Uji aktivitas sitotoksik sediaan salep ekstrak sembung rambat (mikania micrantha)

terhadap larva udang (artemia salina l.)

Melda Aifa1*, Novi Heriana1*, Nopridayanti1*, Sry Hartaty1*, Yentipia1*

Dosen Pengampu: Santi Perawati.S.Farm,M.Farm.
STIKES Harapan Ibu Jambi, Jl. Tarmizi Kadir No.71 Pakuan Baru,Jambi.
Program Studi Farmasi, Stikes Harapan Ibu Jambi.
*E-mail: melda2898@gmail.com

Abstrak

Latar Belakang : Ekstrak daun sembung rambat dilaporkan mempunyai berbagai aktifitas
diantaranya sebagai antimikroba, antioksidan, anti- inflamasi, dan antikogulan.Golongan senyawa
aktif yang terdapat dalam tanaman berkaitan dengan aktivitas biologis suatu tanaman. Pada ekstrak
sembung rambat terkandungan senyawa aktif yaitu steroid. Senyawa steroid merupakan senyawa
bioaktif sebagai zat toksik yang dapat masuk melalui membran sel Artemia salina secara difusi.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui tingkat sitotoksisitas ekstrak sembung rambat
terhadap larva udang Artemia salina Leach serta untuk mengetahui potensi bioaktivitas tertinggi pada
LC50.
Metode : Penelitian ini dilakukan maserasi sembung rambat dengan etanol 70% dan dilakukan
pengentalan ekstrak dengan alat rotary evavoratory, kemudian dilakukan uji sitotoksik ekstrak dan
sediaan salep ekstrak sembung rambat. pengujian evaluasi sediaan salep ekstrak sembung rambat
yaitu uji organoleptis,homogenitas,tes pH, daya sebar dan hedonic test.
Hasil : yang diperoleh yaitu pada uji sitotoksi dengan melihat potensi bioaktivitas tertinggi pada LC 50,
diperoleh angka untuk uji sititoksik ekstrak yang baik yaitu pada 100ppm sebesar 24,31 ppm dengan
persentase 83%, maka dilanjutkan pada sediaad salep menggunakan DMSO, didapat angka sebesar
49,53ppm dengan persentase 71%.
Kesimpulan : Dari hasil yang diperoleh menunjukkan semua konsentrasi ekstrak bersifat toksik karna
mempunyai nilai LC50 <1000ppm.

Kata kunci: sembung rambat (mikania micrantha),artemia salina leach, LC50 uji sitotoksik.

Abstrak

Background : Sembung vine leaf extract is reported to have a variety of activities including
antimicrobial, antioxidant, anti-inflammatory, and anticogulant properties. The group of active
compounds present in plants is related to the biological activity of a plant. In the compound extracts,
the active compound is a steroid. Steroid compounds are bioactive compounds as toxic substances
that can enter through the Artemia salina cell membrane by diffusion. The purpose of this study was to
determine the level of cytotoxicity of the extracts of nyung vines on the larvae of Artemia salina Leach
shrimp and to determine the highest bioactivity potential at LC50.
Method : This research was carried out maceration of propagation with 70% ethanol and thickening of
the extract with a rotary evavoratory device, then cytotoxic extracts and ointment extracts were

1
prepared. evaluation test of ointment extract of nyung vines namely organoleptic test, homogeneity, pH
test, dispersion and hedonic test.
Results
Results : The results obtained in the cytotoxic test by looking at the highest bioactivity potential in the
LC50, obtained figures for a good extract cytitoxic test that is at 100ppm at 24.31 ppm with a
percentage of 83%, then continued at the ointment using DMSO, obtained a figure of 49.53ppm with a
percentage of 71%.
Conclusion : From the results obtained showed that all concentrations of the extract were toxic
because they had an LC50 value <1000ppm.

Keywords: mikania micrantha, artemia salina leach, LC50 cytotoxic test.

agen antikanker1. Berdasarkan hasil

PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang
kaya akan keanekaragaman hayati,
memiliki berbagai jenis tumbuhan yang
dapat dimanfaatkan sebagai tumbuhan
obat. Saat ini upaya pencarian bahan alam
sebagai bahan baku obat terus dilakukan1.
Salah satu tumbuhan berkhasiat obat yaitu
sembung rambat (Mikania Micrantha
Kunth). Sembung rambat (Mikania
micrantha) merupakan tanaman yang
tumbuh merambat sangat cepat pada
tanaman lain ataupun pagar. Selain
merambat tanaman ini juga
mengakibatkan gangguan pertumbuhan
pada tanaman yang dirambatinya sampai
tanaman yang dirambatinya mati kering.
Daun sembung rambat mengandung zat
aktif dalam bentuk metabolit sekunder
seperti alkaloid, saponin, flavonoid,
steroid, tanin, dan terpenoid2. Ekstrak
daun sembung rambat dilaporkan
mempunyai berbagai aktifitas diantaranya
sebagai antimikroba, antioksidan, anti-
inflamasi, dan antikogulan3,4,5. Saat ini
pencarian senyawa aktif untuk pengobatan
penyakit kanker terus dilakukan. Adanya
berbagai senyawa pada tumbuhan sembung
rambat diduga akan dapat berperan sebagai
penelitian sebelumnya yang sudah
dilakukan tentang evaluasi aktivitas
antikanker ekstrak sembung rambat pada
tikus albino di swiss6. Untuk itu penulis
tertarik untuk menguji efek sitotoksiknya
dengan metode Brine Shrimp Lethality Test
(BSLT) menggunakan larva udang.
METODE
Metode yang digunakan yaitu
metode BSLT (Brine Shrimp Lethality)
dengan artemia salina leach larva udang.
Bahan yang digunakan adalah tanaman
sembung rambat segar berasal dari kota
jambi. Sebanyak 5kg dibersihkan, lalu
dirajang sampai halus.
Bahan kimia yang digunakan yaitu etanol
96%, parafin liquid, vaselin album, propoil
paraben,dimetil sulfoksida, larva udang,
dan air laut.
Alat yang digunakan ialah timbangan
digital, rotary evavoratory, lampu
UV,wadah pembiakan larva, pipet tetes,
dan alat-alat gelas.
CARA KERJA
Pengolahan Sampel
Tanaman sambung rambat di panen,
Dengan cara mengambil langsung di alam,
Kemudian tanaman di pisah kan, cara nya
dengan memisah kan bagian daun dan

2
batang nya hingga di dapat sebanyak 5 kg,
Kemudian di cuci bersih dengan air
mengalir hingga tanah dan kotoran yang
menempel hilang dan bersih lalu tiris
kan,Kemudian batang dan daun di rajang
halus,Setelah itu kering kan/dianginkan
hingga kering dan tidak terdapat lagi
kandungan air pada tanaman,Lamanya
pengeringan bisa selama 3-5 hari.
Proses maserasi
siapkan simplisia yang telah dikering
Uji Sitotoksik Ekstrak Sembung
Rambat
Siap kan alat dan bahan,hitung
larutan induk dan pengenceran dengan
konsentrasi ppm 25,50,dan 100,lalu buat
lah larutan induk sebanyak 100 ml dengan
berat simplisia kental 1 gram,kemudian
pipet larutan induk sesuai dengan
konsentrasi yang di hitung ad kan
10ml,masukkan ke dalam vial. (Siap kan 3
vial untuk masing-masing
konsentrasi),kemudian masukkan larva
udang sebanyak 10 ekor kedalam masing-
masing vial, lakukan 3kali pengulangan.
Amati 1x24 jam. Dan hitung berapa banyak
larva yang mati7.
Pembuatan Salep
Timbang semua bahan,masukkan
vaselin putih ke dalam cawan, kemudian
dilebur/di panas kan diatas waterbacth,
dalam lupang masukkan ekstrak, lalu
tambahkan 3 tetes etanol 70%, gerus
homogen,kemudian masukkan parafin
liquid dan vaselin putih yang sudah di lebur
sedikit demi sedikit sambil di gerus dan
homogen,Salep ekstrak daun sembung
rambat dimasukkan ke dalam tube, beri
etiket dan label8.
3
kan lalu masukkan simplisia kering
kedalam wadah gelap agar terlindung dari
cahaya dimaserasi dengan etanol 70%,
ditutup biarkan selama 24 jam terlindung
dari cahaya dan di aduk 2-3 kali, kemudian
di saring dengan kertas saring masukkan
dalam wadah tertutup rapat dan simpan
diruangan yang terlindung dari cahaya
pemekatan ekstrak dilakukan dengan alat
rotary evavoratory.
Uji Sitotoksik sediaan salep
Siapkan alat dan bahan, timbang 1
gram sedian salep ekstrak sembung rambat
dilarutkan dengan dimetil sulfoksida
sebanyak 100 μL (DMSO), kemudian
masukkan kedalam labu ukur 100ml ad
dengan air laut hingga tanda batas.
kemudian pipet larutan induk sesuai
dengan konsentrasi yaitu pada konsentrasi
1ml (100ppm) ad kan 10ml,masukkan ke
dalam vial,kemudian masukkan larva
udang sebanyak 10 ekor kedalam masing-
masing vial, replika 3 kali. Amati 1x24
jam. Dan hitung berapa banyak larva yang
mati8.
Uji Stabilitas Sediaan Salep
a. Uji Organoleptik
Uji organoleptik dilakukan untuk
melihat tampilan fisik sediaan
dengan cara melakukan
pengamatan terhadap bentuk,
warna,dan bau dari sediaan yang
telah dibuat8.
b. Uji Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan untuk
melihat apakah sediaan yang telah
dibuat homogen atau tidak.
Caranya, salep dioleskan pada
kaca objek glass amati secara
 kasat mata. Homogenitas
ditunjukkan dengan tidak adanya
butiran kasar pada sediaan salep8.
c. Uji Pengukuran pH
Uji pH dilakukan untuk melihat
tingkat keasaman sediaan salep
untuk menjamin sediaan salep
tidak menyebabkan iritasi pada
kulit. pH sediaan salep diukur
d. Uji Daya Sebar
Uji daya sebar dilakukan untuk
menjamin pemerataan salep saat
diaplikasikan pada
kulit.Diitimbang sebanyak
0,5gram kemudian diletakkan
ditengah kaca bulat berskala. Di
atas salep diletakkan kaca bulat
lain atau bahan transparan lain
dan pemberat sehingga berat kaca
bulat dan pemberat 150 gram,
didiamkan selama 1 menit,
kemudian dicatat diameter
penyebarannya. Daya sebar salep
yang baik antara 5-7 cm8.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Hasil dari simplisia kering 850 gram
setelah dimaserasi dengan perendaman
maka diperoleh filtrat cair sebanyak 6 liter
dan ekstrak kental sebanyak nya
40,62gram. Pada hasil tabel uji sitotoksik
ekstrak/sedian salep dan grafik uji
4
dengan menggunakan stik pH
universal atau indikator pH. Stik
pH universal dicelupkan ke dalam
sampel salep yang telah
diencerkan, diamkan beberapa saat
dan hasilnya disesuaikan dengan
standar pH universal. pH sediaan
yang memenuhi kriteria pH kulit
yaitu dalam interval 4,5 – 6,58.
sitotoksis/sedian salep dengan pengamatan
di atas terlihat perbedaan nilai LC50 pada
ekstrak dan sedian salep ekstrak sembung
rambat. Pada ekstrak nilai LC50 yang
diperoleh sebesar 24,31 ppm dan pada
sedian salep diperoleh angka sebesar 49,53
ppm. menurut literatur jurnal
(Andriani,L.2017) Suatu ekstrak dianggap
sangat toksik jika nilai LC50 di bawah 30
ppm, dianggap toksik jika nilai LC50 dalam
rentang 30-1000 ppm dan dianggap tidak
toksik jika nilai LC50 di atas 1000 ppm.
Pada tabel.3 di atas hasil uji organoleptis
pada blanko dan sediaan salep ekstrak
sembung rambat dimana memiliki bau khas
dengan warna hijau pada sedian salep yang
ditambahkan ekstrak dan pada blanko
dengan warna putih,bentuk sediaan sama
kental.
Pada tabel.4 uji homogenitas terhadap
blanko dan sediaan salep yang di
tambahkan ekstrak daun sembung rambat
dimana hasil menunjukkan kedua nya
homogen dan tidak ada butiran kasar.
Pada tabel.5 uji pengukuran Ph pada
blanko di peroleh angka ph sebesar 6,7 dan
pada formula di peroleh angka sebesar 5.
Menurut jurnal (Rukmana wulan.2017),
Kulit normal berkisar antara pH 4,5-6,5.
Nilai pH yang melampaui 7 dikhawatirkan
dapat menyebabkan iritasi kulit.
Pengujian tabel.6 uji daya sebar dilakukan
untuk menjamin pemerataan salep ekstrak
sembung rambat saat diaplikasikan pada
PEMBAHASAN
Uji Brine Shrimp Lethality Test
(BSLT) digunakan untuk memprediksi
senyawa atau ekstrak yang mempunyai
aktivitas antikanker, sembung rambat
mengandung zat aktif dalam bentuk
metabolit sekunder seperti alkaloid,
saponin, flavonoid, steroid, tanin, dan
terpenoid. Berbagai penelitian mengenai uji
aktivitas sitotoksik pada larva udang
banyak dilaporkan. Ekstrak etanol daun
widuri terhadap larva udang Artemia salina
Leach dengan nilai LC50 sebesar 22, 8585
ppm. Golongan senyawa aktif yang
terdapat dalam tanaman berkaitan dengan
aktivitas biologis suatu tanaman. Dalam
penelitian ini dugaan sementara kandungan
senyawa aktif dalam ekstrak daun widuri
adalah senyawa steroid. Senyawa steroid
merupakan senyawa bioaktif sebagai zat
toksik yang dapat masuk melalui membran
sel Artemia salina secara difusi. Membran
sel merupakan lapisan luar sel yang
5
kulit. Adapun hasil yang diperoleh sebelum
penambahan berat beban di dapat hasil 2,85
cm, kemudian di tambah beban seberat
50gram diperoleh hasil 3,35cm dan
penambahan berat beban 100gram 4,2 cm.
Pada tabel.6 uji hedonic test diperoleh hasil
bahwa jenis kelamin perempuan lebih
menyukai aroma dan tekstur pada sediaan
salep ekstrak sembung rambat, dan pada
laki-laki menyukai dari segi tekstur.
mengatur perpindahan zat ke dalam dan ke
luar sel pada organel sel. Masuknya
senyawa tersebut dapat merusak
permeabilitas membran dan mengganggu
proses biokimiawi Artemia salina yang
menyebabakan Artemia salina tidak
selektif terhadap paparan yang masuk ke
dalam pencernaannya, sehingga apa saja
yang masuk dianggap makanannya7.
Kemudian dilakukan uji evaluasi
sediaan yaitu uji organoleptis, uji
homogenitas, uji pengukuran pH, uji daya
hambat, dan uji hedonic test. Pada uji
organoleptis pada blanko dan sediaan salep
ekstrak sembung rambat dimana memiliki
bau khas dengan warna hijau pada sedian
salep yang ditambahkan ekstrak dan pada
blanko dengan warna putih,bentuk sediaan
sama-sam kental8.
Pada pengujian pH sediaan salep
ekstrak sembung rambat memiliki pH 5 hal
tersebut telah memenuhi persyaratan pH
untuk suatu sediaan topikal. Hal ini
menunjukkan bahwa salep ekstrak
sembung rambat tidak menyebabkan iritasi
jika diaplikasikan pada kulit8.
Pada pengujian homogenitas
dilakukan untuk mengetahui sediaan salep
yang telah dibuat homogen atau tidak. Pada
sediaan salep ekstrak sembung rambat
memiliki homogenitas yang baik dan dapat
disimpulkan homogen karena tidak ada
gumpalan-gumpalan yang mengurangi
daya homogenitasnya. Sediaan salep yang
homogen mengindikasikan bahwa
ketercampuran dari bahan-bahan salep serta
ekstrak sembung rambat yang digunakan
baik sehingga tidak didapati gumpalan
ataupun butiran kasar pada sediaan karena
sediaan salep harus homogen dan rata agar
tidak menimbulkan iritasi dan terdistribusi
merata ketika digunakan8.

6
Selanjutnya dilakukan pengujian daya
sebar dilakukan untuk menjamin
pemerataan salep ekstrak sembung rambat
saat diaplikasikan pada kulit. Adapun hasil
yang diperoleh pada saat sebelum
penambahan beban didapat angka sebesar
2,85 cm, dan dengan penambahan beban 50
gram dengan angka 3,35 cm kemudian
dengan beban seberat 100 gram didapat
angka sebesar 4,2 cm. Basis salep yang
memiliki daya sebar yang paling baik
adalah dengan penambahan berat 100 gram
sehingga daya sebar diharapkan
berpengaruh terhadap kecepatan difusi zat
aktif dalam melewati membran. Semakin
luas membran tempat sediaan salep
menyebar maka koefisien difusi makin
besar yang dimana mengakibatkan difusi
obat pun semakin meningkat, sehingga
semakin besar daya sebar suatu sediaan
maka semakin baik. Kemudian pada uji
hedonic test atau uji kesukaan diperoleh
hasil bahwa jenis kelamin perempuan lebih
menyukai aroma dan tekstur pada sedian
salep ekstrak sembung rambat dan pada
laki-laki hanya menyukai dari segi tekstur8.
KESIMPULAN
Dari pembahasan diatas ditarik
kesimpulan sebagai berikut :
Dari hasil yang diperoleh menunjukkan
semua konsentrasi ekstrak bersifat toksik
karna mempunyai nilai LC50 <1000ppm.
Potensi bioaktivitas tertinggi terdapat pada
konsentrasi ekstrak dengan nilai LC50 100
ppm didapat hasil sebesar 23,31 ppm
dimana angka persentase nya sebesar
83%,dan pada sedian salep ekstrak
sembung rambat dengan angka 49,53 ppm
pada persentase 71%.

DAFTAR PUSTAKA

Andriani.L.,Yulianis.,Hesti.N.,.20017. Aktivitas Sitotoksik Daun Ceremai. STIKES Harapan

Ibu, Jambi.Riset Informasi Kesehatan,Vol.6 No.1
Dhamayanti.E.,dkk.2017. Proposal Program Kreatifitas Mahasiswa Formulasi Larutan
Antiseptik Ekstrak Etanol Daun Sembung Rambat(Mikania Micrantha H.B.K) Untuk
Luka Sayat Pada Kelinci Putih Jantan(Oryctolagus Cuniculus). Akademi Farmasi Al-
Fatah.Bengkulu.
Susanti.E.,Susi.L.,2019. Uji Aktivitas Tabir Surya Ekstrak Etanol tumbuhan Sembung Rambat
(Mikania Micrantha Kunth) Secara In Vitro. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau.
Pekanbaru,Riau. Jurnal Penelitian Farmasi Indonesia 7(2) ISSN 2302-187X.
Muryadin.M.,2017. Formulasi Dan Uji Penyembuhan Luka Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun
Sembung Rambat (Mikania Micrantha) Terhadap Luka Terbuka Kulit Tikus Galur
Wistar.Universitas Sriwijaya. Palembang.

7
Perawti.S.,Lili.A,Septa.P.H.,2019. Aktivitas Koagulan Ekstrak Dan Fraksi Daun Sembung
Rambat (Mikania Micrantha Kunth.). Stikes Harapan Ibu. Jambi. Chempublish Journal
Vol (4) No (1) 30-37.
Debaprotim, D., Suvakanta, D., & Jashabir, C. (2014). Evaluation of Anticancer Activity
of Mikania micrantha Kunth ( Asteraceae ) Against Ehrlich Ascites Carcinoma
in Swiss Albino Mice. International Journal of Pharmaceutical Research & Allied
Sciences, 3(2), 9–18.
Nadziroh.M.,2014.Uji Sitotoksisitas Ekstrak Daun Widuri (Calotropis Gigantea.L) Terhadap
Larva Udang Artemia Salina Leach Dan Identifikasi Golongan Senyawa Aktifnya.
Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.Malang.
Rukmana.W.,2017. Formulasi dan uji stabilitas fisik sediaan salep antifungi ekstrak daun
ketepeng cina (Cassia Alata.L). UIN Alaudin.Makassar.

8
1. Hasil Pengamatan Uji Sitotiksik Ekstrak Sembung Rambat

A.Tabel.1 Data Pengamatan Uji Sitotoksik.

ppm log(ppm) probit %dead mortalyty total

25 1,398 5 50% 5 10
25 1,398 5,25 60% 6 10
25 1,398 5 50% 5 10
50 1,699 5,25 60% 6 10
50 1,699 5,25 60% 6 10
50 1,699 5,52 70% 7 10
100 2,000 5,84 80% 8 10
100 2,000 5,84 80% 8 10
100 2,000 6,28 90% 9 10

B.Grafik.1 probit analysis and LC50

PROBIT ANALYSIS and LC50

7
6.5 y = 1.5004x + 2.9209
6 R² = 0.8056
5.5
PROBIT

5
4.5 probit
4 Linear (probit)
3.5
3
1.000 1.500 2.000 2.500
LOG PPM

Intercept 2,920858288 b

Log(ppm) 1,50040419 a

persamaan Y=ax+b

9
 5=1,50040419x+2,920858288

X= 1,385721079

LC50= antilog(x) 24,31 ppm

0,0243 %

2. Hasil Pengamatan Uji Sitotoksik Sediaan Salep

A.Tabel.2 Data Pengamatan Uji Sitotoksik Sediaan Salep

ppm log ppm probit %dead mortality total

0 0 0 0% 0 10
0 0 0 0% 0 10
0 0 0 0% 0 10
25 1,398 4,36 26% 2,6 10
25 1,398 4,56 33% 3,3 10
25 1,398 4,82 43% 4,3 10
50 1,699 4,9 46% 4,6 10
50 1,699 5,08 53% 5,3 10
50 1,699 5,15 56% 5,6 10
100 2,000 5,41 66% 6,6 10
100 2,000 5,52 70% 7 10
100 2,000 5,71 76% 7,6 10

B.Grafik.2 Probit Analysis And LC50

grafik nilai probit lc50

7.6 y = 2.8704x + 0.1349
7.1
6.6 R² = 0.9809
6.1
log ppm

5.6
5.1 probit
4.6
4.1
3.6
3.1
2.6
1 1.5 2 2.5
probit

10
Intercept 0,134926 B
log(ppm) 2,870425 A

Persamaan y=ax+b
5=2,870425x+0,134926
x= 1,694897
LC50= antilog(x) 49,53 Ppm
0,049533 %

3. Hasil Uji Evaluasi Sediaan

A.Tabel.3 Hasil Pengamatan Uji Organoleptis

Pengamatan
Organoleptis
blanko formula
Bau Bau khas Khas ekstrak

putih hijau
Warna
kental kental
Bentuk

B.Tabel.4 Pengamatan Uji Homogenitas

Konsentrasi
Pengujian homogenitas
Homogen dan tidak ada bituran kasar
Blanko
Homogen dan tidak ada butiran kasar
Formula

C.Tabel.5 Uji Pengukuran Ph

Pengamatan
Pengukuran Ph
pH 6,7
Balanko
pH 5
Formula

11
 D.Tabel.6 Uji Daya Sebar
Diameter Sebar
Formula
2,85 cm
Sebelum (+) Beban
3,35 cm
(+) Beban 50gram
4,2 cm
(+) Beban 100gram

E.Tabel.7 Uji Hedonic Test

Jenis Usia Indikator Produk

Koresponden Kelamin
Penilaian

1 2 3 4
PR 22-38 Warna - 2 5 3
1-10
PR 22-38 Aroma - 1 7 2
1-10
PR 22-38 Rasa - 5 4 1
1-10
PR 22-38 Tekstur - 1 8 1
1-10
LK 19-27 Warna - 1 3 1
1-5
LK 19-27 Aroma - 1 1 3
1-5
LK 19-27 Rasa - 1 2 2
1-5
LK 19-27 Tekstur - - 3 2
1-5

12