Most

Probable
Number
(MPN)
Kelompok 3B:
Muhammad Alif Ramdani (23)
Muhammad Fikri Arrabani (24(

XII AK 5
 Apa itu MPN?
Most Probable Number (MPN) atau
angka paling mungkin (APM) adalah
metode yang digunakanuntuk
menghitung perkiraan jumlah bakteri
dalamsuatu bahan atau
Metode makanan.
ini menggunakan media kultur cair
dalam
tabung reaksi dan menghitung jumlah tabung
positif,
yaitu jumlah tabung yang ditumbuhi oleh
bakteri
 Tujuan
Untuk menentukan angka E.coli
atau Coliform total dalam
sampel air dan makanan.
 Prinsip
Prinsip utama metode ini adalah
mengencerkan sampel sampai
tingkat
tertentu untuk mendapatkan
konsentrasi
bakteri yang dibutuhkan.
Memasukkan
sampel ke dalam tabung akan
memastikan laju pertumbuhan
 Metode
METODE MPN BIASANYA
MENGGUNAKAN RANGKAIAN 3 ATAU 5
TABUNG UNTUK SETIAP PENGENCERAN.
SEMAKIN BANYAK TABUNG YANG
DIGUNAKAN, MAKA SEMAKIN TINGGI
AKURASINYA
 Tahapan kerja MPN

Uji Penentu

Uji Penduga Uji

Kesempurnaan
 Uji Penduga
Uji penduga merupakan uji pendahuluan
untuk mengetahui ada tidaknya bakteri
koliform berdasarkan pembentukan asam
dan gas yang disebabkan oleh fermentasi
laktosa oleh bakteri golongan
Pembentukan koliform.
gas tersebut dapat dilihat pada
tabung Durham berupa gelembung-
gelembung udara akibat kekeruhan pada
medium laktosa. Tabung dianggap positif jika
10% atau lebih gas terbentuk dari volume
dalam tabung Durham.
 Uji Penentu
Uji penentu dilakukan untuk
memastikan bahwa gas yang dihasilkan
disebabkan oleh bakteri
koliform.Tabung positif yang dihasilkan
dari uji
pendugaan kemudian dilanjutkan
dengan uji
 Uji Kesempurnaan
Uji ini dilakukan hanya jika diperlukan, dengan
media yang memberikan hasil positif dalam uji
penegasan. Uji pelengkap dilakukan dengan
menginokulasi koloni bakteri pada media agar,
digoreskan dan diinkubasi pada suhu 35°C
selama 24 jam. Agar yang digunakan adalah
agar eosin metilena biru (EMB). Pertumbuhan
koliform diindikasi oleh koliform pada
medium agar-agar yang membuat medium
Skema MPN
Teknik Pengenceran MPN
Teknik Pengenceran ini memberikan hasil yang
baik apabila asumsinya terpenuhi, yaitu :

Bakteri terdistribusi sempurna

1st dalam homogenat sampel.
Sel bakteri terpisah-pisah secara
2nd individual, tidak dalam bentuk
rantai atau kumpulan

Media yang dipilih telah sesuai

untuk pertumbuhan bakteri target
3rd dalam suhu dan waktu inkubasi
tertentu
Teknik Pengenceran ini memberikan hasil yang
baik apabila asumsinya terpenuhi, yaitu :

Jumlah yang didapatkan

4th menggambarkan bakteri yang
hidup (viable) saja

Setiap individu tabung memiliki

5th data yang berdiri sendiri
(independen)

Tidak ada kontaminasi

6th
bahan dan peralatan
 Media Yang Digunakan

Lactosa Broth BGLBB EMB

(LB)
Untuk Meningkatkan Untuk
memfermentasi pertumbuhan bakteri membedakan
laktosa menjadi koliform (yang bakteri non fecal
asam dan gas tergolong bakteri gram coliform dan fecal
 HASIL METODE MPN
• Tes Penduga memiliki hasil positif :
Terdapat gelembung gas pada tabung
durham,
warna media dari ungu menjadi kuning
• Tes Penentu, memiliki hasil positif :
Terdapat gelembung gas pada tabung
durham
• Tes Kesempurnaan, memiliki hasil
Hasil dari metode MPN adalah nilai MPN.
Nilai MPN
merupakan perkiraan jumlah unit
pertumbuhan atau unit pembentuk
koloni dalam suatu sampel. Satuan
umumnya adalah per ml atau per gram.
Semakin rendah MPN, semakin tinggi
Kelebihan metode MPN
● Dapat meningkatkan akurasi
dengan meningkatkan jumlah
tabung yang digunakan tiap
pengenceran
● Sensitivitas pada konsentrasi
bakteri rendah, umumnya lebih
baik daripada ALT.
● Pemulihan yang terbaik karena
menggunakan media cair, tetapi
tetap tergantung pada partikel
Kekurangan metode MPN
● Dibutuhkan beberapa hari untuk
mendapatkan kultur yang baik.
● Jumlah angka koliform yang dihitung
hanya perkiraan
● Membutuhkan banyak media
● Tidak dapat dilakukan di lapangan
tempat sampel diambil, sehingga
memerlukan sistem transportasi
khusus untuk meminimalkan
perubahan koliform dalam sampel.
● Tidak dapat digunakan untuk
• Ibu