DIAGRAM ALIR UJI MIKROBA PATOGEN

1. Deteksi E. coli dari sampel padat Sampel padat* Ditimbang sebanyak 25 gram 225 ml pepton Dimasukkan kantong plastik steril

Dihancurkan dengan menggunakan stomacher

Diambil 50 ml

Diambil 50 ml Ditambahkan 1 ml kultur E. coli (Kontrol positif)

Pepton steril 5 ml (Kontrol negatif)

Dilakukan seri pengenceran hingga 10-6 pastikan

Diambil 0,1 ml dari 3 seri pengenceran terakhir

Platting dengan metode spread plate Media VRBA Diinkubasi pada suhu 37C selama 48 jam

Dilakukan pengamatan dan menghitung koloni E. coli yang tumbuh

Kebutuhan alat Tabung reaksi 25 Cawan petri 12 Erlenmeyer 500 ml 4 Hockey glass Bunsen Tip 1 ml 25 Tip 0,1 ml 12 Pipet mikro 1 ml dan 0.1 ml Pipet ukur 10 ml/gelas ukur 100 ml Plastik tebal

Hasil

2. Deteksi Salmonella Sampel padat* Ditimbang sebanyak 25 gram 225 ml lactose broth Dimasukkan kantong plastik steril

Dihancurkan dengan menggunakan stomacher

Diambil 50 ml

Diambil 50 ml Ditambahkan 1 ml kultur Salmonella (Kontrol positif)

Lactose broth 5 ml (Kontrol negatif)

Inkubasi pada suhu 37C selama 24 jam

Diambil 1 ml 10 ml SC broth Dimasukkan tabung reaksi

Diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam

Diambil 0.1 ml platting metode spread plate Media SSA Diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam

Dilakukan pengamatan dan menghitung koloni Salmonella yang tumbuh Kebutuhan alat tiap sampel : Tabung reaksi 4 Cawan petri 1 Erlenmeyer 500 ml 4 buah Bunsen Tip 1 ml 4 buah Tip 0.1 ml 4 buah Pipet mikro Pipet ukur 10 ml/ gelas ukur 100 ml Plastik tebal Hasil

3. Deteksi S. aureus Sampel padat* Ditimbang sebanyak 10 gram 90 ml larutan garam Nacl 7,5 % Dimasukkan kantong plastik steril

Dihancurkan dengan menggunakan stomacher selama 2 menit

Diambil 50 ml

Diambil 50 ml Ditambahkan 1 ml kultur E. coli (Kontrol positif)

larutan garam Nacl 7,5 % 5 ml (Kontrol negatif)

Dilakukan seri pengenceran hingga 10-6

Diambil 0,1 ml dari 3 seri pengenceran terakhir

Platting dengan metode spread plate Media MSA Diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam

Dilakukan pengamatan dan menghitung koloni S. aureus yang tumbuh

Hasil Kebutuhan alat tiap sampel : Tabung reaksi 25 Cawan petri 12 Erlenmeyer 500 ml 4 Hockey glass Bunsen Tip 1 ml 25 Tip 0,1 ml 12 Pipet mikro 1 ml dan 0.1 ml Pipet ukur 10 ml/gelas ukur 100 ml Plastik tebal

4. Deteksi E. coli dari sampel cair Sampel cair** dilakukan pengenceran hingga seri pengenceran tertentu

Diambil 1 ml dari masing-masing seri pengenceran LB broth Dimasukkan dalam 3 tabung reaksi + tabung durham

Diinkubasi pada suhu 37C selama 48 jam

Diambil 1 ml dari seri pengenceran yang positif

Platting pour plate pada media VRBA

Diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam

Hitung jumlah koloni Hasil Sampel Air mineral (10-2) Air keran (10-5) Air keran yang dididihkan (10-2) Air sungai (10-6) Aquades steril + E.coli (10-6) Jumlah Tabung reaksi + pepton 2 5 2 6 6 20 Tabung + durham 9 18 9 21 21 78 Tip 1 ml 2 5 2 6 6 21

Kebutuhan alat Cawan petri 15 Bunsen Pipet mikro Pipet ukur 10 ml Erlenmeyer 500 ml

Kebutuhan Alat & Bahan untuk Deteksi E.coli Sampel padat

Bahan Daging Sapi / usus sapi Pepton untuk pengenceran Pepton VRBA Kultur E. Coli

Kebutuhan @ sampel 25 gram 54 ml 225 ml 45 ml 1 ml

Kebutuhan Untuk satu kelas (4 sampel) 25 gram 216 ml 450 ml 540 ml 1 ml

Alat yang disediakan Asisten Timbangan Stomacher Plastik tebal 2 buah Inkubator suhu 32C Pipet mikro 1 ml Pipet mikro 0.1 ml Tip 1 ml 40 buah Tip 0.1 ml 15 buah Hockey glass

Kebutuhan Alat & Bahan untuk Deteksi Salmonella

Bahan Daging sapi/usus sapi Lactose broth SC/TT broth SSA Kultur Salmonella Alat yang disediakan Asisten Timbangan Stomacher Plastik tebal 2 buah Pipet mikro 1 ml Tip 1 ml 12 buah Inkubator suhu 35C

kebutuhan @ sampel 25 gram 225 ml 10 ml 15 ml 1 ml

Kebutuhan Untuk satu kelas (4 sampel) 25 gram 450 ml 40 ml 60 ml 1 ml

Kebutuhan Alat & Bahan untuk Deteksi S. aureus

Bahan Daging sapi/ usus sapi Larutan garam Nacl 7.5 % Pepton MSA Kultur S. aureus Alat yang disediakan Asisten Timbangan Stomacher Plastik tebal 2 buah Inkubator suhu 37C Pipet mikro 1 ml 1 buah Pipet mikro 0.1 ml 1 buah Tip 1 ml 40 buah Tip 0.1 ml 15 buah Hockey glass

kebutuhan @ sampel 10 gram 90 ml 54 ml 45 ml 1 ml

Kebutuhan Untuk satu kelas (4 sampel) 10 gram 180 ml 216 ml 180 ml 1 ml

Kebutuhan Alat & Bahan untuk Deteksi E.coli Sampel cair

Sampel Air mineral (10-2) Air keran (10-5) Air keran yang dididihkan (10-2) Air sungai (10-6) Aquades steril + E.coli (10-6) Jumlah Alat yang disediakan Asisten Inkubator suhu 35C Pipet mikro 1 ml Tip 1 ml 30 buah Hockey glass

Pepton @9 ml 27 ml 45 ml 27 ml 54 ml 54 ml 207 ml

Lactose broth @9 ml 81 ml 135 ml 81 ml 162 ml 162 ml 621 ml

VRBA @15 ml 45 ml 45 ml 45 ml 45 ml 45 ml 225 ml