Topik 3

Teknik Aseptik Dalam Kultur Sel Hewan

1. Tujuan Praktikum :
Mengetahui teknik aseptis dalam kultur sel hewan dan preparasi media untuk kultur sel
hewan
2. Dasar Teori
Teknik aseptik adalah merupakan salah satu penentu keberhasilan kultur sel hewan.
Teknik ini bertujuan untuk menghindari kontaminasi mikroorganisme yang ada di dalam
lingkungan ke dalam lingkungan dimana sel ditumbuhkan. Penggunaan antibiotik tidak
selalu dapat mengatasi masalah kontaminasi, karena banyaknya sumber kontaminan yang
berasal dari lingkungan luar kultur, misalnya pekerja, udara dan alat-alat yang
terkontaminasi oleh mikroorganisme.
Ketika sel diambil dari jaringan atau organ asalnya, maka harus ditempatkan pada
medium yang menyediakan komponen-komponen utama yang dapat mendukung
pertumbuhannya. Medium kultur sel merupakan bahan yang sangat peka terhadap
perubahan fisik, kima dan kontaminasi, sehingga perlu mendapat perhatian dalam
mensterilkannya. Salah satu cara yang digunakan untuk mensterilkan medium adalah
dengan cara filtrasi menggunakan milipore filter berdiameter pori 0,22 µm.
3. Cara Kerja
a. Dengan bantuan video yang telah diunggah di google classroom:
1) perhatikan cara bekerja secara aseptis di dalam kultur sel hewan
2) perhatikan tahapan dalam sterilisasi media untuk kultur sel hewan
b. Tuliskan tahapan-tahapan dalam menerapkan teksik aseptis pada kultur sel hewan
c. Tuliskan tahapan-tahapan dalam menyiapkan media untuk kukltur sel hewan
 LEMBAR PENGAMATAN PRAKTIKUM

Nama/NIM
Tanggal Praktikum
Topik Praktikum
HASIL PRAKTIKUM
 Topik 4
Isolasi Sel untuk Kultur Primer

1. Tujuan Praktikum :
Mengetahui cara menyiapkan sel untuk kultur primer
2. Dasar Teori
Kultur sel merupakan proses saat sel hidup ditempatkan ke dalam suatu media yang
dapat membantu sel tersebut berkembang biak secara in vitro. Kultur sel dapat berupa
kultur sel primer maupun cell line. Kultur sel primer merupakan kultur yang dimulai
dari sel, jaringan atau organ yang diperoleh langsung dari organisme asalnya,
sedangkan cell line ialah kultur yang diperoleh dari subkultur pertama dari kultur
primer. Untuk mempersiapkan organ, jaringan atau sel yang akan dikultur, organ
harus steril dan secepatnya dikerjakan untuk menjadi suspensi sel. Secara umum ada 3
metode isolasi sel yaitu metode mekanis, metode kimiawi dan metode enzimatis.
3. Cara Kerja
a. Dengan bantuan video yang telah diunggah di google classroom:
1) perhatikan cara isolasi sel PBM (Peripheral Blood Mononuclear)
2) perhatikan tahapan isolasi myocyte organ jantung fetus ayam
b. Tuliskan tahapan-tahapan dalam isoslai sel PBM
c. Tuliskan tahapan-tahapan dalam isolasi myocyte organ jantung fetus ayam,
sampai tahapan sel-sel tersebut dikulturkan.
 LEMBAR PENGAMATAN PRAKTIKUM

Nama/NIM
Tanggal Praktikum
Topik Praktikum
HASIL PRAKTIKUM
DAFTAR PUSTAKA

Freshney RI. 2011. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique. Tenth Edition,
John Wiley & Sons, Inc.

Mitry and Hughes. 2012. Human Cell Culture Protocols. Third Edition, Humana Press.
London

https://www.youtube.com/watch?v=nr1tV_LuqJk&ab_channel=ThermoFisherScientific

https://www.youtube.com/watch?v=RuRgCRASzpo&ab_channel=Abnova

https://www.youtube.com/watch?v=CPPxCr5DQr4&ab_channel=Abnova

https://www.youtube.com/watch?v=Ee3hu4PoBVs&ab_channel=Abnova