LOGO

SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

LKI UPI

UV-Vis

Spektrofotometri
Adalah :
Suatu teknik analisis yang melibatkan
interaksi radiasi elektromagnetik dengan
materi.

LKI UPI

UV-Vis

SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

PRINSIP DASAR

HUKUM DASAR

INSTRUMENTASI

ANALISIS KUANTITATIF

LKI UPI

UV-Vis

Daerah Spektra Elektromagnetik

10-180-350 nm

visible
LKI UPI

Klasifikasi metode spektrometri

Jenis radiasi

Rentang
pj. gelombang

Jenis transisi

Sinar gama

< 0.05

Inti

Sinar x

0.05 100

Elektronik (K dan L)

Ultra Violet

180-350 nm

Elektronik

Visible

350 770 nm

Elektronik

Infra Red

770-2500 nm
2.5 50 m
50 1000 m

Vibrasi molekul
Vibrasi molekul
Rotasi molekul

Gelombang radio

1 300 mm

Rotasi molekul

Gelombang mikro

> 300 mm

Spin elektron dan inti

Tingkat energi orbital

C ontoh senyawa yang melibatkan

tiga jenis elektron di dalam
molekul organik sederhana:

H
C O

xx

= orbital

X = orbital
= orbitan n

n
n

Jenis transisi elektron

Warna-warna Komplementer
Panjang
Gelombang
(nm)

Warna yang
diteruskan

Warna yang
terlihat
(komplemen)

400-435

ungu

hijaukekuningan

435-480

biru

kuning

480-490

biru-hijau

jingga

490-500

hijau biru

merah

500-560

hijau

ungu
kemerahan

560-580

hijau-kuning

ungu

580-595

kuning

biru

595-610

jingga

biru-kehijauan

610-750

merah

hijau-kebiruan

Prinsip Dasar :
Interaksi
energi
dengan
materi
Radiasi/sina
Suatu bentuk gelombang
r

Energi,

E h. h
d

Interaksi :
absorpsi (a), transmisi
(b)
refleksi ( c ) ,

difraksi

b
c

UV-Vis

Hk. Dasar Spektroskopi serapan

Po

Pt
Pr

b
Po = Pt + Pa + Pr

Materi bening, tembus cahaya, maka

Pr ~ 0, sehingga

Transmitansi, T
Pt/Po
Hk dasar spektroskopi
serapan:
(Bouger-Lambert-Beer

T=

Po = Pt + Pa

Dapat dinyatakan dalam %T

T = 0,2 , maka %T = 20

P
T
10 abc
Po
LKI UPI

UV-Vis

P
log T log
abc
Po
Po
log T log
a.b.c
P
Absorbansi, A = -log T, maka

A=a b c

Hk. LambertBeer
Jika C = mol/L, maka
A = . b.
c
adalah koef. Absorptivitas
molar
LKI UPI

UV-VIS

Apa artinya :
A = 0 atau A = 1 ?
%T = 0, atau %T = 50 atau %T =
100 ?

LKI UPI

UV-Vis

Instrumentasi UV-Vis
Spektrofotometer spectronic 20

Bagan alat :

LKI UPI

Instrumentasi Spek. UV-Vis

a. Sumber sinar:

Lampu wolfram/tungsten--- tampak

Lampu Deutrium/H --- UV

- +
Tabung kuarsa
H2
Tekanan rendah

Sinar UV yg dihasilkan: 180-200 nm

b.

Monokromator :

Alat untuk memilih pj gel dengan cara menguraikan sinar polikromatis menjadi
monokromatis
1
2
1
2
Celah
masuk

lensa
kolimator

prisma/

lensa

celah

kisi difraksi

fokus

keluar

Mengapa sinar harus monokromatis ???

mempertinggi kepekaan, karena
absorbans terukur maksimum
penyerapan sinar memenuhi hk L-B
lebih baik

c. Sel/Kuvet:
syarat :
tidak menyerap sinar yang digunakan
Diameter (b) = 1 cm
Volume : 5 mL/ 10 mL
UV: kuarsa
VIS: plastik, gelas/kaca biasa

Pengukuran sampel harus menggunakan blanko

Sel sampel harus matched dengan sel blanko

Bagaimana caranya matching kuvet ??

d. Detektor :
Prinsip:
menyerap energi sinar dan mengubahnya menjadi besaran
terukur
Contoh: menghitamkan pelat foto, arus listrik, termal,
dll

UV-vIS

Syarat detektor :
dapat menangkap/merespon energi sinar

peka dengan noise rendah

waktu respon pendek
stabil
dapat memperkuat isyarat listrik dengan mudah
Isyarat listrik yang dihasilkan berbanding lurus dengan intensitas sinar

Jenis detektor untuk UV-Vis :

Foto sel : Untuk Vis

VPT (Vacuum Photo Tube = Tabung foton hampa)
PMT (Photon Multifier Tube = Tabung penggandaan foton), dapat
mengukur isyarat dengan intensitas <<
LKI UPI

UV-Vis

Syarat Pelarut dalam Spektrofotometri

Dapat melarutkan cuplikan

Tidak menyerap sinar yang digunakan

Tidak bereaksi dengan cuplikan
Pelarut

Cut off

Pelarut

Cut off

Aseton
Benzen
CCl4

330 nm
285 nm
265 nm
375 nm
245 nm
215 nm
235 nm

Etanol
Etilester
Isooktan
Isopropanol
Metanol
Piridin
air

205 nm
205 nm
215 nm
215 nm
215 nm
305 nm
200 nm

Cs2
CHCl3
C6H12
CH2Cl2

LKI UPI

www.themegallery.com

Analisis kuantitatif
Natrium benzoat

Mengapa Na-benzoat dapat menyerap sinar UV ???

Company Logo

Analisis kuantitatif

A = . B . C

Dasar : Hukum Lambert-Beer

Cara kurva kalibrasi :
Membuat kurva kalibrasi (C vs A)

Ax
A

Cx

LOGO

LKI UPI