ISOLASI DNA

• (i) Extraction buffer: 1% SDS, 0.5 M NaCl; (ii) isopropanol; (iii) 70% (v/v) ethanol.

• Ambil setengah dari daun kering muda dan potong kecil-kecil masukan ke dalam tabung 1,5 ml steril.
• kemudian giling menggunakan mikro pestle/alu mini dalam 200 ul buffer ekstraksi hingga halus.
• Tambahkan lebih banyak buffer hingga mencapai volume akhir dari 1200 ul (+Bukffer ekstraksi 1000 ul)
• spin (13.500 rpm, 4 menit, RT) menggunakan mikrosentrifugasi.
SEIMBANG,
posisi dan volume
• Pindahkan supernatan ke dalam tabung microfuge baru dan

• tambahkan volume
Supernatant, berisi isopropanol yang sama
material genetic 600 ul (600 ul) dan aduk
perlahan dengan
Supernatant, berisi
material genetik
Pelet, sisa daun

• aduk perlahan dengan inversi

• Tempatkan campuran di atas es selama 5 menit.
• Putar (13.500 rpm, 4 menit, RT) menggunakan mikrosentrifugasi.
• Buang supernatan
dan

Pelet
DNA
• cuci pelet
DNA dengan
+ 500 ul
70% (v/v)
etanol.

• Putar (13.500 rpm, 2 menit,

RT) menggunakan
microcentrifuge
Buang etanolnya

Larutkan DNA dalam 50 ul

ddH2O

• simpan pada suhu 4 °C untuk segera

digunakanatau−20 °C untuk penyimpanan
jangka panjang. Jika lab dilengkapi dengan -80
°C freezer, sebaiknya simpan pada suhu -80 °C
untuk penyimpanan jangka panjang
Deteksi DNA