Nomor Dokumen

Tanggal Registrasi

Dibuat Oleh

Praktikan

METODE PEMERIKSAAN OBAT JADI

SALEP MATA BASITRASIN, POLYMIXIN,
DAN NEOMYSIN
Diperiksa Oleh

Asisten PJ

Koor. Gol

Disetujui Oleh

Koor. Asisten

Dosen

Nama
Tangg
al
Nomor Batch: _______________________
I.

Pemerian
Pemeriksaan pemerian salep dilakukan dengan metode sebagai berikut:
1. Ambilsatu tube salep mata
2. Keluarkan seluruh isi salep ke atas cawan petri yang telah dibersihkan
3. Amati pemerian salep mata
Paramater

Spesifikasi

Pemerian

Massa semi padat lembut

berwarna putih kekuningan
sampai kuning pucat, bau
khas

Hasil

II. Pemeriksan Partikel Asing dan Homogenitas Salep

Pemeriksaan homogenitas salep dilakukan dengan metode sebagai berikut:
1. Ambil satu tube salep mata
2. Keluarkan seluruh isi salep ke cawan petri yang telah dibersihkan
3. Amati dengan mikroskop
Paramater

Spesifikasi

Partikel Asing
&
Homogenitas

Jumlah total dari partikel

logam dalam 10 tube tidak
lebih dari 50 g atau tidak
lebih dari 1 tube ditemukan
mengandung 3 partikel yang
sama

Hasil

III. Pemeriksaan Kebocoran Tube

1. Ambil satu tube salep mata
2. Bersihkan dan keringkan baik-baik permukaan luar tiap tube dengan kain
penyerap
Halaman 1 dari 6

3. Letakkan tube pada posisi horizontal di atas lembaran kertas penyerap

dalam oven dengan suhu yang diatur pada 600 + 30C selama 8 jam
4. Amati keadaan tube (Tidak boleh terjadi kebocoran yang berarti selama
atau setelah pengujian selesai)
Paramater

Spesifikasi

Kebocoran
Tube

Tidak satupun kebocoran dari

10 tube uji pertama

Hasil

IV. Pemeriksaan Viskositas

1. Ambil tube salep mata
2. Keluarkan seluruh isi salep ke dalam gelas beaker
3. Amati viskositas salep dengan menggunakan alat viskometer
Paramater

Spesifikasi

Viskositas

85 cps

Hasil

V. Uji Sterilitas
1. Ambil 20 tube salep mata
2. Secara aseptic pindahkan 100 mg dari tiap wadah/tube kedalam labu
berisi 100 ml pembawa air steril yang dapat mendispersi homogeny
bahan uji dalam seluruh campuran cairan
3. Campur 10 ml alikot dari campuran cairan yang diperoleh dengan 80 ml
tiap media
4. Inkubasi dalam media tertentu seperti yang tertera pada prosedur umum
selama kurang lebih 14 hari
5. Amati pertumbuhan pada media secara visual sesering mungkin
sekurangnya pada hari ke-3 atau ke-4 atau ke-5, ke-7 dan ke-8 dan pada
hari terakhir dari massa uji
Paramater

Spesifikasi

Sterilitas

Steril

Hasil

VI. Identifikasi
Identifikasi Test Kromatografi Lapis Tipis
Larutan Uji

: Salep mengandung Bacitracin atau Bacitracin Seng,

ditransfer sebagian dari itu setara dengan sekitar 500 Unit
USP Bacitracin, pada tabung centrifuge 15 mL. Dimana
Salep mengandung neomycin, tetapi tidak Bacitracin atau
Bacitracin Seng, ditransfer sebagian dari itu setara dengan
sekitar 3,5 mg neomycin (base) per mL ke tabung
centrifuge 15 mL. Tambahkan 4 mL kloroform pada tabung
centrifuge, dan kocok dengan baik untuk mendispersikan
Halaman 2 dari 6

Salep. Tambahkan 1 mL asam klorida 0,1 N, vortex selama

4 menit, centrifuge, dan gunakan supernatan yang jernih.
Lar. Standar Bacitracin
:
Larutkan sebagian Bacitracin Seng RS USP
dengan asam klorida 0,1 N untuk mendapatkan larutan
yang mengandung 500 Unit USP Bacitracin per mL.
Lar. Standar Neomycin
: Larutkan sebagian Neomycin Sulfat RS USP dengan
asam klorida 0,1 N untuk mendapatkan larutan yang
mengandung setara dengan 3,5 mg neomycin (base) per
mL.
Lar. Standar Polymyxin : Larutkan sebagian Polymyxin B Sulfat RS USP dengan
asam klorida 0,1 N untuk mendapatkan larutan yang
mengandung 10.000 Unit USP Polymyxin B per mL. Dimana
artikel yang diuji juga mengandung Bacitracin atau
Bacitracin Seng, melarutkan sebagian USP Polymyxin B
Sulfat RS di 0,1 N asam klorida untuk mendapatkan larutan
yang mengandung Unit 500J USP Polymyxin B per mL, J
menjadi rasio jumlah berlabel USP Polymyxin Unit B dengan
jumlah berlabel USP Bacitracin Unit di setiap g Cream,
Lotion, atau Salep.
Larutan Pengembang
:
Pelarut disiapkan dengan campuran metanol,
isopropil alkohol, metilen klorida, amonium hidroksida, dan
air (4: 2: 2: 2: 1,5).
Prosedur
: Totolkan 10 uL Larutan Uji dan masing-masing Larutan
Standar yang relevan dengan lempeng kromatografi lapis
tipis yang cocok dilapisi dengan lapisan 0,25 mm silika gel
kromatografi. Tempatkan lempeng di ruang kromatografi
yang telah dijenuhkan, dan kromatogram dielusi dengan
Sistem Pelarut Pengembang sampai pelarut telah bergerak
sekitar tiga-perempat dari panjang lempeng. Angkat
lempeng dari ruang kromatografi, dan keringkan pada suhu
105oC selama 10 menit. Semprot lempeng dengan larutan
0,2% dari ninhidrin dalam butil alkohol, dan panaskan pada
105oC selama 5 menit. Nilai RF dari setiap tempat utama
dalam kromatogram Larutan Uji sesuai dengan yang ada
pada tempat utama dalam kromatogram yang diperoleh
dari masing-masing Larutan Standar yang relevan dengan
label bahan aktif atau bahan yang tercantum pada label.
Paramater

Spesifikasi

Hasil

Positif Bacitracin Zinc

Identifikasi

Positif Neomycin Sulfate

Positif Polymixin B Sulfate

VII.

Penetapan Kadar

Prosedur

: Antibiotic-Microbial Assay <81>

Halaman 3 dari 6

Neomycin
Larutan sampel : Digunakan sebagian Salep mata dan kocok dengan sekitar 50
mL eter dalam pemisah dan diekstraksi dengan empat bagian
dari 20-mL Buffer No 3. Gabungkan ekstrak air, dan encerkan
dengan Buffer Nomor 3 sampai volume tepat untuk
mendapatkan larutan stok. Encerkan larutan stok ini secara
kuantitatif dan bertahap dengan Buffer Nomor 3 untuk
mendapatkan pengenceran Sampel yang memiliki konsentrasi
yang diasumsikan sama dengan tingkat dosis median dari
Standard.
Polymixin B
Larutan sampel : Digunakan sebagian Salep mata dan kocok dengan sekitar 50
mL eter dalam pemisah dan diekstraksi dengan empat bagian
dari 20-mL Buffer Nomor 6. Gabungkan ekstrak air, dan
encerkan dengan Buffer Nomor 6 sampai volume yang tepat
untuk mendapatkan stock larutan. Encerkan larutan stok ini
secara kuantitatif dan bertahap dengan Buffer Nomor 6 untuk
mendapatkan pengenceran Sampel yang memiliki konsentrasi
yang diasumsikan sama dengan tingkat dosis median dari
Standard (10 unit polimiksin B / mL). Tambahkan ke masingmasing pengenceran sampel Standard, neomycin Standard
kuantitas, dilarutkan dalam Buffer Nomor 6, untuk
mendapatkan konsentrasi neomisin yang sama dalam
Pengenceran sampel.
Bacitracin
Larutan sampel : Digunakan sebagian Salep mata dan kocok dengan sekitar 50
mL eter dalam pemisah dan diekstraksi dengan empat bagian
dari 20-mL Buffer Nomor 1. Gabungkan ekstrak air, dan
encerkan dengan Buffer Nomor 1 sampai volume yang tepat
untuk mendapatkan stock larutan. Tambah 0,01 asam klorida N
secukupnya ke sebagian larutan stok sehingga jumlah asam
klorida dalam Pengenceran sampel akan sama seperti pada
tingkat dosis median dari Standard, dan encerkan secara
kuantitatif dengan pengenceran sampel yang memiliki
konsentrasi bacitracin yang diasumsikan sama dengan tingkat
dosis median dari Standard.
Analisis
: Antibiotic-Microbial Assay <81>

VIII.

Paramater

Spesifikasi

Kadar

90,0% - 140,0%

Hasil

Bobot Terpindahkan

Untuk wadah yang diberi label menurut beratnya, dipilih sampel 10 wadah
yang dipenuh, dan dilepas setiap etiket yang mungkin dapat mempengaruhi
berat selama pemindahan isi wadah. Bersihkan dan keringkan bagian luar wadah
dengan baik menggunakan sarana yang cocok, dan diperoleh berat secara
individual. Pindahkan isi dari masing-masing wadah secara kuantitatif, potong
Halaman 4 dari 6

menjadi bagian belakang yang terbuka dan cuci dengan pelarut yang sesuai, jika
perlu, berhati-hati untuk mempertahankan penutupan dan bagian lain dari setiap
wadah. Keringkan, dan timbang kembali setiap wadah kosong bersama-sama
dengan bagian-bagian yang sesuai. Perbedaan antara dua bobot adalah berat
bersih isi wadah. Rata-rata isi bersih dari 10 kontainer tidak kurang dari jumlah
pada etiket, dan isi bersih dari wadah tunggal tidak kurang dari 90% dari jumlah
pada etiket dimana jumlah pada etiket adalah 60 g atau kurang, atau tidak
kurang dari 95% dari jumlah pada etiket dimana jumlah pada etiket lebih dari 60
g tetapi tidak lebih dari 150 g. Jika persyaratan ini tidak dipenuhi, uji terhadap 20
wadah tambahan. Rata-rata isi 30 wadah tidak kurang dari jumlah pada etiket,
dan isi bersih tidak lebih dari 1 dari 30 wadah tidak kurang dari 90% dari jumlah
pada etiket dimana jumlah pada etiket adalah 60 g atau kurang, atau kurang dari
95% dari jumlah pada etiket dimana jumlah pada etiket lebih dari 60 g tetapi
tidak lebih dari 150 g.

Paramater

Spesifikasi

Bobot

Rata-rata isi bersih dari 10

kontainer tidak kurang dari
jumlah pada etiket, dan isi
bersih dari wadah tunggal
tidak kurang dari 90% dari
jumlah pada etiket (bobot
etiket 60 g atau kurang),
atau tidak kurang dari 95%
dari jumlah pada etiket
(bobot etiket lebih dari 60 g)
tetapi tidak lebih dari 150 g.
Rata-rata isi 30 wadah tidak
kurang dari jumlah pada
etiket, dan isi bersih tidak
lebih dari 1 dari 30 wadah
tidak kurang dari 90% dari
jumlah pada etiket (bobot
etiket 60 g atau kurang),
atau kurang dari 95% dari
jumlah pada etiket (bobot
etiket lebih dari 60 g) tetapi
tidak lebih dari 150 g.

Hasil

Halaman 5 dari 6

Dilakukan Oleh

Diperiksa Oleh

Disetujui Oleh

_________________

_________________
Asisten PJ/
Koordinator Golongan

_________________
Koordinator Asisten/
Dosen

Praktikan

Halaman 6 dari 6