MIKROBIOLOGI

“METODE UJI FENOL”

KELOMPOK : 6 (enam)
ANGGOTA : NOR DEWI AISYAH PURTI (61608100819066)
MIA ANDINI (61608100819056)
MUHAMMAD HANDI ARDIYANSAH (61608100819060)
MAY SHINE DEBORA PANAHA (61608100819054)
NISA MIFTAHUL KHAIRA (61608100819064)

FARMASI TINGKAT I KELAS B

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN

MITRA BUNDA PERSADA
BATAM
2020
 KOEFISIEN FENOL PRODUK DESINFEKTAN YANG BEREDAR DI
SALAH SATU SUPERMARKET KOTA LUBUK PAKAM
file:///C:/Users/Lenovo/Downloads/58-Article%20Text-96-1-10-20181017.pdf
Tahun 6 agustus 2018

Sebaliknya, apabila koefisien fenol

Pengertian Fenol
lebih dari 1 artinya bahan
antimikroba tersebut lebih ampuh
daripada fenol.
Koefisien fenol adalah
Koefisien fenol ditentukan dengan
perbandingan ukuran keampuhan
cara membagi pengenceran
suatu bahan antimikroba
tertinggi dari fenol yang
dibandingkan dengan fenol sebagai
memusnahkan jasad renik dalam
standar. digunakan sebagai blanko
sepuluh menit tetapi tidak
karena fenol sering digunakan
memusnahkan dalam lima menit
untuk memusnahkan
terhadap pengenceran tertinggi
mikroorganisme.
bahan antimikroba yang
Angka koefisien fenol yang kurang
membunuh jasad renik dalam
dari 1 menunjukkan bahwa
sepuluh menit tetapi tidak dalam
Senyawa yang bersifat antimikroba
lima menit
tersebut kurang efektif
(Pratiwi, 2008).
dibandingkan fenol..
 Zat-zat antimikroba yang
dipergunakan untuk desinfektan
harus diuji keefektifannya. Fenol
dijadikan pembanding karena fenol
Teknologi produksi dan komposisi
sering digunakan untuk membunuh
produk desinfektan dari masing
mikroorganisme.
masing produsen yang berbeda
Cara menentukan efektivitas
kemungkinan berpengaruh terhadap
desinfektan adalah dengan melakukan
aktivitas desinfektan yang dihasilkan.
uji koefisien fenol.
Uji ini dilakukan untuk
Disamping itu, kondisi penyimpanan
membandingkan aktivitas suatu
juga dapat mempengaruhi stabilitas
produk desinfektan dengan daya
produk desinfektan. Hal tersebut
bunuh fenol baku dalam kondisi uji
mendorong dilakukan penelitian lebih
yang sama. Produk desinfektan
lanjut terhadap beberapa produk
banyak beredar di pasaran dengan
desinfektan yang beredar di salah satu
berbagai merek dagang dari produsen
supermarket Kota Lubuk Pakam
yang berbeda pula. Oleh karena itu,
berdasarkan angka koefisien fenol.
efektivitasnya perlu dievaluasi untuk
menjamin mutu produk desinfektan

(Eka, 2006).
 Metode Uji Koefisien Fenol
1. Mikroorganisme Uji
Mikroorganisme yang digunakan
dalam penelitian ini yaitu Salmonella
typhi strain American Type Culture
Collection (ATCC) 6539 ,
2. Pengambilan Sampel
Produk desinfektan yang diuji
meliputi produk yang mengandung
klorosilenol (A), natrium hipoklorit
(B), benzalkonium klorida (C), asam
klorida (D dan E) dan minyak pinus (F
dan G). Supermarket yang dipilih
adalah supermarket yang
menyediakan ketujuh produk
desinfektan tersebut meliputi
Alfamart, Carefour, Irian, dan
Ramayana.
3. Penyiapan Media
13 gram serbuk NB dalam 1 liter
air suling dan disterilkan dalam
otoklaf pada 1210 selama 15 menit.
4. Penyiapan Bakteri Uji
Salmonella typhi strain American Type
Culture Collection (ATCC) 6539
diremajakan dalam 3 kali dalam 3 hari
berturut-turut dalam nutrient agar
(oxoid, USA). Densitas inokulum
bakteri diukur dengan
spektrofotometer hingga diperoleh
transmitan 25%.
4. Pembuatan Larutan
Fenol 5% Sebanyak 5 g fenol baku
(99,99%) dilarutkan dalam air suling
steril. Kemudian, dicukupkan hingga
100 ml untuk memperoleh fenol 5%.
Larutan fenol 5% tersebut diencerkan
dengan air suling steril.
5. Pembuatan Larutan Desinfektan
Uji Desinfektan uji diencerkan
sesuai dengan yang tertera pada
etiket kemasan dengan air suling
steril. Larutan tersebut diencerkan
secara bertingkat dalam air suling
steril untuk memperoleh
pengenceran 1:5, 1:10, 1:20, 1:30,
1:40, dan 1:50 dengan volume
masingmasing 5 ml.
6. Penetapan Koefisien Fenol
Disiapkan rak tabung reaksi sesuai
ukuran tabung dengan kapasitas 28
dalam 4 deretan. Satu rak tabung
digunakan untuk satu sampel.
Deretan pertama terdiri dari
blanko dan sampel dengan
pengenceran 1:5, 1:10, 1:20, 1:30,
1:40, dan 1:50. Deret kedua, ketiga,
dan keempat untuk tabung berisi
media NB masing-masing untuk
pengamatan waktu kontak 5, 10, dan
15 menit. Ke dalam tiap tabung
pengenceran sampel dimasukkan 0,1
ml suspensi bakteri uji yang telah
dikocok homogen. Waktu
memasukkan bakteri uji pada tabung
pengenceran pertama dicatat sebagai
0 menit.
4. Pembuatan Larutan
Fenol 5% Sebanyak 5 g fenol baku
(99,99%) dilarutkan dalam air suling
steril. Kemudian, dicukupkan hingga
100 ml untuk memperoleh fenol 5%.
Larutan fenol 5% tersebut diencerkan
dengan air suling steril.
5. Pembuatan Larutan Desinfektan
Uji Desinfektan uji diencerkan
sesuai dengan yang tertera pada
etiket kemasan dengan air suling
steril. Larutan tersebut diencerkan
secara bertingkat dalam air suling
steril untuk memperoleh
pengenceran 1:5, 1:10, 1:20, 1:30,
1:40, dan 1:50 dengan volume
masingmasing 5 ml.
6. Penetapan Koefisien Fenol
Disiapkan rak tabung reaksi sesuai
ukuran tabung dengan kapasitas 28
dalam 4 deretan. Satu rak tabung
digunakan untuk satu sampel.
Deretan pertama terdiri dari
blanko dan sampel dengan
pengenceran 1:5, 1:10, 1:20, 1:30,
1:40, dan 1:50. Deret kedua, ketiga,
dan keempat untuk tabung berisi
media NB masing-masing untuk
pengamatan waktu kontak 5, 10, dan
15 menit. Ke dalam tiap tabung
pengenceran sampel dimasukkan 0,1
ml suspensi bakteri uji yang telah
dikocok homogen. Waktu
memasukkan bakteri uji pada tabung
pengenceran pertama dicatat sebagai
0 menit.
Interval waktu inokulasi antar tabung
adalah 30 detik, sehingga untuk 7
tabung dapat diselesaikan selama 3
menit, setiap kali inokulasi diusahakan
ujung pipet mendekati permukaan
cairan dan tidak menyentuh dinding
tabung.
Sepuluh menit setelah bakteri uji
diinokulasi pada tabung pengenceran
pertama setelah dikocok, dipindahkan
1 ml suspensi ke dalam media NB
deret ke-3 sama seperti di atas.
Lima belas menit setelah bakteri uji
diinokulasi pada tabung pengenceran
pertama, setelah dikocok dan
dipindahkan 1 ml suspensi ke dalam
media NB deret ke-4.
Semua tabung yang telah diinokulasi
dikocok homogen kemudian
diinkubasi pada suhu 35-37oC selama
48 jam dan diamati pertumbuhan
bakteri pada setiap tabung. Pengujian
dilakukan secara duplo.
Koefisien fenol adalah hasil bagi dari
faktor pengenceran tertinggi
desinfektan dengan faktor
pengenceran tertinggi fenol baku
yang masing-masing dapat
membunuh bakteri uji dalam masa
kontak 10 menit tetapi tidak dalam
masa kontak 5 menit
(Purohit et al., 2004).
Fenol digunakan sebagai desinfektan
secara umum. Senyawa ini bekerja
sebagai agen membran aktif yang
menyebabkan koagulasi intraseluler
dari sitoplasma. Fenol berinteraksi
dengan sel bakteri melalui proses
adsorpsi yang melibatkan ikatan
hidrogen. Pada kadar rendah
terbentuk kompleks proteinfenol
dengan ikatan yang lemah dan segera
mengalami peruraian, diikuti
penetrasi fenol ke dalam sel dan
menyebabkan presipitasi serta
denaturasi protein. Pada kadar tinggi
fenol menyebabkan koagulasi protein
dan sel membran mengalami lisis
(Siswandono, 1995).
Fenol dijadikan pembanding karena
fenol sering digunakan untuk
membunuh mikroorganisme. Cara
menentukan efektivitas desinfektan
adalah dengan melakukan uji
koefisien fenol. Uji ini dilakukan untuk
membandingkan aktivitas suatu
produk desinfektan dengan daya
bunuh fenol baku dalam kondisi uji
yang sama. Produk desinfektan
banyak beredar di pasaran dengan
berbagai merek dagang dari produsen
yang berbeda pula. Oleh karena itu,
efektivitasnya perlu dievaluasi untuk
menjamin mutu produk desinfektan
(Eka, 2006).

KOEFISIEN FENOL
Koefisien fenol adalah
kemampuan desinfektan untuk
membunuh bakteri dibandingkan
dengan fenol. Uji fenol adalah
membandingkan aktivitas
antimikroba dari komponen-
komponen kimia dengan fenol
sebagai standar uji. Pengenceran
desinfektan secara bertahap dan
fenol ditempatkan dalam tabung
reaksi steril, kultur murni bakteri
yang digunakan sebagai standar
ditambahkan pada setiap tabung.
Refrensi jurnal 2017
Fenol didapatkan melalui oksidasi
sebagian pada benzena atau asam
benzoate dengan proses Raschig,
Fenol juga dapat diperoleh sebagai
hasil dari oksidasi batu bara. Fenol
dapat digunakan sebagai antiseptik
seperti yang digunakan Sir Joseph
Lister saat mempraktikkan
pembedahan antiseptik. Fenol
merupakan komponen utama pada
anstiseptik dagang, triklorofenol atau
dikenal sebagai TCP (trichlorophenol).
Fenol juga merupakan bagian
komposisi beberapa anestitika oral,
misalnya semprotan kloraseptik
(Aditya, 2009).
Fenol berfungsi dalam pembuatan
obat-obatan (bagian dari produksi
paspirin, pembasmi rumput liar, dan
lainnya. Fenol yang terkonsentrasi
dapat mengakibatkan pembakaran
kimiawi pada kulit yang terbuka.
Penyuntikan fenol juga pernah
digunakan pada eksekusi mati.
Penyuntikan ini sering digunakan pada
masa Nazi, Perang Dunia II. Suntikan
fenol diberikan pada ribuan orang di
kemah-kemah, terutama di
Auschwitz-Birkenau. Penyuntikan ini
dilakukan oleh dokter secara
penyuntikan ke vena (intravena) di
lengan dan jantung. Penyuntikan ke
jantung dapat mengakibatkan
kematian langsung.
(Aditya, 2009)
Desinfektan didefinisikan sebagai
bahan kimia atau pengaruh fisika
yang digunakan untuk mencegah
terjadinya infeksi atau
pencemaran jasad renik seperti
bakteri dan virus, juga untuk
membunuh atau menurunkan
jumlah mikroorganisme atau
kuman penyakit lainnya.
Desinfektan ini tersedia secara
komersial yang masing-masing
memiliki karakteristik kimiawi,
toksisitas, biaya dan penggunaan
tertentu.
 Desinfektan merupakan bahan
kimia yang dapat mematikan
mikroorganisme yang sedang dalam
keadaan tidak aktif, sehingga hanya
mematikan bentuk vegetatif dari
mikroorganisme, tetapi tidak efektif
terhadap spora.
Desinfektan dapat mencegah
infeksi dengan jalan penghancuran
atau pelarutan jasad renik yang
patogen.
Desinfektan berbeda dengan
antibiotik, karena desinfektan
memiliki toksisitas selektif yang
rendah, keduanya bersifat toksik tidak
hanya pada mikroba patogen tetapi
juga terhadap sel inang. Oleh karena
itu, desinfektan hanya digunakan
untuk membunuh mikroorganisme
pada lingkungan mati.
Koefisien fenol adalah
perbandingan ukuran keampuhan
suatu bahan antimikrobial
dibandingkan dengan fenol[1].
Fenol dijadikan pembanding
karena fenol sering digunakan
untuk mematikan
mikroorganisme, Koefisien fenol
yang kurang dari 1 menunjukkan
bahwa bahan antimikrobial
tersebut kurang efektif
dibandingkan fenol.
Sebaliknya, apabila koefisien fenol
lebih dari 1 artinya bahan
mikrobial tersebut lebih ampuh
daripada fenol.

Waktu untuk menguji
antibiotika adalah 18-24 jam,
sedangkan untuk mata tidak
mungkin selama itu. Oleh karena
itu, digunakan waktu tertentu
dengan metode kontak secara
konvensional, waktu yang paling
cepat adalah 2,5 menit, paling
lama 15 menit. Kekuatan fenol
untuk menguji desinfektan adalah
tidak lebih besar dari 5%.
Desinfektan digunakan di
rumah sakit dan laboratorium
harus diuji secara berkala untuk
memastikan potensi dan
kemanjuran,
Desinfektan digunakan di
rumah sakit dan laboratorium
harus diuji secara berkala untuk
memastikan potensi dan
kemanjuran, Sebagai desinfektan
tertentu kehilangan potensi pada
berdiri dan penambahan bahan
organik, keberhasilan mereka
harus diuji. Sementara metode
tertentu membantu dalam
memilih cairan yang tepat
desinfektan untuk digunakan
orang lain menguji efektivitas
desinfektan sudah digunakan.
Beberapa metode
membandingkan kinerja dengan
fenol sedangkan metode lain
hanya menyatakan jika disinfektan
efektif atau tidak.
METODE UJI KOEFISIEN FENOL
1. Pembuatan Media
Media kaldu nutrisi (Nutrient
Broth) dimasukan kedalam 12 tabung
reaksi ukuran 20 x 150 mm, volume
masing-masing dibuat 5 ml.
Komposisi perliter terdiri dari pepton
10 gram, ekstrak daging 5 gram, dan
NaCl 5 gram, pH akhir 6.8.
2. Pembuatan Inokulum
Bakteri salmonella thyposa atau
staphylococcus aureus sebelumnya
telah ditanam pada agar nutrisi
(Nutrient Agar) miring dan diinkubasi
pada suhu 370 C selama 24-48 jam.
3. Pembuatan Larutan Baku Fenol
Dibuat larutan persediaan baku
fenol 5% dengan cara menimbang 2.5
gram fenol dalam 50 ml air suling
steril. Kemudian dilakukan
pengenceran konsentrasi menjadi 1:
80 dengan memipet 12.5 ml larutan
fenol 5% ditambahkan dengan 37.5 ml
air suling steril pada tabung steril
ukuran 25 x 150 mm.
4. Pembuatan Larutan Desinfektan
Pengenceran larutan desinfektan
dilakukan pada tabung steril
berukuran 25 x 150 mm
 Berdasarkan hasil pengamatan,
bahan uji baik fenol ataupun
desinfektan (wipol) ditumbuhi
bakteri. Hal ini ditunjukkan dengan
tanda plus (+) yang artinya bakteri
dapat hidup dan tumbuh pada
bahan uji tersebut ditandai dengan
adanya kekeruhan pada larutan
yang diujikan.
Pengamaan ini dilakukan
setelah inkubasi selama 24 jam.
Adapun pengenceran fenol yang
digunakan ialah 1:80.
Sedangkan pengenceran
desinfektan (wipol) yang digunakan
ialah masing-masing 1:80, 1:100,
1:150. Dan penanaman bakteri
dengan interval masing-masing 5
menit, 10 menit, dan 15 menit.
1. Larutan fenol yang telah
diinokulasi bakteri dapat
menyebabkan kematian bakteri
gram negative (Escherichia coli)
yang ditanam di dalamnya.
2. Larutan desinfektan yang
paling cepat membunuh bakteri
gram negative (Escherichia Coli)
yaitu desinfektan dengan
konsentrasi 1:150, terbukti pada
menit ke 5 bakteri sudah mati.
2. Potensi dan efektifitas
desinfektan terhadap bakteri yaitu
1.5 kali dari fenol
 Fenol ( asam karbol ) memiliki
daya bunuh pada konsentrasi
rendah (2-4%), karena mampu
mempresipitasikan protein secara
aktif, selain itu juga merusak
membran sel dengan cara
menurunkan tegangan
permukaannya. Fenol merupakan
standar pembanding untuk
menentukan aktivitas atau khasiat
suatu desinfektan.
Fenol merupakan zat pembaku
daya antiseptik obat lain sehingga
daya antiseptik dinyatakan dengn
koefisien fenol.
Koefisien fenol merupakan
sebuah nilai aktivitas germisidal
suatu antiseptik dibandingkan
dengan efektivitas germisidal fenol.
Aktivitas germisidal adalah
kemampuan suatu senyawa
antiseptik untuk membunuh
mikroorganisme dalam jangka
waktu tertentu.
Fenol merupakan salah satu
germisidal kuat yang telah
digunakan dalam jangka waktu
panjang. Efektivitas senyawa
antiseptik sangat dipengaruhi oleh
konsentrasi dan lama paparannya.
Semakin tinggi konsentrasi dan
semakin lama paparan akan
meningkatkan. efektivitas senyawa
antiseptik. Koefisien fenol yang
kurang dari 1 menunjukkan bahwa
bahan entimikrobial tersebut
kurang efektif dibanding dengan
fenol.
(Dwidjoseputro,2005)
 DAFTAR PUSTAKA DAN LINK SUMBER REFRENSI

Dwidjoseputro, D. 2005. Dasar-dasar Mikrobiologi. Djambatan : Jakarta

Eka. (2006). Desinfektan dan Antimikroba. Jakarta: Penerbit Universitas

Indonesia. Hal. 26; 49-65.

Purohit, S.S., Saliys, A.K, Karkam, H.N.(2004). Pharmaceutical Microbiology.

Pratiwi, S. (2008). Mikrobiologi Farmasi.Jakarta: Penerbit Erlangga. Hal. 17-18

Siswandono. (1995). Kimia Medisinal.Surabaya: Airlangga University Press.

Hal. 249-251

file:///C:/Users/Lenovo/Downloads/58-Article%20Text-96-1-10-20181017.pdf
http://www.gudangmateri.com/2010/07/uji-koefisien-fenol.html

http://fakhrurijal.blogspot.com/2011/07/laporan-mikrobiologi-uji-fenol.html?zx=66ae5c7c98a0059e

http://faridkurniawan21.blogspot.com/2017/01/laporan-praktikum-mikobiologi-koefisien.html