredaman radikal bebas menggunakan 1,1-Diphenyl-2-
Picrylhydrazyl (DPPH) (Multazam, 2017).

Ekstrak Fraksi Fraksi Fraksi

Sampel Vit C
etanol 96% n-heksana etil asetat etanol 20%

IC50 (µg/mL) 19,394 68,708 16,59 7,561 8,698

 Tujuan Penelitian
Penelitian ini dilakukan untuk mendapatkan isolat aktif
antioksidan dari fraksi etanol korteks Kupa (Syzygium
polycephalum (Miq.) Merr & Perry).

Waktu dan Tempat Penelitian

Maret – Juni 2018
Laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium Fitokimia
Sekolah Tinggi Farmasi Bandung.

Batasan Penelitian
Penelitian ini dibatasi untuk mengetahui dan mendapatkan isolat aktif
antioksidan pada fraksi etanol korteks Kupa (Syzygium polycephalum
(Miq.) Merr & L.M.Perry). Metode identifikasi senyawa antioksidan dan
penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode peredaman
radikal bebas menggunakan 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl (DPPH).
 ‘’
EKSTRAKSI DAN
FRAKSINASI I
FRAKSINASI LANJUTAN
DAN ISOLASI
 Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode Peredaman
Radikal Bebas dengan DPPH

Prinsip : mengukur aktivitas antioksidan berdasarkan penurunan absorbansi

DPPH pada panjang gelombang maksimal (515 – 520 nm) sebagai akibat dari
adanya suatu senyawa antioksidan.

Antioksidan
DPPH DPPH tereduksi : intensitas Penurunan
Penambahan menyumbang-
berwarna ungu warna DPPH berkurang nilai
antioksidan kan atom
pekat (dari ungu ke kuning) absorbansi
hidrogen

Reaksi DPPH dan Antioksidan (Yamaguchi et al., 1998)

(Molyneux, 2004)
 Hasil Penelitian

Penyiapan Bahan

Batang kupa dari Sukasari, Simplisia korteks kupa yang

kecamatan Banjaran, telah dikeringkan pada suhu
kabupaten Bandung 40oC menggunakan oven
 Karakterisasi Simplisia

Karakterisasi makroskopik simplisia Hasil Karakterisasi simplisia

Karakterisasi Deskripsi Jenis Pemeriksaan Hasil (%) b/b

Warna Coklat Kadar abu total 9,18

Bau Aroma khas Kadar abu tidak larut 1,02

asam
Rasa Asam dan sedikit kesat
Kadar sari larut air 31,60
Kadar sari larut etanol 8,17
Kadar air 10,70*
Susut pengeringan 12,01

Keterangan : *) % v/b
 Penapisan Fitokimia

Pemeriksaan Hasil
Alkaloid -
Flavonoid +
Kuinon +
Saponin +
FeCl3 10% +
Tanin
Gelatin 1% + 𝐴𝑙𝑘𝑎𝑙𝑜𝑖𝑑 𝐹𝑙𝑎𝑣𝑜𝑛𝑜𝑖𝑑 𝑆𝑎𝑝𝑜𝑛𝑖𝑛
Steroid/Triterpenoid +

Keterangan : (+) : mengandung golongan senyawa uji

(-) : tidak mengandung golongan senyawa uji

Steroid/
𝐾𝑢𝑖𝑛𝑜𝑛 𝑇𝑎𝑛𝑖𝑛 𝑇𝑟𝑖𝑡𝑒𝑟𝑝𝑒𝑛𝑜𝑖𝑑
 Ekstraksi

Ekstraksi : Refluks, 100 gram simplisia

dalam 500 mL etanol 96%, replikasi 3 kali
@ 3 jam. Total simplisia 600 gram

Pemekatan Ekstrak : Rotary vaporator,

suhu 500C
Hasil : Ekstrak kental sebanyak 71,34 gram
dengan rendemen sebesar 11,89%.
 Fraksinasi
Ekstraksi Cair-Cair *) dilakukan sebanyak 2 batch

25 gram ekstrak pekat etanol

Ekstrak EtOH 96% dalam 250 mL etanol 20%
20%

ECC dengan n-heksana ECC replikasi 3 x

@250 mL n-heksana

Fraksi n-heksana
Fraksi EtOH 20%
(5,5 gram, rendemen = 11,00%)

ECC dengan EtOAc

ECC replikasi 3 x @250 mL EtOAc

Fraksi EtOH 20% Fraksi EtOAc

(34,24 gram, rendemen = 68,49%) (7,98 gram, rendemen = 15,96%

Fraksi n-heksana Fraksi etil asetat Fraksi etanol

1 2 3 1 2 3
 Pemantauan Ekstrak dan Fraksi

(sinar tampak) (UV 254) (UV 365) (Sitroborat) (AlCl3) (FeCl3) (DPPH) (H2SO4) KLT
Fase diam : Plat silika GF254
2 Fase gerak : 1. n-heksana-etil
asetat (7:3), 2. EtOAc-As. Format -
air (8:1:1:1)
Sampel : Ekstrak etanol – fraksi n
heksana – fraksi etil asetat – fraksi
etanol
 Fraksinasi
Kromatografi Cair Vakum

KCV
Fase diam : Silika gel H 60
Sampel : fraksi EtOH 20% : silika (2:1)
Sistem elusi gradien
Waktu elusi setiap eluen + 10 menit
Waktu total KCV 3 hari kerja

a. Kolom
Diameter = 4,6 cm
Jari-jari = 2,3 cm
Tinggi = 21 cm

b. Sampel dan Fase Diam

Fase diam = 8 cm/40 gram
Sampel = 2,5 cm/30 gram

c. Komposisi Sampel
Fraksi EtOH 20% : silika (20 gram : 10
gram)
Eluen untuk KCV
PEMANTAUAN FRAKSI HASIL KCV

I II III IV V VI

sinar tampak H2SO4 10% (metanol)

Sinar UV 254 nm Sinar UV 365 nm

KLT
Fase diam : Plat silika GF254
Fase gerak : EtOAc : As. Format : air (5:1:1)
Sampel : Ekstrak-fraksi EtOH-1-3-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-33-35-37-39-41-43-45-47
 PEMANTAUAN FRAKSI GABUNGAN HASIL KCV

FE I II III IV IV V VI FE I II III IV IV V VI FE I II III IV IV V VI FE I II III IV IV V VI FE I II III IV IV V VI

sinar tampak H2SO4 10% (MeOH) UV 254 nm UV 366 nm DPPH 0,2 % (MeOH)

Berat Fraksi
KLT fraksi gabungan hasil KCV Kelompok No Fraksi
Pekat (gram)
Fase diam : Plat silika GF254
1 1 – 13
Fase gerak : EtOAc : As. Format : air (5:1:1)
2 14 -16
Sampel : Fraksi EtOH, FG I, II, III, IV, V, dan VI
hasil KCV 3 17 – 21

4 22 – 25 2,73

5 26 – 35 4,73
Berdasarkan hasil pemantauan,
dipilih fraksi gabungan V untuk 6 36 - 47 5,62
dilanjutkan ke tahap selanjutnya.

FRAKSI TERPILIH
 Fraksinasi
Kromatografi Kolom Klasik I

Kromatografi Kolom Klasik I

• Kolom
Diameter = 1 cm Fase diam : Silika
Jari-jari = 0,5 cm
Sampel : fraksi gabungan 5 KCV : silika (1:1)
Tinggi = 30,5 cm
Fraksi gabungan 5 KCV  fraksi KCV ke 26 - 35
• Sampel dan Fase Diam
Waktu total kromatografi kolom 5 hari kerja
Fase diam = 18,5 cm/1,6 gram
Sampel = 1,4 cm/1,1 gram

• Komposisi Sampel
Fraksi gabungan 5 KCV : silika (0,55 gram : 0,55
gram)

• Komposisi Eluen
Etil asetat-asam format-air (5:1:1) volume 420 mL

Hasil : • 60 fraksi kromatografi kolom dengan eluen etil asetat : asam format : air (5:1:1)
• 4 fraksi bilasan kolom dengan methanol
 PEMANTAUAN FRAKSI HASIL KK I

FG 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 M1 M2 M3 M4
FG 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 M1 M2 M3 M4

(sinar tampak) (H2SO4 10% (MeOH))

FG 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 M1 M2 M3 M4 FG 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 M1 M2 M3 M4

(sinar UV λ 254 nm) (sinar UV λ 366 nm)

Senyawa target turun di fraksi 5 – 15

KLT hasil KK I
Fase diam : Plat silika GF254
Fase gerak : EtOAc : As. Format : air (5:1:1)
Sampel : (FG) Fraksi gabungan 5 KCV, (5-60) Fraksi kolom ke
5-60, (M1-M4) bilasan metanol ke 1 - 4
Bercak senyawa kurang naik  pantau ulang
fraksi kolom dengan pengembang yang
lebih polar
Hasil orientasi pengembang etil asetat :
as. Format : as. Asetat : air (5:1:1:1)
 PEMANTAUAN FRAKSI HASIL KK I

FG 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
FG 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

Sinar tampak H2SO4 10% (MeOH)

I II III IV V

FG 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
FG 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

Sinar UV 254 nm Sinar UV 365 nm

KLT
Fase diam : Plat silika GF254
Fase gerak : EtOAc : As. Format : As. Asetat : air (5:1:1:1)
Sampel : (FG) Fraksi gabungan 5 KCV, (1-25) Fraksi kolom ke 1-25
 PEMANTAUAN FRAKSI GABUNGAN HASIL KK I

FG A B C D E F GI FG A B C D E F G FG A B C D E F G FG A B C D E F G FG A B C D E F G FG A B C D E F G
H2SO4 10% (MeOH)_ FeCl 10% UV 254 nm UV 365 nm AlCl3 5% (MeOH) DPPH 0,2% (MeOH)

KLT Kelompok No Fraksi Bobot Fraksi

Fase diam : Plat silika GF254
Pekat (mg)
Fase gerak : EtOAc : As. Format : As. Asetat : air (5:1:1:1) A 1-3
Sampel : (FG) Fraksi gabungan 5 KCV, (I-VII) Fraksi Gabungan B 4-8 90
Kolom I - VII
C 9-13 120
D 14-19
Berdasarkan hasil pemantauan, E 20-25
dipilih fraksi gabungan C untuk
dilanjutkan ke tahap selanjutnya. F 26-40
G 41-60

FRAKSI TERPILIH
 Fraksinasi dan Isolasi
Kromatografi Kolom Klasik II

• Kolom Kromatografi Kolom (KK) Lanjutan

Diameter = 0,8 cm
Jari-jari = 0,4 cm
Tinggi = 20 cm
• Sampel dan Fase Diam
Fase diam = 12 cm/1,6 gram
Sampel = 1,5 cm/160 mg
Fase diam = Silika
Sampel = fraksi gabungan KK I No 3 : silika (1:1)
Fraksi gabungan C  fraksi KK I ke 9 – 13
Sistem elusi isokratik
Waktu total kromatografi kolom 3 hari kerja

• Komposisi Sampel
Fraksi Gabungan C : silika (80 mg : 80 mg)

• Komposisi Eluen
Etil asetat : asam format : As. Asetat : air (5:0,75:0,75:0,75)
volume 116 mL

Hasil : 30 fraksi
Pemantauan Hasil Kromatografi Kolom Klasik II

FGa FGb 1 5 10 15 20 25 30 FGa FGb 1 5 10 15 20 25 30 FGa FGb 1 5 10 15 20 25 30

Sinar tampak UV 254 nm UV 366 nm H2SO4 10% (MeOH)

Pada proses KK II senyawa aktif antioksidan target turun pada fraksi no 5  Pantau fraksi no 2-9

Sinar tampak UV 254 nm UV 366 nm H2SO4 10% (MeOH)

Pada proses KK II senyawa aktif antioksidan target turun pada fraksi no 2-7
berupa 1 bercak senyawa  diduga isolat murni  disebut sebagai ISOLAT EKK

KLT hasil KK II
Fase diam : Plat silika GF254
Fase gerak : EtOAc : As. Format : As. Asetat : air (5:1:1:1)
Sampel : (FGa) Fraksi gabungan V KCV, (FGb) Fraksi gabungan 3 KK, (1-30) fraksi kolom lanjutan ke 1-30
(F.II) Fraksi gabungan 3 KK, (2-9) Fraksi kolom lanjutan ke 2-9
 Uji Kemurnian

KLT Pengembangan Tunggal dengan 3 Macam Pengembang yang Berbeda

(sinar UV λ 254 nm) (sinar UV λ 365 nm) (H2SO4 10% (MeOH)) (H2SO410% (MeOH) - UV λ 365 nm)

KLT Isolat EKK

Fase diam : silika gel F254
Fase gerak : 1 = etil asetat : asam format : air (5:1:1), 2 = etil asetat : asam format : asam asetat : air : metanol
(5:0,75:0,75:0,5:0,5), 3 = etil asetat : asam format : asma asetat : air (5:1,5:1,5:1,5)

KLT Isolat EKK menghasilkan 1 bercak senyawa baik pada pengembang polar, semi polar
maupun non polar dengan penampak bercak universal
 Uji Kemurnian

KLT Dua Dimensi

(sinar UV λ 254 nm) (sinar UV λ 365 nm) (H2SO4 10% (MeOH)) (H2SO4 10% (MeOH), UV λ 365 nm).

KLT Isolat EKK

Fase diam : silika gel F254 6x6 cm
Fase gerak : 1 = etil asetat : asam format : asam asetat : air : metanol (5:0,5:0,5:0,5:0,5), 2 = etil asetat : metanol : asma asetat
: air (5:1:1:1),

KLT 2 dimensi Isolat EKK menghasilkan 1 bercak senyawa dengan penampak bercak
universal  Isolat EKK merupakan senyawa murni
 Uji Aktivitas Antioksidan

KLT isolat EKK

fase diam : silika gel F254
fase gerak :
etil asetat : asam format : asam asetat :
air : metanol (5:0,75:0,75:0,5:0,5)

(UV 254 nm) (UV 365 nm) (AlCl3) (Sitroborat) (FeCL3) (DPPH) (H2SO4)

Isolat memberikan bercak warna kuning terang berlatar belakang ungu ketika disemprot
dengan DPPH 0,2% dalam metanol  isolat aktif antioksidan  uji kuantitatif antioksidan
secara spektrofotometri
 Uji Aktivitas Antioksidan

Menentukan λ max DPPH  517 nm

Membuat kurva kalibrasi DPPH untuk menentukan

konsentrasi stok DPPH  60 ppm

Orientasi konsentrasi stok isolat yang diuji

(20,30,40,50,60,70,80 ppm)

Membuat larutan uji, sampel atau standar dilarutkan

dalam metanol ditambahkan larutan stok DPPH dengan
perbandingan 1 : 1 (10 mL : 10 mL)dan diinkubasi selama 30
menit

Membaca absorbansi stok DPPH (kontrol) dan larutan uji

serta menghitung nilai % inhibisi dan IC50
 Uji Aktivitas Antioksidan

Sampel IC50 (µg/mL) r2

Vitamin C 9,90 0,9974

Isolat EKK 42,65 0,9963

Keterangan :
IC50 = konsentrasi sampel yang dibutuhkan untuk dapat menghambat
atau meredam 50% radikal bebas DPPH ditunjukkan dengan adanya
penurunan absorbansi DPPH sebesar 50%
r2 = kuadrat koefisien korelasi persamaan regresi linier.
 Karakterisasi dan Identifikasi Isolat
Spektrum Uv-Visibel

Isolat memiliki gugus

kromofor dan bukan
merupakan senyawa
golongan flavonoid

isolat memiliki absorbansi maksimal pada panjang gelombang 221 nm (0,672)

dan 273 nm (0,170) dalam metanol
 Karakterisasi dan Identifikasi Isolat
Spektrum FTIR

No Bilangan Gugus Fungsi

gelombang
1 3611-3000 OH
3
2 2 3000-2855 C-H (stretching)
4
5 6 3 1850-1690 C=O (stretching)
4 1660-1600 C=C terkonjugasi,
aromatik
1 5 1615-1580 C-C (stretching)
6 1480-1410 C-H (bending)
 Kesimpulan

• Isolat berekasi positif dengan

penampak bercak FeCl3
• Isolat bereaksi positif dengan
penampak bercak DPPH Isolat merupakan senyawa
• Isolat memiliki aktivitas fenolat dengan aktivitas
antioksidan dengan IC50 = 42,65 antioksidan yang sangat kuat
ppm
• Isolat memiliki gugus kromofor
• Isolat memiliki gugus OH,
terdapat regangan C=O, C-H
dan C-C, serta memiliki ikatan
C=C terkonjugasi.
 Daftar Pustaka
Amin I., Norazaidah Y., Hainida K.I.E. (2006). Antioxidant activity and phenolic content of raw and blanched Amaranthus species. Food Chem. 94,
47-52.
Bramasto, Y., Nurhasybi, Danu, Dida, S., M. Zanzibar, Endang, P., dan Safrudin, M. (2015). Trees of The City. Bogor : Balai Penelitian Teknologi
Pembenihan Tanaman Hutan
Chen, Y., Zheng R., Jia Z., dan Ju Y. 1990. Flavonoids as Superoxide Scavengers and Antioxidants. Free Radical Biology and Medicine. 9, 19-21
Craven L.A., dan Biffin E. 2010. An Infrageneric Clasiification of Syzygium (Myrtaceae). Blumea. 51, 131-142.
Cronquist, A. (1981). An Integrated System of Classification of Flowering Plants. New York : Columbia University Press
Lim, T.K. (2012). Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants Volume 3, Fruits. London & New York : Springer
Locatelli, M., Gindro, R.., Travaglia, F., Coisson, J.D., Rinaldi, M., dan Arlorio, M. (2009) Study of The DPPH Center Dot-Scavering Activity :
Development of a Free Software for The Correct Interpretation of Data. Dipartimento Sci Chim Alimentari Farmaceut & Farm. 114(3), 889
Molyneux, P. (2004). The Use of The Stable Free Radical Diphenylpicrihidrazil (DPPH) for Estimating Antiocidant Activity, Songklanakarin J. Sci.
Techno, 26(2), 211 – 219.
Multazam, M.L.N. (2017). Isolasi Senyawa Aktif Antioksidan dari Korteks Kupa (Syzygium polycephalum (Miq.)). Skripsi. Sekolah Tinggi Farmasi
Bandung
Musaad, Sabila. (2017). Uji Aktivitas Penghambatan Enzim α-Glukosidase Ekstrak dan Fraksi Korteks Kupa (Syzygium polycephalum (Miq.) Merr. &
L.M. Perry.). Skripsi. Sekolah Tinggi Farmasi Bandung
Ragasa, C.Y., Torres, O.B., Shen, C., Lachica, M.K.E.G., Sulit, A.B., Chua, D.B.D.L., Ancheta, A.D.M., Ismail, C.J.B., Bernaldez, F.T.E., dan Raga, D.D.
(2013). Teriterpenes from the Leaves of Syzygium polycephalum, Syzygium cumini, and Syzygium samarangense. Chemistry of Natural
Compounds. 50(5), 924 – 944
Sadikin, M. (2001). Pelacakan Dampak Radikal Bebas terhadap Makromolekul. Pelatihan : Radikal Bebas dan Antioksidan dalam Kesehatan. Jakarta :
Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
Sichel, G., C. Corsaro, M. Scalia, A.J. DiBilio, dan R. Bonomo. (1991). In Vitro Scavenger Activity of Some Flavonoids and Melanins Against O2. Free
Radical Biology and Medicine. 11, 1 – 8
Wibowo, Agung. (2015). Uji Aktivitas Antioksidan serta Penetapan Kadar Senyawa Fenolat Total Dari Buah, Daun, Cortex, dan Lignum Tumbuhan
Kupa (Syzygium polycephalum (Miq). Merr. & L. M. Perry). Skripsi. Sekolah Tinggi Farmasi Bandung
Winarsi, H. (2007). Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta : Kanisius.
Yamaguchi, T., Takamura, H., Matoba, T., dan Terao, J. (1998). HPLC Method for Evaluation of The Free Radical-Scavenging Activity of Foods by
Using 1,1-Diphenyl-2-Picrylhidrazyl. Biosci. Biotechol. Biochem. 62, 1201 – 1204
Terimakasih
Tingkat Kekuatan Antioksidan

Jun M, Fu HY, Hong J, Wang X,Yang CS, Ho CT, 2006, Comparison of antioxidant activities of
isoflavones from kudzu root (Pueraria lobate ohwi). J of Food Science. 2006; 211722.

34
Karakterisasi Simplisia

Kadar Abu Total

Keterangan Bobot (gram) Kadar Abu (%b/b) Rata-Rata Kadar Abu (%b/b)
Krus kosong I 39,4865
Krus + abu 1 39,6700
9,1750
abu 1 0,1835
Sampel 1 2
9,1750
Krus kosong 2 39,9765
Krus + abu 2 40,1600
9,1750
Abu 2 0,1835
Sampel 2 2

Kadar Abu Tidak Larut Asam

Keterangan Bobot (gram) Kadar Abu (%b/b) Rata-Rata Kadar Abu (%b/b)
Krus kosong I 44,3884
Krus + abu 1 44,4081
0,9850
abu 1 0,0197
Sampel 1 2
1,0175
Krus kosong 2 35,0633
Krus + abu 2 35,0843
1,0500
Abu 2 0,0210
Sampel 2 2
Karakterisasi Simplisia

Kadar Sari Larut Air

Keterangan Bobot (gram) Kadar Sari (%b/b) Rata-Rata Kadar Sari (%b/b)
Cawan kosong I 126,0604
Cawan + sari 1 126,1200
11,92
sari 1 0,0596
Sampel 1 5
31,6
Cawan kosong 2 67,8936
Cawan + sari 2 68,0500
51,28
Sari 2 0,2564
Sampel 2 5

Kadar Sari Larut Etanol

Keterangan Bobot (gram) Kadar Sari (%b/b) Rata-Rata Kadar Sari (%b/b)
Cawan kosong I 126,0624
Cawan + sari 1 126,1411
7,87
sari 1 0,0787
Sampel 1 5
8,175
Cawan kosong 2 67,9015
Cawan + Sari 2 67,9843
8,28
Sari 2 0,0828
Sampel 2 5
Karakterisasi Simplisia

Kadar air
Simplisia = 5,0244 gram
Volume n0 = 0,2 mL
Volume n1 = 0,74 mL
0,74 𝑚𝐿−0,2 𝑚𝐿
Kadar air = x 100% = 10,75%
5,0244 𝑔

Susut Pengeringan

Bobot Susut Pengeringan Rata-Rata Susut

Keterangan
(gram) (%b/b) Pengeringan (%b/b)
Botol timbang
47,2394
kosong
Botol timbang +
49,2370 11,77
sampel
Bobot konstan 49,0020
Sampel 1,9976
12,01
Botol timbang
47,2411
kosong
Botol timbang +
49,2575 12,25
sampel
Bobot konstan 49,0105
Sampel 2,0164
Rendemen Ekstrak
Simplisia = 600 gram
Ekstrak pekat = 71,34 gram
71,34 𝑔
Rendemen = 𝑥 100% = 11,89%
600 𝑔

Rendemen Fraksi
Ekstrak etanol = 50 gram
34,24 𝑔
Fraksi etanol = 𝑥 100% = 68,48%
50 𝑔

5,5 𝑔
Fraksi etil asetat = 𝑥 100% = 11,00%
50 𝑔

7,98 𝑔
Fraksi n-heksana = 𝑥 100% = 15,96%
50 𝑔
 Perhitungan Rf
Fraksi Gabungan KCV Fraksi KK II

1
Rf = = 0,19 Rf =
2,5
= 0,37
5,3 4,1

Fraksi Gabungan KK I Isolat

2,8 3
Rf = = 0,53 Rf = = 0,55
5,3 5.5
Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin C

Konsentras Absorbansi
Rata-Rata % Inhibisi
i (µg/mL) A1 A2 A3
2 0,701 0,701 0,701 0,701 10,47
4 0,648 0,640 0,643 0,644 19,07
6 0,542 0,544 0,546 0,544 30,52
8 0,484 0,485 0,487 0,485 38,02
10 0,393 0,392 0,392 0,392 51,17
12 0,309 0,308 0,308 0,308 60,62
14 0,201 0,202 0,201 0,201 71,73

Keterangan :
𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙−𝑎𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
% inhibisi = x 100
𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙
Absorbansi kontrol 0,783 Vitamin C
80
70 y = 5.1344x - 0.8451
60

% Inhibisi
50 R² = 0.9974
40
a = -0,8451; b = 5,1344; r2 = 0,9974 30 % inhibisi
20
y = bx + a 10 Linear (% inhibisi)

50 = 5,1344x – 0,8451 0
0 5 10 15
50 + 0,8451
IC50(x) = = 9,90 µg/mL Konsentrasi (µg/mL)
5,1344
Uji Aktivitas Antioksidan Isolat EKK

Konsentras Absorbansi
Rata-Rata % Inhibisi
i (µg/mL) A1 A2 A3
20 0,539 0,540 0,540 0,540 30,95
30 0,481 0,480 0,480 0,480 38,62
40 0,413 0,414 0,414 0,414 47,06
50 0,342 0,340 0,340 0,341 56,39
60 0,267 0,267 0,264 0,266 65,98
70 0,196 0,196 0,195 0,196 74,94
80 0,154 0,156 0,155 0,155 80,18

Keterangan :
𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙−𝑎𝑏𝑠 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
% inhibisi = x 100
𝑎𝑏𝑠 𝑘𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙
Absorbansi kontrol 0,782
Isolat EKK
100
80 y = 0.8545x + 13.58

% Inhibisi
R² = 0.9963
60 % inhibisi
a = 13,580; b = 0,854; r2 =0,9963 40
y = bx + a Linear (%
inhibisi)
20
50 = 0,854x + 13,580 0 50 100
50−13,580
IC50(x) = = 42,65 µg/mL Konsentrasi (µg/mL)
0,854