BAB II

METODE PERCOBAAN

2.1 Alat dan Bahan

Alat Bahan
Spektrofotometer UV-VIS Standar / Baku Vitamin C

Kuvet Tablet Vitamin C 250 mg

Labu ukur 100 ml Aquadest
Pipet Volume
Timbangan Analitik
Mortir dan Stamper
Sudip
Kertas saring
Corong
Kertas Perkamen
Tisu

2.2 Prosedur Kerja

A. Pembuatan Larutan Baku Induk 500ppm ( Bahan Murni )

1. Siapkan Alat dan Bahan
2. Timbang Serbuk Vitamin C Standar / Baku sebanyak 50 mg
3. Masukan dalam Labu Ukur 100 ml kemudian Larutkan dengan Aquadest sampai tanda
batas 100 ml, Kocok sampai larut
4. Lakukan Pengenceran Larutan Baku dengan konsentrasi
a. Larutan Konsentrasi 20 ppm
Pipet sebanyak 4 ml larutan Baku dengan menggunakan pipet Volume,masukkan
ke dalam Labu Ukur 100 ml lalu tambahkan Aquadest sampai tanda batas 100 ml
kemudian tutup dan kocok ad larut
b. Larutan Konsentrasi 40 ppm
Pipet sebanyak 8 ml Larutan Baku dengan menggunakan pipet Volume masukkan
ke dalam Labu Ukur 100 ml lalu tambahkan Aquadest sampai tanda batas 100
mlkemudiaan tutup dan kocok ad larut
c. Larutan Konsentrasi 60 ppm
Pipet Sebanyak 12 ml Larutan Baku dengan menggunakan pipet Volume
masukkan ke dalam Labu Ukur 100 ml lalu tambahkan Aquadest sampai tanda
batas 100 ml kemudian tutup dan kocok ad larut
d. Larutan Konsntrasi 80 ppm
Pipet Sebanyak 16 ml Larutan Baku dengan menggunakan pipet Volume
masukkan ke dalam Labu Ukur 100 ml lalu tambahkan Aquadest sampai tanda
batas 100 ml kemudian tutup dan kocok ad larut
e. Larutan Konsntrasi 100 ppm
Pipet Sebanyak 20 ml Larutan Baku dengan menggunakan pipet Volume
masukkan ke dalam Labu Ukur 100 ml lalu tambahkan Aquadest sampai tanda
batas 100 ml kemudian tutup dan kocok ad larut
B. Scanning panjang gelombang maximal pada 200-400nm
 Nyalakan Spektrofotometri kemudian diamkan kurang lebih 30 menit untuk menstabilkan
kondisi alat
 Isi Kuvet dengan Pelarut sebagai blanko sampai tanda batas kemudian letakkan dalam
wadah dengan simbol B pada Spektrofotometer
 Isi Kuvet dengan larutan dengan konsentrasi 20 ppm sampai tanda batas kemudian
letakkan dalam wadah dengan simbol 1 pada Spektrofotometer
 Isi Kuvet dengan larutan dengan konsentrasi 40 ppm sampai tanda batas kemudian
letakkan dalam wadah dengan simbol 2 pada Spektrofotometer
 Isi Kuvet dengan larutan dengan konsentrasi 60 ppm sampai tanda batas kemudian
letakkan dalam wadah dengan simbol 3 pada Spektrofotometer
 Isi Kuvet dengan larutan dengan konsentrasi 80 ppm sampai tanda batas kemudian
letakkan dalam wadah dengan simbol 4 pada Spektrofotometer
 Isi Kuvet dengan larutan dengan konsentrasi 100 ppm sampai tanda batas kemudian
letakkan dalam wadah dengan simbol 5 pada Spektrofotometer
C. Setting alat Spektrofotometer terlebih dahulu untuk scanning lalu cari panjang gelombang
tertinggi / maksimum :di dapat Panjang Gelombang maksimum 287 nm
D. Selanjutnya lakukan pengukuran absorbansi larutan baku berdasarkan panjang
gelombang maksimum hasil scanning tersebut ,lalu catat hasil absorbansi yang di
peroleh
E. Kemudian dari data absorbansi yang didapat dilakukan pembuatan kurva baku
menggunakan excel ,melalui persamaan kurva kalibrasi.
Kroscek kembali dengan menggunakan Persamaan y = bx + a

F. Pembuatan larutan sampel tablet Vitamin C 500 ppm

1. Ambil 1 tablet Vitamin C kemudian di gerus sampai halus menggunakan
mortir,selanjutnya timbang seberat 50 mg dan masukkan dalam beker
glass,larutkan dengan penambahan aquadest aduk sampai larut ,lalu masukkan ke
dalam labu ukur 100ml dengan disaring menggunakan kertas saring ,tambahkan
aquadest ad 100ml kemudiaan tutup dan kocok sampai larut
2. Buat pengenceran 50 ppm
Pipet sebanyak 10 ml menggunakan Pipet Volume,masukkan dalam labu ukur
100 ml,lalu tambahkan aquadest ad tanda batas 100ml
3. Isi Kuvet dengan Pelarut sebagai blanko sampai tanda batas kemudian letakkan
dalam wadah dengan simbol B dalam Spektrofotometer
4. Isi Kuvet dengan larutan sampel dengan konsentrasi 50 ppm sampai tanda batas
kemudian letakkan dalam wadah dengan simbol 1 pada Spektrofotometer

G. Pengukuran absorbansi sampel tablet Vitamin C / penetapan kadar sampel

 Untuk menentukan absorbansi larutan sampel dengan menggunakan spektrofotometer
pada panjang gelombang maksimum 287 nm ,catat hasil absorbansi yang diperoleh
Kemudian dari data absorbansi yang didapat dilakukan pembuatan kurva dengan
menggunakan excel ,melalui persamaan kurva kalibrasi.
Kroscek kembali dengan menggunakan PersamaanY = bx + a untuk mendapatkan
konsentrasi dari sampel

H. Metode Pengolahan Data

 Data yang diperoleh dari hasil pengujian kemudian dianalisa dan di olah
kembali menggunakan excel sehingga memperoleh persamaan garis y= bx + a
 Pembuatan kurva dengan menggunakan excel melalui persamaan kurva kalibrasi
 Persamaan regresi dan memastikan koefisien regresinya mendekati 1