Tahap 1 ANJANI AWIJAYANTI 1948201008 3B FARMASI HPLC(High Performance Liquid Chromatography) KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi) Penetapan Kadar Paracetamoil & Kafein Dalam tablet Menggunakan HPLC Tahap 1 Preparasi standar dan sampel Tahap 2 Pembuatan fase gerak (eluen) Kesetimbangan fase gerak dan fase diam Tahap 3 Analisis menggunakan HPLC Hasil analisis Tahap 2 Preparasi Larutan Standar Prosedur Kerja: 1. larutan baku induk campuran (pct = 1000 ppm, kafein = 100 ppm. Ditimbang 25 mg kafein dilarutkan dalam etanol p.a sampai 10,0 ml (2500 ppm) Ditimbang paracetamol 25 mg masukkan kedalam labu ukur 25,0 ml dilarutkan dalam metanol p.a kira-kira 10 ml, ditambah 1,0 larutan (a) kemudian ditambah metanol p.a ad tanda batas 2) Pembuatan larutan baku kerja campuran Dipipet masing-masing 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 dan 5,0 larutan baku induk campuran masukkan kedalam labu takar 10 ml Tambahakan kedalam masing-masing labu takar metanol p.a ad tanda batas Masing-masing larutan baku disaring dengan membran filter 0,2 mikron Preparasi sampel Ditimbang 10 sampel tab secara seksama ditentukan rata- rata dan RSDnya Gerus tab dan ditimbang secara seksama sejumlah tertentu sehingga mengandung pct 50 mg & kafein 5 mg (replikasi 3 kali) Tambahkan metanol kurang lebih 10 ml masukkan dalam labu ukur 25,0 ml dan ultrasonikasi sela 10 menit Setelah dingin tambahkan ad tanda batas Ambil 1,0 ml larutan sampel dan masukkan kedalam labu ukur 10,0 ml tambahkan metanol ad tanda Sebelum dianalisis sampel disaring dengan membran filtrat 0,2 mikron Pengenceran larutan sampel
Pipet 1,00 larutan sampel diencerkan sampel 10,0 ml
Bilas pipet tetes volume dengan larutan yang akan di pipet Pipet 1,00 larutan sampel diencerkan ad 10,0 ml Menyaring larutan standar dan larutan sampel
Saring larutan standar dan sampel dengan membran nilon 0.2
mikrometer Saring pertama digunakan untuk membilas membran dan vial Uji Kadar Paracetamol Dan Kafein Dalam Tablet Dengan HPLC Tahap 2 PEMBUATAN FASE GERAK/ELUAN 1.Pembuatan eluen dilemari asam komposisi eluen : aquabides,metanol,asam asetat glasial 138:56:6 v/v 2. keseteimbangan fase gerak dan fase diam 1. buka software atur kondisi HPLC 2. atur kondisi HPLC laju alir 1ml/menit panjang gelombang 275nm waktu analisis 15 menit 3. ricek ulang kondisi HPLC pastikan detektor (uv-vis) menyala 4. simpan kondisi HPLC yang sudah diatur 5. dowload ke alat HPLC pompa eluen bisa dijalankan biarkan terjadi kesetimbangan F diam F gerak TAHAP 3