Enzim
Molekul protein yang dihasilkan sel hidup katalis reaksi
biokimia spesifik & selektif
Secara molekuler:
merupakan protein yang tersusun atas serangkaian
asam amino dalam komposisi dan sekuens yang
teratur dan tetap konformasi 3 dimensi
Sisi aktif = bagian permukaan enzim yang berupa
rangkaian asam amino gugus fungsionalnya
berinteraksi dengan substrat
Enzyme Structure
Enzymes are globular proteins. Their folded conformation
creates an area known as the active site. The nature and
arrangement of amino acids in the active site make it
specific for only one type of substrate.
http://science.howstuffworks.com/environmental/life/cellular-microscopic/cell2.htm
Reaksi Enzimatis
Aktivitas Enzim
Aktivitas enzim dinyatakan sebagai unit
Definisi:
ukuran kemurnian
pH optimum
Laju reaksi
Laju. reaksi
Laju maksimum
Laju maksimum
suhu optimum
pH
suhu
Pembentu
kan
Produk
Laju maksimum
Vm
b. Pengaruh suhu
Km
[substrat]
Vm: Laju Reaksi maksimum
Km: konstanta Michaelis
c. Pengaruh [substrat]
Enzim1 aktivator
enzim
Waktu
d. Pengaruh aktivator
Pembentu
kan
Produk
Laju. reaksi
a. Pengaruh pH
enzim
Enzim1 inhibitor
Waktu
d. Pengaruh inhibitor
Pengaruh Substrat
E+S
K1
K--1
ES
Vmaks S
V
K m S
K2
E+P
Persamaan Michaelis-Menten
[S]
Line Weaver-Burk 1 K m . 1
V maks
a
1
V
1
1
V maks
b
Km
Slope
Vmaks
Vmaks
1
Km
1
S
1. Oksidoreduktase:
mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi
- Bekerja pada gugus tertentu dari substrat (misal: gugus
CH-OH, gugus aldehida, gugus alkana CH-CH, gugus
amina CH-NH2, gugus sulfur dll)
- Contoh Oksidoreduktase:
* etanol dehidrogenase mengkatalisis reaksi oksidasi
etanol menjadi asetaldehida dgn bantuan kofaktor NAD
Contoh Oksidoreduktase:
* glukosa oksidase memindahkan sepasang elektron dari
substrat -D-glukosa ke oksigen glukono--lakton +
H2O2
(Konversi glukosa menjadi glukono lakton dapat
dilakukan secara enzimatik atau fermentasi oleh mikroba
tertentu)
2. Transferase
Mengkatalisis reaksi pemindahan (transfer) gugus
fungsional (gugus metil, amino, asil, fosfat, glikosil dll)
Contoh :
* Aminotransferase (pemindahan gugus amino):
Asam glutamat + asam oksaloasetat asam -keto
glutarat + asam aspartat
Fruktosa 1,6-difosfat
ATP
ADP
3. Hidrolase
Mengkatalisis pemecahan (hidrolisis) ikatan
C-O, C-N, O-P dan C-S
Contoh :
molekul polimer pati, selulosa, pektin, protein, lipida
dll menjadi molekul lebih sederhana (penting
pada industri !) . Contoh: protease, lipase, esterase,
glikosidase dll.
- Bekerja pada ikatan peptida, ikatan glikosidik, ikatan
ester, ikatan eter, ikatan hidrogen-fosfat dll
- Spesifitas beragam, dari terbatas (contoh tripsin
memecah ikatan peptida pada sisi karboksil lisin &
arginin) sd luas (selulase memecah ikatan
glikosidik -1,4 secara acak)
4. Liase
Mengkatalisis reaksi pemindahan gugus H2O,
amonia atau CO2 dari substrat
Contoh: aldolase, dekarboksilase, dehidratase
pektinase
Histidin dekarboksilase:
(memindahkan gugus CO2 dari histidin yang
penting pada metabolisme asam amino)
Histidin
Histamin + CO2
5. Isomerase
Mengkatalisis reaksi isomerasi bentuk cis-trans, ketoenol, aldosa-ketosa dll (rasemase, epimerase,
isomerase cis-trans, dll)
- Contoh:
* Rasemase (perubahan bentuk D menjadi L)
Asam D-laktat Asam L-laktat
OH
HOH2C
H
HO
OH
OH
HO
H
H
OH
CH2OH
H
HO
D - Glukosa
HO
H
D - Fruktosa
CH2OH
H
H
H
HO
H
HO
OH
OH
OH
H
D - Xilosa
OH
HO
D - Xilulosa
6. Ligase
mengkatalisis reaksi sintesis dgn penggabungan
dua mol substrat dgn bantuan ATP = Sintetase
(dengan membentuk ikatan C-O, C-S, C-N, C-C dll)
- Contoh :
Amino asil tRNA sintetase, glutamin sintetase, piruvat
karboksilase dll
Glutamat + NH3 + ATP Glutamin + ADP + Pi
glutamin sintetase
-Amilase (1,4--glukan-glukanohidrolase)
Enzim -amilase terdistribusi secara luas di alam, terdapat pada
hewan, tumbuhan dan mikroba.
Menghidrolisis pati secara acak melalui bagian dalam (endo-hydrolase/
endoenzim) dgn memutus ikatan -(1,4) glikosidik pada amilosa,
amilopektin dan glikogen
Enzim -amilase umumnya diisolasi dari Bacillus amyloliquefaciens,
B. licheniformis, Aspergillus oryzae dan A. niger
pH optimum untuk enzim ini sekitar 6 dengan suhu optimum 60 oC
Enzim -amilase yang dibuat oleh Novo Industri A/S antara lain
adalah Termamyl yang memiliki ketahanan terhadap suhu sekitar
95 110oC
Dosis enzim yang digunakan sekitar 0,5 0,6 kg/ton pati atau
1500 U/kg substrat kering (baca brosur/label kemasan)
amilosa
amilopektin
-Amilase
merupakan eksoenzim yang melepaskan maltosa dari
ujung non pereduksi suatu polisakarida, dengan cara
menghidrolisis ikatan 1,4 glikosidik
Digunakan untuk membuat sirup maltosa
Dextranase
Menghidrolisis dekstran (meyebabkan cairan kental)
pada ikatan 1.6 glikosidik menjadi oligosakarida lebih
sederhana digunakan pada penggilingan tebu untuk
pembuatan gula pasir
Selulase
-Merupakan kompleks enzim yg terdiri dari beberapa enzim
yg bekerja secara bertahap atau bersama-sama menguraikan
selulosa menjadi glukosa
Endo--1,4glukanase
-1,4- glukanase
Ekso--1,4glukanase
Selulase
-1,4- glukan
selobiohidrolase
-1,4- glukan
glukohidrolase
-1,4- glukosidase
Selulosa:
berasosiasi dg lignin & hemiselulosa = holoselulosa/
lignoselulosa
Homopolimer glukosa dengan ikatan -1,4 glikosidik
-1,4- glukanase :
Menghidrolisis ikatan -1,4 glikosidik secara acak terutama pada
daerah amorf serat selulosa
Tidak menyerang selobiosa, tapi menghidrolisis selodekstrin dan
selulosa yg telah dilunakkan dgn asam fosfat & selulosa yg telah
disubstitusi (e.g CMC)
-1,4- glukosidase:
Menghidrolisis selobiosa dan selo-oligosakarida glukosa
(tidak menyerang selulosa/selodekstrin)
Cx
Selulosa reaktif
Cl
Selobiosa
Glukosa
Lactase
Lactase is a glycoside hydrolase enzyme that cuts lactose into
it's constituent sugars galactose and glucose.
Without sufficient production of lactase enzyme in the small
intestine, humans become lactose intolerant, resulting in
discomfort (cramps, gas and diarrhea) in the digestive tract
upon ingestion of milk products.
Lactase is used commercially to prepare lactose-free
products, particularly milk, for such individuals. It is also used
in preparation of ice cream, to make a creamier and sweetertasting product.
Lactase is usually prepared from Kluyveromyces sp. of yeast
and Aspergillus sp. of fungi.
Protease
Memutus protein dg cara menghidrolisis ikatan peptida
Aplikasi terutama pada industri deterjen dan keju (rennin)
Penggunaan lain: industri farmasi, industri kulit, pembuatan
protein hidrolisat, industri makanan, industri film dan
penanganan limbah
Mikroba penghasil protease:
Protease alkali:
- Stabil terhadap suhu tinggi, pH 9-11, chelating agent
- Mikroba penghasil: Bacillus licheniformis, B. amyloliquefaciens,
B.megaterium, B.pumilus - Streptococcus griceus, S. fradiae,
S.rectus - Aspergillus niger, A. sojae, A.oryzae, A. flavus
Protease Netral
- Relatif tidak stabil thd pH, suhu & dpt diinaktivasi oleh
protease alkali
- Aplikasi: industri kulit & industri makanan (crackers, roti dll)
Protease Asam
- Aktif pada suasana asam, contoh: rennin & pepsin
(pH opt 2-3)
- Aplikasi:- Protease dari Aspergillus untuk memecah
gluten pada pemanggangan
Rennin
- Menggumpalkan kasein susu pada pembuatan keju
- Mikroba penghasil: S. lactis, S. cremoris, S. thermophilus,
Lactobacillus bulgaricus, L. helveticus
APLIKASI ENZIM
Suspensi pati
Gelatinasi
Pati
(95-105 0C)
-Amilase bakteri
(pH 6.0-6.6, 105oC, 5 mnt atau 95oC 1-2 jam
Maltodekstrin
Sakarifikasi
Glukoamilase atau
Sakarifikasi
Glukoamilase+
Pululanase
pH 4.0-4.5, 60oC,
48-72 jam
Sirup Glukosa
Sakarifikasi
-Amilase kapang
+ glukoamilase
pH 5.0, 55oC, 42
jam
Sirup Glukosa
Sirup Maltosa
Glukosa isomerase
pH 7.5-8.5, 60-65oC, 2-4 jam
Sirup Fruktosa
Pemurnian
Sirup Fruktosa
Berkadar tinggi
Industrial Uses
1. Starch conversions
Production of glucose syrup
Production of high fructose corn syrup
Production of high maltose conversion syrups
Production of cyclodextrins
Production of ethanol
2. Lignocellulosic Biomass conversions
Cellulose conversion
Hemicellulose conversion
Lignin conversion
Industrial Uses
3. Enzymes in the Production of Functional Oligosaccharides
and Other Neutraceuticals
4. Enzymes in the Modification of Fats and Oils
5. Enzymes in the Animal Feed Industry
6. Enzymes in the Pulp and Paper Industry
7. Enzymes in the Fruit Juice Processing Industry
8. Enzymes in the Meat and Fish Processing Industry
9. Enzymes in the Dairy Industry
10.Enzymes in Detergents
11. Enzymes in the Leather Industry
12.Enzymes in the Production of Bulk and Fine Chemicals
13.Analytical Applications of Enzymes
14.Enzyme-Replacement Therapy
* Aplikasi Oksidoreduktase
Enzim
Sumber
Konversi yg dikatalisis
Manfaat
Katalase
A. niger,
Micrococcus
lysodeikticus
dan
bovine liver
2 H2O2 2 H2O + O2
Glukosa
Oksidase
A. niger
Glukosa + O2
Glukono--lakton + H2O2
Lipoksigenase
Tepung kedelai
Linoleat + O2 LOOH
http://www.indogulfgroup.com/AE%20-%20Enzymes%20-%20Glucose%20Oxidase.asp
http://www.jungbunzlauer.com/media/uploads/pdf/Gluconates/Glucono-delta-Lactone_2008.pdf
http://www.gmo-compass.org/eng/database/e-numbers/294.glucono_delta_lactone.html
Karbohidrase
Enzim
Sumber
Manfaat
-amilase
Barley malt,
fungi, bakteri
-amilase
Wheat, barley,
malt, bakteri
(bacillus)
-glukanase
A. niger,
B. subtilis,
barley malt
pati-D-glukan + H2O
oligosakarida, glukosa
(ikatan -1,3 dan -1,4)
Degumming pada
industri minuman
beralkohol
Glukoamilase
(amiloglukosidase, AMG)
A. niger,
A. oryzae,
R. oryzae
Sakarifikasi pati
terlikuifikasi
Debranching
enzymes
(pullulanase,
isoamylase)
A. aerogenes,
Pseudomonas
Oligosakarida (amilosa
rantai pendek)
Inulinase
Kluyvero-myces
HFS
HFS
Isomerase
Selulase
A. niger, T. viride
Hemiselulase
A. niger
Invertase (sukrosa
hidrolase)
Saccharomyces
Laktase
(- galaktosidase)
A. niger,
A. oryzae
Laktosa + H2O
galaktosa + glukosa
Pektinase, terdiri
poligalakturonase,
pektin metil
esterase, pektat liase
A. niger, A.
oryzae
*Poligalakturona-se
menghidrolisis -D-1,4
galakturonida
*Pektin metilesterase
menghilangkan gugus
metil pada pektin
http://www.tastydays.com/drinks/juice/apple-juice
Enzyme Function
Cellulase
Hemicellulase
Xylanase
Sumber
Manfaat
-Mengempukkan daging,
-Meningkatkan ekstraksi minyak
dan protein dari tanaman dan
hewan,
-Pembuatan hidrolisat protein
-Pengolahan protein ikan
Bromelin
Nanas
Ficin
Ficus sp.
Papain
Pepaya
Protease
Aspergillus
Bacillus
-Meningkatkan warna
dan flavor roti,
-Mengempukkan daging
-Meningkatkan dispersitas susu
bubuk & meningkatkan stabilitas
susu evaporasi
Pepsin
Porcine,
Perut
hewan
Tripsin
Pankreas
hewan
Rennet
Perut hewan
ruminansia;
Mucor miehei, M.
Pusilus, Endothia
parasitica
Enzymes as Detergent
Enzymes have also been used in the detergent industry since
the mid 1960s and are probably the best-known application of
industrial enzymes especially in laundry products- the so-called
biological washing powders, liquids and tablets.
The main enzyme used : protease - group of hydrolases acting
on peptide bonds, belongs to EC 3.4 group.
Used for removing of protein contamination acts on organic
stains such as grass, blood, egg and human sweat.
http ://enzymes.me.uk
Formulasi :
enkapsulasi agar debu tak beterbangan, partikel larut
cepat, tak menghasilkan bau & warna, daya simpan lebih
baik, melindungi thd komponen lain e.g bleaching agent
Industri Keju
Rennet
Milk contains proteins, specifically caseins, that maintain its
liquid form.
Proteases are enzymes that are added to milk during cheese
production, to hydrolyze caseins, specifically kappa casein, which
stabilizes micelle formation preventing coagulation.
The most common enzyme isolated from rennet is chymosin.,
which can be obtained from several other animal, microbial or
vegetable sources, but indigenous microbial chymosin (from
fungi or bacteria) is ineffective for making cheddar and other
hard cheeses.
http://enzymes.me.uk/enzyme/enzymes-in-industry
Produksi Keju
Lipases
Lipases are used to break down milk fats and give characteristic
flavours to cheeses.
Stronger flavoured cheeses, for example, the italian cheese,
Romano, are prepared using lipases.
The flavour comes from the free fatty acids produced when milk
fats are hydrolyzed.
Animal lipases are obtained from kid, calf and lamb, while
microbial lipase is derived by fermentation with the fungal species
Mucor meihei.
Although microbial lipases are available for cheese-making, they
are less specific in what fats they hydrolyze, while the animal
enzymes are more partial to short and medium-length fats.
Hydrolysis of the shorter fats is preferred because it results in the
desirable taste of many cheeses. Hydrolysis of the longer chain
fatty acids can result in either soapiness, or no flavour at all.
* Lipase
Enzim
Sumber
Lipase
Jaringan
pankreas
hewan,
A. Niger,
A. oryzae
Manfaat
This oil contains good Omega 3 polyunsaturated fats, particularly DHA, the
most important of the Omega 3 fats, and EPA, also important.
http://www.ias.ac.in/currsci/jul10/articles18.htm
http ://enzymes.me.uk
Therapeutic Enzymes
Daftar Pustaka
Kiwi6.com, 2011, Mata Kuliah Satuan Proses, Departemen Teknologi