Rehanum Mauratcs Muhksin: Nutrisi Dan Kultivasi Mikroorganisme
Rehanum Mauratcs Muhksin: Nutrisi Dan Kultivasi Mikroorganisme
Beranda ▼
Rabu, 20 Mei 2015
MAKALAH MIKROBIOLOGI
NUTRISI DAN KULTIVASI MIKROORGANISME
Keberhasilan kami dalam menyelesaikan makalah ini tidaklah terlepas dari peran serta pihak –
pihak terkait. Atas segala bantuan dan yang diberikan penyususun mengucapkan terima kasih yang
sebesar – besarnya.
Kami menyadari bahwa ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu penyusun
mengharapkan masukan dan kritik yang membangun dari dosen yang membaca makalah ini.
Penyusun berharap hasil dari makalah ini dapat bermanfaat bagi siapa pun yang membutuhkanya.
Semoga makalah ini dapat meningkatkan pemahaman kita di masa yang akan datang Amin.
Palu, maret 2015
Penyusun
DAFTAR ISI
Lampiran
HALAMAN JUDUL
KATA PENGANTAR
DAFTAR ISI
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang.........................................................................
1.2 Rumusan Masalah....................................................................
1.3 Tujuan......................................................................................
BAB II PEMBAHASAN
BAB III PENUTUP
3.1 Kesimpulan..............................................................................
3.2 Saran.......................................................................................
DAFTAR PUSTAKA
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar belakang
Mikroorganisme sebagai makhluk hidup sama dengan organisme hidup lainnya sangat
memerlukan energi dan bahan-bahan untuk membangun tubuhnya, seperti dalam sintesis
protoplasma dan bagian-bagian sel lainnya. Bahan-bahan tersebut disebut nutrien. Untuk
memanfaatkan bahan-bahan tersebut, maka sel melakukan suatu kegiatan-kegiatan, sehingga
menyebabkan perubahan kimia di dalam selnya. Semua reaksi yang teratah yang berlangsung di
dalam sel ini disebut metabolisme. Metabolisme yang melibatkan berbagai macam reaksi di dalam
sel tersebut, hanya dapat berlangsung atas bantuan dari suatu senyawa organik yang disebut juga
biokatalisator yang dinamakan enzim.
Semua makhluk hidup memerlukan bahan makanan. Bahan makanan ini diperlukan untuk
sintesis bahan sel dan untuk mendapatkan energi. Demikian juga dengan mikroorganisme, untuk
kehidupannya membutuhkan bahan-bahan organik dan anorganik dari lingkungannya. Bahan-bahan
tersebut disebut dengan nutrient (zat gizi), sedang proses penyerapanya disebut proses nutrisi.
Peran utama nutrien adalah sebagai sumber energi, bahan pembangun sel, dan sebagai aseptor
elektron dalam reaksi bioenergetik (reaksi yang menghasilkan energi). Oleh karenanya bahan
makanan yang diperlukan terdiri dari air, sumber energi, sumber karbon, sumber aseptor elektron,
sumber mineral, faktor pertumbuhan, dan nitrogen. “Selain itu, secara umum nutrient dalam media
pembenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting untuk sintesis biologik oranisme baru.
Media berfungsi untuk menumbuhkan mikroba, isolasi, memperbanyak jumlah, menguji sifat-sifat
fisiologi dan perhitungan jumlah mikroba, dimana dalam proses pembuatannya harus disterilisasi
dan menerapkan metode aseptis untuk menghindari kontaminasi pada media
Suatu medium yang mengandung substansi kompleks seperti ekstrak daging sapi, ekstrak
khamir, tripton, dan darah disebut sebagai medium buatan atau medium kompleks (artificial or
complex medium). Sebagai lawannya, kita acu medium yang rumus kimia masing-masing ramuannya
dapat dituliskan sebagai medium sintesis (synthtetical medium) atau medium yang ditentukan
(difined medium). Medium sintesis mungkin sangat rumit dan sangat berbeda sesuai dengan
organisme tertentu yang hendak ditumbuhkan. Untuk sebagian besar, medium sintesis hanya
digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme di laboratorium penelitian.
1.2 Rumusan Masalah
1.3 Tujuan
BAB II
PEMBAHASAN
Berdasarkan cara-cara pengambilan nutrient maka mikroba dapat dibagi atas jasad osmotrof dan
jasad fagotrof. Jasad osmotrof mengambil nutrien dalam bentuk larutan, misalnya bakteri dan fungi,
sedangkan jasad fagotrof mengambil nutrien secara fagositosis lalu dicerna di dalam vakuola
makanan, misalnya protozoa, jasad osmotrof mengeluarkan eksoenzim untuk memecah molekul
besar misalnya protease untuk memecah protein menjadi asam amino, amilase untuk memecah pati
menjadi gula, lipase memecah lemak menjadi asam lemak dan gliserol. Selanjutnya asam amino,
gula, asam lemak, dan gliserol diserap ke dalam sel untuk digunakan.
Mikroorganisme dapat menggunakan makanan dalam bentuk padat dan dapat pula yang hanya
menggunakan bahan-bahan dalam bentuk cairan atau larutan. Mikroorganisme yang menggunakan
makanannya dalam bentuk padat tergolong tipe holozoik. Mikroorganisme yang dapat
menggunakan makanannya dalam bentuk cairan atau larutan disebut holofitik. Ada beberapa
mikroorganisme yang dapat menggunakan makanannya dalam bentuk padatan, tetapi makanan
tersebut sebelumnya harus dicerna, di luar sel dengan bantuan enzim ekstraseluler.
Peran utama nutrien adalah sebagai sumber energi, bahan pembangun sel, dan sebagai aseptor
elektron dalam reaksi bioenergetik (reaksi yang menghasilkan energi). Oleh karenanya bahan
makanan yang diperlukan terdiri dari air, sumber energi, sumber karbon, sumber aseptor elektron,
sumber mineral, faktor pertumbuhan, dan nitrogen. “Selain itu, secara umum nutrient dalam media
pembenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting untuk sintesis biologik oranisme
baru .
Mikroba memerlukan nutrien sebagai sumber materi dan energy untuk menyusun komponen
sel seerti genom, membrane plasma dan dinding sel. Bentuk nutrient yang diperlukan bermacam-
macam, tergantung jenis mikrobanya, misalnya kebutuhan karbon untuk jasad fotoautotrof dalam
bentuk CO2, sedangkan bagi jasad kemoorganotrof dalam bentuk bahan organik. Dengan
mengetahuia keperluan nutrien mikroba para ilmuwan dapat melakukan penelitian untuk
menentukan peranan mikroba di alam dan kegunaannya dalam kehidupan manusia. Uraian berikut
akan membahas mengenai tipe nutrisi yang dijumpai diantara mikroba.
1. Kegiatan sel seperti biosintesis komponen sel, transport nutrient ke dalam sel dan motilitas
memerlukan energy. Berdasarkan sumber energy, mikroba dibagi atas jasad fototrof yang
menggunakan oksidasi senyawa kimia sebagai sumber energy. Dan jasad kemotrof yang
menggunakan oksidasi senyawa kimia sebagai sumber energy. Terleas dari sumber energy yang
digumakan, mikroba akan mengubah energy yang diperoleh menjadi senyawa pembawa energy
yaitu ATP yang dapat dipakai untuk kegiatan sel. Ada 2 kelompok bakteri fototrof yaitu sianobakteri
dan bakteri fotosintetik. Kedua kelompok ini mengubah energy cahaya menjadi ATP melalui proses
fotosintesis. Mikroba khemotrof mengoksidasi senyawa kimia seperti glukosa atau ammonium,
kemudian energy yang dilepaskan diubah menjadi ATP dalam proses fermentasi atau respirasi.
2. Semua jasad hidup memerlukan karbon sebab unsurmkarbon terdapat dalam semua mikromolekul
penyusun sel seperti rotein, karbohidrat, asam nukleat dan lipid. Berdasarkan sumber karbon,
mikroba dapat digolongkan atas jasad heterotrof dan autotrof. Jasad autotrof bila menggunakan
karbondioksida sebagai sumber karbon, bila jasad tersebut memperoleh energinya dari cahaya
disebut fotoautotrof, dan bila jasad tersebutmemperoleh energinya dengan cara mengoksidasi
senyawa kimia maka disebut kemoautotrof. Jasad heterotrof menggunakan bahan organic sebagai
sumber karbon.
3. Semua jasad hidup memerlukan sulfur (blerang) dan fosfor. Sulfur dipergunakan untuk membentuk
asam amino metionin dan sistein serta koensim. Mikroba memperoleh sulfur dalam bentuk garam
sulfat, H2S, granula sulfur, thiosulfat atau dalam bentuk bahan organic (sistein dan metionin). Fosfor
dipergunakan membentuk asam nukleat, fosfolipid dan koensim. Mikroba dapat mengambil fosfor
dalam bentuk organic dan anorganik. Garam fosfat adalah yang paling sering digunakan
sebagaisumber fosfat meskiun dapat pula memakai nukleotida.
4. Semua jasad hidup memerlukan nitrogen sebab nitrogen dipergunakan untuk mensintesis asam
amino, nukleotida dan vitamin. Keerluan akan nitrogen dapat dipenuhi dalam berbagai bentuk
seperti protein atau polipeptida, garam nitrat atau amonium bahkan ada mikroba yang dapat
mengambil dalam bentuk N2 seperti Rhizobium dan Azotobacter.
5. Semua jasad hidup memerlukan beberapa unsure logam, natrium, kalium, kalsium, magnesium,
mangan, besi, seng, tembaga dan kobalt untuk pertumbuhannya yang normal. Mineral ini diperlukan
untuk aktivitas enzim dan molekul yang lain misalnya Mg sebagai penyusun klorofil, Co untuk
aktivitas enzim nitrogenase, dan Fe merupakan komponen sitokrom.
Oksigen (O) Penyusun air sel, bahan-bahan organik sel, sebagai O2 aseptor
elektron, dalam respirasi aerob
Cu, Zn, Mo
6. Semua jasad hidup memerlukan vitamin (senyawa organik yang penting untuk pertumbuhan).
Kebanyakan vitamin berfungsi membentuk substansi yang mengaktivasi enzim.meskipun semua
bakteri membutuhkan vitamin di dalam proses metaboliknya yang normal, beberapa mampu
mensintesis seluruh keperluan vitaminnya dari senyawa-senyawa lain di dalam medium. Yang lain
tidak akan tumbuh kecuali bila ditambahkan satu atau lebih vitamin ke dalam mediumnya, seperti
Leuconostoc mesentroides tidak mampu mensintesis beberapa asam amino dan vitamin sehingga
harus ditambahkan dalam keadaan jadi ke dalam mediumnya.
7. Oksigen merupakan unsure yang terdaat dalam molekul hayati seperti asam amino, nukleotida,
gliserida dan molekul lain. Keperluan akan oksigen dipenuhi bersamaan dangan masuknya nutrient
lain sepertirotein dan lipid. Disamping itu, oksigen dalam bentuk O2 juga diperlukan untuk
menjalankan respirasi aerobic.
8. Semua jasad hidu memerlukan air bagi kehiduan karena semua aktivitas metabolism terjadi dalam
lingkungan air. Ketersediaan air yang dapat digunakan dalam mikroba sering dinyatakan dengan
aktivitas aair (Aw). Aktivitas air suatu bahan dapat dihitung dengan menentukan kelembaban
relatifnya (RH). Untuk bakteri, semua nutrient harus ada dalam bentuk larutan sebelum dapat
memasuki bakteri tersebut.
Selain menyediakan nutrisi yang sesuai untuk kultivasi bakteri, juga perlu disediakan kondisi fisik
yang memungkinkan pertumbuhan optimum. Mikroba tidak hanya bervariasi dalam persyaratan
nutrisinya, tetapi menunjukan respon yang berbeda terhadap kondisi fisik di lingkungannya. Untuk
berhasilnya kultivasi mikroba diperlukan suatu kombinasi nutrisi serta lingkungan fisik yang sesuai.
Ada 5 arameter lingkungan yang utama yang perlu diperhatikan dalam menumbuhkan mikroba yaitu
temperature, kelembaban (RH), kadar oksigen, pH dan osmosis.
a. Temperatur
Karena semua proses pertumbuhan bergantung pada reaksi kimiawi dank arena laju reaksi-
reaksi ini dipengaruhi oleh temperature, maka pola pertumbuhan mikroba sangat dipengaruhi oleh
temperature. Temperature juga mem pengaruhi laju pertumbuhan dan penambahan jumlah sel.
Keragaman suhu dapat juga mengubah proses-proses metabolic serta morfologi sel. Setiap mikroba
tumbuh pada suatu kisaran suhu tertentu. Atas dasar ini maka mikroba ada yang bersifat psikrofilik
yang tumbuh pada 00 dampai 200 C, mesofilik yang tumbuh pada 200 sampai 450 C dan termofilik
yang tumbuh pada temperature 450 sampai 800 C. Temperature inkubasi yang memungkinkan
pertumbuhan tercepat selama periode waktu yang singkat (12 sampai 24 jam) dikenal sebagai
temperature pertumbuhan optimum.
b. Kondisi atmosfer seperti kadar oksigen, RH dan tekanan udara
Mikroba memperlihatkan keragaman yang luas dalam hal respons terhadap oksigen bebas dan
atas dasar ini maka mikroba dibagi menjadi empat yaitu aerobik (memerlukan oksigen), anaerobik
(tumbuh tanpa oksigen molekuler), anaerobic fakultatif (tumbuh pada keadaan aerobic dan
anaerobik), dan mikroaerofilik (tumbuh bila ada sedikit oksigen atmosferik). Beberapa mikroba
bersifat anaerobik obligat, bila terkena oksigen akan terbunuh, oleh karena itu untuk menumbuhkan
mikroba anaerobic diperlukan teknik khusus agar tercapai keadaan anaerob. Keperluan
penumbuhan jasad anaerob obligat dapat dipenuhi dengan menggunakan alat yang disebut
anaerobic jar.
pH optimum bagi kebanyakan mikroba terletak antara 6.5 sampai 7,5. Bagi kebanyakan mikroba
pH minimum dan maksimum antara 4 sampai 9. Pertumbuhan mikroba sangat dipengaruhi oleh pH
karena nilai pH sangat menentukan aktivitas enzim. Bila mikoba di kultivasi di dalam suatu medium
yang mula-mula pH-nya 7 maka kemungkinan pH ini akan berubah. Pergeseran pH ini dapat
sedemikian besar sehingga menghambat pertumbuhan. Pergeseran pH dapat dicegah dengan
menggunakan larutan penyangga atau bufer dalam medium. Bufer merupakan senyawa yang dapat
menahan perubahan pH misalnya KH2PO4 dan K2HPO4. Beberapa bahan nutrisi medium seperti
pepton mempunyai kapasitas bufer. Perlu atau tidaknya suatu medium diberi bufer tergantung
kepada maksud penggunaannya dan dibatasi oleh kapasitas bufer yang dimiliki senyawa-senyawa
yang digunakan.
d. Tekanan osmosis
Tekanan osmosis adalah besarnya tekanan minimum yang dierlukan untuk mencegah aliran air
yang menyebrangi membrane di dalam larutan. Contohnya : jika larutan 10 % sukrosa di dalam
kantong membrane dialysis diletakkan dalam air dalam gelas maka molekul air yang ada dalam gelas
akan mengalir ke dalam kantong analisis. Besarnya tekanan yang diperlukan untuk mencegah aliran
molekul air dalam gelas ke dalam kantong dialisis merupakan nilai tekanan osmosis larutan sukrosa
tersebut. Berdasarkan tekanan osmosanya maka larutan tempat pertumbuhan mikroba dapat
digolongkan atas larutan hipotonis, isotonis dan larutan hipertonois. Mikroba biasanya hidup di
lingkungan yang bersifat agak hipotonis sehingga air akan mengalir dari lingkungannya ke dalam sel
sehingga sel menjadi mengembang kaku. Adanya dinding sel dapat mencegah pecahnya sel mikroba.
Di habitat alaminya, mikroorganisme biasanya tumbuh dalam populasi yang kompleks dan
terdiri dari beberapa spesies. Hal ini menyebabkan penelitian mengenai mikroorganisme dalam
berbagai habitat menjadi sulit untuk dilakukan. Oleh karena itu, diperlukan suatu teknik untuk
memisahkan populasi yang kompleks ini menjadi spesies yang berbeda-beda sebagai biakan murni.
Biakan murni adalah suatu populasi sel yang ditumbuhkan dari satu sel induk.
Proses isolasi dan upaya mempertahankan keadaan murni memerlukan teknik aseptik . Oleh
karena itu, sebelum mengkultur suatu mikroba harus dilakukan suatu proses sterilisasi.
Setelah semua bahan dan alat yang akan digunakan dalam proses kultivasi disterilkan, maka
dimulailah proses isolasi untuk mendapatkan biakan murni. Bahan yang diinokulasikan pada medium
disebut inokulum. Di bawah ini ada beberapa teknik inokulasi yang umum dilakukan di laboratorium
mikrobiologi.
Teknik penyebaran yang lebih sering disebut dengan Spread-Plate adalah teknik langsung dan
mudah untuk mendapatkan suatu biakan murni. Di bawah ini adalah gambar saat menginokulasi
mikroba dengan menggunakan teknik Spread-Plate. Campuran dari beberapa spesies bakteri
disebarkan di permukaan medium agar, sehingga setiap sel akan tumbuh menjadi koloni yang
terpisah sempurna dan dapat dilihat secara makroskopis berupa kumpulan mikroba di atas medium
padat. Setiap koloni yang terbentuk merupakan biakan murni. Di bawah ini adalah gambar dari
biakan murni yang diperoleh dengan menggunakan teknik Spread-Plate.
Biakan murni juga dapat diperoleh dengan teknik goresan ( Streak-Plate Technique ). Inokulum
digoreskan di atas medium dengan memakai ose menurut pola tertentu, yaitu:
1. Goresan T
Untuk membuat biakan murni dangan teknik goresan T, ada beberapa langkah yang harus
diikuti, yaitu :
ü Lempengan dibagi menjadi 3 bagian dengan hutuf T pada bagian luar dasar cawan petri.
ü Gores ulang daerah I sebanyak 3-4 kali dan teruskan goresan di daerah II.
2. Goresan Kuadran
Teknik ini sama dengan goresan T, hanya lempengan agar dibagi menjadi empat.
3. Goresan Radian
c. Putar lempengan agar 90o dan buat goresan terputus dimulai dari bagian pinggir lempengan.
d. Putar lempengan agar 900 dan buat goresan terputus di atas goresan sebelumnya.
e. Pijarkan ose.
4. Goresan Sinambung
ü Ambil satu mata ose suspensi dan goreskan setengah permukaan lempengan agar.
ü Jangan pijarkan ose, putar lempengan 1800, gunakan sisi mata ose yang sama dan gores pada sisa
permukaan lempengan agar.
Setelah inkubasi, sel-sel mikroba memperbanyak diri dan dalam waktu 18-24 jam akan
terbentuk suatu massa sel yang disebut koloni. Koloni yang terbentuk ini adalah biakan murni. Di
bawah ini adalah hasil kultivasi berupa biakan murni yang diperoleh dengan teknik goresan.
Biakan murni yang dihasilkan, jika disimpan dalam jangka waktu yang lama akan mudah sekali
mengalami mutasi. Ini berarti, biakan murni yang disimpan terlalu lama bukan lagi biakan murni
yang semula. Oleh karena itu, ada beberapa hal yang harus dilakukan untuk mencegah atau
setidaknya mengurangi kemungkinan terjadinya mutasi, yaitu :
a. Secara periodik, biakan harus dipindahkan ke medium baru, sebaiknya pemindahan dilakukan pada
fase log.
b. Biakan harus disimpan pada suhu rendah dan terhindar dari radiasi.
Mikroba diliofilisasikan, yaitu dimasukkan dalam ampul berisis susu kering bercampur CO2
kemudian disimpan pada tempat bersuhu rendah.
BAB III
PENUTUP
3.1 KESIMPULAN
Adapun kesimpulan dari hasil makalah yang dibuat yaitu :
1. Berdasarkan cara-cara pengambilan nutrient maka mikroba dapat dibagi atas jasad osmotrof dan
jasad fagotrof.
2. Jasad osmotrof mengambil nutrien dalam bentuk larutan, misalnya bakteri dan fungi.
3. Jasad fagotrof mengambil nutrien secara fagositosis lalu dicerna di dalam vakuola makanan,
misalnya protozoa, jasad osmotrof mengeluarkan eksoenzim untuk memecah molekul besar
misalnya protease untuk memecah protein menjadi asam amino, amilase untuk memecah pati
menjadi gula, lipase memecah lemak menjadi asam lemak dan gliserol.
4. Selain menyediakan nutrisi yang sesuai untuk kultivasi bakteri, juga perlu disediakan kondisi fisik
yang memungkinkan pertumbuhan optimum.
5. Mikroba tidak hanya bervariasi dalam persyaratan nutrisinya, tetapi menunjukan respon yang
berbeda terhadap kondisi fisik di lingkungannya.
6. Untuk berhasilnya kultivasi mikroba diperlukan suatu kombinasi nutrisi serta lingkungan fisik yang
sesuai.
7. Ada 5 arameter lingkungan yang utama yang perlu diperhatikan dalam menumbuhkan mikroba yaitu
temperature, kelembaban (RH), kadar oksigen, pH dan osmosis.
3.2 SARAN
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 2009. Nutrisi Mikroba, Sebuah Esensi Dasar Untuk Kehidupan Mikroba.
http://zaifbio.wordpress.com/2009/01/31/nutrisi-mikroba-sebuah-esensi-dasar-untuk-kehidupan-
mikroba/. Diakses pada tanggal 19 maret 2015.
Djide, M., dan Sartini. 2006. Mikrobiologi Farmasi Dasar. Universitas Hasanuddin : Makassar.
Dwyana, Zaraswaty dan Nur Haedar. 2009. Penuntun praktikum Mikrobiologi Pangan. Jurusan Biologi.
Universitas Hasanuddin : Makassar.
Jawetz, dkk. 1995. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba Medika, Surabaya.
Irianto, K. 2006. Mikrobiologi Menguak Dunia Mikroorganisme Jilid 1. CV. Yrama Widya : Bandung
Unknown di 08.53
Berbagi
1 komentar:
1.
Unknown
Diberdayakan oleh Blogger.