PROPOSAL PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

KATALIS JAMBON
“AKTIVITAS ANTIBAKTERI KOMBINASI
EKSTRAK ETANOL KULIT PISANG RAJA
(Musa acuminate x Balbisiana),
AMBON (Musa paradisiaca Var.) TERHADAP BAKTERI
Pseudomonas aeruginosa”

BIDANG KEGIATAN
PKM PENELITIAN

Diusulkan oleh:
Mohammad Farid Alfaridzi; K100170103; 2017
Mantiqa Syafa Duvadillan Gusrin; K100170120; 2017
Tiara Septiani; K100180043; 2018

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2019

1
 PENGESAHAN PROPOSAL PKM-PENELITIAN

1. Judul Kegiatan : KATALIS JAMBON “Aktivitas

Antibakteri
Ekstrak Etanol Kulit Pisang Raja
(Musa acuminate x Balbisiana),
Ambon (Musa paradisiaca Var.)
Terhadap Bakteri Pseudomonas
aeruginosa”
2. Bidang Kegiatan : PKM-P
3. Ketua Pelaksana Kegiatan
a. Nama Lengkap : Mohammad Farid Alfaridzi
b. NIM : K100170103
c. Jurusan : Farmasi
d. Universitas/Institut/Politeknik : Universitas Muhammadiyah Surakarta
e. Alamat Rumah dan No Tel./HP : Piji RT 4 RW 7 Dawe Kudus

4. Anggota Pelaksana Kegiatan/Penulis : 2 orang

5. Dosen Pendamping
a. Nama Lengkap dan Gelar : Ika Trisharyanti DK, M.Farm,.Apt.
b. NIDN/NIDK : 0609096902
c. Alamat Rumah dan No Tel./HP :
6. Biaya Kegiatan : Rp.11.675.000
7. Jangka Waktu Pelaksanaan : 5 Bulan

Surakarta, 26 Oktober 2019

Menyetujui
Wakil Dekan I Fakultas Farmasi, Ketua Pelaksana Kegiatan

(Erindyah Retno W, Ph.D., Apt) ( Mohammad Farid Alfaridzi)

NIDN. 0613027401 NIM. K100170103

Wakil Rektor Bidang Kemahasiswaan, Dosen Pendamping,

(Taufik Kasturi,S.Psi,M.Si,Ph.D) (Ika Trisharyanti DK M.Farm,.Apt.)

NIK. 799 NIDN. 0609096902

DAFTAR ISI

2
HALAMAN JUDUL..............................................................................................i
HALAMAN PENGESAHAN...............................................................................ii
DAFTAR ISI........................................................................................................ iii
DAFTAR TABEL ............................................................................................... iv
BAB 1. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang.........................................................................................1
1.2 Tujuan Penelitian..................................................................................... 1
1.3 Kerangka Pemikiran................................................................................ 2
1.4 Manfaat Penelitian................................................................................... 2
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tinjauan Tanaman Pisang........................................................................3
2.1.1 Morfologi............................................................................................3
2.1.2 Pisang Raja..........................................................................................3
2.1.3 Pisang Ambon.....................................................................................3
2.2 Bakteri Pseudomonas Aeruginosa...........................................................3
2.3 Media ...................................................................................................... 4
2.4 Resistensi Antibiotik................................................................................4
2.5 Uji Antibakteri Metode Kirby-Baurer..................................................... 4
BAB 3. METODE PELAKSANAAN
3.1 Variabel Dan Kategori.............................................................................5
3.2 Alat Dan Bahan........................................................................................5
3.3 Pelaksanaan..............................................................................................5
3.3.1 Determinasi Tanaman.........................................................................5
3.3.2 Pengambilan Bahan............................................................................5
3.3.3 Pengeringan Dan Pembuatan Serbuk................................................. 5
3.3.4 Pembuatanekstrak...............................................................................5
3.3.5 Sterilisasi Alat.................................................................................... 6
3.3.6 Pembuatan Media...............................................................................6
3.3.7 Pemeliharaan Bakteri.........................................................................7
3.3.8 Pembuatan Suspensi Bakteri..............................................................7
3.3.9 Uji Sensitivitas Bakteri.......................................................................8
3.3.10 Uji Antibakteri...................................................................................8
3.3.11 Analisis Kromatografi Lapis Tipis....................................................8
3.3.12 Uji Bioautografi.................................................................................9
3.3.13 Uji Tabung.........................................................................................9
3.4 Teknik Dan Model Analisis Data............................................................ 9
BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN
4.1 anggaran biaya........................................................................................10
4.2 jadwal kegiatan.......................................................................................10
Daftar Pustaka............................................................................................. .......11
DAFTAR TABEL

3
Tabel 4.1. Anggaran Biaya Kegiatan………………………….…......10
Tabel 4.2. Jadwal Kegiatan ………………………………………......10

DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.3. Kerangka Pemikiran……………………………………..2

4
 1

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang Masalah

Diketahui bahwa jenis kuman patogen seperti Pseudomonas sp.
mempunyai resisten tinggi terhadap ampisilin, amoksisilin, penisilin G,
tetrasiklin dan kloramfenikol. Data menunjukkan pada Pseudomonas
aeruginosa menunjukkan 98,4% sampel di RS Fatmawati Jakarta resisten
terhadap amoksisilin dan 98,7% sampel resisten terhadap penisilin G
(Refdanita et al., 2004). Sementara itu, di RSUD Abdoel Moeloek Lampung
dilakukan uji resistensi Pseudomonas aeruginosaterhadap beberapa
antibiotik,memperlihatkan 14 jenis antibiotik didapatkan ≥50% spesimen
telah resisten. Antibiotik yang paling resisten adalah ampisilin, eritromisin,
amoksisilin, sefurosim, seftriason, gentamicin, tetrasiklin, sefadroksil,
piperasilin, trimetroprim, tobramisin, kotrimoksazol, nalidisid, sulfonamid
kompleks (Rukmono dan Zuraida,2013). Penelitian ini mendorong penulis
untuk menemukan antibakteri yang sensitif terhadap bakteri P.aeruginosa.
Tanaman pisang adalah tumbuhan asli Indonesia (Kuswanto, 2007).
Buah pisang ini dimanfaatkan untuk berbagai jenis keperluan, baik untuk
buah maupun obat oleh masyarakat (Thomas, 1992). Tak hanya buah, daun
batang, jantung, ternyata kulit buah pisang yang biasanya dibuang pun
memiliki banyak manfaat. Padahal kulit pisang seringkali hanya dibuang
sebagai limbah, baik limbah pabrik maupun limbah rumah tangga yang
akhirnya menyumbang masalah terkait sampah. Mahnfaat dari kulit pisang ini
pun juga jarang diketahui. Mokbel dan Hashinaga melaporkan bahwa ekstrak
etil asetat kulit pisang Clavendis (Musa, AAA cv. Cavendish) berfungsi
sebagai antibakteri terhadap Bacillus cereus, Salmonella enteritidis,
Escherichia coli, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus dengan diameter
hambat antara 9 sampai 12 mm (Mokbel dan Hashinaga,2005). Ekstrak etanol
kulit pisang Musa sapientum dilaporkan dapat menghambat bakteri Bacillus
subtilis, Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Klebsiella pneumonia,
Pseudomonas aeruginosa, dan Salmonella typhi dengan MIC (Minimum
Inhibitory Concentration) sebesar 16-512.5mg/mL.
(Ehiowemwenguan,2014).
Oleh karena itu, peneliti berupaya untuk meneliti aktivitas antibakteri
ekstrak etanol kulit pisang terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
mengingat kulit pisang banyak yang terbuang begitu saja dan resistensi
bakteri ini terhadap beberapa antibiotik yang sudah sangat berkembang saat
ini.
1.2. Tujuan Penelitian
Berdasarkan latar belakang diatas,tujuan penelitian ini adalah:
 2

1. Mengidentifikasi aktifitas antibakteri ekstrak etanol kulit pisang raja

(Musa acuminate x Balbisiana), ambon (Musa paradisiaca Var.)
terhadap Pseudomonas aeruginosa.
2. Mengetahui senyawa yang beraktifitas antibakteri pada ekstrak etanol
kulit pisang raja (Musa acuminate x Balbisiana), ambon (Musa
paradisiaca Var.)

1.3. Kerangka pemikiran

Gambar 1.3
1.4. Manfaat Program
1. Mengembangkan penelitian uji antibakteri kulit pisang terhadap
Pseudomonas aeruginosa.
2. Menemukan alternatif senyawa antibakteri yang efektif untuk
Pseudomonas aeruginosa.
 3

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tinjauan Tanaman Pisang

Kulit buah pisang masak yang berwarna kuning kaya akan
senyawa flavonoid, karbohidrat, mineral (seperti kalium dan natrium, serta
selulosa). Flavonoid dan senyawa fenolik merupakan senyawa bioaktif yang
yang berguna untuk antioksidan, antidermatosis, kemopreventif, antikanker,
maupun antiviral . (Indo. J. Chem., 2007). Hasil uji fitokimia fraksi n-butanol
kulit pisang positif mengandung alkaloid, saponin, fenolik dan flavonoid
sementara fraksi n Heksan positif mengandung flavonoid dan terpenoid.
(Indonesian E-Journal of Applied Chemistry, 2018)
2.1.1. Morfologi Pisang
Buah pisang tersusun dalam tandan tiap tandan terdiri atas
beberapa sisir dan tiap sisir terdapat 6-22 buah pisang tergantung
varietasnya. Buah pisang umumnya tidak berbiji dan bersifat triploid.
Kecuali pada pisang kluthuk yang bersifat diploid dan memiliki biji.
Ukuran buah pisang bervariasi tergantung pada varietasnya. Panjang
antara 10-18 cm dengan ukuran diameter sekitar 2,5-4,5 cm. Daging
buah tebal dan lunak, kulit buah yang masih muda berwarna hijau dan
ketika tua berubah menjadi kuning dan strukturalnya bisa tebal dan
tipis tergantung dari varietas pisangnya. (Suyanti dan Supriyadi, 2008)
2.1.2. Pisang Raja
Salah satu tanaman yang mengandung antioksidan adalah
pisang Raja. Kulit pisang Raja mengandung antioksidan lebih tinggi
dibandingkan daging buahnya. (Husni, 2009). Hasil pengukuran uji
antioksidan ekstrak kulit pisang Raja dengan metode
spektrofotometer-UV dan persamaan regresi linear diperoleh nilai
IC50 sebesar 46,82 ppm. (Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia,
2008).
2.1.3 Pisang Ambon
Tumbuhan pisang ambon memiliki banyak kandungan
senyawa metabolit sekunder yang bermanfaat. Pada bagian buahnya
diketahui memiliki kandungan saponin, glikosida, tannin, alkaloid,
dan flavonoid (Ajani et al,2010). Selain kaya akan metabolit
sekunder, buah pisang juga kaya akan kandungan kalium yang baik
untuk hipertensi (Fatmawati dkk, 2017) . Penelitian Pauzy (2018)
menyebutkan bahwa kulit pisang ambon mengandung flavonoid,
alkaloid, tanin, saponin. Kegunaan kulit pisang ambon yaitu sebagai
antibakteri karena mengandung fenolat dan flavonoid. Selain itu
pisang ambon juga dapat berfungsi sebagai antidiabetes,
 4

antihipertensi, kandungan pro vitamin A, penyembuhan luka /

regenerasi sel, dan antioksidan (Arifki & Barliana, 2018).

2.2. Pseudomonas aeruginosa

Berdasarkan Global Biodiversity Information Facility (2018),
klasifikasi Pseudomonas aeruginosa adalah sebagai berikut: Kingdom :
Bacteria
Phylum : Proteobacteria
Class : Gammaproteobacteria
Order : Pseudomonadales
Family : Pseudomonaceae
Genus : Pseudomonas
Species : Pseudomonas aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa termasuk dalam famili
Pseudomonadaceae. Bakteri ini merupakan bakteri gram negatif,
mempunyai flagel tunggal yang bersifat polar. Bakteri ini dapat 5
menyebabkan infeksi pada mata, kulit, telinga, selain itu dapat juga
menyebabkan infeksi pada saluran nafas bagian bawah, saluran kemih,
dan organ lain. Pseudomonas aeruginosa juga merupakan flora di kulit
dan saluan cerna individu normal. Umumnya dapat ditemukan di
lingkungan Rumah Sakit seperti pada perlatannya.
Beberapa jenis antibiotik tidak efektif terhadap Pseudomonas
aeruginosa. Oleh sebab itu, uji resistensi bakteri perlu dilakukan untuk
memilih antibiotik yang tepat. Bakteri ini biasanya peka terhadap
amikasin, gentamisin, tobramisin, dan kolistin (Radji & Biomed, 2011).
2.3 Media
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang
terdiri atas campuran nutrisi (nutrient) yang digunakan oleh suatu
mikroorganisme untuk tumbuh dan berkembangbiak padamedia tersebut.
Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi pada media berupa molekul-
molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel-nya. Dengan
media pertumbuhan juga bisa digunakan untuk mengisolasi
mikroorganisme identifikasi dan membuat kultur murni! komposisi media
pertumbuhan dapat dimanipulasi untuk tujuan isolasi dan identifikasi
mikroorganisme tertentu sesuai dengan tujuan masing-masing pembuatan
suatu media Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat
hara (nutrient) yang berguna untuk membiakkan mikroba Dengan
mempergunakan bermacam-macam media dapat dilakukan isolasi
perbanyakan pengujian sifat-sifat fisiologis dan perhitungan jumlah
mikroba (Sutedjo, 1996)
Terdapat beberapa jenis media yang relevan digunakan untuk uji
antibakteri pada suatu percobaan seperti MSA, LIA, MIO dan BHI.
 5

Media MSA memiliki kemampuan untuk mengidentifikasi bakteri yang

mampu memfermentasi manitol. bakteri yang positif memfermentasi
manitol akan tampak sebagai koloni berwarna kuning sedangkan bakteri
yang negatif memfermentasi manitol akan menunjukkan koloni berwarna
merah muda sampai merah tua. Media LIA memiliki kemampuan
mendeteksi bakteri yang memproduksi lisin dekarboksilase dengan
menunjukkan warna koloni ungu karena reaksi alkali (basa) yang terjadi.
organisme yang tidak mendekarboksilasi lisin akan menghasilkan reaksi
basa pada bagian miring (ungu) dan asam pada bagian tegak ( kuning).
Media MIO digunakan untuk identifikasi pergerakan bakteri dengan
mengamati pertumbuhan bakteri diluar garis inokulasi.
2.4.Resistensi Antibiotik
Resistensi muncul jika organisme yang sebelumnya rentan tidak
lagi terhambat oleh antibiotik pada kadar yang dapat dicapai dengan
aman secara klinis. Hal ini terjadi karena pool gen bakteri mengalami
perubahan, difasilitasi oleh pembelahan selnya yang cepat, dan genom
haploid (Irianto, 2013).
Bakteri Pseudomonas aeruginosa merupakan salah satu bakteri
opurtunistik Gram negatif yang paling sering berperan dalam
pembentukan biofilm pada alat kesehatan yang tertanam dalam tubuh
manusia. Diperkirakan 10%-20% kasus infeksi nosokomial disebabkan
oleh bakteri Pseudomonas aeruginosa (Laverty G et al.,2014). Sebagai
bakteri pembentuk biofilm ini, maka infeksi biofilm bakteri
Pseudomonas aeruginosa umumnya sulit dieradikasi dan sering
menyebabkan infeksi persisten atau kronik, seperti pada kasus infeksi
kistik fibrosis paru atau infeksi biofilm akibat pemakaian alat yang
tertanam dalam tubuh.Hal ini disebabkan karena kerja dari antibiotika
dan sistem imunitas tubuh menjadi kurang efektif pada bakteri yang
terdapat dalam biofilm dibandingkan dengan bakteri planktonik
(Rasamiravaka et al.,2015)
2.5.Uji Antibakteri Metode Kirby Bauer
Uji kepekaan metode difusi cakram merupakan pemeriksaan
kualitatif untuk menentukan apakah isolat bakteri dari pasien infeksi
masih sensitif, intermediet atau sudah resisten terhadap suatu antibiotik
dengan mencocokkan menggunakan tabel standar CLSI. Zona hambat
merupakan zona yang terbentuk disekeliling cakram antibiotik pada
media MuellerHinton yang diinokulasi isolat bakteri dan tampak tidak
ada pertumbuhan bakterinya setelah dieramkan dalam inkubator pada
suhu 35 ± 2o C selama 18 jam (Departemen Mikrobiologi Klinik, 2015).
 6

BAB 3.METODE PELAKSANAAN

3.1. Variabel dan Kategori Penelitian

3.1.1.Variabel Penelitian
Adapun variable penelitian adalah sebagai berikut:
a. Variabel bebas : konsentrasi ekstrak tanaman kulit pisang (raja, ambon),
ekstrak tunggal kulit pisang ambon, ekstrak tunggal kulit pisang raja,
kombinasi ekstrak kulit pisang ambon dan kulit pisang raja,
b. Variabel tergantung : zona hambat (mm) Variabel kendali : lama inkubasi,
lama maserasi
3.1.2.Kategori Penelitian
Penelitian ini termasuk kategori Penelitian dan Pengembanganatau
Litbang (Research and Development atau R&D) adalah kegiatan
penelitian, dan pengembangan, serta memiliki kepentingan komersial
dalam kaitannya dengan riset ilmiah murni, dan pengembangan aplikatif di
bidang teknologi

3.2. Alat Dan Bahan

3.2.1 Alat
Blender, bejana, pengaduk, rotary evaporator, penangas air, cawan
porselen, neraca analitik, alat timbang, alat alat gelas, mikroskop, object
glass, deck glass, penjepit, pipet tetes, jarum ose, autoklaf, oven, LAF,
mikropipet, inkubator, blue tips, yellow tips, batang pengaduk, api
bunsen,silika gel 20x20 cm, pipa kapiler, bejana kromatografi, lampu
UV254 nm dan UV366 nm, dan seperangkat alat penyemprot.
3.2.2.Bahan
Pseudomonas aeruginosa sentitif maupun resisten, serbuk kulit pisang,
pelarut etanol 96%, cat Gram A, cat Gram B, cat Gram C, dan cat Gram
D, serta media MSA, LIA, MIO, BHI, MH, DMSO, gentamisin,
vankomisin, kloramfenikol, seftriakson, siprofloksasin
3.3. Pelaksanaan
Tempat dilakukannya penelitian adalah di Laboratorium Mikrobiologi
dan Kimia Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
3.3. Jalannya Penelitian
3.3.1.Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman pisang (ambon, raja, tanduk) dilakukan
untuk memastikan tanaman yang akan diteliti sesuai dengan
tanaman yang dimaksud dengan mencocokan morfologi dari
tanaman pisang (ambon, raja, tanduk) dengan morfologi pada buku
determinasi. Determinasi akan dilakukan di Laboratorium Biologi
FKIP UMS.
 7

3.3.2.Pengambilan Bahan
Pengambilan bahan Kulit pisang (ambon, raja, tanduk) diambil
dari buah pisang yang masak dan didapatkan di pasar Surakarta.
3.3.3.Pengeringan dan Pembuatan Serbuk
Pengeringan dan pembuatanserbuk Kulit pisang dicuci dengan
air yang mengalir kemudian dikeringkan. Pengeringan akan
dilakukan pada oven dengansuhu 50º C selama 2 hari. Setelah
kering simplisia kering dihaluskan dengan blender.
3.3.4.Pembuatan Ekstrak
Serbuk kering kulit pisang kemudian ditimbang masing masing
jenis 200 gram dan dimasukkan kedalam botol kaca kemudian
ditambahkan denga netanol 96% sebanyak 1,5 liter. Serbuk tersebut
dimaserasi selama 3 hari dengan disertai pengadukan. Hasil
maserasidisaring dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator
dilanjutkan dengan penangas air sampai didapatkan ekstrak kental.
3.3.5.Sterilisasi Alat
Alat-alat gelas kaca seperti cawan petri, tabung reaksi, erlenmeyer,
pipet volume dibungkus menggunakan kertas lalu disterilisasikan
menggunakan oven selama 2 jam dengan suhu 175oC (Pemanasan
Kering). Alat yang tidak tahan pemanasan kering seperti pipet tetes,
yellow tips, blue tips, dimasukkan dalam autoklaf (pemanasan
basah) selama 15 menit pada suhu 121oC.
3.3.6.Pembuatan media
Media yang digunakan adalah KIA, LIA, MIO, MH, dan BHI.
Serbuk ditimbang secukupnya kemudian dilarutkan dalam aquades.
Setelah dilarutkan media di sterilkan di autoklaf suhu 120 oC
selama 20 menit, lalu diambil dan disimpan di kulkas sebagai stok
media (Muhtadi et al., 2012).
3.3.7.Pemeliharaan Bakteri
Induk bakteri didapatkan dari Rumah Sakit Universitas Sebelas
Maret. Diambil satu ujung mata ose kemudian digoreskan media
MH, diinkubasi pada suhu 37oC selama 18-24 jam. Setelah koloni
tumbuh, disimpan pada almari es dan digunakan sebagai
stok(Muhtadi et al., 2012).
3.3.8.Pembuatan Suspensi Bakteri
Dari hasil biakan, diambil 3-5 koloni bakteri dari stok
kemudian di suspensikan dalam 5 mL BHI steril dan diinkubasi
pada shaker incubator selama 2 jam. Lalu kekeruhan disamakan
dengan standar Mc Farland 1,5x108 CFU/mL dengan
mensuspensikannya ke larutan salin sehingga memiliki kekeruhan
yang sama dengan standar Mc Farland.(Muhtadi et al., 2012)
 8

3.3.9. Pengujian Sensitivitas Bakteri

Uji sensitivitas Bakteri terhadap antibiotik Bakteri P.aeruginosa dan
diuji sensitivitasnya dengan mengambil suspensi bakteri dan
diratakan dengan spreader glass pada permukaan media MH. Disk
antibiotik diletakkan diatas media, diinkubasi pada suhu 37°C selama
18-24 jam. Kemudian diameter zona hambat pada tiap-tiap disk
diukur dan dibandingkan dengan standar resistensi bakteri terhadap
masing-masing antibiotik.
3.3.10. Uji Antibakteri
Media MH sebanyak 20 mL dipadatkan dalam cawan petri,
kemudian sejumlah suspensi bakteri 1,5 x 108 CFU/mL dimasukkan
dan diratakan dengan spreader glass. 15-20 µL sampel ekstrak dengan
konsentrasi 40% dimasukkan dalam disk kosong. Disk diletakkan di
atas media yang 12 telah ditambah bakteri dan diinkubasi pada suhu
37oC selama 18-24 jam. kontrol positif untuk P.aeruginosa adalah
vankomisin, dan untuk K.pneumoniae adalah gentamisin, dan DMSO
sebagai kontrol negatif (Muhtadi et al., 2012). Seri konsentrasi dibuat
dengan melihat hasil orientasi. Jenis pisang yang memiliki zona
hambat terbesar pada sampel bakteri akan dibuat seri konsentrasi
pada replikasi.
Uji ekstrak tunggal kulit pisang ambon dan kulit pisang raja. Uji
ekstrak kombinasi kulit pisang raja : kulit pisang ambon berturut-
turut ( 1:2 , 1:1 , 2:1 ).
3.3.11. Analisis Kromatografi Lapis Tipis
Ekstrak etanol kulit pisang raja, tanduk, ambon ditotolkan pada plat
silika gel GF254. Dan fase gerak kloroform : heksan (8:2) v/v.
Analisis KLT dilakukan dengan mengamati bercak pada lempeng
KLT yang telah terelusi pada sinar UV254 dan UV366 dan
menghitung nilai Rf. Deteksi bercak dilakukan dengan beberapa
pereaksi semprot seperti pereaksi FeCl3, Sitroborat, anisaldehid-
H2SO4, Dragendroff dan Liebermenn-Burchad (Muhtadi et al.,
2012).
3.3.12. Uji Bioautografi
Uji Bioautografi Lempeng KLT yang telah dielusi, diletakkan di atas
media Mueller Hinton yang telah diinokulasi dengan bakteri
P.aeruginosa menggunakan pinset selama 20 menit. Diambil
lempeng KLT dari media menggunakan pinset. Media MH diinkubasi
selama 24 jam pada suhu 37°C dengan cawan dalam posisi terbalik.
Diamati ada atau tidaknya zona hambat yang terbentuk. Dihitung
nilai Rf bercak yang memiliki zona hambat dan dibandingkan dengan
nilai Rf bercak hasil KLT. Senyawa yang memiliki aktivitas
 9

antibakteri mempunyai Rf yang sama dengan zona hambat (Muhtadi

et al., 2012)

3.4. Teknik atau Model Analisis Data

3.4.1.Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol dan ekstrak etanol kulit
pisang ambon, tanduk, dan raja terhadap bakteri Pseudomonas
aeruginosa sensitif dan resisten ditunjukkan dengan nilai diameter
zona hambat (mm) 13
3.4.2.Uji Kualitatif dengan KLT
Analisis uji kualitatif dengan KLT dilakukan untuk mengetahui
senyawa yang terdapat dalam ekstrak etanol kulit pisang raja, ambon,
dan tanduk. Parameter yang digunakan pada KLT adalah harga Rf.
Reagen FeCl3 merupakan pereaksi khas yang digunakan untuk
deteksi senyawa fenolik. Warna abu-abu yang muncul pada sinar
tampak menunjukkan hasil positif mengandung senyawa fenolik
(Saifudin, 2014). Pereaksi sitroborat digunakan untuk mendeteksi
flavonoid, hasil positif apabila terjadi fluoresensi hijau, biru, kuning
maupun ungu pada UV366 (Wagner and Bladt, 1996). Pereaksi
anisaldehid-H2SO4 digunakan untuk mendeteksi senyawa golongan
terpenoid, hasil positif apabila ada bercak pada UV256 berwarna
biruviolet, merah, merah violet (Wagner and Bladt, 1996). Dan untuk
deteksi alkaloid dengan reagen Dragendorff didapatkan hasil yang
positif mengandung alkaloid jika berwarna coklat atau orange
kecoklatan (Wagner and Bladt, 1996). Pereaksi Liebermann-Burchard
digunakan untuk mengetahui senyawa steroid, hasil pengujian
dinyatakan positif jika terjadi fluoresensi kuning jika pada UV366.
3.4.3.Uji Tabung
Analisa kualitatif yang dilakukan dengan cara mengidentifikasi
suatu senyawa yang terdapat pada tanaman atau bagian tanaman
menggunakan pereaksi tertentu untuk mendapatkan senyawa bioaktif
yang diinginkan.
 10

BAB 4.BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

a. Anggaran Biaya
Tabel 4.1 Anggaran Biaya Kegiatan

Jenis Pengeluaran Biaya Jumlah

1 Peralatan penunjang Rp 3.029.000,00
2 Bahan habis pakai Rp 3.250.000,00
Perjalanan untuk pembelian bahan baku dan
3 Rp 396.000,00
peralatan
Dana sewa alat Rp 1.500.000,00
Lain-lain :
4 administrasi,publikasi,seminar,laporan, Rp 3.500.000,00
analisis data
JUMLAH Rp 11.675.000,00

b. Jadwal Kegiatan
Tabel 4.2 Jadwal Kegiatan
No Bulan 1 Bulan 2 Bulan 3 Bulan 4
Nama Kegiatan
. 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
1. Study Pustaka                                
Pengumpulan
2.
alat dan bahan                                
Pelaksanaan
3.
kegiatan                                
4. Evaluasi                                
Pembuatan
5.
Laporan                                
Pengumpulan
6.
laporan                                
 11

DAFTAR PUSTAKA

Adisasmito, A. W., Tumbelaka, A. R., 2006. Penggunaan Antibiotik Khususnya

pada Infeksi Bakteri Gram Negatif di ICU Anak RSAB Harapan Kita. Sari
Pediatri, 8(2), 127–134.
Anggraini R., Aliza D., and Mellisa S., 2016,Identifikasi Bakteri Aeromonas
hydrophila Dengan Uji Mikrobiologi Pada Ikan Lele Dumbo (Clarias
gariepinus) Yang Dibudidayakan Di Kecamatan Baitussalam Kabupaten
Aceh Besar,Jurnal Ilmiah Mahasiswa Kelautan dan Perikanan Unsyiah,
1(2),270-286, ISSN. 2527-6395.
Apriasari M.L., Fadhilah A., and Carabelly A.N., 2013, Aktivitas antibakteri
ekstrak metanol batang pisang mauli (Musa sp) terhadap Streptococcus
mutans, Dentofasial, 12 (3), 148-151.
Arifki H.H., and Barliana M.I., 2018, Karakteristik Dan Manfaat Tumbuhan
Pisang Di Indonesia,Farmaka, 16 (3), 196-203.
Chabuck Z.A.G., Al-Charrakh A.H., Nada Khazal Kadhim Hindi N.K.K., and
Hindi S.K.K, Antimicrobial Effect of Aqueous Banana Peel Extract,
Research Gate: Pharmaceutical Sciences, 1 (2013), 73-75
Departemen Mikrobiologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga,
2015, Buku ajar pemeriksaan mikrobiologi pada penyakit infeksi, Sagung
seto, Jakarta.
Ehiowemwenguan, G., Emoghene, A. O.’1and Inetianbor, J.E., 2014,
Antibacterial and phytochemical analysis of Banana fruit peel, IOSR
Journal Of Pharmacy, 4(8): 18-25
Fitriahani F.,2017, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 70% Limbah Kulit Pisang
(Musa acuminate x Musa balbisiana cv Candi) Terhadap Bakteri
Staphylococcus aureus Dan Escherichia coli, Skripsi, Jurusan Biologi
Fakultas Sains dan Teknoligi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik
Ibrahim, Malang.
Global Biodiversity Information Facility, 2018, Avicennia marina, Terdapat di:
https://www.gbif.org/species/2925403 [diakses pada 23 april 2019].
Husni I, 2009. Pengembangan Pisang Sebagai Bahan Pangan Pengganti
Karbohidrat Dalam Rangka Diversifikasi Pangan
Ida Ayu Raka Astiti Asih, Wiwik Susanah Rita, I Gusti Bagus Teguh Ananta, Ni
Kadek Dyan Mustika Sri Wahyuni , 2018, Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Kulit Pisang (Musa sp.) Terhadap Escherichiacoli dan Staphylococcus
aureus serta Identifikasi Golongan Senyawa Aktifnya. Cakra Kimia
(Indonesian E-Journal of Applied Chemistry), (6): 56-57
Indrawati S., Yuliet, and Ihwan, 2015,Efek Antidiabetes Ekstrak Air Kulit Buah
Pisang Ambon (Musa paradisiaca L.) Terhadap Mencit (Mus musculus)
MODEL Hiperglikemia,Galenika Journal of Pharmacy, 2 (1), 133 – 140.
 12

Irianto K., 2014, Bakteriologi Medis, Mikologi Medis, dan Virologi Medis
(Medical Bacteriology, Medical MIcoogy, and Medical Virology),
Alfabeta, Bandung.
Jawetz E. J. L., and Adelberg, E. A., 2001, Mikrobiologi Kedokteran, Edisi XXII,
Diterjemahkan oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas
Airlangga,Penerbit Salemba Medika, Jakarta.
Jawetz E., Melnick J., and Adelberg E. A. M, 2005, Jawetz, Mikrobiologi
Kedokteran, EGC, Jakarta.
Kurnianingtyas K., Djati M.S., and Rifa’I M., Aktivitas Imunomodulator
Polyscias obtusa Terhadap Sistem Imunitas Pada Bone Marrow Broiler
Setelah Pemberian Salmonella typhimurium, The Journal of Experimental
Life Science, 3 (1), 25-30
Laverty G, Gorman SP, Gilmore BF. Biomolecular mechanisms of Pseudomonas
aeruginosa and Escherichia coli biofilm formation. Pathogens.
2014;3(3):596-632. 2.
Mokbel, M.S. and Hashinaga, F., ,2005, Antibacterial and Antioxidant Activities
of Banana (Musa, AAA cv. Cavendish) Fruits Peel. American Journal of
Biochemistry and Biotechnology, 1(3): 125-131
.Rasamiravaka T, Labtani Q, Duez P, El Jaziri M. The formation of biofilms by
Pseudomonas aeruginosa: a review of the natural and synthetic compounds
interfering with control mechanisms. BioMed Research International.
2015;2015:759348.
Sitti Raudhotul Jami’ah, Mus Ifaya, Jastria Pusmarani, Eny Nurhikma, 2018, Uji
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Kulit Pisang Raja (Musa
Paradisiaca sapientum) Dengan Metode DPPH (2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil),
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, (4): 33-38

Sri Atun, Retno Arianingrum, Sri Handayani, Rudyansah, Mary Garson., 2007,
Identification And Antioxidant Activity Test of some compounds from
Methanol Extract Peel of Banana (Musa paradisiaca Linn.) Indo. J
.Chem., 20007, 7 (1), 83-87
Suyanti, Ahmad S, 2008, Pisang - Budidaya, Pengolah&Prospek Pasar (Rev) ,
Jakarta : Penebar Swadaya

Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan

 13

1.1 Peralatan Penunjang

Justifikasi Harga Satuan
Material Kuantitas Jumlah
Pemakaian (Rp)
Bejana maserasi Penyarian ekstrak 1 Rp875.000,00 Rp875.000,00
Timbangan 1
Rp150.000,00 Rp150.000,00
digital Alat ukur berat
Pisau Alat pemotong 10
Rp15.000,00 Rp150.000,00
daun
Ember sedang Wadah pencuci 5 Rp30.000,00 Rp150.000,00
Saringan Menyaring ekstrak 5 Rp25.000,00 Rp125.000,00
Cawan porselin Wadah saat 10
Rp30.000,00 Rp300.000,00
pengeringan zat
Corong Memasukkan 10
Rp60.000,00 Rp600.000,00
larutan dalam labu
Pipet tetes Mengambil dan 10
Rp3000,00 Rp30.000,00
penetesan
Batang 5
Rp8000,00 Rp40.000,00
pengaduk Mengaduk bahan
Pinset Menjepit 10 Rp10.000,00 Rp100.000,00
Oven Tempat 24 jam
pengeringan Kulit Rp1.000,00/jam Rp24.000, 00
Pisang
Erlenmayer Penampung 1 Rp85.000,00 Rp85.000,00
Kaca arloji Wadah ekstrak 1 Rp20.000,00 Rp20.000,00
Kertas Alas bahan yang 1 Pack
Rp20.000,00/100 Rp20.000,00
perkamen akan ditimbang
Gelas ukur Pengukur 2 Rp40.000,00 Rp80.000,00
Spatel Mengambil zat 2 Rp15.000,00 Rp30.000,00
Mortil dan Mengaduk dan 3
Rp50.000,00 Rp150.000,00
stamfer mencampur bahan
Wadah Tempat untuk kulit 25
Rp4.000,00 Rp100.000,00
pisang
Sub TOTAL (Rp) Rp 3.029.000,00

1.2 Bahan Habis Pakai

Justifikasi
Material Kuantitas Harga Satuan (Rp) Jumlah
Pemakaian
Pisang Ambon Bahan 12Kg
Rp20.000,00/1 Kg Rp240.000,00
Utama
Pisang Raja Bahan 12Kg
Rp20.000,00/1 Kg Rp240.000,00
Utama
Etanol 70% Bahan 3L Rp50.000,00/ 1 liter Rp150.000,00
 14

Utama
Etanol 96% Bahan 4L
Rp40.000,00/ 1 liter Rp160.000,00
Utama
Aquadest Bahan 10 L Rp7.000,00/ 1 liter Rp70.000,00
Kultur Bakteri Bahan Rp350.000,00 /
1 Kultur Rp350.000,00
P. aeruginosa Utama Kultur
Media MH Rp300.000/100g
100 gram Rp1.500.000/500gr
Media r
Media BHI analisis Rp290.000/100g
100 gram Rp1.450.000/500gr
r
Cakram Disk 400 buah Rp3.500/ 1 buah Rp1.400.000
Handgloves 1 box Rp50.000/ 1 box Rp50.000
Sub TOTAL (Rp) Rp3.250.000

1.3 Perjalanan
Harga
Kuantita
Material Justifikasi Pemakaian Satuan Jumlah
s
(Rp)
Perjalanan dari Rp10.000,0
Pembelian peralatan 2 Motor Rp20.000,00
ums ke pasar kleco 0
Perjalanan dari Rp20.000,0
Pembelian bahan baku 2 Motor Rp40.000,00
ums ke pasar gede 0
Perjalanan dari
Pembelian wadah Rp20.000,0
ums ke pasar 2 Motor Rp40.000,00
pembuatan 0
Kabangan
Ongkos kirim
(kurir) pengiriman Pembelian bahan dan alat Rp27.000,0 Rp108.000,0
4 Kali
peralatan dan via online 0 0
barang
Rp396.000,0
Sub Total
0

1.4 Estimasi dana sewa alat

Alat Harga satuan Kuantitas Total harga)

Inkubator bakteri Rp. 2000,00/ hari 1 minggu Rp14.000,00

Inkubator shaker Rp. 15.000,00/ hari 2 hari Rp30.000,00

Autoklaf Rp. 7.500,00/ 1 kali 10 kali Rp 75.000,00
 15

LAF Rp. 2000,00/ 1 kali 20 kali Rp 200.000,00

Waterbath Rp. 1.000,00 / 1 jam 8 hari Rp 179.000,00
Rotary evaporator Rp. 2.000,00/ 1 jam 10 jam Rp 20.000,00
Lemari pengering Rp 1.000,00/ 1 jam 10 hari Rp 240.000,00
Sonikator Rp. 2.000,00/ 1 jam 3 jam Rp. 6.000,00
Plat KLT Rp. 300.000,00/ 2 plat 3 plat Rp. 450.000,00
Spiritus Rp. 30.000,00/ 1 liter 2,5 L Rp. 90.000,00
Rp. 75.000,00/ 500
Blue tips 500 pcs Rp. 75.000,00
pcs
Rp. 63.000,00/ 1000
Yellow tips 1000 pcs Rp. 63.000,00
pcs
Rp. 230.000,00/ 500
White tips 500 pcs Rp. 230.000,00
pcs
Rp. 78.000,00/ 500
ependof 500 pcs Rp. 78.000,00
pcs
Sub Total Rp. 1.500.000,00

1.5 Biaya analisis

Material Kuantitas Justifikasi Harga satuan Jumlah

pemakaian (Rp) (Rp)

Publikasi 1 Jurnal 1.000.000 1.000.000

ilmiah
Pembuatan 1 Poster 500.000 500.000
poster
Seminar 3 Orang 400.000 1.200.000
nasional
Dokumentasi 1 Paket 200.000 200.000

Analisis data 1 Paket 600.000 600.000

Sub Total Rp. 3.500.000

 16

Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Kegiatan dan Pembagian Tugas

Program Bidang Alokasi Waktu

No. Nama/NIM Uraian Tugas
Studi Ilmu (Jam/Minggu)
Penanggung jawab
pelaksanaan
Mohammad Farid
penelitian,
1. Alfaridzi Farmasi Farmasi 30 jam/minggu
penanggung jawab
(K100170103)
bagian uji sensitivitas
bakteri.
Penangung jawab
Mantiqa Syafa pengadaan alat, dan
2. Duvadillan Gusrin Farmasi Farmasi 30 jam/minggu bahan, penanggung
(K100170120) jawab pelaksanaan
uji tabung.
Penanggung jawab
pengadaan dana, dan
pengadaan proposal
Tiara Septiani kegiatan,
3. Farmasi Farmasi 30 jam/minggu
(K100180043) penanggung jawab
pelaksanaan uji
kualitatif dengan
KLT.
 17

Lampiran 1. Biodata ketua; Anggota dan Dosen Pembimbing

Biodata Ketua Pelaksana

A. Identitas Diri
1 Nama Lengkap Mohammad Farid Alfaridzi
2 Jenis Kelamin Laki-laki
3 program studi Farmasi
4 NIM K100170103
5 Tempat dan Tanggal Lahir Kudus, 10 April 1999
6 E-mail m.faridalfaridzi103@gmail.com
7 Nomor Telepon / HP 081226803097

B. Riwayat Pendidikan
Gelar Akademik SD SMP SMA
SD 3 Piji dawe SMP 1 Bae SMA 1 Bae
Nama Institusi
Kudus Kudus Kudus
Tahun Masuk-Lulus 2004-2010 2010-2013 2013-2016

Semua data yang diisikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
di pertanggung jawabkan secara hukum. apabila di kemudian hari ternyata
dijumpai ketidaksesuaian, saya sanggup menerima sanksi. demikian biodata ini
saya buat dengan sebenar-benarnya untuk mematuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan PKM penelitian.

Surakarta, 31 Oktober 2019

Pengusul

Mohammad Farid Alfaridzi

NIM. K100170103
 18

Biodata Anggota 1

A. Identitas Diri
1 Nama Lengkap Mantiqa Syafa Duvadillan Gusrin
2 Jenis Kelamin Perempuan
3 program studi Farmasi
4 NIM K100170120
5 Tempat dan Tanggal Lahir Klaten, 01 Maret 2000
6 E-mail duvadilan.gusrin@gmail.com
7 Nomor Telepon / HP 082138683919

B. Riwayat Pendidikan
Gelar Akademik SD SMP SMA
MI Negeri SMP Negeri 2 SMA Negeri 1
Nama Institusi
Karanganom Klaten Klaten
Tahun Masuk-Lulus 2005-2011 2011-2014 2014-2017

Semua data yang diisikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
di pertanggung jawabkan secara hukum. apabila di kemudian hariternyata
dijumpai ketidaksesuaian, saya sanggup menerima sanksi. demikian biodata ini
saya buat dengan sebenar-benarnya untuk mematuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan PKM penelitian.

Surakarta, 31 Oktober 2019

Pengusul

Mantiqa Syafa Duvadilan Gusrin

NIM. K100170120

Biodata Anggota 2
 19

A.Identitas diri
1 Nama Lengkap Tiara Septiani
2 Jenis Kelamin Perempuan
3 program studi Farmasi
4 NIM K100180043
5 Tempat dan Tanggal Lahir Pemalang, 11 September 2000
6 E-mail tiaraseptiani052@gmail.com
7 Nomor Telepon / HP 082325023056

B. Riwayat Pendidikan
Gelar Akademik SD SMP SMA
SDN 1 SMPN 1
Nama Institusi SMA N 1 Comal
Banglarangan Ampelgading
Tahun Masuk-Lulus 2006-2012 2012-2015 2015-2018

Semua data yang diisikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar dan dapat
di pertanggung jawabkan secara hukum. apabila di kemudian hariternyata
dijumpai ketidaksesuaian, saya sanggup menerima sanksi. demikian biodata ini
saya buat dengan sebenar-benarnya untuk mematuhi salah satu persyaratan dalam
pengajuan PKM penelitian.

Surakarta, 31 Oktober 2019

Pengusul

Tiara Septiani
NIM. K100180043

BIODATA DOSEN PENDAMPING

A. IdentitasDiri
 20

Nama Lengkap (dengan Ika Trisharyanti Dian K., Apt.,

1
gelar) M.Farm.
2 Jenis Kelamin Perempuan
3 Program Studi Fakultas Farmasi
4 NIDN 0619037901
5 Tempat dan Tanggal Lahir Surakarta, 19 Maret 1979
6 E-mail Ika.Trisharyanti@ums.ac.id
7 Nomor Telepon/HP 08562831640
Riwayat
Sarjana S2/Magister S3
Pendidikan
-
Nama Universitas Gadjah Universitas
Institusi Mada Airlangga
-
Jurusan Farmasi Farmasi

Tahun -
1996-2001 2006-2009
Masuk-Lulus

B. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

Nama Pertemuan
Judul Artikel Ilmiah Waktu dan Tempat
Ilmiah/Seminar
Skrining antibakteri ekstrak
Pokjanas TOI 53 etanol kulit buah pisang dan
Malang, 11-12 Oktober 2017
(FK UNISMA) jeruk terhadap Salmonella
typhi resisten kloramfenikol

2ndAnnual Skrining aktivitas antibakteri

Pharmacy ekstrak etanol daun terhadap
Solo, 10 September 2017
Conference (FF salmonella typhi resisten
UNS) kloramfenikol

C. Penghargaan dalam 10 tahun Terakhir (dari pemerintah, asosiasi atau

institusilainnya)
Institusi Pemberi
No. Jenis Penghargaan Tahun
Penghargaan
1 - - -

Semua data yang saya isikan dan tercantum dalam biodata ini adalah benar
dan dapat dipertanggungjawabkan secara hukum. Apabila dikemudian hari
ternyata dijumpai ketidaksesuaian dengan kenyataan, saya sanggup menerima
 21

sanksi. Demikian biodata ini saya buat dengan sebenarnya untuk memenuhi
persyaratan dalam pengajuan Hibah PKM-P 2019.

Surakarta, 3 Oktober 2019

Pendamping,

Ika Trisharyanti D.K.

NIDN. 0619037901

Lampiran 2.
 22

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

Jl. Ahmad Yani Tromol Pos 1, Pabelan Kartasura, Surakarta
57102 Telp (0271)-717417

SURAT PERNYATAAN KETUA PENELITI

Yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Mohammad Farid Alfaridzi

NIM : K100170103
Program Studi : Farmasi
Fakultas : Farmasi

Dengan ini menyatakan bahwa proposal PKM Penelitian saya dengan judul
KATALIS JAMBON “AKTIVITAS ANTIBAKTERI KOMBINASI
EKSTRAK ETANOL KULIT PISANG RAJA (Musa acuminate x
Balbisiana), AMBON (Musa paradisiaca Var.) TERHADAP BAKTERI
Pseudomonas aeruginosa” yang diusulkan untuk tahun anggaran 2019/2020
bersifat original dan belum pernah dibiayai oleh lembaga atau sumber dana lain.
Bilamana dikemudian hari ditemukan ketidaksesuaian dengan pernyataan
ini, maka saya bersedia dituntut dan diproses sesuai dengan ketentuan yang
berlaku dan mengembalikan seluruh biaya penelitian yang sudah diterima ke kas
negara.
Demikian pernyataan ini dibuat dengan sesungguhnya dan dengan sebenar-
benarnya.

Surakarta, 31 Oktober 2019

Mengetahui
Wakil Dekan Bidang Akademik dan Ketua Pelaksana
Kemahasiswaan Fakultas Famasi UMS

(Erindyah Retno Wikantyasning, Ph.D., Apt) (Mohammad Farid Alfaridzi)

NIK. 0613027401 NIM. K100170103