Olymphiart 2017

Optogenetik: Inovasi Terapi Berbasis Cahaya dengan Sistem

Pengantaran Sel sebagai Terobosan untuk Tatalaksana Aritmia

Abstrak

Ini merupakan template penulisan karya literature review Olymphiart 2017. Setiap
peserta diwajibkan untuk mengikuti template ini dalam penulisan literature review.
Karya literature review dibuat sesuai dengan tema dan subtema yang disediakan
oleh panitia. Naskah diketik pada kertas A4, spasi single, font type Arial, ukuran 11pt
(terkecuali judul, diketik dengan font 14pt). Batas pengetikan atas, bawah, kiri, kanan
masing-masing sebesar 3 cm, 3 cm, 4cm, 3cm.Naskah ditulis dengan bahasa
Indonesia yang baik dan benar, oleh karena itu kata asing yang belum diubah
kedalam bahasa Indonesia ditulis dengan huruf miring. Abstrak dibuat dalam bahasa
Indonesia danbahasa Inggris, tidak lebih dari 250 kata.

Kata Kunci : aritmia, optogenetik, cahaya, sistem pengantaran sel

Abstract

Pada bagian ini, abstrak ditulis dalam bahasa Inggris. Abstrak mencakup latar
belakang, tujuan, metode, hasil, analisis, diskusi, hingga kesimpulan. Ditulis
dalamsatu paragraf abstrak, bukan ringkasan yang terdiri atas beberapa
paragraf.Ditulis dimiringkan/Italic.

Keywords: arrhythmia, cardiac optogenetic, light, cell delivery system

Pendahuluan berbagai penyakit jantung lainnya..

Hal ini menyebabkan aritmia menjadi
Penyakit kardiovaskular kini menjadi bagian penting dalam permasalahan
sorotan karena menjadi penyebab kesehatan masyarakat. Mekanisme
utama kematian di seluruh dunia. yang mendasari aritmia adalah
World Health Organization (WHO) abnormalitas pada pembentukan
mengungkapkan bahwa sekitar 17,5 sinyal listrik jantung atau konduksinya
juta orang meninggal pada tahun 2012 Selain menyebabkan kematian
akibat penyakit kardiovaskular dan mendadak, aritmia juga dapat
tiga perempat di antaranya terjadi di menyebabkan disabilitas yang
negara berkembang, salah satunya menurunkan kualitas hidup serta
adalah Indonesia.1 meningkatkan biaya pengobatan.2

Kematian akibat serangan jantung Fibrilasi atrium merupakan jenis

mendadak mewakili sekitar 50% dari
total kematian yang berkaitan dengan
penyakit kardiovaskular. Penyebab
utama kematian mendadak adalah
aritmia, yaitu gangguan irama jantung
yang terjadi karena komplikasi dari
aritmia yang paling sering terjadi.
Kejadian fibrilasi atrium lebih sering
ditemukan pada pasien dengan
hipertensi, diabetes, dan/atau gagal
jantung. Meskipun prevalensi fibrilasi
atrium lebih rendah di Asia jika
dibandingkan dengan negara di
wilayah barat, akan tetapi angka
morbiditas serta mortalitasnya masih
lebih tinggi. Kasus terjadinya fibrilasi
atrium yakni sekitar 40 kasus per
100.000 orang per tahunnya di setiap
negara di Asia. Sebagian besar kasus
fibrilasi atrium disebabkan oleh infark
miokard. 3,4
Menurut Perhimpunan Dokter
Spesialis Kardiovaskular Indonesia,
prevalensi fibrilasi atrium pada tahun
2014 di Indonesia mencapai 1-2%.
Angka ini diprediksi akan terus
meningkat dalam 50 tahun
mendatang. Sementara itu, data dari
studi observasional Multinational
Monitoring of Trend and
Determinant in Cardiovascular
disease (MONICA) pada populasi
urban di Jakarta menunjukkan angka
kejadian fibrilasi atrium sebesar 0,2%.
Selain itu, kejadian fibrilasi atrium
diprediksi akan terus meningkat
secara signifikan seiring
meningkatnya persentase populasi
usia lanjut di Indonesia. Pada tahun
2045-2050 mendatang, kejadian
fibrilasi atrium pada usia lanjut di
Indonesia diprediksi akan mencapai
angka 28,68%. Dalam skala yang
lebih kecil, hal ini tergambarkan pada
data di Rumah Sakit Jantung dan
Pembuluh Darah Harapan Kita yang
menunjukkan bahwa selalu meningkat
setiap tahunnya, yakni sebesar 7,1%
pada tahun 2010, meningkat menjadi
9,0% (2011), 9,3% (2012), dan 9,8%
(2013). 5
Takikardia ventrikel dan fibrilasi
ventrikel merupakan jenis aritmia yang
paling berbahaya karena merupakan
penyebab utama serangan jantung
mendadak. Kondisi tersebut ditandai
dengan eksitasi otot jantung yang
cepat dan tidak terkoordinasi,
sehingga menyebabkan kegagalan
pompa jantung dan berujung pada
kematian mendadak hanya dalam
beberapa menit jika tidak dilakukan
penanganan segera.6
Tatalaksana yang saat ini digunakan
untuk kasus artimia masih berupa
pemberian obat anti-aritmia dan
defibriliasi pada kasus kegawatan.
Obat anti aritmia sendiri dikategorikan
menjadi empat kelas sesuai dengan
mekanisme kerja obat tersebut.
Meskipun obat anti-aritmia tetap
menjadi terapi yang paling sering
digunakan dalam aritmia, namun
terdapat kekhawatiran mengenai
keamanan dalam penggunaan obat
ini.7
Setidaknya terdapat dua kekurangan
utama dari obat anti-aritmia. Pertama,
obat anti-aritmia sering kali memiliki
efek samping yang menyebabkan
aritmia lain, terutama pada pasien
dengan penyakit jantung yang
mendasarinya, seperti gagal jantung,
penyakit iskemia jantung, dan infark
miokard. Munculnya efek samping
tersebut berkaitan dengan sempitnya
rentang dosis. Hal ini menyebabkan
dosis rendah tidak akan memiliki efek
untuk aritmia, sedangkan dosis yang
sedikit saja berlebihan dapat
menimbulkan efek samping. Karen itu,
dalam pemberian obat anti-aritmia
banyak yang harus diperhatikan untuk
menentukan dosis yang tepat. Kedua,
walaupun obat anti-aritmia dinilai
dapat bermanfaat untuk mencegah
kejadian aritmia berulang, namun
belum ada data akurat yang
menunjukkan bahwa obat anti-aritmia
dapat mencegah aritmia pada pasien
dengan risiko tinggi, seperti pasien
pasca infark miokard atau pasien
dengan kardiomiopati.7
Selain obat anti-aritmia, tatalaksana
terdahulu untuk aritmia diantaranya
2
dengan menggunakan alat pacu
jantung implan dan radiofrequency
catheter ablation. Namun, terdapat
keterbatasan dalam penggunaan
modalitas terapi-terapi tersebut. Alat
pacu jantung implan yang sampai saat
ini merupakan modalitas terapi paling
efektif pun memiliki berbagai
kelemahan, yaitu diperlukan tindakan
pembedahan untuk pemasangan alat,
prosedur penggantian baterai yang
harus dilakukan berulang, dan dapat
merusak jaringan normal pada
jantung.8 Selain itu, radiofrequency
catheter ablation juga memiliki efek
kerusakan jaringan jantung
permanen.9,10 Karena itu, diperlukan
solusi lain untuk penanganan
aritmia.11,12
Teknologi yang saat ini tengah
dikembangkan adalah optogenetik.
Optogenetik merupakan teknik untuk
mempengaruhi aktivitas sel yang telah
dimodifikasi secara genetik ketika
diberikan rangsangan cahaya. Agar
sel target secara spesifik dapat
dipengaruhi oleh cahaya, maka sel
harus mengekspresikan protein yang
sensitif terhadap cahaya sehingga
fungsi biologis sel berubah ketika
diberi pencahayaan.13 Dalam dekade
terakhir, optogenetik telah secara luas
diteliti untuk digunakan dalam
mempengaruhi kerja otak.14,15 Karena
aktivitas listrik pada jantung
menyerupai aktivitas listrik pada otak,
maka optogenetik mulai banyak diteliti
dalam penelitian jantung, terutama
kegunaannya untuk mengatasi
aritmia. 16-18
Pengembangan optogenetik harus
memperhatikan tiga komponen utama,
yang pertama adalah optimasi protein
yang sensitif terhadap cahaya.
Optogenetic actuator merupakan
protein yang memodifikasi aktivitas sel
ketika terpapar oleh cahaya. Actuator
yang paling kuat dan telah secara luas
digunakan adalah opsin.19 Ketika
mendapat rangsangan cahaya dengan
panjang gelombang yang sesuai,
opsin mengalami perubahan
konformasi yang menyebabkan
terbukanya kanal ion atau aktivasi
pompa ion sehingga terjadi perubahan
potensial membran. Proses tersebut
akan menghasilkan arus depolarisasi
atau hiperpolarisasi dalam beberapa
mili detik. Sel akan teraktivasi atau
terinhibisi sesuai dengan jalur sinyal
yang dipengaruhi oleh ekspresi jenis
opsin yang dipilih.20
Untuk diaplikasikan secara klinis,
komponen kedua yang harus
diperhatikan adalah sistem
optogenetik harus dapat menargetkan
tipe sel jantung secara spesifik. Opsin
dapat secara spesifik diekspresikan
oleh struktur jantung tertentu ketika
diadministrasikan bersama dengan
promoter gen yang secara spesifik
diaktifkan oleh tipe sel yang
diinginkan.13
Ekspresi opsin di dalam tubuh dapat
dihasilkan melalui transduksi oleh
vektor virus yang membawa gen opsin
dan promoter spesifik.21 Adeno-
associated virus (AAV) merupakan
vektor yang paling sering digunakan
karena dapat menghasilkan ekspresi
gen jangka panjang dengan efek
samping yang sedikit. Hal ini
disebabkan karena virus tersebut
memiliki imunogenisitas yang rendah,
dapat mentransduksi sel yang tidak
sedang membelah, dan tidak dapat
bereplikasi tanpa adanya helper
virus.22 Sayangnya, materi genetik
yang dapat dibawa oleh virus terbatas,
sehingga membatasi ukuran promoter
yang dapat digunakan. Hal ini
menurunkan keragamaan jenis sel
yang dapat ditargetkan. Vektor virus
juga tidak dapat menghasilkan
3
ekspresi gen dalam jangka panjang.
Selain itu, penggunaan vektor virus
masih dikhawatirkan dapat
menginduksi sistem imun.23 Karena
itu, sistem pengantaran yang ideal
adalah dengan sistem pengantaran
sel, yaitu menggunakan sel somatik
seperti fibroblas atau sel induk agar
dapat menghindari respon imun.24
Komponen ketiga yang harus
diperhatikan adalah teknologi untuk
mengirimkan cahaya secara in vivo.
Penelitian jangka panjang telah
dilakukan dalam menguji penerapan
optogenetik untuk memodulasi sinyal
saraf pada model tikus dan monyet
dengan menggunaan alat berisi serat
optik yang dipasangkan di kepala agar
dapat mengantarkan stimulasi cahaya
melalui tulang tengkorak menuju otak.
Hasil dari penelitian tersebut
menunjukkan bahwa metode
optogenetik dapat mempengaruhi
aktivitas saraf otak pada kondisi sadar
dan aktif bergerak.25-28 Kesulitan
penerapan optogenetik untuk jantung
adalah memastikan serat optik dapat
masuk melalui dinding dada dan
mencapai kedalaman struktur jantung
yang diinginkan. Hal ini menunjukkan
bahwa penggunaan serat optik
sesungguhnya membatasi aplikasi
optogenetik untuk jantung secara in
vivo.29
Berdasarkan permasalahan tersebut,
tujuan dari penulisan tinjauan pustaka
ini adalah untuk mengetahui potensi
optogenetik dengan sistem
pengantaran sel sebagai tatalaksana
terkini aritmia.
Metode
Tinjauan pustaka ini disusun
berdasarkan analisis data sekunder
dari berbagai publikasi. Referensi
yang digunakan untuk menganaslis
dan menyintesis tinjauan pustaka ini
didapatkan dari berbagai buku ajar
dan artikel yang dipublikasikan secara
global melalui International Library of
Medicine (Pubmed), Google Scholar,
dan Clinical Key. Dalam menemukan
artikel yang sesuai, penulis
menggunakan beberapa kata kunci, di
antaranya “arrhythmia”, “cardiac
optogenetics”, dan “cell delivery
system”. Pencarian juga
menggunakan logika operator
Boolean untuk mendapatkan artikel
yang spesifik.
Kriteria inklusi untuk sumber yang
dijadikan referensi di antaranya 1)
artikel berupa article review mengenai
aspek klinis aritmia, aspek ilmu
kedokteran dasar pada
patomekanisme aritmia, ataupun
studi analitik terapi aritmia baik in vitro
maupun in vivo, khususnya terkait
penggunaan optogenetik, 2)
diterbitkan dalam kurun waktu sepuluh
tahun terakhir yakni 2007 hingga
2017. Pada pencarian referensi
didapatkan 825 artikel, dan yang
memenuhi kriteria inklusi artikel yakni
sebanyak … artikel digunakan untuk
membahas, menganalisis, dan
menyintesis tinjauan pustaka ini.
Hasil dan Pembahasan
Dalam penggunaan optogenetik,
terdapat dua jenis opsin. Yang
pertama adalah opsin eksitasi, salah
satunya adalah channelrhodopsin-2
(ChR2), yaitu opsin yang dapat
menghasilkan aliran listrik yang cukup
untuk memicu potensial aksi.30 Protein
tersebut merupakan kanal kation yang
berasal dari alga hijau uniseluler
dengan nama spesies
Chlamydomonas reinhardtii. Ketika
terpapar cahaya biru dengan panjang
gelombang 470 nm, kanal kation akan
terbuka dan menyebabkan ion natrium
4
dan kalsium masuk ke dalam sel Aktivasi masing-masing cahaya
sehingga terjadi depolarisasi.19 ChR2 dilakukan secara bergantian dengan
dapat menghasilkan depolarisasi sel interval waktu yang telah
dengan berbagai ukuran ketika diberi disesuaikan.23
cahaya dengan panjang gelombang
yang sesuai.13 Opsin yang paling
sering digunakan untuk diaplikasikan
pada jantung adalah ChR2-(H134R),
yaitu opsin yang mengalami subtitusi
satu asam amino sehinga dapat
menghasilkan konduksi dua hingga
tiga kali lipat dibandingkan dengan
ChR2.30 Potensial aksi yang
dihasilkan oleh ChR2-(H134R)
terbentuk ketika mendapat
rangsangan cahaya biru dengan
panjang gelombang 470 nm selama
50 mili detik.20

Berbeda dengan opsin eksitasi, opsin

inhibisi dapat menghambat aktivitas
listrik sel.31 Opsin inhibisi yang paling
efisien dan banyak digunakan adalah
NpHR, yaitu halorhodopsin yang
dihasilkan oleh arkaeabakteri
Natronomonas pharaonis. Saat
teraktivasi oleh cahaya, NpHR
memompa ion klorida ke dalam sel Gambar 1
sehingga menyebabkan Opsin ChR2
hiperpolarisasi. Selain NpHR, opsin
inhibisi lainnya adalah Penggunakan optogenetik pada
archaerhodopsin (Arch) yang jantung secara in vivo salah satunya
memompa proton keluar dari sel dilakukan oleh Bruegman et al.
ketika mendapat rangsangan dengan menggunakan model tikus
cahaya.19 NpHR dan Arch yang mengekspresikan ChR2-
menghasilkan hiperpolarisasi setelah (H134R). Penelitian tersebut
menerima rangsangan cahaya kuning menunjukkan bahwa terjadi
dengan panjang gelombang 570 perubahan pada aktivitas normal
nm.32,33 jantung ketika diberikan pulsasi
cahaya dalam durasi singkat dan
Ketika digabungkan, opsin eksitasi terjadi aritmia ketika durasi pulsasi
dan inhibisi menghasilkan manipulasi cahaya diperpanjang.29 Selain itu,
sel dua arah yang dapat mengaktivasi penelitian lain yang dilakukan oleh
atau menghentikan potensial aksi Arrenberg et al. menguji ekspresi
melalui cahaya.31 Kombinasi ini ChR2-(H134R) dan NpHR pada model
membutuhkan dua sumber cahaya jantung ikan. Penelitian tersebut
dari dua light-emitting diode (LED) menunjukkan bahwa sistem
dengan panjang gelombang berbeda optogenetik dapat mempengaruhi
yang dipasang berdampingan. kecepatan kontraksi jantung.34

5
 Daftar pustaka yang digunakan harus
aktual (pustaka ditulis dalam 10 tahun
terakhir). Daftar pustaka disusun
menurut sistem Vancouver, diberi
nomor sesuai dengan urutan
pemunculan dalam keseluruhan teks,
bukan menurut abjad. Contohnya
adalah sebagai berikut:
1. Soepardi J. Demam Berdarah
Dengue. Buletin Jendela
Epidemiologi. 2010:1-14.
2. Muhadir A. Epidemiology of
Dengue in Indonesia. In: Health
Gambar 2 DGoDCaE, editor. Jakarta:
Ekspresi ChR2-(H134R) pada Sel Otot Ministry of Health, Republic of
Jantung yang Ditandai dengan Warna Indonesia; 2013.
Hijau 3. Wilder-Smith A, Macary P.
Dengue: challenges for policy
Bagian ini juga disertai pembahasan
makers and vaccine developers.
yang berisi analisis hasil berdasarkan
Current infectious disease
prinsip-prinsip medis saat ini. reports. 2014;16(5):1
Penulisan diharapkan menguraikan
makna beberapa penelitian yang
1. Organization WH. WHO,
sudah ada dalam menjawab
permasalahan. Global status report on
noncommunicable diseases 2010,
Simpulan WHO Library Cataloguing-in-
Publication Data. ISBN 978-92-4-
Simpulan sesuai dengan tujuan 156422-9, 2011.
khusus, disertai dengan saran yang 2. Keller SP, Halperin HR.
aplikatif. Simpulan dituliskan dalam Cardiac arrest: the changing incidence
bentuk esai dan tidak mengandung of ventricular fibrillation. Current
data angka hasil penelitian. treatment options in cardiovascular
Simpulan terdiri dari maksimal tiga
medicine. 2015;17(7):1-11.
paragraf yang merangkum inti hasil
penelitian/tinjauan pustaka dan 3. Physician AAF. Arrhythmias :
keterbatasan penelitian/ tinjauan Atrial Fibrillation. 2016; Available
pustaka, serta kemungkingan from:
pengembangan penelitian yang bisa http://www.aafp.org/test/fpcomp/FP-
dilakukan. E_391/preface.html.
4. Murakoshi N, Aonuma K.
Ucapan Terima Kasih Epidemiology of Arrhythmias and
Sudden Cardiac Death in Asia
Apresiasi terhadap pihak-pihak Circulation Journal. 2013;77.
tertentu yang berperan dalam
5. Yuniadi Y. Pedoman Tata
penulisan literature review dapat
ditulis disini. Laksana Fibrilasi Atrium Perhimpunan
Dokter Spesialis Kardiovaskular
Daftar Pustaka

6
Indonesia. 1 ed: Centra
Communications; 2014.
6. Bruegmann T, Boyle PM, Vogt
CC, Karathanos TV, Arevalo HJ,
Fleischmann BK, et al. Optogenetic
defibrillation terminates ventricular
arrhythmia in mouse hearts and human
simulations. The Journal of Clinical
Investigation. 2016;126(10):3894-904.
7. Bunch TJ, Anderson JL.
Adjuvant antiarrhythmic therapy in
patients with implantable cardioverter
defibrillators. American Journal of
Cardiovascular Drugs. 2014;14(2):89-
100.
8. Sham'a RA, Nery P, Sadek M,
Yung D, Redpath C, Perrin M, et al.
Myocardial injury secondary to ICD
shocks: insights from patients with
lead fracture. Pacing and Clinical
Electrophysiology. 2014;37(2):237-41.
9. Schoenfeld MH. Contemporary
pacemaker and defibrillator device
therapy. Circulation. 2007;115(5):638-
53.
10. John RM, Tedrow UB, Koplan
BA, Albert CM, Epstein LM, Sweeney
MO, et al. Ventricular arrhythmias and
sudden cardiac death. The Lancet.
2012;380(9852):1520-9.
11. Cho HC, Marbán E. Biological
therapies for cardiac arrhythmias.
Circulation research. 2010;106(4):674-
85.
12. Rosen MR, Robinson RB,
Brink PR, Cohen IS. The road to
biological pacing. Nature Reviews
Cardiology. 2011;8(11):656-66.
13. Kushibiki T, Okawa S,
Hirasawa T, Ishihara M. Optogenetics:
novel tools for controlling mammalian
cell functions with light. International
Journal of Photoenergy. 2014;2014.
14. Mattis J, Tye KM, Ferenczi
EA, Ramakrishnan C, O'shea DJ,
Prakash R, et al. Principles for
applying optogenetic tools derived
from direct comparative analysis of
microbial opsins. Nature methods.
2012;9(2):159-72.
15. Yizhar O, Fenno LE, Davidson
TJ, Mogri M, Deisseroth K.
Optogenetics in neural systems.
Neuron. 2011;71(1):9-34.
16. Ambrosi CM, Entcheva E.
Optogenetics ‘promise: pacing and
cardioversion by light? Future
cardiology. 2014;10(1):1-4.
17. Boyle PM, Entcheva E,
Trayanova NA. See the light: can
optogenetics restore healthy
heartbeats? And, if it can, is it really
worth the effort? Expert review of
cardiovascular therapy. 2014;12(1):17-
20.
18. Entcheva E. Cardiac
optogenetics. American Journal of
Physiology-Heart and Circulatory
Physiology. 2013;304(9):H1179-H91.
19. Guru A, Post RJ, Ho Y-Y,
Warden MR. Making sense of
optogenetics. International Journal of
Neuropsychopharmacology.
2015:pyv079.
20. Ambrosi CM, Klimas A, Yu J,
Entcheva E. Cardiac applications of
optogenetics. Progress in biophysics
and molecular biology.
2014;115(2):294-304.
21. Williams JC, Xu J, Lu Z,
Klimas A, Chen X, Ambrosi CM, et al.
Computational optogenetics:
empirically-derived voltage-and light-
sensitive channelrhodopsin-2 model.
PLoS Comput Biol.
2013;9(9):e1003220.
22. Williams PD, Ranjzad P, Kakar
SJ, Kingston PA. Development of viral
vectors for use in cardiovascular gene
therapy. Viruses. 2010;2(2):334-71.
7
23. Mohanty SK, channelrhodopsins: light
Lakshminarayananan V. Optical instrumentation, expression systems,
techniques in optogenetics. Journal of and channelrhodopsin variants.
modern optics. 2015;62(12):949-70. Optogenetics: Tools for Controlling
24. Bolli R, Chugh AR, D'Amario and Monitoring Neuronal Activity.
D, Loughran JH, Stoddard MF, Ikram 2012;196:29.
S, et al. Cardiac stem cells in patients 31. Chow BY, Han X, Dobry AS,
with ischaemic cardiomyopathy Qian X, Chuong AS, Li M, et al. High-
(SCIPIO): initial results of a performance genetically targetable
randomised phase 1 trial. The Lancet. optical neural silencing by light-driven
2011;378(9806):1847-57. proton pumps. Nature.
25. Stark E, Koos T, Buzsáki G. 2010;463(7277):98-102.
Diode probes for spatiotemporal 32. Packer AM, Roska B, Häusser
optical control of multiple neurons in M. Targeting neurons and photons for
freely moving animals. Journal of optogenetics. Nature neuroscience.
neurophysiology. 2012;108(1):349-63. 2013;16(7):805-15.
26. Voigts J, Siegle JH, Pritchett 33. Smedemark-Margulies N,
DL, Moore CI. The flexDrive: an Trapani JG. Tools, methods, and
ultra-light implant for optical control applications for optophysiology in
and highly parallel chronic recording neuroscience. Frontiers in molecular
of neuronal ensembles in freely neuroscience. 2013;6:18.
moving mice. Frontiers in systems 34. Arrenberg AB, Stainier DY,
neuroscience. 2013;7:8. Baier H, Huisken J. Optogenetic
27. Wang J, Wagner F, Borton DA, control of cardiac function. Science.
Zhang J, Ozden I, Burwell RD, et al. 2010;330(6006):971-4.
Integrated device for combined optical
neuromodulation and electrical
recording for chronic in vivo
applications. Journal of neural
engineering. 2011;9(1):016001.
28. Ozden I, Wang J, Lu Y, May
T, Lee J, Goo W, et al. A coaxial
optrode as multifunction write-read
probe for optogenetic studies in non-
human primates. Journal of
neuroscience methods.
2013;219(1):142-54.
29. Bruegmann T, Malan D, Hesse
M, Beiert T, Fuegemann CJ,
Fleischmann BK, et al. Optogenetic
control of heart muscle in vitro and in
vivo. Nature methods. 2010;7(11):897-
900.
30. Knöpfel T, Boyden E.
Optogenetic excitation of neurons with