i

MODIFIKASI SELULOSA AMPAS TEBU DENGAN

ASETILASI

WIDA LESTARI

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2010
 ABSTRAK

WIDA LESTARI. Modifikasi Ampas Tebu dengan Asetilasi. Dibimbing oleh

HENNY PURWANINGSIH dan ZAINAL ALIM MAS’UD.
Ampas tebu mengandung selulosa yang tinggi (52.7%), yang sangat
dimungkinkan untuk menghasilkan selulosa asetat melalui asetilasi. Selulosa
dipisahkan dari ampas tebu melalui tahapan pencucian dengan air, delignifikasi
dengan NaOH dan NaClO2, dan aktivasi H2SO4. Analisis mikroskopi elektron
susuran menunjukkan bahwa proses delignifikasi menghasilkan selulosa yang
berbentuk serat kasar yang bersalut, sedangkan aktivasi H2SO4 menghasilkan
selulosa yang berbentuk serat mikro tidak bersalut. Spektrum inframerah
menunjukkan keberhasilan asetilasi yang dibuktikan dengan keberadaan serapan
C=O ester pada bilangan gelombang 1751–1749 cm-1 dan serapan regangan –C–
O– pada bilangan gelombang 1244–1267 cm-1. Proses asetilasi pada ampas tebu
hasil delignifikasi NaOH dan NaClO2 hanya dapat sedikit memodifikasi gugus –
OH selulosa. Nilai derajat substitusi produk asetilasi ampas tebu hasil
delignifikasi NaOH, delignifikasi NaClO2, dan aktivasi H2SO4 berturut-turut
adalah 0.07, 1.01, dan 2.37. Bobot molekul meningkat sedangkan derajat
polimerisasi menurun dengan meningkatnya derajat substitusi. Bobot molekul
berkisar antara 58,577–72,516 g mol-1 dan derajat polimerisasi berkisar antara
289–509. Untuk mengevaluasi kinerja hasil modifikasi ampas tebu digunakan
sebagai fase diam pada kolom kromatografi dengan toluena sebagai fase gerak.
Pada kromatografi lapis tipis dan spektrum ultraviolet-sinar tampak menunjukkan
bahwa hampir semua komponen ekstrak etanol temulawak pada fase diam hasil
modifikasi ampas tebu tidak terelusi.

ABSTRACT

WIDA LESTARI. Modification of Sugarcane Bagasse By Acetylation.

Supervised by HENNY PURWANINGSIH and ZAINAL ALIM MAS’UD.
Bagasse has high cellulose content (52.7%), that can be modified into
cellulose acetate by acetylation. Cellulose was isolated from bagasse by treatment
with water, delignification with NaOH and NaClO2, and activation with H2SO4.
Scanning Electron Microscopy analysis showed that cellulose fibers have coated
fibers after delignification and cellulose microfiber has not coated fibers after acid
treatment. Infrared spectra showed the acetylation succeeded as proved by
absorption of C=O at 1751–1749 cm-1 and absorption of –C–O– at 1244–1267
cm-1. The degree of substitution for delignified products were 0.07 (NaOH
delignification) and 1.01 (NaClO2 delignification). Acetylated product had the
highest degree of substitution (2.37). The degree of substitution and the molecular
weight increased, meanwhile the degree of polymerization decreased. Molecular
weight was 58,577–72,516 g mol-1 and degree of polymerization was 289–509.
To evaluate the modified bagasse performance, it was used as a stationary phase
in column chromatography and toluene was used as mobile phase. The extract of
Curcuma xanthorrhiza was not eluted in the modified bagasse column.
 MODIFIKASI SELULOSA AMPAS TEBU DENGAN
ASETILASI

WIDA LESTARI

Skripsi
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Departemen Kimia

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2010
Judul Skripsi : Modifikasi Selulosa Ampas Tebu dengan Asetilasi
Nama : Wida Lestari
NIM : G44062165

Menyetujui

Pembimbing I, Pembimbing II,

Henny Purwaningsih, S.Si., M.Si. Dr. Zainal Alim Mas’ud, DEA.

NIP 19741201 200501 2 001 NIP 19560622 198601 1 001

Mengetahui
Ketua Departemen Kimia,

Prof. Dr. Ir. Tun Tedja Irawadi, MS

NIP 19501227 197603 2 002

Tanggal Lulus:
 PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang senantiasa
memberikan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan
karya ilmiah ini sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Sains pada
Departemen Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut
Pertanian Bogor. Shalawat serta salam semoga selalu tercurahkan kepada Nabi
Muhammad SAW dan keluarganya dan semoga kita semua menjadi pengikutnya
hingga akhir zaman.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Henny Purwaningsih, S.Si.,
M.Si. dan Dr. Zainal Alim Mas’ud, DEA. selaku pembimbing atas saran, kritik,
dorongan, dan bimbingannya selama penelitian serta dalam penyusunan karya
ilmiah ini. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Bapak Drs. Muhamad
Farid. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Masyarakat
Perkebunan atas bantuan dana penelitian yang diberikan melalui Direktorat
Jenderal Perkebunan Departemen Pertanian Republik Indonesia. Selain itu,
penulis mengucapkan terima kasih pada staf laboran di Laboratorium Kimia Fisik
(Pak Mail, Pak Nano, dan Ibu Ai), Kimia Organik (Pak Sobur), Kimia Analitik
(Pak Eman), dan analis di Laboratorium Terpadu (Kak Victoria, Kak Ema, dan
Kak Yono) atas bantuan serta masukan yang diberikan.
Ucapan terima kasih tak terhingga kepada orang tua dan keluarga atas
bantuan materi dan doa. Selain itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada
teman-teman seperjuangan penelitian di Laboratorium Kimia Fisik, Laboratorium
Kimia Organik, dan Laboratorium Terpadu atas kerja sama, kritik, dan semangat
selama penelitian serta semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian
karya ilmiah ini.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.

Bogor, Agustus 2010

Wida Lestari
 RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Tasikmalaya pada tanggal 30 Januari 1988 dari ayah

Apipudin dan ibu Syariah. Penulis merupakan putri kedua dari tiga bersaudara.
Tahun 2006 penulis lulus dari SMA Negeri 1 Tasikmalaya dan pada tahun
yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB
(USMI). Penulis memilih Program Studi Kimia, Departemen Kimia, Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis menjadi staf Human Research and
Development (HRD) Ikatan Mahasiswa Kimia IPB (IMASIKA) masa jabatan
2007/2008. Bulan Juli–Agustus 2009 penulis melaksanakan Praktik Lapangan di
PT Hexpharm Jaya Cipanas dengan judul Analisis Sifat Fisik dan Kimia Produk
Dapyrin Tablet Di PT Hexpharm Jaya.
 DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR TABEL................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. ii
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................... ii
PENDAHULUAN .................................................................................................. 1
BAHAN DAN METODE ....................................................................................... 1
Alat dan Bahan................................................................................................1
Metode Penelitian……………………………………………………………2
HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................................... 4
Pengaruh Pencucian, Delignifikasi, dan Aktivasi ..........................................4
Modifikasi Selulosa ........................................................................................5
Derajat Substitusi, Bobot Molekul, dan Derajat Polimerisasi ........................5
Pencirian Spektrum FTIR ...............................................................................6
Pemisahan Ekstrak Temu Lawak....................................................................6
Analisis UV-tampak........................................................................................9
SIMPULAN DAN SARAN .................................................................................... 9
Simpulan .........................................................................................................9
Saran .............................................................................................................10
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 10
LAMPIRAN.......................................................................................................... 12
 DAFTAR TABEL
Halaman

1 Derajat substitusi, bobot molekul, dan derajat polimerisasi berbagai produk

asetilasi………………………………………………………………………...5
2 Hasil KLT eluat kromatografi kolom ekstrak etanol temu lawak dengan fase
diam produk asetilasi ampas tebu hasil aktivasi H2SO4…………………….....8
3 Hasil KLT eluat kromatografi kolom ekstrak etanol temu lawak dengan fase
diam silika gel…………………………………………………………………8

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1 Ampas tebu dengan berbagai perlakuan. .......................................................... 4

2 Morfologi serat selulosa sebelum dan setelah aktivasi. .................................... 5
3 Produk asetilasi ampas tebu dari berbagai perlakuan ....................................... 5
4 Spektrum FTIR ampas tebu dengan berbagai perlakuan. ................................. 7
5 Spektrum FTIR produk asetilasi dari berbagai perlakuan. ............................... 7
6 Kromatogram KLT dengan berbagai fase gerak. .............................................. 8
7 Spektrum UV-tampak ekstrak etanol fase diam produk asetilasi ampas tebu
sebelum dan sesudah elusi…………………………………………………….9

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1 Bagan alir penelitian ........................................................................................13

2 Bagan preparasi proses isolasi selulosa ampas tebu ........................................14
3 Bagan proses asetilasi ......................................................................................15
4 Data modifikasi ampas tebu.............................................................................16
5 Penentuan fase gerak terbaik............................................................................20
 PENDAHULUAN
Perkebunan tebu di Indonesia tersebar di
Medan, Lampung, Semarang, Solo, dan
Makassar dengan total produksi di tahun 2009
mencapai ± 2.8 juta ton (Ditjen Perkebunan
2010). Dalam industri pengolahan tebu menjadi
gula, jumlah ampas tebu yang dihasilkan
adalah 90% dari setiap tebu yang diolah,
sedangkan kandungan gula yang termanfaatkan
hanya sebesar 5% (Wijanarko et al. 2006).
Ampas tebu merupakan limbah berserat
dari batang tebu setelah melalui proses
penghancuran dan ekstraksi. Ampas tebu,
seperti halnya biomassa yang lain, terdiri atas
tiga penyusun utama, yaitu selulosa (52.7%),
hemiselulosa (20%), lignin (24.2%), dan
sisanya unsur penyusun lainnya (Samsuri et al.
2007). Selulosa ampas tebu telah dimanfaatkan
menjadi etanol (Samsuri et al. 2007) dan
sebagai produk kompos (Cahaya & Nugroho
2007). Lignin ampas tebu telah dimanfaatkan
oleh Iskandar et al. (2009) sebagai bahan baku
pembuatan surfaktan, sedangkan protein ampas
tebu telah dimanfaatkan untuk makanan ternak
melalui amonifikasi dan fermentasi (Widodo
2006), dan senyawa pentosan ampas tebu telah
dimanfaatkan untuk menghasilkan senyawa
furfural (Wijanarko et al. 2006).
Ampas tebu juga telah dimanfaatkan
sebagai bahan baku pembuatan papan partikel,
pulp, bahan bakar, pupuk, dan pakan ternak.
Namun, pemanfaatannya bersifat terbatas dan
bernilai ekonomi rendah. Oleh karena itu,
dibutuhkan cara modifikasi lain agar ampas
tebu bisa bernilai ekonomi tinggi. Salah
satunya adalah memodifikasi selulosa ampas
tebu menjadi selulosa asetat melalui reaksi
asetilasi. Steinmeier (2004), Sassi & Chanzy
(1995), Cerquiera et al. (2007), dan Shaikh et
al. (2009) telah memodifikasi ampas tebu
menjadi selulosa asetat. Selain ampas tebu,
limbah industri hasil pertanian seperti rami,
ampas sagu (ELA), onggok singkong, dan
limbah lain yang mengandung selulosa dapat
dimodifikasi membentuk selulosa asetat.
Beberapa penelitian telah melaporkan
modifikasi selulosa menjadi selulosa asetat.
Santi (2006) telah memodifikasi selulosa
onggok sagu menjadi selulosa asetat dan Netty
(2006) telah memodifikasi selulosa onggok
singkong menjadi selulosa asetat dan selulosa
nitrat. Telah dilakukan pula modifikasi selulosa
ampas sagu menjadi selulosa asetat dengan
derajat substitusi 0.29–1.43 menggunakan
katalis iodin (Irfana 2010) dan dengan derajat
substitusi 1.15–1.41 menggunakan katalis asam
sulfat (Cahyani 2010).
Selulosa merupakan salah satu
polisakarida yang berbentuk homopolimer
linear dari D-anhidroglukosa dengan ikatan β-
1,4-glukosida. Senyawa lain dalam ampas tebu
seperti hemiselulosa dan lignin perlu
dihilangkan dengan cara ekstraksi
menggunakan pelarut basa encer
(Sastrohamidjojo 1995). Selulosa yang
berbentuk kristalin dan amorf sukar larut dalam
larutan basa dan akan larut dalam larutan asam.
Dalam penelitian ini, ampas tebu yang telah
dicuci dengan air kemudian didelignifikasi
menggunakan larutan NaOH dan NaClO2.
Selanjutnya, untuk mendapatkan serat
selulosa yang berukuran mikro dilakukan
homogenisasi dan aktivasi dengan larutan asam
(Bhattacharya et al. 2008). Hal ini dilakukan
agar probabilitas gugus asetil (CH3CO-)
menggantikan gugus hidroksil (-OH) selulosa
pada saat reaksi asetilasi berlangsung menjadi
lebih besar karena tapak aktif pada serat
selulosa semakin banyak. Pereaksi yang lazim
digunakan untuk reaksi asetilasi antara lain
anhidrida asetat, asetil klorida, dan ketena.
Reaksi asetilasi dapat berlangsung cepat
melalui aktivasi dengan asam asetat glasial
yang dibantu dengan katalis asam sulfat
(Fengel & Wegener 1989).
Modifikasi selulosa ampas tebu dalam
penelitian ini dilakukan melalui asetilasi
menggunakan pereaksi anhidrida asetat serta
diaktivasi dengan asam asetat glasial dan
katalis asam sulfat. Pencirian dilakukan dengan
spektrofotometer inframerah transformasi
fourier (FTIR), mikroskopi elektron susuran
(SEM), penentuan derajat substitusi, bobot
molekul secara viskometri, dan derajat
polimerisasi. Selanjutnya, kinerja selulosa
asetat dievaluasi sebagai media separator pada
kromatografi kolom untuk memisahkan
senyawa kurkuminoid dari senyawa ekstrak
etanol temu lawak.
BAHAN DAN METODE
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah radas
kromatografi kolom, radas kromatografi lapis
tipis (KLT), viskometer Ostwald,
spektrofotometer FTIR Prestige-21 Shimadzu
(Lab. Terpadu, IPB), spektrofotometer UV-
tampak Shimadzu 1700 (Lab. Terpadu, IPB),
dan SEM (Puslitbang Hutan, Bogor).
Bahan-bahan yang digunakan adalah
ampas tebu (Pabrik Gula Modjopanggung,
Jawa Timur), temu lawak (Pusat Studi
Biofarmaka, IPB), standar kurkuminoid (Pusat
Studi Biofarmaka, IPB), dan lempeng KLT
silika gel GF 254 (Merck). Pereaksi yang
digunakan adalah anhidrida asetat, asam asetat
glasial, H2SO4, NaOH, NaClO2, aseton, dan
toluena (semua berasal dari Merck).
Metode Penelitian
Preparasi Ampas Tebu
Ampas tebu dibersihkan dengan air keran
untuk menghilangkan bau dan kotoran yang
masih ada, lalu dikeringkan pada suhu 60 °C
selama 16 jam. Ampas tebu kering digiling
dalam blender selama 5 menit lalu diayak
hingga terpisah dari bagian berseratnya.
Sebanyak 6 g bagian tepung ditambahkan 400
ml akuades dan diaduk dengan pengaduk
magnet selama 5 menit. Campuran disaring dan
pencucian dilakukan tiga kali. Residu
kemudian dikeringkan pada suhu 50 °C hingga
bobotnya konstan. Contoh tersebut bebas dari
komponen polisakarida yang larut dalam air
(A1).
Delignifikasi Ampas Tebu (Bhattacharya et
al. 2008 dan Sun et al. 2004)
Sebanyak 5 g A1 ditambahkan 95 ml
NaOH 4% dan dipanaskan pada suhu 80 °C
selama 4 jam. Campuran kemudian disaring
dengan bantuan vakum dan endapannya dicuci
dengan akuades hingga pH filtratnya tidak
berubah. Residu kemudian dikeringkan pada
suhu 50 °C hingga bobotnya konstan (A2).
Sebanyak 5 g A2 ditambahkan 35 ml
NaClO2 1.3% yang diasamkan dengan asam
asetat glasial sampai pH 3.5–4, lalu campuran
dipanaskan pada suhu 75 °C selama 2 jam.
Campuran kemudian disaring dengan bantuan
vakum dan endapannya dicuci dengan NaOH
5% dan air hingga pH filtratnya netral. Residu
kemudian dikeringkan pada suhu 50 °C hingga
bobotnya konstan (A3).
Preparasi Serat Selulosa Berukuran Mikro
(Bhattacharya et al. 2008)
Sebanyak 5 g A3 disuspensikan dalam 95
ml akuades dan dipanaskan hingga suhu 75 °C
lalu disonikasi selama 10 menit dan disaring.
Residu kemudian dikeringkan pada suhu 50 °C.
Residu tersebut kemudian direfluks dengan
H2SO4 60% (b/v) pada suhu 60 °C selama 2.5
jam. Campuran ditambahkan air es untuk
menyempurnakan reaksi. Campuran kemudian
dicuci dengan akuades dan didispersikan
selama 5 menit. Setelah disaring, residu
dikeringkan pada suhu 105 °C selama 3 jam
(A4). Proses isolasi selulosa disajikan pada
Lampiran 2.
Modifikasi secara Asetilasi (Cerqueira et al.
2007)
Sebanyak 1 g A2, A3, dan A4 masing-
masing ditambahkan 25 ml asam asetat glasial
dan diaduk selama 30 menit dengan pengaduk
magnet. Kemudian campuran ditambahkan
0.08 ml H2SO4 dan 9 ml asam asetat glasial dan
diaduk kembali selama 25 menit. Sebanyak 32
ml anhidrida asetat lalu ditambahkan dan
diaduk lagi selama 30 menit. Campuran
selanjutnya didiamkan selama 14 jam pada
suhu 28 °C, sebelum ditambahkan akuades
untuk menghentikan reaksi hingga terbentuk
dua lapisan. Campuran kemudian disaring dan
endapannya dicuci dengan akuades hingga pH
filtratnya netral. Residu kemudian dikeringkan
pada suhu 50 °C hingga bobot konstan (SA2,
SA3, dan SA4). Hasil tersebut kemudian
dianalisis dengan spektrometer FTIR
(Lampiran 3).
Penentuan Kadar Asetil (ASTM D-678-91)
Kadar asetil ditentukan dengan
menentukan jumlah NaOH yang dibutuhkan
untuk menyabunkan contoh. Sebanyak 0.5 g
SA dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer
yang bersih, kering, dan telah diketahui bobot
kosongnya. Contoh kemudian dikeringkan
pada suhu 105 °C selama 3 jam untuk
ditentukan kadar airnya.
Contoh kering kemudian ditambahkan 20
ml etanol 75% (v/v) dan dipanaskan selama 30
menit pada suhu 60 ○C. Sebanyak 20 ml NaOH
0.5 N ditambahkan ke dalam contoh dan
dipanaskan pada suhu yang sama selama 30
menit.
Contoh didiamkan selama 72 jam dan
kelebihan NaOH dititrasi dengan HCl 0.5 N
menggunakan indikator fenolftalein sampai
warna merah muda hilang. Contoh didiamkan
lagi selama 24 jam untuk memberi kesempatan
bagi HCl berdifusi. Selanjutnya contoh dititrasi
dengan NaOH 0.5 N sampai terbentuk warna
merah muda kembali. Pengukuran blangko
dilakukan sama dengan contoh tanpa
penambahan contoh SA. Kadar asetil (KA)
dihitung dengan rumus:
4.305
KA  D  C N a   A  B N b  
W
Keterangan:
A = volume NaOH untuk titrasi contoh
Na = normalitas HCl
B = volume NaOH untuk titrasi blangko
Nb = normalitas NaOH
C = volume HCl untuk titrasi contoh
F = 4.305 untuk kadar asetil
D = volume HCl untuk titrasi blangko
W = bobot contoh
Sementara besarnya derajat substitusi dapat
dihitung menggunakan rumus:
Keterangan:
162 = bobot molekul anhidroglukosa
43 = bobot molekul asetil
Pencirian Selulosa Asetat (SNI 06-2115-
1991)
Viskositas. Sebanyak 0.13 g SA
dikeringkan pada suhu 105 °C selama 2 jam.
Contoh kering ditimbang ke dalam Erlenmeyer
dan dilarutkan dengan 50 ml aseton. Larutan
disimpan dalam penangas air dengan suhu 25
°C. Hal yang sama dilakukan terhadap aseton
sebagai blangko. Pengukuran viskositas
dilakukan pada suhu 25 °C. Viskositas dihitung
berdasarkan rumus
t contoh
η nisbi =
t blangko
[η] = (K/C) x {antilog [log η nisbi/K]- 1}
Keterangan:
[η]: viskositas intrinsik larutan selulosa asetat
(ml/g)
K : 10 (aseton)
C : konsentrasi larutan (g/dl)
Bobot Molekul. Bobot molekul dihitung
berdasarkan rumus:
[η] = KMα
Keterangan:
[η]: viskositas intrinsik
K : 2,38 × 10-3 ml/g (Fenger & Wegener 1989)
M : bobot molekul
α : 1,0
Derajat Polimerisasi. Derajat polimerisasi
dihitung berdasarkan rumus:
M = (BM per unit) n
dengan n adalah derajat polimerisasi.
Ekstraksi Temu Lawak (Santi 2006)
Serbuk temu lawak yang telah halus
kemudian diekstraksi secara maserasi
menggunakan pelarut etanol dengan nisbah
bahan dan pelarut 1:3 selama 3×21 jam.
Ekstraksi dihentikan dan selanjutnya ekstrak
disaring menggunakan kertas saring dan
dipekatkan dengan penguap putar (rotavapor)
pada suhu 40 °C. Residu yang diperoleh
merupakan ekstrak etanol temu lawak.
Fraksinasi Ekstrak Temu Lawak dengan
Kromatografi Kolom
Kolom kromatografi yang berisi 5 g
selulosa asetat disiapkan. Tinggi fase diam di
dalam kolom 10 cm, laju alir ± 0.1 ml/menit,
dan ekstrak etanol temu lawak yang digunakan
adalah sebanyak 0.5 ml. Fase gerak yang
digunakan adalah toluena. Ekstrak dielusi
dengan mengalirkan pelarut sampai semua
fraksi keluar dari kolom. Fraksi yang keluar
dari kolom ditampung sebanyak 3 ml di dalam
tabung gelap. Fraksi yang diperoleh diuji
dengan KLT dan nilai retardation factor (Rf)
yang diperoleh dibandingkan dengan dengan
nilai Rf standar kurkuminoid.
Analisis Kromatografi Lapis Tipis
KLT dilakukan dengan menotolkan
ekstrak etanol temu lawak, standar
kurkuminoid, fraksi-fraksi hasil kolom, dan
hasil pengocokan fase diam dengan etanol
(sebelum dan setelah elusi) pada lempeng KLT
silika gel GF 254 berukuran 5×10 cm dengan
bantuan pipa kapiler. Selanjutnya dielusi
dengan fase gerak toluena lalu dikeringkan.
Pola pemisahannya dapat dideteksi dengan
sinar UV pada panjang gelombang 254 nm.
Analisis Spektrofotometer UV-tampak
(Cahyani 2010)
Sebanyak 0.3 g SA setelah elusi
ditambahkan 5 ml etanol dan diaduk dengan
pengaduk magnet selama 10 menit. Kemudian
campuran disaring dengan kertas saring.
Penambahan etanol dan penyaringan diulangi
dua kali lagi. Filtrat dari ketiga ulangan
kemudian dianalisis dengan spektrofotometer
UV-tampak. Blangko yang digunakan adalah
filtrat etanol dari fase diam sebelum elusi.
 PEMBAHASAN
Pengaruh Pencucian, Delignifikasi, dan
Aktivasi
Ampas tebu mengandung tiga senyawa
kimia utama, yaitu selulosa, lignin, dan
hemiselulosa. Menurut Samsuri et al. (2007),
ampas tebu mengandung 52.7% selulosa, 20%
hemiselulosa, dan 24.2% lignin (berdasarkan
bobot kering). Target utama proses asetilasi
adalah senyawa selulosa, sehingga senyawa
lainnya perlu dihilangkan. Salah satunya
melalui proses delignifikasi dengan NaOH dan
NaClO2. Sebelum dilakukan delignifikasi,
ampas tebu dicuci dengan air untuk
menghilangkan senyawa-senyawa yang larut
dalam air (A1). Pencucian tersebut
menyebabkan warna ampas tebu yang cokelat
menjadi berwarna lebih pudar dibandingkan
dengan dengan sebelum pencucian. Bobot
contoh ampas tebu hasil pencucian air juga
berkurang. Hal ini menunjukkan bahwa
pencucian telah menghilangkan senyawa-
senyawa yang larut dalam air.
Produk delignifikasi dengan larutan NaOH
(A2) menghasilkan serat yang berwarna kuning
muda dan teksturnya sedikit lebih keras
sehingga sulit untuk dihaluskan. Warna serat
yang pucat menunjukkan hilangnya lignin
selama proses delignifikasi. Lignin larut dalam
NaOH pada suhu tinggi (70–80 °C)
(Bhattacharya et al. 2008). Tekstur yang sedikit
lebih keras disebabkan oleh terbukanya bagian
kristalin selulosa sehingga rongga kosong pada
serat selulosa akan runtuh yang menyebabkan
bahan menjadi lebih padat. Menurut Stevens
(2007), ion-ion hidroksida dari NaOH diikat
oleh ikatan hidrogen sehingga terbentuk
interaksi baru yang lebih kuat antara gugus
hidroksil selulosa dan NaOH yang membuka
bagian kristalin selulosa.
Produk delignifikasi dengan larutan
NaClO2 (A3) menghasilkan serat yang lebih
pucat, tetapi masih berwarna kuning muda dan
lebih keras, jika dibandingkan dengan produk
sebelumnya, yaitu hasil delignifikasi dengan
NaOH. Tahapan ini tampaknya dapat
menghilangkan sisa-sisa lignin yang tidak
hilang dengan larutan NaOH (A2). Senyawa
NaClO2 merupakan oksidator yang lazim
digunakan dalam pemucatan pulp di industri
kertas. Dalam suasana asam, NaClO2 akan
membentuk senyawa ClO2 yang dapat
mengoksidasi lignin sehingga dapat larut dalam
sistem berair. Ampas tebu dengan berbagai
perlakuan disajikan pada Gambar 1.
A0 A1 A2 A3 A4
Gambar 1 Ampas tebu dengan berbagai
perlakuan. Sebelum pencucian air
(A0), tercuci air (A1),
terdelignifikasi NaOH (A2),
terdelignifikasi NaClO2 (A3), dan
teraktivasi H2SO4 (A4).
Serat selulosa yang diperoleh dari proses
delignifikasi diaktivasi dengan H2SO4 pada
suhu 60 °C (A4). Sebelum diaktivasi, serat
selulosa disuspensikan dalam air panas dan
disonikasi untuk menghomogenkan suspensi
tersebut. Setelah diaktivasi, selulosa berwarna
cokelat, padat, dan rapuh.
Mikrograf SEM memperlihatkan adanya
perbedaan morfologi permukaan serat selulosa
setelah dan sebelum aktivasi asam (Gambar 2).
Morfologi permukaan produk sebelum
diaktivasi menggunakan H2SO4 berupa serat
selulosa kasar dengan ukuran lebih besar dan
permukaan serat berselaput (Gambar 2a),
sedangkan morfologi permukaan serat selulosa
setelah diaktivasi memperlihatkan adanya
fragmen-fragmen dengan ukuran yang lebih
kecil dan permukaan tidak berselaput (Gambar
2b). Menurut Bhattacharya et al. (2008), serat
selulosa berkisar 20–200 nm dan sering
menggumpal sehingga ukuran seratnya terlihat
lebih besar, sedangkan serat selulosa tunggal
yang berukuran mikro berkisar 3–20 nm.
Untuk melihat pengaruh aktivasi terhadap
kristalinitas serat selulosa dibutuhkan analisis
lebih lanjut menggunakan mikroskopi gaya
atom (AFM). Analisis ini dapat menunjukkan
bahwa proses aktivasi dengan asam akan
menghilangkan sebagian besar bagian amorf
dari selulosa tanpa merusak struktur kristal
selulosa.
 sedangkan produk asetilasi dari contoh yang
diaktivasi H2SO4 (SA4) berbentuk butiran yang
rapuh sehingga mudah untuk dihaluskan.

SA2 SA3 SA4

a Gambar 3 Produk asetilasi ampas tebu dari
berbagai perlakuan. Delignifikasi
dengan NaOH (SA2), delignifikasi
dengan NaClO2 (SA3), dan
aktivasi H2SO4 (SA4).

Keberhasilan modifikasi dengan asetilasi

b disebabkan kendala-kendala teknis yang terjadi
Gambar 2 Morfologi serat selulosa sebelum
aktivasi (a) dan setelah aktivasi
(b) perbesaran 100×.
dapat dipantau secara gravimetri. Produk
asetilasi seharusnya memiliki bobot yang lebih
besar dibandingkan dengan sebelum asetilasi.
Hal ini disebabkan adanya substitusi gugus
hidroksil (–OH) dengan gugus asetil
(CH3COO-). Hasil yang diperoleh
menunjukkan adanya penurunan bobot produk
(Lampiran 4). Penurunan bobot produk ini
selama proses pencucian produk. Oleh karena
itu, evaluasi keberhasilan modifikasi dilakukan
dengan menentukan derajat substitusi.

Derajat Substitusi, Bobot Molekul, dan

Modifikasi Selulosa
Modifikasi selulosa ampas tebu dilakukan
dengan cara asetilasi. Contoh yang digunakan
untuk modifikasi adalah contoh yang diperoleh
dari tahapan delignifikasi dengan NaOH, hasil
delignifikasi dengan NaClO2, dan hasil aktivasi
dengan H2SO4. Semua produk asetilasi
berwarna pucat (Gambar 3). Sementara itu,
tekstur produk yang dihasilkan berbeda-beda.
Tekstur produk asetilasi dari contoh yang
didelignifikasi NaOH (SA2) dan NaClO2 (SA3)
masih berbentuk serat kasar dan sedikit keras,
Derajat Polimerisasi
Derajat substitusi (DS) diperoleh dengan
menentukan kadar asetil produk-produk
asetilasi. Penentuan kadar asetil dilakukan
secara titrimetri berdasarkan kebutuhan NaOH
dalam penyabunan gugus ester selulosa asetat
pada medium etanol. Tabel 1 menyajikan
derajat substitusi, bobot molekul, dan derajat
polimerisasi beberapa produk asetilasi.

Tabel 1 Derajat substitusi, bobot molekul, dan derajat polimerisasi berbagai produk asetilasi

Jenis Kadar air Kadar M

DS [η] (ml/g) DP
Produk (%) asetil (%) (g mol-1)
SA2 14.12 1.83 0.07 139.41 58,577 509
SA3 18.13 21.20 1.01 149.03 62,616 367
SA4 7.63 38.91 2.37 172.59 72,516 289
Ket: SA2=produk asetilasi dari contoh hasil delignifikasi NaOH, SA3=produk asetilasi dari conth hasil delignifikasi
NaClO2, dan SA4=produk asetilasi dari contoh hasil aktivasi H2SO4, DS=derajat substitusi, η=viskositas intrinsik, M=bobot
molekul, dan DP=derajat polimerisasi
 DS berbagai produk asetilasi memiliki
nilai yang berbeda-beda. Hal ini menunjukkan
adanya pengaruh perlakuan terhadap derajat
subsitusi. Nilai DS suatu bahan dapat
digunakan untuk melihat kelarutan bahan
tersebut dalam berbagai pelarut (Brandrup &
Immergut 1975, Steinmeier 2004).
Derajat substitusi produk asetilasi dari
contoh hasil delignifikasi dengan NaOH adalah
0.07. Hal ini disebabkan kandungan lignin
dalam contoh masih tinggi. Keberadaan lignin
dalam ampas tebu menghalangi proses asetilasi
sehingga pereaksi sulit untuk menjangkau
gugus hidroksil selulosa yang akan disubstitusi
dengan gugus asetil.
Produk asetilasi dari contoh hasil
delignifikasi dengan NaClO2 (A3) memiliki
DS=1.01. Kandungan lignin yang terdapat
dalam contoh ini diharapkan lebih kecil jika
dibandingkan dengan contoh hasil delignifikasi
dengan NaOH, sehingga derajat substitusi
produk asetilasinya lebih tinggi daripada
produk asetilasi contoh hasil delignifikasi
dengan NaOH.
Derajat substitusi produk asetilasi hasil
aktivasi dengan asam adalah 2.37. Hal ini
didukung oleh mikrograf SEM. Tekstur contoh
hasil aktivasi memiliki banyak fragmen serat
selulosa yang berukuran lebih kecil jika
dibandingkan dengan contoh hasil delignifikasi
dengan NaClO2 (contoh sebelum aktivasi
asam) yang berbentuk serat kasar berukuran
besar. Fragmen-fragmen kecil serat selulosa
pada contoh hasil aktivasi H2SO4 menyebabkan
tapak aktif selulosa menjadi lebih banyak,
sehingga probabilitas substitusi gugus asetil
pada contoh ini menjadi lebih besar.
Keberhasilan modifikasi selulosa dengan
asetilasi juga dapat dipantau melalui penentuan
kadar air produk asetilasi. Modifikasi dengan
asetilasi menyebabkan gugus hidroksil pada
selulosa ampas tebu akan tersubstitusi oleh
gugus asetil yang bersifat lebih nonpolar
sehingga produk asetilasinya menjadi kurang
higroskopis karena kemampuan menjerap air
dari gugus ester pada selulosa asetat tidak
sebaik gugus alkohol pada selulosa. Secara
umum, kadar air produk asetilasi sesuai dengan
nilai derajat substitusinya. Semakin besar
derajat substitusi maka kadar airnya semakin
kecil.
Nilai derajat substitusi menunjukkan
perubahan molekul produk modifikasi.
Semakin tinggi nilai derajat substitusi semakin
besar molekul produk asetilasi, sehingga
hambatan alir molekul tersebut lebih tinggi.
Molekul besar memiliki substitusi polimerisasi
yang lebih rendah dibandingkan dengan
dengan molekul berbobot kecil. Oleh karena
itu, derajat polimerisasi produk asetilasi
menurun dengan meningkatnya derajat
substitusi.
Pencirian Spektrum FTIR
Spektrum inframerah contoh ampas tebu
hasil pencucian dengan air (A1) dan aktivasi
dengan asam (A4) menunjukkan pola spektrum
khas selulosa (Gambar 4). Delignifikasi
menurunkan intensitas serapan –OH pada
bilangan gelombang 3356–3361 cm-1.
Keberadaan lignin pada contoh hasil pencucian
dengan air (A1) dan delignifikasi dengan
NaOH (A2) ditandai dengan serapan pada
bilangan gelombang 1470 dan 1651 cm-1 yang
merupakan pita serapan vibrasi ulur kerangka
aromatik (Silverstein et al. 2005). Hal ini
menunjukkan bahwa selulosa pada A2 masih
terlindungi oleh lignin sehingga proses asetilasi
terhambat (DS=0.07). Ketidakberadaan serapan
lignin pada contoh ampas tebu A3 dan A4
menunjukkan bahwa proses delignifikasi
dengan NaClO2 dan aktivasi H2SO4 dapat
menghilangkan lignin.
Keberhasilan modifikasi asetilasi pada
contoh A4 ditunjukkan dengan adanya serapan
C=O pada bilangan gelombang 1759 cm-1. Hal
ini diperkuat dengan adanya serapan –C–O–
pada bilangan gelombang 1244–1267 cm-1
(Gambar 5). Kekuatan serapan ulur C=O sesuai
dengan besarnya nilai derajat substitusi.
Spektrum produk SA2 dan SA3 memiliki
serapan –OH pada bilangan gelombang 3200
cm-1 yang menunjukkan bahwa gugus –OH
pada struktur selulosa tidak terasetilasi semua.
Hal ini dibuktikan dengan nilai derajat
substitusi yang diperoleh SA2 dan SA3, yaitu
berturut-turut 0.07 dan 1.01. Spektrum semua
produk asetilasi ampas tebu tidak menunjukkan
keberadaan anhidrida asetat yang memiliki
serapan pada bilangan gelombang 1800, 1750,
dan 1020 cm-1 (Pavia et al. 2001 & Silverstein
et al. 2005).
Pemisahan Ekstrak Temu Lawak
Komponen dalam ekstrak temu lawak
dipisahkan dengan cara kromatografi kolom.
Fase diam yang digunakan adalah produk
asetilasi ampas tebu hasil aktivasi H2SO4
(SA4), karena memiliki derajat substitusi yang
mendekati pustaka, yaitu 2.46 (Bandrup &
Immergut 1975). Fase gerak yang digunakan
merupakan fase gerak terbaik, yaitu toluena.
 100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
3871 3582 3292 3003 2714 2425 2135 1846 1557 1267 978 689 399
cm-1
Gambar 4 Spektrum FTIR ampas tebu: biru=tercuci air, merah muda=delignifikasi dengan NaOH,
merah=delignifikasi dengan NaClO2, biru muda=aktivasi dengan H2SO4.

100

90

80

70

60

50

40

30

20

10

0
3871,13 3485,37 3099,61 2713,84 2328,08 1942,32 1556,55 1170,79 785,028 399,265
cm -1

Gambar 5 Spektrum FTIR produk asetilasi: merah muda=delignifikasi dengan NaOH,

biru=delignifikasi dengan NaClO2, merah=aktivasi dengan H2SO4.
 Pemilihan fase gerak terbaik dilakukan Hal ini dimungkinkan fase gerak yang
dengan melarutkan SA4 dalam beberapa pelarut digunakan bukan fase gerak terbaik untuk
organik yang memiliki sifat kepolaran berbeda- memisahkan senyawa kurkuminoid dari
beda, di antaranya heksana, toluena, kloroform, senyawa lain yang ada pada ekstrak etanol
dietil eter, etil asetat, etanol, air, aseton, temu lawak. Data tersebut diperkuat dengan
metanol, piridin, dan xilena. Dari semua pelarut hasil elusi toluena pada plat KLT silika gel
organik tersebut, hanya heksana, toluena, yang menunjukkan bahwa standar kurkuminoid
piridin, dan xilena yang tidak melarutkan SA4 memiliki 2 bercak.
(Lampiran 5a). Karena itu, keempat pelarut
Tabel 2 Hasil KLT eluat kromatografi kolom
tersebut dijadikan fase gerak dalam mengelusi
ekstrak temu lawak dengan fase diam
ekstrak etanol temu lawak dan standar
SA4
kurkuminoid dengan KLT.
Fase gerak terbaik memiliki daya pisah Nilai Rf Bercak Ke-
komponen contoh yang baik, di antaranya Tabung
menghasilkan bercak banyak dan teratur. 1 2 3 4 5 6 7
Pelarut toluena menghasilkan bercak lebih Ekstrak 0.03 0.12 0.21 0.44 0.49 0.53 0.90
banyak daripada keempat pelarut yang tidak standar 0.03 - - 0.43 - - -
melarutkan SA4 tersebut (Gambar 6). 8 - - 0.38 0.43 - - -
11 - - 0.18 - - - -
14 - - 0.29 - - - -
20 - - - - - 0.70 -
23 - - - - - - -
33 - - 0.28 - - - 0.85
Fase - - - - - - -
gerak

Hasil kolom SA4 memiliki pengotor yang

a b c d ditunjukkan pada tabung 14 sampai 20 (Tabel
2). Selain itu, penggunaan toluena sebagai fase
Gambar 6 Kromatog KLT dengan fase gerak gerak menyebabkan sebagian komponen
(a) heksana, (b) toluena, (c) piridin, ekstrak etanol temu lawak tidak terelusi pada
(d) xilena. fase diam SA4. Hal ini ditunjukkan dengan
ketidakberadaan bercak dengan nilai Rf
Standar kurkuminoid yang digunakan terendah pada semua tabung dan hasil analisis
memiliki konsentrasi 20 mg/25 ml. UV-tampak pada Gambar 7b.
Berdasarkan Batubara et al. (2004) standar
kurkuminoid menghasilkan 3 puncak terpisah Tabel 3 Hasil KLT eluat kromatografi kolom
dalam analisis kromatografi cairan kinerja ekstrak temu lawak dengan fase diam
tinggi (KCKT). Hal ini menunjukkan bahwa silika gel
dalam standar kurkuminoid terdapat 3
senyawa, yaitu kurkuminoid, Nilai Rf Bercak Ke-
Tabung
desmetoksikurkumin, dan bis-
1 2 3 4 5 6 7
desmetoksikurkumin. Berdasarkan struktur
ketiga senyawa tersebut, senyawa kurkuminoid Ekstrak 0.04 0.13 0.18 0.26 0.39 0.53 0.93
yang memiliki 2 gugus metoksi (–OCH3) Standar 0.04 - - 0.21 - - -
bersifat lebih polar daripada senyawa 7 - - - - 0.37 - -
desmetoksikurkumin yang memiliki satu gugus 8 - - - 0.20 - 0.50 -
metoksi dan senyawa bis-desmetoksikurkumin 9 0.04 - 0.16 - - - -
yang tidak memiliki gugus metoksi. Oleh 11 0.04 0.11 - - - 0.53 -
karena itu, senyawa kurkuminoid akan tertahan 13 0.04 - - - - - -
lebih lama di dalam fase diam sehingga 18 0.05 - - - - - -
menghasilkan bercak dengan nilai Rf lebih 24 - - - - - - -
rendah. 30 - - - - - 0.53 0.67
Hasil elusi kolom baik SA4 maupun silika
gel menunjukkan bahwa senyawa kurkuminoid
tidak terpisahkan sempurna (Tabel 3 dan 4).
 Kolom silika gel berhasil mengeluarkan
hampir semua komponen yang ada pada
ekstrak etanol temu lawak. Hal ini ditunjukkan
dengan keberadaan semua bercak dengan nilai
Rf terendah sampai tertinggi (Tabel 3).
Walaupun demikian, kedua fase diam tersebut
masing-masing menghasilkan 3 fraksi, yaitu
pada tabung 8, 11, dan 33 untuk fase diam SA4
(DS=2.37) dan pada tabung 7, 13, dan 30 untuk
silika gel. Oleh karena itu, diperlukan analisis
lebih lanjut mengenai fase gerak terbaik untuk
menghasilkan pola pemisahan komponen
ekstrak etanol temu lawak yang lebih baik.
Sebagai perbandingan, pola pemisahan produk
asetilasi pada pemisahan komponen ekstrak a
etanol temu lawak dengan derajat substitusi
kurang dari 2 yang menggunakan
kloroform:etil asetat (85:15) sebagai fase gerak
tidak menghasilkan komponen tunggal (Irfana
2010 & Cahyani 2010).

Analisis UV-tampak
Analisis UV-tampak dilakukan terhadap
fase diam sebelum dan sesudah elusi. Hal ini
dilakukan untuk mengetahui keberadaan
komponen ekstrak etanol temu lawak yang
tertahan dalam fase diam SA4. Etanol
digunakan untuk melarutkan pengotor dan
ekstrak etanol temu lawak yang mungkin b
tertahan di fase diam.
Fase diam SA4 sesudah elusi menunjukkan Gambar 7 Spektrum UV-tampak ekstrak etanol
kenaikan serapan dari sebelum elusi pada fase diam produk asetilasi ampas
panjang gelombang 300–480 nm (Gambar 7a tebu teraktivasi H2SO4 (a) sebelum
dan 7b). Serapan tersebut menunjukkan elusi, (b) sesudah elusi.
keberadaan ekstrak etanol temu lawak dalam
fase diam SA4. Ekstrak etanol temu lawak
memiliki serapan pada panjang gelombang
220–500 nm (Cahyani 2010). Hal ini
membuktikan bahwa sebagian komponen
SIMPULAN DAN SARAN
ekstrak etanol temu lawak pada fase diam SA4 Simpulan
tidak terelusi.
Modifikasi selulosa ampas tebu dengan
cara asetilasi dipengaruhi oleh keberadaan
senyawa-senyawa selain selulosa dan
morfologi permukaan serat selulosa. Bobot
molekul meningkat sedangkan derajat
polimerisasi menurun dengan meningkatnya
derajat substitusi. Bobot molekul berkisar
antara 58,577–72,516 g mol-1 dan derajat
polimerisasi berkisar antara 289–509. Produk
asetilasi dari ampas tebu dapat digunakan
sebagai media separator pada kromatografi
kolom.
 Saran cellulose acetylation. Carbohydr Polym
69:579-582.
Penelitian lebih lanjut perlu dilakukan.
Beberapa di antaranya adalah mencari fase
Direktorat Jenderal Perkebunan. 2010. Luas
gerak terbaik yang tidak melarutkan pelarut
Areal dan Produksi Perkebunan Seluruh
produk asetilasi ampas tebu, pencirian lebih
Indonesia Menurut Pengusahaan.
lanjut menggunakan AFM dan XRD untuk
http://dirjenperkebunan.com/2010/luas-
melihat pengaruh perlakuan aktivasi dengan
area-dan-produksi/indeks [29 Jan 2010]
asam terhadap morfologi permukaan serat
selulosa ampas tebu, dan mengevaluasi kinerja
media separator untuk pemisahan senyawa Fengel D, Wegener G. 1989. Wood Chemistry
bahan alam lainnya. Ultrastructure Reactions. New York:
Walter de Gruyter.

Irfana L. 2010. Asetilasi selulosa ampas sagu

dengan katalis I2 dan aplikasinya sebagai
DAFTAR PUSTAKA
fasa diam kromatografi kolom [skripsi].
Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
[ASTM] American Society for Testing
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Material. 1991. ASTM D871: Standard
Bogor.
Methods of Testing Cellulose Acetate.
Philadelphia: ASTM.
Iskandar L, Heri AP, Enggar H. 2009. Studi
Awal Mengenai Pembuatan Surfaktan dari
Batubara I, Yusnira, Darusman LK. 2004.
Ampas Tebu. Semarang: Universitas
Penentuan kadar kurkuminoid pada temu
Diponegoro.
lawak menggunakan metode spektroskopi
dan kromatografi cair kinerja tinggi. Di
Netty MR. 2006. Pemanfaatan onggok
dalam: Anam K, editor. Prosiding Seminar
singkong ternitrasi dan terasetilasi sebagai
Nasional Hasil Penelitian MIPA 2004;
fase diam kromatografi kolom [skripsi].
Semarang, 4 Des 2004. Semarang:
Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Diponegoro. hlm 57-60. Bogor.

Pavia DL, Lampman GM, Kriz GS. 2001.

Bhattacharya D, Germinario LT, Winter WT.
Introduction To Spectroscopy. Ed ke-3.
2008. Isolation, preparation and
Washington: Thomson Learning.
characterization of cellulose microfibers
obtained from bagasse. Carbohydr Polym
73:371-377. [SNI] Standar Nasional Indonesia. 1991. SNI
06-2115-1991: Selulosa Asetat. Jakarta:
Badan Standarisasi Nasional.
Brandrup J, Immergut EH. 1975. Polymer
Handbook. Ed ke-2. New York: J Wiley.
Samsuri et al. 2007. Pemanfaatan selulosa
bagas untuk produksi etanol melalui
Cahaya A, Nugroho DA. 2007. Pembuatan
sakarifikasi dan fermentasi serentak
Kompos dengan Menggunakan Limbah
Padat Organik (Sampah Sayuran dan dengan enzim xylanase. Makara Teknol
Ampas Tebu). Semarang: Universitas 11:17-24.
Diponegoro.
Santi. 2006. Onggok sagu termodifikasi
sebagai fase diam dalam kromatografi
Cahyani RD. 2010. Asetilasi selulosa ampas
kolom [skripsi]. Bogor: Fakultas
sagu dan aplikasinya sebagai fase diam
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,
kromatografi kolom [skripsi]. Bogor:
Fakultas Matematika dan Ilmu Institut Pertanian Bogor.
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor. Sassi JF, Chanzy H. 1995. Ultrastructural
aspects of the acetylation of cellulose.
Cellulose 2:111-127.
Cerqueira DA, Filho GR, Meireles CS. 2007.
Optimization of sugarcane bagasse
Sastrohamidjojo H. 1995. Kayu: Kimia, Stevens MP. 2007. Kimia Polimer. Sopyan I,
Ultrastruktur, Reaksi-reaksi. Yogyakarta: penerjemah. Jakarta: PT Pradnya Paramita.
Gajah Mada Univ Pr. Terjemahan dari Polymer Chemistry.

Shaikh HM et al. 2009. Utilization of Sun JX et al. 2004. Isolation and

sugarcane baggase cellulose for producing characterization of cellulose from
cellulose acetates: Novel use of residual sugarcane bagasse. Polym Degrad
hemicellulose as plasticizer. Carbohydr Stability 84:331-339.
Polym 76:23-29.
Widodo Y. 2006. Penggunaan Bagas Tebu
Silverstein RM, Webster FX, Kiemle DJ. 2005. Teramoniasi dan Terfermentasi dalam
Spectrometric Identification of Organic Ransum Ternak Domba. Lampung:
Compounds. Ed ke-7. New York: J Will. Universitas Lampung.

Steinmeier H. 2004. Acetate manufacturing,
process and technology. Macromol Symp
208:49-60.
Wijanarko A, Witono JA, Wiguna MS. 2006.
Tinjauan komprehensif perancangan awal
pabrik furfural berbasis ampas tebu di
Indonesia. Indones Oil Gas Community
8:1-10.
LAMPIRAN
Lampiran 1 Bagan alir penelitian

Ampas Tebu Pencirian: Analisis

Komposisi Kimia
(Proksimat)

Pencirian Selulosa:
Densitas, Viskositas, Preparasi
DP, dan BM Ampas Tebu

Modifikasi Asetilasi
(Cequeira et al. 2007)

FTIR, dan
Selulosa Asetat (3 penentuan derajat
Temu lawak prototipe) asetilasi

Aplikasi Kromatografi Kolom

Ekstrak Temu sebagai Fase diam (1prototype
lawak terbaik) UV Vis

Fraksi-fraksi dari
berbagai kolom

Analisis KLT
(Pelat Silika Gel)

Perhitungan Rf dan
dibandingkan dengan standar
Lampiran 2 Bagan preparasi proses isolasi selulosa ampas tebu (Modifikasi Bhattacharya et al.
2008 dan Sun et al. 2004)

Ampas tebu segar

Pencucian dengan air keran, pengeringan pada suhu 60 °C selama 16 jam

Ampas tebu (A0)

Pencucian dengan akuades pada suhu kamar hingga filtrat tidak berwarna, pengeringan
pada suhu 50 °C hingga bobot konstan

Ampas tebu (A1)

Delignifikasi dengan NaOH 4% pada suhu 80 °C selama 4 jam, pencucian dengan akuades
hingga pH filtratnya tidak berubah, pengeringan pada suhu 50 °C hingga bobot konstan

Ampas tebu terdelignifikasi NaOH (A2)

Delignifikasi dengan NaClO2 1.3% yang diasamkan dengan asam asetat glasial sampai pH
3.5–4, pada suhu 75 °C selama 2 jam, pencucian dengan NaOH 5% dan air hingga pH air
pencucian netral, pengeringan pada suhu 50 °C hingga bobot konstan

Ampas tebu terdelignifikasi NaClO2 (A3)

Pensuspensian dalam akuades hingga suhu 75 °C, sonikasi selama 10 menit, refluks dengan
asam sulfat 60% (b/v) pada suhu 60 °C selama 2.5 jam, penambahan air es, pencucian
dengan akuades, dispersi selama 5 menit, pengeringan pada suhu 105 °C selama 3 jam

Ampas tebu teraktivasi H2SO4 (A4)

Lampiran 3 Bagan proses asetilasi (Cerqueira et al. 2007)

1 g A2, A3, A4 ditambahkan 25 ml asam asetat glasial

(diaduk selama 30 menit dengan pengaduk magnet)

ditambahkan 0.08 mL asam sulfat pekat dan 9 mL asam asetat glasial

(diaduk selama 25 menit dengan pengaduk magnet)

ditambahkan 32 mL anhidrida asetat

(diaduk selama 30 menit dengan pengaduk magnet)

didiamkan selama 14 jam pada suhu 28 °C

dicuci dengan akuades hingga pH netral

dikeringkan pada suhu 50 °C hingga bobot konstan

ampas tebu terasetilasi (SA2, SA3, SA4)

Lampiran 4 Data modifikasi ampas tebu, penentuan kadar asetil, pencirian produk asetilasi ampas
tebu, dan mekanisme asetilasi dengan katalis H2SO4

a) Pembuatan selulosa asetat

Cawan kosong
Tipe Bobot awal (g) Cawan isi (g) Bobot akhir (g)
(g)
NaOH 2.0034 43.3189 44.4064 1.0675
NaClO2 2.0164 33.6817 35.4034 1.7217
H2SO4 1.8739 44.6596 47.6023 2.9427

b) Penentuan kadar asetil

Kadar air produk asetilasi ampas tebu
Rerata
Bobot awal Labu kosong Bobot akhir Kadar air
Tipe Labu isi (g) kadar air
(g) (g) (g) (%)
(%)
NaOH 0.5064 79.7795 80.2144 0.4349 14.1193 14.1193
0.5050 75.2338 75.6478 0.4140 18.0198
NaClO2 18.1341
0.5058 114.3156 114.7291 0.4135 18.2483
0.5225 112.3878 112.8694 0.4816 7.8276
H2SO4 7.6306
0.5112 126.1638 126.6370 0.4732 7.4335
Perhitungan:

Bobot awal (g) - Bobot akhir (g)

Kadar air   100%
Bobot awal (g)

Standarisasi HCl 0.5 N dengan Boraks (Na2BO4·10H2O)

Bobot Boraks : 4.7754 g
Volume : 50 ml
BE Boraks : 190.6825 g/ekivalen
[Boraks] : 0.5009 N
Penentuan [HCl] dengan boraks 0.05009 N
Volume boraks awal Volume boraks akhir Volume boraks terpakai
[HCl] (N)
(ml) (ml) (ml)
1.00 10.70 9.70 0.5164
10.70 20.70 10.00 0.5009
20.70 30.50 9.80 0.5111
Rataan [HCl] : 0.5095 N

Standarisasi NaOH 0.5 N dengan Asam Oksalat (H2C2O4·2H2O)

Bobot Asam oksalat : 1.6054 g
Volume : 50 ml
BE Asam oksalat : 63.035 g/ekuivalen
[Asam oksalat] : 0.5094 N
Penentuan [NaOH] dengan Asam oksalat 0.5094 N
Volume oksalat awal Volume oksalat akhir Volume oksalat terpakai
[NaOH] (N)
(ml) (ml) (ml)
2.00 12.10 10.10 0.5044
12.10 22.20 10.10 0.5044
22.20 32.20 10.00 0.5094
Rerata [NaOH]: 0.5061 N
Kadar asetilasi dan derajat substitusi
Volume
Bobot Volume Rerata
NaOH Kadar Derajat
Tipe contoh HCl 0.5095 derajat
0.5061 N asetil (%) substitusi
kering (g) N (ml) substitusi
(ml)
Blangko - 20.70 0.1 - - -
NaOH 0.4349 20.40 0.2 1.8255 0.0700 0.0700
0.4140 16.60 0.2 22.2483 1.0709
NaClO2 1.0082
0.4135 17.00 0.2 20.1534 0.9454
0.4816 12.80 0.3 36.8845 2.1722
H2SO4 2.3705
0.4732 11.90 0.2 40.9275 2.5688

Perhitungan:
[Vol blangko – Vol contoh] HCl (ml) × N HCl +
[Vol contoh – Vol blangko] NaOH (ml) × N NaOH
Kadar Asetil (%) = × 4.305
Bobot contoh kering (g)

162  KA
DS 
[4300  (42  KA)]

c) Pencirian produk asetilasi ampas tebu

Densitas produk asetilasi ampas tebu
Bobot Bobot larutan & Bobot Volume Densitas
Tipe
piknometer (g) piknometer (g) larutan (g) (ml) (g/ml)
NaOH 14.9234 34.5904 19.6670 25 0.7867
NaClO2 14.9485 34.6363 19.6878 25 0.7875
H2SO4 14.9458 34.6955 19.7497 25 0.7880

Konsentrasi larutan produk asetilasi ampas tebu

Bobot Bobot Bobot contoh & Bobot Konsentrasi
Tipe
wadah (g) contoh (g) wadah (g) kering (g) (g/ml)
NaOH 88.5779 0.1300 88.7039 0.1260 0.0025
NaClO2 79.7645 0.1339 79.8950 0.1305 0.0026
H2SO4 74.0258 0.1325 74.1469 0.1211 0.0024

Perhitungan:
Bobot contoh kering (g)
Konsentrasi larutan =
Volume pelarut (ml)

Viskositas intrinsik dan bobot molekul produk asetilasi ampas tebu

Tipe
Waktu (detik) η nisbi [η] (ml/g) M (g/mol)
Blangko 49.54 - - -
NaOH 69.78 1.4086 139.4130 58,576.8908
NaClO2 72.45 1.4625 149.0251 62,615.5882
H2SO4 74.34 1.5006 172.5891 72,516.4286
 Derajat polimerisasi produk asetilasi ampas tebu
Tipe DS DS * asetil BM per unit DP
NaOH 0.0700 4.1300 115.1300 508.7891
NaClO2 1.0082 59.4838 170.4838 367.2817
H2SO4 2.3705 139.8595 250.8595 289.0719
Perhitungan:
Waktu contoh (detik)
η nisbi =
Waktu blangko (detik)

10 Log η nisbi
[η] = {antilog - 1}
C 10

[η] = K Mα

Rumus molekul selulosa asetat: [C6H7O2 (COOCH3)x]y

dengan x: derajat substitusi (DS)
y: derajat polimerisasi (DP)
BM asetil (COOCH3): 59 g/mol
BM C6H7O2: 111 g/mol

BM per unit = (DS X BM asetil) + BM C6H7O2

M
DP =
BM per unit
d) Mekanisme reaksi asetilasi selulosa dengan katalis H2SO4

OSO3H O O
OSO3H
2. O HO SO
HO3SO
O
3

O
+ H3C C O C CH3
OSO3H
OSO3H

O O O O
3.
H 3C C O C CH 3 + HO SO3 H H3 C C O SO 3H +H C
3 C OH

OH OH 2
OH 2
O OH H O
4. HO H O
O O 2
HO O H 2O O
OH OH 2
OH OH 2

OS O 3 H O
O SO 3H
O
HO 3SO
H O 3S O
O + H 3C C OH 2
O
O SO 3H
OSO 3H
Lampiran 5 Penentuan fase gerak terbaik

a. Uji kelarutan
Kelarutan produk asetilasi ampas tebu teraktivasi H2SO4

Pelarut Kelarutan
Heksana -
Toluena -
Kloroform ++
Dietil eter +
Etil asetat ++
Etanol +
Air +
Aseton ++
Metanol +
Piridin -
Xilena -
Keterangan: (+): larut
(-): tidak larut

b. Uji KLT ekstrak etanol temu lawak

Bercak hasil KLT ekstrak etanol temu lawak pada berbagai eluen
Eluen Bercak ekstrak etanol temu Standar kurkuminoid
lawak
toluena:heksana
0:100 0.06; 0.10
15:85 0.14; 0.19; 0.27
25:75 0.04; 0.21; 0.22; 0.31
50:50 0.02; 0.21; 0.26; 0.33
75:25 0.01; 0.07; 0.28; 0.40
85:15 0.02; 0.06; 0.29; 0.38
100:0 0.04; 0.12; 0.36; 0.46
piridin:toluena
0:100 0.04; 0.56; 0.93 0.05
10:90 0.13; 0.20 0.16
20:80 0.40; 0.48 0.44
25:75 0.66; 0.85 0.69
50:50 Pecah 0.80
75:25 Pecah 0.82
100:0 Pecah 0.89
Xilena Pecah Tidak ada
 15:85 85:15 25:75 50:50 15:18
i) Kromatogram KLT eluen heksana:toluena

25:75 50:50 75:25 80:20 90:10

ii) Kromatogram KLT eluen pirirdina:toluena