BAGAN UJI KOEFISIEN FENOL

(AOAC Method)
AOAC (2007) Official Methods of Analysis. 18th Edition,
Association of Official Analytical chemists, Gaithersburg.

Persiapan suspensi bakteri

Inkubasi
pada 37oC Simpan pada
selama 48 jam 2-5 oC
Stock Salmonella

NA

Transfer
Stock culture NB 10 ml hari-1
bulanan

NB 10 ml

Transfer
hari-2
NB 10 ml

NB 10 ml Transfer
hari-3

Kocok, diamkan Inkubasi

15 menit sebelum pada 37oC Transfer
sebelum selama 22-26 jam
hari-4
digunakan.
 Pengenceran Fenol

10 ml
10 ml

Stok Fenol 5%

Aquadest steril 35 ml Aquadest steril 40 ml

Fenol 1:90 Fenol 1:100

Pengenceran Sample

1 ml

1%

Aquadest steril
sample 99 ml 3 ml
2 ml
2 ml

Aquadest steril 6 ml Aquadest steril 5 ml Aquadest steril 6 ml

1:300 1:350 1:400

biakan Salmonella Fenol 1:90 Fenol 1:100 Sample 1:300 Sample 1:350 Sample 1:400

Samakan volume menjadi 5 ml

Tempatkan dalam water bath 20oC, dibiarkan selama 5 menit

 Pengujian Fenol

1 ose
1 ose

1 ose

NB 10 ml NB 10 ml NB 10 ml

5’ 10’ 15’
Fenol 1:90

1 ose
1 ose

1 ose

NB 10 ml NB 10 ml NB 10 ml

5’ 10’ 15’
Fenol 1:100

1 ose
1 ose

1 ose
0,5 ml

NB 10 ml NB 10 ml NB 10 ml Inkubasi
pada 37oC
selama 48 jam
biakan 5’ 10’ 15’
Salmonela Sample 1:300

1 ose
1 ose Uji konfirmasi
jika diperlukan:
1 ose
 perpanjang
waktu
inkubasi
NB 10 ml NB 10 ml NB 10 ml sampai 3 hari,
 streak pada
NA,
5’ 10’ 15’  pemeriksaan
Sample 1:350
mikroskopik
atau
1 ose  aglutinasi
1 ose dengan
antiserum
1 ose typhoid.

NB 10 ml NB 10 ml NB 10 ml

5’ 10’ 15’
Sample 1:400

Dikerjakan dalam water bath 20oC

Kebutuhan Media:

 Nutrien Agar (NA) : 5 plate

 Nutrient broth : 30 tabung @ 10 ml
 NaCl fis. steril : 100 ml
 Aquadest steril : 500 ml
 Phenol 5% : 100 ml

Kebutuhan alat:

 Ose disposable
 Pipet 1 ml
 Pipet 10 ml
 Gelas ukur 100 ml
 Pipet 0,5 ml (500 μl)
 Waterbath 20 ± 0,2 oC
 Bolol steril 100 ml
 Tabung steril 10 ml

Test culture:

Salmonella typhi