PENETAPAN KADAR PARACETAMOL DENGAN HPLC

(HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY)

Alat :
1. HPLC 9. Beaker Glass
2. Sonicator 10. Syringe Injetor HPLC
3. Filter Milipore 0,45 mikrometer 11. Pompa Vakum
4. Corong Buchner 12. Pipet Volume
5. Labu Ukur
6. Gelas Ukur
7. Vial HPLC
8. Kolom (Fase Diam)

Bahan :
1. Aquabidest/ Aquadest
2. Metanol Pro HPLC
3. Baku Paracetamol
4. Sampel Paracetmol Tablet

Prosedur Kerja
A. Pembuatan Fase Gerak Air : Metanol Pro HPLC(3 : 1)
1. Dibuat fase gerak aquabidest/aquadest : methanol pro HPLC (3 : 1)
2. Saring fase gerak dengan kertas saring yang dilapisi kertas whatman dengan bantuan
Corong Buchner dan pompa vakum
3. Fase gerak disonikasi selama 10 menit.
B. Pembuatan Larutan Baku
1. Ditimbang baku paracetamol sebanyak 25 mg.
2. Dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL, kemudian ditambahkan 50 mL fase gerak
Untuk melarutkan.
3. Tambahkan fase gerak sampai tanda batas dan dihomogenkan
4. Larutan di sonikasi selama 10 menit.
5. Dipipet sebanyak 1 mL, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL
6. Ditambahkan fase gerak sampai tanda batas dan di homogenkan
7. Larutan di sonikasi selama 10 menit
8. Saring larutan ke dalam vial menggunakan spuit dan filter milipore 0,45 mikrometer

C. Pembuatan Larutan Uji

1. Ditimbang sampel paracetamol sebanyak 5 tablet. Catat kekuatan sediaan dan berat
tablet.
2. Tablet digerus dan ditimbang sebanyak 25 mg, masukkan ke dalam labu ukur 100 mL,
kemudian ditambahkan 50 mL fase gerak Untuk melarutkan.
3. Tambahkan fase gerak sampai tanda batas dan dihomogenkan
4. Larutan di sonikasi selama 10 menit.
5. Dipipet sebanyak 1 mL, dimasukkan ke dalam labu ukur 100 mL
6. Ditambahkan fase gerak sampai tanda batas dan di homogenkan
7. Larutan di sonikasi selama 10 menit
8. Saring larutan ke dalam vial menggunakan spuit dan filter milipore 0,45 mikrometer

D. Penetapan Kadar
1. Dialirkan fase gerak dengan laju alir 1,5 mL/menit ke dalam fase diam (pencucian
kolom). Pencucian kolom dilakukan sampai kurva stabil pada angka 0
2. Kemudian di injeksikan secara terpisah larutan baku paracetamol dan larutan sampel
ke dalam HPLC dengan volume injeksi 20 mikroliter.
3. Pemisahan kromatografi dengan HPLC menggunakan panjang gelombang 243 nm
4. Hitung Kadar paracetamol pada sampel dari luas area yang terbentuk pada data analisa
Instrument

Kadar Zat Aktif = [(Au/Ab) x (Bb/Bu) x (Fu/Fb)] x % Kemurnian Baku

Keterangan :
Au = Area Sampel
Ab = Area Baku
Bb = Bobot Baku
Bu = Bobot Sampel
Fu = Faktor Pengenceran Sampel
Fb = Faktor Pengenceran Baku
% Kemurnian Baku = 99,98%