PROSEDUR PEWARNAAN ZIEHL-NEELSEN

RSUP Dr.Hasan Sadikin No. Dokumen No. Revisi Halaman

Bandung
HS.1.B50.04.MB 021 06 1/2

Kepala Instalasi
STANDAR Patologi Klinik
Tanggal Terbit
PROSEDUR
OPERASIONAL
2 Juni 2017
Dr. Delita Prihatni, dr., SpPK(K), M.Kes
NIP. 196611151999032001
PENGERTIAN Pewarnaan Ziehl Neelsen adalah tehnik pewarnaan yang
digunakan khusus untuk mewarnai bakteri tahan asam.

TUJUAN Menemukan Batang Tahan Asam pada bahan pemeriksaan

PELAKSANA 1. Analis
2. Dokter Residen Patologi Klinik
3. Dokter Spesialis Patologi Klinik
RUANG LINGKUP Instalasi Laboratorium Klinik RSHS
BAHAN Cairan serebrospinal, cairan tubuh, sputum atau bilasan
PEMERIKSAAN bronkoalveolus, cairan luka, eksudat dan urin
REAGEN 1. Larutan carbol fuchsin 0,3%
2. Larutan asam alkohol 3%
3. Larutan metilen blue 0,1%
METODE Manual
PRINSIP Pewarnaan primer dengan pemanasan akan terikat pada asam
mikolik pada dinding sel Mycobacterium, sesudah dekolorisasi
dengan asam alkohol, warna akan tetap melekat. Pulas tanding
tidak akan merubah warna yang dihasilkan oleh pewarnaan
primer.
ALAT DAN BAHAN 1. Sarung tangan
2. Masker
3. Kacaobjek
4. Ose
5. Bunsen
6. Alas tempat pewarnaan (rangka besi)
PROSEDUR 1. Simpan sediaan di atas rak pewarnaan.
2. Tuangkan carbol fuchsin di atasnya sampai menutupi seluruh
permukaan sediaan.
3. Panasi dari bawah sampai keluar uap (jangan sampai
mendidih) selama 5 menit.
4. Biarkan dingin selama 5-7 menit.
5. Cuci dengan air mengalir untuk menghilangkan kelebihan
carbol fuchsin
 PROSEDUR PEWARNAAN ZIEHL-NEELSEN
RSUP Dr.Hasan Sadikin No. Dokumen No. Revisi Halaman
Bandung
HS.1.B50.04.MB 021 06 2/2

6. Dilakukan dekolorisasi dengan menuangkan asam alkohol

sampai sediaan menjadi pucat, cuci dengan air mengalir
7. Dilakukan pulas tanding dengan menuangkan metilen blue lalu
dibiarkan selama 10-20 detik
8. Sediaan dicuci dengan air mengalir dan dibiarkan kering di
udara
INTERPRETASI Bakteri Batang Tahan Asam berwarna merah, bakteri yang tidak
tahan asam berwarna biru
PUSTAKA ACUAN
1. Prosedur Pemeriksaan Mikrobiologi, Departemen Kesehatan,
Direktorat Jenderal Pelayanan Medik, Direktorat Laborato-rium
Kesehatan 2003.
2. Mahon, Connie R, Manuseis, George, Text Book of Diagnostic
Microbiology,WB Saunders Company, USA 1995.
3. Pedoman Nasional Pengendalian Tuberkulosis. Kementrian
Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jendral Pengendalian
dan Penyehatan 2011
UNIT TERKAIT Laboratorium 24 jam Emergensi, Laboratorium 24 jam rawat inap,
Laboratorium Mikrobiologi
DOKUMEN -
TERKAIT

RIWAYAT DOKUMEN

No. Revisi Tanggal Berlaku Informasi Perubahan

02 1 Mei 2003 Format

03 1 April 2010 Format, Prosedur

04 1 Juni 2014 Pelaksana , Penandatangan

05 1 Desember 2015 Penandatangan, Nomor dokumen

06 2 Juni 2017 -