Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

1702KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

PANGAN PENCEMAR BIOLOGIS

Perbandingan Metode Compact Dry TC dengan Standar

Metode Tuang Piring (Metode Resmi AOAC 966.23) untuk
Menentukan Jumlah Koloni Aerobik dalam Sampel Makanan
Metode Teruji KinerjaSM

Abstrak 2 Peserta

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Compact Dry TC memenuhi syarat sebagai kit metode cepat METODEAPENULIS:
untuk menentukan jumlah koloni aerobik dalam makanan. Pelat HIDEMASAKODAKA, SHINGOMIZUOCHI, HAJIMETERAMURA, dan
disterilisasi dan mengandung media kultur dan zat pembentuk gel TADANOBUNIRAZUKA
yang larut dalam dingin. Media direhidrasi dengan menginokulasi 1 Nissui Pharmaceutical Co. Ltd., 1075-2, Hokunanmoro,
mL sampel yang diencerkan ke tengah media yang dapat menyebar Yuki, Ibaraki 307-0036, Jepang
sendiri dan membiarkan larutan berdifusi melalui aksi kapiler. Piring
kemudian dapat diinkubasi dan koloni dihitung tanpa langkah SPENGIRIMANLABORATORIUM:
tambahan. Metode Compact Dry TC divalidasi dengan 5 daging Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., 3-23-9, Ueno, Taito-ku,
mentah yang berbeda. Tes kinerja dilakukan pada 35- dan 30-C. Tokyo 110-8736, Jepang
Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada perbedaan
nyata yang diamati antara metode Compact Dry TC dan metode SayaTERGANTUNGLABORATORIUM:
Pelat Tuang Standar (Metode Resmi AOAC966.23) untuk deteksi Layanan Kesehatan Masyarakat Nasional untuk Wales, Laboratorium

tingkat mikroorganisme aerobik. Untuk klaim akurasi (n=60), sebuah Kesehatan Masyarakat, Rumah Sakit Llandough, Penlan Rd, Penarth, Inggris

korelasi Raya

faktor dari r2 35= 0,9977 (35-C) dan r2 30= 0,9932 (30-C) bisa jadi
3 Pendahuluan
ditugaskan, sebagaimana tercantum dalam aplikasi untuk “Metode Uji Kinerja.
Studi konsistensi kualitas dan ketahanan penyimpanan, menunjukkan tidak
3.1 Prinsip
SM

ada variasi yang signifikan dalam hasil jumlah pelat dengan lot produksi yang
berbeda atau pelat dengan usia penyimpanan yang beragam.
1 Lingkup
Pelat penghitung prefabrikasi untuk indikasi jumlah sel
mikroba aerobik dalam bahan baku makanan, produk, dan
matriks terkait.
1.1 Organisme Sasaran
Sel mikroba aerobik.
1.2 Matriks
Daging mentah.
1.3 Ringkasan Klaim Kinerja yang Divalidasi
Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada
perbedaan nyata yang diamati antara metode Compact
Dry TC dan metode Pelat Tuang Standar (Metode Resmi
AOAC966.23) untuk deteksi tingkat mikroorganisme
aerobik.
Diterima 7 April 2005. Diterima oleh AH 17 Mei 2005. Email
penulis yang sesuai: h-kodaka@yki.nissui-pharm.jp.
Metode pengujian adalah unit jumlah piring yang memfasilitasi
penentuan cepat beban bakteri aerobik dalam daging mentah.
3.2 Informasi Umum
Estimasi jumlah bakteri aerobik total (unit pembentuk koloni; CFU)
adalah praktik yang digunakan secara luas untuk mengukur kesegaran
dan status higienis makanan dan produk terkait serta lingkungan
produksi, yang diatur dalam beberapa undang-undang pangan nasional.
Makanan segar secara alami mengandung mikroorganisme yang
berbeda kecuali produk tersebut disterilkan, dipasteurisasi, atau
diperlakukan dengan pengawet. Selama penyimpanan, sel bakteri dapat
membelah dan meningkatkan jumlah sel yang layak dalam makanan.
Penting untuk menentukan jumlah muatan sel maksimum tertentu untuk
makanan, pakan, bahan mentah, dan lingkungan produksi, yang dapat
dipantau dengan metode penghitungan pelat spektrum luas. Kami telah
mengembangkan Compact Dry TC yang memenuhi syarat sebagai kit
metode cepat untuk menentukan jumlah koloni aerobik dalam makanan.
Meskipun ada kit metode cepat lainnya di pasaran, mereka menderita
berbagai kerugian. Oleh karena itu, pemikiran awal telah dimasukkan ke
dalam desain Compact Dry TC untuk mengatasi kelemahan kit komersial
yang ada.
Pelat disterilisasi dan mengandung media kultur dan zat
pembentuk gel yang larut dalam dingin. Media direhidrasi dengan
menginokulasi 1 mL sampel encer yang diinokulasikan ke tengah
media yang dapat menyebar sendiri dan membiarkan larutan
berdifusi melalui aksi kapiler. Pelat kemudian dapat diinkubasi dan
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051703
koloni dihitung tanpa langkah tambahan. Piring dapat
ditumpuk, ramping, dan lebih kecil dari cawan Petri standar.
Sifat media yang kering dan steril memberikan umur simpan
yang lama untuk pelat. Pelat media Compact Dry TC diklaim
sebagai alat analisis untuk menunjukkan CFU dari berbagai
daging mentah. Oleh karena itu, metode tersebut divalidasi
dengan 5 daging mentah yang berbeda.
3.3 Ringkasan Hasil
Laporan ini menjelaskan pengujian ulang Compact Dry TC menurut
protokol AOAC Research Institute (RI) pada tanggal 6 Agustus 2003,
untuk matriks daging mentah yang tereduksi. Sebagian besar laporan
dan data asli yang dikeluarkan pada tanggal 19 Desember 2002 adalah
valid.
Pelat media Compact Dry TC diklaim sebagai alat analisis
untuk menunjukkan CFU dari berbagai daging mentah. Oleh
karena itu, metode tersebut divalidasi dengan 5 daging
mentah yang berbeda. Untuk Compact Dry TC, dan metode
standar, 35-C adalah suhu yang direkomendasikan,
sedangkan 30-C adalah suhu yang lebih umum digunakan
untuk pengujian jumlah total di Komunitas Eropa (1). Tes
kinerja dilakukan pada 35-C serta 30-C.
Dalam semua studi kinerja yang diperlukan, tidak ada
perbedaan nyata yang diamati antara metode Compact
Dry TC dan metode Pelat Tuang Standar (Metode Resmi
AOAC966.23) untuk deteksi tingkat mikroorganisme
aerobik. Untuk klaim akurasi, korelasi dari 2 metode
enumerasi diselidiki. Untuk semua yang dikumpulkan
contoh data (n=60), faktor korelasi r2 35 = 0,9977
(35-C) dan r2 = 0,9932 (30-C) dapat ditetapkan, seperti yang dinyatakan dalam
30
aplikasi untuk "Metode Uji Kinerja"SM.” Konsistensi kualitas dan
ketahanan penyimpanan pelat film dehidrasi ditunjukkan
menggunakan matriks makanan yang diklaim. Tidak ada variasi
signifikan dalam hasil jumlah pelat yang diamati dengan lot
produksi yang berbeda atau pelat dengan usia penyimpanan yang
berbeda (tanggal kedaluwarsa setelah 2, 12, dan 15 bulan, dan satu
sudah 22 bulan melewati tanggal kedaluwarsa). Pelat Compact Dry
TC dapat digunakan untuk jumlah bakteri aerob total untuk
spektrum luas daging mentah, namun, karena fisiologi mikroba,
parameter inkubasi optimal yang direkomendasikan dari suhu tetap
dan periode 48 jam harus dijaga konstan. Volume inokulasi yang
menyimpang sebesar -20% dapat ditoleransi jika hasilnya
dinormalisasi menjadi 1,0 mL untuk perhitungan.
4 Bahan dan Metode
4.1 Informasi Test Kit
(4.1.1)Nama perangkat.—Kompak Kering TC.
(4.1.2)Kucing. Tidak.—Nissui 06740 (40 piring), 06741 (240
piring); HyServe 1 000 166 (40 piring), 1 000 167 (240
piring), 1 002 877 (880 piring).
(4.1.3)Meminta informasi.—Nissui Pharmaeutical
Co., Ltd., 3-23-9, Ueno, Taito-ku, Tokyo 110-8736, Jepang,
Telp: +81 (0) 3-5846-5611, Faks: +81 (0) 3-5846-5619 ;
HyServe, Seeshaupter Str. 27, 82393 Iffeldorf, Jerman, Telp:
+ 49 (0) 8856 8020588, Faks: +49 (0) 8856 8020339.
(4.1.4)Reagen satu.—Pelat Compact Dry TC adalah a
media nonselektif yang terdiri dari nutrisi kompleks seperti
ekstrak ragi, pepton, dan glukosa, dan buffer fosfat dan
dilengkapi dengan magnesium klorida. Medium dilengkapi
dengan indikator redoks 2,3,5-trifenil-tetrazolium-klorida (TTC).
Media dipadatkan oleh polisakarida alga dan dikeringkan
dalam struktur jaring.
4.2 Perlengkapan dan Reagen Tambahan
(4.2.1)Penyangga pengenceran.—Karena maksimal
250 koloni dapat diselesaikan dan dihitung pada satu piring
Compact Dry TC dan beberapa matriks makanan dapat
menampung hingga 108CFU/g, (desimal-) pengenceran bahan
Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022
sampel diperlukan.
Untuk tujuan ini, buffer pengenceran steril seperti larutan
Butterfield, phosphate-buffered saline (PBS), air pepton, atau
larutan Ringer dapat diterapkan. Rak yang telah disterilkan
yang diisi dengan buffer pengenceran dan pembuka khusus
juga dapat dibeli di pemasok Compact Dry TC: Dilution Rack,
Cat. No. Nissui, 01550; HyServe, 1 000 888; Pembuka, Kucing.
No. Nissui, 06737; HyServe, 1 000 887.
(4.2.2)Penyeka permukaan.—Untuk menguji permukaan (makanan,
pakan, dll.) lingkungan produksi, sistem swab steril dapat
digunakan. Usap kering ditempatkan dalam wadah sekali pakai.
Setelah pengambilan sampel, swab dibilas dalam PBS yang
disimpan dalam perangkat dan suspensi dapat diterapkan (sudah
dengan volume yang tepat) ke pelat Compact Dry TC.
Aksesori ini juga dapat dibeli di pemasok Compact Dry TC:
Swab for Compact Dry TC, Cat. No. Nissui, 06738 (200 tabung);
HyServe, 1 002 953 (40 tabung), 1 002 952 (240 tabung).
4.3 Aparatur
Inkubator.—Satu-satunya peralatan yang diperlukan untuk
metode pengujian jumlah pelat dengan Compact Dry TC adalah
inkubator. Peralatan yang tersedia secara komersial yang
menjaga suhu yang dapat diatur -1-C dari suhu target (30-–35-C)
dapat diterapkan.
4.4 Bahan Referensi Standar
Compact Dry TC diuji dengan 67 galur ATCC Gram-
positif dan -negatif yang berbeda dan hasilnya
ditunjukkan dalam brosur produk. Produk ini memiliki
spesifikasi kinerja dengan jenis berikut:Bacillus subtilis
ATCC 6633; Escherichia coliATCC 8739;Klebsiella
pneumoniaeATCC 13883;Pseudomonas aeruginosaATCC
9027; dan Stafilokokus aureusATCC6538.
Pertumbuhan yang baik harus diamati setelah inkubasi pada 35-C
selama 44-48 jam.
4.5 Solusi Standar
Tidak ada.
4.6 Persiapan Umum
Tidak ada.
1704KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

4.7 Persiapan Sampel dokter. Manipulasi dengan mikroorganisme selalu melibatkan

risiko tertentu dari infeksi yang didapat di laboratorium.
Sampel untuk inokulasi harus disiapkan mengikuti
Manipulasi harus dilakukan di bawah pengawasan spesialis
standar nasional dan internasional khusus untuk teknik
kunci bersama dengan langkah-langkah perlindungan
pencacahan, misalnya ISO 7218: Mikrobiologi—Pedoman
biohazard. Setiap peralatan laboratorium dan media yang
umum untuk pemeriksaan mikrobiologi; ISO 6887:
menyentuh spesimen harus dianggap menular.
Mikrobiologi—Panduan umum untuk persiapan
pengenceran untuk pemeriksaan mikroba.
5.2 Tindakan Pencegahan untuk Pembuangan Limbah
Sampel yang diproses untuk uji penyaringan dan pemeriksaan
lainnya harus diambil sesteril mungkin, dihancurkan dalam cairan
Setiap media, reagen, dan bahan harus disterilkan secara kimia atau
pengenceran steril dan diencerkan dalam larutan standar seperti
dengan autoklaf setelah digunakan, dan kemudian dibuang sebagai
pengencer fosfat buffer Butterfield, PBS, air pepton, atau larutan
limbah industri sesuai dengan peraturan nasional tentang pembuangan
Ringer.
limbah laboratorium.
Pengencer fosfat buffered Butterfield.—KH2PO4,

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

34,0 gram; 1,0M NaOH, kira-kira 175 mL; pH, 7,2; pengenceran untuk digunakan, stok
1,25 mL - 1 LH2HAItujuan; pengenceran autoklaf. 6 Ringkasan Hasil
PBS.—NaCl, 9,0 g/L; NaHPO4, 0,0785 g/L; KH2PO4,
0,0127 g/L; pH, 6,8–7,3; autoklaf. Studi validasi internal dilakukan di laboratorium
air pepton.—Kasein pepton, 0,1%; NaCl, 0,85%; pH, Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.
6.9–7.1; autoklaf.
Solusi dering.—NaCl, 9,0 g/L; KCl, 0,42 g/L; CaCl2, 0,24 g/L; NaHCO3,
6.1 Studi Perbandingan
0,20 g/L; pengenceran untuk digunakan, 1:4 dengan H2HAItujuan;
pengenceran autoklaf.
Studi perbandingan dilakukan sesuai dengan protokol AOAC RI pada
Prosedur persiapan sampel untuk tes ulang ini sepenuhnya
tanggal 6 Agustus 2003, untuk 4 jenis daging mentah yang umum di Jepang:
mengikuti Metode Resmi AOAC966.23.
daging babi giling mentah, babi mentah, domba mentah, dan daging sapi

4.8 Analisis mentah. Metode referensi adalah Metode Resmi AOAC966.23 menggunakan
agar-agar metode standar dengan pelat tuang.
(4.8.1)Inokulasi pelat TC Kering Kompak.-Menghapus
(6.1.1)Metodologi.—Prosedur persiapan sampel
tutup dari pelat dan sebarkan 1 mL spesimen di tengah pelat
sepenuhnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23. Siapkan sampel
Compact Dry TC. Cairan termasuk bakteri berdifusi secara otomatis
dengan menggunakan blender Cell Master CM-100 (AZ One Corp.,
dan merata di atas lembaran (total media 20 cm2) untuk mengubah
Nishiku, Osaka, Jepang). Timbang 50 g sampel uji ke dalam tabung
lembaran kering menjadi gel dalam hitungan detik.
blender berkecepatan tinggi yang steril. Tambahkan 450 mL pengencer
Pasang kembali tutup pada pelat, dan catat informasi yang
buffer fosfat Butterfield steril, dan campurkan selama 2 menit.
diperlukan pada bagian memorandum. Tempatkan piring tertutup
Karena tingkat kontaminasi bakteri pada daging sapi
di inkubator.
mentah cukup rendah (mendekati 0 CFU/g),E. coliuntuk ATCC
(4.8.2)Inkubasi dari kompak Kering TC
11775 sebagai bakteri perwakilan dibubuhi tingkat kontaminasi
piring.—Waktu inkubasi dan suhu yang direkomendasikan adalah
bakteri sekitar 102, 104, atau 106CFU/g, dan didinginkan selama
48 jam; 35-C. Kondisi inkubasi lain (misalnya, 30-C) juga
3 hari sebelum pengujian. Untuk daging babi giling mentah,
memungkinkan dan dapat diadopsi ke dalam peraturan analisis
babi mentah, dan domba mentah, siapkan sampel dengan
pangan nasional.
tingkat kontaminasi rendah dan tinggi. Untuk prosedur lainnya,
4.9 Interpretasi dan Laporan Hasil Tes ikuti Metode Resmi AOAC966.23dan instruksi masing-masing
pada sisipan paket Compact Dry TC.
Hitung jumlah koloni berwarna yang muncul di media dari bagian
belakang piring. Kertas putih yang ditempatkan di bawah piring
(6.1.2)Hasil.—Analisis varians satu arah
(ANOVA) untuk data 3 level pada daging babi giling mentah menunjukkan hasil
membantu menghitung koloni. Karena beberapa mikroorganisme
yang sama (P>0,05) untuk kedua metode (Tabel 1), dan r2sebagai koefisien
mungkin tidak mereduksi TTC dan oleh karena itu mengembangkan
korelasi untuk kedua metode adalah 0,9997 (Gambar 1), menunjukkan korelasi
koloni berwarna merah/merah muda, Compact Dry TC juga dapat
yang baik. Data ANOVA satu arah pada 3 level pada daging babi mentah
menunjukkan koloni dalam warna lain.
menunjukkan hasil yang sama (P>0,05) untuk kedua metode (Tabel 2) dan r2
Ketika jumlah koloni tinggi, akan lebih mudah untuk
sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9973 (Gambar 2)
menggunakan kisi-kisi yang diukir di bagian belakang wadah yang
menunjukkan korelasi yang baik. ANOVA satu arah untuk data pada 3 level
terdiri dari kotak 11 cm, atau 0,5 0,5 cm. Hitung koloni satu persegi
pada domba mentah menunjukkan hasil yang sama (P>0,05) untuk kedua
dan kalikan masing-masing dengan 20 atau 80.
metode (Tabel 3) dan r2sebagai koefisien korelasi untuk kedua metode adalah
5 Tindakan Pencegahan Keamanan 0,9992 (Gambar 3), menunjukkan korelasi yang baik. ANOVA satu arah untuk
data pada 4 level dalam daging sapi mentah menunjukkan hasil yang sama (P>
5.1 Tindakan Pencegahan untuk Bahaya
0,05) untuk kedua metode (Tabel 4), dan r2sebagai koefisien korelasi untuk
Ketika media atau reagen terkena mata atau mulut, kedua metode adalah 0,9974 (Gambar 4) menunjukkan korelasi yang baik.
segera cuci dengan banyak air, dan konsultasikan dengan a
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051705

Tabel 1. Perbandingan metode AOAC (babi giling mentah)

Bakteri aerob TC Kering Kompak AOAC966.23bakteri aerob

Tingkat Paku, CFU/g Mengulangi CFU/g Catatan10CFU/g CFU/g catatan10CFU/g

Sekitar 102CFU/g Lot 1 0sebuah 1 525 2.72 500 2.70

2 680 2.83 670 2.83
3 430 2.63 415 2.62
4 635 2.80 635 2.80
5 365 2.56 355 2.55
Berarti 527 2.71 515 2.70
sr 133 0.11 136 0.12
RSDr, % 25.2 4.18 26,5 4.37

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Sekitar 104CFU/g Lot 2 0sebuah 1 78000 4.89 70500 4.85
2 80000 4.90 76000 4.88
3 77000 4.89 78000 4.89
4 99000 5.00 96000 4.98
5 55000 4.74 42500 4.63
Berarti 77800 4.88 72600 4.85
sr 15600 0,09 400 0.13
RSDr, % 20.1 1.87 26.7 2.72
Sekitar 106CFU/g Lot 3 0sebuah 1 6400000 6.81 5850000 6.77
2 9100000 6.96 8850000 6.95
3 9350000 6.97 9150000 6.96
4 6800000 6.83 6400000 6.81
5 9300000 6.97 8250000 6.92
Berarti 8190000 6.91 7700000 6.88
sr 1460000 0,08 1490000 0,09
RSDr, % 17.8 1.17 19.3 1.27

sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.

6.2 Studi Pengulangan pengenceran dalam pengencer Butterfield disiapkan dan masing-
masing 1 mL diterapkan ke pusat perangkat Compact Dry TC. Dua
Studi pengulangan dilakukan dengan 18 matriks makanan yang
seri inkubasi dengan 10 paralel dari setiap matriks, pada 30- dan 35-
berbeda dari daftar dengan 15 kelompok jenis makanan. Sampel
C, dilakukan.
disiapkan dan diencerkan ke 4 tingkat yang berbeda (CFU/mL) dari
bakteri asli (<10, 10-25, ca 100, dan ca 250). Sampel dengan jumlah
bakteri asli yang rendah atau tidak ada dibubuhi denganE. colidan
Staphylococcus epidermidis (dicampur setelah budidaya) dalam
jumlah sel sesuai dengan kadar yang dibutuhkan. Sepuluh ulangan
dari setiap pengenceran sampel diterapkan pada Compact Dry TC
serta pada pelat tuang yang disiapkan dengan metode standar
(Metode Resmi AOAC966.23) dan dihitung dua kali setelah inkubasi.

(6.2.1)Metodologi.—Setiap bahan sampel 25 g adalah

ditempatkan di Perut yang disterilkan®tas. Pengencer fosfat
buffered Butterfield (225 mL) ditambahkan dan sampel
diperlakukan selama 2 menit.
Populasi asli dihitung dan bahan sampel diencerkan atau
dibubuhi sesuai. Sampel dengan beban bakteri rendah atau
tidak ada dibubuhi setelah langkah Stomacher dengan Gambar 1. Korelasi antara Compact Dry TC dan AOAC 966.23
pengenceranS. epidermidisdanE. colibudaya. Kemudian serial untuk bakteri aerob pada daging babi giling mentah.
1706KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

Meja 2. Perbandingan metode AOAC (babi mentah)

Bakteri aerob TC Kering Kompak AOAC966.23bakteri aerob

Tingkat Paku, CFU/g Mengulangi CFU/g Catatan10CFU/g CFU/g Catatan10CFU/g

Sekitar 102CFU/g Lot 1 0sebuah 1 125 2.10 165 2.22

2 180 2.26 170 2.23
3 100 2.00 90 1.95
4 145 2.16 100 2.00
5 120 2.08 170 2.23
Berarti 134 2.12 139 2.13
sr 30.3 0,10 40.4 0.14
RSDr, % 22.6 4,52 29.0 6.46

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Sekitar 104CFU/g Lot 2 0sebuah 1 37500 4.57 37500 4.57
2 35000 4,54 35000 4,54
3 96500 4.98 96500 4.98
4 16100 4.21 15800 4.20
5 18350 4.26 10400 4.02
Berarti 40690 4.51 39040 4.46
sr 32600 0.31 34200 0.37
RSDr, % 80.2 6.85 87.6 8.38
Sekitar 106CFU/g Lot 3 0sebuah 1 3700000 6.57 3500000 6.54
2 2855000 6.46 2840000 6.45
3 7800000 6.89 7550000 6.88
4 1210000 6.08 1300000 6.11
5 1545000 6.19 1775000 6.25
Berarti 3420000 6.44 3393000 6.45
sr 2640000 0.32 2480000 0,29
RSDr, % 77.3 4.98 73.1 4.56

sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.

(6.2.2)Hasil.—Dari semua matriks bakteri yang diselidiki Fenomena ini tidak diamati dengan tingkat beban bakteri
hitungan dalam kisaran yang diharapkan antara 1 dan 250 CFU/ lain dan oleh karena itu dapat berkontribusi pada rendahnya
mL dapat diselesaikan dan dihitung pada pelat Compact Dry TC presisi tingkat penghitungan itu. Untuk semua sampel yang
dan pada pelat tuang yang disiapkan dengan metode standar tersisa, standar deviasi sampel analog memberikan nilai yang
sebanding untuk Compact Dry TC serta tuangnya
(Metode Resmi AOAC966.23).
Nilai komparatif dari analisis Compact Dry TC dan
metode pelat tuang berada dalam kisaran desimal yang
sama. Dalam standar deviasi kedua metode memberikan
hasil jumlah pelat yang serupa. Nilai standar deviasi
menurun dengan meningkatnya CFU per piring, seperti
yang diharapkan (presisi penghitungan meningkat dengan
CFU/piring; 2, 3). Mengenai nilai terukur, hanya untuk ayam
giling (kelompok 1) dan coklat susu (kelompok 12),
keduanya dengan level terendah, nilai antara Compact Dry
TC dan AOAC Official Method966.23berbeda satu sama lain
lebih dari kisaran standar deviasi; dan dengan ANOVA satu
arah (P<0,05). Nilai terukur antara metode pelat tuang dan
metode Compact Dry TC berbeda satu sama lain lebih dari Gambar 2. Korelasi antara Compact Dry TC dan AOAC 966,23
kisaran standar deviasi. untuk bakteri aerob pada daging babi mentah.
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051707

Tabel 3. Perbandingan metode AOAC (domba mentah)

Bakteri aerob TC Kering Kompak AOAC966.23bakteri aerob

Tingkat Paku, CFU/g Mengulangi CFU/g Catatan10CFU/g CFU/g Catatan10CFU/g

Sekitar 102CFU/g Lot 1 0sebuah 1 255 2.41 225 2.35

2 370 2.57 360 2.56
3 455 2.66 410 2.61
4 145 2.16 130 2.11
5 840 2.92 965 2.98
Berarti 413 2.54 418 2.52
sr 266 0,28 325 0.32
RSDr, % 64.4 11.2 77.8 12.8

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Sekitar 104CFU/g Lot 2 0sebuah 1 tahun 1945 4.29 18900 4.28
2 13400 4.13 13600 4.13
3 83500 4.92 79.000 4.90
4 15000 4.18 14200 4.15
5 10300 4.01 9700 3.99
Berarti 28330 4.31 27100 4.29
sr 31000 0.36 29200 0.36
RSDr, % 109 8.33 108 8.28
Sekitar 106CFU/g Lot 3 0sebuah 1 5850000 6.77 4800000 6.68
2 1610000 6.21 112000 6.05
3 2020000 6.31 2025000 6.31
4 3700000 6.57 3500000 6.54
5 1290000 6.11 1320000 6.12
Berarti 2890000 6.39 2553000 6.34
sr 1900000 0.27 1565118.206 0.27
RSDr, % 65.5 4.23 61.30506096 4.26

sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.

metode pelat. Akibatnya, hasil dari Compact Dry TC bakteri, data pengulangan yang diharapkan dari pencacahan dengan
untuk studi pengulangan sesuai dengan metode pelat metode Compact Dry TC atau pelat tuang sesuai dengan kualitas yang
tuang. sama seperti yang diperiksa pada 35-C.
Menggunakan suhu inkubasi 30-C, bukan 35-C yang
direkomendasikan, yang merupakan suhu inkubasi yang lebih
umum untuk metodologi penghitungan aerobik total di
Komunitas Eropa, hasil CFU dari matriks yang berbeda serupa
dengan yang diperoleh pada 35-C. Hanya dengan yogurt, seri
inkubasi 30-C menunjukkan perbedaan besar. Hitungan
pengenceran 104dan 103diukur dengan Compact Dry TC secara
signifikan lebih rendah dibandingkan dengan metode pelat
tuang. Pengenceran 2.5 102dan 102tidak memberikan hitungan
apapun dengan pelat Compact Dry TC. Ini mungkin karena
kondisi aerobik semata-mata dari pelat prefabrikasi. Teknik
pelat tuang memungkinkan pertumbuhan bakteri anaerob
(fakultatif). Ini jelas mempengaruhi populasi bakteri yang
tumbuh pada 30-C lebih banyak daripada yang dipilih dengan
suhu pertumbuhan pada 35°C. Mengulangi seri inkubasi ini Gambar 3. Korelasi antara Compact Dry TC dan AOAC
dengan sampel yogurt yang mengandung 108CFU/g asli 966,23 untuk bakteri aerob pada domba mentah.
1708KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

Tabel 4. Perbandingan metode AOAC (daging sapi mentah)

Bakteri aerob TC Kering Kompak AOAC966.23bakteri aerob

Tingkat Paku, CFU/g Mengulangi CFU/g Catatan10CFU/g CFU/g Catatan10CFU/g

0 CFU/g Lot 1 Tidak ada 1 5 0,70 5 0,70

2 10 1.00 5 0,70
3 20 1.30 10 1.00
4 10 1.00 5 0,70
5 10 1.00 10 1.00
Berarti 11 1.00 7 0.82
sr 5.48 0.21 2.74 0.16
RSDr, % 49.8 21.3 39.1 20.1

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Sekitar 102CFU/g Lot 1 250 1 260 2.41 256 2.41
2 224 2.35 238 2.38
3 170 2.23 172 2.24
4 292 2.47 284 2.45
5 220 2.34 230 2.36
Berarti 233.2 2.36 236 2.37
sr 45.9 0,09 41.4 0,08
RSDr, % 19.7 3.75 17.5 3.44
Sekitar 104CFU/g Lot 2 25000 1 23200 4.37 23200 4.37
2 11800 4.07 11900 4.08
3 13700 4.14 13580 4.13
4 56000 4.75 53800 4.73
5 14680 4.17 14800 4.17
Berarti 23900 4.30 23500 4.29
sr 18500 0.27 17500 0.27
RSDr, % 77.4 6.39 74.7 6.21
Sekitar 106CFU/g Lot 3 1500000 1 1340000 6.13 1320000 6.12
2 1780000 6.25 1540000 6.19
3 860000 5.93 1210000 6.08
4 1100000 6.04 1290000 6.11
5 1540000 6.19 1340000 6.13
Berarti 1324000 6.11 1340000 6.13
sr 361000 0.12 122000 0,04
RSDr, % 27.2 2.03 9.12 0.63

6.3 Studi Akurasi (6.3.1)Metodologi.—Contoh bahan disiapkan sebagai

Studi akurasi dilakukan dengan 20 matriks makanan yang
berbeda dari daftar dengan 15 kelompok jenis makanan.
Sampel dari 3 lot matriks yang berbeda disiapkan dan
diencerkan hingga tingkat yang dapat diukur (dapat dihitung
pada pelat: 1-250 CFU/piring) dari bakteri asli. Lima ulangan dari
setiap sampel dan lot matriks ditempatkan pada Compact Dry
TC dan dituangkan pelat sesuai dengan Metode Resmi AOAC
standar966.23dan dihitung setelah inkubasi.
Korelasi setiap matriks (rm) serta semua hasil gabungan (r
sabu) diperkirakan, masing-masing pada 35- dan 30-C.
disajikan dalam deskripsi metodologi studi pengulangan
di 6.2.1.
Dua seri inkubasi, pada 30- dan 35-C, dilakukan. Tiga lot
yang berbeda dari masing-masing matriks makanan diinokulasi
pada pelat Compact Dry TC dan agar pelat tuang sesuai dengan
Metode Resmi AOAC966.23dalam 5 paralel.
(6.3.2)Hasil.—Untuk sebagian besar matriks,
jumlah sel bakteri asli (CFU/mL) diukur dengan akurasi yang
sebanding menggunakan metode Compact Dry TC atau
metode standar (piring tuang). Fakta ini tercermin dalam
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051709
Gambar 4. Korelasi antara Compact Dry TC dan
AOAC 966.23 untuk bakteri aerob pada daging sapi mentah.
faktor korelasi antara 0,96 dan 1,00 untuk matriks tunggal. Dari
total 16 matriks (suhu inkubasi 35-C), 13 berada dalam nilai
korelasi ini. Juga, tidak adanya populasi bakteri asli yang
terukur, seperti yang ditemukan pada 4 jenis makanan yang
berbeda (sosis, daging makan siang, jus apel, dan pewarna
makanan merah), dapat dipantau dengan Compact Dry TC dan
piring tuang. Daging ayam giling, daging babi giling, dan
tepung terigu menunjukkan korelasi sekitar 0,91. Ini dapat
diberikan ke angka pengukuran rendah hanya 3 titik data per
matriks.
Melihat korelasi semua data yang dikumpulkan (n=60)
pada suhu ini (Gambar 5), korelasi dari 2 metode
pencacahan dapat diberikan dengan 0,9955, sebagaimana
dinyatakan dalam klaim akurasi dalam aplikasi metode.
Batas kuantisasi dihitung sebagai 1 CFU/piring dari data.
Dengan suhu inkubasi 30-C, pengamatan serupa. Jumlah
bakteri asli (CFU/mL) dapat diukur dengan akurasi yang
sebanding menggunakan metode Compact Dry TC atau
metode standar (piring tuang). Faktor korelasi antara 0,97
dan 1,00, untuk matriks tunggal. Dari 16 matriks (suhu
inkubasi 30-C), 11 berada dalam nilai korelasi ini. Sekali lagi,
tidak adanya populasi bakteri asli yang terukur ditemukan
dengan 4 jenis makanan yang berbeda: sosis, daging makan
siang, jus apel, dan pewarna makanan merah. Ini diamati
dengan Compact Dry TC dan
Gambar 5. Studi akurasi TC Compact Dry versus
metode pelat tuang standar (inkubasi pada 35-C).
menuangkan piring juga. Ayam giling dan tepung terigu
menunjukkan faktor korelasi rendah masing-masing 0,91 dan 0,78,
seperti yang dideteksi dengan 35-C. Selanjutnya, ikan mentah
(sampel 1 dan 2), telur kering, dan makanan kucing kering 2
menunjukkan nilai korelasi yang rendah yaitu 0,51–0,88. Untuk ikan
mentah 1, lot makanan No. 3 menunjukkan nilai penyimpangan
yang ekstrim dengan metode Compact Dry TC atau metode tuang,
sehingga titik data ini tidak termasuk dalam penilaian. Matriks
makanan lainnya, seperti telur kering, tepung terigu, dan makanan
kucing kering, hanya mengandung sedikit populasi bakteri alami;
Oleh karena itu, pencacahan harus dilakukan pada batas deteksi
dan data yang menyimpang lebih berpengaruh pada evaluasi
statistik. Sekali lagi, variasi ini dapat ditetapkan ke angka uji rendah
hanya 3 titik data per matriks.
Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022
Melihat korelasi semua data yang dikumpulkan (n=60)
pada suhu ini (Gambar 6), korelasi 0,9932 untuk 2
metode pencacahan dapat ditemukan.
6.4 Lot-to-Lot (Test Kit) dan Studi Stabilitas Lot
Studi konsistensi lot-to-lot dan stabilitas lot dilakukan
dengan 20 matriks makanan yang berbeda. Empat lot
produksi pelat Compact Dry TC yang berbeda diuji.
(6.4.1)Metodologi.—Contoh bahan disiapkan sebagai
disajikan dalam deskripsi metodologi studi pengulangan di
6.2.1. Dua seri inkubasi, pada 30- dan 35-C, dilakukan. Tiga lot
yang berbeda dari setiap matriks makanan diperiksa dalam 5
paralel. Pengenceran sampel yang sesuai diinokulasi. Empat lot
yang berbeda dari pelat Compact Dry TC diperiksa. 4 lot
Compact Dry TC memiliki tanggal kadaluwarsa yang berbeda: 2
lot baru diproduksi (Lot 71206, 15 bulan hingga kadaluarsa;
64203, 12 bulan hingga kadaluwarsa); satu mendekati tanggal
kadaluwarsa (Lot 56111, 2 bulan sampai kadaluwarsa); dan satu
sudah melewati tanggal jatuh tempo (Lot 3907, 22 bulan setelah
kedaluwarsa). Persentase variasi antara CFU/g dari lot yang
berbeda dihitung.
(6.4.2)Hasil.—Mempertimbangkan CFU/g dari 20
matriks yang berbeda diuji dengan lot Compact Dry TC yang berbeda
pada kedua suhu inkubasi, tidak ada perbedaan signifikan yang
ditemukan. Tidak adanya atau sangat sedikitnya jumlah bakteri asli yang
dapat dibudidayakan ditemukan untuk 4 spesies berbeda
Gambar 6. Studi akurasi TC Compact Dry versus
metode pelat tuang standar (inkubasi pada 30°C).
1710KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

Tabel 5. Konsistensi banyak-ke-banyak 6.5 Studi Kekasaran

35-C 30-C
(6.5.1)Metodologi.—Materi sampel makanan adalah
Jenis makanan sr (interlot) Variasi, % sr (interlot) Variasi, % disiapkan seperti yang dijelaskan di bagian metodologi studi
pengulangan di 6.2.1 dan diencerkan menjadi 1-250 CFU/
ayam giling 0,01 0.18 0,02 0,47 mL. Dari total 11 jenis matriks makanan yang berbeda, 27
Babi giling 0,03 0,75 0,06 1.32 sampel disiapkan dan diselidiki. Dari semua sampel 0,8, 1,0,
Selada 0,05 0.93 0,05 0,87
dan 1,2 mL bagian diinokulasi ke dalam Compact Dry TC.
Seri inkubasi pada 30-, 35-, dan 37-C dilakukan. Pelat
Sosis 0.00sebuah 0.00sebuah 0.15 10.91b
dihitung setelah 18, 24, 27, 42, 48, 51, 66, dan 72 jam
Babi panggang 0.12 10.57b 0,09 6.31b
inkubasi. Setiap titik pengukuran dari seri uji dikonfirmasi
Udang mentah 0,09 2.28 0,05 1.17 dengan 5 pelat ulangan.
Ikan mentah 0,03 0,84 0,03 0,81 (6.5.2)Hasil.—Membandingkan titik data dari
yogurt 0,05 0,59 0.11 1.52 3 volume inokulasi yang berbeda, pertama jumlah CFU

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Telur bubuk kering 0.00sebuah 0.00sebuah 0.14 11.63b dinormalisasi menjadi 1,0 mL dan kemudian persen deviasi dari
Oregano 0,06 1.53 0,09 2.04 nilai standar 1,0 mL diperkirakan. Dalam rentang desimal yang
sama (>101), variasi CFU/plate sampai 50% adalah biasa. Oleh
jus apel 0.00sebuah 0.00sebuah 0.00sebuah 0.00sebuah
karena itu, melihat matriks ayam, babi giling, ikan mentah,
Mie 0,02 0,52 0,02 0.43
oregano, tepung terigu, mie, dan makanan kucing kering, 1,0
Selai kacang 0,05 3.27 0.14 8.58b
mL data ternormalisasi yang diperoleh dari 0,8 dan 1,2 mL
Coklat susu 1 0.12 7.34b 0.15 7.98b inokulasi berada dalam hamburan data 1,0 mL inokulasi.
Coklat susu 2 0,04 2.22 0,07 3.77 Penyimpangan volume inokulasi -20% dapat ditoleransi jika
Makanan kucing kering 1 0.11 7.36b 0,07 4.00b hasilnya dinormalisasi menjadi 1,0 mL untuk perhitungan.
Makanan kucing kering 2 0,04 2.32 0,02 0.93
Pewarna makanan merah 0.00sebuah 0.00sebuah 0.00sebuah 0.00sebuah
Jenis makanan udang mentah, telur bubuk kering, coklat
susu, dan adonan pizza menunjukkan nilai deviasi >50%.
adonan pizza 0,42 15.74b 0,03 1.01
Memeriksa sampel makanan dengan beban mikroba asli yang
sebuahTidak adanya atau sangat sedikitnya jumlah bakteri asli yang dapat dibudidayakan.
rendah (bubuk telur kering, cokelat susu, adonan pizza)
bVariasi dari lot ke lot 4%. menghasilkan nilai hitungan sekitar/di bawah 101. Karena sifat
metode penghitungan pelat dalam kisaran desimal ini,
persentase deviasi yang jauh lebih tinggi dimungkinkan. Untuk
matriks ini nilai normalisasi dari 0,8 dan 1,2 mL inokulasi juga
jenis makanan (sosis, bubuk telur kering, jus apel, dan pewarna
sebanding dengan yang diperoleh dengan volume inokulasi
makanan merah (Tabel 5) Pengamatan ini konsisten dengan semua
standar 1,0 mL.
4 lot Compact Dry TC dan piring tuang yang berbeda.
Bahan sampel “udang mentah” menunjukkan pada 1 dari
Variasi dari lot ke lot 4% juga ditunjukkan pada Tabel 5. Matriks 4 sampel paralel, deviasi >50% dibandingkan dengan nilai
tersebut mengandung populasi bakteri alami marginal (0–100 CFU/ inokulasi standar 1,0 mL. Ini mungkin karena prosedur
g) dan hanya menghasilkan jumlah koloni dengan salah satu lot preparasi sampel yang tidak memadai dan dapat dinilai
makanan. Oleh karena itu, perhitungan statistik jatuh kembali pada sebagai pelarian karena 3 sampel lainnya menghasilkan nilai
kumpulan data yang dikurangi dengan konsekuensi variasi yang yang dapat diterima untuk inokulasi 0,8 dan 1,2 mL yang
lebih tinggi. dinormalisasi.
Peningkatan variabilitas jumlah dengan sampel cokelat susu Memvariasikan suhu inkubasi antara 30-, 35-, dan 37-C
1, terutama jumlah Lot 3907 yang lebih rendah (data tidak menghasilkan tingkat jumlah pelat aerobik (CFU) yang berbeda.

ditampilkan) dipertanyakan tetapi tidak dapat direproduksi Karena mikroorganisme menunjukkan suhu pertumbuhan optimum

dengan sampel cokelat susu 2. CFU/g matriks ini sedikit lebih
rendah ketika diinkubasi pada 30-C. Ini mungkin karena efek
pemilihan suhu pada spesies bakteri yang tumbuh tetapi tidak
signifikan dengan semua sampel yang diuji dari jenis makanan
ini. Jumlah cokelat yang tinggi lemak dan kesulitan yang
dihasilkan untuk homogenisasi yang cukup mungkin juga
mempengaruhi variabilitas hasil tes.
Tidak ada penyimpangan yang jelas antara metode Compact Dry
TC dan metode pelat tuang yang dapat ditetapkan untuk matriks
apa pun. Hal ini diamati dengan suhu pertumbuhan 30- dan 35-C
(Tabel 5).
yang spesifik, populasi mikroba yang berbeda diamati pada suhu
yang berbeda. Fenomena ini terjadi terutama pada jenis makanan
segar (ayam, babi giling, udang mentah, dan ikan mentah). Produk
makanan untuk penyimpanan lebih lama (telur bubuk kering,
oregano, tepung terigu, mie, coklat susu, makanan kucing kering,
dan adonan pizza) menghasilkan tingkat hitungan yang rendah
tetapi serupa pada 3 suhu. Ini mungkin menunjukkan flora
(kontaminasi) dengan spektrum suhu yang luas. Eksperimen suhu
ini mengkonfirmasi pentingnya menggunakan pelat Compact Dry
TC pada suhu yang ditentukan untuk estimasi jumlah aerobik total
guna mendapatkan data uji yang konsisten untuk bahan makanan.
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051711

Tabel 6. Perbandingan metode (data laboratorium independen)

Bakteri aerob TC Kering Kompak AOAC966.23bakteri aerob

Tingkat Paku, CFU/g Mengulangi CFU/g Catatan10CFU/g CFU/g Catatan10CFU/g

Sekitar 104CFU/g Lot 1 0sebuah 1 15300 4.18 25400 4.40

2 9600 3.98 24650 4.39
3 10900 4.04 2020 4.31
4 11100 4.05 27950 4.45
5 10600 4.03 20700 4.32
Berarti 11500 4.06 23780 4.37
sr 2200 0,08 3280 0,06
RSDr, % 19.1 1.89 13.8 1.38

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Sekitar 106CFU/g Lot 2 0sebuah 1 1590000 6.20 1300000 6.11
2 1660000 6.22 1335000 6.13
3 1870000 6.27 1780000 6.25
4 1110000 6.05 980000 5,99
5 1850000 6.27 1680000 6.23
Berarti 1616000 6.20 1415000 6.14
sr 307000 0,09 321000 0,10
RSDr, % 19.0 1.49 22,7 1.68
Sekitar 108CFU/g Lot 3 0sebuah 1 93000000 7.97 86500000 7.94
2 125000000 8.10 111500000 8.05
3 164000000 8.21 128000000 8.11
4 120000000 8.08 104000000 8.02
5 19000000 8.28 158500000 8.20
Berarti 13840000 8.13 11770000 8.06
sr 3840000 0.12 27250000 0,10
RSDr, % 27.7 1.50 23.2 1.22

sebuahSampel yang terkontaminasi secara alami.

Penentuan CFU pada kondisi standar (35-C, 1,0 mL inokulum)
dari semua jenis makanan yang diuji dihitung setelah 8 periode
waktu inkubasi berturut-turut: 18, 24, 27, 42, 48, 51, 66, dan 72 jam.
Menyusun nilai CFU yang dihasilkan dalam kurva waktu, dengan
sebagian besar jenis makanan yang diuji, angka saturasi yang khas
dapat diperoleh. Setelah 48 ha, nilai dataran tinggi yang stabil
tercapai. Untuk beberapa matriks makanan (sampel oregano 2,
sampel cokelat susu 2, dan adonan pizza) hal ini diamati setelah 24
atau 42 jam (sampel bubuk telur kering 2, tepung terigu, mie,
sampel cokelat susu 4, dan makanan kucing kering), masing-
masing . Setelah inkubasi lebih lanjut (66 atau 72 jam) produk laut
segar (sampel udang mentah 1 dan ikan mentah) serta sampel mie
1 dan sampel makanan kucing kering 1 menunjukkan peningkatan
kedua nilai CFU. Ini mungkin karena populasi bakteri menggunakan
produk metabolisme dari flora awal sebagai substrat. Pengamatan
tersebut sangat menunjukkan titik optimal untuk membaca hasil
setelah inkubasi 48 jam. Pada titik ini semua jenis makanan yang
diuji telah mencapai CFU maksimumnya tetapi efek sekundernya
belum dimulai.
Untuk meringkas, dapat dikatakan bahwa pelat TC Compact Dry dapat
digunakan untuk memperkirakan jumlah koloni total untuk area yang luas
spektrum matriks makanan. Suhu inkubasi 35-C dan waktu
inkubasi 48 jam harus dijaga konstan karena fisiologi
mikroba. Volume inokulasi yang menyimpang dari
- 20% dapat ditoleransi jika hasilnya dinormalisasi menjadi 1,0
mL untuk perhitungan. Namun, bahkan untuk parameter ini,
nilai yang disarankan dari 1,0 mL inokulum cair harus
dipertahankan, karena jumlah ini dioptimalkan untuk rehidrasi
media.
6.6 Studi Validasi Independen
Studi validasi dilakukan oleh National Public Health
Service for Wales di bawah tanggung jawab Richard
Meldrum dan arahan dari AOAC RI.
(6.6.1)Studi pengulangan.—Sebuah studi tentang pengulangan pada
daging giling mentah dilakukan di laboratorium
independen. Metode referensi adalah Metode Resmi AOAC
966.23(tuang piring), dilakukan persis seperti yang ditentukan, tanpa
penyimpangan atau perubahan.
(6.6.1.1)Metodologi.—Sampel dibekukan, mentah
daging giling yang dibeli dari supermarket lokal. Tiga paket dari
batch yang sama (merek yang sama, ukuran paket yang sama, sama
1712KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 2005

untuk 3 level (4 level untuk daging sapi mentah) dari 5 jenis daging mentah (n=
80) melalui studi validasi internal dan independen, r2sebagai
koefisien korelasi untuk kedua metode adalah 0,9965
(Gambar 8). Artinya, hasil pengujian ulang sama dengan
aslinya, oleh karena itu pembahasan pada laporan asli harus
valid.
Mengenai nilai terukur, hanya untuk level terendah, nilai
antara Compact Dry TC dan AOAC Official Method966.23
berbeda satu sama lain lebih dari kisaran standar deviasi,
dan dengan ANOVA satu arah (P<0,05) dalam studi validasi
independen. Fenomena ini tidak dapat diamati dengan
tingkat beban bakteri lain dan dengan 4 matriks lainnya
Gambar 7. Korelasi antara Compact Dry TC dan
AOAC 966.23 untuk bakteri aerob pada daging giling mentah.
(babi giling mentah, babi mentah, domba mentah, dan
daging sapi muda mentah) dengan studi validasi internal..

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Untuk semua level dan sampel yang tersisa dengan studi
produsen, tanggal penggunaan yang sama) dibeli pada hari yang
validasi internal, standar deviasi sampel analog memberikan
sama. Sampel diangkut segera ke laboratorium dalam keadaan
nilai yang sebanding untuk metode Compact Dry TC dan
beku, dan pada penerimaan di laboratorium ditempatkan langsung
Metode Resmi AOAC966.23. Akibatnya, hasil dari metode
ke dalam freezer untuk penyimpanan.
Compact Dry TC untuk studi pengulangan sesuai dengan
Untuk mencapai jumlah koloni aerobik yang diperlukan, 3 sampel
hasil dari metode pelat tuang.
disiapkan sebagai berikut:angkatan 1.-Diinkubasi belum dibuka dari beku
Menggunakan suhu inkubasi 30-C alih-alih 35-C yang
pada 22-C selama 28 jam, dan kemudian diperiksa. Level hitungan yang
direkomendasikan, yang merupakan suhu inkubasi yang lebih
diharapkan adalah 108CFU/g.Angkatan 2.-Diinkubasi belum dibuka dari
umum untuk estimasi jumlah aerobik total dalam peraturan
beku pada 22-C selama 19 jam, dan kemudian diperiksa. Level hitungan
makanan Komunitas Eropa (1), hasil pengulangan, akurasi,
yang diharapkan adalah 106CFU/g.angkatan 3.—Diperiksa langsung dari
konsistensi lot , dan stabilitas lot yang diperoleh dari matriks
beku. Tingkat hitungan yang diharapkan adalah 10 CFU/g.
yang berbeda serupa dengan yang ada pada 35-C.
Menggunakan yogurt dalam studi pengulangan, seri inkubasi
Persiapan sampel dan pemeriksaan untuk uji ulangan
30-C menunjukkan perbedaan besar. Hitungan pengenceran 10
dilakukan sebagai berikut:
4dan 103diukur dengan Compact Dry TC secara signifikan lebih
Setiap ulangan diberi kode identifikasi unik yang
rendah dibandingkan dengan metode pelat tuang.
memungkinkan sampel dilacak tetapi tidak dapat
Pengenceran 2.5 102dan 102tidak memberikan hitungan apapun
mengidentifikasi sampel dalam hal jumlah yang diharapkan.
dengan teknik Compact Dry TC. Karena hasil dengan yogurt
Setiap ulangan diperiksa dalam rangkap dua menggunakan
tersebut tidak dapat diamati dalam akurasi, konsistensi lot, dan
metode yang disebutkan di atas, tanpa penyimpangan atau
studi stabilitas lot pada inkubasi 30-C, hasil studi pengulangan
perubahan. Pelat diinkubasi pada 35-C selama 48 jam. Pelat
mungkin dikaitkan dengan kesalahan internal.
dihitung dalam kisaran 30-300 CFU.
Keuntungan besar dari sistem Compact Dry TC adalah
Prosedur persiapan sampel lainnya sepenuhnya mengikuti
pengurangan waktu penggunaan dan penggunaan yang ekonomis,
Metode Resmi AOAC966.23.
sebagaimana dikonfirmasi oleh laboratorium independen. Dalam
Prosedur lainnya mengikuti Metode Resmi AOAC966.23
hal preparasi pelat, inokulasi, dan pembacaan hasil, sistem Compact
dan instruksi masing-masing pada sisipan paket Compact
Dry TC lebih mudah dan cepat dibandingkan dengan teknik pelat
Dry TC.
tuang konvensional. Membaca pelat lebih cepat dengan sistem
(6.6.1.2)Hasil.—Seperti pada Tabel 6, nilai yang sebanding dari
Compact Dry TC, dengan indikator TTC yang dipercepat
Analisis Compact Dry TC dan Metode Resmi AOAC966.23
berada dalam rentang desimal yang sama. Nilai standar
deviasi serupa pada 3 level dengan kedua metode.
Mengenai nilai terukur, hanya nilai level terendah antara
Metode Resmi Compact Dry TC dan AOAC966.23berbeda
satu sama lain lebih dari kisaran standar deviasi, dan juga
dengan ANOVA satu arah (P<0,05). Koefisien korelasi untuk
kedua metode adalah 0,9961 (Gambar 7).

7 Diskusi

Hasil pengujian ulang, seperti yang diinstruksikan oleh AOAC

RI dengan prosedur preparasi sampel yang sama persis dengan
Metode Resmi AOAC966.23menunjukkan hasil yang sama pada
Metode Compact Dry TC dan Metode Resmi AOAC966.23. Angka 8. Korelasi antara Compact Dry TC dan
Terbukti dengan data terlampir sebanyak 5 ulangan AOAC 966.23 untuk jumlah total dalam daging mentah.
 KODAKA ET AL.: JKAMIAOAC IINTERNASIONALVOL. 88, NHAI. 6, 20051713

Tabel 7. Koefisien korelasi (r2) dari metode penghitungan pelat aerobik film standar dan kering

TC Kering Ringkas versus 3M Petrifilm versus TC Kering Ringkas versus

metode standar metode standar Petrifilm 3M

Ellis dan Meldrum (ref. 4; 196 sampel) 0,86 0,85 0,96

Mizuochi dan Kodaka (ref. 5; 97 sampel) 0,94 0,92 0,98

perhitungan. Diamati bahwa partikel makanan, ketika ada, tampaknya 8 Kesimpulan

tidak menyerap indikator. Partikel makanan di piring tuang membuat
piring membaca dan menghitung koloni relatif lebih sulit. Untuk sistem
Hasil yang diperoleh dari studi ini pada perbandingan kinerja

Diunduh dari https://academic.oup.com/jaoac/article/88/6/1702/5657446 oleh tamu pada 20 April 2022

Compact Dry TC, pelatihan yang dibutuhkan lebih sedikit daripada teknik
metode Compact Dry TC dengan metode pelat tuang
pelat tuang. Petunjuk penggunaan Compact Dry TC jelas dan tidak
konvensional untuk estimasi jumlah koloni aerobik total
ambigu. Sistem Compact Dry TC juga akan memberikan keuntungan
menunjukkan bahwa 2 metode ini dilakukan dengan baik. Oleh
dalam pengurangan ruang penyimpanan, pembuangan limbah, dan
karena itu, pelat Compact Dry TC dapat menjadi metode
ruang inkubator yang dibutuhkan. Umur simpan produk yang lama juga
memiliki keunggulan dibandingkan dengan agar-agar siap pakai, yang alternatif yang nyaman untuk pengujian mikrobiologis
memiliki umur simpan terbatas dan oleh karena itu memerlukan makanan secara rutin untuk jumlah koloni aerobik total.
perencanaan logistik yang lebih banyak.
Ada laporan tentang studi perbandingan ekstensif yang 9 Referensi
menganalisis berbagai jenis makanan dengan metode
lembaran kering [Petrifilm Aerobic Count Plates (ACP 3M),
(1) Organisasi Internasional untuk Standardisasi (1991)ISO
Compact Dry TC] dan teknik konvensional (metode pelat spiral,
4833: Panduan Umum Mikrobiologi untuk Pencacahan
metode pelat tuang standar; 4, 5). Studi Ellis dan Meldrum (4;
Mikroorganisme-Teknik Hitung Koloni pada 30-C,
Tabel 7) termasuk 196 sampel makanan dari berbagai asal,
Organisasi Internasional untuk Standardisasi, Jenewa,
menginkubasi piring pada 30-C lebih dari 48 jam dan
Swiss
menghubungkan hasil metode satu sama lain. Korelasi >0,85
dapat ditunjukkan. Korelasi tertinggi (r2= 0,96) diperoleh dengan (2) Jarvis, B. (1989)Aspek Statistik Analisis Mikrobiologi
Compact Dry TC versus 3M Petrifilm ACP (6). Dalam hal akurasi Pangan,Penerbit Sains Elsevier, Amsterdam, Oxford,
dan sensitivitas, metode yang dibandingkan serupa dan dan New York, NY
direkomendasikan untuk digunakan dalam pemeriksaan (3) Bast, E. (1999)Mikrobiologische Methoden, eine Einführung di
makanan. grundlegende Arbeitstechniken,Spektrum Akad. Verl.,
Mizuochi dan Kodaka (5) menguji 97 berbagai sampel makanan Heidelberg, Berlin, Gemany
dalam penelitian mereka (Tabel 7) dengan perangkat pelat yang berbeda
(4) Ellis, P., & Meldrum, R. (2002)J. Makanan Prot.65, 423–425
dan menunjukkan korelasi yang lebih tinggi dan menyatakan kesesuaian
yang dapat diandalkan dari pelat media prefabrikasi.
(5) Mizuochi, S., & Kodaka, H. (2000)J. Makanan Prot.63,
665–667
Kedua studi memberikan bukti daya saing sistem
Compact Dry TC dengan metode 3M Petrifilm ACP (6) Smith, LB, Fox, TL, & Busta, FF (1985)J. Makanan Prot.48,
untuk estimasi jumlah koloni aerobik total. 1044–1045