ENZIM
Proses Konversi Pada Bahan Yang
Memanfaatkan Enzim Sebagai
Katalis
Enzim
---- Review
Aktivitas Enzim
Aktivitas enzim dinyatakan sebagai unit
Definisi:
ukuran kemurnian
Setiap akan digunakan harus dianalisis aktivitasnya
untuk menentukan dosis pemakaian
Laju. reaksi
Laju maksimum
pH optimum
Laju reaksi
Laju maksimum
suhu optimum
pH
suhu
Vm
2
Laju maksimum
Pembentu
kan
Produk
Vm
b. Pengaruh suhu
Km
[substrat]
Vm: Laju Reaksi maksimum
Km: konstanta Michaelis
c. Pengaruh [substrat]
Enzim1 aktivator
enzim
Waktu
d. Pengaruh aktivator
Pembentu
kan
Produk
Laju. reaksi
a. Pengaruh pH
enzim
Enzim1 inhibitor
Waktu
d. Pengaruh inhibitor
Pengaruh Substrat
E+S
K1
K--1
ES
Vmaks S
V
Km S
K2
E+P
Persamaan Michaelis-Menten
[S]
Line Weaver-Burk 1 K m . 1
Y = aX + b
Vmaks
1
V
1
Vmaks
b
Slope
1
Km
Vmaks
Vmaks
1
Km
1
S
Source:
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/B
iologyPages/E/EnzymeKinetics.html
Km
Km merupakan tetapan untuk enzim tertentu,
nilanyanya tidak tergantung konsentrasi substrat
atau konsentrasi enzim
Km = konsentrasi substrat [S] yang memberikan
0.5 Vmax.
Semakin besar nilai Km, berarti semakin besar
konsentrasi substrat yang dibutuhkan untuk
mencapai Vmaks
= semakin rendah afinitas enzim terhadap
substrat
Km
: pengikatan lemah
Km
: pengikatan kuat
1. Oksidoreduktase :
mengkatalisis reaksi oksidasi-reduksi
(reaksi pengikatan oksigen atau pelepasan hidrogen)
- Bekerja pada gugus tertentu dari substrat (e.g gugus
alkohol, gugus aldehida, gugus alkana, gugus amina,
gugus sulfur dll)
- Contoh Oksidoreduktase:
*alkohol dehidrogenase mengkatalisis reaksi oksidasi
reversibel etanol menjadi asetaldehida dgn kofaktor
NAD+ sebagai akseptor elektron (hidrogen)
Contoh Oksidoreduktase :
* glukosa oksidase mengkatalis -D-glukosa menjadi
glukono--lakton + H2O2 dengan menggunakan
molekul oksigen sebagai akseptor elektron
2. Transferase
mengkatalisis reaksi pemindahan (transfer) gugus
fungsional (gugus metil, amino, asil, fosfat, glikosil dll)
Contoh :
* Aminotransferase (=Transaminase, pemindahan gugus
amino dari suatu asam amino ke asam amino baru)
penting pada metabolisme protein/asam amino.
Contoh : Asam glutamat + asam oksaloasetat asam
-keto glutarat + asam aspartat.
transaminase
Fruktosa 1,6-difosfat
ATP
ADP
(Glikolisis)
3. Hidrolase
mengkatalisis pemecahan (hidrolisis) ikatan :
C-O, C-N, O-P dan C-S dg memerlukan air, contoh :
amilase, amiloglukosidase, protease, lipase, selulase,
esterase dll.
- Bekerja pada ikatan peptida, ikatan glikosidik, ikatan
ester, ikatan eter, ikatan hidrogen-fosfat dll
- Molekul polimer pati, selulosa, pektin, protein, lipida dll
dihidrolisis menjadi molekul lebih sederhana
enzim penting pada industri !.
- Spesifitas beragam, dari :
terbatas , contoh enzim tripsin : memecah ikatan
peptida pada sisi karboksil lisin & arginin
luas, contoh selulase (CMC-ase) : memecah ikatan 1,4 glikosidik pada selulosa secara acak
4. Liase
mengkatalisis reaksi penambahan/ pemindahan
gugus H2O, amonia atau CO2 dari substrat
Contoh : aldolase, dekarboksilase, dehidratase
pektinase
Histidin dekarboksilase : yang penting pada
metabolisme asam amino, memindahkan gugus
CO2 dari histidin histamin (racun pd produk hsl
laut) + CO2
5. Isomerase
Isomer mempunyai formula molekul yang sama,
namun berbeda formula strukturnya. Perbedaan ini
mengubah sifat kimia molekul.
Isomerase mengkatalisis reaksi isomerasi bentuk
cis-trans, keto-enol, aldosa-ketosa dll (enzim rasemase,
epimerase, isomerase cis-trans, dll)
Contoh :
* Rasemase (perubahan bentuk D menjadi L)
- Asam D-laktat
- D-alanin
Asam L-laktat
L-alanin
HOH2C
O
H
HO
OH
HO
CH2OH
D - Fruktosa
H
H
H
H
D - Xilosa
OH
CH2OH
O
H
H
HO
HO
D - Glukosa
HO
OH
OH
HO
H
OH
OH
H
OH
OH
HO
D - Xilulosa
6. Ligase
mengkatalisis reaksi sintesis dgn penggabungan
dua mol substrat dgn bantuan ATP = Sintetase
(dengan membentuk ikatan C-O, C-S, C-N, C-C dll)
- Contoh :
DNA ligase (pembentukan DNA Rekombinan), amino
asil tRNA sintetase (pada translasi protein), glutamin
sintetase (pada metabolisme asam amino) dll
Glutamat + NH4+ + ATP Glutamin + ADP + Pi
glutamin sintetase
-Amilase (1,4--glukan-glukanohidrolase)
Enzim -amilase terdistribusi secara luas di alam, terdapat pada
hewan, tumbuhan dan mikroba. Enzim -amilase umumnya
diisolasi dari Bacillus amyloliquefaciens, B. licheniformis, Aspergillus
oryzae dan A. niger
Menghidrolisis pati secara acak melalui bagian dalam (endohydrolase/ endoenzim) dgn memutus ikatan -(1,4) glikosidik pada
amilosa, amilopektin dan glikogen
pH optimum untuk enzim ini sekitar 6 dengan suhu optimum 60 oC
Kebanyakan -amilase merupakan metaloenzim yang membutuhkan
ion kalsium (Ca2+) untuk aktivitas, integritas, dan stabilitas strukturnya
Enzim -amilase yang dibuat oleh Novo Industri A/S antara lain
adalah Termamyl yang memiliki ketahanan terhadap suhu sekitar
95 110oC
Dosis enzim yang digunakan sekitar 1500 U/kg substrat kering (baca
brosur/label kemasan)
amilosa
amilopektin
-Amilase
Merupakan eksoenzim yang melepaskan maltosa dari
ujung non pereduksi suatu polisakarida, dengan cara
menghidrolisis ikatan -1,4 glikosidik
Ditemukan pada tanaman tingkat tinggi dan mikroba
Digunakan untuk membuat sirup maltosa
Dextranase
Menghidrolisis dekstran yg terbentuk dari sukrosa oleh
mikroba e.g Leuconostoc pada ikatan -1,6 glikosidik
menjadi oligosakarida lebih sederhana
Dekstran menyebabkan viskositas nira meningkat
sehingga mengurangi efisensi dan kualitas gula pada
industri gula pasir
Cellulase
In nature, complete cellulose hydrolysis is mediated by a
combination of three main types of cellulases :
(1). Endoglucanases /CMCase /Cx : randomly cut -1,4bonds of cellulose chains in amorf area, generating new
ends reactive cellulose
(2). Exoglucanases, including cellobiohydrolases (Cl) :
act on the reducing or nonreducing ends of
cellulose polysaccharide chains, liberating either cellobiose
or glucose as major products. Exoglucanases can
effectively work on microcrystalline cellulose
(3). -glucosidase (C) : hydrolyze soluble cellodextrins
and cellobiose to glucose
Cx
Selulosa reaktif
Cl
Selobiosa
Glukosa
Aplikasi Selulase :
Industri sakarifikasi bahan berselulosa produk lain
Deterjen
Industri makanan,
Pengolahan limbah pabrik kertas
Lactase
Lactase is a glycoside hydrolase enzyme that cuts
lactose into it's constituent sugars galactose and
glucose.
Application :
- Used commercially to prepare lactose-free products,
particularly milk (LLM), for lactose intolerant individuals.
- Preparation of ice cream, to make a creamier and
sweeter-tasting product.
Produced from Kluyveromyces sp. and Aspergillus sp.
Protease
Memutus protein dg cara menghidrolisis ikatan peptida
Aplikasi :
- Industri deterjen dan keju (rennin)
- Industri farmasi, industri kulit, pembuatan protein
hidrolisat, industri makanan, industri film dan penanganan
limbah
Jenis Protese :
Protease alkali :
- Stabil terhadap suhu tinggi, pH 9-11 & chelating agent
digunakan untuk deterjen
- Mikroba penghasil : - Bacillus sp. (B. licheniformis,
B.megaterium, - Streptococcus griceus, S. fradiae, S.rectus Aspergillus niger, A.oryzae, A. flavus
Protease Netral :
- Relatif tidak stabil thd pH, suhu & dpt diinaktivasi oleh
protease alkali
- Aplikasi : industri kulit & industri makanan (crackers, roti
dll)
Protease Asam
-Aktif pada suasana asam, contoh : rennin & pepsin
(pH opt 2-3)
Aplikasi :
-Protease dari Aspergillus untuk memecah gluten pada
pemanggangan roti
- Rennin
- Menggumpalkan kasein susu pada pembuatan keju
- Mikroba penghasil : S. lactis, S. cremoris, S. thermophilus,
Lactobacillus bulgaricus, L. helveticus
APLIKASI ENZIM
Suspensi
pati
Gelatinasi
Pati
(95-105 0C)
-Amilase bakteri
(pH 6.0-6.6, 105oC, 5 mnt atau 95oC 1-2 jam
Maltodekstrin
Sakarifikasi
-Amilase
kapang
Sakarifikasi
+
glukoamilase
Glukoamilase atau
Sakarifikasi
pH 5.0, 55oC, 42
Glukoamilase+
jam
Pululanase
o
pH 4.0-4.5, 60 C,
48-72 jam
Sirup Glukosa
Sirup Glukosa
Glukosa isomerase
pH 7.5-8.5, 60-65oC, 2-4 jam
Sirup Fruktosa
Pemurnian
Sirup Maltosa
Sirup Fruktosa
Berkadar tinggi
* Aplikasi Oksidoreduktase
Enzim
Sumber
Konversi yg
dikatalisis
Katalase
A. niger,
2 H2O2
Micrococcus
2 H 2O + O 2
Lysodeikticus
&
bovine liver
Manfaat
-Membuang residu
H2O2 (racun) setlh
sterilisasi dingin susu
dan putih telur,
-Membuang H2O2
dari kerja glukosa
oksidase
- Membuang O2 dari sari
buah (kerjasama dg
glukosa oksidase)
Glukosa A. niger
Oksidase
Glukosa + O2
Glukono--lakton +
H2O2
-Menghilangkan gula
pada putih telur untuk
mencegah browning
dan off-flavor selama
pengeringan
Lipoksige Tepung
Linoleat + O2
Menghilangkan bau
http://www.indogulfgroup.com/AE%20-%20Enzymes%20-%20Glucose%20Oxidase.asp
*Karbohidrase
Enzim
Sumber
Manfaat
-amilase
Barley malt,
fungi, bakteri
-amilase
Wheat,
barley
malt, bakteri
(bacillus)
-glukanase
A. niger,
B. subtilis,
barley malt
pati-D-glukan + H2O
oligosakarida, glukosa
(ikatan -1,3 dan -1,4)
Degumming pada
industri minuman
beralkohol
Glukoamilase
(amiloglukosidase,AMG)
A. Niger,
A. oryzae,
R. oryzae
Sakarifikasi pati
terlikuifikasi
Debranching
enzymes
(pullulanase,
isoamylase)
A. aerogenes,
Pseudomonas
amilopektin + H2O
amilosa rantai
pendek
,menghidrolisis
ikatan -1,6
Oligosakarida
(amilosa rantai
pendek)
Prebiotik
Inulinase
Kluyveromyces
Polifruktan (inulin) +
H2O fruktosa
HFS
HFS
Isomerase
Selulase
A. niger,
T. viride
Hemiselulase
A. niger
Hemiselulase + H2O
-dekstrin (ikatan
-1,4)
Memudahkan
pengelupasan kulit
kopi, meningkatkan
germinasi biji-bijian
dll
Invertase
(sukrosa
hidrolase)
Saccharomyces
Laktase
(galaktosidase)
*Poligalakturonase menghidrolisis
-D-1,4
galakturonida
*Pektin
metilesterase
menghilangkan
gugus metil pada
pektin
Hemicellulase
Xylanase
Enzyme Function
Breaks down cellulose, a fibre found in the
cell walls of all plants and trees.
Cellulose is the basic raw material used to
make products such as paper, cotton, and
other textiles
Breaks down hemicellulose
Breaks down xylan, a gummy sugar present in
the cell walls of plants and trees.
Used primarily for bleaching in wood and pulp
industry
Bioethanol Production
Enzymes can be used to produce fuels from renewable
sources of biomass. Enzymes such as cellulases, used to
convert cellulose fibers into sugars. These sugars are
subsequently fermented into bioethanol by
microorganisms, i.e Saccharomyces cerevisiae
Simultaneous Saccharification and Fermentation has
greatly improved ethanol production efficiency. cellulase
enzymes and fermentation microorganisms are combined
in a single reaction mixture to produce ethanol in one
step .
Sumber
Bromelin
Nanas
Ficin
Ficus sp.
Papain
Pepaya
Protease
Aspergillus
Bacillus
Manfaat
-Mengempukkan daging,
-Meningkatkan ekstraksi
minyak dan protein dari
tanaman dan hewan,
-Pembuatan hidrolisat
Protease dari tanaman. protein
Hidrolisis polipeptida, -Pengolahan protein ikan
amida dan ester (leu,
gly) menjadi peptida
dengan BM rendah
Hidrolisis protein dan
polipeptida menjadi
peptida dengan BM
rendah
-Meningkatkan warna
dan flavor roti,
-Mengempukkan
daging
-Meningkatkan
dispersitas susu bubuk &
meningkatkan stabilitas
susu evaporasi
Pepsin Porcine,
Perut
hewan
Hidrolisis polipeptida
(asam amino
aromatik,
dikarboksilat) menjadi
peptida dengan BM
rendah
Bovine pepsin
rennet extender
dan koagulan susu
(keju), produksi
hidrolisat protein
Tripsin Pankreas
hewan
Hidrolisis polipeptida
(ggs karboksil L-arg,
L-lys) menjadi peptida
dengan BM rendah
Menekan oksidasi
flavor di susu;
produksi hidrolisat
protein
Selektivitas tinggi
Koagulasi susu
terhadap kasein susu, dalam pembuatan
mengkoagulasi susu
keju, meningkatkan
flavor dan tekstur
pada pematangan
keju
Enzymes as Detergent
The main enzyme used is protease.
Protease - remove protein contaminants.
Lipases remove fatty stains effective on stains
resulting from fatty acids such as oils and fats.
Amylase remove starchy food deposits.
Cellulase : used as a colour enhancing and antibobbling washing powders . This enzyme remove
detached cellulose fibrils, which cause a progressive
dulling of the colour as dirt is trapped on the rough surface
of the fabric.
Formulasi :
Dienkapsulasi agar debu tak beterbangan, partikel larut
cepat, tak menghasilkan bau & warna, daya simpan lebih
baik, melindungi thd komponen lain e.g bleaching agent
INDUSTRI KEJU
Rennet
Proteases are enzymes that are added to milk during
cheese production, to hydrolyze caseins.
The most common enzyme isolated from rennet is
chymosin., which can be obtained from young animal,
microbial or vegetable sources, but indigenous microbial
chymosin (from fungi or bacteria) is ineffective for making
cheddar and other hard cheeses.
http://enzymes.me.uk/enzyme/enzymes-in-industry
PRODUKSI KEJU
Lipases
-Lipases are used to break down milk fats and give
characteristic flavours to cheeses, e.g. Italian cheese,
Romano, etc. The flavour comes from the free fatty acids
produced when milk fats are hydrolyzed.
- Animal lipases are obtained from kid, calf and lamb, while
microbial lipase is derived by fermentation with the fungal
species Mucor meihei.
-Animal enzymes are more partial to short and mediumlength fats results in the desirable taste of many
cheeses. While hydrolysis of the longer chain fatty acids
can result in either soapiness, or no flavour at all.
Whey Proteins
- Milk also contains whey proteins such as lactalbumin and
lactoglobulin.
- During production of soft cheeses, whey is separated from
the milk after curdling.
Proteases are used to produce hydrolyzed whey protein
produce shorter polypeptide sequences. Hydrolyzed
whey is less likely to cause allergic reactions and is used
to produce supplements for infant formulas and medical
uses.
* Lipase
Enzim
Sumber
Konversi yang
dikatalisis
Manfaat
Lipase
Jaringan
pankreas
hewan,
A. Niger,
A. oryzae
Hidrolisis triasil
gliserol, ester asam
lemak, menghasilkan
mono- dan diasilgliserol,
gliserol dan asam
lemak bebas
Lipase hewan :
meningkatkan
flavor pada industri
keju, lypolized
butter oil
Lipase mikrobial :
menghidrolisis
lipid (konsentrat
minyak ikan)
http://www.ias.ac.in/currsci/jul10/articles18.htm
Therapeutic Enzymes