Hal pertama yang harus dilakukan adalah mempersiapkan 2 larutan stok, yaitu:
Larutan Stok A: 0.1 M larutan Asam Sitrat (21.01 gram Asam sitrat
dilarutkan dalam 1 L Aquades)
Larutan Stok B: 0.1 M larutan Sodium Sitrat atau Natrium Sitrat (29.41
gram Natrium Sitrat atau C6H5O7Na3.2H2O dilarutkan dalam 1 L
Aquades)
x y pH
46.5 3.5 3.0
x y pH
43.7 6.3 3.2
40.0 10.0 3.4
37.0 13.0 3.6
35.0 15.0 3.8
33.0 17.0 4.0
31.5 18.5 4.2
28.0 22.0 4.4
25.5 24.5 4.6
23.0 27.0 4.8
20.5 29.5 5.0
18.0 32.0 5.2
16.0 34.0 5.4
13.7 36.3 5.6
11.8 38.2 5.8
9.5 41.5 6.0
7.2 42.8 6.2
Jika Kamu ingin membuat larutan buffer Sitrat pH 3.0, maka yang harus Kamu
lakukan adalah:
Komposisi
Larutan A Larutan B
Larutan
di-Natrium sitrat 0.1 mol/L B1 : HCl 0.1 X ml Larutan A
(asam sitrat monohidrat mol/L B2 : + (100 - X)
21.014 gr = 200 ml NaOH NaOH 0.1
Larutan B
1M, encerkan tepat 1 L mol/L
pH 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0
X ml 9.0 17.9 23.6 27.6 30.2 32.2 34.1 36.0 37.9 39.9
pH 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 4.0
X ml 42.1 44.8 47.8 51.2 55.1 60.0 66.4 74.9 85.6 100
Bicara tentang analisa kimia, salah satu hal yang sedikit merepotkan bagi saya
adalah buffer. Buffer atau larutan penyangga adalah larutan yang terdiri dari asam
lemah dan garam-nya yang dapat mempertahankan dan menjaga pH. Bidang
bioteknologi tidak bisa dipisahkan dari penggunaan larutan ini.
Dalam memilih buffer, yang harus diperhatikan adalah pH optimum serta sifat-
sifat biologisnya. Banyak jenis buffer yang mempunyai impact terhadap sistem
biologis, aktivitas enzim, substrate, atau kofaktor.
x (ml) pH
22.0 2.2
16.2 2.4
12.1 2.6
8.4 2.8
5.7 3.0
4.1 3.2
3.2 3.4
2.5 3.6
Mencampurkan 0.1N acetic acid dan 0.1N sodium acetate untuk mencapai pH
tertentu.
TNT PBT
Siapkan 0.2 M sodium cacodylate stock solution dalam air (4.28 g/100 ml).
Tambahkan x ml 0.2 N HCL per 100 ml cacodylate stock solution, diikuti denga
penambahan air demin sampai volume 400 ml hingga diperoleh 0.05 M
cacodylate buffer pada pH yang diinginkan.
0.2 M HCl pH
94.0 5.0
90.0 5.2
86.0 5.4
78.4 5.6
69.6 5.8
59.2 6.0
47.6 6.2
36.6 6.4
26.6 6.6
18.6 6.8
12.6 7.0
8.4 7.2
5.4 7.4
Citrate buffer stock solutions: A: 0.1 M citric acid; B: 0.1 M sodium citrate.
Campurkan kedua larutan dengan perbandingan volume dan encerkan dengan air
sampai 100 ml untuk membuat pH yang diinginkan.
Campur sejumlah tertentu stock solution dan tambahkan air suling untuk
mendapatkan 100 ml larutan Sørensen’s phosphate buffer 0.1 M. Ingat,
konsentrasi phosphate yang tinnggi dapat bersifat toksik bagi sel tanaman.
Stock solutions:
A 0.2 M NaH2PO4
B 0.2 M Na2HPO4
A (ml) B (ml) pH
92.0 8.0 5.8
87.7 12.3 6.0
81.5 18.5 6.2
68.5 31.5 6.5
62.5 37.5 6.6
56.5 43.5 6.7
51.0 49.0 6.8
45.0 55.0 6.9
39.0 61.0 7.0
33.0 67.0 7.1
28.0 72.0 7.2
23.0 77.0 7.3
19.0 81.0 7.4
16.0 84.0 7.5
8.5 91.5 7.8
5.3 94.7 8.0
Stock solutions:
I. TRIS BUFFERS
Solution Preparation
Tris, 1 M stock Tris base DI Dissolve and adjust pH 121.1 g 800 ml;
with the following approximate
amount of HCl: pH 7.4 pH 7.6 pH 8.0 70 ml, 60 ml, 42 ml
SSPE, 20x NaCl NaH2PO4 • H2O EDTA DI 174 g 27.6 g 7.4 g 800
Adjust pH to 7.4 with NaOH then add ml
DI to 1 liter
Stock solutions:
0.2 M glycine
0.2 M NaOH
x ml 0.2 M NaOH pH
2.0 8.6
3.0 8.8
4.4 9.0
6.0 9.2
8.4 9.4
11.2 9.6
13.6 9.8
19.3 10.4
22.75 10.6
Demikian beberapa buffer yang bisa dijadikan pilihan untuk digunakan. Perlu
diingat, bahwa larutan buffer hanya berfungsi untuk mempertahankan pH. Tidak
berarti bahwa pH tidak akan berubah. Perubahan dan gangguan yang cukup besar
dalam sistem dapat merubah pH meskipun telah ditambahkan buffer ke dalamnya.
Hal ini karena buffer hanya menjaga agar pH tidak terlalu berubah signifikan
dengan adanya sedikit perubahan konsentrasi ion hidrogen dalam sistem.