Autoclaf

POSTED BY ANITAMUINA IN LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA ANALISIS INSTRUMENTASI

DASAR TEORI
Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yg digunakan
dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yg digunakan pada
umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121C (250 F). Jadi tekanan yg
bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi 2 (15Psi =15 pounds per
square inch).Lama sterilisasi yg dilakukan biasanya 15 menit utk 121C. Autoklaf biasanya
digunakan dalam bidang mikrobiologi, kedokteran, body piercing, kedokteran hewan,
kedokteran gigi, dan podiatry untuk mensterilisasi alat-alat dari gelas, sampah medis,
kandang hewan, dan media lisogenik. Terdapat tiga jenis autoklaf, yaitu gravity
displacement, prevacuum atau high vacuum, dan steam-flush pressure-pulse. Perbedaan
ketiga jenis autoklaf ini terletak pada bagaimana udara dihilangkan dari dalam autoklaf
selama proses sterilisasi. (Anonim, 2009)
Pada prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu secara mekanik, fisik dan
kimiawi.
1. Sterilisai secara mekanik (filtrasi)
Di dalam sterilisai secara mekanik (filtrasi), menggunakan suatu saringan yang berpori
sangat kecil (0.22 mikron atau 0.45 mikron) sehingga mikroba tertahan pada saringan
tersebut. Proses ini ditujukan untuk sterilisasi bahan yang peka panas, misal nya larutan
enzim dan antibioti
1. Sterilisasi secara fisik
Sterilisasi secara fisik dapat dilakukan dengan pemanasan & penyinaran.
1. Sterilisaisi secara kimiawi
Biasanya sterilisasi secara kimiawi menggunakan senyawa desinfektan antara lain alkohol.
Antiseptik kimia biasanya dipergunakan dan dibiarkan menguap seperti halnya alkohol.
Umumnya isopropil alkohol 70-90% adalah yang termurah namun merupakan antiseptik
yang sangat efisien dan efektif. Penambahan yodium pada alkohol akan meningkatkan daya
disinfeksinya. Dengan atau iodium, isopropil tidak efektif terhadap spora. Solusi terbaik
untuk membunuh spora adalah campuran formaldehid dengan alkohol, tetapi solusi ini
terlalu toksik untuk dipakai sebagai antiseptik.
Beberapa media atau bahan yang tidak disterilkan dengan autoklaf adalah :
1. Bahan tidak tahan panas seperti serum, vitamin, antibiotik, dan enzim.
2. Pelarut organik, seperti fenol.
3. Buffer engan kandungan detergen, seperti SDS. (Dayat, 2010)
HASIL DAN PEMBAHASAN
Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda
menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (1210C, 15 lbs) selama kurang lebih 15
menit. Penurunan tekanan pada autoklaf tidak dimaksudkan untuk membunuh
mikroorganisme, melainkan meningkatkan suhu dalam autoklaf. Suhu yang tinggi inilah
yang akan membunuh microorganisme. Perhitungan waktu sterilisasi autoklaf dimulai ketika
suhu di dalam autoklaf mencapai 121 CJika objek yang disterilisasi cukup tebal atau
banyak, transfer panas pada bagian dalam autoklaf akan melambat, sehingga terjadi
perpanjangan waktu pemanasan total untuk memastikan bahwa semua objek bersuhu 121
C untuk waktu 10-15 menit. Perpanjangan waktu juga dibutuhkan ketika cairan dalam
volume besar akan diautoklaf karena volume yang besar membutuhkan waktu yang lebih
lama untuk mencapai suhu sterilisasi.
Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua organisme yang teradapat
pada suatu benda. Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3 macam, yaitu penggunaan
panas (pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan bahan kimia (etilena oksida,
asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida alkalin).
Komponen-komponen autoklaf :
1. Tombol pengatur waktu mundur (timer)
2. Katup pengeluaran uap
3. pengukur tekanan
4. kelep pengaman
5. Tombol on-off
6. Termometer
7. Lempeng sumber panas
8. Aquades (dH2O)
9. Sekrup pengaman
10. batas penambahan air
Cara Penggunaan autoklaf yaitu :
1. Sebelum melakukan sterilisasi cek dahulu banyaknya air dalam autoklaf. Jika air kurang
dari batas yang ditentukan, maka dapat ditambah air sampai batas tersebut. Gunakan
air hasil destilasi, untuk menghindari terbentuknya kerak dan karat.
2. Masukkan peralatan dan bahan. Jika mensterilisasi botol beretutup ulir, maka tutup
harus dikendorkan.
3. Tutup autoklaf dengan rapat lalu kencangkan baut pengaman agar tidak ada uap yang
keluar dari bibir autoklaf. Klep pengaman jangan dikencangkan terlebih dahulu.
4. Nyalakan autoklaf, diatur timer dengan waktu minimal 15 menit pada suhu 121
o
C.
5. Tunggu sampai air mendidih sehingga uapnya memenuhi kompartemen autoklaf dan
terdesak keluar dari klep pengaman. Kemudian klep pengaman ditutup (dikencangkan)
dan tunggu sampai selesai. Penghitungan waktu 15 dimulai sejak tekanan mencapai 2
atm.
6. Jika alarm tanda selesai berbunyi, maka tunggu tekanan dalam kompartemen turun
hingga sama dengan tekanan udara di lingkungan (jarum pada preisure gauge
menunjuk ke angka nol). Kemudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan isi
autoklaf dengan hati-hati.
Prinsip cara kerja autoklaf yaitu :
Mensterilkan alat dan bahan dengan menggunakan tekanan uap optimum untuk sterilisasi
pada tekanan 15 Psi dan suhu 121C. Pada saat sumber panas dinyalakan, air dalam
autoklaf lama kelamaan akan mendidih dan uap air yang terbentuk mendesak udara yang
mengisi autoklaf. Setelah semua udara dalam autoklaf diganti dengan uap air, katup
uap/udara ditutup sehingga tekanan udara dalam autoklaf naik. Pada saat tercapai tekanan
dan suhu yang sesuai., maka proses sterilisasi dimulai dan timer mulai menghitung waktu
mundur. Setelah proses sterilisasi selesai, sumber panas dimatikan dan tekanan dibiarkan
turun perlahan hingga mencapai 0 psi. Autoklaf tidak boleh dibuka sebelum tekanan
mencapai 0 psi.
Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam menggunakan autoklaf, yaitu :
1. Semua udara yang masih terdapat di dalam autoklaf harus dikeluarkan terlebih dahulu
sebelum katup buangan ditutup agar di dapat tekanan 1 atm yang tepat.
2. Alat dan bahan yang akan disterilkan hendaknya jangan terlalu membebani autoklaf
secara berlebihan karena hal tersebut akan menimbulkan alat-alat dalam dandang
autoklaf tersebut bercampur dengan air sehingga tidak steril lagi.
3. Batas air pada autoklaf juga harus diperhatikan karena jika berlebihan akan masuk
merendam alat-alat yang akan disterilkan.
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2010. Autoklaf, http://id.wikipedia.org, 26 September 2010.
Anonim, 2009. Pengenalan Peralatan Laboratorium Biologi,http://belindch.wordpress.com,
26 September 2009.
Dayat, 2009. Metode Sterilisasi Mikrobiologi, http://ghalapunk.blogspot.com, 26 Septembr
2010.
Indra, 2009. Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi, http://rofix.wordpress.com, 26 September
2010.


Sumber:
http://anitamuina.wordpress.com/2013/02/11/autoclaf/