PENGARUH PERBEDAAN VOLUME DARAH PADA TABUNG

K3EDTA DENGAN JUMLAH TROMBOSIT

KARYA TULIS ILMIAH

OLEH
AGUSTIN PUTRI PAMUNGKAS
NIM. 1171001

PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN NASIONAL
SURAKARTA
2020
PENGARUH PERBEDAAN VOLUME DARAH PADA TABUNG
K3EDTA DENGAN JUMLAH TROMBOSIT

KARYA TULIS ILMIAH

DIAJUKAN SEBAGAI PERSYARATAN MENYELESAIKAN
JENJANG PENDIDIKAN DIPLOMA III ANALIS KESEHATAN

OLEH
AGUSTIN PUTR PAMUNGKAS
NIM. 1171001

PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN

SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN NASIONAL
SURAKARTA
2020

i
 KARYA TULIS ILMIAH

Pengaruh Perbedaan Volume Darah pada Tabung K3EDTA

dengan Jumlah Trombosit

Disusun oleh :
Agustin Putri Pamungkas
NIM. 1171001

Telah disetujui untuk diajukan pada ujian proposal Karya Tulis Ilmiah

Pembimbing Utama

Dewi Saroh, S.Si., M.Sc

 DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL
HALAMAN JUDUL................................................................................................i
HALAMAN PERSETUJUAN................................................................................ii
DAFTAR ISI..........................................................................................................iii
DAFTAR TABEL....................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................vi
DAFTAR LAMPIRAN.........................................................................................vii
BAB I PENDAHULUAN........................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah..............................................................................1
B. Pembatasan Masalah....................................................................................3
C. Rumusan Masalah........................................................................................3
D. Tujuan Penelitian.........................................................................................4
E. Manfaat Penelitian.......................................................................................4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.............................................................................6
A. Landasan Teori............................................................................................6
1. Darah......................................................................................................6
a. Definisi.............................................................................................6
b. Komponen .......................................................................................7
2. Trombosit ........................................................................................... 7
a. Definisi.......................................................................................... 7
b. Fungsi............................................................................................ 8
3. Faktor yang mempengaruhi jumlah trombosit.................................... 9
a. Pra analitik..................................................................................... 9
b. Analitik .........................................................................................10
c. Pasca analitik ................................................................................11
4. Abacus 3 CT........................................................................................12
a. Definisi...........................................................................................13
b. Prinsip............................................................................................13
B. Kerangka Pikir...........................................................................................14
C. Hipotesis....................................................................................................15
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................16
A. Desain Penelitian.......................................................................................16
B. Tempat dan Waktu Penelitian...................................................................16
C. Subyek dan Obyek Penelitian....................................................................16
D. Populasi dan Sampel Penelitian.................................................................16
E. Definisi Operasional Variabel Penelitian..................................................16
F. Teknik Sampling.......................................................................................17
 G. Sumber Data Penelitian.............................................................................17
H. Instrumen Penelitian..................................................................................18
I. Alur Penelitian...........................................................................................19
1. Bagan...................................................................................................19
2. Cara Kerja............................................................................................20
J. Jenis Analisis Data Penelitian...................................................................24
K. Jadwal Rencana Penelitian........................................................................25
DAFTAR PUSTAKA............................................................................................26
LAMPIRAN..........................................................................................................28
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman
3.1 Jadwal Rencana Penelitian 25
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman
2.1 Alat Hematology Analyzer Abacus 3 CT 13
2.2 Skema Kerangka Pikir 14
3.1 Skema Teknik Sampling 17
3.1 Bagan Alur Penelitian 19
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Informend consent 3
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Pemeriksaan laboratorium hematologi merupakan salah satu

pemeriksaan penting yang digunakan dalam laboratorium. Pemeriksaan

hematologi terdiri dari leukosit, eritrosit, hemoglobin, hematokrit, indeks

eritrosit dan trombosit (Kemenkes). Pemeriksaan jumlah trombosit

merupakan salah satu pemeriksaan yang penting untuk menyangkut

hemostasis maupun kasus lain yang meliputi penegakan diagnosis, penilaian

hasil terapi atau perjalanan suatu penyakit, penentu prognosis dan berat

tidaknya suatu penyakit (Sujud, 2015).

Trombosit sering disebut juga sebagai kepingan darah dengan ukuran

lebih kecil dari pada sel lain dan berjumlah sekitar 150.000-400.000sel/ ul

darah. Trombosit berperan penting dalam suatu mekanisme pembekuan darah

dengan melepaskan zat di tempat cidera atau luka dan bersama dengan faktor

pembekuan lain dan akan membentuk fibrin (Samad, dkk. 2014).

Pemeriksaan trombosit di laboratorium ini memiliki beberapa tahapan

pemeriksaan meliputi pra analitik, analitik dan post analitik sehingga

memberikan hasil yang dapat dipercaya. Salah satu faktor yang

mempengaruhi pada tahap pra analitik adalah penggunaan antikoagulan

dalam pengambilan darah untuk pemeriksaan laborarium (Nurrahmat, 2005).

1
 Antikoagulan yang dapat digunakan yaitu Ethylene Diamine Tetraacetic

Acid (EDTA). Ada tiga jenis EDTA yaitu dinatrium, dipotassium, dan

2
 2

tripotassium. Antikoagulan K3EDTA, K2EDTA dan Na3EDTA di beberapa

laboratorium baik dirumah sakit, puskesmas, laboratorium klinik masih

digunakan untuk pemeriksaan hematologi rutin, saat ini tersedia dalam

volume siap pakai yang sudah dikemas dalam dry spray sedangkan K3EDTA

dalam bentuk cair ( Li et al , 2013). Dari ketiga jenis antikoagulan, K2EDTA

adalah yang paling baik dan dianjurkan oleh ICSH (International Council for

Standardization in Hematology) dan CLSI (Clinical and Laboratory

Standards Institute) (Riswanto, 2013). Namun yang paling banyak digunakan

adalah jenis K3EDTA.

Antikoagulan K3EDTA dalam bentuk cair dapat menyebabkan nilai

hemoglobin rendah, hitung eritrosit, laukosit dan trombosit rendah, begitu

pula dengan nilai hematokrit(Kiswri,2014). Selain itu K3EDTA bentuk cair

juga akan menyebabkan pengenceran pada spesimen dan akan mempengaruhi

ukuran sel darah akibat terjadinya penyusutan sel darah merah (Zini, 2013).

Selain itu juga dapat menyebabkan trombosit dapat meningkat ataupun turun

karena sel membengkak kemudian disintegrasi membentuk fragmen dalam

ukuran yang sama dengan trombosit kemudian dibaca oleh alat hitung

otomatis

sehingga menyebabkan peningkatan palsu hitung jumlah trombosit namun

bila disintegrasi membentuk fragmen dalam ukuran yang berbeda dengan

ukuran trombosit akan menyebabkan penurunan palsu hitung jumlah

trombosit. Untuk
 3

itu ketepatan dalam perbandingan takaran antikoagulan K3EDTA dengan

volume darah harus benar benar diperhatikan (Wirawan, 2004 dalam

Sanatang 2018).

Pada kasus dilapangan, banyak ditemukan masalah dalam penentuan

volume darah pada tabung K3EDTA khususnya pada pemeriksaan automatik..

Teknisi di laboratorium sering mencabut tabung dan jarumnya sebelum

selesai menghisap darah sesuai kondisi vakumnya, atau sebelum tercapai

volume 3 ml, dengan alasan bahwa volume darah minimal darah yang

dibutuhkan pada pembacaan dengan alat hitung otomatis hanya sebanyak 1

ml saja, sehingga dengan volume kurang dari 3 ml, sudah diperoleh hasil

pemeriksan hematologi. Selain lain itu juga kesulitan teknisi saat

pengambilan darah, terutama pasien pada anak-anak. Berdasarkan latar

belakang tersebut penulis tertarik dengan melakukan penelitian mengenai “

Pengaruh perbedaan volume darah pada tabung vakum K3EDTA dengan

jumlah trombosit”.

B. Pembatasan Masalah

Pembatas masalah pada penelitian ini adalah memberikan data secara

analitik mengenai pengaruh perbedaan volume darah pada tabung vakum

K3EDTA terhadap jumlah trombosit.

C. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang maka rumusan masalah yang diajukan pada

penelitian ini adalah apakah ada perbedaan volume darah pada tabung vakum

K3EDTA terhadap jumlah trombosit ?

 4

D. Tujuan Penelitian

a. Tujuan Umum

Untuk mengetahui pengaruh perbedaan volume darah pada tabung

vakum K3EDTA dengan jumlah trombosit.

Tujuan Khusus

1) Mengetahui jumlah trombosit pada tabung vakum K3EDTA dengan

volume darah 1 ml.

2) Mengtahui jumlah trombosit pada tabung vakum K3EDTA dengan

volume darah 3 ml.

3) Mengetahui perbedaan jumlah trombosit dengan perbedaan volume

darah pada tabung vakum K3EDTA.

E. Manfaat Penelitian

a. Manfaat Teoritis

Memberikan informasi dan referensi bagi perkembangan ilmu

kesehatan khususnya mengenai hubungan volume darah dalam tabung

K3EDTA terhadap jumlah trombosit.

b. Manfaat Praktis

1) Bagi Penulis

Diharapkan dapat menambah pengetahuan dan ketrampilan dalam

penelitian dan penulisan Karya Tulis Ilmiah dalam bidang hematologi

khususnya mengenai pengaruh hubungan volume darah dalam tabung

K3EDTA dalam jumlah trombosit.

 5

2) Bagi Akademik

Menambah perbendaharaan Karya Tulis Ilmiah dalam bidang

hematologi khususnya mengenai pengaruh hubungan volume darah

dalam tabung K3EDTA dalam jumlah trombosit.

3) Bagi Praktisi Kesehatan

Memberikan informasi kepada masyarakat tentang pengaruh

hubungan volume darah dalam tabung K3EDTA terhadap jumlah

trombosit.
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Landasan Teori

1. Darah

Darah merupakan jaringan tubuh yang berbeda dengan jaringan tubuh

lain, berada dalam konsistensi cair, beredar dalam suatu sistem tertutup

yang dinamakan dengan pembuluh darah dan berfungsi sebagai alat

pertahanan. Darah dibagi menjadi dua bagian yaitu sel darah merah dan

cairan tubuh. Sel darah terdiri dari sel arah merah (eritrosit), sel darah

putih (leukosit) dan keping sel (trombosit). Cairan darah yang terpisah dari

sel darah yaitu plasma atau serum (Maharani, dkk.2017).

2. Komponen darah

Darah tersusun dari dua komponen utama yaitu plasma dan sel sel

arah atau butir darah. Plasma darah yaitu bagian cairan darah (55%) yang

sebagian terdiri dari ( 92%) air, 7% protein, 1% nutrien, hasil

metabolisme, gas pernafasan, enzim, hormon, faktor pembekuan dan

garam garam organik, protein protein dalam plasma terdiri dari serum

albumin, fibrinogen, protrombin, dan plasma koagulasi. Serum albumin

dan gamma globulin sangat penting untuk mempertahankan tekanan

osmotik koloid dan gamma globulin juga mengandung antibodi untuk

mempertahankan tubuh terhadap mikroorganisme (Desmawati, 2013).

6
 7

Sel-sel darah atau butir darah kira kira 45% terdiri dari eritrosit atau

sel darah merah, laukosit atau sel darah putih dan trombosit atau platelet.

Sel darah merah dan trombosit 1%. Sel darah putih terdiri dari basofil,

eosinofil, neutropil, limposit dan monosit(Desmawati, 2013)

3. Definisi trombosit

Trombosit adalah fragmen sitoplasma megakariosit yang tidak berinti

dan terbentuk disumsum tulang. Trombosit matang ukuran 2-4 mikromili,

trombosit setelah keluar dari sumsum ulang, sekitar 20-30% trombosit

mengalami sekuestrasi di limpa (Kosasih, 2008).

Trombosit disebut juga platelet. Trombosit tidak dapat dipandang,

sebagai sel utuh karena berasal dari sel raksasa yang berada disumsum

tulang yang dinamakan megakariosit. Megakariosit di dalam

pematangannya dipecah menjadi 3.000-40.000 serpih sel, yang dinamai

sebagai trombosit platelet. Trombosit mempunyai bentuk bulat dengan

garis tengah 0,75-2,25 nm, tidak mempunyai inti, kepingan sel ini masih

dapat melakukan sintesis protein walaupun sangat terbatas karena didalam

sitoplasma masih terdapat sejumlah RNA (Sadikin, 2013).

4. Maturasi Trombosit

Trombosit dihasilkan pada sumsum tulang melalui fragmentasi

sitoplasma pada megakariosit. Kemudian megakariosit mengalami

pematangan melalui replikasi endomitotik yang menyebabkan volume

sitoplasma setia kali jumlah lobus nukleus bertambah menjadi dua kali
 8

lipat, tahap awal terjadi invaginasi membran plasma yang berkembang

sepanjang pembentukan megakariosit menjadi anyaman yang bercabang.

Tahap perkembangan terutama pada tahap nukleus berjumlah 8, trombosit

terbentuk dari perluasan sitoplasma megakariosit, tiap megakariosit

menghasilkan 4000 trombosit(Hoffbrand, 2013).

5. Harga Normal Trombosit

Nilai normal trombosit antara 150.000-400.000 sel/ul darah(Kiswari ,

2014).

6. Fungsi Trombosit

Fungsi utama trombosit adalah membentuk sumbat mekanis yang

merupakan respons hemostatik normal terhadap cidera vaskuler. Tanpa

adanya trombosit, dapat terjadi kebocoran secara spontan. Selain itu

menurut Hoffbrand (2013), fungsi fisis trombosit diantaranya adalah

1) Fungsi agredasi sifat trombosit yang mudah melekat pada

permukaan asing.

2) Fungsi adhesi yaitu sifat trombosit yang saling melekat satu sama

lain

3) Aglutinasi yaitu sifat trombosit yang mudah menggumpal.

4) Disentrigasi yaitu sifat trombosit yang mudah pecah/mati.

7. Kelainan Trombosit

1) Trombositosis

Meningkatnya jumlah trombosit di atas normal pada

peredaran darah, yaitu lebih dari 400 x 109L. Pada trombositosis,

 9

apabila rangsangan-rangsangan yang menyebabkan trombositosis

ditiadakan, maka jumlah trombosit kembali normal, misalya saat

terjadi pada pendarahan akut, contohnya saat pembedahan atau

pendarahan(Kiswari , 2014).

2) Trombositopenia

Keadaan dimana jumlah trombosit yang kurang dari normal

sebelum menentukan diagnosis trombositopenia, perlu

disingkarkan terlebih dahulu penyebab trombositopenia akibat

penggumpalan trombosit dalam sampel darah yang dapat terjadi

pada sampel yang mengguakan antikoagulan keadaan ini dapat

bersifat kongenital, trombositopenia ini dapat disebabkan oleh

produksi trombosit yang berkurang, kelainan distribusi atau

destruksi yang meningkat (Firani, 2018).

8. Struktur trombosit

Trombosit berbentuk sangat kecil dengan diameter 3,0 x 0,5 um

dengan volume 7-11 fL berbentuk cakram bulat, sel darah yang tidak

mempunyai inti, dan masa hidup sekitar 10 hari (Handayani, 2008).

9. Faktor yang mempengaruhi jumlah trombosit

a. Pra Analitik

1. Persiapan alat

Persiapan alat digunakan untuk pnengambilan darah adalah

jarum suntik, tabung vakum beserta jaru dan holder yang besih.

Kering dan siap pakai. Peralatan yang basah dapat menambah

 10

cairan sehingga dapat menyebabkan hasil rendah (Riswanto,

2013).

2. Persiapan Pasien

Sebelum pengambilan darah yang harus dilakukan terlebih

dahulu adalah identifikasi pasien dangan jelas menggunakan 2

identitas yaitu nama dan nomor rekam medis pasien atau tanggal

lahir pasien. Petugas juga memberikan informasi mengenai

tindakan yang dilakukan, serta manfaat tindakan pengambilan

darah pemberian identitas merupakan tahapan yang sangat

penting, pemberian identitas meliputi pengisian formulir

permintaan, permintaan laboratorium dan pemberian label

spesimen (Riswanto, 2013).

3. Pengambilan Sampel

Jika memasang tourniquet terlalu lama (lebih dari 2 menit)

menyebabkan trombosit meningkat, sedangkan mengambil darah

dengan tangan atau lengan yang terpasang cairan intravena

menyebabkan jumlah trombosit rendah palsu (Riswanto , 2013).

b. Analitik

1. Homogenisasi Sampel

Proses pencampuran darah dengan kondisi seperti darah

beredar dalam aliran darah. Proses ini dilakukan dengan

membolak balikan tabung sampel beberapa kali saat darah akan

diperiksa (Riswanto , 2013).

 11

2. Reagen kerja

Reagen siap pakai kondisi baru dan stabil pada suhu 20-35o C.

3. Penggunaan Alat

Mengunakan alat-alat yang dilapisi dengan silikon atau

alat-alat plastik, untuk mencegah trombosit tidak melekat pada

permukaan asing (Riswanto , 2013).

c. Post Analitik

Tahap ini dimulai dari pencatatan hasil, pemeriksaan sampai

pada tahap melakukan validasi hasil pemeriksaan serta

memberikan interprestasi dari hasil pemeriksaan sampai dengan

pelaporan hasil. Kesalahan dalam pencatatan atau pelaporan hasil

pemerikaan dapat menyebabkan kesalahan dalam menetapkan

suatu tindakan.

10. Pemeriksaan Trombosit

Pemeriksaan trombosit dilakukan dengan beberapa metode yaitu

metode rees ecker, fanio dan metode alat automatik dengan menggunakan

alat hematology analyzer.

a. Metode Rees Ecker

Metode langsung ini menggunkan darah yang diencerkan daam

pipet eritrosit lalu dimasukan ke dalam kamar hitung. Dengan

menggunakan larutan pengencer terdiri dari BCB yang membuat

trombosit berwarna kebiruan saat dilihat dibawah mikroskop. Metode

ini mempunyai kemungkinan kesalahan sekitar 16-25% yang didapat

 12

dari kemampuan visual pemeriksaan saat menghitung jumlah

trombosit, cahaya yang kurang terang, dan kesalahan saat melakukan

pengenceran (Kiswari, 2014).

b. Metode Fonio

Metode fonio menggunakan darah yang ditambah larutan MgSO4

14% kemudian dibuat apusan darah tepi lalu di cat dengan Wright dan

Giemsa. Jumlah trombosit kemudian dipeiksa dibawah mikroskop

pembesaran 40x, dan dihitung per jumlah eritrosit atau dalam 1000

eritrosit (Gandasoebrata, 2016).

c. Metode otomatis

Perhitungan jumlah trombosit secara otomatis dapat dilakukan

dengan menggunakan alat Hematology Analyzer. Perhitungan dengan

metode ini memiliki prinsip berbeda beda pengukurannya tergantung

dengan merk alat yang digunakan. Secara umum pengukuran sel

dalam darah dilakukan berdasarkan Impedance Flowcyometry.

11. Abacus 3CT

a. Definisi

Abacus 3CT merupakan alat otomatis hematology analyzer

dengan kualitas tinggi untuk diagnostik yang digunakan pada

laboratorium klinik. Alat ini menggunakan metode impedansi untuk

pengukuran leukosit (WBC), eritrosit (RBC) dan trombosit (RBC).

Hemoglobin diukur menggunakan metode fotometrik. Parameter

yang dapat diukur dengan Abacus 3CT adalah WBC (White Blood
 13

Cell), RBC (Red Blood Cell), HGB (Hemoglobin), MCV (Mean

Corpuscular Volume), HCT (Hematokrit), MCH (Mean

Corpuscular Hemoglobin), MCHC (Mean Corpuscular

Haemoglobin Concentration), PLT (Hitung Trombosit), limfosit,

sel granulosit. Alat ini dapat mengukur 60 sampel dalam 1 jam.

Setiap running membutuhkan sampel sebanyak 100 ul. Prinsip

operasi metode impedansi volumetrik digunakan untuk menghitung

konsentrasi dan volume RBC, PLT, WBC dan sub populasinya

(LYM, MID, GRA).

b. Prinsip

Metode impedansi adalah metode untuk penghitungan sel

melewati aperture kecil, dan mengukur kadar hemoglobin sel darah

merah menggunakan metode fotometri (Manual Book Abacus 3 CT,

2015).
 14

Gambar 2.1 Alat Hematology Analyzer ABACUS 3CT

B. Kerangka Pikir

Pengambilan Darah Vena Vacutainer K3EDTA sebanyak 4 ml

Faktor Yang Mempengaruhi :
menggunakan spuit 5 ml
1. Pra Analitik

a. Persiapan alat

b. Pengambilan 1 ml 3 ml

sampel
Perbandingan darah Perbandingan darah
c. Antikoagulan
dengan antikoagulan dengan antikoagulan
2. Analitik
tidak tepat tepat
a. Pemilihan metode

b. Penggunaan alat Terjadi pengenceran darah Tidak terjadi pengenceran darah

3. Post Analitik

a. Interpretasi hasil Trombosit membengkak

Trombosit normal
b. Pencatatan hasil krenasi

c. Validasi hasil

d. Pelaporan hasil

Trombosit stabil

Disintegrasi membentuk Disentrigasi membentuk

ukuran yang berbeda ukuran yang sama

 15

Trombosit meningkat
Trombosit menurun

Gambar 2.2 Skema Kerangka Pikir.

C. Hipotesis

Ada pengaruh perbedaan volume darah pada tabung vakum K 3EDTA

dengan jumlah trombosit.

 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Desain Penelitian

Karya tulis ilmiah ini menggunakan jenis penelitian analitik eksperimental.

B. Tempat dan Waktu Penelitian

1. Tempat

Tempat penelitian darah dan pemeriksaan sampel dilakukan di

Laboratorium Hematologi di Sekolah Tinggi Imu Kesehatan Nasional

Surakarta.

2. Waktu

Waktu penelitian karya tulis ilmiah dilakukan pada 1 April 2020

sampai dengan 30 April 2020.

C. Subyek dan Objek Penelitian

1. Subyek Penelitian

Subjek penelitian karya tulis ilmiah ini adalah mahasiwa tingkat dua,

Kelas 2A3 progam DIII Teknologi laboratorium medis di Sekolah Tinggi

Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta.

2. Obyek Penelitian

Objek penelitian karya tulis ilmiah ini adalah jumlah trombosit

mahasiwa tingkat dua progam DIII Teknologi laboratorium medis di

Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta.

 16

D. Populasi dan Sampel Penelitian

1. Populasi

Populasi sasaran pada peneliti adalah mahasiswa tingkat dua, kelas

2A3 progam DIII Teknologi laboratorium medis Sekolah Tinggi Iimu

KesehatanNasional Surakarta sebanyak 37 orang .

2. Sampel

Sampel penelitian ini adalah darah vena K3EDTA dari mahasiwa dan

mahasiswi tingkat dua, kelas 2A3 progam DIII Teknologi laboratorium

medis di Sekolah Tinggi Iilmu Kesehatan Nasional sejumlah 37 sampel .

E. Definisi Operasional Variabel Peelitian

1. Volume Darah

Banyaknya cairan yang terdiri dari atas plasma, sel sel merah dan sel

sel putih yang mengalir dalam pembuluh darah manusia ( Kamus KBBI).

Dengan menggunakan volume darah sebanyak 1 ml dan 3 ml darah dari

setiap sampel menggunakan tabung K3EDTA dari mahasiswa/i Sekolah

Tinggi Iilmu Kesehatan Nasional tingkat dua Progam DIII Teknologi

Laboratorium Medik sebanyak 37orang, sehingga jumlah sampel

seluruhnya 74 sampel.

Skala Ukur : Numerik

Variabel : Bebas
 17

2. Pemeriksaan Jumlah Trombosit

Merupakan pemeriksaan yang sering dilakukan di laboratorium klinik.

Hal ini disebabkan perannya penting dalam menegakan diagnosis dan

memberikan terapi(Wirawan, 2006).

Pada pemeriksaan jumlah trombosit hasil pemeriksaan jumah trombosit

mengunakan alat fotometer mikroab 300 dengan hematologi analyzer

abacus 3CT dinyatakan dalam mikromili.

Skala Ukur : Numerik

Variabel : Terikat

F. Teknik Sampling

Teknik sampling yang digunakan dalam penelitan ini menggunakan total

sampling, yaitu seluruh populasi diteliti(Dahlan, 2009).

Populasi sasaran
37 mahasiswa/i

Informed concent

37 mahasiswa/i

Total sampling

Responden 37 mahasiswa/i

Gambar 3.1 Skema teknik sampling

 18

G. Sumber Data Penelitian

Sumber data yang digunakan dalam pnelitian ini adalah data primer dan

data sekunder. Data primer merupakan data yang didapatkan dari hasil

penelitian yaitu data jumlah trombosit melalui pemeiksaan di laboratorium

Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta. Data sekunder merupakan

data yang didapatkan dari hasil penelitianyaitu seperti absensi mahasiswa

tingkat dua kelas 2A3 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta.

H. Instrumen Penelitian

1. Informed Consent

2. Alat Pengambilan Sampel

a. Tourniquet

b. Handscoon

c. Masker

d. Tabung K3EDTA

e. Plaster

f. Holder

g. Kapas

3. Alat dan Pemeriksaan

a. Alat hematology analyzer abacus 3CT

b. Darah vena

c. Alkohol 70%.
 19

I. Alur penelitian

Populasi 37 orang

Inform concent

Total sampling
37 sampel

Pengambilan darah vena

1 ml darah K3EDTA 3 ml darah K3EDTA

Pemeriksaan trombosit Pemeriksaan trombosit

menggunakan alat menggunakan alat
Hematologi Analyzer. Hematologi Analyzer

Hasil hitung jumlah Hasil hitung jumalh

trombosit. trombosit.

Analisis data

Kesimpulan

Gambar 3.2 Alur Penelitian

 20

Cara kerja penelitian

a. Cara pegabilan darah vena

1) Pasang jarum pada holder, pastikan terpasang erat.

2) Posisi probandus duduk dan meletakan tangan dalam keadaan lurus sejajar

dengan tinggi jantung.

3) Pasang pembendung tiga perempat dibawah lengan atas yang akan ditusuk.

4) Desinfeksi bagian yang akan ditusuk menggunakan alkohol 70% dan

tunggu sampai kering.

5) Renggangkan kulit diatas vena dengan ibu jari supaya vena tidak bergerak.

6) Tusuk bagian yang akan diambil darahnya dengan jarum yang telah

terpasang pada holder suhu 15-20 derajat, saat indikator darah telah terlihat

pada jarum segera dipasang tabung vakutainer pada holder.

7) Lepaskan pembendung.

8) Setelah darah tidak mengalir lagi, lepaskan tabung vacutainer yang telah

berisi darah tersebut.

9) Letakkan kapaas diatas tempat tusukan dan tarik dari vena perlahn lahan .

10) Minta Probandus supaya menekan bekas tusukan dengan kapas.

11) Tutup luka tusukan dengan plester.

12) Homogenkan vacutainer berisis darah dengan bolak balik 8-10 kali.

13) Lepaskan jarum dari holder dan buang pada tempat sampah biohazard.

14) Labeli tabung atau botol yang teelah berisi sampel darah dengan keterangan

nama pasien, umur dan jenis kelamin.

 21

b. Pemeriksaa jumlah trombosit menggunakan hematologi analyzer

1) Prinsip

Pengukuran fotometrik dari absorbansi cahaya pengenceran white

blood cell (WBC) menentuan jumlah trombosit, penyerapan cahaya

fotometrik yaitu pengenceran sampel darah white blood cell (WBC) yang

dilarisi dan dianalisa untuk jumla trombosit berdasarkan kandungan

chromagen stabil, (Panduan Operator Abacus 3CT).

2) Cara kerja

a) Persiapan alat

(1) Hidupkan abacus 3CT menggunakan saklar daya utama dibagian

belakang, diatas konnektor power input DC.

(2) Posisi ON ditandai dengan symbol I.

(3) Selama start up akan mucul tampilan dilayar.

(4) Perangkat lunak ini mucul dimain menu.

(5) Jika igin menelusuri database maka tidak ada tindakan lebih lanjut

yang diperlukan penggunakan.

(6) Jika ingin menjalankan sampel, masuk ke menu pengukuran, melalui

sebuah pengukuran baru akaan melakukan prime reagen dan

membersihkan secara otomatis.

b) Persiapan reagen

(1) Reagen stabil dalam suhu 20-35oC.

(2) Reagen siap pakai.

 22

c) Persiapan sampel

(1) Pastikan bahwa tabung terisi sampel sampai batas garis yang

terdapat pada pinggir tabung sampel antikoagulan K3EDTA tidak

hanya mencegah terjadinya pembekuan darah juga tetapi

pengenceran, jika volume darah sedikit terjadi pengenceran yang

dapat mempengaruhi hasil pengukuran.

(2) Pastikan bahwa darah dengan antikoagulan K3EDTA tercampur

secara benar dengan membolak balik tabung 8-10 kali, jangan

mengguncang atau mengocok sampel, karena hal ini dapat merusak

sel sel darah dan menyebabkan gelembung mikro.

(3) Miniamal 30 menit harus dilalui antara pengambilan darah dan

menjalankannya pada Abacus 3CT.

(4) Untuk analisi memastikan bahwa ineraksi antara darah dengan

antikoagulan K3EDTA telah spenuhnya stabil.

(5) Gunakan antikoagulan K3EDTA

(6) Lakukan pengukuran sampel darah minimsl 7 jam setelah

pengambilan.

(7) Pengukuran dilakukan pada suhu kamar.

(8) Sebelum menjalankan pengukuran, sampel harus dihomogenkan

dahulu.

(9) Jangan mengirim atau menyimpan sampel pada suhu tubuh normal

(Panduan Operator Abacus 3CT).

 23

d) Pengukuran Sampel

(1) Homogenkan sampel sebanyak 8-10 kali secara perlahan.

(2) Pada menu utama pilih “ pengukuran”lalu”sampel baru”.

(3) Buka tutup tabung jika diperlukan.

(4) Letakan tabung sampel pada adaptor.

(5) Atur kedalaman jarum jika diperlukan.

(6) Pilih sampel profil (human, male, felame)

(7) Pilih menu pre-diluted jika diperlukan.

(8) Masukan sampel ID secara manual atau pun pembacaan barcode.

(9) Tekan “jalankan “ pada layar. Sampel rotor akan masuk dan jarum

menghisap 10 mikromili sampel pada tabung .jarum sampel ditarik

dan dibagian luar jarum akan dibilas dengan diluents. Setelah

beberapa detik sampel rotor akan keluar, keluar tabung dari sampel

rotor .

(10) Setelah 1 menit alat akan menampilkan hasil.

(11) Cetak, hasil dapat dicetak.

(12) Kembali, kembali kemenu pengukuran

(13) Sampel baru, menjalankan sampel baru

(14) Mengulang, untuk mengulang sampel sebelumnya dengan sampel

ID yang sama.

(15) Buang, membuang data pengukuran jika terjadi kesalahan

(Panduan Operator Abacus 3CT).

e) Mematikan Alat
 24

(1) Kembali ke posisi special menu.

(2) Tekan tombol “keluar “ pada menu utama.

(3) Tekan “ penutupan “.

(4) Abacus 3CT akan menampilkan pesan dan memberikan nada yang

menunjukan nada bahwa alat itu aman untuk mematikan listrik

setelah prosedur shut down selesai, memtikan instrumen

menggunakan saklar

daya pada penel belakang. Posisi “OFF” ditandai dengan simbol “0”

(Panduan Operator Abacus 3CT).

J. Teknis Analiss Data Penelitian

1. Uji normalitas

Data yang diperoleh dari penelitian ini akan dianalis dengan SPSS 16.0

for windows, dilakukan alisis data untuk mengetahui karakeristik jenis data

dengan melakukan uji normalitas. Menggunakan uji saphiro wilk karena

jumlah data kurang dari 50 . Jika nilai p>0,05 maksimal data terdistribusi

normal ( Dahlan, 2009).

2. Uji hipotesis

Jika data terdistribusi normal maka dilanjutkan uji T berpasangan, jika

tidak terdistribusi normal menggunakan uji Willcoxon (Dahlan, 2009).

3. Menarik hipotesis

H0 : Tidak ada pengaruh perbedaan volume darah pada tabung vakum

K3EDTA dengan jumlah trombosit.

H1 : Ada pengaruh perbedaan volume darah pada tabung vakum

 25

K3EDTA dengan jumlah trombosit.

Tabel 3.1 Jadwal Rencana Penelitian

Bulan
No Kegiatan Februari Maret April Mei Juni
2020 2020 2020 2020 2020
1. Pengajuan Judul
2. Penyusunan
Proposal
3. Ujian Proposal
4. Pelaksanaan
Penelitian
5. Penyusunan
Laporan
6. Ujian KTI
7. Seminar Hasil
 26

DAFTAR PUSTAKA

Dahlan, M.S. 2011, Statistik untuk kedokteran dan kesehatan. Jakarta : Salemba
Medika

Firani, N.K. 2018 Mengendali Sel-Sel Darah dan Kelainan Darah. Malang:UB
Press

Gandasoebrata. 2007. Penuntun Laboratorium Klinik. Jakarta: Dian

Handayani W., Hariwibowo A. 2008. Buku Ajar Keperawatan pada Klien dengan
Gangguan Sistem Hematologi. Jakarta: Salemba Medika

Hoffbrand, A.V.,Moss.P.A.H. (2013). Kapita Selekta Hematologi Edisi 6.Jakarta:

Penerbit Buku Kedokteran EGC

Kemenkes. 2011. Pedoman Interprestasi Data Kinik. Jakarta: Kementrian

Kesehatan Republik Indonesia

Manual Book Hematology Analyzer Abacus 3 CT

Maharani , R. D., Angggraini, H., Isworo, T. J. (2017). Perbedaan Hitung

Jumlah Trombosit Metode Impedansi, Langsung dan Barbara Brown.
Semarang: Universitas Muhammadiayah Semarang

Pramytasari E., Krihariyani D., dan Wahyuni S. 2016. Sitrat Estimasi

Perhitungan Jumlah Trombosit Sampel Darah terhadap Sampel Darah
EDTA. Jurnal Analis Kesehatan Sains ISSN : 2302-3635

Riswanto. 2013. Pemeriksaan Laboratorium Hematologi. Yogyakarta : Alfa

Media dan Kanal Medika.

Sidikin, M. (2012). Biokimia darah. Jakarta: Widya Medika

Suhud, Hardiasari, R., Nuryati, A. (2015). Perbedaan Jumlah Trombosit Pada

Darah EDTA Yang Segera Diperiksa Dan Penundaan Selama 1 Jam
Dilaboratorium RSJ Grhasia. Medical Laboratory Technology
Journal.1(12). PP 91-95

Wahdaniah dan Sri Tumpuk. 2018. Perbedaan Penggunaan Antikoagulan

K2EDTA dan K3EDTA Terhadap Hasil Pemeriksaan Indeks Eritrosit. Jurnal
Laboratorium Khatulistsiwa p-ISSN: 2597-9523
 27

Wirawan R., 2004, dalam Sanatang 2018, Perbandingan Jumlah Trombosit

Terhadap Variasi Volume Darah Dengan Antikoagulan K3EDTA Metode
Impedendansi Elektrikdi RS Hati Mulia
 28

LAMPIRAN

Lampiran 1. Informed consent

PENGANTAR

PERSETUJUAN MENJADI RESPONDEN

Peneliti atas nama Agustin Putri Pamungkas mahasiswi Sekolah Tinggi Ilmu

Kesehatan Nasional Surakarta tahun 2020 akan melakukan penelitian “Pengaruh

Perbedaan Volume Darah pada Tabung Vacutainer K3EDTA terhadap Nilai

Hematokrit” yang akan diajukan sebagai Karya Tulis Ilmiah sebagai persyaratan

menyelesaikan program pendidikan Diploma III Teknologi Laboratorium Medis.

Peneliti mengajak teman - teman agar berkenan untuk ikut berpartisipasi dalam

penelitian ini.

A. Kesukarelaan untuk Mengikuti Penelitian

Jika teman - teman berkenan menjadi responden dalam penelitian saya,

maka hal tersebut bertujuan untuk kelangsungan penelitian ini. Namun

apabila teman - teman tidak berkenan sehubungan dengan hal tersebut maka

tidak akan ada ancaman terhadap Anda.

B. Prosedur Penelitian

Apabila teman - teman berkenan untuk berpartisipasi dalam penelitian

ini, Anda diminta untuk menadatangani informed consent yang tertera di

bawah ini. Adapun prosedur yang lebih lanjut adalah sebagai berikut:

1. Anda akan diwawancarai oleh peneliti untuk menanyakan identitas.

 29

2. Anda akan dilakukan pengambilan darah vena yang dilakukan oleh

peneliti dan bersedia dilakukan pengambilan darah ulang apabila terjadi

kegagalan dalam pengambilan darah vena atau bila terjadi hemolisis pada

sampel.

3. Setiap probandus akan diambil darah vena sebanyak 4 mL.

C. Kewajiban responden penelitian

Sebagai responden penelitian, teman - teman berkewajiban mengikuti

aturan atau petunjuk penelitian seperti yang tertulis di atas. Bila ada yang

belum jelas, Anda dapat bertanya lebih lanjut kepada peneliti.

D. Risiko dan Efek Samping dan Penanganannya

Perlakuan yang peneliti lakukan tidak memberikan efek samping, namun

pada beberapa orang dapat terjadi hematoma. Namun hematoma tersebut

dapat hilang dengan sendirinya atau dikompres dengan air hangat maupun

dioles dengan salep thrombophop. Apabila ada efek samping diluar perkiraan

maka peneliti akan bertanggung jawab dan menyelesaikan secara

kekeluargaan.

E. Manfaat

Keuntungan langsung yang diperoleh adalah Anda mendapatkan

pemeriksaan laboratorium untuk mengetahui nilai hematokrit.

F. Kerahasiaan

Semua informasi yang berkaitan dengan identitas subyek penelitian akan

dirahasiakan dan hanya akan diketahui oleh peneliti. Hasil penelitian akan

dipublikasikan tanpa identitas subyek penelitian.

 30

G. Informasi Tambahan

Teman - teman diberi kesempatan untuk menanyakan hal yang belum

jelas sehubungan dengan penelitian ini kepada peneliti.

 31

INFORMED CONSENT

Saya yang bertanda tangan dibawah ini :

Nama :

Umur :

Jenis Kelamin :

No. Telepon/HP ;

Setelah menerima penjelasan tentang tujuan, prosedur, dan konsekuensi

*
serta manfaat menjadi responden, saya menyatakan SETUJU / TIDAK SETUJU

secara sukarela menjadi responden dalam penelitian ini dan menerima tindakan

pengambilan darah yang akan dilakukan oleh peneliti.

Sukoharjo, Maret 2020

Responden Peneliti

( ) (Agustin Putri Pamungkas)

Catatan: (*) Coret yang tidak perlu