Laporan Praktikum Struktur Perkembangan Hewan II

OSTEOGENESIS EMBRIO PUYUH (Conturnix conturnic japonica)

PADA MASA INKUBASI 13, 14, 15, DAN 16 HARI
1.3
Alian Supriansyah 1.3Malini Pasaribu, 1.3Fitri Sofura, 1.3Djuita Harti, 1.3Waode Siti Adelia
Ambo
1Laboratorium Struktur Perkembangan Hewan II Jurusan Biologi

FAKULTAS MATIMATIKA DAN ILMU PENGTAHUAN ALAM UNIVERSITAS BENGKULU

3Kelompok praktikum SPH II Angkatan 2016 kelas B

ABSTRAK

Praktikum osteogenesis embrio puyuh (Coturnix coturnix japonica) pada masa inkubasi 11,
12, 13, 14, 15 dan 16 hari bertujuan untuk membuat preparat awetan embrio puyuh dan
menghitung panjang tulang yang menulang pada perkembangan embrio puyuh. Praktikan,
lalu dilakukan pengawetan dengan membersihkan seluruh tubuh puyuh dari bulu, kulit serta
dikeluarkan seluruh organ dalam. Kemudian dilakukan fiksasi, pewarnaan, rehidrasi,
transparasi dan penjernihan selama 21 hari. Berdasarkan pengamatan yang dilakukan
didapatkan hasil perkembangan tulang pada preparat 11, 12 dan 13 hari didominasi oleh
tulang rawan yang ditandai dengan warna biru alcian blue serta dominasi warna merah
alzarin red untuk preparat 14 dan 15 hari yang merupakan tulang keras (tulang kompak).
Dari hasil tersebut, secara jelas bahwa ditemukan peningkatan perkembangan tulang embrio
puyuh dan ditemukan perbedaan jumlah dari setia rentang masa hari inkubasi.

Kata kunci : Embrio puyuh, masa inkubasi, osifikasi, osteogenesis.

PENDAHULUAN Pengertian osteogenesis adalah

Latar belakang
Puyuh (Coturnix coturnix
japonica) merupakan hasil domestikasi
dari puyuh liar (Coturnix coturnix
japonica) yang dilakukan di Jepang
(Cooper, 1976). Puyuh yang telah
didomestikasi ini mencapai kecepatan
pertumbuhan yang tinggi dan dewasa alat
kelamin dalam jangka waktu yang singkat,
keadaan fisiologisnya hampir sama dengan
ayam dan kegiatan reproduksi dengan cara
ovipar (bertelur) bermula setitik kelenjar
putih pada telur puyuh yang bakal akan
menjadi embrio (Lee, 1992)
proses dari pembentukan tulang dimana
tulang terdiri atas material interseluler
terkalsifikasi, matriks tulang, dan tiga tipe
sel yaitu osteosit yang dapat ditemukan di
ruang (lakuna) diantara matriks, osteoblas
yang merupakan tempat sintesis komponen
organik dari matriks, serta osteoklas yang
merupakan sel raksasa multinuklear yang
terlibat dalam proses reabsorpsi dan
pembentukan jaringan tulang(Junqueira
dan Carneiro 2005).
Tulang selalu terbentuk dalam
kerangka jaringan penyambung atau
connective tissue yang telah ada
sebelumnya. Perbedaan-perbedaan dalam
perkembangan terjadi karena dalam
embrio beberapa dari tulang-tulang itu
diendapkan dalam mesenkim yang belum
ter- diferensiasi (pembentukan tulang intra
membran), sedangkan di bagian lain dari
tubuh terjadi pembentukan tulang yang
didahului oleh sistem tulang rawan
penumpu yang sementara (pembentukan
tulang endokondral) (Storer, 1978).
Pengertian osifikasi adalah proses
penting pembentukan matriks tulang
(penulangan) mengandung unsur-unsur
yang sama seperti jaringan-jaringan
penyambung lainnya, serat-serat dan bahan
dasar, pengendapan matriks ini oleh
osteoblast. Osifikasi bermembran ter-jadi
dalam tulang-tulang tengkorak pipih dan
klavikula (tulang selangka), sedangkan
osifikasi endokondral bersifat khas untuk
sebagian besar sisi kerangka tubuh.
Perbedaan antara kedua proses itu terletak
dalam kenyataan bahwa pada osifikasi
endokondral, tiap spikula diendapkan
sekeliling pecahan matriks tulang rawan
yang telah mengapur, sedangkan pada
spikula tulang intra membran tidak
terdapat kerangka semacam itu
(Bevelander, 1988).
Pengertian osteogenesis pada
embrio puyuh adalah proses pembentukan
tulang puyuh yang terdiri atas material
interseluler terkalsifikasi, matriks tulang,
dan tiga tipe sel yaitu osteosit yang dapat
ditemukan di ruang (lakuna) diantara
matriks, osteoblas yang merupakan tempat
sintesis komponen organik dari matriks,
serta osteoklas yang merupakan sel raksasa
multinuklear yang terlibat dalam proses
reabsorpsi dan pembentukan jaringan
tulang. Tulang membentuk rangka tubuh,
yang fungsinya untuk menahan berat
badan. Otot volunter (rangka) diinsersikan
pada tulang melalui penyisipan tendon ke
jaringan penyambung periosteum. Dalam
perkembangan dan pembentukannya
sebagai seorang mahasiswa biologi harus
memahami hal tersebut hingga mendasari
saya untuk melakukan pengamatan
osteogenesis pada embrio awetan puyuh.
Rumusan masalah, adapun
rumusa masalah yang mencakup
bagaimana perkembanga tulang pada
puyuh dimulai masa inkubasi 11, 12, 13,
14, 15 dan 16 hari?
Tujuan, adapun tujuan dari
Praktikum osteogenesis embrio puyuh
(Coturnix coturnix japonica) pada masa
inkubasi 11, 12, 13, 14, 15 dan 16 hari
adalah untuk membuat preparat awetan
embrio puyuh dan menghitung panjang
tulang yang menulang pada perkembangan
embrio puyuh.
MATERIAL DAN METODOLOGI
Alat
Alat yang di gunakan pada praktikum ini
ialah inkubator,botol film,botol vial,botol
film,jangka sorong, miktometer, cawan
petri, kaca benda, mikroskop streo.
Bahan
Pada praktikum pembuatan
preparat embrio puyuh ini digunakan
bahan yakni embrio puyuh (Coturnix
coturnix japonica) umur 11, 12, 13, 14, 15,
dan 16 hari, alkohol 96%, Etanol 70%,
Etanol 40%, Etanol 15%, KOH 1%,
Alizarin red 0,0001 M, Alcian Blue dan
Gliserin.
Waktu pelaksanaan praktikum
Praktikum pembuatan embrio puyuh
dilaksanakan pada tanggal 21 September -
6 Oktober 2017 WIB di Laboratorium
Struktur Perkembangan Hewan FMIPA
Universitas Bengkulu.
Prosedur kerja
Prosedur inkubasi: Telur puyuh
(Coturnix coturnix japonica) fertil di
masukkan kedalam inkubator yang telah
disediakan. Atur suhu inkubator sebesar
38℃. Kemudian biarkan hingga waktu
yang telah di tentukan (11,12,13,14,15 dan
16 hari). Selama inkubasi, setiap 2 kali
dalam sehari (pagi dan sore) ubah posisi
telur. Namun pada 3 hari pertama masa
inkubasi telur dibiarkan dalam mesin
inkubasi tanpa harus di pindah posisinya.
Prosedur pembuatan preparat tulang
embrio:Telur puyuh yang telah di
inkubasi selama 11, 12, 13, 14, 15, dan 16
hari dikeluarkan dari inkubator dan
diletakkan pada lemari es. Kemudian
difiksasi dengan menggunakan alkohol
96% selama 7 hari. Setelah difiksasi,
embrio puyuh diberikan pewarnaan
menggunakan alcian blue selama 3 hari.
Selanjutnya dilakukan rehirasi dengan
menggunakan etanol 70% selama tiga jam,
lalu dengan menggunakan etanol 70%
kembali selama tiga jam, diganti dengan
menggunakan etanol 45%. Dan y
HASIL
Embrio puyuh yang telah melewati proses
inkubasi dan proses pembuatan preparat
dengan penggantian larutan di setiap tahap.
ang terakhir etanol 15% selama tiga jam.
Sebelum ke tahap transparansi embrio di
rendam dalam aquades selama 10 menit.
Pada tahap transparansi deilakukan
dengan menggunakan KOH 1% selama
dua hari. Dilanjutkan dengan pewarnaan
menggunakan alizarin red selama tiga hari.
Setelah di beri pewarna, dilakukan
transparansi kembali mengunakan KOH
1% selama dua hari. Proses penjernihan
bertahap menggunakan KOH : Gliserin
dengan perbandingan 3:1 selama satu hari,
hari berikutnya diganti dengan KOH :
gliserin 1:1. Dan yang terkhir 3:1.Tahap
terakhir yaitu penyimpanan dengan
menggunakan Gliserin murni.
Prosedur pengukuran panjang tulang
embrio : Panjang tulang yang telah
mengalami osifikasi di ukur dengan
menggunakan jangka sorong. Tulang yang
di ukur ialah panjang femur, panjang
tibiatarsus, panjang falang, panjang
tarsometatarsus. Sedangkan untuk tulang
vertebre, servikal vertebre dan caudal
vertebre di hitung jumlah tulangnya.
Maka dapat di lihat perbedaannya dengan
jelas pada gambar berikut:
Keterangan : Gambar 1.1 Perkembangan embrio ayam pada masa inkubasi (A) 13 hari, (B)
14 hari dan (C) 15 hari menunjukkan osifikasi tulang pada embrio puyuh.
Cranium(Cr), body(bd), femur(Fm), tibia (Tb), phalanges (Ph), Cervix(Cx),
Extermitas (Ep dan EA), alizarin red dan alcian blue.

Keterangan : Gambar 1.2 Perkembangan embrio puyuh pada masa inkubasi (a) 13 hari, (b)
14 hari, (c) 15 hari, (d) 16 hari. Cranium (Cr), Upper mandible (Um)
Keterangan : Gambar 1.3 Perkembanagn extermitas atas(EA) pada embrio puyuh masa
inkubasi (a) 13 hari, (b) 14 hari, (c) 15 hari, (d) 16 hari. Panjang tulang
humerus(PH), panjang tulang radius(PR), panjang tulang ulna (PU), Panjang
tulang Carpometacarpus (PCm).
 Keterangan : Gambar 1.4 Perkembanagn extermitas bawah (EB) pada embrio puyuh masa
inkubasi (a) 13 hari, (b) 14 hari, (c) 15 hari, (d) 16 hari. Panjang tulang Tarsometatarsus
(PTm), Panjang tulang Phalanges (PP).

Hasil dari dilakukannya pengukuran pada Maka didapati data panjang tulang sebagai
tiap-tiap bagian tulang embrio puyuh. berikut:
tabel 1. Hasil pengukuran panjang tulang embrio puyuh

PP
Masa PF PT
inkubasi (mm) (mm) PTm(mm) 1 2 3 PH(mm) PR(mm) PU(mm) PCm(mm) PM(mm) JR(buah) JV(buah) JCS(buah) JCV(buah)

13 hari 6.2 6.2 7 4 3.8 3.2 3.1 4.2 2.6 1.2 2 7 9 11 6

14 hari 8 13 8.35 4 2.8 2.5 2.5 3 3.6 2.3 1.08 5 14 13 7

15 hari 8.6 10.7 8.3 4.1 4.2 4.1 4.1 6.4 3.7 4.8 5.5 7 15 12 9

16 hari 10.1 13.5 8.5 4 4.2 4 7.1 4.15 4.5 3.3 4.8 7 19 11 10
Grafik 1.Hasil pengukuran panjang tulang embrio puyuh .Panjang Femur (FE), Panjang
Tibiotarsus (PT), Panjang Tarsometatarsus (PTm), Panjang Phalanges (PP), Panjang
Humerus (PH), Panjang Radius (PR), Panjang Ulna (PU), Panjang Carpometacarpus
(PCm), Panjang Mandibula bawah (PM), Jumlah Rusuk (JR), Jumlah Vertebra (JV),
Jumlah Tulang Serviks/Leher(JCs),Jumlah Tulang Cauda/Ekor (JCv)

PEMBAHASAN lebih kecil dari ukuran unggas lainnya dan

Tulang merupakan jaringan ikat
khusus yang berfungsi sebagai alat
penyokong, perlekatan, perlindungan, dan
penyimpanan mineral. Proses pembentu-
kan disebut dengan osteogenesis, dimana
proses ini merupakan proses penting dalam
pemebentungan tulang. Pada praktikum
osteogenesis embrio puyuh yang diamati
merupakan hasil dari awetan yang
dilaksanakan praktikan. Dimana telur
puyuh diinkubasi pada masa hari yang
berbeda untuk melihat perkembangan
tulang embrio puyuh tersebut. Hal
mendasar yang dilakukan adalah
pembuatan awetan puyuh yang telah
dibersihkan bulu dan kulitnya serta
dilakukan fiksasi selama 7 hari dengan
alkohol 96% yang bertujuan untuk
mematikan dengan cepat spesimen yang
berupa jaringan dan sel-sel berfungsi juga
untuk mempertahankan struktur sel dan
jaringan sebagaimana aslinya agar tetap
utuh dalam pembuatan awetan yang kami
lakukan.
Pada praktikum yang dilaksanakan
menggunakan puyuh sebagai objek
pengamatan tulangnya. Hal ini
dikarenakan bentuk dari tubuh puyuh yang
memiliki kelebihan yang dapat dijadikan
sebagai hewan percobaan, biaya
pemeliharaan rendah sesuai dengan ukuran
tubuh yang kecil, memiliki selang generasi
yang pendek (3-4 generasi per tahun),
resisten terhadap penyakit, dapat
digunakan sebagai hewan percobaan, dan
(6) C. japonica3 merupakan unggas
dengan ukuran terkecil yang diternakkan
untuk menghasilkan telur dan daging
(Vali, 2008).
Pengamatan yang dilakukan
dengan masa inkubasi yang berbeda. Hal
tersebut dilakukan untuk melihat
perkembangan yang nyata pada setiap
masa hari. Karena sel berkembang setiap
saat dan pengamatan yang dilakukan
dengan masa inkubasi 11 akan berbeda
dengan masa inkubasi 12, meskipun
berbeda sehari namun terlihat perbedaan,
yang berarti perkembangan selnya terus
berjalan.
Dalam pembuatan preparat awetan,
pewarnaan merupakan hal yang terpenting,
seperti halnya pewarnaan yang dilakukan
menggunakan bahan Alcian blue dan
Alizarin Red. Dimana pada saat pewarnaan
yang pertama merupakan Alcian blue atau
sering disingkat AB dan kontras pada
embrio dengan masa inkubasi 11 dan 12 KESIMPULAN
hari, tentu ini dikarenakan penyusun tulang
pada masa hari tersebut belum terjadi Berdasarkanpengamatan osteo-
osifikasi (proses penulangan) yang berarti genesis embrio puyuh (Coturnix coturnix
masi disusun oleh tulang rawan dimana japonica) dengan masa inkubasi 11, 12,
peran Alcian blue adalah untuk menandai 13, 14, 15 dan 16 hari dapat disimpulkan
tulang rawan.Alcian blue yang mampu bahwa pada masa inkubasi 11 dan 12 hari
mendeteksi mukopolisakarida asam telah terjadi proses osteogenesis, namun
tersebut yang membuatnya bekerja pada proses osifikasi belum terjadi secara
tulang rawan. menyeluruh. Pada masa inkubasi 13, 14
Kemudian pewarnaan dengan dan 15 hari proses osteogenesis sudah
Alizarin red, seperti halnya namanya, terjadi dan osifikasi juga terjadi.
warnanya yaitu merah. Dimana pada
preparat awetan embrio puyuh tersebut
yang memiliki masa hari 13, 14 dan 15 DAFTAR PUSTAKA
hari didominasi dengan warna Alizarin
red, yang berfungsi menandai tulang keras Soeminto. 2000. Embriologi Vertebrata.
atau tulang yang telah mengalami Purwokerto : Universitas Soedirman.
osifikasi. Sehingga pada preparat awetan
Bavelander ramly, Gerrit.2008.Dasar-
hari ke 15 sudah didominasi oleh warna dasar histologi. Jakarta :
merah yang menandakan telah terjadi Erlangga.
proses osifikasi pada masa hari 14 dan 15.
Menurut Soeminto (2000) T.W sadler.2000.Embriologi kedoteran.
Jakarta : EGC.
Alizarin red adalah satu
metode mikroteknik untuk mengetahui Yatim,Wildan.2009. Embryologi. Bandung
pembentukan tulang pada embrio atau : Tarsito.
untuk mendeteksi proses osifikasi pada
.
tulang embrio. Tulang yang diwarnai
dengan alizarin Red akan berwarna merah
tua apabila tulang tersebut telah .
mengalami osifikasi. Warna ini muncul
karena zat warna yang diberikan terikat
oleh kalsium pada matriks tulang.
Pembentukan System rangka dimulai pada
inkubasi hari ke 5 ditandai dengan
kondensasi mesen-skim prekartilago.
Kondrifikasi dimulai pada hari ke 8
sedangkan osifikasi dimulai pada hari ke 9
dan akan terlihat jelas pada hari ke 14 dan
15.