Pereaksi untuk senyawa steroid

1. Pereaksi Lieberman – Burchard (menurut hidayah et al, 2016) untuk

steroid, perubahan warna menjadi biru kehijauan menunjukkan adanya
steroid.

Pereaksi Salkowski menggunakan beberapa mg zat dalam 2-3 ml kloroform

ditambahkan 3-5 ml asam sulfat pekat, lapisan kloroform berwarna merah.

2. Pembuatan
p-anisaldehida / asam sulfat
untuk deteksi fenol, steroid dan terpen.
Larutkan 0,5 ml p-anisaldehida dalam campuran 50 ml asam asetat glasial
dan 1 ml asam sulfat pekat.
Gunakan larutan baru untuk menyemprot plat. Panaskan pada suhu 105
derajat celcius sampai terlihat spot. Semprotan uap air bisa membuat latar
belakang plat lebih terang sehingga spot lebih terlihat.
Hasil yang terlihat spot berwarna ungu, biru, merah, abu-abu atau hijau.

Antimon (III) Klorida

Untuk deteksi terpen, steroid, steroid glukosida.
Semprot plat dengan larutan jenuh dari 25 gram antimon (III) klorida dalam
kloroform, panaskan pada suhu 100 derajat celcius selama 10 menit, lakukan
pengamatan pada panjang gelombang 360 nm.

Timah (IV) Klorida

Untuk deteksi triterpen, sterol, steroid, fenol, dan polifenol.
Larutkan 10 ml timah (IV) klorida ke dalam campuran 80 ml kloroform dan 80
ml asam asetat glasial. Gunakan larutan ini untuk menyemprot plat. Panaskan
pada suhu 100 derajat celcius selama 5-10 menit. Dan periksa dengan sinar
UV pada panjang gelombang tampak dan besar.

Vanilin / asam sulfat

Untuk deteksi steroid.
Larutkan 1 gram vanilin dalam 100 ml asam sulfat pekat. Gunakan untuk
menyemprot plat. Keringkan pada suhu 120 derajat celcius sampai berbentuk
warna secara maksimal.
Formulasi yang lain adalah 0,5 gram vanilin dalam campuran 80 ml asam
sulfat dan 20 ml etanol.
Reagen ini hanya dapat digunakan untuk KLT berbahan gipsum dengan alas
kaca.

Asam Fosfat
Untuk deteksi sterol, steroid.
Campurkan 50 ml asam fosfat pekat dengan 50 ml aquades. Semprot plat
dengan larutan tersebut sampai lapisan terlihat transparan. Kemudian
panaskan pada suhu 10 derajat celcius selama 10-15 menit.
 Asam Trifluoroasetat
Untuk deteksi steroid.
Larutkan 1 gram asam trifluoroasetat dalam 100 ml kloroform. Semprot plat
dengan larutan tersebut, kemudian panaskan pada suhu 120 derajat celcius
selama 5 menit.

3. Cara Uji
Cerium (IV) Sulfate / Asam Sulfat
Untuk alkaloid steroid dan steroid solanum sapogenin. Larutkan semprot:
larutan jenuh cerium (IV) sulfat dalam asam sulfat 65% setelah perawatan:
panaskan 15 menit pada 120 derajat celcius. Catatan: tidak berlaku untuk
lapisan aluminium oksida.

Antimony (V) Chloride

Untuk vitamin A, D, dan E, terpene, minyak, resin, steroid sapogenin. Larutan
semprot: campur segera sebelum menggunakan 1 bagian antimon (V) klorida
dengan 4 bagian karbon tetraklorida atau kloroform. Setelah perawatan:
panaskan kromatogram hingga muncul bintik-bintik. Periksa dalam sinar UV
gelombang panjang.

Anisaldehyde / Asam Sulfat

Untuk gula, steroid, terpene.
Larutkan semprot: siapkan segera sebelum menggunakan larutan 0,5 ml
anisaldehida dalam 50 ml asam asetat glasial dan 1 ml asam sulfat 97%.
Setelah perawatan: panaskan hingga 100-105 derajat celcius hingga
visualisasi maksimal bintik-bintik. Itu latar belakang bisa menjadi cerah
dengan uap air. Konstituen lichen, fenol, terpene, gula dan steroid berubah
menjadi ungu, biru, merah, abu-abu dan hijau. Solusi visualisasi gula, campur
sebelum menggunakan 0,5 ml asam sulfat 97% dan 0,1 ml asam asetat.
Setelah perawatan: panaskan kromatogram yang disemprotkan 5-10 menit
pada jam 9.

Mercury (II) Chloride / Potassium iodide

Untuk steroid alkaloid (Reagen Meyer). PC. Larutan semprotan I: larutkan
13,55 g merkuri (II) klorida dan 49,8 g kalium iodida secara terpisah masing-
masing dalam 20 ml air. Campur kedua larutan dan isi dengan air 11.
Sebelum penyemprotan tambahkan 1 bagian asam hidroklorat 17% ke 10
bagian larutan ini. Larutan semprotan II: larutkan 5 g seng klorida dalam 80 ml
air dan tambahkan 15 ml 36% asam hidroklorik. Larutan semprot III: larutan
amonia 15%. Prosedur: setelah disemprotkan dengan I, alkaloid steroid
tampak kuning pudar bintik-bintik. Bilas kromatogram 10 menit dengan air
dan, setelah pengangkatan air, semprotkan dengan II dan selanjutnya dengan
III. Catatan: bintik-bintik coklat tua yang dihasilkan tidak stabil untuk prolo.
 DAFTAR PUSTAKA

Auterhoff & Kovar (2002). Identifikasi obat.

Julianto, Tatang Shabur (2019). Fitokimia Tinjauan Metabolit Sekunder dan

Skrinning Fitokimia.

R. Tschesche, R. Petersen, Chem. Ber. 87, 269 (1953).

Chemicals:
Mercury (II) chloride sublimed GR ACS, Ord. No. 1.04419
Potassium iodide GR ISO, Ord. No. 1.05043
Hydrochloric acid fuming 37% GR ISO, Ord. No. 1.00317
Zinc chloride GR ACS, Ord. No. 1.08816
Ammonia solution 25% GR, Ord. No. 105432