PEMBUATAN OVULA KOMBINASI Laktobasillus-METRONIDAZOL

DENGAN BASIS PEG (POLIETILEN GLIKOL)

Patricia Pretty Ayu Alviony 1 ) Siti Sa’diah 2), 3) dan Erni Rustiani 1)
1)
Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Pakuan
Bogor
2)
Departemen Anatomi, Fisiologi dan Farmakologi Fakultas Kedokteran Hewan IPB
3)
Pusat Studi Biofarmaka LPPM IPB

Abstrak
Telah dilakukan penelitian Pembuatan ovula kombinasi Laktobasillus-
Metronidazol dengan Basis PEG (Polietilen Glikol). Tujuan penelitian ini adalah
membuat ovula kombinasi Laktobasillus-Metronidazol dengan 2 (dua) metode
pembuatan, menentukan stabilitas sediaan ovula pada penyimpanan suhu sejuk 5o-
15o C dan suhu kamar 25o-30o C selama 2 (dua) bulan, dan menentukan
pertumbuhan mikroorganisme Laktobasillus dalam sediaan ovula. Sediaan dibuat
dalam 5 Formula. Parameter pengujian meliputi organoleptik, keseragaman bobot,
waktu hancur, dan kelangsungan hidup Laktobasillus. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa ovula Laktobasillus-Metronidazol dapat dibuat dengan 2 (dua) metode
pembuatan yaitu ovula konvensional dan ovula tipe berongga. Sediaan ovula stabil
selama 2 bulan pada penyimpanan suhu sejuk 5o-15o C dan suhu kamar 25o-30o C dan
Laktobasillus masih dapat terdeteksi dalam sediaan ovula selama pengujian 2 bulan
(8 minggu).
Kata Kunci : Laktobasillus, Metronidazol, Ovula.

Abstract
Preparation of the research has been done ovules Laktobasillus-Metronidazole
combination with base PEG (Polyethylene Glycol). The purpose of this study is to make
the ovules Laktobasillus-Metronidazole combination with two methods of making,
determining the storage stability of the dosage ovules at cool temperatures 5 o-15o C and
room temperature of 25o-30o C for 2 (two) months, and determines the growth of
microorganisms Laktobasillus ovules dosage. Preparations were made in five Formula.
Parameters include organoleptic testing, uniformity of weight, disintegration time, and
survival Laktobasillus. The results showed that the ovules Laktobasillus-Metronidazole
can be made with two methods of making the conventional ovules and ovules hollow
type. Ovules dosage stable for 2 months at a cool temperature storage 5 o-15o C and room
temperature of 25o-30o C and Laktobasillus can still be detected in the ovule
preparations for testing 2 months (8 weeks)
Keywords: Laktobasillus, Metronidazole, Ovules.
PENDAHULUAN Formulasi Sediaan Ovula
Wanita sangat rentan dengan berbagai
penyakit kewanitaan. Salah satu penyakit Tabel 1. Tabel Formulasi Sediaan
umum yang sering dialami oleh wanita
Bahan Formula Formula Formula Formula
adalah Vaginitis atau lebih dikenal dengan I II III IV & V
keputihan. Penyebab umumnya adalah
ketidakseimbangan mikroflora dalam Laktobasillus 0 mg 0 mg 108 CFU 108 CFU
vagina serta ketidakstabilan tingkat
Metronidazol 0 mg 500 mg 0 mg 500 mg
keasaman (pH) vagina dengan pH 3,5-4,5
Salah satu bakteri anaerob yang hidup dan PEG 400 1 bagian 1 bagian 1 bagian 1 bagian
sangat mempengaruhi keseimbangan
vagina adalah bakteri Laktobasillus. PEG 4000 1 bagian 1 bagian 1 bagian 1 bagian
Antimikroba yang dapat digunakan untuk
Total 3000 mg 3000 mg 3000 mg 3000 mg
keputihan adalah Metronidazol. Oleh
karena aktivitas yang baik dari
Metronidazol terhadap bakteri anaerob,
Pembuatan Sediaan Ovula
maka dibuat kombinasi Laktobasillus-
Sediaan ovula Laktobasillus-
Metronidazol dengan basis PEG (Polietilen
Metronidazol dibuat dengan 2 metode
glikol). Penelitian ini bertujuan untuk
pembuatan. Formula I-Formula IV dibuat
membuat ovula yang mengandung
dengan metode pembuatan ovula
Laktobasillus dikombinasikan dengan
konvensional, basis dan zat aktif dilebur
Metronidazol dengan 2 (dua) metode,
bersamaan pada saat peleburan basis.
menentukan kestabilan sediaan ovula pada
Formula V dibuat dengan metode ovula
suhu sejuk 5o-15oC dan suhu kamar 25o-
berongga, basis dilebur dahulu dan dicetak
30oC selama 2 (dua) bulan, dan
sebagian, kemudian setelah setengah
menentukan pertumbuhan mikroorganisme
padat, zat aktif dimasukkan ke dalam
Laktobasillus dalam sediaan ovula.
rongga cetakan bersama dengan sisa basis.
METODE PENELITIAN
Bahan Pembuatan Ovula Konvensional
Isolat bakteri Laktobasillus yang Basis ovula dilebur pada suhu 70o C dan
didapat dari Laboratorium Mikrobiologi kemudian Laktobasillus-Metronidazol
Departemen Biologi FMIPA IPB, PEG dicampur bersama dengan basis pada suhu
400, PEG 4000, Metronidazol, asam asetat 40o – 45oC. Setelah bercampur homogen,
anhidrat, asam perklorat, asam asetat campuran dituangkan ke dalam cetakan
glasial, larutan buffer fosfat, dan media dan dimasukkan ke dalam lemari
agar MRS (de Man, Rogosa, dan Sharpe). pendingin bersuhu 2o-8o C sampai
membeku. Setelah membeku, ovula
Alat dikeluarkan dari cetakan dan dikemas
Timbangan analitik, gelas piala, spatula, dengan menggunakan aluminium foil.
pengaduk kaca, thermometer, cetakan
ovula, lemari pendingin , penangas air, pH Pembuatan Ovula Berongga
meter, disintegration tester, alat uji waktu Ovula tipe berongga dibuat dengan cara
hancur, disolusi tester, buret, erlemeyer, meleburkan basis pada suhu 70o C
cawan petri dan alat-alat lain yang lazim kemudian dicetak dalam cetakan berongga,
digunakan di laboratorium kimia. setelah basis dalam keadaan setengah
padat yakni pada suhu 40o – 60o C lalu
Laktobasillus-Metronidazol dimasukkan
ke dalam cetakan berongga. Kemudian
dimasukkan ke dalam lemari pendingin
bersuhu 2o-8o C sampai membeku. Setelah
2
membeku, ovula dikeluarkan dari cetakan
dan dikemas dengan menggunakan
aluminium foil.
A.
Laktobasillus-Metronidazol
+ Basis
B.
Laktobasillus-Metronidazol
Basis
Gambar 1. Skema ilustrasi dari ovula
konvensional (A) dan
ovula tipe berongga (B).
Sumber : Kaewnopparat, 2009
Evaluasi Sediaan Ovula
1. Uji Organoleptik
Pada uji organoleptik sediaan yang
dapat diamati meliputi bau, warna, dan
bentuk dari ovula Laktobasillus-
Metronidazol. Uji ini dilakukan selama 2
(dua) bulan dengan pengujian dilakukan
pada tahap awal dan selang 2 (dua)
minggu sekali selama 2 (dua) bulan.
2. Uji Keseragaman Bobot
Uji kesetaraan bobot ovula dilakukan
dengan cara menimbang masing-masing
ovula untuk setiap formula, dilakukan
secara duplo. Berat dari ovula tidak boleh
kurang dan tidak lebih dari 3000 mg ± 7,5
%, jadi tidak kurang dari 2775 mg dan
tidak lebih dari 3225 mg (Depkes, 1995)
3. Uji Waktu Hancur
Pada uji waktu hancur digunakan alat
Desintegration tester. Waktu yang
diperlukan ovula untuk larut sempurna
pada media bersuhu 36-37oC tidak lebih
dari 60 menit untuk basis larut dalam air.
Pengujian ini dilakukan setiap 2 minggu
sekali selama 2 bulan.
4. Uji Kelangsungan Hidup
Laktobasillus
3
Uji kelangsungan hidup
mikroorganisme Laktobasillus dilakukan
dengan cara melarutkan ovula
Laktobasillus-Metronidazol ke dalam
medium disolusi dengan menggunakan
kecepatan 100±1 rpm dan temperature
37±0,50 C. Larutan hasil disolusi kemudian
diambil sebanyak 4 ml dan kemudian
dicampurkan dengan media agar MRS
pada cawan petri dan kemudian diinkubasi
pada kondisi anaerob dengan suhu 370 C
selama 48 jam, dan kemudian setelah 48
jam dilihat apakah masih ada
mikroorganisme Laktobasillus yang hidup
( Kaewnopparat et al, 2009).
5. Uji Stabilitas Sediaan Ovula
Uji stabilitas ovula Laktobasillus-
Metronidazol disimpan pada suhu 5o-15o C
dan pada suhu 25o-30o C (suhu kamar)
selama 2 (dua) bulan. Evaluasi yang
dilakukan meliputi penampilan, bobot
ovula, kehidupan Laktobasillus. Evaluasi
dilakukan setiap 2 (dua) minggu sekali
selama 2 (dua) bulan. (Kaewnopparat et al,
2009)
HASIL DAN PEMBAHASAN
Organoleptik Sediaan Ovula
Pengujian organoleptik sediaan
dilakukan setiap 2 minggu selama 8
minggu pada suhu sejuk (5°C-15°C) dan
suhu kamar (25°C-30°C) meliputi bentuk,
warna dan bau sediaan. Hasil pengujian
stabilitas Formula I-Formula IV dengan
metode pembuatan ovula konvensional
stabil pada suhu sejuk (5°C-15°C) dan suhu
kamar (25°C-30°C) menunjukkan warna
putih, bentuk torpedo, dan tidak berbau.
Formula V dengan pembuatan ovula
berongga stabil pada suhu sejuk (5°C-15°C)
dan suhu kamar (25°C-30°C) menunjukkan
warna sedikit kecoklatan, bentuk torpedo,
dan berbau khas. Bentuk, baud an warna
sediaan stabil dari awal pembuatan sampai
penyimpanan 8 minggu.
Keseragaman Bobot Sediaan Ovula
Uji keseragaman bobot dilakukan
setiap 2 minggu sekali sampai waktu 8
minggu. Bobot ovula yang diinginkan
seberat 3 gram per ovula. Bobot ini
diharapkan tetap stabil selama
penyimpanan 8 minggu. Pada Formula I
bobot rata-rata yang didapat selama
penyimpanan 8 minggu adalah 3,038 mg
dengan kisaran bobot pada Formula I
berkisar 3,01-3,12 gram. Pada Formula II
memiliki kisaran bobot berkisar antara
2,99-3,10 gram dengan bobot rata-rata
yang didapat 3,014 gram. Pada Formula III
memiliki kisaran bobot antara 2,98-3,13
gram. Bobot rata-rata yang didapat untuk
Formula III selama pengujian stabilita
adalah 3,058 gram. Formula IV memiliki
kisaran bobot 2,99-3,14 gram, dengan
bobot rata-rata sebesar 3,032 gram. Bobot
yang dihasilkan dari Formula V yang
memiliki komposisi sama seperti Formula
IV, tapi berbeda dalam metode pembuatan
ini memiliki kisaran bobot antara 2,97-
3,06 gram dengan bobot rata-rata 3,032
gram. Bobot ovula yang dihasilkan harus
memenuhi persyaratan sesuai dengan
Farmakope Indonesia IV (FI IV) .
Persyaratan bobot ovula dalam Farmakope
Indonesia 2775-3225 mg. hasil bobot
ovula yang didapat masuk ke dalam
persyaratan FI.
Waktu Hancur Sediaan Ovula
Sediaan ovula diuji waktu hancur
dengan menggunakan alat disintegration
tester pada suhu 36°C-37°C karena pada
suhu yang demikian sesuai dengan suhu
tubuh tempat ovula akan hancur. Menurut
hasil pengujian waktu hancur yang
didapat, Formula I memiliki kisaran waktu
hancur antara 16-23 menit, baik pada
penyimpanan suhu sejuk maupun suhu
kamar. Rata-rata waktu hancur untuk
Formula I 18 menit. Formula II pada
penyimpanan suhu sejuk memiliki kisaran
waktu hancur 18-23 menit sedangkan
untuk waktu hancur pada penyimpanan
suhu kamar memiliki kisaran waktu 16-18
menit. Waktu hancur untuk penyimpanan
suhu kamar lebih cepat daripada suhu
sejuk, dikarenakan sediaan pada suhu
sejuk memiliki tekstur seperti es, sehingga
4
memerlukan waktu lebih lama untuk
menstabilkan suhu dengan suhu
lingkungan pada media. Formula III pada
penyimpanan suhu sejuk memiliki kisaran
waktu hancur 18-23 menit dan kisaran
waktu hancur pada penyimpanan suhu
kamar berkisar 15-17 menit. Untuk
formula IV memiliki kisaran waktu hancur
19-24 menit untuk penyimpanan suhu
sejuk dan 16-19 menit untuk sediaan pada
penyimpanan suhu kamar. Pada Formula V
dengan komposisi sama seperti Formula
IV berbeda dalam metode pembuatan
memiliki kisaran waktu hancur 17-19
menit untuk sediaan pada penyimpanan
suhu sejuk maupun suhu kamar. Waktu
maksimal yang diperlukan untuk
menghancurkan suppositoria tidak lebih
dari 60 menit untuk suppositoria yang larut
dalam air. (Depkes, 1995).
Uji Kelangsungan Hidup Laktobasillus
Evaluasi uji kehidupan Laktobasillus
dilakukan pada minggu ke-0, minggu ke-4,
dan minggu ke-8. Pengujian hanya
dilakukan pada Formula yang mengandung
Laktobasillus saja yaitu Formula III,
Formula IV, dan Formula V. Formula III
pada penyimpanan suhu sejuk,
kelangsungan hidup Laktobasillus lebih
tinggi dibandingkan dengan penyimpanan
suhu kamar, dikarenakan Laktobasillus
pada suhu penyimpanan 5°C-15°C lebih
terjaga satbil. Formula IV memiliki tingkat
kelangsungan hidup Laktobasillus lebih
rendah dibandingkan dengan Formula V
yang dibuat dengan metode ovula
berongga. Kelangsungan hidup
Laktobasillus pada Formula III, Formula
IV dan Formula V mengalami penurunan
konsentrasi Laktobasillus, hal ini mungkin
disebabkan karena penyimpanan pada suhu
optimum pertumbuhan bakteri. Agar
bakteri lebih awet dapat disimpan pada
suhu yang lebih dingin. Suhu dingin 2o–
8oC berguna untuk pengawetan bakteri,
karena pada suhu dingin bakteri menjadi
inaktiv. Tabel konsentrasi Laktobasillus
(CFU) pada penyimpanan selama 8
minggu (2 bulan).
Formula Penyimpanan Anonim. 1995. Farmakope Indonesia edisi
Minggu ke- IV. Departemen Kesehatan
0 4 8 Republik Indonesia Jakarta.
III A 108 106 104
III B 108 105 103 Ansel. 2005. Pengantar Bentuk Sediaan
IV A 108 104 102 Farmasi. Universitas Indonesia
IV B 108 102 102 Press Jakarta.
VA 108 105 104
VB 108 103 102 Aroutcheva, A., D. Gariti, et al. (2001).
Ket. : A : Penyimpanan suhu sejuk 5o-15oC "Defense factors of vaginal
B : Penyimpanan suhu kamar 25o-30oC lactobacilli." American Journal of
Obstetrics and Gynecology 185(2):
KESIMPULAN 375-379.
Berdasarkan hasil penelitian dapat
disimpulkan bahwa : Beigi, R., M. Austin, et al. (2004).
1. Laktobasillus dengan konsentrasi "Antimicrobial resistance
108CFU dapat diformulasikan sebagai associated with the treatment of
bahan probiotik dalam bentuk bacterial vaginosis." American
kombinasi ovula Laktobasillus- journal of obstetrics and
Metronidazol. gynecology 191(4): 1124-1129.
2. Sediaan ovula Laktobasillus-
Metronidazol stabil pada suhu sejuk Bhalla, P. C., R. Garg,S. (2007).
(5°C-15°C) dan suhu kamar (25oC- "Prevalence of bacterial vaginosis
30oC) selama penyimpanan 2 bulan (8 among women in Delhi, India."
minggu). Indian J Med Res 125(February):
3. Laktobasillus sp. Masih dapat 167-172.
terdeteksi dalam sediaan ovula
Laktobasillus-Metronidazol selama Donati, L., A. Di Vico, et al. (2010).
pengujian 2 bulan (8 minggu). "Vaginal microbial flora and
outcome of pregnancy." Archives
SARAN of Gynecology and Obstetrics
Dalam penggunaannya ovula perlu 281(4): 589-600..
disimpan pada suhu 2oC-8oC, mengingat
pada suhu tersebut dapat digunakan untuk Harris, J. M. 1992. Poly (ethylene glycol).
pengawetan bakteri, sehingga bakteri dapat New York. Plenum Press
hidup lebih lama.
Kaewnopparat, Sanae and Nattha. 2009. “
DAFTAR PUSTAKA Formulation and Evaluation of
Anief. 2006. Ilmu Meracik Vaginal Suppositories Containing
Obat. Universitas Gajah Mada Lactobacillus”. World Academy of
Press Yogyakarta. Science, Engineering and
Technologi
Anonim. 1978. Formularium Nasional
edisi II. Departemen Kesehatan Kale, V. V., R. V. Trivedi, et al. (2005).
Republik Indonesia. Jakarta. “Development and Evaluation of a
Suppository Formulation
Anonim. 1979. Farmakope Indonesia edisi Containing Lactobacillus and Its
III. Departemen Kesehatan Application in Vaginal Diseases,
Republik Indonesia. Jakarta. Annals”. New York Academy of
Sciences. 1056: 359-365.

5
Launer and Dressman. 2000. Teori Dan
Praktek Farmasi Industri.
Universitas Indonesia Press.
Jakarta.

Lachman, L., Lieberman, H. A dan

Kanigh, J.L. 2004. Teori dan
Praktek Farmasi Industri. Vol II.
Edisi III. Terjemahan Siti Suyatmi.
Universitas Indonesia. Jakarta.

Nighswonger, B. D., M. M. Brashears, et

al. (1996). "Viability of
Lactobacillus acidophilus and
Lactobacillus casei in Fermented
Milk Products During Refrigerated
Storage." J. Dairy Sci. 79(2): 212-
219.

Pelczar, M.J., Chan, E.C.S. 1986. Dasar-

Dasar Mikrobiologi jilid 1.
Universitas Indonesia, Jakarta.

Petrova, P., K. Petrov, et al. (2007).

"Probiotic properties of Bulgarian
vaginal lactobacillus isolates."
Comptes Rendus de L'Academie
Bulgare des Sciences 60(8): 871-
878.

Stamer,J.R. 1979. The Lactic Acid

Bacteria. Microbes of Diversity. J.
Food Technol.

Syamsuni, A. 2006. Ilmu Resep. Penerbit

Buku Kedokteran EGC, Jakarta.