Trypticase Soy Broth &

Loeffler Serum Medium Base

Anggun Agustrina
Annisa Hanna Mutia
Dandi
Muhamad Imam
Susan Aanisah Azzahra
 Media Pertumbuhan Mikrooganisme
Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrient) yang
berguna untuk membiakkan mikroba. Dengan mempergunakan bermacam-macam media dapat
dilakukan isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis dan perhitungan jumlah mikroba.
Berdasarkan bentuknya media terbagi menjadi tiga, yaitu:
1. Padat: Media padat merupakan media yang mengandung banyak agar atau zat pemadat
kurang lebih 15% sehingga media menjadi padat.
2. Semi padat: Media semi padat atau semi cair merupakan media yang mengandung agar kurang
dari yang seharusnya kurang lebih 0,3% - 0,4% sehingga media menjadi kenyal, tidak padat
dan tidak begitu cair. Umumnya digunakan untuk pertumbuhan mikroba yang banyak
memerlukan air dan hidup anerobik dan untuk melihat pergerakan mikroba.
3. Cair: Media cair merupakan media yang tidak ditambahi bahan pemadat, umumnya digunakan
untuk pertumbuhan mikroalga. Kalau ke dalam media tidak ditambahkan zat pemadat,
umumnya dipergunakan untuk pembiakkan mikroalge tetapi juga mikroba lain, terutama
bakteri dan ragi.
 TSB
TSB adalah media broth diperkaya untuk tujuan umum, untuk
isolasi, dan penumbuhan bermacam mikroorganisme. Media ini
banyak digunakan untuk isolasi bakteri dari spesimen
laboratorium dan akan mendukung pertumbuhan mayoritas
bakteri pathogen.
Komposisi dari Trypticase Soy Broth yaitu:
• 3 gram peptone soymeal
• 5 gram sodium chloride
• 17 gram peptone casein
• 2,5 gram dipottasium hydrogenophosphate
• 2,5 gram D (+) glukosa
• Dikalium fosfat
Jenis Media: Cair, Enrichment, Universal.
PENYIMPANAN DAN KEHIDUPAN SHELF
Penyimpanan: Pada toko penerimaan pada 2-30ºC (2-8ºC untuk Cat. No. K85 dan Cat. No. R36) dari lampu langsung.
Media tidak boleh digunakan jika ada tanda-tanda kerusakan (menyusut, retak, atau berubah warna), kontaminasi,
atau jika tanggal kedaluwarsa telah berlalu. Produk ini peka terhadap cahaya dan suhu; melindungi dari cahaya,
panas berlebihan, kelembaban, dan pembekuan. Tanggal kedaluwarsa pada label produk berlaku untuk produk
dalam kemasan utuh saat disimpan sesuai petunjuk. Produk dapat digunakan dan diuji hingga tanggal kedaluwarsa
pada label produk dan diinkubasi untuk waktu inkubasi kontrol kualitas yang direkomendasikan.

PENCEGAHAN
Produk ini mungkin mengandung komponen yang berasal dari hewan. Pengetahuan bersertifikat tentang asal-usul
dan / atau keadaan sanitasi hewan tidak menjamin tidak adanya agen patogen yang dapat menular. Oleh karena itu,
direkomendasikan bahwa produk ini diperlakukan sebagai berpotensi menular, dan menangani mengamati tindakan
pencegahan darah universal yang biasa. Jangan menelan, menghirup, atau membiarkan kontak dengan kulit. Produk
ini hanya untuk penggunaan diagnostik in vitro. Ini hanya dapat digunakan oleh personel laboratorium yang terlatih
dan berkualitas. Amati tindakan pencegahan dan teknik aseptik biohazard yang disetujui. Semua spesimen
laboratorium harus dianggap menular dan ditangani sesuai dengan "tindakan pencegahan standar."
PROSEDUR Pengumpulan Spesimen: Konsultasikan referensi yang terdaftar untuk informasi tentang
pengumpulan spesimen. (2-4,9) Bahan infeksi harus diserahkan langsung ke laboratorium tanpa penundaan dan
dilindungi dari panas dan dingin yang berlebihan. Jika ada keterlambatan dalam pemrosesan, spesimen harus
diinokulasi ke media transportasi yang sesuai dan didinginkan hingga inokulasi. Metode Penggunaan:
Inokulasikan media sesegera mungkin setelah spesimen dikumpulkan. Inkubasi dengan tutup longgar, di
lingkungan atmosfer yang sesuai dan suhu inkubasi selama 18-24 jam, atau hingga tujuh hari. Lihat pedoman
CLSI (sebelumnya NCCLS) saat ini untuk protokol pengujian sensitivitas, dan referensi terdaftar lainnya untuk
prosedur tambahan menggunakan media ini. (2-4,9,11,14)
 Loeffler Serum Medium Base
Loeffler Serum Medium Base dengan serum sapi yang
ditambahkan digunakan untuk budidaya Corynebacterium
diphtheriae .
Komposisi:
Bahan per liter air deionisasi: *
Proteosa peptone 1,5 gm
Dekstrosa 1,25 gr

Natrium Klorida 1,25 gr

Ekstrak daging sapi 0,75 gr
Serum kuda 750,0 ml
PH akhir 7,6 +/- 0,3 pada 25ºC.
Disesuaikan dan / atau ditambah sesuai kebutuhan untuk
memenuhi kriteria kinerja.
Simpan dibawah 30 ° C dalam wadah tertutup rapat dan
media disiapkan pada 2- 8° C.
Gunakan sebelum tanggal kedaluwarsa pada label.
Cara Kerja:Tambahkan 10 gram dalam 250 ml air suling pada suhu 45 ° C. Campur dengan
baik. Tambahkan 750 ml serum Bovine steril, campur baik dan buang ke tabung. Koagulasi dan
sterilkan dengan inspeksi selama 15 menit pada 80 hingga 90 ° C atau kukus pada 100 ° C untuk
10 – 15 menit.
Warna: Kuning muda
Warna dan kejelasan: Bewarna kuning muda setelah penambahan serum kuda dan pembekuan
menjadi bewarna putih bentuk miring opalescent dalam tabung
PENYIMPANAN DAN KEHIDUPAN SHELF
Penyimpanan: Pada toko penerimaan pada 2-8 derajat C. jauh dari cahaya langsung. Media tidak boleh
digunakan jika ada tanda-tanda kerusakan, perubahan warna, kontaminasi, atau jika tanggal kedaluwarsa telah
berlalu. Produk ini peka terhadap cahaya dan suhu; melindungi dari cahaya, panas berlebihan, kelembaban, dan
pembekuan. Tanggal kedaluwarsa pada label produk berlaku untuk produk dalam kemasan utuh saat disimpan
sesuai petunjuk. Produk dapat digunakan dan diuji hingga tanggal kedaluwarsa pada label produk dan diinkubasi
untuk waktu inkubasi kontrol kualitas yang direkomendasikan.
PENCEGAHAN
Produk ini mungkin mengandung komponen yang berasal dari hewan. Pengetahuan bersertifikat tentang asal-usul dan
/ atau keadaan sanitasi hewan tidak menjamin tidak adanya agen patogen yang dapat menular. Oleh karena itu,
direkomendasikan bahwa produk ini diperlakukan sebagai berpotensi menular, dan menangani mengamati tindakan
pencegahan darah universal yang biasa. Jangan menelan, menghirup, atau membiarkan kontak dengan kulit. Produk ini
hanya untuk penggunaan diagnostik in vitro. Ini hanya dapat digunakan oleh personel laboratorium yang terlatih dan
berkualitas. Amati tindakan pencegahan dan teknik aseptik biohazard yang disetujui. Semua spesimen laboratorium
harus dianggap menular dan ditangani sesuai dengan "tindakan pencegahan standar." "Pedoman untuk Kewaspadaan
Isolasi"
PROSEDUR
Pengumpulan Spesimen: Bahan infeksi harus diserahkan langsung ke laboratorium tanpa penundaan dan dilindungi dari
panas dan dingin yang berlebihan. Jika ada keterlambatan dalam pemrosesan, spesimen harus diinokulasi ke media
transportasi yang sesuai dan didinginkan hingga inokulasi. Konsultasikan referensi yang terdaftar untuk informasi tentang
pengumpulan spesimen. (1-5) Untuk Isolasi Corynebacterium diphtheria: Metode penggunaan: 1. Sebelum inokulasi,
biarkan media menyeimbangkan suhu kamar. 2. Menggunakan gerakan fishtail, langsung inokulasi spesimen usap ke
media. 3. Inkubasi secara aerobik pada suhu 35ºC. hingga 4 hari. 4. Amati setiap hari untuk morfologi kolonial khas
corynebacteria. 5. Lakukan pewarnaan metilen biru untuk memeriksa keberadaan butiran metakromatik dan penampakan
sugestif pembentukan sel huruf cina. 6. Identifikasi definitif C. diphtheriae dibuat dengan melakukan tes biokimia dan
toksigenisitas. Untuk Deteksi Proteolisis Mikroorganisme Aerobik
1. Suntikkan medium dengan koloni terisolasi dari organisme yang dimaksud.
2. Inkubasi secara aerobik pada suhu 35ºC. selama 3-4 hari.
3. Amati morfologi kolonial yang khas
F atau Deteksi Proteolisis Mikroorganisme Anaerob
1. Suntikkan medium dengan koloni terisolasi dari organisme yang dimaksud.
2. Inkubasi secara anaerob pada suhu 35ºC. selama 3-4 hari atau overlay miring yang diinokulasi dengan Thioglycollate
Broth sesaat sebelum inkubasi, kencangkan tutup dan inkubasi secara aerob.
3. Amati morfologi kolonial yang khas