Konsep HPLC (High Performance Liquid

Chromatography): Instrumental, prinsip kerja,

dan interpretasi kromatogram

Dosen pengampu: Elza Rachman Panca Priyanda, M. Pd.

 Pengertian HPLC
● Kromatografi Cair Berperforma Tinggi (high performance liquid
chromatography, HPLC) merupakan salah satu teknik kromatografi
untuk zat cair ang biasanya disertai dengan tekanan tinggi.
● HPLC adalah alat laboratorium yang bekerja dengan metode
fisikokimia, didasarkan pada teknik kromatografi dimana fase
geraknya berupa cairan dan fase diamnya bisa berupa memiliki bentuk
padat atau cair.
 Jenis – jenis HPLC
Kromatografi pasangan
1 Kromatografi Adsorbsi 4 ion

Kromatograsi fase
2 terikat 5 Kromatografi eksklusif

Kromatografi penukar
3 ion 6 Kromatografi afinitas
 Instrumentasi HPLC
• Fase gerak (eluen) berupa zat cair. Fase
gerak selain sebagai pembawa senyawa
campuran menuju detektor, fase gerak juga
dapat berinteraksi dengan solut-solut.
• Pompa dianalogikan sebagai jantung, berfungsi
mengalirkan fase gerak cair melalui kolom.
• Injektor merupakan tempat masuknya sampel.
• Kolom HPLC berisi fase diam, tempat terjadinya
pemisahan campuran menjadi komponen-komponennya.

• Detektor dengan persyaratan untuk detektor antara lain harus cukup sensitif, stabilitas dan
keterulangannya tinggi, respon terhadap sampel linier, waktu respon pendek sehingga tidak
tergantung pada kecepatan alir, reliabilitas tinggi, mudah digunakan serta tidak merusak
sampel.
 Prinsip kerja HPLC
Secara sederhana prinsip kerja HPLC
adalah dengan memberikan tekanan tinggi
pada sampel cairan atau bentuk lainnya
yang telah dilarutkan. Tekanan tinggi ini
didapat dari pompa dengan spesifikasi yang
mantap. Sampel akan di injeksi bersamaan
dengan solven melewati column, kemudian
ditangkap oleh uv-vis detector
 Kelebihan
HPLC
• Mampu memisahkan molekul-molekul dari suatu campuran
dengan daya memisah yang tinggi.
• Dapat menghindari terjadinya dekomposisi kerusakan
bahan analisis.
• Dapat digunakan bermacan-macam detektor dengan
kepekaan yang tinggi.
• Waktu analisa cukup singkat.
• Dapat menganalisis sampel yang kecil kuantitasnya.

Kekurangan HPLC
• Harga sebuah alat HPLC cukup mahal.
• Sering ada larutan standar yang tertinggal diinjektor.
• lebih mudah tertutup oleh kotoran
INTERPRETASI DATA
 KESIMPULAN
1. HPLC adalah alat laboratorium yang bekerja dengan metode
fisikokimia, didasarkan pada teknik kromatografi dimana fase geraknya
berupa cairan dan fase diamnya bisa berupa memiliki bentuk padat atau
cair
2. prinsip kerja HPLC adalah dengan memberikan tekanan tinggi pada
sampel cairan atau bentuk lainnya yang telah dilarutkan.
THANK YOU