LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019
Terapi sel CAR T: Era baru untuk pengobatan kanker (Ulasan)
RIMJHIMMOHANTY, CHITRAN ROY CHOWDHURY, SOLOMONAREGA,
PRAKRITI SEN, POOJAGANGULY dan NILADRI GANGULY
Laboratorium Biologi Kanker, Sekolah Bioteknologi, Universitas Kalinga Institute of Industrial Technology (KIIT),
Bhubaneswar, Odisha 751024, India
Diterima 9 April 2019; Diterima 12 Agustus 2019
DOI: 10.3892 / atau. 2019.7335
Abstrak. Kanker baru-baru ini telah diidentifikasi sebagai yang terdepan
penyebab kematian di seluruh dunia. Beberapa perawatan konvensional
dan imunoterapi sitotoksik telah dikembangkan dan dibuat
tersedia untuk pasar. Mempertimbangkan perilaku kompleks
tumor dan keterlibatan berbagai genetik dan seluler
faktor yang terlibat dalam tumorigenesis dan metastasis, ada kebutuhan
untuk mengembangkan imunoterapi yang menjanjikan yang menargetkan tumor
baik tingkat seluler maupun genetik. Reseptor antigen chimeric
(CAR) Terapi sel T telah muncul sebagai terapi baru T
praktek rekayasa sel, di mana sel T berasal dari pasien
darah direkayasa in vitro untuk mengekspresikan reseptor buatan
ditargetkan ke antigen tumor tertentu. Ini secara langsung mengidentifikasi
antigen tumor tanpa keterlibatan riwayat utama
kompleks kompatibilitas. Penggunaan terapi ini dalam beberapa terakhir
bertahun-tahun telah berhasil, dengan penurunan tingkat remisi hingga
80% untuk kanker hematologi, terutama untuk leukemia limfoblastik akut
(ALL) dan limfoma non-Hodgkin, seperti limfoma sel B besar. Baru-baru
ini, terapi CAR anti-CD19, atau UCART19, telah terbukti efektif dalam
mengobati kanker hematologi kambuh / refrakter. Beberapa antigen
tumor permukaan sel lainnya, seperti CD20 dan CD22, ditemukan di
sebagian besar leukemia dan limfoma.
Korespondensi dengan: Dr Niladri Ganguly, Laboratorium Biologi Kanker,
Sekolah Bioteknologi, Universitas Kalinga Institute of Industrial Technology (KIIT),
Kampus-11, Patia, Bhubaneswar, Odisha 751024, India
E-mail: niladri.ganguly@kiitbiotech.ac.in ; toniladri@gmail.com
Singkatan: SEMUA, leukemia limfositik akut, CLL, leukemia limfositik kronis; CAR,
reseptor antigen chimeric; TCR, reseptor sel T; mAb, antibodi monoklonal; NK,
pembunuh alami; FDA, Badan Pengawas Obat dan Makanan Amerika Serikat; scFv,
fragmen variabel rantai tunggal, CRISPR, mengelompokkan pengulangan palindromik
pendek berselang-seling secara teratur; PAM, motif berdekatan protospacer; Treg, sel
T regulator; PD ‑ 1, kematian terprogram 1; PD ‑ L1, terprogram kematian ‑ ligan 1;
CTLA-4, protein 4 terkait limfosit T sitotoksik; ICOS, costimulator sel T yang dapat
diinduksi; Tingkat CR, tingkat respons lengkap terhadap pengobatan atau hilangnya
kanker
Kata kunci: terapi sel T reseptor antigen chimeric, terapi NK ‑ CAR,
CRISPR-CAR, CAR bispesifik, CAR tandem, CAR penghambat
target potensial oleh perusahaan farmasi dan penelitian
organisasi, dan uji coba telah berlangsung ke arah ini.
Meskipun rejimen terapeutik saat ini terbatas pada
mengobati kanker hematologi, peningkatan keterlibatan
dari beberapa teknik tambahan, seperti CAR bispesifik,
Tan ‑ CAR, inhibitor ‑ CAR, antigen gabungan, berkelompok
penyuntingan gen pengulangan palindromik pendek berselang-seling secara teratur
alat dan pengiriman nanopartikel, secara substansial dapat meningkatkannya
efek antikanker secara keseluruhan. Terapi CAR berpotensi untuk
menawarkan rezim pengobatan yang cepat dan lebih aman untuk mengobati non-padat dan
tumor padat. Ulasan ini menyajikan wawasan tentang
keuntungan dan kemajuan imunoterapi CAR dan
menyajikan perbedaan yang muncul dari terapi CAR dari biasanya
bentuk terapi, seperti kemoterapi dan radioterapi.
Isi
1. Perkenalan
2. Terapi sel CAR T.
3. Ideologi arsitektur rekayasa sel T dan desain CAR
4. Cara pengiriman
5. Tantangan terapi sel CAR T.
6. Fitur lanjutan dari terapi sel CAR T.
7. Keuntungan terapi CAR dibandingkan terapi lain
8. Uji coba terapi sel CAR T untuk tumor padat
9. Tingkat keberhasilan terapi yang disetujui
10. Prospek masa depan
1. Perkenalan
Reseptor antigen chimeric (CAR) adalah reseptor unik yang dirancang untuk
menargetkan antigen tumor tertentu untuk memprogram ulang limfosit T.
Karena limfosit T direkayasa secara genetik untuk mengekspresikan reseptor
buatan ini untuk menargetkan sel kanker, jenis terapi dapat disebut imunoterapi,
terapi gen atau terapi kanker (1). Sistem pertahanan manusia dapat secara
efisien mengidentifikasi molekul diri dan non-diri, termasuk bakteri, virus, dan
sel kanker abnormal. Identifikasi sel tumor didasarkan pada antigenisitas dan
imunogenisitas yang diperoleh melalui ekspresi antigen asing (2). Namun, sel
kanker memiliki potensi untuk menumbangkan sistem kekebalan untuk
keuntungannya, mengakibatkan kekebalan antitumor yang tidak memadai,
2184 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)
dan kelangsungan hidup dan perkembangan tumor (3). Imunoterapi juga disebut
bioterapi karena sistem kekebalan dalam tubuh secara alami mampu mendeteksi
patogen dan sel kanker. Dalam beberapa tahun terakhir, imunoterapi telah muncul
sebagai cabang penting dari pengobatan untuk jenis penyakit serupa; Namun,
mekanisme proteksinya mungkin berbeda (4). Imunoterapi tertentu meningkatkan
sistem kekebalan, sedangkan yang lain secara langsung menargetkan sel kanker.
Setiap jenis pengobatan memiliki kelebihan dan kekurangan tergantung dari jenis
penyakitnya (5). Tisagenlecleucel (Kymriah) adalah obat yang digunakan untuk
mengobati pasien leukemia limfoblastik akut (ALL) sampai dengan usia 25 tahun.
Demikian pula, axicabtagene ciloleucel (Yescarta) disetujui untuk pasien dengan
limfoma sel B besar, seperti limfoma non ‑ Hodgkin (NHL), dan mereka yang
menderita kanker dalam keadaan refrakter dan kambuh atau yang kankernya tidak
responsif terhadap pengobatan lain (6). Dengan meningkatnya kesadaran sistem
kekebalan, sejumlah imunoterapi inovatif sedang dikembangkan dengan
menggunakan metode yang termasuk mendorong sistem kekebalan agar berfungsi
dengan cara yang tidak tepat untuk menargetkan sel-sel ganas. Pendekatan lain
melibatkan administrasi komponen imun, seperti sintetik, protein imun yang
dimodifikasi yang direkayasa secara genetik untuk menargetkan antigen tumor (7).
Perawatan sel CAR T telah mencapai keberhasilan dalam
mengobati keganasan hematopoietik; namun, efektivitasnya melawan
tumor padat masih harus ditentukan. Pada bagian berikut,
perkembangan pesat dalam penerapan transfer adopsi sel T dan
mekanisme pemberantasan sel tumor dibahas.
2. Terapi sel CAR T.
CAR adalah imunoterapi yang muncul untuk beberapa keganasan. Pendekatan
terapeutik ini merupakan bentuk eksperimental terapi gen yang mengarahkan
kembali limfosit T untuk membasmi sel kanker. Langkah awal dalam terapi ini adalah
leukapheresis atau isolasi darah tepi pasien (8,9). Apheresis banyak digunakan
untuk memisahkan darah dari pasien dan memisahkannya menjadi
komponen-komponennya, yang kemudian diubah secara genetik sebelum
disuntikkan kembali ke dalam tubuh pasien. Saat ini, apheresis digunakan oleh bank
darah untuk mengumpulkan trombosit dan komponen darah lainnya untuk
pengobatan beberapa penyakit, termasuk gangguan hematologi dan ginjal. Oleh
karena itu, ini dianggap sebagai praktik yang aman untuk individu dan pasien yang
sehat (10) (Gbr. 1).
3. Ideologi arsitektur rekayasa sel T dan desain CAR
Keunikan reseptor chimeric ada dalam kemampuannya untuk memadukan
atau memisahkan fungsi vital yang berbeda, seperti pengenalan,
ko-stimulasi dan aktivasi, dalam rantai molekul reseptor yang berbeda
dengan meniru kompleksitas struktur reseptor sel T asli (TCR) (11 ). Sel T
biasanya tidak memerlukan kostimulasi untuk aktivasi dan untuk memulai
proliferasi, tetapi dalam proses pembentukan sel CAR T, aktivasi dan
proliferasi sel T memerlukan adanya molekul kostimulatoris, yang juga
membantu dalam produksi sitokin sel T CAR. Strateginya melibatkan
pembangunan reseptor chimeric yang direkayasa untuk sel T berdasarkan
integrasi fragmen scFv di area engsel yang memisahkan scFv dari
membran sel. Eksposur scFv pada permukaan sel, selain itu
ke molekul fungsional kecil lainnya, meningkatkan induksi fungsi sitolitik sel T yang
direkayasa. Bersama-sama, koordinasi 'obat hidup' dalam sistem kekebalan melawan kanker
(12). Selain itu, sel CAR T dapat tetap stabil selama beberapa tahun di dalam tubuh sebagai
sel memori jangka panjang. Fitur ini memungkinkan mereka untuk mengenali dan membunuh
sel kanker yang terperangkap dalam sirkulasi jika kambuh. Keuntungan lain dari sel CAR T
adalah bahwa mereka secara spesifik hanya menargetkan sel tumor dan bukan antigen
otomatis. Oleh karena itu, aman dan tidak mematikan untuk sel inang (13). Setelah
imunoreseptor sintetis diekspresikan pada permukaan sel T yang direkayasa, scFv-nya
secara spesifik mengikat antigen target yang diekspresikan pada sel kanker. Pengikatan ini
kemudian menghasilkan transduksi sinyal pengaktifan ke dalam sel kekebalan yang diedit
secara genetik. Sel T kemudian memunculkan fungsi antikanker efektornya (14). Terapi sel
CAR T dianggap sebagai pendekatan pertama untuk mengkonfigurasi ulang limfosit T dengan
fragmen scFv spesifik antibodi yang diperoleh dari antibodi monoklonal (mAbs) dengan
mengganti bagian berbeda dari rantai TCRα dan β. Sebuah laporan baru-baru ini menyatakan
potensi sel CAR T dalam menyembuhkan tumor ganas yang diturunkan dari mukosa sebagai
strategi baru untuk terapi sel CAR T (15). TCR hibrid secara fungsional mengekspresikan dan
mengenali molekul antigen target analog dengan cara yang tidak dibatasi MHC. Bergantung
pada pemilihan biomarker yang beragam dan kompleksitas struktural, berbagai generasi
model CAR telah dikembangkan (16). Sel T kemudian memunculkan fungsi antikanker
efektornya (14). Terapi sel CAR T dianggap sebagai pendekatan pertama untuk
mengkonfigurasi ulang limfosit T dengan fragmen scFv spesifik antibodi yang diperoleh dari
antibodi monoklonal (mAbs) dengan mengganti bagian berbeda dari rantai TCRα dan β.
Sebuah laporan baru-baru ini menyatakan potensi sel CAR T dalam menyembuhkan tumor
ganas yang diturunkan dari mukosa sebagai strategi baru untuk terapi sel CAR T (15). TCR
hibrid secara fungsional mengekspresikan dan mengenali molekul antigen target analog
dengan cara yang tidak dibatasi MHC. Bergantung pada pemilihan biomarker yang beragam dan kompleksitas
MOBIL generasi pertama. Model CAR T generasi pertama terdiri dari rantai
CD3ζ sebagai pemancar utama sinyal dari TCR endogen. Mengikuti hasil
yang sukses dalam uji pra-klinis, jenis obat ini memasuki uji klinis fase I
untuk leukemia, limfoma, dan berbagai jenis kanker lainnya, termasuk
kanker ovarium dan neuroblastoma (17). Meskipun tindakan antitumor tidak
memadai karena kurangnya aktivasi, paparan lingkungan tumor yang
terus-menerus telah mengakibatkan efek terapeutik yang berkelanjutan
pada pasien dengan limfoma sel B yang diinfuskan dengan sel CAR T α ‑
CD20 ‑ CD3ζ dan sejumlah pasien dengan neuroblastoma yang diobati
dengan scFv ‑ CD3ζ sel CAR T (18). Rantai berat dan ringan merupakan
bagian struktural dari reseptor atau antibodi sel B, yang disebut scFv, yang
menyatu ke domain CD3 atau rantai pengaktifan sel T dari TCR untuk
membuat molekul reseptor pengaktifan yang tidak dibatasi MHC. Molekul
yang dimodifikasi ini mampu meningkatkan deteksi antigen sel T dan
sitotoksisitas dengan secara khusus menargetkan sel tumor (19). CAR
'sejati' asli dirancang dengan mengintegrasikan reseptor antibodi scFv
langsung dengan domain CD3ζ. Model ini kemudian dinamai 'pendekatan
tubuh T' dan reseptor pensinyalan sintetis ini sekarang dikenal sebagai CAR
atau reseptor imun chimeric (20).
MOBIL generasi kedua. Keberhasilan CAR generasi pertama dalam uji
klinis fase 1 membuka jalan bagi terapi sel CAR T generasi kedua. Model
sel CAR T ini dibuat untuk mendapatkan respons anti-leukemia yang lebih
efektif dalam uji klinis fase I dengan tingkat remisi lengkap hingga 90%
pada pasien dengan sel B berulang ALL (B-ALL). Di sini, sel T anti ‑ CD19
generasi kedua diintegrasikan ke dalam domain ko-stimulator 4‑1BB atau
CD28 yang terpasang ke domain CD3 (21). Namun, kekhawatiran yang
signifikan tetap ada
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019 2185

Gambar 1. Terapi sel CAR T. Mengadopsi. Terapi sel CAR T dapat didefinisikan sebagai pengobatan di mana sel T pasien dimodifikasi secara genetik di laboratorium untuk membunuh sel
kanker. Mekanisme terapi sel CART yang diadopsi meliputi langkah-langkah berikut ini: Pengumpulan darah pasien, isolasi sel T dari sampel darah tepi dengan proses leukaferesis, transduksi
sel oleh vektor yang mengkode gen CAR, perluasan sel CAR T in vitro dan pengenalan kepada pasien untuk melawan kanker. CAR, reseptor antigen chimeric.

khasiat dan keamanannya serta membuatnya lebih kuat. Mengantisipasi
masalah ini, CAR generasi kedua bertujuan untuk mengintegrasikan domain
pensinyalan intraseluler dari molekul ko-stimulasi yang berbeda, seperti CD28,
4‑1BB atau CD137, kostimulator sel T (ICOS) yang dapat diinduksi atau CD278,
OX40 atau CD134 yang menyatu dengan ekor sitoplasma CAR, sehingga
memperkuat sinyal (22). CAR generasi pertama mengandung rantai CD3ζ
sebagai pemancar utama sinyal dari TCR endogen, sedangkan CAR generasi
kedua mengandung rantai CD3ζ dan molekul kostimulatori tunggal, itulah
sebabnya reseptor ini dikenal sebagai CAR generasi kedua. Misalnya,
anti-CD19 CAR yang terdiri dari 4‑1BB atau domain pensinyalan CD28
menghasilkan tingkat respons lengkap (CR) yang penting pada pasien dengan
keganasan sel B yang kambuh dan refrakter (23). CR mewakili respons lengkap
atau hilangnya semua tanda kanker sebagai respons terhadap pengobatan
[Administrasi Makanan dan Obat Amerika Serikat (FDA) 2007]. Akibatnya, CAR
berbasis CD28 memiliki reaksi proliferasi yang cepat, sehingga meningkatkan
fungsi sel T efektor, sedangkan CAR berbasis 4-1BB mengarah pada
peningkatan akumulasi sel T (24).
MOBIL generasi ketiga. Untuk memperluas efektivitas antitumor, CAR
generasi ketiga terdiri dari dua domain pensinyalan dan rantai CD3ζ, seperti
CD3ζ ‑ CD28 ‑ OX40 dan CD3ζ ‑ CD28‑4‑1BB, untuk mencapai sinyal
aktivasi yang lebih baik,
proliferasi yang berkepanjangan, peningkatan produksi sitokin dan fungsi yang
efektif (25). Misalnya, CAR generasi ketiga yang terdiri dari α ‑ CD19 ‑ CD3ζ ‑
CD28‑4‑1BB melaporkan tingkat remisi lengkap dengan menginfiltrasi dan
melisis jaringan kanker pada pasien dengan leukemia limfosit kronis (26). Selain
itu, sel CAR T tertentu berfungsi sebagai sel memori, sehingga mencegah
kekambuhan tumor. Terlepas dari efek kuratif yang signifikan, aktivitas CAR
yang tidak dapat ditahan dan peningkatan efikasi antitumor dikaitkan dengan
hasil yang mengancam jiwa dan tidak menguntungkan, dengan peningkatan
sekresi sitokin pro-inflamasi, disfungsi multi-organ, kegagalan paru dan kematian
(27).
MOBIL generasi keempat. Semua CAR sebelumnya didasarkan pada
strategi yang tepat dan membantu dalam memediasi respons antikanker sel
T. Namun, hal ini mengalami keterbatasan, termasuk kurangnya aktivitas
antitumor terhadap tumor padat karena heterogenitas fenotipik yang besar
dan kerusakan yang disebabkan oleh sel kanker antigen-negatif. Kekurangan
ini menyebabkan pengembangan strategi CAR baru (28). CAR generasi
keempat diperkenalkan untuk menetapkan latar belakang tumor melalui
ekspresi pengubah imun transgenik yang diinduksi, seperti interleukin (IL)
-12, yang mengaktifkan sel imun bawaan dan meningkatkan aktivasi sel T
untuk mengurangi sel kanker antigen-negatif pada tanda lesi (29,30) (Gbr. 2).
2186 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)

Gambar 2. Evolusi arsitektur desain sel CAR T. CAR dibangun dari domain pengikatan antigen ekstraseluler yang berasal dari antibodi monoklonal (scFv) dan domain pensinyalan intraseluler,
dihubungkan oleh engsel dan domain transmembran. CAR generasi pertama mengandung rantai CD3ζ dari kompleks reseptor sel T, sedangkan reseptor generasi kedua mengandung satu molekul
kostimulatori (CD28) dan CAR generasi ketiga masing-masing berisi dua molekul kostimulatori, seperti CD28 dan OX40. CAR biasanya dimasukkan ke dalam sel T primer menggunakan vektor. CD3ζ
biasanya mempertahankan fungsi efektor sitotoksik dari sel CAR-T. CD28 (biru) penting untuk proliferasi sel T dan sekresi sitokin. 4‑1BB (ungu) adalah domain ko-stimulasi lain yang mempromosikan
kelangsungan hidup sel T dan in vivo Ketekunan sel T. Setiap generasi CAR meningkatkan kompleksitas yang berkaitan dengan penambahan molekul kostimulatori atau promotor yang diinduksi untuk
sitokin IL ‑ 12 pada CAR, CAR, reseptor antigen chimeric generasi keempat; scFv, fragmen variabel rantai tunggal; IL, interleukin; TM, transmembran.

4. Cara pengiriman sion menjadi sel yang tidak membelah dan membelah keduanya in vitro dan

Terapi gen melibatkan pengiriman DNA ke dalam sel dan ini dapat dilakukan
dengan menggunakan sejumlah metode yang dirangkum di bawah ini. Metode
paling tradisional menggunakan virus rekombinan (juga dikenal sebagai vektor
virus), nanopartikel biologis, dan metode non-virus berdasarkan pengiriman
langsung DNA telanjang.
Vektor virus. Vektor virus, seperti vektor γ-retrovirus, lentivirus dan
adenovirus umumnya digunakan dalam terapi gen. Transduksi
retrovirus adalah salah satu metode pengiriman yang umum
digunakan dalam terapi gen. Metode ini melibatkan reverse
transcriptase yang mempromosikan integrasi gen buatan yang stabil
ke dalam genom inang (31). Untuk membuat vektor, ‑ urutan kode
retroviral diganti dengan gen yang diinginkan. Vektor retroviral
memiliki kemampuan bawaan untuk mengganggu bagian genom dan
menghasilkan transformasi neoplastik. Dengan demikian,
vektor-vektor retroviral telah digunakan dalam aplikasi terapi gen (32).
Vektor lentiviral adalah retrovirus yang berasal dari human
immunodeficiency virus-1, yang berfungsi sebagai alat utama untuk
pengiriman transgen ke dalam sel mamalia.
in vivo ( 33).
Metode pengiriman non-virus
Transposon transfeksi. Mekanisme transfeksi transposon berbeda dengan
transfeksi virus. Pengiriman melalui transposon adalah proses non-virus yang
menggunakan DNA transposon dan enzim transposase untuk transfer gen yang
stabil. Dua vektor penting, yaitu piggyBac (PB) dan sleep beauty (SB), sering
digunakan (34). Transposon bergeser dari satu posisi gen ke posisi lain melalui
mekanisme potong dan tempel. Mekanisme sistem transposon menggunakan
SB dan PB melibatkan empat langkah: i) Enzim transposase membantu dalam
pengenalan dan pengikatan pada transposon; ii) kompleks sinaptik dihasilkan
oleh penggandengan dan pengikatan elemen berulang di kedua ujung
transposon; iii) transposon memotong elemen genetik untuk dialihkan, dan iv)
elemen yang dipotong diintegrasikan kembali ke lokasi target (35). Transposase
untuk kedua vektor (SB dan PB) terdiri dari domain pengikatan DNA, domain
katalitik transposabel, dan sinyal lokalisasi inti. Vektor SB adalah pengganti
yang lebih aman untuk vektor virus karena aktivitas peningkat bawaannya yang
rendah, sumber non-patogenik dan perubahan epigenetik minimum di tempat
penggabungan (36). Sebaliknya, vektor PB telah terbukti memberikan kapasitas
beban yang besar dan
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019
tindakan transposisi tambahan yang kompeten di in vivo studi. Terapi CAR T yang dimediasi
oleh vektor PB dianggap lebih aman daripada terapi berdasarkan vektor SB. Oleh karena itu
penggunaan vektor PB menghasilkan produksi CAR yang lebih besar, terbukti dari produksi
CAR yang menargetkan CD19 dengan menggunakan vektor PB (37).
Elektroporasi. Elektroporasi telah berkembang sebagai teknik yang berguna
untuk memodifikasi gen dari berbagai jenis sel. Sel target terkena medan
listrik untuk sementara mengganggu membran selnya. Ini memungkinkan
molekul bermuatan masuk ke dalam sel. Sistem gelombang persegi dan
berbasis pulsa adalah perangkat elektroporasi baru (38). Lonza
Nucleofector II Electroporator melakukan perubahan genetik yang efektif
dari sel T menggunakan parameter listrik dan buffer elektroporasi tertentu
(39). Elektroporasi sel T manusia telah dilaporkan terkait dengan ~ 40-60%
ekspresi gen dan 80% viabilitas sel (40). Salah satu keterbatasan
elektroporasi adalah efisiensi transfeksi yang rendah dan kerusakan sel
yang berlebihan (41).
Nanopartikel. Langkah paling kritis dalam terapi sel CAR T adalah aktivasi sel T,
di mana sel perlu diinkubasi dengan vektor virus termasuk gen CAR. Namun,
mutagenesis insersional yang stabil bisa berbahaya karena kemungkinan
efeknya pada manusia masih harus dijelaskan sepenuhnya (42). Vektor
retroviral atau lentiviral menawarkan integrasi gen permanen ke dalam sel inang,
dengan potensi integrasi yang sangat dekat dengan proto-onkogen yang dapat
menghasilkan onkogen. Berbagai kelemahan yang terkait dengan metode
transfer ini menunjukkan bahwa diperlukan alternatif yang lebih aman (43).
Studi oleh Smith dkk menjelaskan penggunaan nanoteknologi untuk
menyelesaikan masalah penargetan tumor dan membuat terapi hemat biaya.
Mereka melaporkan bahwa pembawa nano polimerik secara efisien dapat
mengirimkan gen CAR spesifik leukemia yang ditargetkan ke ligan spesifik pada
sel T inang. in situ ( 44). Sejumlah nanopartikel yang digunakan untuk pengiriman
gen telah diteliti dan dilaporkan secara praklinis. Misalnya magnet
nanopartikel, seperti Fe 3 HAI 4, berintegrasi ke dalam kompleks peptida yang
menembus sel. Oligonukleotida ini tetap stabil
transfeksi sel dan transfeksi plasmid selain pembungkaman gen dan koreksi
sambungan (45). Sebuah studi yang baru-baru ini diterbitkan oleh Smith dkk di
Fred Hutchinson Cancer Research Center, Seattle, menegaskan bahwa
nanopartikel polimerik yang membawa DNA secara efektif memasukkan gen
CAR ke dalam inti sel T dan mengenali sel leukemia secara khas (46).
Penggunaan nanopartikel untuk menggantikan vektor virus untuk pengiriman
gen telah terbukti menguntungkan, terbukti dari pembatasan efek pro-atau
anti-inflamasi yang tidak spesifik atau efek pro-atau antiproliferasi (47).
5. Tantangan terapi sel CAR T.
Meskipun terapi CAR telah muncul sebagai pendekatan antikanker yang
menjanjikan, terapi CAR tidak lepas dari tantangan yang membutuhkan
optimisasi. Misalnya, peningkatan ketekunan dan peningkatan profil sitotoksik
dari terapi sel CAR T adalah area aktif penelitian yang membutuhkan tindak
lanjut jangka panjang dalam uji klinis (48). Selain itu, sejumlah efek samping
yang serius telah diketahui sering dikaitkan dengan terapi sel CAR T, termasuk
toksisitas neurologis, sindrom pelepasan sitokin (CRS), sel B.
2187
aplasia, sindrom lisis tumor dan anafilaksis (49). Perkembangbiakan sel CAR T
menghasilkan sitokin dalam tubuh yang membunuh sel kanker. Gejala keracunan
terkait CRS berkisar dari gejala kelelahan ringan, mual, sakit kepala, demam dan
menggigil hingga gejala serius termasuk penurunan tekanan darah, takikardia,
dan kebocoran kapiler. Efek samping lainnya adalah adanya sel CAR T yang
menargetkan antigen pada permukaan sel B atau sel T yang tidak hanya
menargetkan sel kanker tetapi juga sel normal (50), mengakibatkan aplasia sel B.
Oleh karena itu, penyelidikan menyeluruh sangat penting untuk mengukur sifat
aplasia sel B. Serupa dengan itu, sindrom lisis tumor dapat menyebabkan
toksisitas karena runtuhnya sel-sel mati pada umumnya pada permulaan
pengobatan kanker. Bisa juga menyebabkan kerusakan organ dan mengancam
nyawa pasien (51).
6. Fitur lanjutan dari terapi sel CAR T.
Meskipun sel kanker memiliki banyak garis keturunan dan heterogenitas, mereka
memiliki antigen target yang sama, seperti CD19, CD20, CD22 dan banyak
lainnya yang memungkinkan sel CAR T untuk mengenali sel tumor tanpa
memandang garis keturunan sel. Oleh karena itu, kemajuan terbaru dalam teknik
ini mencakup antigen target yang lebih tepat yang diekspresikan oleh sel tumor
(13,52). Ulasan ini menempatkan penekanan tambahan pada studi baru terapi sel
CAR T yang membedakan beragam sel CAR T yang dapat meningkatkan
kematian sel tumor. Model tertentu sudah diimplementasikan dan yang lain dalam
status investigasi klinis, termasuk NK ‑ CAR dan clustered regular interspaced
short palin- dromic repeats (CRISPR) ‑CAR therapy (Gbr. 3Α ‑ Ε).
MOBIL Bispesifik. Reseptor bispesifik adalah reseptor yang berisi dua
domain pengenalan antigen berbeda yang dilampirkan dan ditempatkan
dengan dua domain pensinyalan intraseluler berbeda yang diekspresikan
sebagai dua CAR berbeda pada permukaan sel tunggal. Saat ini, CAR
CD19 / CD20 bispesifik telah diperkenalkan sebagai molekul sintetik baru
yang dapat mengenali dan mengikat lebih dari satu antigen tumor yang
ditargetkan pada permukaan sel kanker. Oleh karena itu, ia dapat
membuat kaskade sinergis dari molekul efektor ketika bertemu dengan
dua antigen tumor (53). Selain itu, CAR bispesifik melestarikan kapasitas
sitolitik sel T, yaitu jika salah satu molekul objektif tidak dapat diakses oleh
sel CAR T karena hambatan seluler seperti mutasi antigen target atau
hilangnya antigen target yang biasa ditemukan pada ganas. sel, CAR
bispesifik dapat mengimbangi penghindaran tumor (54). Terapi yang
diselidiki termasuk CD3 sel T dan antigen tumor, seperti CD19, pada sel
ganas. Kemampuan kuratif terbukti dari blinatumomab, sebuah sel T
bispesifik yang disetujui melawan B-ALL yang kambuh / refrakter (55).
Hasil positif telah dilaporkan pada pasien <15 tahun dengan ALL kambuh /
refrakter, dengan respon tinggi pada 26/36 (72%) pasien dalam 9 bulan.
Blinatumomab ditemukan saat mempelajari pasien yang negatif untuk
penyakit sisa minimal (MRD) dan yang ditemukan MRD-positif setelah
kemoterapi gabungan (56). Sejumlah CAR bispesifik lainnya telah diteliti
secara praklinis oleh beberapa organisasi penelitian, termasuk CD20 /
CD19 dan CD20 / CD3 (57,58). Menargetkan sel T dengan CAR bispesifik
terbukti menghilangkan ALL pediatrik yang ditransplantasikan dalam
sebuah penelitian,
2188 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)

Gambar 3. Model lanjutan sel T CAR. (A) CAR Tandem: Struktur CAR tunggal menargetkan dua antigen tumor dengan domain pengenalan antigen berbeda (scFv) yang dihubungkan secara berurutan dengan satu domain intraseluler. (B)

CAR Bispesifik: Dua CAR diekspresikan secara bersamaan menargetkan sel T, dengan dua domain pengenalan antigen berbeda yang menargetkan dua antigen tumor. (C) CAR fisiologis: struktur CAR yang terdiri dari ligan dan molekul

reseptor, bukan scFv, untuk mengenali molekul berpasangan pada sel tumor. (D) CAR Universal: Domain ekstraseluler mengekspresikan avidin ‑ biotin berlabel mAb, bukan scFv, yang dapat mengenali hampir semua antigen target khusus

untuk mAb. (E) I ‑ CAR: CTLA ‑ 4 dan PD ‑ 1 adalah dua reseptor inhibitor yang dapat secara reversibel mengatur pensinyalan TCR dan dapat meningkatkan fungsi reseptor chimeric. CTLA ‑ 4 atau PD ‑ 1 adalah domain intraseluler di I ‑

CAR, yang memicu sinyal penghambatan pada sel T, seperti pengurangan aksi litik sel target dan produksi sitokin. Faktor terpenting dari I ‑ CAR ‑ T adalah kemampuannya untuk membedakan antigen normal dan abnormal pada sel kanker

target. CAR, reseptor antigen chimeric; scFv, fragmen variabel rantai tunggal; mAb, antibodi monoklonal; PD ‑ 1, kematian terprogram 1; CTLA-4, protein 4 terkait limfosit T sitotoksik; I ‑ CAR, CAR penghambat; TM, transmembran. antibodi

monoklonal; PD ‑ 1, kematian terprogram 1; CTLA-4, protein 4 terkait limfosit T sitotoksik; I ‑ CAR, CAR penghambat; TM, transmembran. antibodi monoklonal; PD ‑ 1, kematian terprogram 1; CTLA-4, protein 4 terkait limfosit T sitotoksik; I ‑

CAR, CAR penghambat; TM, transmembran.

CAR Tandem (Tan ‑ CARs). CAR konvensional tidak dapat memenuhi ekspektasi
yang lebih tinggi dalam keadaan tertentu, seperti regulasi turun atau perubahan
antigen target yang dapat terjadi pada sel kanker. Kondisi ini kemudian
menyebabkan hilangnya antigenik atau variasi pelarian (60). Untuk mengatasi
kekurangan ini, para ilmuwan mencoba untuk mengembangkan teknologi canggih,
di mana dua situs pengenalan antigen bergabung dengan linker, ditempatkan
bersama-sama pada domain intraseluler tunggal dan diekspresikan sebagai CAR
tunggal pada permukaan sel, disebut Tan. -MOBIL. Model ini memungkinkan
penargetan yang disinkronkan dari kedua antigen pada satu sel kanker atau
lingkungan mikro tumor. Dengan cara ini, ia meningkatkan aktivasi dan stimulasi
sel T dengan meningkatkan aviditasnya dan memperluas sifat terapeutiknya (61).
Tan ‑ CAR memiliki beberapa implikasi kuratif yang signifikan karena sama
kuatnya dengan model penyakit standar dengan CAR spesifik antigen tunggal.
Selain itu, mereka lebih efisien dan tidak berbahaya dalam pengaturan beban
penyakit yang lebih tinggi (62). Hal ini mungkin dikaitkan dengan produksi sitokin
yang dioptimalkan dan pembunuhan sel yang terbatas, sebagaimana dibuktikan
dari studi praklinis pada sel Tan-CAR T dalam model tumor tikus, yang
mengkonfirmasi kemungkinan untuk implikasi perbaikan pada penyakit manusia
yang terdiri dari antigen sel B CD19 dan reseptor faktor pertumbuhan epidermal
manusia 2 (HER2) (63).
Baru-baru ini, sel CAR T trivalen dirancang oleh sekelompok ilmuwan dengan
secara bersamaan menargetkan beberapa antigen, seperti HER2, reseptor IL-13
α2 dan ephrin A2, untuk mengatasi perubahan antar pasien dengan
kecenderungan untuk menargetkan hampir 100% sel tumor (64).
MOBIL Hambatan (I ‑ CAR). Telah dilaporkan bahwa reseptor
imunoinhibitor baru tertentu terlibat dalam aktivasi sel T dan atenuasi
atau penghentian respons sel T, seperti kematian terprogram-1 (PD ‑
1), kematian terprogram ‑ ligan 1 (PD ‑ L1) dan sitotoksik T ‑ limfosit ‑
terkait antigen 4 (CTLA ‑ 4). Jalur ini dianggap sebagai terobosan
imunoterapi kanker (65). Baru-baru ini, dua ahli imunologi
memenangkan Hadiah Novel dalam Fisiologi / Kedokteran, Dr James
Allison dan Dr Tasuku Honjo, atas penemuan mereka yang mendalam
di bidang imunoterapi kanker. Pekerjaan Dr Allison difokuskan pada
protein permukaan sel T CTLA-4; ia menemukan bahwa
penghambatan sel kekebalan dan antibodi terhadap CTL-4
menghilangkan pertumbuhan ganas dan mencegah pembentukan
tumor baru (66). Temuan ini diuji pada 14 pasien dengan metastasis
melanoma, dengan kekambuhan diamati pada tiga pasien.
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019
Demikian pula, tim Dr. Honjo menyelidiki protein sel T baru, PD ‑ 1,
yang ditemukan pada tahun 1992 (68). Mereka mengamati bahwa PD
‑ L1 muncul pada sel sehat dan sel ganas berikatan dengan PD ‑ 1.
Mereka melaporkan molekul serupa lainnya, PD ‑ L2, yang juga
berikatan dengan PD ‑ 1. Berdasarkan temuan ini, mereka
menerbitkan laporan bahwa sel ganas memproduksi PD ‑ L1 dan
memblokir PD ‑ L1 menggunakan antigen penangkal untuk
menghambat pertumbuhan tumor (69). Uji klinis pertama untuk
menargetkan keganasan diluncurkan pada tahun 2006, yang
menunjukkan kelangsungan hidup yang signifikan pada sejumlah
pasien pada tahun 2012. FDA menyetujui penghambat pos
pemeriksaan PD-1 utama, nivolumab dan pembrolizumab (70,71),
untuk mengobati melanoma di 2014 (72). Namun, pengobatan tunggal
mungkin tidak cukup, yang merupakan alasan bahwa pengobatan
gabungan yang menargetkan CTLA ‑ 4 dan PD ‑ 1 saat ini sedang
diselidiki.
Sel tumor tertentu mengandung PD ‑ L1 tingkat tinggi, yang membantu menghindari
serangan kekebalan. Telah diteliti bahwa I-CAR berbasis PD ‑ 1 atau CTLA ‑ 4 dapat secara
efisien mengontrol sitotoksisitas, sekresi sitokin, dan proliferasi dan sitotoksisitas yang
dirangsang oleh TCR endogen atau reseptor khimerik pengaktifan (74). I-CAR dirancang
untuk mengontrol tindakan sel CAR T melalui reseptor penghambat. Fitur lanjutan ini
menyatukan aksi dua reseptor chimeric; salah satunya menghasilkan sinyal dominan-negatif
yang membatasi respons sel CAR T yang diaktifkan oleh reseptor pengaktif. I ‑ CARs dapat
menghambat respon aktivator CAR terhadap antigen yang diekspresikan hanya oleh sel
normal, sehingga membedakan antara kanker dan sel normal (75). Karena itu, menggunakan
rekayasa genetika untuk menghambat fisiologi penghambatan sel T dan mengatur respons
sel T dapat dimanfaatkan dengan cara antigen-selektif. Hal ini telah dikonfirmasi secara
eksperimental secara praklinis dalam model tikus dengan merancang I ‑ CAR menggunakan
domain pengenalan antigen permukaan CTLA ‑ 4 dan PD ‑ 1. Pada tikus yang kekurangan
reseptor CTLA-4, aktivasi dan proliferasi sel T yang substansial diamati, yang pada akhirnya
menyebabkan penyakit autoimun sistemik yang parah (76). Demikian pula, PD-1 adalah
reseptor penghambat lainnya, yang ditemukan secara khusus diekspresikan oleh sel T
teraktivasi yang menyebabkan glomerulonefritis dan artritis pada tikus C57BL / 6 dan tikus
diabetes non-obesitas tertentu yang terkena insulitis (77). Hal ini telah dikonfirmasi secara
eksperimental secara praklinis dalam model tikus dengan merancang I ‑ CAR menggunakan
domain pengenalan antigen permukaan CTLA ‑ 4 dan PD ‑ 1. Pada tikus yang kekurangan
reseptor CTLA-4, aktivasi dan proliferasi sel T yang substansial diamati, yang pada akhirnya
menyebabkan penyakit autoimun sistemik yang parah (76). Demikian pula, PD-1 adalah
reseptor penghambat lainnya, yang ditemukan secara khusus diekspresikan oleh sel T
teraktivasi yang menyebabkan glomerulonefritis dan artritis pada tikus C57BL / 6 dan tikus
diabetes non-obesitas tertentu yang terkena insulitis (77). Hal ini telah dikonfirmasi secara eksperimental IL-10,praklinis
MOBIL fisiologis. Awalnya, beberapa konstruksi CAR mengandung
scFv yang berasal dari murine. Hal ini terkait dengan risiko respons
imun terhadap sel yang dimodifikasi, dan anafilaksis yang dihasilkan
dari transfer sel CART tidak dapat dihindari. Kerugian ini membatasi
persistensi sel yang diinfuskan. Oleh karena itu, selain CAR
konvensional, telah dikembangkan CAR fisiologis yang disebut juga
CAR reseptor-ligan, yang dapat mengenali dan mengikat antigen
tumor, seperti HER3 dan HER4 (78). CAR fisiologis terdiri dari
reseptor antigen dan domain pensinyalan intraseluler CD3ζ dengan
atau tanpa daerah transmembran, yang juga dapat direkayasa
menjadi sel kekebalan untuk menargetkan ligan yang diekspresikan
pada sel tumor. Pendekatan ini meningkatkan kemampuan limfosit T
untuk membedakan target terkait tumor dan menghilangkan sel
kanker (79).
2189
Uji coba eksperimental mungkin telah dimulai tetapi hasilnya belum
dipublikasikan.
UniversalCARs (uCARs). Meskipun scFvis secara khusus ditujukan untuk
antigen terkait tumor, pengenalan potensi spesifisitas sel CAR T tidak
memadai. Oleh karena itu, uCAR dikembangkan untuk mengatasi
keterbatasan ini. Untuk membangun CAR universal, biotin atau
anti-fluorescein isothiocyanate (FITC) scFv digunakan sebagai wilayah
penargetan, yang digabungkan ke domain transmembran dengan satu atau
dua endodomain (80). Sel T yang mengekspresikan uCAR dapat secara
efisien mengenali dan menghilangkan sel kanker melalui pengikatan mAbs
spesifik antigen berlabel FITC atau biotinilasi, yang, pada gilirannya,
mengaktifkan sel T dan merangsang proliferasi dan produksi sitokinnya (81).
Sel mSA2 CAR T adalah uCAR, yang dapat digabungkan dengan antibodi
spesifik tumor yang dibiotinilasi untuk secara spesifik menargetkan berbagai
jenis tumor. Seperti interferon γ, itu dilengkapi dengan baik untuk perantara
lisis sel ganas dan produksi sitokin (82). Uji klinis manusia yang melibatkan
sel T uCAR sedang berlangsung. Dua anak dengan B-ALL yang kambuh dan
refrakter mencapai remisi molekuler dan sitogenik setelah terapi uCAR T. Uji
klinis telah dimulai pada terapi sel T uCAR khusus untuk sel CD19-positif
(NCT03166878 dan NCT03229876). Namun, informasi dan kesimpulan rinci
belum tersedia (83).
Pembunuh alami (NK) ‑CAR. Sel NK adalah jenis sel T sitotoksik yang penting
untuk kekebalan alami. Fungsi sel NK mirip dengan sel T sitotoksik dalam respon
imun adaptif vertebrata. Sel imun umumnya mengidentifikasi kompleks MHC yang
diekspresikan pada permukaan sel infeksius untuk menghasilkan produksi sitokin,
sehingga menghasilkan respons imun, yang berpuncak pada apoptosis atau
kematian sel infeksius (84). Sel NK adalah satu-satunya sel kekebalan yang
mengidentifikasi sel yang terinfeksi tanpa adanya MHC dan antibodi, sehingga
menimbulkan respons imun yang cepat. Ini dikenal sebagai 'pembunuh alami'
karena tidak memerlukan aktivasi untuk menghancurkan sel yang tidak memiliki
penanda molekul MHC kelas I 'sendiri' (85), menjadikannya penting untuk sel yang
merusak dengan penanda MHC I yang hilang.
Sel kanker yang tidak menyebabkan peradangan diperlakukan sebagai
dirinya sendiri oleh sistem kekebalan dan tidak merangsang respons sel T. Sel
NK menghasilkan sejumlah sitokin, termasuk faktor nekrosis tumor α, interferon
γ dansecara
yang bertindak sebagai
dalam model penekan
tikus dengan imun (86).
merancang Aktivasi
I ‑ CAR sel KNdomain pengenalan antig
menggunakan
mengarah pada pembentukan bertahap sel efektor sitolitik, seperti sel dendritik,
makrofag dan neutrofil, yang akibatnya memfasilitasi respon sel T dan B
spesifik antigen. Lisis sel tumor yang dimediasi sel NK melibatkan beberapa
reseptor, termasuk NKp44, NKp46, NKG2D, NKp30 dan DNAM. Sel ganas
biasanya mengekspresikan NKG2D selain ULBP dan MICA (87,88). Efektivitas
klinis sel CAR T telah ditunjukkan untuk SEMUA; Namun, pendekatan
terapeutik ini belum dikonfirmasi untuk leukemia myeloid akut (AML),
menyarankan perlunya pilihan terapeutik lain (89). Secara hipotesis, sel NK
otomotif memiliki efek toksik tambahan yang menguntungkan dibandingkan
dengan sel CAR T, terutama untuk menghindari efek yang tidak
menguntungkan seperti CRS. Selain itu, berbeda dengan sel T, sel NK donor
tidak menargetkan sel non-hematopoietik, yang menunjukkan bahwa aktivitas
antitumor yang dimediasi oleh sel NK dapat diaktifkan tanpa adanya penyakit
graft-vs.-host (90) (Gbr. 4).
2190 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)

Gambar 4. Sel T dan sel NK di platform CAR. Sel NK adalah komponen fundamental dari sistem kekebalan bawaan dan berperan penting dalam kekebalan tubuh melawan kanker. Saat ini, sel NK yang
direkayasa oleh CAR ditargetkan ke NKGD2, antigen CD16; setelah bertemu dengan antigen tumor pada sel kanker, NK-CAR mengeluarkan perforin dan granzim, yang secara langsung memediasi
sitotoksisitas sel tumor yang ditargetkan. Sel CAR T mengeluarkan sitokin, seperti interferon dan TNF-a, yang juga memediasi sitotoksisitas sel dan akhirnya kematian sel kanker. CAR, reseptor antigen
chimeric; NK, pembunuh alami; NKGD2, anggota grup 2 pembunuh alami D.

MOBIL CRISPR. CRISPR adalah alat pengubah gen yang
menggunakan panduan gRNA untuk memodifikasi urutan DNA.
Karena teknologi ini adalah sistem penggabungan gen yang bebas
integrasi, ia menawarkan proses knock-in gen yang sangat mudah
dan kompeten. Mengikuti kemajuan signifikan yang terkait dengan
teknologi CRISPR, ini berpotensi untuk muncul sebagai imunoterapi
yang menjanjikan (91). Sistem CRISPR dapat langsung diterapkan
pada sel mamalia melalui transfeksi menggunakan plasmid yang
mengandung nuclease dan sgRNA. Cas9 mengkodekan molekul
besar dengan endonuklease DNA multifungsi dan diketahui
mengeluarkan dsDNA dari 3 ‑ bp hulu dari protospacer berdekatan
motif (PAM) (92). Setelah nuklease berikatan dengan gRNAnya,
senyawa tersebut memindai sekuens DNA target integral (93). Urutan
PAM memiliki peran penting dalam mengenali urutan diri dan non-diri.
pensinyalan, dengan demikian memulai internalisasi dan stimulasi CAR yang
berhasil untuk paparan tunggal dan berulang ke antigen tumor. Ini juga
menunda diferensiasi dan kelelahan sel T efektor (97). Pengeditan genom
multipleks adalah aplikasi menarik lainnya dari alat CRISPR / Cas9.
Gangguan genom yang mahir dari beberapa lokus gen untuk membuat sel
donor universal dan limfosit T efektor kuat yang ditargetkan ke jalur
penghambatan yang berbeda, seperti PD ‑ 1 dan CTLA4, dibentuk dengan
memasukkan beberapa gRNA ke dalam vektor CAR. Lebih lanjut, knockout
dua kali lipat dari gen TCR dan HLA kelas I dapat secara efektif
memungkinkan pembentukan sel T uCAR alogenik, selain sel T CAR yang
secara universal tahan Fas melalui gangguan gen tiga kali lipat (98).
7. Keuntungan terapi CAR dibandingkan terapi lain

Laporan yang baru-baru ini diterbitkan menunjukkan bahwa teknologi
CRISPR dapat mengirimkan gen CAR ke lokus TRAC sel T. Dalam hal ini,
terapi sel T universal-CAR yang diedit CRISPR telah digunakan pada
manusia (NCT03166878 dan NCT03229876). Teknologi ini berkembang
pesat dengan potensi koreksi gen (82). Dilaporkan bahwa anti-CD19 CAR ke
lokus konstan TCR α (lokus TRAC) tidak hanya menghasilkan peningkatan
potensi sel T tetapi juga dalam ekspresi konsisten CAR dalam sel T darah
perifer (95). Sel yang dimodifikasi CRISPR telah terbukti berkinerja baik pada
sel CAR T yang dibangun secara umum dalam model tikus ALL (96). Juga
telah dibuktikan bahwa menargetkan lokus TRAC mengaktifkan CAR
Keuntungan paling menonjol dari terapi sel CAR T dibandingkan terapi kanker
lainnya adalah intervensi waktu mendadak dan infus tunggal sel CAR T. Selain itu,
perawatan dan observasi yang tepat selama 2-3 minggu sudah cukup bagi pasien.
Terapi sel CAR T dianggap sebagai 'obat masa kini' dan kemanjurannya dapat
bertahan selama beberapa dekade karena sel dapat bertahan di tubuh inang
dalam jangka panjang, dengan kemampuan konstan untuk menemukan dan
menghancurkan sel kanker selama kambuh (2 , 3). Saat ini, terapi sel CAR T
dilisensikan untuk digunakan pada pasien dengan transplantasi yang belum kuratif
dan yang kambuh setelah transplantasi. Terapi sel CAR T diharapkan menjadi
pengganti berbagai jenis transplantasi (99). Uji klinis pada kanker darah telah
menunjukkan hal itu, bahkan pada pasien dengan refrakter
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019 2191

Tabel I. Daftar uji klinis terapi reseptor antigen chimeric. Antigen target

Jenis kanker ID uji klinis

CD19 BOLA NCT01044069

CD19 B ‑ CLL NCT00466531
CD19 Leukemia NCT01416974
CD19 Limfoma NCT00586391
CD19 B ‑ NHL / CLL NCT00608270
CD20 Leukemia sel mantel / B ‑ NHL NCT00621452
CD22 Limfoma Non ‑ Hodgkins NCT02315612
CD19 / CD20 Limfoma B ‑ Non Hodgkins NCT00621452
CD19 / CD22 Keganasan sel B. NCT03185494
CD133 Karsinoma hepatoseluler NCT02541370
CD171 Neuroblastoma NCT02311621
PMSA Kanker prostat NCT001140373
CEA Kanker payudara NCT00673829
CEA Kanker kolorektal NCT00673827
CEA Kanker paru-paru NCT00673322
DIA ‑ 2 Kanker paru-paru NCT00889954
DIA-2 Osteosarcoma NCT00902044
DIA-2 Glioblastoma NCT01109095
CD30 Limfoma NCT02274584
FAP Mesothelioma pleura ganas NCT01722149
NKGD2 Leukemia NCT02203825
GD2 Neuroblastoma, osteosarcoma NCT03356795
EGFRVIII Glioblastoma NCT02309373
Mesothelin Kanker pankreas NCT02706782
CD38 / CD123 Keganasan Sel B. NCT03125577
ROR1 Leukemia limfositik kronis NCT02194374
MUC16 Karsinoma ovarium NCT02498912
GPC3 Karsinoma sel skuamosa paru Kanker NCT03198546
VEGFRII ginjal NCT01218867

PMSA, antigen membran khusus prostat; ROR1, reseptor tirosin kinase seperti orphan receptor 1; NKGD2, pembunuh alami grup 2 anggota D, diekspresikan dalam sel pembunuh alami; GD2, molekul
disgangliosida diekspresikan pada tumor yang berasal dari neuroektodermal; EGFRVIII, reseptor faktor pertumbuhan epidermal varian III; Mesothelin, antigen diferensiasi yang diekspresikan pada sel
mesothelial dan diekspresikan secara berlebihan pada banyak tumor manusia; MUC16, juga dikenal sebagai CA125, adalah biomarker untuk kanker ovarium; GPC3, glypican 3, adalah protein permukaan
sel yang diekspresikan secara berlebihan dalam banyak tumor padat; VEGFRII, reseptor faktor pertumbuhan endotel vaskular II.

kondisi di mana kanker kembali setelah beberapa transplantasi, terapi sel
CAR T berhasil memberantas penyakit sepenuhnya (100). Selain itu,
dengan sel CAR T, pasien dapat hidup tanpa risiko kambuh dan
mendapatkan manfaat dari perawatan sanitasi, seperti transplantasi sel
induk. Oleh karena itu, terapi sel CAR T dapat disebut sebagai 'obat
hidup' (101).
8. Uji coba terapi sel CAR T untuk tumor padat
Beberapa uji klinis saat ini sedang meneliti penggunaan terapi sel CAR T
melawan tumor padat dan penyakit lainnya. Laporan menunjukkan bahwa sel T
yang direkayasa CAR mRNA spesifik mesothelin dapat menginduksi aktivitas
antitumor pada keganasan padat (102,103). Lebih lanjut, teknologi CAR telah
digunakan dalam transplantasi organ menggunakan dua novel spesifik HLA ‑ A2
CAR, satu mewakili domain pensinyalan CD28 ‑ CD3d (CAR) dan
yang lainnya tidak memiliki domain pensinyalan intraseluler (dCAR).
Transfer adopsi dari sel T regulasi allospecific (Treg) memberikan
perlindungan yang lebih baik dari penolakan cangkok dibandingkan
dengan Treg poliklonal (104). CAR yang terdiri dari domain
pensinyalan ICOS berhubungan dengan efek antitumor yang efektif
pada reseptor faktor pertumbuhan epidermal varian III (EGFRvIII)
-expressing glioma (105). Evaluasi praklinis terapi sel CAR T yang
menargetkan antigen tumor 5T4 pada kanker ovarium telah dikaitkan
dengan hasil yang sukses (106). Sebuah penemuan evolusioner tak
terduga dilaporkan selama investigasi CAR yang menargetkan
penyakit autoimun; terapi kekurangan penyakit autoimun yang dengan
sengaja hanya menargetkan sel penyebab penyakit, reseptor
autoantibodi chimeric (CAAR),
2192 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)
domain. Sel Dsg3 CAAR ‑ T menunjukkan toksisitas yang akurat terhadap sel anti ‑
Dsg3 ‑ expressing (107). Target CAR tumor padat tertentu sedang menjalani
penelitian dengan beragam produk genetik yang timbul dari mutasi gen (EGFRvIII)
(108) atau pola glikosilasi termodifikasi (MUC1) (109), dan peptida turunan antigen
kanker testis (MAGE), CAR secara khusus menargetkan antigen tertentu yang
diekspresikan berlebih pada kanker payudara, kanker paru-paru dan kanker
pankreas, seperti antigen karsinoembrionik (110) GD2, antigen membran khusus
prostat, HER2 / ERBB2, MUC16 (111) dan mesothelin atau stoma yang berafiliasi
dengan tumor (fibroblast activation protein dan reseptor faktor pertumbuhan
endotel vaskular) (112).
9. Tingkat keberhasilan terapi yang disetujui
Sesuai catatan 2018 tentang total uji klinis yang dilakukan di domain
imuno-onkologi, 220 uji coba yang melibatkan terapi CAR T dilakukan
untuk mengidentifikasi target tertentu. Obat sel CAR T yang berhasil
dikembangkan yang tersedia di pasar termasuk CTL019 (Kymriah)
(113), KTE-C19 (Yescarta) (114) dan JCAR015 (115). Ini telah
dikembangkan oleh perusahaan yang dikenal sebagai anteseden
pengembangan terapi sel CAR T, seperti Novartis dalam hubungan
dengan University of Pennsylvania, Kite Pharma dengan National
Cancer Institute, dan Juno Therapeutics dengan Sloan Kettering,
masing-masing, dan digunakan untuk obati ALL, NHL, dan ALL.
Terapi CAR T ini merupakan momen yang menentukan di tahun 2017
di bidang onkologi.
Uji coba ELIANA global melaporkan tingkat keberhasilan yang tinggi,
dengan tingkat remisi lengkap 3 bulan 83% dengan tisagenle- cleucel, dan
tingkat kelangsungan hidup 6 bulan 89% (117). Percobaan lain, ZUMA-1,
melaporkan hasil yang setara dengan 82% tingkat respons keseluruhan dan
54% dari tingkat remisi lengkap setelah infus tunggal rezim terapeutik dalam 8
bulan. Hal ini menunjukkan bahwa tingkat remisi lebih menonjol pada pediatri
B-ALL dibandingkan pada DLBCL relaps / refrakter dewasa; Namun, reaktivitas
tinggi pada kedua penyakit (118).
Selain itu, beberapa investigasi klinis telah dilaksanakan oleh Cellectis
setelah UCART19. Cellectis saat ini memimpin dengan dua pendekatan CAR T
alogenik yang disetujui FDA Investigational (IND) yang disetujui FDA (119):
UCART123 untuk pasien dengan neoplasma sel dendritik plasmacytoid blastik
dan AML (120) dan UCART22 IND untuk pasien dengan B-ALL (121). Dua uji
klinis lain yang sedang berlangsung adalah UCARTCS1 untuk menekan
keganasan hematologi yang mengekspresikan CS1 (122) danUCART38 untuk
keganasan hematologis yang mengekspresikan CD38. UCART38 secara
khusus dikembangkan untuk menargetkan sel T ALL, multiple myeloma,
limfoma sel mantel dan NHL (123.124). Daftar uji klinis terapi CAR tercantum
pada Tabel I.
10. Prospek masa depan
Meskipun imunoterapi telah mencapai keberhasilan klinis dalam mengobati
kanker darah, tingkat keberhasilan yang sama belum diamati untuk tumor
padat. Berbagai tantangan terkait
dengan keamanan, keefektifan biaya dan kualitasnya memerlukan penyelidikan yang
cermat untuk melaksanakan terapi ini untuk semua jenis kanker. Pendekatan lain
adalah untuk mengintegrasikan sel CAR T dengan berbagai jenis imunoterapi untuk
meningkatkan efektivitasnya. Misalnya, CAR dapat dikombinasikan dengan
penghambat checkpoint tertentu, yang membatasi mekanisme pertahanan tumor
terhadap sel T. Diharapkan bahwa rejimen terapi sel CAR T di masa depan akan
menargetkan beberapa molekul yang beragam untuk jenis tumor tertentu, sehingga
sel CAR T dapat secara efisien mengenali sel kanker bahkan jika sel tersebut
mengalami mutasi pada molekul targetnya.
Sejumlah terapi CAR T sudah tersedia di pasaran, tetapi harganya
mahal, misalnya, $ 475.000 (€ 400.000) untuk Yescarta dan $ 373.000 (€
316.000) untuk Kymriah. Menurut para ahli, ketika biaya rawat inap dan
biaya obat lain yang diperlukan untuk pengobatan juga dipertimbangkan,
biaya tersebut meningkat menjadi hampir $ 1.500.000 per pasien kanker.
Oleh karena itu, solusi yang mungkin adalah untuk mengurangi biaya
pengobatan CAR T alogenik dengan memasok limfosit T dari individu
sehat yang dapat langsung digunakan saat pasien membutuhkannya,
daripada memodifikasi secara genetik sel T setiap pasien secara
individual. Tantangan ilmiah yang cukup besar juga ada terkait dengan
imunologi, selain solusi manufaktur, transportasi, dan perbankan untuk
meningkatkan perawatan pasien secara ekstensif. Karena itu, ilmuwan
sedang menyelidiki langkah-langkah untuk mengatasi tantangan klinis
dalam hal regulasi. Sel CAR T tersedia dalam beberapa kerangka ilmiah,
yang mungkin sangat bervariasi di berbagai negara. Tantangan dan
teknologi gabungan ini membutuhkan standarisasi; Namun, sel CAR T
menawarkan pasien harapan pengobatan lanjutan. Karena terapi pertama
sudah tersedia di pasaran, ada potensi untuk alternatif khusus dan lebih
baik yang tersedia dalam beberapa dekade mendatang.
Ucapan Terima Kasih
Kami berterima kasih kepada Dewan Riset Sains dan Teknik atas dana yang
murah hati.
Pendanaan
Pendanaan dari Dewan Sains dan Teknik, Departemen Sains dan
Teknologi, Pemerintah India sangat diakui. ECR / 2016/000584.
Ketersediaan data dan bahan
Tak dapat diterapkan.
Kontribusi penulis
RM dan NG membuat konsep dan ikut menulis naskah. CRC, SA, PS dan
PG berkontribusi pada tinjauan pustaka, organisasi dan penulisan
berbagai bagian dari naskah. NG adalah PI dan pemegang hibah.
Persetujuan etis dan persetujuan untuk berpartisipasi
Tak dapat diterapkan.
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019
Persetujuan pasien untuk publikasi
Tak dapat diterapkan.
Minat yang bersaing
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan yang bersaing.
Referensi
1. Restifo NP, Dudley ME dan Rosenberg SA: Imunoterapi adopsi untuk
kanker: Memanfaatkan respons sel T. Nat Rev Immunol 12: 269-281,
2012.
2. Galluzzi L dan Martin P: MOBIL di jalan raya dengan penghalang jalan.
Onkoimunologi 6: e1388486, 2017.
3. Perales MA, Kebriaei P, Kean LS dan Sadelain M: Membangun lebih aman dan cepat CAR:
Sabuk Pengaman, Kantung Udara, dan CRISPR. Transplantasi Sumsum Darah Biol 24:
27‑31, 2018.
4. Sharpe M dan Mount N: Sel T yang dimodifikasi secara genetik dalam terapi
kanker: Peluang dan tantangan. Dis Model Mech 8: 337-350, 2015.
5. McGuirk J, Waller EK, Qayed M, Abhyankar S, Ericson S, Holman P, Keir C, dan
Pengacara GD: Blok penyusun untuk persiapan kelembagaan penyampaian
CTL019. Sitoterapi 19: 1015-1024,
2017.
6. Prasad V: Imunoterapi: Tisagenlecleucel - terapi sel CAR-T pertama yang disetujui:
Implikasi bagi pembayar dan pembuat kebijakan. Nat Rev Clin Oncol 15: 11-12,
2018.
7. Neelapu SS, Tummala S, Kebriaei P, Wierda W, Gutierrez C, Locke FL,
Komanduri KV, LinY, JainN, Daver N, dkk: Penilaian terapi sel T reseptor
antigen chimeric dan pengelolaan toksisitas. Nat Rev Clin Oncol 15: 47-62,
2018.
8. Miliotou AN dan Papadopoulou LC: CAR T-cell therapy: Era baru dalam
imunoterapi kanker. Curr Pharm Biotechnol 19: 5‑18,
2018.
9. Mirzaei HR, Jamali A, Jafarzadeh L, Masoumi E, Alishah K, Fallah Mehrjardi K,
Emami SAH, Noorbakhsh F, Till BG dan Hadjati J: Konstruksi dan karakterisasi
fungsional dari reseptor antigen chimeric antigen (huCAR) manusia
sepenuhnya. ‑Menunjukkan sel T manusia primer. J Cell Physiol 234:
9207-9215, 2019.
10. Vormittag P, Gunn R, Ghorashian S dan Veraitch FS: Panduan untuk membuat
terapi sel CAR T. Curr Opin Biotechnol 53: 164-181, 2018.
11. Abate ‑ Daga D dan Davila ML: Model CAR: Modifikasi CAR generasi
mendatang untuk meningkatkan fungsi sel T. Mol Ther Oncolytics 3: 16014,
2016.
12. Yang QY, Yang JD dan Wang YS: Strategi saat ini untuk meningkatkan keamanan sel T
yang dimodifikasi reseptor antigen chimeric (CAR). Immunol Lett 190: 201-205, 2017.
13. Mirzaei HR, Mirzaei H, Namdar A, Rahmati M, Sampai BG dan Hadjati J:
Biomarker prediktif dan terapeutik dalam terapi sel T reseptor antigen
chimeric: Perspektif klinis. J Cell Physiol 234: 5827-5841, 2019.
14. Dai H, Wang Y, Lu X dan Han W: Reseptor antigen chimeric memodifikasi sel T
untuk terapi kanker. J Natl Cancer Inst 108: pii: djv439, 2016.
15. Mirzaei HR, Mirzaei H, Lee SY, Hadjati J dan Till BG: Prospek untuk reseptor
antigen chimeric (CAR) γδ Sel T: Pengubah permainan potensial untuk
imunoterapi kanker sel T adopsi. Cancer Lett 380: 413-423, 2016.
16. Morgan RA: Bab 17-Terapi Sel T Adopsi: Rekayasa reseptor sel-T.
Cancer Immunother (Sec Ed): 261-272, 2013.
17. Louis CU, Savoldo B, Dotti G, Pule M, Yvon E, Myers GD, Rossig C, Russell HV,
Diouf O, Liu E, dkk: Aktivitas antitumor dan nasib jangka panjang sel T reseptor
antigen chimeric positif pada pasien dengan neuroblastoma. Darah 118:
6050‑6056, 2011.
18. Duong CP, Yong CS, Kershaw MH, Slaney CY dan Darcy PK: Imunoterapi
kanker menggunakan sel T yang dimodifikasi gen: Dari bangku ke klinik. Mol
Immunol 67: 46-57, 2015.
19. SadelainM: Terapi CAR: Paradigma CD19. J Clin Invest 125: 3392-3400, 2015.
20. Eshhar Z: Pendekatan T-body: Mengarahkan sel T dengan spesifisitas
antibodi. Handb Exp Pharmacol: 329-342, 2008.
21. Brentjens R, Yeh R, Bernal Y, Riviere I dan Sadelain M: Pengobatan leukemia
limfositik kronis dengan sel T autologus yang ditargetkan secara genetik: Laporan
kasus dari kejadian merugikan yang tidak terduga dalam uji klinis fase I. Mol Ther
18: 666-668, 2010.
2193
22. Hingga BG, Jensen MC, Wang J, Qian X, Gopal AK, Maloney DG, Lindgren CG,
Lin Y, Pagel JM, Budde LE, dkk: Imunoterapi adopsi spesifik CD20 untuk limfoma
menggunakan reseptor antigen chimeric dengan domain CD28 dan 4‑1BB: Hasil
uji klinis percontohan. Darah 119: 3940‑3950, 2012.
23. Park JH dan Brentjens RJ: Apakah semua reseptor antigen chimeric dibuat sama? J
Clin Oncol 33: 651-653, 2015.
24. Qian L, Li D, Ma L, He T, Qi F, Shen J dan Lu XA: Reseptor antigen chimeric anti ‑
CD19 novel dengan scFv (fragmen variabel rantai tunggal) yang dimanusiakan
memicu pembunuhan sel leukemia. Imunol Sel 304-305: 49-54, 2016.
25. Kunci D, Mockel ‑ Tenbrinck N, Drechsel K, Barth C, Mauer D, Schaser T, Kolbe
C, Al Rawashdeh W, Brauner J, Hardt O, dkk:
Pembuatan otomatis dari sel T reseptor antigen khimerik yang diarahkan ke
CD20 untuk penggunaan klinis. Ada Hum Gene 28: 914-925, 2017.
26. Tang XY, Sun Y, Zhang A, Hu GL, Cao W, Wang DH, Zhang B dan Chen H:
Sel T reseptor antigen kimerik CD28 / 4‑1BB generasi ketiga untuk
kemoterapi relaps atau leukemia limfoblastik akut refrakter: A non -racak,
protokol uji coba fase I label terbuka. BMJ Open 6: e013904, 2016.
27. Yeku OO dan Brentjens RJ: Sel-T CAR Lapis Baja: Memanfaatkan sitokin dan
ligan pro-inflamasi untuk meningkatkan efektivitas anti-tumor sel-T CAR. Biochem
Soc Trans 44: 412‑418, 2016.
28. Chmielewski M dan Abken H: TRUCKs: Generasi keempat CAR. Expert Opin
Berbagai Ada 15: 1145‑1154, 2015.
29. Kueberuwa G, Kalaitsidou M, Cheadle E, Hawkins RE dan Gilham DE: CD19
CAR T sel mengekspresikan IL-12 memberantas limfoma pada tikus limforeplet
sepenuhnya melalui induksi kekebalan tubuh. Mol Ther Oncolytics 8: 41-51,
2017.
30. Kerkar SP, Muranski P, Kaiser A, Boni A, Sanchez ‑ Perez L, Yu Z, Palmer
DC, Reger RN, Borman ZA, Zhang L, dkk:
Sel CD8 + T spesifik tumor yang mengekspresikan interleukin-12 membasmi kanker yang sudah
ada pada pejamu yang mengalami limfodeplet. Res Kanker 70: 6725-6734, 2010.
31. Giacca M dan Zacchigna S: Pengiriman gen yang dimediasi virus untuk terapi gen
manusia. J Control Rilis 161: 377‑388, 2012.
32. Yi Y, Noh MJ dan Lee KH: Kemajuan terkini dalam terapi gen retroviral. Curr
Gene Ther 11: 218-228, 2011.
33. KiddME, Shin S dan Shea LD: Hidrogel fibrin untuk pengiriman gen lentiviral in vitro
dan in vivo. J Control Release 157: 80-85, 2012.
34. Munñoz ‑ López M dan García ‑ Perez JL: Transposon DNA: Sifat dan
aplikasi dalam genomik. Curr Genomics 11: 115-128, 2010.
35. Morita D, Nishio N, Saito S, Tanaka M, Kawashima N, Okuno Y, Suzuki S,
Matsuda K, Maeda Y, Wilson MH, dkk: Peningkatan ekspresi reseptor antigen
chimeric Anti ‑ CD19 dalam sel T yang direkayasa transposon piggyBac. Metode
Mol Ther Clin Dev 8: 131-140, 2017.
36. Kebriaei P, Singh H, Huls MH, FigliolaMJ, Bassett R, Olivares S, Jena B, Dawson MJ,
Kumaresan PR, Su S, dkk: Uji coba Tahap I menggunakan kecantikan tidur untuk
menghasilkan sel CAR T spesifik CD19. J Clin Invest 126: 3363-3376, 2016.
37. Manuri PV, Wilson MH, Maiti SN, Mi T, Singh H, Olivares S, Dawson MJ, Huls
H, Lee DA, Rao PH, dkk: piggyBac Transposon / Transposase system untuk
menghasilkan sel T spesifik CD19 untuk pengobatan keganasan garis B-B.
Ada Hum Gene 21: 427-437, 2010.
38. Yarmush ML, Golberg A, Serša G, Kotnik T dan Miklavčič D: Teknologi berbasis
elektroporasi untuk kedokteran: Prinsip, aplikasi, dan tantangan. Annu Rev
Biomed Eng 16: 295‑320, 2014.
39. Chicaybam L, Sodre AL, Curzio BA dan Bonamino MH: Metode biaya rendah
yang efisien untuk transfer gen ke limfosit T. PLoS One 8: e60298, 2013.
40. Chicaybam L, Barcelos C, Peixoto B, Carneiro M, Limia CG, Redondo P,
Lira C, Paraguayassú ‑ Braga F, Vasconcelos ZF, Barros L dan Bonamino
MH: Protokol elektroporasi yang efisien untuk modifikasi genetik sel
mamalia. Depan Bioeng Biotechnol 4: 99 2017.
41. Kotnik T, Frey W, Sack M, Haberl Meglič S, Peterka M dan Miklavčič D:
Aplikasi berbasis elektroporasi dalam bioteknologi. Trends Biotechnol 33:
480‑488, 2015.
42. Ramamoorth M dan Narvekar A: Vektor non-virus dalam terapi gen ‑ gambaran
umum. J Clin Diagn Res 9: GE01 ‑ GE06, 2015.
43. Yin H, Kauffman KJ dan Anderson DG: Teknologi pengiriman untuk pengeditan
genom. Nat Rev Drug Discov 16: 387-399, 2017.
44. SmithTT, StephanSB, Moffett HF, McKnight LE, JiW, ReimanD, Bonagofski E,
Wohlfahrt ME, Pillai SPS dan Stephan MT: Pemrograman in situ sel T spesifik
leukemia menggunakan DNA nanocarrier sintetis. Nat Nanotechnol 12: 813-820,
2017.
2194 MOHANTY dkk: TERAPI CAR T CELL PADA KANKER (REVIEW)
45. Miller MA: Nanopartikel meningkatkan jarak tempuh ekonomi untuk CAR. Sci Transl Med
9: pii: eaan2784, 2017.
46. Smith TT, Moffett HF, Stephan SB, Opel CF, Dumigan AG, Jiang X,
Pillarisetty VG, Pillai SPS, Wittrup KD dan Stephan MT: Biopolymers
codelivering engineered T cells dan STING agonists dapat menghilangkan
tumor heterogen. J Clin Invest 127: 2176-2191, 2017.
47. Dowaidar M, Abdelhamid HN, Hällbrink M, Freimann K, Kurrikoff K, ZouX dan
Langel Ü: Bantuan nanopartikel magnetik Perakitan sendiri kompleks peptida
penetrasi sel ‑ oligonukleotida kompleks untuk pengiriman gen. Rep Sci 7: 9159,
2017.
48. Kebriaei P: Terapi sel-T CAR: Mengatasi tantangan dan strategi baru. Clin
Lymphoma Myeloma Leuk 17 (Suppl 2): S74-S78, 2017.
49. Bonifant CL, Jackson HJ, Brentjens RJ dan Curran KJ: Toksisitas dan manajemen
dalam terapi sel-T CAR. Mol Ther Oncolytics 3:
16011, 2016.
50. Brudno JN dan Kochenderfer JN: Toksisitas sel T reseptor antigen chimeric:
Pengakuan dan manajemen. Darah 127: 3321-3330, 2016.
51. Neelapu SS, Locke FL, Bartlett NL, Lekakis LJ, Miklos DB, Jacobson CA,
Braunschweig I, Oluwole OO, Siddiqi T, Lin Y, dkk: Axicabtagene Ciloleucel
CAR T-cell therapy dalam refractory large B-cell lymphoma. N Engl J Med
377: 2531‑2544,
2017.
52. Paietta E: Imunobiologi leukemia akut. Dalam: Penyakit neoplastik darah.
Springer, Cham, pp237‑279, 2018.
53. Zah E, Lin MY, Jensen MC, Silva ‑ Benedict A dan Chen YY: Abstrak IA12:
Memerangi pelarian antigen dengan terapi sel CAR-T bispesifik CD19 / CD20.
Cancer Immunol Res 5 (3 Suppl): IA12, 2017.
54. Majzner RG dan Mackall CL: Antigen tumor lepas dari terapi sel-T CAR.
Cancer Discov 8: 1219‑1226, 2018.
55. ZhuM, Wu B, Brandl C, Johnson J, Wolf A, ChowA dan Doshi S: Blinatumomab,
Bispecific T-cell Engager (BiTE (®)) untuk CD-19 imunoterapi kanker yang
ditargetkan: Farmakologi klinis dan implikasinya. Clin Pharmacokinet 55:
1271-1288, 2016.
56. Martyniszyn A, Krahl AC, André MC, Hombach AA dan Abken H: CD20 ‑
CD19 sel Bispecific CAR T untuk pengobatan keganasan sel B. Hum Gene
Ther 28: 1147‑1157, 2017.
57. Zhu F, Shah N, Xu H, Schneider D, Orentas R, Dropulic B, Hari P dan
Keever-Taylor CA: Manufaktur sistem tertutup CD19 dan sel T reseptor
antigen khimerik CD20 / 19 target ganda menggunakan keajaiban CliniMACS
perangkat di pusat medis akademik. Sitoterapi 20: 394-406, 2018.
58. Sun LL, Ellerman D, Mathieu M, Hristopoulos M, Chen X, Li Y, Yan X, Clark R,
Reyes A, Stefanich E, dkk: Antibodi bispesifik yang bergantung pada sel CD3 T anti
‑ CD20 / CD3 untuk pengobatan keganasan sel B. Sci Transl Med 7: 287ra70,
2015.
59. Zhang W, Liu Y, Wang Y, Wang C, Yang QM, Zhu HL dan Han WD: Keamanan
jangka panjang dan kemanjuran sel CART-20 pada pasien dengan limfoma
non-Hodgkin sel B refrakter atau kambuh: 5- tahun tindak lanjut hasil uji coba
fase I dan IIa. Target Transduct Sinyal Ada 2: 17054, 2017.
60. Hegde M, Mukherjee M, Grada Z, Pignata A, Landi D, Navai SA, Wakefield
A, Fousek K, Bielamowicz K, Chow KK, dkk:
Sel T CAR Tandem yang menargetkan HER2 dan IL13Rα2 mengurangi pelepasan
antigen tumor. J Clin Invest 126: 3036‑3052, 2016.
61. Schneider D, Xiong Y, Wu D, Nӧlle V, Schmitz S, Haso W, Kaiser A, Dropulic
B dan Orentas RJ: Vektor tandem CD19 / CD20 CAR lentiviral drive on ‑
target dan off ‑ target antigen modulation dalam sel leukemia garis. J
Immunother Cancer 5:42,
2017.
62. Grada Z, Hegde M, Byrd T, Shaffer DR, Ghazi A, Brawley VS, Corder A,
Schönfeld K, Koch J, Dotti G, dkk: TanCAR: Reseptor antigen kimerik
bispesifik baru untuk imunoterapi kanker. Mol Ther Nucleic Acids 2: e105,
2013.
63. Ahmed N, Brawley V, Hegde M, Bielamowicz K, Kalra M, Landi D,
Robertson C, Gray TL, Diouf O, Wakefield A, dkk:
Sel T spesifik virus yang dimodifikasi reseptor antigen kimerik HER2 untuk
glioblastoma progresif: Uji coba peningkatan dosis fase 1. JAMA Oncol 3:
1094-1101, 2017.
64. Bielamowicz K, Fousek K, Byrd TT, Samaha H, Mukherjee M, Aware N, WuMF,
Orange JS, Sumazin P, Man TK, dkk: Sel CAR T trivalen mengatasi variabilitas
antigenik antar pasien pada glioblastoma. Neuro Oncol 20: 506-518, 2018.
65. Ott PA, Hodi FS dan Robert C: blokade CTLA ‑ 4 dan PD ‑ 1 / PD ‑ L1:
Modalitas imunoterapi baru dengan manfaat klinis yang tahan lama pada
pasien melanoma. Clin Cancer Res 19: 5300-5309, 2013.
66. Curran MA, Montalvo W, Yagita H dan Allison JP: blokade kombinasi PD ‑ 1 dan
CTLA ‑ 4 memperluas infiltrasi sel T dan mengurangi sel T regulatoris dan sel
myeloid dalam tumor melanoma B16. Proc Natl Acad Sci USA 107: 4275-4280,
2010.
67. Hodi FS, O'Day SJ, McDermott DF, Weber RW, Sosman JA, Haanen JB,
Gonzalez R, Rober t C, Schadendor f D, Hassel JC, dkk: Peningkatan
Survival dengan Ipilimumab pada Pasien dengan Metastatic Melanoma. N
Engl J Med 363: 711-723, 2010.
68. Iwai Y, Ishida M, Tanaka Y, Okazaki T, Honjo T dan Minato N: Keterlibatan PD ‑
L1 pada sel tumor dalam pelarian dari sistem imun inang dan imunoterapi
tumor dengan blokade PD ‑ L1. Proc Natl Acad Sci USA 99: 12293-12297,
2002.
69. Iwai Y, Hamanishi J, Chamoto K dan Honjo T: Terapi imun kanker yang
menargetkan jalur pensinyalan PD-1. J Biomed Sci 24:
26, 2017.
70. Ansell SM, Lesokhin AM, Borrello I, Halwani A, Scott EC, Gutier rez M,
Schuster SJ, Mi l lenson MM, Cat coba D, Freeman GJ, dkk: Blokade PD-1
dengan Nivolumab pada limfoma Hodgkin yang kambuh atau refrakter. N
Engl J Med 372: 311‑319,
2015.
71. Chen R, Zinzani PL, Fanale MA, Armand P, Johnson NA, Brice P, Radford J,
Ribrag V, Molin D, Vassilakopoulos TP, dkk:
Studi fase II tentang efikasi dan keamanan pembrolizumab untuk limfoma Hodgkin
klasik yang kambuh / refrakter. J Clin Oncol 35: 2125-2132, 2017.
72. Barbee MS, Ogunniyi A, Horvat TZ dan Dang TO: Status saat ini dan arah masa
depan dari penghambat pos pemeriksaan imun ipilimumab, pembrolizumab, dan
nivolumab dalam onkologi. Ann Pharmacother 49: 907-937, 2015.
73. Curran MA, Kim M, Montalvo W, Al-Shamkhani A dan Allison JP:
Kombinasi blokade CTLA ‑ 4 dan aktivasi 4‑1BB meningkatkan penolakan
tumor dengan meningkatkan infiltrasi sel T, proliferasi, dan produksi
sitokin. PLoS One 6: e19499,
2011.
74. Seidel JA, Otsuka A dan Kabashima K: Terapi Anti ‑ PD ‑ 1 dan
Anti-CTLA-4 pada kanker: Mekanisme kerja, khasiat, dan batasan. Depan
Oncol 8: 86, 2018.
75. Ren J, Liu X, Fang C, Jiang S, June CH dan Zhao Y: Pengeditan genom multipleks untuk
menghasilkan sel CAR T universal yang tahan terhadap penghambatan PD1. Clin Cancer
Res 23: 2255‑2266, 2017.
76. Azijli K, Stelloo E, Peters GJ dan Van Den Eertwegh AJ: Perkembangan baru dalam
pengobatan melanoma metastatik: Penghambat pos pemeriksaan kekebalan dan terapi
yang ditargetkan. Res Antikanker 34: 1493-1505, 2014.
77. Deng L, Liang H, Burnet te B, Becket t M, Darga T, Weichselbaum RR dan Fu
YX: Iradiasi dan pengobatan anti ‑ PD ‑ L1 secara sinergis meningkatkan
kekebalan antitumor pada tikus. J Clin Invest 124: 687-695, 2014.
78. Shi H, Sun M, Liu L dan Wang Z: Reseptor antigen chimeric untuk imunoterapi
adopsi kanker: Penelitian terbaru dan prospek masa depan. Kanker Mol 13: 219,
2014.
79. Liu L, Sun M dan Wang Z: Terapi sel T adopsi dari keganasan sel B:
Reseptor antigen chimeric konvensional dan fisiologis. Cancer Lett 316:
1-5, 2012.
80. Minutolo NG, Hollander EE dan Powell DJ Jr: Munculnya terapi sel T reseptor
kekebalan universal untuk kanker. Depan Oncol 9: 176, 2019.
81. Zhao J, Lin Q, Lagu Y dan Liu D: MOBIL Universal, sel T universal, dan sel
T CAR universal. J Hematol Oncol 11: 132,
2018.
82. Lohmueller JJ, Ham JD, Kvorjak M dan Finn OJ: sel CAR T pengikat biotin
yang ditingkatkan afinitas mSA2 untuk penargetan tumor universal.
Onkoimunologi 7: e1368604, 2018.
83. Qasim W, Zhan H, Samarasinghe S, Adams S, Amrolia P, Stafford S,
Butler K, Rivat C, Wright G, Somana K, dkk:
Remisi molekuler bayi B ‑ ALL setelah infus sel CAR T yang diedit oleh gen
TALEN universal. Sci Transl Med 9: eaaj2013,
2017.
84. Alienke W, Esser R, Priesner C, Suerth JD, Schambach A, Wels WS, Grez M,
Kloess S, Arseniev L dan Koehl U: Keuntungan dan aplikasi sel pembunuh
alami yang mengekspresikan CAR. Pharmacol Depan 6:21, 2015.
85.Klingemann H: Apakah sel-sel pembunuh alami lebih unggul daripada penggerak CAR?
Onkoimunologi 3: e28147, 2014.
86. Jiang H, Zhang W, Shang P, Zhang H, Fu W, Ye F, Zeng T, Huang H,
Zhang X, Sun W, dkk: Transfeksi gen chimeric anti ‑ CD138 meningkatkan
aktivasi sel pembunuh alami dan membunuh beberapa sel myeloma. Mol
Oncol 8: 297‑310,
2014.
 LAPORAN ONKOLOGI 42: 2183-2195, 2019
87. Boissel L, Betancur ‑ Boissel M, LuW, Krause DS, Van Etten RA, Wels WS dan
Klingemann H: Penargetan ulang sel NK ‑ 92 dengan menggunakan reseptor antigen
khimerik spesifik CD19 dan CD20 lebih baik dibandingkan dengan sito seluler yang
bergantung pada antibodi - toksisitas. Onkoimunologi 2: e26527, 2013.
88. Romanski A, Uherek C, Bug G, Seifried E, Klingemann H, Wels WS,
Ottmann OG dan Tonn T: sel NK ‑ 92 rekayasa CD19 ‑ CAR cukup untuk
mengatasi resistensi sel NK pada keganasan sel B. J Sel Mol Med 20:
1287‑1294, 2016.
89.Hermanson DL dan Kaufman DS: Memanfaatkan reseptor antigen chimeric untuk
mengarahkan aktivitas sel pembunuh alami. Immunol depan 6: 109. Posey AD, Schwab RD, Boesteanu AC, Steentoft C, Mandel U, Engels B, Stone
195, 2015.
90. Tang X, Yang L, Li Z, Nalin AP, Dai H, Xu T, Yin J, You F, Zhu M, Shen W, dkk:
Uji klinis pertama sel CAR NK-92: uji keamanan sel CD33 ‑ CAR NK ‑ 92
pada pasien dengan leukemia myeloid akut yang kambuh dan refrakter. Am
J Cancer Res 8: 1083-1089, 2018.
91.Hsu PD, Lander ES dan Zhang F: Pengembangan dan Aplikasi CRISPR ‑
Cas9 untuk rekayasa genom. Sel 157: 1262‑1278,
2014.
92.Haurwitz RE, Jinek M, Wiedenheft B, Zhou K dan Doudna JA: Pemrosesan
RNA spesifik-struktur dan urutan oleh endonuklease CRISPR. Sains 329:
1355-1358, 2010.
93. Cox DB, Platt RJ dan Zhang F: Pengeditan genom terapi: Prospek dan
tantangan. Nat Med 21: 121‑131, 2015.
94. Shang W, Wang F, Fan G dan Wang H: Elemen kunci untuk merancang dan
melakukan layar genetik berbasis CRISPR / Cas9. J Genet Genomics 44:
439-449, 2017.
95.Mirzaei HR, Pourghadamyari H, Rahmati M, Mohammadi A, Nahand JS, Rezaei
A dan Hadjati J: Gene-knocked out chimeric antigen receptor (CAR) sel T:
Tuning up untuk imunoterapi kanker generasi berikutnya. Cancer Lett 423:
95-104, 2018.
96. Eyquem J, Mansilla-Soto J, Giavridis T, van der Stegen SJ, Hamieh M,
Cunanan KM, Odak A, Gönen M dan Sadelain M: Menargetkan CAR ke lokus
TRAC dengan CRISPR / Cas9 meningkatkan penolakan tumor. Alam 543:
113‑117, 2017.
97.Mou H, Kennedy Z, Anderson DG, Yin H dan Xue W: Model tikus kanker
presisi melalui pengeditan genom dengan CRISPR-Cas9. Genome Med
7:53, 2015.
98. MacLeod DT, Antony J, Martin AJ, Moser RJ, Hekele A, Wetzel KJ, Brown
AE, Triggiano MA, Hux JA, Pham CD, dkk:
Integrasi CAR CD19 ke dalam lokus rantai alfa TCR merampingkan
produksi sel CAR T yang diedit gen alogenik. Mol Ther 25: 949-961,
2017.
99. Ren J, Zhang X, Liu X, Fang C, Jiang S, June CH dan Zhao Y: Sebuah sistem serbaguna
untuk pembuatan sel CAR T yang diedit genom multipleks dengan cepat. Oncotarget 8:
17002‑17011, 2017.
100. Grupp SA, Laetsch TW, Buechner J, Bit tencour t H, Maude SL, Verneris MR,
Myers GD, Boyer MW, Rives S, De Moerloose B, dkk: Analisis uji coba
registrasi global tentang kemanjuran dan keamanan CTL019 pada anak-anak
dan dewasa muda dengan leukemia limfoblastik akut (ALL) kambuh /
refrakter. Darah 128: 221, 2016.
101. Zhao Z, Chen Y, Francisco NM, Zhang Y dan Wu M: Penerapan terapi sel
CAR-T pada keganasan hematologi: Keuntungan dan tantangan. Acta
Pharm Sin B 8: 539‑551, 2018.
102. Beatty GL, Haas AR, Maus MV, Torigian DA, Soulen MC, Plesa G dan Kalos M:
Reseptor antigen kimerik spesifik Mesothelin sel T yang direkayasa mRNA
menginduksi aktivitas antitumor pada keganasan padat. Cancer Immunol Res
2: 112‑120, 2014.
103. Mirzaei HR, Rodriguez A, Shepphird J, Brown CE dan Badie B: Reseptor
antigen chimeric Terapi sel T pada tumor padat: Tantangan dan aplikasi
klinis. Front Immunol 8: 1850, 2017.
104. Boardman DA, Philippeos C, Fruhwirth GO, Ibrahim MA, Hannen RF, Cooper D,
Marelli ‑ Berg FM, Watt FM, Lechler RI, Maher J, dkk: Ekspresi reseptor
antigen chimeric khusus untuk donor HLA kelas I meningkatkan potensi sel T
pengatur manusia dalam mencegah penolakan transplantasi kulit manusia. Am
J Transplantasi 17: 931-943, 2017.
105. Shen CJ, Yang YX, Han EQ, Cao N, Wang YF, Wang Y, Zhao YY, Zhao LM, Cui
J, Gupta P, dkk: Reseptor antigen chimeric yang mengandung domain
pensinyalan ICOS memediasi efek antitumor spesifik dan efisien dari sel T
terhadap glioma yang mengekspresikan EGFRvIII. J Hematol Oncol 6: 33, 2013.
106. Owens GL, Sheard VE, Kalaitsidou M, Blount D, Lad Y, Cheadle EJ, Edmondson
RJ, Kooner G, GilhamDE dan Harrop R: Penilaian praklinis terapi sel-T CAR
yang menargetkan antigen tumor 5T4 pada kanker ovarium. J Immunother 41:
130‑140, 2018.
2195
107. Ellebrecht CT, Bhoj VG, Nace A, Choi EJ, Mao X, Cho MJ, Di Zenzo G,
Lanzavecchia A, Seykora JT, Cotsarelis G, dkk:
Merekayasa ulang sel T reseptor antigen khimerik untuk terapi target
penyakit autoimun. Sains 353: 179-184, 2016.
108. O'Rourke DM, Nasrallah MP, Desai A, Melenhorst JJ, Mansfield K,
Morrissette JJD, Martinez ‑ Lage M, Brem S, Maloney E, Shen A, dkk: Dosis
tunggal sel CAR T yang diarahkan EGFRvIII perifer memediasi hilangnya
antigen dan menginduksi resistensi adaptif pada pasien dengan
globlastoma berulang. Sci Transl Med 9: pii: eaaa0984, 2017.
JD, Madsen TD, Schreiber K, Haines KM, dkk:
Sel CAR T yang direkayasa menargetkan Tn-Glycoform terkait kanker dari
mucin membran MUC1 yang mengontrol adenokarsinoma. Kekebalan 44:
1444-1454, 2016.
110. Burga RA, Thorn M, Titik GR, Guha P, Nguyen CT, Licata LA, DeMatteo RP, Ayala A,
Joseph Espat N, Junghans RP dan Katz SC: Sel-sel penekan yang diturunkan dari
myeloid hati berkembang sebagai respons terhadap metastasis hati pada tikus dan
menghambat kemanjuran anti tumor dari anti ‑ CEA CAR ‑ T. Cancer Immunol
Immunother 64: 817-829, 2015.
111. Ahmed N, Brawley VS, Hegde M, Robertson C, Ghazi A, Gerken C, Liu E,
Dakhova O, Ashoori A, Corder A, dkk: Reseptor faktor pertumbuhan epidermal
manusia 2 (HER2) ‑ sel T yang dimodifikasi reseptor antigen kimerik spesifik
untuk imunoterapi sarkoma positif HER2. J Clin Oncol 33: 1688-1696, 2015.
112. Akce M, Zaidi MY, Waller EK, El ‑ Rayes BF dan Lesinski GB: Potensi
terapi sel CAR T pada kanker pankreas. Front Immunol 9: 2166, 2018.
113. Bach PB, Giralt SA dan Saltz LB: Persetujuan FDA untuk tisagenle- cleucel: Janji
dan kompleksitas obat kanker senilai $ 475.000. JAMA 318: 1861-1862, 2017.
114. Fala L: Yescarta (Axicabtagene Ciloleucel) Terapi sel-T CAR kedua disetujui
untuk pasien dengan jenis limfoma sel B besar tertentu. Manfaat Obat
Kesehatan Am 11: 109‑111, 2018.
115. Hai SP dan Kesselheim AS: FDA, terapi Juno, dan keharusan etis untuk
transparansi. BMJ 354: i4435, 2016.
116. Rotolo A, Caputo V dan Karadimitris A: Prospek dan janji imunoterapi
reseptor antigen chimeric pada multiple myeloma. Br J Haematol 173:
350‑364, 2016.
117. Almond LM, Charalampakis M, Ford SJ, Gourevitch D dan Desai A:
Myeloid sarcoma: Presentasi, diagnosis, dan pengobatan. Clin Limfoma
Myeloma Leuk 17: 263-267, 2017.
118. Locke FL, Neelapu SS, Bartlett NL, Siddiqi T, Chavez JC, Hosing CM,
Ghobadi A, Budde LE, Bot A, Rossi JM, dkk:
Fase 1 hasil ZUMA-1: Sebuah studi multisenter dari KTE-C19 Anti ‑
CD19 CAR T sel terapi pada limfoma agresif refrakter. Mol Ther 25:
285-295, 2017.
119. Qasim W, Ciocarlie O, Adams S, Inglott S, Murphy C, Rivat C, Wright G,
Lucchini G, Silva J, Rao K, dkk: Hasil awal UCART19, produk sel T anti ‑
CD19 alogenik CAR dalam uji coba pertama pada manusia (PALL) pada
pasien anak dengan leukemia limfoblastik akut sel B kambuh / refrakter
CD19 +. Darah 130: 1271, 2017.
120. Cai T, Galetto R, Gouble A, Smith J, Cavazos A, Konoplev S, Lane AA,
Guzman ML, Kantarjian HM, Pemmaraju N, dkk:
Studi pra-klinis sel Anti ‑ CD123CAR ‑ T untuk pengobatan neoplasma sel
dendritik plasmacytoid blastik (BPDCN). Darah 128: 4039, 2016.
121. Double A, Schiffer-Mannioui C, Thomas S, Gautron AS, Poirot L dan Smith
J: Abstrak 3763: UCART22: Imunoterapi adopsi alogenik leukemia dengan
menargetkan CD22 dengan sel-T CAR. Res kanker 77: 3763-3763, 2017.
122. Galetto R, Chion-Sotinel I, Gouble A dan Smith J: Allogenic TCRa / CS1
double knockout T-sel yang membawa reseptor antigen chimeric anti-CS1:
Pendekatan imunoterapi yang ditingkatkan untuk pengobatan multiple
myeloma. Cancer Res 76 (14 Suppl): Abstrak nr 2289, 2016.
123. Dr ent E, Groen RW, Noor t WA, Themel i M, Lammerts van Bueren JJ,
Parren PW, Kuball J, Sebestyen Z, Yuan H, de Bruijn J, dkk: Evaluasi
pra-klinis dari CD38 yang direkayasa reseptor antigen reseptor sel T
untuk pengobatan multiple myeloma. Haematologica 101: 616‑625, 2016.
124. Coulter I: Komposisi. Paten AS 2018 / 0228866A1. Diarsipkan 12 Agustus 2016;
dikeluarkan 16 Agustus 2018.