Persamaan Mihaelis Menten

dan efek konsentrasi substrat

Persamaan Michaelis Menten (MM)
digambarkan dalam sudut
matematik sebagai hubungan
antara kecepatan reaksi awal (vi)
dan konsentrasi substrat (S).
vi = Vmaks (S)/Km + (S)

Persamaan MM
Bila (S) jauh lebih kecil dari Km, Km + (S) akan
sama dengan Km. Karena V maks dan Km
selalu konstan, maka kecepatan reaksi awal vi
secara langsung paralel dengan (S).
Bila (S) jauh lebih besar dari Km , Km + (S) sama
dengan (S). Km+ (S) pada persamaan MM
ditukar dengan (S), maka persamaan MM
menjadi
vi = V maks.
Jadi bila (S) terlampau besar dari Km , kecepatan
reaksi maksimal dan tak terpengaruh dengan
penembahan substrat
Persamaan MM
Bila (S) = Km, vi = V maks (S)/ Km + (S)
vi = V maks (S)/ 2 (S)
vi = V maks
Bentuk linear Pers. MM untuk
menentukan V maks dan dan Km
Lineweaver-Burk memodifikasi pers. MM
dengan cara membalikan pers MM, yaitu
1/vi = Km + (S)/ V maks. (S).
Km/Vmaks (S) + (S)/V maks (S)
Km/Vmaks. 1/(S) + 1/ Vmaks
Bila 1/vi = Y, 1/S = X, Km/Vmaks =a dan
1/V maks = b
y = ax + b, adalah suatu
persamaan garis lurus.
Menentukan Km dan V maks
Bila y = o
ax = -b
x = -b/a = - 1/Km
1/S = -1/Km,
Bila x = o
y = 1/Vmaks
1/vi = 1/Vmaks,

Enzim dg 2 atau lebih substrat
Banyak enzim hanya mengkatalisis 1
substrat ( substrat tunggal)
Banyak pula enzim dg 2 atau lebih
substrat dan produk (multisubstrat)
Reksi pada multisubstrat sangat kompleks
Istilah Uni (1), Bi (2), Ter(3) dan Quad(4)
menyatakan jumlah reaktan dan produk..
Reaksi 2 substrat, 2 pruduk dikenal
sebagai Bi-Bi reaction
Mekanisme Bi-Bi reaction
Sequensial reaction. Kedua substrat
bergabung dg enzim membentuk satu
kompleks ternary sebelum terjadinya
katalisis.
Disebut juga reaksi perpindahan tunggal.
Disini gugus dipindahkan langsung dari
substrat donor ke substrat aseptor
Tergantung cara penambahan substrat
-Urutan acak (random)
-Urutan wajib (kompulsif),
Urutan acak
Substrat secara acak ditambahkan
shg tbtk E-A dan E-B
Urutan wajib
Hanya A yg dapat bereaksi dg E,
sedangkan B dengan kompleks E-A
Pengikatan akan menyebabkan
perubahan konformasi supaya bisa
mengikat B

Reaksi ping-pong
Istilah ini diterapkan pada mekanisme
reaksi enzimatik yang telah melepaskan 1
atau lebih produk sebelum semua substrat
ditambahkan.
Terdapat pada aktifitas enzim amino asil
transferase.Ala alfa KG


Pyr glutamat
Inhibisi enzim
Senyawa yang memblok kerja enzim adalah
suatu inhibitor., misalnya racun, toksin
Inhibitor dikenal sebagai inhibitor reversibel dan
inhibitor ireversibel
Inhibitor reversibel menghambat kerja enzim
untuk sementara, sedangkan yang ireversibel
akan menghambat kerja enzim dengan cara
menginaktifkan pusat aktif enzim.
Inhibisi reversibel
Ada 2 macam,
Inhibisi reversibel kompetitif, yaitu inhibitor
berkompetisi dengan substrat untuk berikatan dengan
enzim.
Untuk ini, struktur inhibitor identik dengan substrat dan
yang dikompetisikan adalah satu pusat aktif enzim.
Contoh:
Suksinat dehidrogenase, substratnya adalah
suksinat, sedangkan inhibitornya malonat
E + S ES
E + I EI
Inhibisi reversibel non kompetitif
Inhibitor tidak sama strukturnya dengan
substrat. Jadi baik substrat dan inhibitor
dapat berikatan bareng dengan enzim.
Pusat aktif enzim diassumsikan 2 , yaitu
satu untuk berikatan dg substrat dan satu
untuk inhibitor
E + S + I ESI
Inhibitor ireversibel
Bila inhibitor berikatan dengan enzim
maka enzim tidak akan berfungsi lagi.
Inhibitor yang ireversibel yaitu
golongan fosfat seperti terdapat pada
pestisida.
Pestisida akan menghambat aktifitas
asetilkolin esterase.
Proses suatu inhibisi
Bila suatu inhibitor ireversibel berikatan dengan
enzim, enzim tidak akan aktif, sehingga produk
tidak akan ada.
Inhibitor kompetitif , penambahan substrat akan
menanggalkan ikatan inhinitor- enzim, sehigga
Vmaks tidak akan berubah atau akan tetap.
Inhibitor non kompetitif, substrat dan inhibitor
sama-sama berikatan dengan substrat,
sehingga akan mengurangi aktifitas enzim. V
maks akan berkurang tetapi Km tetap
Inhibisi kompetitif dapat dibedakan
dg yang nonkompetitif.
Bila hasil sutu eksperimental
dianalisa menggunakan persamaan
Lineweaver- Burk, suatu inhibisi
kompetitif akan memperlihatkan V
maks yang tetap, sedangkan inhibisi
non kompetitif menghasilkan Km
yang tak berubah
Tentukanlah jenis inhibisi dari data
suatu eksperimen berikut
( S ) Produk tanpa I Produk dg I
mM uM/menit/mg uM/menit/mg
1. 3.0 2.29 x 10
3
1.83 x 10
3

2. 5.0 3.20 x 10
3
2.56 x 10
3
3. 7.0 3.86 x 10
3
3.09 x 10
3
4. 9.0 4.36 x 10
3
3.49 x 10
3
5. 11.0 4.75 x 10
3
3.80 x 10
3
Carilah nilai Km dan V maks. Apakah inhibitor
kompetitf atau nonkompetitif