Teknik Pewarnaan Semi Permanen Nematoda

Menurut penelitian Khairunnisa (2007) pewarnaan untuk nematoda adalah dengan pewarnaan semi
permanen menggunakan minyak cengkeh dan KOH 10%. Sifat kimia minyak cengkeh dan KOH 10%
mendukung proses pewarnaan preparat cacing. KOH membantu dalam melisiskan dinding kutikula
nematoda dan minyak cengkeh dengan proses oksidasi mewarnai morfologi melalui sifat permeabilitas
dinding tubuh cacing.

Teknik pewarnaan minyak cengkeh dan KOH 10% adalah:

- Cacing direndam dalam KOH 10 % selama 1-3 menit untuk menipiskan lapisan kutikula agar cacing
nematoda terlihat agak melunak dan transparan.

- Sampel cacing kemudian dimasukkan ke dalam wadah yang berisi minyak cengkeh selama kurang lebih
30 detik -1 menit sampai organ-organ tubuh terlihat lebih jelas.

- Cacing yang terwarnai dimasukkan ke dalam Alkohol bertingkat 70%, 85% 95 % dan Alkohol absolut
secara berurut masing-masing selama 15-30 detik.

- Kemudian di-mounting dengan Entellan atau Canada balsam.

Pengamatan dan Pengukuran Pengamatan struktur morfologi cacing dilakukan dibawah pemeriksaan
mikroskop. Dilakukan pengambilan gambar preparat untuk dokumentasi dan mempermudah
pengamatan. Pengukuran menggunakan video mikrometer untuk mengukur panjang dan lebar badan
cacing agar membantu dalam mengidentifikasi jenis cacing.